治疗NASH、NAFLD和肥胖的化合物、组合物和方法与流程

治疗nash、nafld和肥胖的化合物、组合物和方法1.对相关申请的交叉引用2.本技术要求2019年10月1日提交的美国专利申请第62/909,086号的权益和优先权，其内容通过引用整体并入本文。
技术领域：
：3.本技术涉及治疗非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholicsteatohepatitis,nash)、非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholicfattyliverdisease,nafld)和/或肥胖以及其他病症的方法、化合物和组合物。
背景技术：
：：4.非酒精性脂肪性肝炎(nash)是一种严重形式的非酒精性脂肪性肝病(nafld)，它是由肝脏中过多的脂肪积累(肝脂肪变性)引起的。nafld被广泛认为是与肥胖、高脂血症、2型糖尿病和胰岛素抗性相关的代谢疾病的肝脏表现。nash的特点是肝脂肪变性、炎症和肝细胞气球样变，并伴有不同程度的纤维化。大多数nafld患者(70％-90％)患有单纯性脂肪变性，而10％-30％的患者患有侵袭性nash。nash患者可能发展为纤维化(肝脏瘢痕形成的第一阶段)并最终发展为肝硬化，可能导致肝细胞癌或需要肝移植。随着肥胖率的上升，全球nafld和nash的发病率正在迅速上升。目前，没有fda批准的nash治疗方法。5.发明概述6.根据一个方面，本技术提供了用于治疗选自由nash、nafld、肥胖、高脂血症、高胆固醇血症、高甘油三酯血症和代谢综合征组成的组的疾病或疾病状况的方法，包括向有需要的个体施用治疗有效量的本文所述的化合物、组合物或提取物。在一些实施方案中，疾病或疾病状况是nash、nafld和/或肥胖。在某些实施方案中，个体是人类。在另一个方面，本技术提供了降低有需要的个体的血浆和/或肝脂质水平的方法，其包括向所述个体施用降脂有效量的本文所述的化合物、组合物或提取物。要降低的脂质水平可以是总胆固醇、ldl胆固醇(ldl–cholesterol)、甘油三酯和未酯化长链脂肪酸中的一种或多种。在另一方面，7.在一个方面，本技术提供了来自多种植物的降脂剂，包括降胆固醇和/或降甘油三酯化合物以及这些化合物的衍生物，这些植物包括紫堇属植物(corydalis)、囊果草属植物(leontice)、十大功劳属植物(mahonia)、烟堇属植物(fumaria)、乳皮藤属植物(legnephora)、千金藤属植物(stephania)、白屈菜属植物(chelidonium)、金杯罂粟属植物(hunnemannia)、黄连属植物(coptis)、索木属植物(guatteria)、厚足花属植物(pachypodanthium)、张口藤属植物(chasmanthera)、天仙藤属植物(fibraurea)、碎米蕨属植物(cheilanthes)、秃疮花属植物(dicranostigma)、海罂粟属植物(glaucium)和白屈菜植物(chelidonium)。在一些实施方案中，化合物获自选自由以下组成的组的植物物种：紫堇属植物(延胡索(corydalisambigua)、山延胡索(corydalisbulbosa)、凹陷紫堇(corydaliscava)、corydalischaerophylla、黄堇(corydalispallida)、密花紫堇(corydalissolida)、角状黄堇(corydalisthalictrifolia)、corydalistuberosa、齿瓣延胡索(corydalisturtschaninowiibesser))；囊果草属植物(地中海囊果草(leonticeleontopetalum))、十大功劳属植物(冬青叶十大功劳(mahoniaaquifolium))、烟堇属植物(短梗烟堇(fumariavaillantii))、乳皮藤属植物(legnephoramoorii)、千金藤属植物(西藏地不容(stephaniaglabra)、粉防己(stephaniatetranda))、白屈菜属植物(白屈菜(chelidoniummajus))、金杯罂粟属植物(烟堇叶金杯罂粟(hunnemanniafumariaefolia))、黄连属植物(格林兰黄连(coptisgroenlandica))、索木属植物(两色索木(guatteriadiscolor))、厚足花属植物(pachypodanthiumstaudtii)、张口藤属植物(chasmantheradependens)、天仙藤属植物(绿白天仙藤(fibraureachloroleuca))、碎米蕨属植物(cheilanthesmeifolia)、秃疮花属植物(秃疮花(dicranostigmaleptopodum))、海罂粟属植物(海罂粟(glauciumvitellinum))、延胡索(corydalisyanhusuo)和夏日无(corydalisxiarriwu)。8.在某些实施方案中，降脂剂是来自以下的含异喹啉基的生物碱：例如紫堇属植物提取物，或紫堇属植物化合物的衍生物，例如本文所示的式i、式ii、式iii或式iv的化合物。示例性降脂剂包括基本上纯的紫堇米定碱(corlumidin,clmd)、(+)–紫堇米定碱、(+)–clmd、紫堇根碱(corypalmine,crpm)、14r–(+)–紫堇根碱(14r–(+)–crpm)、四氢巴马汀(tetrahydropalmatine,thp)、14r–(+)–四氢巴马汀(14r–(+)–thp)、紫堇碱(corydaline,crdl),14r,13s–(+)–紫堇碱(14r,13s–(+)–crdl)、荷包牡丹碱(bicuculline,bccl)、d-(+)-荷包牡丹碱(d-(+)-bccl)以及egenine(egn)、(+)-egenine((+)-egn)。[0009][0010]对于式i或式ii的化合物，r1、r2、r3、r4、r5和r6(独立地、共同地或以任何组合的形式)选自h、卤素、羟基、c1-c6烷基、烷氧基、硝基、氨基、氨基烷基、三氟甲基、三氟甲氧基、环烷基、烷酰基、烷酰氧基(alkanoyloxy)、腈、二烷基氨基、烯基、羟烷基、烷基氨基烷基、氨基烷基、二烷基氨基烷基、卤代烷基、羧烷基、烷氧基烷基、羧基、烷酰基氨基、羰基氨基、氨基甲酰基、烷基磺酰基氨基和杂环基。优选，当卤素与氧共价键合时，r1、r2、r3、r4、r5和r6不是卤素。一方面，本技术的化合物还可以在式i或式ii的任何位置包含一个或多个卤素作为取代基。在一些实施方案中，式i的化合物具有14r-(+)立体化学构型。在一些实施方案中，式i的化合物具有14s-(-)立体化学构型。[0011]在一些实施方案中，可用于本文所述方法的降脂剂包括式iii和式iv的化合物或其立体异构体、其互变异构体、其溶剂化物及其药学上可接受的盐：[0012][0013]其中[0014]r1和r2独立地为-h、-(ch2)0-6coor'、–c(o)r"，或取代或未取代的烷基、环烷基、环烷基烷基、烯基、芳基、芳烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂环基或杂环基烷基；或r1和r2一起为亚甲基；[0015]r3和r8独立地为-h、-oh、-cl、-br、-f、-i、-cn、-nh2、-c(o)nh2、-cooh、或取代或未取代的烷基、烷氧基、烯基或芳烷基；[0016]r3'为h，或r3和r3'一起为桥氧基(oxogroup)；[0017]r4为-h、卤素、-or'、-oso2r"、-oc(o)r"、-oc(o)or"、-oc(o)nr'r"、-o-亚烷基-nr'r'、-o-亚烷基-oso2r"、-o-亚烷基-s(o)0-2r"、-o-亚烷基-nr'so2r"、-o-亚烷基-n(r')c(o)r'，或取代或未取代的烷基；[0018]r5和r6独立地为-h、卤素、-oh，或取代或未取代的烷氧基；或r4和r5一起为亚甲基二氧基，或r5和r6一起为亚甲基二氧基；[0019]r7为h、卤素、oh、或取代或未取代的烷基或烷氧基；[0020]r9为h或取代或未取代的烷基；[0021]每个r'都独立地为氢、或取代或未取代的烷基、烯基、环烷基、环烷基烷基、芳基、芳烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂环基或杂芳基烷基；[0022]每个r"都独立地为取代或未取代的烷基、烯基、环烷基、环烷基烷基、芳基、芳烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂环基或杂环基烷基。[0023]在其他实施方案中，提供了式iii的第二组化合物、其立体异构体、其互变异构体、其溶剂化物及其药学上可接受的盐：[0024][0025]其中[0026]r1和r2独立地为-h、-(ch2)0-6coor'、–c(o)r"、或取代或未取代的烷基、环烷基、环烷基烷基、烯基、芳基、芳烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂环基或杂环基烷基；或r1和r2一起为亚甲基；[0027]r3和r8独立地为-h、-oh、-cl、-br、-f、-i、-cn、-nh2、-c(o)nh2、-cooh、或取代或未取代的烷基、烯基、烷氧基或芳烷基；[0028]r3'为-h，或r3和r3'一起为桥氧基；[0029]r4为-h、卤素、-or'、-oso2r"、-oc(o)r"、-oc(o)or"、-oc(o)nr'r"、-o-亚烷基-nr'r'、-o-亚烷基-oso2r"、-o-亚烷基-s(o)0-2r"、-o-亚烷基-nr'so2r"、-o-亚烷基-n(r')c(o)r'或取代或未取代的烷基；[0030]r5和r6独立地为-h、卤素、-oh或取代或未取代的烷氧基；或r4和r5一起为亚甲基二氧基，或r5和r6一起为亚甲基二氧基；[0031]r7为-h、卤素、-oh、或取代或未取代的烷基或烷氧基；[0032]每个r’都独立地为氢、或取代或未取代的烷基、烯基、环烷基、环烷基烷基、芳基、芳烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂环基或杂芳基烷基；[0033]每个r"都独立地为取代或未取代的烷基、烯基、环烷基、环烷基烷基、芳基、芳烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂环基或杂环基烷基；[0034]前提条件是，当r4为-h、-oh或c1-4烷氧基时，则r5不为-h、-oh或c1-4烷氧基；且当r1和r2都为-ch3或当r1和r2一起为亚甲基时，则r5不为oh或c1-2烷氧基，且r4和r5一起不为亚甲基二氧基；且当r4为oc(o)r"时，则r5不为oc(o)r"或甲氧基。[0035]还在其他实施方案中，提供了式v和式vi的化合物：[0036][0037]在式v和式vi的化合物中，[0038]r1和r2独立地为-h、-(ch2)0-6coor'、–c(o)r"、-or'、-nr10r11、-c(o)nr10r11、或取代或未取代的烷基、烯基、环烷基、环烷基烷基、芳基、芳烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂环基或杂环基烷基；或r1和r2一起为1,2-二氧基亚乙基；[0039]r3和r8独立地为-h、-oh、-cl、-br、-f、-i、-cn、-nh2、-c(o)nh2、-cooh、或取代或未取代的烷基、烯基、烷氧基或芳烷基；[0040]r3'为-h，或r3和r3'一起为桥氧基；[0041]r4为-h、卤素、-or'、-oso2r"、-oc(o)r"、-oc(o)or"、-oc(o)nr'r"、-o-亚烷基-nr'r'、-o-亚烷基-oso2r"、-o-亚烷基-s(o)0-2r"、-o-亚烷基-nr'so2r"、-o-亚烷基-n(r')c(o)r'或取代或未取代的烷基；[0042]r5和r6独立地为-h、卤素、-oh或取代或未取代的烷氧基；或r4和r5一起为亚甲基二氧基，或r5和r6一起为亚甲基二氧基；[0043]r7为-h、卤素、-oh、或取代或未取代的烷基或烷氧基；[0044]r10和r11独立地为h、-c(o)or"或取代或未取代的烷基；[0045]每个r’都独立地为氢、或取代或未取代的烷基、烯基、环烷基、环烷基烷基、芳基、芳烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂环基或杂芳基烷基；且[0046]每个r"都独立地为取代或未取代的烷基、烯基、环烷基、环烷基烷基、芳基、芳烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂环基或杂环基烷基。[0047]在式v或式vi的化合物的任何实施方案中，r1和r2并不是两者都为–or'。在式v或式vi的化合物的任何实施方案中，当r1和r2都为h时，则r4为卤素、-oso2r"、-oc(o)r"、-oc(o)or"、-oc(o)nr'r"、-o-亚烷基-nr'r'、-o-亚烷基-oso2r"、-o-亚烷基-s(o)0-2r"、-o-亚烷基-nr'so2r"、-o-亚烷基-n(r')c(o)r'或取代或未取代的烷基。[0048]在另一个方面，本技术的降脂剂是含有一种或多种赋形剂、载体或填充剂的药物组合物的一部分。在一个实施方案中，药物组合物以单位剂型的形式包装。当施用于有需要的个体时，单位剂型在降低血流和/或肝中的脂质水平(例如总胆固醇、ldl胆固醇、甘油三酯和未酯化长链脂肪酸中的至少一种)方面是有效的。[0049]本技术的又一方面是含有根据本技术的降脂剂和第二药剂的药物包或试剂盒。第二药剂可以是胆固醇摄取抑制剂、胆固醇合成抑制剂、胆固醇吸收抑制剂、胆汁酸螯合剂、维生素、抗高血压剂或血小板聚集抑制剂。第二药剂也可以是hmg-coa还原酶抑制剂、hmg-coa合酶抑制剂、角鲨烯环氧酶抑制剂、酰基辅-coa胆固醇酰基转移酶(acat)抑制剂、微粒体甘油三酯转移蛋白(mtp)抑制剂、过氧化物酶体增殖剂激活受体(ppar)激动剂或amp激活蛋白激酶(ampk)激活剂。第二药剂也可以是增加低密度脂蛋白受体(ldlr)表达的药剂。第二药剂可以是小檗碱化合物，例如四氢小檗碱。[0050]本技术的又一方面是合成14r-四氢巴马汀的方法。该方法包括在二氯甲烷中用三氯化硼处理小檗碱，在无水丙酮中用甲基碘和碳酸钾将产物甲基化，并使用不对称氢化催化剂将产物氢化以产生14r-四氢巴马汀。附图说明[0051]图1显示了通过x射线衍射确定crdl的立体化学构型。[0052]图2显示了通过x射线衍射测定thp的立体化学构型。[0053]图3显示了通过半定量rt-pcr分析(+)-clmd、14r-(+)-crpm、14r,13s-(+)-crdl和14r-(+)-thp对hepg2细胞中ldlrmrna表达的有效和剂量依赖性影响。[0054]图4显示了在ldlrmrna表达上调中对+/–thp特定立体化学要求的确定。[0055]图5显示了对14r,13s-(+)-crdl和14r-(+)-thp激活hepg2细胞中erk的蛋白质印迹分析。[0056]图6显示了对14r-(+)-thp诱导乙酰辅酶a羧化酶(acc)磷酸化的蛋白质印迹分析。[0057]图7a显示了用(14r,13s)-crdlhcl处理的wister雄性大鼠中tc与时间曲线，并证明与对照组相比，crdl处理将tc降低至33.8％，并降低至预处理水平的33.0％。图7b显示了ldl-c水平的类似曲线，并且表明crdl将ldl-c水平降低至对照的25.6％，并且crdl处理将ldl-c水平降低至第0天的22.4％。图7c显示了tg水平的类似曲线，该曲线表明tg水平降低至对照的29％和预处理水平(第0天)的27％。图7d是显示用(14r,13s)-crdlhcl处理的wister雄性大鼠和对照组的血清ast和alt水平的条形图，并表明crdl没有损害肝功能，而是改善了肝功能，具有统计显著性。[0058]图8a显示了用crdl处理的雄性wister大鼠和对照组的食物摄取与时间曲线。食物消耗量在第一周最初减少后，在其余的处理时间内，它增加并稳定在与对照组相似的统计水平。图8b显示了crdl处理的wister大鼠和喂食高脂肪和高胆固醇饮食的对照组的体重变化与时间曲线，并且表明尽管对照组在4周内体重增加了超过30％，但crdl处理组wister大鼠的体重保持不变。[0059]图9显示了为检查ldlr、pcsk9和β-肌动蛋白的蛋白质水平而进行的蛋白质印迹分析。为了证明本文公开的化合物对他汀类诱导的pcsk9上调的抵消作用，在不存在或存在浓度为10μm的化合物127(+)的情况下，用0.3μm或1μm的瑞舒伐他汀(rsv)将hepg2细胞处理了2天。[0060]图10a-10f显示了式i、式ii、式iii和式iv的化合物对ldlrmrna上调(10a、10c和10e)和对pcsk9mrna表达抑制(10b、10d、10f)的时间依赖性影响。hepg2细胞分别用20μm剂量的新化合物处理1天、2天和3天。收获总rna用于定量实时rt-pcr分析。通过用化合物处理的细胞中归一化的pcsk9mrna或ldlrmrna的量除以未处理对照细胞中的pcsk9mrna或ldlrmrna的量，得出倍数活性(foldactivity)。[0061]图11比较了暴露于本文公开的化合物的细胞的总细胞tg含量。[0062]图12比较了化合物127和128的正旋(+)对映异构体与负旋(-)对映异构体对ldlr蛋白上调、pcsk9抑制和acc磷酸化(pacc)诱导的时间依赖性影响。hepg2细胞用所示化合物处理了1-3天，并分离总细胞裂解物，用于使用抗ldlr、抗pcsk9和pacc抗体的蛋白质印迹。[0063]图13显示了本文发明的新化合物在高胆固醇血症兔中的降ldl-c作用。给42只雄性日本兔喂食富含胆固醇的兔饮食两周，以诱导高胆固醇血症。然后用化合物128(+)和128(-)(以30mg/kg的剂量)以及辛伐他汀(smv)和阿托伐他汀(atv)(以3mg/kg的剂量)每天一次通过口服管饲法处理兔。在第0天(药物处理前)和第7天收集血清样品。处理7天后，将化合物28(+)和128(-)的化合物剂量增加到60mg/kg，并将smv和atv的化合物剂量增加到10mg/kg，并将处理再持续7天。在总共14天的处理结束时处死所有受试动物，并分析血清样品的tc、ldl-c、tg和hdl-c。显示的数据是化合物处理组与溶媒组(vehiclegroup)相比的ldl-c变化百分比。[0064]图14显示了本文公开的化合物强烈抑制pcsk9的mrna表达。[0065]图15a显示了化合物91和辛伐他汀的ldlrmrna水平与浓度曲线。图15b显示了曲线化合物91的pcsk9mrna水平与浓度曲线。[0066]图16是证明增强的ldlr表达和降低的pcsk9表达的蛋白质印迹。肌动蛋白是显示相同蛋白质加载水平的阳性对照。[0067]图17显示了来自实施例24所述nash仓鼠模型的肝组织的代表性h&e和siriusred图片(10x放大倍数)。在hfhc饮食15周后，将仓鼠随机分为3个同质组(n＝10/组)并用溶媒、化合物128(c128)(以100mg/kg的剂量)或ppar双激动剂elafibranor(15mg/kg的剂量)口服qd(一天一次)处理5周。矩形表示评分为3的小叶小泡性脂肪变性(panlobularmicrovesicularsteatosis)，伴有几个气球样肝细胞并存在混合细胞炎症(白色圆圈)。箭头表示溶媒处理的仓鼠的肝脏中评分为3的纤维化，这在c128处理的仓鼠的肝组织中未检测到。[0068]图18显示了来自nash仓鼠模型肝组织的代表性h&e图片(20x放大倍数)，比较了来自用溶媒、c128或elafibranor处理的仓鼠的组织。正方形和长方形表示小泡性脂肪变性。虚线圆圈表示几个气球样肝细胞，以及在溶媒处理的仓鼠的肝脏中存在混合细胞炎症，这在c128处理的仓鼠的肝组织中未检测到。[0069]图19a-19e为显示了在小鼠nash模型中比较c128和elafibranor与溶媒的益处的图表。图19a：nas总评分，(19b)肝细胞气球样变，(19c)纤维化，(19d)炎症，和(19e)肝脂肪变性评分。用单因素加dunnett事后检验(1-wayplusdunnett’spost-test)，与溶媒相比，*p《0.05和**p《0.01。用t检验，与溶媒相比，#p《0.05、##p《0.01和###p《0.001。[0070]图20a-20f为显示了c128对喂食高脂肪和高胆固醇饮食两周然后用c128(以10mg/kg、20mg/kg和40mg/kg的剂量)处理4周的仓鼠的影响的图表，同时用非诺贝特(feno)(以50mg/kg的剂量)作为阳性对照化合物。测量血清脂质和肝酶。与溶媒组相比，c128处理显著降低了tc(20a)、ldl-c(20b)、tg(20c)的血清脂质水平，而不影响体重(20d)、肝重(20e)和肝指数(20f)。用单因素加dunnett后检验，与溶媒相比，*p《0.05、**p《0.01以及***p《0.001。[0071]图21a-21d显示了在仓鼠nafld模型中(与图20相同)，c128(非诺贝特阳性对照，feno)处理显著降低肝酶(21a)alt、(21b)ast、(21c)alp、(21d)油红o染色。用单因素加dunnett后检验，与溶媒相比，*p《0.05、**p《0.01以及***p《0.001、[0072]图22a-22f显示了来自作为nafld仓鼠模型的一部分的正常饮食(22a)或高脂肪高胆固醇饮食(hfhc)的仓鼠的肝组织的代表性h&e图片(40x放大倍数)。用溶媒(22b)、10mg/kgc128(22c)、20mg/kgc128(22d)、40mg/kgc128(22e)或作为阳性对照的50mg/kg非诺贝特(feno)(22f)处理hfhc饮食的仓鼠。[0073]图23a-23f显示了喂食了以下的仓鼠的肝组织的代表性油红o脂肪染色图片(40x放大倍数)：正常饮食(23a)、高脂肪和高胆固醇饮食(hfhcd)和溶媒(23b)、hfhcd+10mg/kgc128(23c)、hfhcd+20mg/kgc128(23d)、hfhcd+40mg/kgc128(23e)、hfhcd+50mg/kg非诺贝特(feno)(23f)。[0074]图24a-24f显示了实施例26讨论的喂食hfhcd和溶媒或c127的食蟹猴的dexa全身扫描结果的图表。显示了以下结果：体重(24a)、bmi(24b)和体脂肪含量(24c)以及骨矿物质密度(24d)略有改善、骨矿物质含量(24e)和瘦肉组织的百分比增加(24f)。[0075]图25a-25c显示了关于喂食高脂肪饮食的肥胖食蟹猴的血清ldl-c、tc和肝酶alt，c127处理的结果的图表。[0076]图26a-26f显示了关于ldl-c(26a)、tc(26b)、tg(26c)、alt(26d)、ast(26e)的血清脂质水平和组织油红o染色评分(26f)，在nafld仓鼠模型(参见实施例27)中c127处理的图表。用单因素加dunnett事后检验，与溶媒相比，*p《0.05、**p《0.01以及***p《0.001。feno：非诺贝特。[0077]图27a-27c显示了来自作为nafld仓鼠模型的一部分的仓鼠的肝组织的代表性h&e图片(40x放大倍数)，。用溶媒(27a)或80mg/kgc127(27b)或作为阳性对照的50mg/kg非诺贝特(feno)(27c)处理hfhcd仓鼠。[0078]图28a-28c显示了喂食hfhcd和溶媒(28a)、hfhcd+80mg/kgc127(28b)和hfhcd+50mg/kg非诺贝特(feno)(28c)的仓鼠的肝组织的代表性油红o脂肪染色图片(40x放大倍数)。[0079]发明详述[0080]在各个方面，本技术提供了用于治疗nash、nafld、肥胖、用于降低血浆和/或肝脂质水平的化合物、方法，以及用于治疗高脂血症、高胆固醇血症、高甘油三酯血症和代谢综合征的方法。本文提供的化合物可以配制成可用于所公开的方法的药物组合物和药剂。还提供了该化合物在制备药物制剂和药剂中的用途，该化合物用于治疗nash、nafld、肥胖的用途，在降低血浆和/或肝脂质水平中的用途，以及该化合物在治疗高脂血症、高胆固醇血症、高甘油三酯血症和代谢综合征中的用途。[0081]以下术语按下文定义在全文中使用。[0082]通常，提及诸如氢或h等某种元素意味着包括该元素的所有同位素。例如，如果r基团被定义为包括氢或h，则它还包括氘和氚。包含诸如氚、c14、p32和s35等放射性同位素的化合物因此在本技术的范围内。基于本文的公开，将此类标记插入本技术的化合物中的程序对于本领域技术人员而言应当是显而易见的。[0083]通常，“取代的”是指下文定义的有机基团(例如烷基)，其中与所含氢原子的一个或多个键被与非氢或非碳原子的键替代。取代的基团还包括其中与一个或多个碳或一个或多个氢原子的一个或多个键被与杂原子的一个或多个键(包括双键或三键)替代的基团。因此，除非另有说明，取代的基团被一个或多个取代基取代。在一些实施方案中，取代的基团被1、2、3、4、5或6个取代基取代。取代基的实例包括：卤素(即f、cl、br和i)；羟基；烷氧基、烯氧基、芳氧基、芳烷氧基、杂环氧基和杂环基烷氧基；羰基类化合物(氧代)；羧基；酯类；尿烷；肟；羟胺；烷氧基胺；芳烷氧基胺；硫醇；硫化物；亚砜；砜类；磺酰基；磺胺类；胺类；n-氧化物；肼；酰肼；腙；叠氮化物；酰胺；脲；脒；胍；烯胺；酰亚胺；异氰酸酯；异硫氰酸酯；氰酸酯；硫氰酸酯；亚胺；硝基；腈(即cn)；等。[0084]取代的环基，例如取代的环烷基、芳基、杂环基和杂芳基，还包括其中与氢原子的键被与碳原子的键替代的环和环系统。因此，取代的环烷基、芳基、杂环基和杂芳基也可以被下文定义的取代的或未取代的烷基、烯基和炔基取代。[0085]烷基包括具有1-12个碳原子，通常1-10个碳原子，或在一些实施方案中，具有1-8个、1-6个或1-4个碳原子的直链和支链烷基。直链烷基的实例包括诸如甲基、乙基、正丙基、正丁基、正戊基、正己基、正庚基和正辛基等基团。支链烷基的实例包括但不限于异丙基、异丁基、仲丁基、叔丁基、新戊基、异戊基和2,2-二甲基丙基。代表性的取代的烷基可以被例如上文列出的那些取代基取代一次或多次，并且包括但不限于卤代烷基(例如三氟甲基)、羟烷基、硫代烷基、氨基烷基、烷基氨基烷基、二烷基氨基烷基、烷氧基烷基、羧基烷基等。[0086]环烷基包括在一个或多个环中具有3-12个碳原子，或在一些实施方案中，具有3-10、3-8或3-4、3-5或3-6个碳原子的单环、双环或三环烷基。示例性的单环环烷基包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基和环辛基。在一些实施方式中，环烷基具有3-8个环成员，而在其他实施方式中，环碳原子的数目为3-5、3-6或3-7。双环和三环系统包括桥接环烷基和稠环，例如但不限于双环[2.1.1]己烷、金刚烷基、十氢化萘基等。取代的环烷基可以被上文定义的非氢和非碳基团取代一次或多次。然而，取代的环烷基还包括被上文定义的直链或支链烷基取代的环。代表性的取代的环烷基可以是单取代的或取代一次以上，例如但不限于2,2-、2,3-、2,4-、2,5-或2,6-二取代的环己基，其可以被取代基(例如上文列出的那些取代基)取代。[0087]环烷基烷基是上文定义的烷基，其中烷基的氢键或碳键被与上文定义的环烷基的键替代。在一些实施方案中，环烷基烷基具有4-16个碳原子、4-12个碳原子，并且通常4-10个碳原子。取代的环烷基烷基可以在该基团的烷基处被取代、环烷基处被取代或烷基和环烷基均被取代。代表性的取代的环烷基烷基可以被取代基(例如上文列出的那些取代基)单取代或取代一次以上，例如但不限于单取代、二取代或三取代。[0088]烯基包括如上文定义的直链和支链烷基，除了存在至少一个在两个碳原子之间的双键。烯基具有2-12个碳原子，通常具有2-10个碳原子，或在一些实施方案中，具有2-8、2-6或2-4个碳原子。在一些实施方案中，烯基具有一个、两个或三个碳-碳双键。实例尤其包括但不限于乙烯基、烯丙基、-ch＝ch(ch3)、-ch＝c(ch3)2、-c(ch3)＝ch2、-c(ch3)＝ch(ch3)、-c(ch2ch3)＝ch2。代表性的取代的烯基可以被取代基(例如上文列出的那些取代基)单取代或取代一次以上，例如但不限于单取代、二取代或三取代。[0089]环烯基包括具有至少一个在两个碳原子之间的双键的上文定义的环烷基。在一些实施方案中，环烯基可具有一个、两个或三个双键，但不包括芳族化合物。环烯基具有4-14个碳原子，或在一些实施方案中，具有5-14个碳原子、5-10个碳原子或甚至5、6、7或8个碳原子。环烯基的实例包括环己烯基、环戊烯基、环己二烯基、丁二烯基、戊二烯基和己二烯基。[0090]环烯基烷基是其中烷基的氢键或碳键被与上文定义的与环烯基的键替代的上文定义的烷基。取代的环烯基烷基可以在该基团的烷基处被取代、环烯基处被取代或烷基和环烯基部分均被取代。代表性的取代的环烯基烷基可以被取代基(例如上文列出的那些取代基)取代一次或多次。[0091]炔基包括如上文定义的直链和支链烷基，除了至少一个存在于两个碳原子之间的三键。炔基具有2-12个碳原子，通常具有2-10个碳原子，或在一些实施方案中，具有2-8、2-6或2-4个碳原子。在一些实施方案中，炔基具有一个、两个或三个碳-碳三键。实例尤其包括但不限于–c≡ch、-c≡cch3、-ch2c≡cch3、-c≡cch2ch(ch2ch3)2等。代表性的取代的炔基可以被取代基(例如上文列出的那些取代基)单取代或取代一次以上，例如但不限于单取代、二取代或三取代。[0092]芳基是不含杂原子的环状芳烃。本文中的芳基包括单环、双环和三环环系统。因此，芳基包括但不限于苯基、薁基、庚搭烯基、联苯基、芴基、菲基、蒽基、茚基、茚满基、戊搭烯基和萘基。在一些实施方案中，芳基在基团的环部分中含有6-14个碳，并且在其他实施方案中，含有6-12或甚至6-10个碳原子。在一些实施方案中，芳基是苯基或萘基。尽管短语“芳基”包括含有稠环的基团，例如稠合芳族脂族环系统(例如，茚满基、四氢萘基等)，但它不包括具有与环成员之一键合的其他基团(例如烷基或卤素基团)的芳基。相反，诸如甲苯基等基团称为取代的芳基。代表性的取代的芳基可以是单取代的或取代一次以上。例如，单取代的芳基包括但不限于可以被取代基(例如上文列出的那些取代基)取代的2-、3-、4-、5-或6-取代的苯基或萘基。[0093]芳烷基是其中烷基的氢键或碳键被与上文定义的芳基的键替代的上文定义的烷基。在一些实施方案中，芳烷基含有7-16个碳原子、7-14个碳原子或7-10个碳原子。取代的芳烷基可以在该基团的烷基处被取代、芳基处被取代或烷基和芳基部分处均被取代。代表性的芳烷基包括但不限于苄基和苯乙基以及稠合的(环烷基芳基)烷基，例如4-茚满基乙基。代表性的取代的芳烷基可以被取代基(例如上文列出的那些取代基)取代一次或多次。[0094]杂环基包括，含有3个或更多个环成员且其中一个或多个是例如但不限于n、o和s等杂原子的芳族(也称为杂芳基)和非芳族环化合物。在一些实施方案中，杂环基含有1、2、3或4个杂原子。在一些实施方案中，杂环基包括单环、双环和三环，具有3-16个环成员，而其他此类基团具有3-6、3-10、3-12或3-14个环成员。杂环基包括芳族、部分不饱和的和饱和的环系统，例如咪唑基、咪唑啉基和咪唑烷基。短语“杂环基”包括稠环物质，包括包含稠合芳族和非芳族基团的那些，例如苯并三唑基、2,3-二氢苯并[1,4]二噁英基和苯并[1,3]间二氧杂环戊烯基(dioxolyl)。该短语还包括含有杂原子的桥接多环环系统，例如但不限于喹宁环基。然而，该短语不包括具有与环成员之一键合的其他基团(例如烷基、桥氧基或卤代基团)的杂环基。更确切的说，这些称为“取代的杂环基”。杂环基包括但不限于氮丙啶基、氮杂环丁烷基、吡咯烷基、咪唑烷基、吡唑烷基、噻唑烷基、四氢噻吩基、四氢呋喃基、间二氧杂环戊烯基、呋喃基、噻吩基、吡咯基、吡咯啉基、咪唑基、咪唑啉基、吡唑基、吡唑啉基、三唑基、四唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、噻唑啉基、异噻唑基、噻二唑基、噁二唑基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、硫代吗啉基、四氢吡喃基、四氢噻喃基、氧硫杂环己烷、二氧杂环己基(dioxyl)、二硫杂环己基(dithianyl)、吡喃基、吡啶基、嘧啶基、哒嗪基、吡嗪基、三嗪基、二氢吡啶基、二氢二硫代环己烯基(dihydrodithiinyl)、二氢二亚硫酰(dihydrodithionyl)、高哌嗪基(homopiperazinyl)、奎宁环基、吲哚基、吲哚啉基、异吲哚基、氮杂吲哚基(吡咯并吡啶基)、吲唑基、吲哚嗪基、苯并三唑基、苯并咪唑基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并噻唑基、苯并噁二唑基、苯并噁嗪基、苯并二硫杂环己烯基(benzodithiinyl)、苯并噁硫杂环己烯基(benzoxathiinyl)、苯并噻嗪基(benzothiazinyl)、苯并噁唑基、苯并噻唑基、苯并噻二唑基、苯并[1,3]间二氧杂环戊烯基、吡唑并吡啶基、咪唑吡啶基(氮杂苯并咪唑基)、三唑并吡啶基、异噁唑吡啶基、嘌呤基、黄嘌呤基(xanthinyl)、腺嘌呤基、鸟嘌呤基(guaninyl)、喹啉基、异喹啉基、喹嗪基、喹喔啉基、喹唑啉基、噌啉基、酞嗪基、萘啶基、蝶啶基、噻萘基(thianaphthyl)、二氢苯并噻嗪基、二氢苯并呋喃基、二氢吲哚基、二氢苯并二噁英基(dihydrobenzodioxinyl)、四氢吲哚基、四氢吲唑基、四氢苯并咪唑基、四氢苯并三唑基、四氢吡咯并吡啶基、四氢吡唑并吡啶基、四氢咪唑并吡啶基、四氢三唑并吡啶基和四氢喹啉基。代表性的取代的杂环基可以是单取代的或取代一次以上，例如但不限于被各种取代基(例如上文列出的那些取代基)2-、3-、4-、5-或6-取代或双取代的吡啶基或吗啉基。[0095]杂芳基是含有5个或更多个环成员并且其中一个或多个是例如但不限于n、o和s的杂原子的芳族环化合物。杂芳基包括但不限于例如吡咯基、吡唑基、三唑基、四唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、噻吩基、苯并噻吩基、呋喃基、苯并呋喃基、吲哚基、氮杂吲哚基(吡咯并吡啶基)、吲唑基、苯并咪唑基、咪唑并吡啶基(氮杂苯并咪唑基)、吡唑并吡啶基、三唑并吡啶基、苯并三唑基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、苯并噻二唑基、咪唑并吡啶基、异噁唑并吡啶基、噻萘基、嘌呤基、黄嘌呤基、腺嘌呤基、鸟嘌呤基、喹啉基、异喹啉基、四氢喹啉基、喹喔啉基和喹唑啉基。杂芳基包括所有环都是芳族的稠环化合物，例如吲哚基，并且包括只有一个环是芳族的稠环化合物，例如2,3-二氢吲哚基。尽管短语“杂芳基”包括稠环化合物，但该短语不包括具有与环成员之一键合的其他基团(例如烷基)的杂芳基。而是，具有这种取代的杂芳基称为“取代的杂芳基”。代表性的取代的杂芳基可以被各种取代基(例如上文列出的那些取代基)取代一次或多次。[0096]杂环基烷基是其中氢键或碳键被与上文定义的杂环基的键替代的上文定义的烷基。取代的杂环基烷基可以在该基团的烷基处被取代、杂环基处被取代或烷基和杂环基部分处均被取代。代表性的杂环基烷基包括但不限于吗啉-4-基-乙基、呋喃-2-基-甲基、咪唑-4-基-甲基、吡啶-3-基-甲基、四氢呋喃-2-基-乙基和吲哚-2-基-丙基。代表性的取代的杂环基烷基可以被取代基(例如上文列出的那些取代基)取代一次或多次。[0097]杂芳烷基是其中氢键或碳键被与上文定义的杂芳基的键替代的上文定义的烷基。取代的杂芳烷基可以在该基团的烷基处被取代、杂芳基处被取代或烷基和杂芳基部分处均被取代。代表性的取代的杂芳烷基可以被取代基(例如上文列出的那些取代基)取代一次或多次。[0098]在本技术的化合物内具有两个或更多个连接点(即，二价、三价或多价)的本文所述基团通过使用后缀“亚”来命名。例如，二价烷基是亚烷基，二价芳基是亚芳基，二价杂芳基是二价杂亚芳基等。具有单个与本技术的化合物的连接点的取代的基团不使用“亚”名称来指代。因此，例如，氯乙基在本文中不称为氯亚乙基。[0099]烷氧基是其中与氢原子的键被与上文定义的取代或未取代的烷基的碳原子的键替代的羟基(-oh)。直链烷氧基的实例包括但不限于甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基、戊氧基、己氧基等。支链烷氧基的实例包括但不限于异丙氧基、仲丁氧基、叔丁氧基、异戊氧基、异己氧基等。环烷氧基的实例包括但不限于环丙氧基、环丁氧基、环戊氧基、环己氧基等。代表性的取代的烷氧基可以被取代基(例如上文列出的那些取代基)取代一次或多次。[0100]如本文所用，术语“烷酰基”和“烷酰氧基”可分别指各自含有2-5个碳原子的-c(o)-烷基和-o-c(o)-烷基。[0101]术语“芳氧基”和“芳基烷氧基”分别是指与氧原子键合的取代或未取代的芳基和在烷基处与氧原子键合的取代或未取代的芳烷基。实例包括但不限于苯氧基、萘氧基和苄氧基。代表性的取代的芳氧基和芳基烷氧基可以被取代基(例如上文列出的那些取代基)取代一次或多次。[0102]如本文所用，术语“羧酸酯”是指-cooh基团。[0103]如本文所用，术语“酯”是指-coor30基团。r30是取代或未取代的本文定义的烷基、环烷基、烯基、炔基、芳基、芳烷基、杂环基烷基或杂环基。[0104]术语“酰胺”(或“酰胺基”)包括c-和n-酰胺基团，即分别为-c(o)nr31r32和–nr31c(o)r32基团。r31和r32独立地为氢，或取代或未取代的本文定义的烷基、烯基、炔基、环烷基、芳基、芳烷基、杂环基烷基或杂环基。因此酰胺基包括但不限于氨基甲酰基(-c(o)nh2)和甲酰胺基(-nhc(o)h)。在一些实施方案中，酰胺是–nr31c(o)-(c1-5烷基)并且该基团称为“羰基氨基”，并且在其他实施方案中酰胺是-nhc(o)-烷基并且该基团被称为“烷酰基氨基”。[0105]如本文所用，术语“腈”或“氰基”是指-cn基团。[0106]尿烷基团包括n-和o-尿烷基团，即分别为-nr33c(o)or34和-oc(o)nr33r34基团。r33和r34独立地为取代或未取代的本文定义的烷基、烯基、炔基、环烷基、芳基、芳烷基、杂环基烷基或杂环基。r33也可以为h。[0107]如本文所用，术语“胺”(或“氨基”)是指-nr35r36基团，其中r35和r36独立地为氢，或取代或未取代的本文定义的烷基、烯基、炔基、环烷基、芳基、芳烷基、杂环基烷基或杂环基。在一些实施方案中，胺是烷基氨基、二烷基氨基、芳基氨基或烷基芳基氨基。在其他实施方案中，胺是nh2、甲氨基、二甲氨基、乙氨基、二乙氨基、丙氨基、异丙氨基、苯氨基或苄氨基。[0108]术语“磺酰胺基”包括s-和n-磺酰胺基团，即分别为-so2nr38r39和–nr38so2r39基团。r38和r39独立地为氢，或取代或未取代的本文定义的烷基、烯基、炔基、环烷基、芳基、芳烷基、杂环基烷基或杂环基。因此磺酰胺基包括但不限于氨磺酰基(-so2nh2)。在本文的一些实施方案中，磺酰胺基是–nhso2-烷基，并且称为“烷基磺酰基氨基”。[0109]术语“硫醇”是指-sh基团，而硫化物包括–sr40基团，亚砜包括–s(o)r41基团，砜包括-so2r42基团，磺酰基包括–so2or43。r40、r41、r42和r43各自独立地为取代或未取代的本文定义的烷基、环烷基、烯基、炔基、芳基芳烷基、杂环基或杂环基烷基。在一些实施方案中，硫化物是烷硫基，即-s-烷基。[0110]术语“脲”是指–nr44-c(o)-nr45r46基团。基团r44、r45和r46独立地是氢，或取代或未取代的本文定义的烷基、烯基、炔基、环烷基、芳基、芳烷基、杂环基或杂环基烷基。[0111]术语“脒”是指–c(nr47)nr48r49和-nr47c(nr48)r49，其中r47、r48和r49各自独立地为氢，或取代或未取代的本文定义的烷基、环烷基、烯基、炔基、芳基芳烷基、杂环基或杂环基烷基。[0112]术语“胍”是指-nr50c(nr51)nr52r53，其中r50、r51、r52和r53各自独立地为氢，或取代或未取代的本文定义的烷基、环烷基、烯基、炔基、芳基芳烷基、杂环基或杂环基烷基。[0113]术语“烯胺”是指–c(r54)＝c(r55)nr56r57和-nr54c(r55)＝c(r56)r57，其中r54、r55、r56和r57各自独立地为氢，取代或未取代的本文所定义的烷基、环烷基、烯基、炔基、芳基芳烷基、杂环基或杂环基烷基。[0114]如本文所用，术语“卤素”或“卤代”是指溴、氯、氟或碘。在一些实施例中，卤素是氟。在其他实施方案中，卤素是氯或溴。[0115]如本文所用，术语“羟基”可以指-oh或其离子化形式–o–。[0116]术语“酰亚胺”是指–c(o)nr58c(o)r59，其中r58和r59各自独立地为氢，或取代或未取代的本文定义的烷基、环烷基、烯基、炔基、芳基芳烷基、杂环基或杂环基烷基。[0117]术语“亚胺”是指–cr60(nr61)和–n(cr60r61)基团，其中r60和r61各自独立地为氢，或取代或未取代的本文定义的烷基、环烷基、烯基、炔基、芳基芳烷基、杂环基或杂环基烷基，前提条件是r60和r61两者并不同时都为氢。[0118]如本文所用，术语“硝基”是指–no2基团。[0119]如本文所用，术语“三氟甲基”是指–cf3。[0120]如本文所用，术语“三氟甲氧基”是指–ocf3。[0121]如本领域技术人员应当理解的，出于任何和所有目的，特别是就提供书面描述而言，本文公开的所有范围还涵盖任何和所有可能的子范围及其子范围的组合。任何列出的范围都可以被容易地认为充分描述并且能够将相同的范围分解成至少相等的一半、三分之一、四分之一、五分之一、十分之一等。作为非限制性实例，本文讨论的每个范围都可以很容易地分解为下三分之一、中三分之一和上三分之一等。还如本领域技术人员也应当理解的，所有语言，例如“高达”、“至少”、“大于”、“小于”和类似用语，包括所列数字，并指可以随后分解为上文讨论的子范围的范围。最后，如本领域技术人员应当理解的，范围包括每个单独的成员。因此，例如，具有1-3个原子的基团是指具有1、2或3个原子的基团。同样，具有1-5个原子的基团是指具有1、2、3、4或5个原子的基团，等等。[0122]本文所用，“约”应当为本领域普通技术人员所理解，并且应取决于使用它的上下文在一定程度上变化。如果存在对本领域普通技术人员不清楚的术语的使用，考虑到使用它的上下文，“约”意味着高达具体术语的正负10％。[0123]本文所述化合物的药学上可接受的盐在本技术的范围内，并且包括保留了所需的药理活性并且在生物学上不是不希望的(例如，没有过度毒性、过敏性或刺激性，并且是生物可利用的)酸加成盐或碱加成盐。当本技术的化合物具有碱性基团，例如氨基时，可以与无机酸(例如盐酸、氢溴酸、硝酸、硫酸和磷酸)、有机酸(例如海藻酸盐、甲酸、乙酸、苯甲酸、葡萄糖酸、富马酸、草酸、酒石酸、乳酸、马来酸、柠檬酸、琥珀酸、苹果酸、甲磺酸、苯磺酸、萘磺酸和对甲苯磺酸)或酸性氨基酸(例如天冬氨酸和谷氨酸)形成药学上可接受的盐。当本技术的化合物具有酸性基团，例如羧酸基团时，它可以与诸如碱金属和碱土金属(例如na+、li+、k+、ca2+、mg2+、zn2+)等金属、氨或有机胺(例如二环己胺、三甲胺、三乙胺、吡啶、甲基吡啶、乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺)或碱性氨基酸(例如精氨酸、赖氨酸和鸟氨酸)形成盐。此类盐可以在化合物的分离和纯化过程中原位制备，或者通过分别使纯化的游离碱或游离酸形式的化合物与合适的酸或碱反应并分离由此形成的盐来制备。[0124]本领域技术人员应当理解，本技术的化合物可能表现出互变异构、构象异构、几何异构和/或立体异构现象。由于说明书和权利要求书中的式图仅可以代表可能的互变异构、构象异构、立体化学或几何异构形式中的一种，因此应当理解，本技术包括具有一种或多种本文所述用途的化合物的任何一种互变异构、构象异构、立体化学和/或几何异构形式，以及这些不同形式的混合物。[0125]“互变异构体”是指化合物的相互平衡的异构形式。异构形式的存在和浓度将取决于化合物所在的环境，并且可以根据例如化合物是固体还是在有机溶液或水溶液中而有所不同。例如，在水溶液中，咪唑可以表现出以下的异构形式，其被称为彼此的互变异构体：[0126][0127]如本领域技术人员容易理解的，多种官能团和其他结构可以表现出互变异构，并且本文所述化合物的所有互变异构体都在本技术的范围内。[0128]化合物的立体异构体(也称为旋光异构体)包括结构的所有手性、非对映异构和外消旋形式，除非明确指出具体的立体化学。因此，本技术所用的化合物包括在任何或所有不对称原子处富集或拆分的旋光异构体，这根据描述是显而易见的。可以分离或合成外消旋体和非对映异构混合物以及各旋光异构体，从而基本上不含它们的对映异构或非对映异构配偶体，并且这些立体异构体都在本技术的范围内。[0129]本技术的化合物可以作为溶剂化物存在，尤其是水合物。水合物可以在化合物或包含该化合物的组合物的制造过程中形成，或者由于化合物的吸湿性，水合物可随时间形成。本技术的化合物也可以作为有机溶剂化物存在，尤其包括dmf、醚和醇溶剂化物。任何具体溶剂化物的鉴定和制备在合成有机或药物化学的普通技术人员的技能范围内。[0130]脂质包括合成或天然存在的脂溶性化合物，包括中性和两亲分子。两亲脂质通常包含亲水组分和疏水组分。示例性脂质包括脂肪酸、甘油三酯、中性脂肪、磷脂、糖脂、脂肪醇、蜡、萜烯、类固醇如胆固醇和表面活性剂。[0131]本文所用的“降脂剂”是指当施用于个体时具有一种或多种下述作用的化合物：增加ldlr的肝脏表达；增加肝细胞中ldlrmrna的半衰期；增加血浆ldl、胆固醇或甘油三酯的肝摄取；增强肝脏脂肪酸氧化，减少肝甘油三酯合成和分泌，并降低血浆和/或肝总胆固醇、ldl胆固醇、vldl胆固醇或甘油三酯水平。本文所公开的降脂剂包括式i、式ii、式iii、式iv、式v和式vi的化合物。[0132]如本文所用，“化合物”或“衍生物”是指已通过一个或多个纯化步骤从植物提取物(如紫堇属植物提取物)获得或已通过化学合成从任何所需的起始材料产生的部分纯化形式或基本上纯的形式的化学化合物。本技术的化合物或衍生物可以作为外消旋混合物或作为纯立体异构体使用。优选的是具有作为降脂剂的活性的纯立体异构体。[0133]如本文所用，“部分纯化的”化合物或衍生物是指存在于化学混合物中的紫堇属植物化合物或其衍生物，该化学混合物已经经历了至少一个分离或纯化步骤，导致去除至少一种最初存在于含有该化合物或衍生物的初始提取物或合成混合物中的其他化学物质。“基本上纯的”化合物或衍生物是这样的化合物或衍生物，其已经被分离或纯化以使该化合物或衍生物成为基本上纯的化合物或衍生物的主要化学成分，即以摩尔计包含至少50％，或在一些实施方案中包含至少70％、至少90％或至少95％或99％。[0134]一方面，本技术提供了治疗nash、nafld和/或肥胖的方法，其包括以下、基本上由以下组成或由以下组成：施用治疗有效量的本文所述化合物或组合物，包括但不限于式i、式ii、式iii、式iv、式v和/或式vi中任一个的化合物。在一些实施方案中，化合物是式v的化合物或其任何实施方案。例如，本方法的化合物可以是实施例中的任何化合物，包括化合物1-161中的任何一种、其立体异构体、其药学上可接受的盐或上述两种或多种的任何组合。在本方法的一些实施方案中，向个体例如人类个体施用治疗有效量的化合物127(也称为2,3,10-三甲氧基-5,6,7,8,13,13a-六氢异喹啉并[2,1-b]异喹啉-9-基3-氟苯磺酸酯；也称为2,3,10-三甲氧基-5,8,13,13a-四氢-6h-异喹啉并[3,2-a]异喹啉-9-基3-氟苯磺酸酯)、其立体异构体和/或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，化合物127的14位具有r-(+)立体化学构型。在其他实施方案中，化合物127的14位具有s-(-)立体化学构型。在一些实施方案中，化合物127作为药学上可接受的盐，包括作为在14位的r-或s-对映异构体的药学上可接受的盐施用。在本方法的一些实施方案中，向个体例如人类个体施用治疗有效量的化合物128(也称为3,10-二甲氧基-5,6,7,8,13,13a-六氢异喹啉并[2,1-b]异喹啉-9-基3-氟苯磺酸酯；也称为3,10-二甲氧基-5,8,13,13a-四氢-6h-异喹啉并[3,2-a]异喹啉-9-基3-氟苯磺酸酯)、其立体异构体和/或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，化合物128的14位具有r-(+)立体化学构型。在其他实施方案中，化合物128的14位具有s-(-)立体化学构型。在一些实施方案中，化合物128作为药学上可接受的盐，包括作为在14位的r-或s-对映异构体的药学上可接受的盐施用。[0135]该方法还可以包括与本技术的化合物或组合物组合施用治疗有效量的fxr(法尼醇x受体)激动剂。例如，fxr激动剂可以是奥贝胆酸或托匹非索(tropifexor)。在另一个方面，本技术提供了降低有需要的个体的血浆和/或肝脂质水平的方法，包括向所述个体施用降脂有效量的本文所述化合物或组合物。要降低的脂质水平可以是总胆固醇、ldl胆固醇(ldl-c)、甘油三酯(tg)和未酯化长链脂肪酸中的一种或多种。[0136]本文所述的化合物和组合物可以用于治疗或预防包括例如nash、nafld、肥胖、高脂血症、高胆固醇血症、高甘油三酯血症和代谢综合征在内的疾病。治疗方法包括向有需要的个体施用治疗有效量的本文所述化合物或组合物。本技术的化合物还可以用于治疗或预防以血浆或肝胆固醇或甘油三酯升高为特征或与之相关的疾病状态或疾病。一般而言，预防措施(prophylactic)或预防治疗(prophylaxis)涉及降低患者发展诸如高脂血症、高胆固醇血症、高甘油三酯血症、脂肪肝或代谢综合征等病症或进入病症诊断状态的可能性。例如，本技术的化合物可以预防性地用作旨来在患者中保持健康和防止疾病传播或成熟的措施。还应理解，诸如高脂血症、高胆固醇血症、高甘油三酯血症、脂肪肝或代谢综合征等疾病的各种治疗或预防模式可以意味着“实质性”治疗或预防，其包括全部治疗或预防但也包括少于全部治疗或预防，并且取得了一些生物学或医学相关结果。此外，治疗(treatment)或治疗(treating)以及减轻可以指治疗性治疗和预防性或防预性措施，其中目的是预防、减缓(减轻)疾病状态、疾病状况或疾病。例如，如果在通过施用接受有效量或治疗量的一种或多种本文所述的化合物后，个体表现出具体疾病的一种或多种体征和症状可观察和/或可测量地减轻或不存在，例如但不限于血浆总胆固醇降低、血浆ldl-胆固醇降低、ldl受体(ldlr)的肝表达增加、血浆甘油三酯降低、发病率和死亡率降低或生活质量问题改善，则可以成功地治疗个体的高胆固醇血症。本技术还提供了以治疗有效量向患者施用本技术的一种或多种化合物，以治疗或预防诸如nash、nafld、肥胖、高脂血症、高胆固醇血症、高甘油三酯血症、脂肪肝或代谢综合征等疾病的方法。[0137]尽管不希望受理论束缚，但据信，本文公开的化合物和组合物通过增加ldlrmrna的稳定性，通过增加ldlr基因转录，通过抑制通过前蛋白转化酶枯草杆菌蛋白酶/kexin9型(proproteinconvertasesubtilisin/kexintype9,pcsk9)介导的ldlr蛋白降解，或所有上述潜在的细胞机制来增加ldlr的肝表达，进而降低脂质水平。肝脏中ldlr水平的增加会增加血浆ldl-c的摄取和处理，从而导致血浆胆固醇、ldl-c和甘油三酯水平降低。此外，该化合物可以通过激活amp激活的蛋白激酶(ampk)来增加乙酰辅酶a羧化酶(acc)的磷酸化。acc磷酸化的增加会增强肝中的脂肪酸氧化，导致肝tg积累减少，和以vldl形式的tg分泌物，这也有助于降低血浆tg、ldl-c、总胆固醇和未酯化长链脂肪酸水平，从而预防或治疗与高脂血症有关的疾病。[0138]因此，在另一方面，本技术提供了增加ldlr表达的方法，包括向有需要的个体施用治疗有效量的本文所述化合物或组合物，由此增加所述个体的ldlr表达。在本技术的另一个方面，提供了降低血浆ldl-胆固醇和/或血浆甘油三酯的方法，包括向有需要的个体施用治疗有效量的本文所述化合物或组合物，由此降低所个体的血浆ldl-胆固醇。[0139]“有效量”或“治疗有效量”是指产生所需效果所需的化合物或组合物的量。有效量(或治疗有效量)的一个实例包括用于治疗(药物)用途产生可接受的毒性和生物利用度水平的量或剂量，治疗(药物)用途包括但不限于治疗或预防nash、nafld、肥胖、高脂血症、高胆固醇血症、高甘油三酯血症、脂肪肝或代谢综合征。有效量的另一个实例包括能够防止血浆或肝胆固醇或甘油三酯升高的量或剂量。[0140]如本文所用，“个体”或“患者”是哺乳动物，例如猫、狗、啮齿动物或灵长类动物。通常，个体是人类，并且优选疑似患有与血浆或肝胆固醇或甘油三酯升高相关的疾病(例如高脂血症、高胆固醇血症、高甘油三酯血症、脂肪肝或代谢综合征)的人类。个体还可以包括这样的哺乳动物，其ldl水平升高、vldl水平升高或患有高脂血症加重或引发的疾病，例如心血管疾病，包括动脉粥样硬化、冠状动脉疾病、心绞痛、颈动脉疾病、中风、脑动脉硬化、心肌梗死、脑梗死、球囊血管成形术后再狭窄、间歇性跛行、高血压、餐后血脂异常脂血症和黄色瘤。术语“个体”和“患者”可以互换使用。[0141]在另一个方面，本技术提供了降脂剂，包括其化合物和组合物。化合物和组合物可用于本文所述的降脂方法和疗法。在一个实施方案中，本技术提供了式i的化合物、式ii的化合物、其立体异构体、其互变异构体、其溶剂化物和/或其药学上可接受的盐，[0142][0143]对于式i或式ii的化合物，r1、r2、r3、r4、r5和r6(独立地、共同地或以任何组合形式地)选自h、卤素、羟基、c1-c6烷基、烷氧基、硝基、氨基、氨基烷基、三氟甲基、三氟甲氧基、环烷基、烷酰基、烷酰氧基、腈、二烷基氨基、烯基、羟烷基、烷基氨基烷基、氨基烷基、二烷基氨基烷基、卤代烷基、羧基烷基、烷氧基烷基、羧基、烷酰基氨基、羰基氨基、氨基甲酰基、烷基磺酰基氨基和杂环基。优选地，当卤素与氧共价键合时，r1、r2、r3、r4、r5和r6不是卤素。一方面，本技术的化合物还可以在式i或式ii的任何位置包含一个或多个卤素作为取代基。在一些实施方案中，式i的化合物具有14r-(+)立体化学构型，并且式ii的化合物具有1r-(+)立体化学构型。[0144]在另一个实施方案中，提供了式iii的第一组化合物和式iv的化合物，以及其立体异构体、其互变异构体、其溶剂化物及其药学上可接受的盐。[0145][0146]在式iii和iv的化合物中，[0147]r1和r2独立地为-h、-(ch2)0-6coor'、–c(o)r"、或取代或未取代的烷基、环烷基、环烷基烷基、烯基、芳基、芳烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂环基或杂环基烷基；或r1和r2一起为亚甲基；[0148]r3和r8独立地为-h、-oh、-cl、-br、-f、-i、-cn、-nh2、-c(o)nh2、-cooh、或取代或未取代的烷基、烷氧基、烯基或芳烷基；[0149]r3'为-h，或r3和r3'一起为桥氧基；[0150]r4为-h、卤素、-or'、-oso2r"、-oc(o)r"、-oc(o)or"、-oc(o)nr'r"、-o-亚烷基-nr'r'、-o-亚烷基-oso2r"、-o-亚烷基-s(o)0-2r"、-o-亚烷基-nr'so2r"、-o-亚烷基-n(r')c(o)r'或取代或未取代的烷基；[0151]r5和r6独立地为-h、卤素、-oh或取代或未取代的烷氧基；或r4和r5一起为亚甲基二氧基，或r5和r6一起为亚甲基二氧基；[0152]r7为-h、卤素、-oh或取代或未取代的烷基或烷氧基；[0153]r9为h或取代或未取代的烷基；[0154]每个r’都独立地为氢、或取代或未取代的烷基、烯基、环烷基、环烷基烷基、芳基、芳烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂环基或杂环基烷基；[0155]每个r"都独立地为取代或未取代的烷基、烯基、环烷基、环烷基烷基、芳基、芳烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂环基或杂环基烷基。[0156]在式iii的第一组化合物和式iv的化合物的一些实施方案中，[0157]r1和r2独立地为-h、-(ch2)0-6coor'、–c(o)r"、或取代或未取代的烷基、环烷基、环烷基烷基、烯基、芳基、芳烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂环基或杂环基烷基；或r1和r2一起为亚甲基；[0158]r3和r8独立地为-h、-oh、-cl、-br、-f、-i、-cn、-nh2、-c(o)nh2、-cooh、或取代或未取代的烷基、烯基、烷氧基或芳烷基；[0159]r3'为-h，或r3和r3'一起为桥氧基；[0160]r4为-h、-or'、-oso2r"、-oc(o)r"、-oc(o)or"、-oc(o)nr'r"、-o-亚烷基-nr'r'、-o-亚烷基-oso2r"、-o-亚烷基-s(o)0-2r"、-o-亚烷基-nr'so2r"、-o-亚烷基-n(r')c(o)r'或取代或未取代的烷基；[0161]r5和r6独立地为-h、卤素、-oh或取代或未取代的烷氧基；或r4和r5一起为亚甲基二氧基，或r5和r6一起为亚甲基二氧基；[0162]r7为–h、-br、-cl或-f；[0163]每个r’都独立地为氢或、取代或未取代的烷基、烯基、环烷基、环烷基烷基、芳基、芳烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂环基或杂环基烷基；[0164]每个r"都独立地为取代或未取代的烷基、烯基、环烷基、环烷基烷基、芳基、芳烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂环基或杂环基烷基。[0165]在式iii的第一组化合物和式iv的化合物的其他实施方案中，[0166]r1和r2独立地为-h、-(ch2)0-2coor'、–c(o)(ch2)0-2r"或未取代的c1-6烷基；或r1和r2一起为亚甲基；[0167]r3和r3'各自为-h，或r3和r3'一起为桥氧基；[0168]r4为-h、-oh或取代或未取代的c1-6烷氧基、c7-14芳烷氧基、-oc(o)-(c1-6烷基)、-oc(o)-(芳基)、-oc(o)o-(芳基)、-oc(o)-nh-(芳基)、-o-(c2-6亚烷基)-nh-(c2-6烷基)、-o-(c2-6亚烷基)-nh-(四氢吡喃)、-o-(c2-6亚烷基)-nh-(硫代吗啉二氧化物)、-o-(c2-6亚烷基)-nh-(哌啶基)、-o-(c2-6亚烷基)-nh-(哌嗪基)、-o-(c2-6亚烷基)-nh-(吗啉基)、-o-(c2-6亚烷基)-nh-(芳烷基)、-o-(c2-6亚烷基)-nh-(环丙基)、-oso2-(c3-6环烷基)、-oso2-(芳基)、-o-(c2-6亚烷基)-oso2-(芳基)、-oso2-(芳烷基)、-o-(c2-6亚烷基)-oso2-(杂芳基)、-oso2-(c1-6烷基)、-oso2-(吡啶基)、-oso2-(噻唑基)、-o-(c2-6亚烷基)-nhso2-(芳基)、-o-(c2-6亚烷基)-nhso2-(杂芳基)、-o-(c2-6亚烷基)-nhc(o)-(芳基)、-o-(c2-6亚烷基)-nhc(o)-(杂芳基)、-o-(c0-4烷基)吡啶基、-o-(c0-4烷基)嘧啶基、-o-(c0-4烷基)吗啉基、-o-(c0-4烷基)硫代吗啉基、-o-(c0-4烷基)咪唑基、-o-(c0-4烷基)噻吩基、-o-(c0-4烷基)四氢吡喃基、-o-(c0-4烷基)四氢呋喃基、-o-(c0-4烷基)吡咯烷基、-o-(c0-4烷基)哌啶基或-o-(c0-4烷基)哌嗪基；[0169]r5和r6独立地为-h、-oh或未取代的c1-6烷氧基；或r4和r5一起为亚甲基二氧基，或r5和r6一起为亚甲基二氧基；且[0170]r8为-h、-oh、-cooh或未取代的烷基或–(ch2)1-6-苯基。[0171]在另一个实施方案中，本技术提供了式iii的第二组化合物、其立体异构体、其互变异构体、其溶剂化物及其药学上可接受的盐；[0172][0173]其中[0174]r1和r2独立地为-h、-(ch2)0-6coor'、–c(o)r"、或取代或未取代的烷基、环烷基、环烷基烷基、烯基、芳基、芳烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂环基或杂环基烷基；或r1和r2一起为亚甲基；[0175]r3和r8独立地为-h、-oh、-cl、-br、-f、-i、-cn、-nh2、-c(o)nh2、-cooh、或取代或未取代的烷基、烯基、烷氧基或芳烷基；[0176]r3'为-h，或r3和r3'一起为桥氧基；[0177]r4为-h、卤素、-or'、-oso2r"、-oc(o)r"、-oc(o)or"、-oc(o)nr'r"、-o-亚烷基-nr'r'、-o-亚烷基-oso2r"、-o-亚烷基-s(o)0-2r"、-o-亚烷基-nr'so2r"、-o-亚烷基-n(r')c(o)r'、或取代或未取代的烷基；[0178]r5和r6独立地为-h、卤素、-oh或取代或未取代的烷氧基；或r4和r5一起为亚甲基二氧基，或r5和r6一起为亚甲基二氧基；[0179]r7为-h、卤素、-oh或取代或未取代的烷基或烷氧基；[0180]每个r’都独立地为氢或取代或未取代的烷基、烯基、环烷基、环烷基烷基、芳基、芳烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂环基或杂环基烷基；[0181]每个r"都独立地为取代或未取代的烷基、烯基、环烷基、环烷基烷基、芳基、芳烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂环基或杂环基烷基；[0182]前提条件是，当r4为-h、-oh或c1-4烷氧基时，则r5不是-h、-oh或c1-4烷氧基；且当r1和r2都为-ch3或当r1和r2一起为亚甲基时，则r5不是oh或c1-2烷氧基，且r4和r5一起不是亚甲基二氧基；且当r4为oc(o)r"时，则r5不是oc(o)r"或甲氧基。和r6一起为亚甲基二氧基；且[0193]r8为-h、-oh、-cooh或未取代的烷基或–(ch2)1-6-苯基。[0194]在式iii的化合物和式iv的化合物的其他实施方案中，[0195]r1和r2独立地为–h、–ch3、-ch2cooh、-ch2c(o)och2ch3、烷基或r1和r2一起为亚甲基；[0196]r3和r3'各自为-h，或r3和r3'一起为桥氧基；[0197]r4为-h、-oh、och3、-och2ch3、-o(ch2)2oh、-och2cooh、-och2cooch2ch3、-o(ch2)2cooh、-o(ch2)2ch2br、-o-乙酰基、-o-苯甲酰基、-o-(ch2)2-nh-(ch2)2-n(ch3)2、-o-(ch2)2-nh-(ch2)2-och3、-o-(ch2)2-nh-(ch2)2-sch3、-o-(ch2)2-nh-吗啉基、-o-(ch2)2-nh-(ch2)3-n(ch3)2、-o-(ch2)2-nh-苯基、-o-(ch2)2-nh-(ch2)3-(硫代吗啉二氧化物)、-o-(ch2)2-nh-(ch2)3-吗啉基、-o-(ch2)2-nh-(ch2)3-四氢吡喃基，任选地被一个或2个选自c1-4烷基、-no2和nh2的取代基取代的-o-吡啶基，-o-(ch2)2-s-苯基、任选地被二(c1-4烷基)取代的-oso2-萘基、-oso2-cf3、任选地被乙酰胺基取代的-oso2-噻唑基(thiaolyl)、-o-(ch2)0-2so2-苯基，其中苯基任选地被一个或2个选自甲基、甲氧基、氟、氯、三氟甲基和硝基的取代基取代，-oso2-环戊基、-oso2-噻吩基、-oso2-苄基、-(ch2)2-环丙基、-(ch2)2-吗啉基、-(ch2)2-咪唑基、-(ch2)2-吡咯烷基或-(ch2)2-哌嗪基，其中哌嗪基任选地被甲基、异丙基或甲氧基乙基取代；[0198]r5和r6独立地为-h、-oh或-och3；且[0199]r8为-h、甲基、乙基、-cooh或苄基。[0200]虽然在14位具有任一立体化学构型的式iii的化合物都显示出降脂活性，但r-(+)立体化学构型可能是优选的。在其他实施方案中，可以优选s-(-)立体化学构型。因此，式iii的化合物在14位可以是外消旋的，或者可以是相对于任一立体化学构型具有1％至99％对映异构体过量(enantiomericexcess,e.e.)的对映异构体混合物。例如，式iii的化合物可以具有至少1％、至少5％、至少10％、至少20％、至少30％、至少40％、至少50％、至少60％、至少70％、至少80％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％的e.e.。鉴于本文提供的指导，式iii的化合物的任一旋光异构体的产生和/或分离在本领域技能范围内。[0201]同样，在1位具有r-(+)或s-(-)立体化学构型的某些式iv的化合物，与在该位置的相反构型相比，可能表现出改善的降脂活性。在某些实施方案中，式iv的化合物是1位立体异构体的等摩尔混合物。由于式iv的化合物还在9位具有立构中心，因此两种在1位具有r-(+)立体化学构型的非对映异构体是可能的，以及两种具有s-(-)立体化学构型的非对映异构体也是可能的。在一些实施方案中，式iv的化合物具有(1r,9s)构型，而在其他实施方案中，具有(1s,9s)构型。在其他实施方案中，式iv的化合物可以是相对于1位的任一立体化学构型具有1％至99％的非对映异构体过量(diastereomericexcess,d.e.)的非对映异构体混合物。例如，相对于1位，式iv的化合物可以具有至少1％、至少5％、至少10％、至少20％、至少30％、至少40％、至少50％、至少60％、至少70％、至少80％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％的d.e.。[0202]在另一方面，本技术提供了式v的化合物和式vi的化合物，以及其立体异构体、其互变异构体、其溶剂化物及其药学上可接受的盐。h、-(ch2)0-6coor'、-nr10r11、-c(o)nr10r11或取代或未取代的烷基；或r1和r2一起为1,2-二氧基亚乙基。在一些实施方案中，r1和r2一起为1,2-二氧基亚乙基。在一些实施方案中，r1和r2之一为-or'，另一个为-h。在其他实施方案中，r2为-or'并且r1为-h。在一些实施方案中，r'为取代或未取代的烷基，例如取代或未取代的c1-6烷基或c1-4烷基。在一些实施方案中，r2为甲氧基、乙氧基或丙氧基(例如正丙氧基或异丙氧基)。[0216]在式v和式vi的化合物的一些实施方案中，r10和r11独立地为h、任选地被羟基取代的c1-6烷基。[0217]在式v和式vi的化合物的一些实施方案中，r3和r3'各自为-h，或r3和r3'一起为桥氧基。[0218]在式v和式vi的化合物的一些实施方案中，r4为-h、-or'、-oso2r"、-oc(o)or"、-oc(o)nr'r"、-o-亚烷基-oso2r"或-o-亚烷基-nr'r'。在其他实施方案中，r4为-h、-or'、-oso2r"或-oc(o)r"。在一些实施方案中，r4为-h、-oh或取代或未取代的c1-6烷氧基、c7-14芳烷氧基、-oc(o)-(c1-6烷基)、-oc(o)-(芳基)、-oc(o)o-(芳基)、-oc(o)-nh-(芳基)、-o-(c2-6亚烷基)-nh-(c2-6烷基)、-o-(c2-6亚烷基)-nh-(四氢吡喃)、-o-(c2-6亚烷基)-nh-(硫代吗啉二氧化物)、-o-(c2-6亚烷基)-nh-(哌啶基)、-o-(c2-6亚烷基)-nh-(哌嗪基)、-o-(c2-6亚烷基)-nh-(吗啉基)、-o-(c2-6亚烷基)-nh-(芳烷基)、-o-(c2-6亚烷基)-nh-(环丙基)、-oso2-(c3-6环烷基)、-oso2-(芳基)、o-(c2-6亚烷基)-oso2-(芳基)、-oso2-(芳烷基)、-o-(c2-6亚烷基)-oso2-(杂芳基)、-oso2-(c1-6烷基)、-oso2-(吡啶基)、-oso2-(噻唑基)、-o-(c2-6亚烷基)-nhso2-(芳基)、-o-(c2-6亚烷基)-nhso2-(杂芳基)、-o-(c2-6亚烷基)-nhc(o)-(芳基)、-o-(c2-6亚烷基)-nhc(o)-(杂芳基)、-o-(c0-4烷基)吡啶基、-o-(c0-4烷基)嘧啶基、-o-(c0-4烷基)吗啉基、-o-(c0-4烷基)硫代吗啉基、-o-(c0-4烷基)咪唑基、-o-(c0-4烷基)噻吩基、-o-(c0-4烷基)四氢吡喃基、-o-(c0-4烷基)四氢呋喃基、-o-(c0-4烷基)吡咯烷基、-o-(c0-4烷基)哌啶基或-o-(c0-4烷基)哌嗪基。在一些实施方案中，r4为-h、-oh或取代或未取代的c1-6烷氧基、-oc(o)-(c1-6烷基)-生物素、-oso2-(芳基)、-o-(c2-6亚烷基)-oso2-(芳基)或-oso2-(芳烷基)。[0219]在式v和式vi的化合物的一些实施方案中，式v的14位或式vi的1位是r-(+)立体化学构型。在其他实施方案中，式v的14位或式vi的1位是s-(-)立体化学构型。因此，式v的化合物在14位可以是外消旋的，或者可以是相对于任一立体化学构型具有1％至99％对映异构体过量(e.e.)的对映异构体混合物。例如，式v的化合物可以具有至少1％、至少5％、至少10％、至少20％、至少30％、至少40％、至少50％、至少60％、至少70％、至少80％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％e.e.。鉴于本文提供的指导，式v的化合物的任一旋光异构体的产生和/或分离在本领域技能范围内。[0220]同样，在1位具有r-(+)或s-(-)立体化学构型的某些式vi的化合物，与在该位置的相反构型相比，可以表现出改善的降脂活性。在某些实施方案中，式vi的化合物是1位立体异构体的等摩尔混合物。由于式vi的化合物还在9位具有立构中心，因此两种在1位具有r-(+)立体化学构型的非对映异构体是可能的，以及两种具有s-(-)立体化学构型的非对映异构体也是可能的。在一些实施方案中，式vi的化合物具有(1r,9s)构型，而在其他实施方案中，具有(1s,9s)构型。在其他实施方案中，式vi的化合物可以是相对于1位的任一立体化学构型具有1％至99％非对映异构体过量(d.e.)的非对映异构体混合物。例如，相对于1位，式vi的化合物可以具有至少1％、至少5％、至少10％、至少20％、至少30％、至少40％、至少50％、至少60％、至少70％、至少80％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％的d.e.。[0221]在式v和式vi的化合物的一些实施方案中，r5为oh或未取代的烷氧基，并且r6是h。在其他实施方案中，r6为h，并且r7为h。[0222]在式v和式vi的化合物的一些实施方案中，r8为-h、oh、cooh或未取代的烷基或(ch2)1-6-苯基。在一些实施方案中，r8为-h或未取代的c1-4烷基，例如甲基或乙基。[0223]在式v和式vi的化合物的一些实施方案中，[0224]r1和r2独立地为-h、-(ch2)0-6coor'、-nr10r11、-c(o)nr10r11或取代或未取代的烷基；r1和r2一起为1,2-二氧基亚乙基；[0225]r3和r3'各自为-h，或r3和r3'一起为桥氧基；[0226]r4为-h、-oh或取代或未取代的c1-6烷氧基、c7-14芳烷氧基、-oc(o)-(c1-6烷基)、-oc(o)-(芳基)、-oc(o)o-(芳基)、-oc(o)-nh-(芳基)、-o-(c2-6亚烷基)-nh-(c2-6烷基)、-o-(c2-6亚烷基)-nh-(四氢吡喃)、-o-(c2-6亚烷基)-nh-(硫代吗啉二氧化物)、-o-(c2-6亚烷基)-nh-(哌啶基)、-o-(c2-6亚烷基)-nh-(哌嗪基)、-o-(c2-6亚烷基)-nh-(吗啉基)、-o-(c2-6亚烷基)-nh-(芳烷基)、-o-(c2-6亚烷基)-nh-(环丙基)、-oso2-(c3-6环烷基)、-oso2-(芳基)、-o-(c2-6亚烷基)-oso2-(芳基)、-oso2-(芳烷基)、-o-(c2-6亚烷基)-oso2-(杂芳基)、-oso2-(c1-6烷基)、-oso2-(吡啶基)、-oso2-(噻唑基)、-o-(c2-6亚烷基)-nhso2-(芳基)、-o-(c2-6亚烷基)-nhso2-(杂芳基)、-o-(c2-6亚烷基)-nhc(o)-(芳基)、-o-(c2-6亚烷基)-nhc(o)-(杂芳基)、-o-(c0-4烷基)吡啶基、-o-(c0-4烷基)嘧啶基、-o-(c0-4烷基)吗啉基、-o-(c0-4烷基)硫代吗啉基、-o-(c0-4烷基)咪唑基、-o-(c0-4烷基)噻吩基、-o-(c0-4烷基)四氢吡喃基、-o-(c0-4烷基)四氢呋喃基、-o-(c0-4烷基)吡咯烷基、-o-(c0-4烷基)哌啶基或-o-(c0-4烷基)哌嗪基；[0227]r5和r6独立地为-h、-oh或未取代的c1-6烷氧基；或r4和r5一起为亚甲基二氧基，或r5和r6一起为亚甲基二氧基；且[0228]r8为-h、-oh、-cooh或未取代的烷基或–(ch2)1-6-苯基。[0229]在式v和式vi的化合物的一些实施方案中，[0230]r1和r2独立地为–h、–ch3、–ch2oh、-oh、–och3、–och2ch3、-och2ch2oh、-cooh、-c(o)n(ch3)2、-c(o)nh(ch2ch2oh)、-c(o)och3、-nhch3、-n(ch3)2、-nc(o)och2ch3、苄氧基，或r1和r2一起为1,2-二氧基亚乙基；[0231]r3和r3'各自为-h，或r3和r3'一起为桥氧基；[0232]r4为-h、-oh、och3、-och2ch3、-o(ch2)2oh、-och2cooh、-och2cooch2ch3、-o(ch2)2cooh、-o(ch2)2ch2br、-o-乙酰基、-o-苯甲酰基、-o-(ch2)2-nh-(ch2)2-n(ch3)2、-o-(ch2)2-nh-(ch2)2-och3、-o-(ch2)2-nh-(ch2)2-sch3、-o-(ch2)2-nh-吗啉基、-o-(ch2)2-nh-(ch2)3-n(ch3)2、-o-(ch2)2-nh-benzyl、-o-(ch2)2-nh-(ch2)3-(硫代吗啉二氧化物)、-o-(ch2)2-nh-(ch2)3-吗啉基、-o-(ch2)2-nh-(ch2)3-四氢吡喃基，任选地被一个或2个选自c1-4烷基、-no2和nh2的取代基取代的-o-吡啶基，-o-(ch2)2-s-苯基、任选地被二(c1-4烷基)取代的-oso2-萘基、-oso2-cf3、任选地被乙酰胺基取代的-oso2-噻唑基、-o-(ch2)0-2so2-苯基，其中苯基任选地被一个或2个选自甲基、甲氧基、氟、氯、三氟甲基和硝基的取代基取代，-oso2-环戊基、-oso2-噻吩基、-oso2-苄基、-(ch2)2-环丙基、-(ch2)2-吗啉基、-(ch2)2-咪唑基、-(ch2)2-吡咯烷基或-(ch2)2-哌嗪基，其中哌嗪基任选地被甲基、异丙基或甲氧基乙基取代；[0233]r5和r6独立地为-h、-oh或-och3；且[0234]r8为-h、甲基、乙基、-cooh或苄基。[0235]在式v和式vi化合物的一些实施方案中，r4为-o-(ch2)0-2-so2-苯基，其中苯基任选地被一个或两个选自甲基、甲氧基、氟、氯、三氟甲基和硝基的取代基取代。[0236]在式v和式vi的化合物、其立体异构体、其互变异构体、其溶剂化物及其药学上可接受的盐的一些实施方案中；[0237]r1选自-(ch2)0-6coor'、–c(o)r"、-or'、-nr10r11、-c(o)nr10r11或取代或未取代的烷基；[0238]r2选自–h、-(ch2)0-6coor'、–c(o)r"、-o(ch2)1-4-co2r'、-nr10r11、-c(o)nr10r11或取代或未取代的烷基；或r1和r2一起为1,2-二氧基亚乙基；[0239]r8为h或未取代的c1-4烷基；[0240]r3和r3'都为-h；[0241]r4为-oh、-oso2r"、-oc(o)-(c1-6烷基)-生物素或-o-亚烷基-s(o)0-2r"；[0242]r5为-h、卤素、-oh或取代或未取代的烷氧基；或r4和r5一起为亚甲基二氧基，或r5和r6一起为亚甲基二氧基；[0243]r6和r7独立地选自-h或卤素；[0244]r10和r11独立地为h、-c(o)or"或取代或未取代的烷基；[0245]每个r’都独立地为氢或取代或未取代的烷基、烯基、环烷基、环烷基烷基、芳基、芳烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂环基或杂环基烷基；且[0246]每个r"都独立地为取代或未取代的烷基、烯基、环烷基、环烷基烷基、芳基、芳烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂环基或杂环基烷基。[0247]在本文公开的任何化合物的一些实施方案中，r”是取代或未取代的芳基。在其他实施方案中，r”是任选地被一个或两个卤素，例如一个或两个氟和/或氯取代的苯基。在一些实施方案中，r”是任选地被氟取代的苯基。[0248]在本文公开的任何化合物的一些实施方案中，r4为-oso2r"或-o-亚烷基-s(o)0-2r"。在一些实施方案中，r4为-oso2-苯基，其中苯基任选地被氟取代。[0249]式i、式ii、式iii、式iv、式v和式vi的某些化合物可以分离自植物。式i、式ii、式iii、式iv、式v和式vi的化合物也可以使用本文所述的合成方案制备。许多这样的化合物可以从天然产物如小檗碱开始制备。例如，方案1显示可以优选在干燥烘箱中在减压下加热(例如，150-250℃)小檗碱，以选择性去除19位(小檗碱编号)甲基并提供小檗红碱(berberrubine)。[0250]方案1[0251][0252]可以将所得羟基烷基化以提供产物a。烷基化可以使用多种烷化剂r'x进行，以提供各种or'，其中r'不是h，而是例如烷基、烯基、芳烷基、环烷基、环烷基烷基、杂芳基烷基和杂环基烷基。x可以是卤化物例如cl、br或i，或x可以是其他离去基团，例如甲磺酸盐、三氟甲磺酸盐(trifluoromethanesulfunate)、对甲苯磺酸盐等。可以在诸如dmf、二氯甲烷、氯仿或丙酮等合适的溶剂中，通过在合适的温度(例如环境温度或加热)下搅拌或回流进行烷基化，直到形成所需的产物。在烷基化中任选地使用碱，例如无机碱(碱金属碳酸盐)或有机碱(吡啶、三乙胺)。[0253]在第三步，可以使用任何合适的还原剂将化合物a还原以得到四氢小檗碱化合物b。通常，可以使用硼氢化物作为还原剂，例如硼氢化钠、氰基硼氢化钠或三乙酰氧基硼氢化钠。可以在任何合适的溶剂或溶剂混合物(诸如甲醇、乙醇等醇、其水溶液和acoh溶液)中，在合适的温度下进行该反应。选择合适的还原温度和反应时间在本领域技能范围内。或者，可以在烷基化反应之前进行还原(方案未显示)，只要避免环氮的烷基化即可。[0254]方案2[0255][0256]如方案2所示，可以用末端二卤代烷x-(ch2)n-x,(n＝1-10)以类似的方式烷基化小檗红碱，以允许随后用诸如hnr'r"等胺进行官能化。可以在诸如dmf、二氯甲烷、氯仿或丙酮等合适的溶剂中，通过在合适的温度下搅拌或回流进行烷基化反应，以得到化合物c，直到反应完成。任选地在存在无机碱(碱金属碳酸盐)或有机碱(吡啶、三乙胺)的情况下，在合适的溶剂(例如dmf、二氯甲烷或氯仿)中，在合适的温度下，进行化合物c与hnr'r"(其中r'和r”如本文所定义)的胺化，以得到化合物d。然后如上文所述还原化合物d，以得到化合物e。[0257]方案3：[0258][0259]类似地，如方案3所示，可以使合适溶剂中的化合物c与各种硫醇(hsr")反应，以得到化合物f。如上文针对c的胺化所述，任选地在存在无机碱或有机碱的情况下进行反应。本文所述的还原提供了四氢小檗碱衍生物化合物g。可以通过将化合物g暴露于温和氧化剂例如过氧苯甲酸(例如间氯过氧苯甲酸)来制备砜h。[0260]方案4[0261][0262]方案4显示了制备小檗红碱的酰化衍生物的方法。可以如本文所述还原化合物1，以得到四氢小檗碱化合物j。在第二步中，可以用酰卤(例如r”c(o)x，其中r”如本文所定义且x为卤化物例如cl或br)、卤代甲酸酯(例如r”oc(o)x)或异氰酸酯(例如nc(o)r”)酰化化合物j，以分别提供相应的酰胺、尿烷或碳酸酯。酰化通常在合适的溶剂中在存在无机碱(碱金属碳酸盐)或有机碱(吡啶、三乙胺)的情况下进行。在反应完成后，将反应混合物冷却，并且任选地对产物进行进一步的分离和纯化步骤，以得到目标化合物k。同样，可以通过在存在无机碱或有机碱的情况下，在合适的溶剂中，使化合物j与磺酰卤r"so2x反应，来插入r4磺酰基。[0263]方案5[0264][0265]在r4取代基的另一个实例中，如方案5所示，可以用卤代酯(例如x(ch2)ncoor，其中x是卤素或其他离去基团，r是取代或未取代的烷基或芳烷基)，在诸如丙酮、甲醇、乙醇或其混合物等合适的溶剂中，烷基化小檗红碱，以得到化合物m。可以如本文所述还原后一种化合物，以得到四氢小檗碱衍生物n。然后可以通过本领域已知的标准方法，例如碱或酸水解，或者在合适的芳烷基酯的情况下，通过用合适的催化剂(例如pd/c、pt/c等)进行氢解，除去酯基团。可以通过标准技术，例如在存在酰胺偶联剂如碳二亚胺(例如dcc、edc)的情况下，在存在添加剂(hobt、hoat、dmap)、bop的情况下下，使hnr'r"反应，或通过形成相应的酰卤或混合酸酐，由所得的酸形成化合物o酰胺。[0266]方案6[0267][0268]可以通过与方案1-4中的那些程序类似的程序，制备在r2处具有各种取代基的式i和式iii的化合物。因此，例如，如方案6所示，可以用r2x烷基化紫堇根碱，其中r2如本文所定义并且x在上述条件下可以为卤素、磺酰基或其他离去基团。类似地，可以在存在碱或羧酸的情况下，在存在例如edc.hcl/dmap等偶联剂的情况下，用酰卤酰化紫堇根碱中的游离羟基，以得到靶标化合物l。[0269]方案7[0270][0271]可以将r8取代基安装在式i和式iii的化合物的13位，如方案7所示。例如，可以在存在合适的碱例如碱金属氢氧化物的情况下，使氯化小檗碱的水溶液与丙酮反应，以得到化合物q。随后可以使被保护的化合物q与r7x反应，其中r7如本文所述并且x是卤化物、磺酰基或其他离去基团。在合适的溶剂中，在合适的温度下，任选地在存在碱金属卤化物例如碘化钾的情况下，进行该反应，以得到化合物r。如本文所述，或使用合适的催化剂例如pt/c用氢来氢化化合物r，得到四氢小檗碱化合物s。[0272]方案8[0273][0274]可以通过方案8所示的全合成来制备式i和式iii的化合物。可以使用用于形成酰胺键的标准技术，例如使用偶联剂(例如，edc/hobt、羰基二咪唑等)，通过形成苯乙酸p的酰卤或混合酸酐，使苯乙酸p与苯乙胺q偶联。可以在诸如苯、甲苯或二甲苯等合适的溶剂中，并在存在脱水剂如pocl3的情况下，使所得n-酰基β-芳基乙基胺化合物r进行bischler-napieralski反应，以得到相应的二氢异喹啉化合物s。可以通过任何合适的方法，例如用硼氢化钠、氰基硼氢化钠等还原后一种化合物，以得到化合物t。可以通过使化合物t与甲醛在合适的溶剂例如乙酸中反应实现化合物t的闭环，以得到化合物u，其是式i和式iii的化合物。[0275]方案8.1[0276][0277]类似地，也可以根据方案8(如方案8.1所示)，使用适当取代的苯乙胺(q')和苯乙酸衍生物(p')制备式v的化合物。[0278]方案9[0279][0280]或者，方案9显示了式i和式iii的化合物的另一种通用合成路径。可以将苯乙酸衍生物v连续暴露于苯基硼酸，然后暴露于多聚甲醛。通常加热反应的两个阶段，并且与多聚甲醛的反应可以在压力下在例如不锈钢高压容器中进行。用于该反应的合适溶剂包括芳族溶剂，例如甲苯。用水水解所得硼酸盐，以得到化合物w。后一种化合物可以用多种亲电试剂r'x，如本文所述(例如方案1中的a)烷基化。随后，可以与所示的苯乙胺化合物形成酰胺，以得到化合物x。在合适的溶剂如甲苯中使用pocl3进行闭环，然后如本文所述进行还原，以得到化合物y，即式i或式iii的示例性化合物。也可以根据方案9，使用合适的起始材料(例如方案8.1中的苯乙胺q'和/或苯乙酸衍生物p')制备式v化合物。[0281]方案10[0282][0283]可以根据方案10制备式ii和式iv的化合物。因此，可以使用本领域的标准技术制备已经在适当位置具有r1和r2的起始苯乙胺。可以通过用适当的醛(市售或根据标准氧化方案由相应的醇制备)进行还原胺化，将r8安装在苯乙胺上。也可以使用标准技术容易地制备起始羧基四氢异苯并呋喃。可以使用酰胺偶联剂或其他标准技术，偶联苯乙胺和羧基四氢异苯并呋喃。因此，例如，可以在存在edc/hobt或羰基二咪唑以及其他偶联试剂的情况下进行偶联。可以通过类似的路径，使用合适的原料，例如方案8.1所示的苯乙胺q'，制备式vi的化合物。[0284]式ii和式iv的化合物的另一通用合成路径如方案11所示。化合物a可以通过相应苯乙胺的bischler-napieralsky环化来制备，并且随后可以在存在强碱例如lda的情况下与内酯反应，以提供前体b。可以通过还原内酯羰基或与例如格氏试剂反应以安装r3和r3'，将后一种化合物转化为式ii和式iv的各种化合物。同样，可以通过类似的路径，使用合适的起始材料，例如与方案8.1中相同的苯乙胺q'，制备式vi的化合物。[0285]方案11[0286][0287]制备式ii和式iv的化合物的其他方法可以改编自方案12中概述的并在以下参考文献中描述的文献程序：jeromel.moniotandmauriceshamma,"conversionofberberineintophthalideisoquinolines"j.org.chem.,1979,44(24),4337-4342；jeromel.moniot,davidm.hindenlang,andmauriceshamma,"chemistryof8,13-dioxoberbines"j.org.chem.,1979,44(24),4343-4346；tatsuyashono,hiroshihamaguchi,manjisasaki,shumeifujita,andkimihikonagami,"novelzinc-promotedalkylationofiminiumsalts.newsynthesisofbenzylisoquinoline,phthalidylisoquinoline,andprotoberberinealkaloidsandrelatedcompounds"j.org.chem.,1983,48(10),1621-1628；rhprager,jmtippettandadward,"centralnervoussystemactivecompounds.viii.newsynthesesofphthalideisoquinolines"aust.j.chem.,1981,34(5),1085-1093；siclarke,bkasum,rhpragerandadward,"centralnervoussystemactivecompounds.xiii.theuseofaminomethylenephthalidesinthesynthesisofphthalideisoquinolinealkaloids"aust.j.chem.,1983,36(12),2493-2498；nuranis.narasimhan,ravindrar.joshiand(mrs)radhikas.kusurkar,"anefficientsynthesisofphthalideisoquinolinealkaloids"j.chem.soc.,chem.comm.,1985,3,177-178；yoshikazukondo,jiroimaiandshigeonozoe,reactionofprotoberberine-typealkaloids.part13.biogeneticconversionofprotoberberinealkaloidsintophthalideisoquinolinealkaloids"j.chem.soc.,perkin.trans.1,1980,919-926；tetsujikametani,toshiohonda,hitoshiinoue,andkeiichirofukumoto,"aonestepsynthesisofthephthalideisoquinolinealkaloidcordrastine"heterocycl.1975,3(12),1091-1098；k.w.bentleyanda.w.murray,"ketolaudanosine"j.chem.soc.,1963,2487-2491。[0288]方案12[0289][0290]例如，方案13显示了如何如aust.j.chem.1983,36(12),2493报道的那样制备化合物b。由3h-异苯并呋喃-1-酮(a)分两步制备的化合物d，可以在存在碱存的情况下与各种烷化剂和酰化剂反应，以得到中间体b。[0291]方案13[0292][0293]在另一个方面，本发明技术提供了包含本文公开的任何化合物(例如式i、式ii、式iii、式iv、式v或式vi的化合物)和药学上可接受的载体或一种或多种赋形剂或填充剂的药物组合物和药剂。在一些实施方案中，提供了用于治疗选自高脂血症、高胆固醇血症、高甘油三酯血症和代谢综合征的疾病状况的药物组合物。此类组合物包括降脂有效量的本文所述的任何化合物，包括但不限于式iii、式iv、式v或式vi的化合物。在一个实施方案中，药物组合物以单位剂型包装。当施用于有需要的个体时，单位剂型有效降低血流和/或肝中的脂质水平(例如总胆固醇、ldl-胆固醇、甘油三酯和未酯化长链脂肪酸中的至少一种)。[0294]可以通过将本技术的一种或多种化合物、其药学上可接受的盐、其立体异构体、其互变异构体或其溶剂化物与药学上可接受的载体、赋形剂、黏合剂、稀释剂等混合，制备药物组合物，以预防和治疗与血浆和/或肝脂质水平升高的影响有关的病症。本文所述的化合物和组合物可以用于制备预防或治疗各种血浆和/或肝脂质水平升高相关病症的制剂和药物，例如高脂血症、高胆固醇血症和代谢综合征。这样的组合物可以采用例如颗粒剂、粉剂、片剂、胶囊剂、糖浆剂、栓剂、注射剂、乳剂、酏剂、悬浮剂或溶液剂的形式。本发明的组合物可以配制用于各种给药途径，例如，通过口服、肠胃外、局部、直肠、鼻、阴道给药，或通过植入型药盒。肠胃外或全身给药包括但不限于皮下、静脉内、腹膜内和肌肉内注射。以下剂型以举例的方式给出，且不应解释为限制本发明的技术。[0295]对于口服、口腔和舌下给药，粉剂、悬浮剂、颗粒剂、片剂、丸剂、胶囊剂、凝胶胶囊(gelcap)和囊片(caplet)，作为固体剂型，是可以接受的。可以例如通过将本发明技术的一种或多种化合物或其药学上可接受的盐或其互变异构体与至少一种添加剂例如淀粉或其他添加剂混合，来制备这些剂型。合适的添加剂是蔗糖、乳糖、纤维素糖、甘露醇、麦芽糖醇、葡聚糖、淀粉、琼脂、藻酸盐、几丁质、壳聚糖、果胶、黄芪胶、阿拉伯树胶、明胶、胶原蛋白、酪蛋白、白蛋白、合成或半合成聚合物或甘油酯。口服剂型可以任选地含有其他有助于给药的成分，例如非活性稀释剂，或润滑剂例如硬脂酸镁，或防腐剂例如对羟基苯甲酸酯或山梨酸，或抗氧化剂例如抗坏血酸、生育酚或半胱氨酸，崩解剂、黏合剂、增稠剂、缓冲剂、甜味剂、调味剂或芳香剂。可以用本领域已知的合适包衣材料进一步处理片剂和丸剂。[0296]用于口服给药的液体剂型可以采用药学上可接受的乳剂、糖浆剂、酏剂、悬浮剂和溶液剂的形式，它们可以含有非活性稀释剂，例如水。可以使用无菌液体，例如但不限于油、水、醇及其组合，制备液体悬浮剂或溶液剂形式的药物制剂和药物。可以添加药学上合适的表面活性剂、助悬剂、乳化剂用于口服或胃肠外给药。[0297]如上所述，悬浮剂可以包括油。此类油包括但不限于花生油、芝麻油、棉籽油、玉米油和橄榄油。悬浮剂还可以含有脂肪酸酯，例如油酸乙酯、肉豆蔻酸异丙酯、脂肪酸甘油酯和乙酰化脂肪酸甘油酯。悬浮制剂可以包括醇，例如但不限于乙醇、异丙醇、十六烷醇、甘油和丙二醇。醚，例如但不限于聚乙二醇、诸如矿物油和凡士林等石油烃以及水，也可用于悬浮制剂中。[0298]可注射剂型通常包括可以使用合适的分散剂或润湿剂和助悬剂制备的水性悬浮剂或油悬浮剂。可注射形式可以采用用溶剂或稀释剂制备的溶液相或悬浮液形式。可接受的溶剂或溶媒包括无菌水、林格溶液或等渗盐水溶液。或者，可以使用无菌油作为溶剂或悬浮剂。通常，油或脂肪酸是非挥发性的，包括天然或合成油、脂肪酸、甘油单酯、甘油二酯或甘油三酯。[0299]对于注射，药物制剂和/或药剂可以是适合用上述适当溶液重构的粉剂。这些制剂和/或药物的实例包括但不限于冷冻干燥、旋转干燥或喷雾干燥的粉剂、无定形粉剂、颗粒剂、沉淀物或微粒剂。对于注射，制剂可以任选地含有稳定剂、ph调节剂、表面活性剂、生物利用度调节剂及其组合。[0300]本技术的化合物可以通过鼻或口吸入而施用于肺。用于吸入的合适药物制剂包括溶液剂、喷雾剂、干粉剂或气雾剂，它们含有任何合适的溶剂和任选的其他化合物，例如但不限于稳定剂、抗微生物剂、抗氧化剂、ph调节剂、表面活性剂、生物利用度调节剂及其组合。载体和稳定剂随具体化合物的要求而变化，但通常包括非离子表面活性剂(tweens、pluronics或聚乙二醇)、像血清白蛋白等无害蛋白质、山梨聚糖酯、油酸、卵磷脂、诸如甘氨酸等氨基酸、缓冲液、盐、糖或糖醇。水性和非水性(例如，在碳氟化合物推进剂中)气溶胶通常用于通过吸入递送本发明的化合物。[0301]用于局部(包括口腔和舌下)或经皮施用本技术的化合物的剂型包括粉剂、喷雾剂、软膏剂、糊剂、乳膏剂、洗剂、凝胶剂、溶液剂和贴剂。可以在无菌条件下将活性成分与药学上可接受的载体或赋形剂以及任何可能需要的防腐剂或缓冲剂混合。例如，可以用赋形剂，例如乳糖、滑石、硅酸、氢氧化铝、硅酸钙和聚酰胺粉末或这些物质的混合物，来制备粉末剂和喷雾剂。软膏剂、糊剂、乳膏剂和凝胶剂还可以含有赋形剂，例如动物脂肪和植物脂肪、油、蜡、石蜡、淀粉、黄芪胶、纤维素衍生物、聚乙二醇、硅酮、膨润土、硅酸、滑石和氧化锌或其混合物。也可以用吸收促进剂来增加本发明化合物穿过皮肤的通量。可以通过提供速率控制膜(例如作为皮肤贴剂的一部分)或将化合物分散在聚合物基质或凝胶中来控制这种通量的速率。[0302]除了那些上述代表性剂型之外，药学上可接受的赋形剂和载体通常是本领域技术人员已知的，因此包括在本发明的技术中。此类赋形剂和载体描述于例如“remingtonspharmaceuticalsciences(雷明顿药物科学)”mackpub.co.,newjersey(1991)中，其通过引用并入本文。[0303]可以将本技术的制剂设计成下文所述的短效的、快速释放的、长效的和持续释放的。因此，也可以配制用于控释或缓释的药物制剂。[0304]本发明的组合物还可以包含例如胶束或脂质体或一些其他封装形式，或者可以以缓释形式施用以提供延长的储存和/或递送效果。因此，药物制剂和药物可以压缩成丸剂或圆柱体，并作为贮库型注射剂或作为植入物如支架植入肌肉内或皮下。这种植入物可以使用已知的惰性材料，例如硅酮和生物可降解的聚合物。[0305]可以根据个体的疾病状况、年龄、体重、一般健康状况、性别和饮食，药物的剂量间隔、给药途径、排泄率，及其组合，调整具体剂量。任何含有有效量(包括治疗有效量)的上述剂型都在常规实验的范围内，因此也在本发明技术的范围内。[0306]通过简单地将本技术的化合物以递增的量施用于患者，直到升高的血浆或肝胆固醇或甘油三酯或疾病状态的进展减少或停止，本领域技术人员能够来容易地确定有效量。可以使用所述体内成像，或者通过从患者获取组织样品并观察其中的感兴趣靶标，来评估疾病状态的进展。可以以每天约0.1至约1,000mg或甚至高达10,000mg/天的剂量水平，向患者施用本技术的化合物。对于体重为约70kg的正常成人，可使用的剂量范围为每天每公斤体重约0.01至约100或约200mg，或约0.05mg/kg/天至约50或约100mg/kg/天，或甚至约0.1或1mg/kg/天至约50或约100mg/kg/天。然而，如果本领域普通技术人员认为合适，所用的具体剂量可以变化或可以调整。例如，剂量可以取决于许多因素，包括患者的需要、所治疗疾病状况的严重程度和所用化合物的药理活性。确定具体患者的最佳剂量对于本领域技术人员来说是众所周知的。[0307]可以容易地使用各种测定和模型系统来确定本技术的抗高脂血症疗法的治疗效果。例如，常规进行血液测试以测量总胆固醇以及甘油三酯、ldl和hdl水平。总胆固醇水平大于200mg/dl的个体被认为是心血管疾病临界高风险。总胆固醇水平大于239mg/dl的个体被认为处于高风险中。ldl水平低于100mg/dl被认为是最佳的。ldl水平介于130-159mg/dl之间是临界高风险。ldl水平介于160-189mg/dl之间处于心血管疾病高风险，而ldl大于190mg/dl的那些个体被认为处于心血管疾病非常高的风险中。甘油三酯水平低于150mg/dl被认为是正常的。介于150–199mg/dl之间的水平为高到接近临界值，高于200mg/dl的水平被认为使个体处于心血管疾病高风险中。可以通过标准血脂谱测试测定脂质水平。本技术组合物的有效量会使升高的脂质水平降低至少10％、20％、30％、50％或更大的减少，高达75-90％或95％或更多。有效量还会使个体的脂质谱向每种脂质的最佳类别移动，即将ldl水平从190mg/dl降低到130-159mg/dl范围内，甚至进一步降低到100mg/dl以下。有效量还可以将ldl或甘油三酯水平降低约10至约70mg/dl、约20至约50mg/dl、约20至约30mg/dl或约10至约20mg/dl。[0308]多种高脂血症分类系统是本领域技术人员已知的。一种这样的分类系统是frederickson分类，其总结在下文的表1中。[0309]表1[0310][0311]idl：中密度脂蛋白；ldl：低密度脂蛋白；n：正常；[0312]tc：总胆固醇；tg：甘油三酯；vldl：极低密度脂蛋白[0313]*美国高脂血症患者的近似百分比。[0314]也可以使用hs-crp(高敏c反应蛋白)血液测试对个体进行评估。hs-crp结果低于1.0mg/l的个体处于心血管疾病低风险中。hs-crp结果介于1.0-3.0mg/l之间的个体处于心血管疾病平均风险中。hs-crp结果大于3.0mg/l的个体处于心血管疾病高风险中。有效量的本技术组合物会使hs-crp结果降低到3.0mg/l以下。有效量的本技术组合物可以将hs-crp结果降低约0.5至约3.0mg/l，并进一步降低约0.5至约2.0mg/l。[0315]本技术组合物和方法的效果还可以通过心血管疾病、水肿、尿崩症、高血压、心肌缺血、充血性心力衰竭、心律失常和高脂蛋白血症的症状减少来证明，这些症状包括呼吸急促、胸痛、腿痛、疲倦、精神错乱、视力改变、尿血、流鼻血、心跳不规则、失去平衡或协调、虚弱或眩晕。[0316]对于本文所述的每种指示疾病状况，与安慰剂治疗的个体或其他合适的对照个体相比，测试个体会表现出，由该个体的高脂血症、胆固醇升高、甘油三酯升高和/或靶向心血管疾病或疾病状况引起或与之相关的一种或多种症状减少10％、20％、30％、50％或更多，高达75-90％或95％或更多。[0317]也可以将本技术的化合物与可用于治疗或预防高脂血症疾病的其他常规治疗剂一起施用于患者。一方面，提供了用于将有效量的本技术的一种或多种化合物施用于患者的方法，该患者患有以血浆或肝胆固醇或甘油三酯升高为特征的疾病，或被认为处于患有该疾病的风险中。此外，本技术涉及通过向有需要的患者施用有效量的一种或多种化合物来治疗高脂血症疾病。本技术的方法还可以包括顺序地或与本技术的一种或多种化合物组合，以潜在地或协同地有效治疗或预防高脂血症疾病的量施用常规治疗剂。与本技术的一种或多种化合物组合使用的示例性治疗剂包括但不限于抗炎药、治疗性抗体和降胆固醇药，例如胆固醇合成酶抑制剂。[0318]一方面，以适合治疗用途的量或剂量向患者施用本技术的化合物。通常，包含本技术化合物的单位剂量会根据必须考虑的患者因素而变化。这类因素包括例如年龄、方案、疾病状况、性别、疾病程度、禁忌证、伴随疗法等。基于这些因素的示例性单位剂量也可以由本领域技术人员来调整或改进。例如，用于患者的包含本技术化合物的单位剂量可以从1×10–4g/kg到1g/kg不等，优选从1×10–3g/kg到1.0g/kg不等。本技术化合物的剂量也可以从0.01mg/kg到100mg/kg不等，或优选从0.1mg/kg到10mg/kg不等。[0319]在组合制剂和协同治疗方法中有用的辅助治疗剂包括例如，抗高血脂剂；抗血脂异常剂；抗糖尿病剂，包括但不限于二甲双胍、罗格列酮、血浆hdl升高剂，包括但不限于烟酸、苯氧酸类；抗高胆固醇血症剂，包括但不限于胆固醇摄取抑制剂；胆固醇生物合成抑制剂，例如hmg-coa还原酶抑制剂(也称为他汀类，例如洛伐他汀、辛伐他汀、普伐他汀、氟伐他汀、瑞舒伐他汀、匹伐他汀和阿托伐他汀)；hmg-coa合酶抑制剂；鲨烯环氧酶抑制剂或鲨烯合成酶抑制剂(也称为鲨烯合酶抑制剂)；微粒体甘油三酯转移蛋白(mtp)抑制剂；酰基辅酶a胆固醇酰基转移酶(acat)抑制剂，包括但不限于亚油甲苄胺；普罗布考；烟酸及其盐；烟酰胺；胆固醇吸收抑制剂，包括但不限于β-谷甾醇或依泽替米贝；胆汁酸螯合剂阴离子交换树脂，包括但不限于消胆胺、考来替泊、考来维仑或交联葡聚糖的二烷基氨基烷基衍生物；ldl受体诱导剂；贝特类，包括但不限于氯贝特、苯扎贝特、非诺贝特和吉非贝齐；维生素b6(吡哆醇)及其药学上可接受的盐，例如盐酸盐；维生素b12(氰钴胺素)；维生素b3(烟酸和烟酰胺)；抗氧化维生素，包括但不限于维生素c和维生素e以及β胡萝卜素；β-阻断剂；血管紧张素ii受体(at1)拮抗剂；血管紧张素转换酶抑制剂、肾素抑制剂；血小板聚集抑制剂，包括但不限于纤维蛋白原受体拮抗剂，即糖蛋白iib/iiia纤维蛋白原受体拮抗剂；激素，包括但不限于雌激素；胰岛素；离子交换树脂；欧米伽-3油；苯氟雷司；二十碳五烯酸乙酯；和氨氯地平。辅助疗法还可能包括增加锻炼、手术和改变饮食(例如，改变为低胆固醇饮食)。一些草药也可以有效地用于治疗高脂血症的组合制剂和协同疗法中，例如姜黄素、古古脂(gugulipid)、大蒜、大豆、可溶性纤维、鱼油、绿茶、肉碱、铬、辅酶q10、葡萄籽提取物、泛素、红曲米和蜂王浆。[0320]小檗碱和相关化合物也可以作为第二治疗剂与本技术的紫堇属植物降脂剂一起使用。例如，可以使用硫酸小檗碱、盐酸小檗碱(berberinehydrochloride)、氯化小檗碱(berberinechloride)、氧化小檗碱、二氢小檗碱、8-氰基二氢小檗碱、四氢小檗碱n-氧化物、四氢小檗碱、6-原小檗碱、9-乙氧羰基小檗碱、9-n,n-二甲基氨基甲酰基小檗碱和12-溴小檗碱、叠氮小檗碱和小檗碱甜菜碱。有效提高ldlr表达水平的小檗碱化合物描述于us2006/0223838中，该专利通过引用整体并入本文。[0321]另一类可以作为第二治疗剂与本技术的紫堇属植物降脂剂一起使用的化合物是scap拮抗剂。这些化合物与srebp切割激活蛋白结合并阻止其与srebp的物理相互作用，导致ldlr启动子的激活和ldlr表达增加。合适的化合物描述于美国专利6,673,555(其通过引用整体并入)中。[0322]在一些实施方案中，将紫堇属植物降脂剂与一种或多种作为第二药剂的甾醇14-还原酶抑制剂组合。这类抑制剂会减少肝中胆固醇的合成，从而有助于降低总胆固醇和ldl胆固醇。一系列基于紫堇属植物生物碱的合适14-还原酶抑制剂描述于美国专利号6,255,317和美国专利号6,239,139中，这两个专利均通过引用整体并入。值得注意的是，作为14-还原酶抑制剂的紫堇属植物生物碱与本技术的紫堇属植物降脂剂的不同之处在于在13-14位具有双键。然而，在本技术的一些实施方案中，抑制胆固醇合成的额外作用可能是不期望的。在这种情况下，14-还原酶抑制剂，特别是那些在13-14位具有双键的紫堇属植物生物碱，被明确排除与本技术的紫堇属植物降脂剂一起使用。[0323]本技术的化合物可以以如通过任何对本领域普通技术人员而言常规的合适技术测量的例如约0.0001至10μm(或0.0001至7μm、0.0001至5μm、0.0001至1μm、0.001至5μm、0.01至5μm和/或0.1至5μm)的解离常数(例如平衡解离常数kd)与一种或多种感兴趣的靶标结合。本技术考虑通过对本领域普通技术人员而言常规的惯常技术测量解离常数(例如，kd和ki)或进行竞争实验、饱和实验和动力学实验。此外，本技术的化合物可以以例如约0.01nm至》10,000nm(或0.001至7,000nm、0.001至5,000nm、0.001至1,000nm、0.01至5,000nm、0.01至2,000nm和/或0.1至5,000nm)的解离抑制常数，与参考化合物竞争结合感兴趣的靶标和/或与感兴趣的靶标结合。[0324]本技术的化合物或探针可以以如通过结合与感兴趣的靶标相关的合成肽或组织所测量的例如约0.0001至10μm的解离常数(例如，平衡解离常数，kd)与一种或多种感兴趣的靶标结合。本技术考虑通过对本领域普通技术人员而言常规的惯常技术测量解离常数(例如，kd和ki)或进行竞争实验、饱和实验和动力学实验。此外，本技术的化合物或探针可以以例如约0.01nm至》10,000nm的解离抑制常数(例如，ki)与参考化合物竞争与感兴趣的靶标结合。[0325]在一方面，结合、相互作用或缔合可以指，化合物(或其类似物、盐、药物组合物、衍生物、代谢物、前药或外消旋、互变异构体混合物)与感兴趣的靶标之间，以至少10-6m，优选至少约10-7m，更优选10-8m至10-9m、10-10m、10-11m或10-12m的结合亲和力接触。在一方面，结合亲和力包括解离常数或kd小于但不限于以下的那些：5×10–6m、10–6m、5×10–7m、10–7m、5×10–8m、10–8m、5×10–9m、10–9m、5×10–10m、10–10m、5×10–11m、10–11m、5×10–12m、10–12m、5×10–13m、10–13m、5×10–14m、10–14m、5×10–15m和10–15m。[0326]也可以例如通过有机部分或缀合物的共价连接来修饰本技术的化合物，以改善药代动力学特性、毒性或生物利用度(例如，增加体内半衰期)。缀合物可以是直链或支链的亲水聚合基团、脂肪酸基团或脂肪酸酯基团。聚合基团可以包含可由本领域普通技术人员调节以改善例如药代动力学特性、毒性或生物利用度的分子量。示例性缀合物可以包括聚烷二醇(例如，聚乙二醇(peg)、聚丙二醇(ppg))、碳水化合物聚合物、氨基酸聚合物或聚乙烯吡咯烷酮和脂肪酸或脂肪酸酯基团，它们各自可以独立地包含约八到七十个碳原子。与本技术的化合物一起使用的缀合物还可以用作以下的连接体：例如任何合适取代基或基团、放射性标记(标志物或标签)、卤素、蛋白质、酶、多肽、其他治疗剂(例如，药物(pharmaceutical)或药品(drug))、核苷、染料、寡核苷酸、脂质、磷脂和/或脂质体。一方面，缀合物可以包括聚乙烯亚胺(pei)、聚甘氨酸、pei和聚甘氨酸的杂化物、聚乙二醇(peg)或甲氧基聚乙二醇(mpeg)。缀合物还可以将本技术的化合物连接于例如标记(荧光或发光)或标志物(放射性核素、放射性同位素和/或同位素)以构成本技术的探针。一方面，与本技术的化合物一起使用的缀合物可以改善体内半衰期。与本技术的化合物及其应用和相关技术一起使用的其他示例性缀合物包括笼统地描述于美国专利号5,672,662中的那些缀合物，该专利通过引用并入本文。[0327]在另一个方面，本技术提供了识别感兴趣的靶标的方法，包括使感兴趣的靶标与可检测量或成像有效量的标记的本技术的化合物接触。可检测量或成像有效量是标记的本技术的化合物被所选检测方法检测到所需的量。例如，可检测量可以是足以检测标记化合物与感兴趣的靶标的结合的施用量，所述感兴趣的靶标包括但不限于一种或多种细胞蛋白。合适的标记是本领域技术人员已知的，并且可以包括例如放射性同位素、放射性核素、同位素、荧光基团、生物素(与链霉抗生物素蛋白络合)和化学发光基团。在标记化合物与感兴趣的靶标结合后，可以分离、纯化并进一步表征靶标，例如通过确定氨基酸序列表征。[0328]术语“缔合”和/或“结合”可以指例如本技术的化合物与感兴趣的靶标之间的化学或物理相互作用。缔合或相互作用的例子包括共价键、离子键、亲水-亲水相互作用、疏水-疏水相互作用和络合物。缔合也可以泛指“结合”或“亲和力”，因为每个都可以用来描述各种化学或物理相互作用。测量结合或亲和力对于本领域技术人员来说也是常规的。例如，本技术的化合物可以与感兴趣的靶标或其前体、部分、片段和肽和/或其沉积物结合或相互作用。[0329]在此提供了实施例以说明本技术的优点，并进一步帮助本领域普通技术人员制备或使用本技术的化合物或其盐、药物组合物、衍生物、代谢物、前药、外消旋混合物或互变异构体形式。本文呈现的实施例还是为了更全面地说明本技术的优选方面。实施例决不应解释为限制本技术的由所附权利要求限定的范围。实施例可以包括或并入上述本技术的任何变化、方面或方面。上述变化、方面或方面还可以各自进一步包括或并入本技术的任何或所有其他变化、方面或方面的变化。实施例[0330]实施例1.13s,14r–紫堇碱的分离和纯化[0331]所有化学品均购自sigma-aldrichchemicalcompany(milwaukee,wi)。溶剂购自vwrinternational(brisbane,ca(加利福尼亚州布里斯班))，均为hplc纯度标准或更高。质子和13cnmr光谱在带有tcplinkpcupgrade的300mhzbrukerac-300plusnmr光谱仪(inaccomputer,gmbh,malsch，德国)上进行。除非另有说明，否则nmr溶剂是cdcl3。使用带有waters996光电二极管阵列检测器的waters600泵和控制器进行hplc。溶剂a是0.05％的三氟乙酸水溶液。溶剂b是0.04％的三氟乙酸乙腈溶液。在30分钟内梯度为0-100％b，2ml/min.的流速。色谱柱为25x0.46cm的c-18反相vydac254tp18色谱柱。快速色谱法在teledyneisco(lincoln,ne)combiflashcompanion自动化工作站上进行。ft-ir光谱在perkin-elmerft-1600分光光度计上获得，熔点在colepalmerkofler块熔点测定仪上测定。绝对构型的x射线晶体学在texasa&muniversity(collegestations,tx)的化学表征和分析中心进行。hydrogenationofquinolinesandisoquinolinesactivatedbychloroformates,"angew.chemie,intl.ed.(2006),45(14),2260–2263；wang,d.–w.,zeng,w.；zhou,y.–g.,"iridium–catalyzedasymmetrictransferhydrogenationofquinolineswithhantzschesters,"tetrahedron:asymmetry(2007),18(9),1103–1107；xulijin；lamkimhung；jijianxin；wujing；fanqing–hua；lowai–hung；chanalbertsc"air–stableir–(p–phos)complexforhighlyenantioselectivehydrogenationofquinolinesandtheirimmobilizationinpoly(ethyleneglycol)dimethylether(dmpeg),"chem.comm.(cambridge,england)(2005),(11),1390–2；andwang,y.,weissensteiner,w.,spindler,f.,arion,v.b.，以及mereiter,k.,"synthesisanduseinasymmetrichydrogenationsofsolelyplanarchiral1,2–disubstitutedand1,2,3–trisubstitutedferrocenyldiphosphines:acomparativestudy,"organometallics,2007,每一篇上述文件均通过引用整体并入本文。[0339]实施例4.紫堇属植物化合物的比旋光度[0340]通过将几种基本上纯的紫堇属植物化合物溶解于乙醇中并使用perkin–elmer241polarimeter测量它们的比旋光度，来测定其比旋光度。结果如下表2所示。[0341]表2[0342]化学名称比旋光度ms:m/z(m++1)*(+)–clmd+21370.114r,13s–(+)–crdl+31237014r–(+)–thp+29435614s–(–)–thp–256356(+)–crpm+345342.2[0343]实施例5.14r,13s-紫堇碱的x射线衍射[0344]通过如下的x射线衍射检查实施例1制备的结晶状14r,13s-紫堇碱。[0345]数据收集：使用leicamz7偏光显微镜从具有代表性的取样材料鉴别合适的样本。然后将选定的样品固定到尼龙环上，尼龙环又封固到铜安装销上。然后将封固的粉末置于保持在110k下的冷氮气流(oxford)中。[0346]brukerd8gadds通用三环x射线衍射仪用于样品筛选和数据收集。使用gadds软件套件(microsoftwin2000操作系统)控制测角仪。借助摄像机对样品进行光学对中，使得当晶体旋转通过所有位置时没有观察到平移。检测器设置在距离晶体样品5.0cm处(mwpchi-stardetector，512x512像素)。使用的x射线辐射由铜密封x射线管(电位为40kv，电流为40ma)产生，并用平行模式的石墨单色器(175mm准直器，针孔0.5mm)过滤。[0347]行旋转曝光以确定晶体质量和x射线束与检测器的交点。将光束交点坐标与配置的坐标进行比较，并进行相应的更改。旋转暴露表明可接受的晶体质量并且进行了晶胞测定。以0.5°的宽度拍摄60个数据帧，曝光时间为10秒。超过200个反射被居中并确定了它们的位置。这些反射被用于自动索引程序以确定晶胞。通过非线性最小二乘法和bravais晶格程序发现并精修了合适的晶胞，并将其报告于表3(14r,13s-紫堇碱)和4(14r-四氢巴马汀)中。通过检查几帧数据(包括区域照片)上的hkl覆盖来验证晶胞。没有观察到超晶胞或错误反射。[0348]在仔细检查晶胞后，启动了标准数据收集程序。此程序包括收集使用欧米伽扫描收集的一个半球数据，涉及以2θ和χ(2θ＝-28°,χ＝54.73°,2θ＝-90°,χ＝54.73°)的固定角度收集超过9000个0.5°帧，同时改变欧米伽。收集附加数据帧，以完成数据集并收集fiedel对。每帧曝光10秒。在110k下进行了持续时间为大约24小时的总数据收集。没有观察到等效反射的显著强度波动。[0349]数据收集后，仔细测量晶体的粒度、形态和颜色。结果报告在表3中并且结构显示在图1中。[0350]表3.14r,13s-紫堇碱的晶体数据和结构精修[0351][0352][0353]实施例6.14r-四氢巴马汀的x射线衍射[0354]通过实施例5的程序，利用x射线衍射检查实施例2制备的晶状14r-四氢巴马汀。结果示于表4中，结构示于图1中。[0355]表4.14r-四氢巴马汀的晶体数据和结构精修[0356][0357][0358]实施例7.合成、提取和/或植物来源[0359]与本技术的化合物的分离相关的示例性合成和鉴定通常还描述于：boudouetal.,j.org.chem.,70,9486-94(2005)和shaathetal.,j.org.chem.,40,1987-88(1975)中，各自通过引用并入本文。[0360]实施例8.化合物的设计和合成[0361]1.由小檗碱制备小檗红碱[0362][0363]将小檗碱(1.0g,2.68mmol)在干燥的烘箱中在真空下于190°加热30分钟。将粗产物从etoh中重结晶，以得到小檗红碱(0.6g，产率60％，由1hnmr证实)。[0364]2.由小檗红碱制备化合物i1[0365][0366]在60°下加热氯化小檗红碱(0.2g,0.5mmol)和1,3-二溴丙烷(0.58g,2.8mmol)在无水dmf中的悬浮液。将悬浮液冷却至室温并加入乙醚。沉淀通过过滤收集，用乙醚冲洗并真空干燥，得到黄色固体状化合物i1(通过1hnmr证实)。以0.5g规模(小檗红碱)重新进行反应，得到0.55g粗化合物i1(产率82％)。[0367]3.由紫堇根碱制备化合物67[0368][0369]将d-生物素(105mg,0.43mmol)、edc.hcl(125mg,0.65mmol)和dmap(19mg,0.16mmol)一起溶解于具有最小体积dmf(4.5ml)的烧瓶中。然后将紫堇根碱(25mg，0.073mmol)溶解于该溶液中。搅拌3小时后，取出0.5ml反应液样品进行测试。将样品添加到10mlh2o中并用10mletoac提取。有机层用mgso4干燥，过滤并真空浓缩。对产物进行lc-ms。lc-ms信息表明形成了化合物67。将剩余的反应混合物搅拌过夜。随后用etoac提取反应混合物。有机层用mgso4干燥并真空蒸发。通过制备tlc分离黄色残余物，得到化合物67。用制备hplc纯化化合物67。通过ms和hplc证实纯化的产物，以确认结构和纯度(92.1％和93.1％)。[0370]4.由紫堇根碱制备化合物i2[0371][0372]将紫堇根碱(0.068g,0.2mmol)添加到20ml丙酮和5ml乙醇中。将悬浮液回流1小时以溶解起始材料。然后加入0.068mgk2co3并将悬浮液回流1小时。将2-溴乙酸乙酯(0.0244ml,0.22mmol)溶解于1ml丙酮中并在30分钟内分批添加到反应悬浮液中。将所得悬浮液回流2小时。通过lc-ms监测该反应。通过制备tlc纯化部分产物。[0373]5.由化合物i2制备化合物68[0374][0375]根据程序4制备的化合物i2无需纯化即可使用，并用naoh将其皂化以制备化合物68。通过lc-ms监测该反应。标准后处理。[0376]6.由小檗红碱制备化合物i3[0377][0378]将小檗红碱(60mg,0.1mmol)添加到7ml热meoh中并在60℃下搅拌15分钟。然后将nabh4(8mg,0.21mmol)添加加到混合物中，并将混合物在60°下搅拌15分钟。将5mlh2o添加到溶液中以淬灭反应。用chcl3(10ml×3)从溶液中提取产物i3。获得10mg灰色固体，产率20％。分离的材料在ms中给出了预期的峰并证实了结构。hplc分析表明纯度令人满意，无需进一步纯化即可使用。[0379]7.由化合物i1制备化合物74[0380][0381]在室温(rt)下，将化合物i1(80mg,0.168mmol)溶解于25ml烧瓶内的ch3oh(5ml)中。溶液的颜色为深红色。将硼氢化钠(8mg,0.210mmol)添加到该烧瓶中。此后不久反应液变为淡黄色。反应在回流(rf)下保持2小时。然后将h2o(20ml)添加到溶液中以淬灭反应。[0382]减压蒸发溶剂以除去所有ch3oh。然后将30ml水添加到残余物中，溶液用氯仿提取3次。合并的有机提取物用无水mgso4干燥，过滤并真空浓缩。获得40mg黄色油状产物。(产率：54.4％)。ms分析证实了化合物74的结构。hplc分析表明纯度为86％。[0383]8.由14r-(+)-thp制备化合物77[0384][0385]将14r-(+)-thp(250mg,0.70mmol)添加到15ml47％hbr中并在100℃下搅拌过夜。然后将溶液冷却至室温，滤出产物，得到化合物77，为氢溴酸盐。[0386]9.由14r,13s-(+)-cdrl制备化合物78[0387][0388]将14r,13s-cdrl(200mg,0.54mmol)添加到10ml47％hbr中并在100℃下搅拌过夜。然后将溶液冷却至rt，滤出产物，得到化合物78，为氢溴酸盐。[0389]10.由小檗红碱制备化合物79[0390][0391]将小檗红碱(248mg,0.693mmol)添加到烧瓶内的5mlchcl3中。搅拌混合物并回流。然后缓慢加入苯磺酰氯(760mg,4.30mmol)和吡啶(0.1ml)。将反应混合物在相同温度下搅拌2小时，随后冷却至室温。过滤混合物，得到黄色固体。将固体用chcl3洗涤3次并在真空下干燥以提供最终产物化合物79(黄色固体，204mg)。化合物79不经纯化直接用于下一步。[0392]11.由化合物79制备化合物69[0393][0394]将化合物79(132mg,0.265mmol)和甲醇(5ml)一起添加到烧瓶中。然后将反应混合物加热回流以溶解起始材料。然后将nabh4(42mg,1.11mmol)缓慢加入烧瓶中。将反应混合物在相同温度下搅拌1小时。然后将其冷却至室温，然后在冰箱中冷却4小时。过滤混合物，得到淡黄色晶体。将晶体用水洗涤3次，然后真空干燥，得到最终产物化合物69(淡黄色固体，28.7mg)。nmr和ms分析与化合物69的结构一致。[0395]可以使用市售的取代的苯磺酰氯容易地制备化合物69的类似物。[0396]12.由小檗红碱制备化合物80[0397][0398]通过回流将小檗红碱(0.5g,1.4mmol)溶解于40mlchcl3中。搅拌约30分钟后，在30秒内将甲磺酰氯(0.33ml,4.2mmol)滴加到溶液中。10分钟后，出现黄色固体。将悬浮液回流3小时。冷却后，过滤悬浮液，得到黄色固体。该中间体(化合物80)不经纯化直接用于下一步。[0399]13.由化合物80制备化合物71[0400][0401]在回流下将化合物80溶解于30mlmeoh中。将nabh4(0.052g,1.3mmol)添加到反应中。反应立即发生。将溶液回流2小时并冷却。tlc分析表明转化已完成。将反应放置过夜，第二天早上出现灰色固体。过滤悬浮液，得到灰色固体。nmr和ms与化合物71的结构一致。[0402]14.由小檗红碱制备化合物81[0403][0404]将小檗红碱(300mg,0.84mmol)添加到15mlchcl3中并回流搅拌20分钟。将苯甲酰氯(1180mg,8.4mmol)和0.1ml吡啶添加到溶液中。将混合物回流搅拌2小时。然后用chcl3洗涤过滤产物。1hnmr和ms证实了化合物81的结构。[0405]15.由化合物81制备化合物70[0406]通过添加nabh4(8mg,0.21mmol)继续先前反应的反应混合物。然后将混合物在60℃下搅拌15分钟。向溶液中加入5mlh2o以淬灭反应。从溶液中过滤出产物。ms信息表明它是所需的结构。[0407]16.由小檗红碱制备化合物i4[0408][0409]将小檗红碱(100mg,0.279mmol)溶解于5ml丙酮中。然后将2-溴乙醇(182mg,1.40mmol)添加到溶液中并在60°下搅拌过夜。出现预期的黄色固体。然后将产物从反应中过滤出来，不经进一步纯化而使用。[0410]17.由化合物i4制备化合物82[0411][0412]将化合物i4(60mg,0.186mmol)添加到5ml热meoh中并在60°下搅拌15分钟。然后将nabh4(9mg,0.24mmol)添加到溶液中。溶液的颜色立即发生改变。然后将混合物在60°下搅拌15分钟，然后如前处理和分离。[0413]18.由小檗红碱制备化合物i5[0414][0415]在回流下将小檗红碱(400mg,1.12mmol)溶解于在50ml烧瓶内的chcl3(14ml)中。然后将溴乙酸乙酯(1.5g,8.96mmol)滴加到反应中。溴乙酸乙酯全部加入后，红色溶液变为黄色。将反应保持在回流下。[0416]过滤溶液，将固体在chcl3(15ml)中回流2小时并过滤。1hnmr信息表明产物是所需的结构i5。[0417]19.由化合物i5制备化合物83[0418][0419]将化合物i5(250mg,0.563mmol)置于50ml烧瓶中，并加入ch3oh(12ml)。回流片刻后溶液变澄清。然后将硼氢化钠(27.7mg,0.732mmol)小心地加入同一烧瓶中。tlc显示该材料已经消失。反应继续并在相同温度下保持40分钟。[0420]将水(30ml)添加到溶液中，搅拌半小时。然后真空蒸发溶液直到除去ch3oh。将水(30ml)添加到溶液中，溶液用氯仿提取3次。有机相用水和盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，真空蒸发，得到化合物83。[0421]20.由小檗红碱制备化合物i6[0422][0423]将小檗红碱(648mg,1.81mmol)添加到其中具有15mln,n-二甲基甲酰胺的烧瓶中。将混合物在60℃下搅拌并加热以溶解。然后缓慢加入2-溴乙酸(724mg,5.21mmol)。将反应混合物在相同温度下搅拌2小时。然后将其冷却至室温。过滤混合物以显示黄色固体。然后将固体用chcl3洗涤3次，然后真空干燥以显示产物。[0424]21.由化合物i6制备化合物111[0425][0426]将化合物i6(109mg,0.262mmol)与甲醇(5ml)一起添加到烧瓶中。然后将反应混合物在回流条件下加热溶解。将nabh4(42mg,1.11mmol)缓慢添加到反应中。将反应混合物在相同温度下搅拌1小时。然后首先将其冷却至室温，然后在冰箱中冷却4小时。过滤混合物得到透明晶体。将晶体用et2o洗涤3次并真空干燥，得到最终产物化合物111。[0427]22.由小檗红碱制备化合物i7[0428][0429]将小檗红碱(1.0g,2.79mmol)溶解于5mldmf中。然后将1,2-二溴乙烷(5.3g,27.9mmol)添加到溶液中并在60℃下搅拌过夜。然后将5mlet2o添加到溶液中。将产物从反应中过滤出来，并直接用于下一步反应。[0430]23.由化合物i7制备化合物i8[0431][0432]在60℃下加热化合物i7(460mg,1mmol)、吗啉(870mg,10mmol)、k2co3(1.38g,10mmol)、dmf(30ml)的溶液。[0433]24.由化合物i8制备化合物88[0434][0435]将化合物i8溶解于50ml甲醇中并加热回流。将nabh4添加到回流溶液中。通过tlc监测反应并回流4小时。通过真空蒸馏除去甲醇。将所得残余物与水混合并用氯仿(3x)提取。将有机层用naso4干燥。然后通过真空蒸馏除去氯仿。产物通过硅胶柱色谱法(丙酮：ch2cl2，4:1至1:1)纯化。ms分析与所需产物一致，hplc测定表明纯度为96％。1hnmr证实该结构是所需的结构，即化合物88。[0436]25.由化合物78制备化合物72[0437][0438]在ar下将化合物78(100mg,0.32mmol)在5ml无水dmf中的溶液加热至60℃并加入ch2brcl(84mg,0.64mmol)的溶液。将反应温度升至95℃。4小时后，通过lc-ms分析反应，并证实产物为化合物72。[0439]26.由小檗红碱制备化合物i9[0440][0441]在回流下将小檗红碱(300mg,0.84mmol)溶解于30mlchcl3中。然后将4-(三氟甲基)苯-1-磺酰氯(300mg,1.23mmol)添加到溶液中并搅拌7小时。然后过滤产物，用chcl3洗涤并干燥。得到400mg黄色固体状产物(产率：84.2％)。中间体不经进一步纯化直接使用。[0442]27.由化合物i9制备化合物85[0443][0444]在回流下将化合物i9(140mg,0.247mmol)溶解于80mlmeoh中。将nabh4(50mg,1.322mmol)添加到溶液中并搅拌1小时。然后过滤产物，用meoh、h2o和己烷洗涤。获得45mg灰色固体状产物(产率：34％)。产物的ms&1hnmr分析与化合物85的结构一致。[0445]28.由小檗红碱制备化合物i10[0446][0447]在70℃下将小檗红碱(300mg,0.84mmol)溶解于30mlchcl3中。然后将3,4-二甲氧基苯-1-磺酰氯(300mg,1.27mmol)添加到溶液中并搅拌7小时。然后过滤产物，用chcl3洗涤并干燥。获得40mg黄色固体状产物。(产率：17％)。中间体不经进一步纯化直接使用。[0448]29.由化合物i10制备化合物86[0449][0450]在70℃下将化合物i10(80mg,0.14mmol)溶解于80mlmeoh中。将nabh4(50mg,1.32mmol)添加到溶液中并搅拌1小时。然后过滤产物，用meoh、h2o和己烷洗涤。获得25mg灰色固体状产物。(mc0236-38-1；产率：34％)。ms&1hnmr信息表明该产物是所需的结构，即化合物86。[0451]30.由小檗红碱制备化合物i11[0452][0453]在70℃下将小檗红碱(300mg,0.84mmol)溶解于30mlchcl3中。然后将4-硝基苯-1-磺酰氯(300mg,1.35mmol)添加到溶液中并搅拌7小时。然后过滤产物，用chcl3洗涤并干燥。获得400mg黄色固体状产物(收率：87.7％)。中间体不经进一步纯化直接使用。[0454]31.由化合物i11制备化合物106[0455][0456]在250ml三颈烧瓶中，在回流下将化合物i11(110mg,0.202mmol)溶解于ch3oh(150ml)中。然后将硼氢化钠(100mg,2.64mmol)小心地添加到到反应中。将混合物回流3小时。将溶液真空浓缩至10ml，在冰箱中冷却，过滤，用水和正己烷洗涤，真空干燥。得到35mg青色固体状产物(收益率：33.9％)。[0457]32.由化合物i12制备化合物107[0458][0459]在250ml三颈烧瓶中，在回流下将化合物i12(130mg,0.325mmol)溶解于ch3oh(150ml)中。然后小心地加入硼氢化钠(120mg,3.17mmol)。反应持续3小时。将溶液真空浓缩至10ml，在冰箱中冷却，过滤，用水和正己烷洗涤，真空干燥。[0460]33.由小檗红碱制备化合物i13[0461][0462]在70℃下将小檗红碱(200mg,0.56mmol)溶解于30mlchcl3中。然后将4-(甲基磺酰基)苯-1-磺酰氯(350mg,1.37mmol)添加到溶液中并在70℃下搅拌7小时。然后过滤产物，用chcl3洗涤并干燥。获得200mg黄色固体状产物(产率：62％)。中间体化合物i13不经进一步纯化直接使用。[0463]34.由化合物i13制备化合物87[0464][0465]在回流下将化合物i13(110mg,0.19mmol)溶解于80mlmeoh中。然后将nabh4(70mg,1.85mmol)添加到溶液中并在70℃下搅拌1小时。然后除去大部分溶剂，过滤产物，用meoh、h2o和己烷洗涤。得到40mg灰色固体状产物(产率：38.8％)。[0466]35.由小檗红碱制备化合物i14[0467][0468]在70℃下将小檗红碱(220mg,0.61mmol)溶解于30mlchcl3中。然后将4-氰基苯-1-磺酰氯(340mg,1.68mmol)添加到溶液中并在70℃搅拌7小时。然后过滤产物，用chcl3洗涤并干燥。得到110mg黄色固体状产物(收率：35％)。中间体化合物i14不经进一步纯化直接使用。[0469]36.由化合物i14制备化合物108[0470][0471]37.由化合物i15制备化合物109[0472][0473]将化合物i15(150mg,0.449mmol)与甲醇(15ml)一起添加到烧瓶中。然后将反应混合物在回流条件下加热溶解。然后缓慢加入nabh4(276mg,7.30mmol)。将反应混合物在相同温度下搅拌2小时。然后将其真空蒸发，固体用水洗涤24小时。将混合物过滤，然后干燥，获得112mg红色固体状化合物109(产率：81.2％)。1hnmr&ms信息表明该产物是所需的结构。[0474]38.由化合物109制备化合物110[0475][0476]将化合物109(17mg,0.0461mmol)添加到其中具有13mlchcl3的烧瓶中。搅拌混合物并加热回流以使其溶解。然后缓慢加入苯磺酰氯(55mg,0.311mmol)和吡啶(0.3ml)。将反应混合物在相同温度下搅拌2小时。然后将反应冷却至室温。ms分析表明形成了化合物110。[0477]39.由化合物i16制备化合物i17[0478][0479]用dbu(317mg,1.8mmol)处理苯硫酚(229mg,1.8mmol)在5ml甲苯中的溶液。5分钟后，将15ml含有化合物i16(300mg,0.6mmol)的甲苯溶液添加到反应液中。将反应搅拌过夜。lc-ms信息表明形成了所需的产物化合物i17。产物用硅胶柱色谱法纯化。(300mlch2cl2，然后300mlch2cl2:丙酮＝3:1)。获得200mg产物(产率：62.3％)。1hnmr&ms信息表明该产物是所需的结构。[0480]40.由化合物i17制备化合物105[0481][0482]将化合物i17(80mg,0.17mmol)溶解于5mlacoh中并在60℃下加热。10分钟后，加入2ml30％h2o2。1.5小时后，将反应送至lc-ms测定。[0483]41.化合物1的制备[0484][0485]氯化小檗碱→b[0486]在室温下向naoh(4g,100mmol)在水(20ml)中的搅拌溶液中加入氯化小檗碱(2.0g,5.4mmol)。然后在相同温度下缓慢加入丙酮(1.6ml)并搅拌1小时。tlc分析表明反应完成。将反应液过滤，用80％甲醇充分洗涤，干燥，得到1.7gb。[0487]b→c[0488]在室温下向b(1.7g,4.3mmol)在mecn(20ml)中的搅拌溶液中加入ki(450mg,2.7mmol)。将反应混合物加热回流并加入bnbr(1.5ml,12.7mmol)。然后将反应搅拌回流4小时。tlc分析表明反应完成。除去溶剂并通过柱色谱法纯化残余物，得到1.6gc。[0489]c→化合物1[0490]向c(1.6g,3.7mmol)在meoh中的搅拌溶液中加入pt/c(200mg)并在h2下在环境温度下搅拌过夜。过滤后，浓缩滤液，得到粗产物。将固体用meoh洗涤，得到500mg纯化合物1。1hnmr(cdcl3):δ7.20-7.14(m,3h)；6.88-6.85(m,2h)；6.76(s,1h)；6.61(s,1h)；6.52(d,1h,j＝8.4hz)；6.00(d,1h,j＝8.4hz)；5.94(s,2h)；4.28(d,1h,j＝16.2hz)；3.86(s,3h)；3.80(s,3h)；3.77(br,1h)；3.56(d,1h,j＝16.2hz)；3.25-3.07(m,3h)；2.73-2.57(m,4h).ms:m/z(apci-esi)430.2(m++1)。[0491]42.化合物的制备、盐的形成[0492]通用程序：将14r,13s-(+)-crdl或14r-(+)-thp溶解于溶剂中，并与适量的酸混合以形成相应的酸加成盐。[0493]盐酸盐(化合物2和6)[0494]在室温下向含有hcl(2mmol)的meoh(2ml)和dcm(2ml)的搅拌溶液中加入14r-(+)-thp(100mg,0.28mmol)或14r,13s-(+)-cdrl(100mg,0.27mmol)，并搅拌2小时。除去溶剂得到110mg盐。[0495]硫酸盐(化合物3和7)[0496]在室温下向含有h2so4(15μl,0.28mmol)的meoh(2ml)和dcm(2ml)的溶搅拌液中加入14r-(+)-thp(100mg,0.28mmol)或14r,13s-(+)-cdrl(100mg,0.27mmol)，并搅拌2小时。3.85(m,12h)；3.71(s,1h)；3.65-3.56(m,1h)；3.27-3.22(m,1h)；3.18-3.14(m,2h)；2.87-2.78(m,1h)；2.68-2.63(m,2h).ms:m/z(apci-esi)356.1(m++1)。[0511]44.化合物11的制备[0512][0513]a+b→c[0514]在20℃下向a(1.8g,10mmol)、b(1.81g,10mmol)在dcm(20ml)中的溶液中加入edci(2.83g,12mmol)和et3n(1.0g,9.93mmol)，并将溶液搅拌过夜。tlc分析表明反应完成。加入水，收集有机层，干燥并浓缩，得到1.9gc。[0515]c→d[0516]在环境温度下向c(0.3g,0.88mmol)在甲苯(10ml)中的搅拌溶液中加入pocl3(1.5ml)。将反应混合物搅拌回流4小时。当反应完成时，蒸发掉溶剂和过量的pocl3。将残余物倒入冰水中并用na2co3调节ph》7。用etoac提取溶液，将有机层干燥并浓缩，得到粗产物，其不经进一步纯化直接用于下一步。[0517]d→e[0518]在10℃下向d在meoh(8ml)中的搅拌溶液中加入nabh4(130mg,3.42mmol)。将反应混合物在室温下搅拌6小时。tlc分析表明反应完成。除去溶剂并用etoac和水提取残余物。将有机层干燥并浓缩，得到粗品e(123mg)。[0519]e→化合物11[0520]将粗品e添加到37％hcho(10ml)和acoh(10ml)中。将反应混合物加热至100℃并搅拌8小时。tlc分析表明反应完成。除去水和acoh。用na2co3水溶液和etoac提取残余物。将有机相干燥并浓缩成粗产物。粗物质通过柱色谱法进一步纯化，得到78mg化合物11。ms(m+1):340.1.1hnmr(cdcl3)δ＝6.73(s,1h),6.61-6.63(s,2h),6.55(s,1h),6.70-5.91(s,2h),3.89-3.94(m,1h),3.87-3.90(s,6h),3.54-3.670(m,2h),3.10-3.25(m,3h),2.80-2.86(t,1h),2.60-2.70(m,2h)。[0521]45.化合物12和13的制备。[0522][0523]a→b[0524]在n2保护下，在-30℃的温度下，向a(1.0g,2.95mmol)在无水thf的溶液中滴加n-buli(2.5m,3.25mmol)，搅拌1小时，然后滴加ch3ch2br(386mg,3.54mmol)。添加完成后，将溶液在室温下搅拌1.5小时。加入nh4cl，真空除去分离溶液。加入水，产物用ch2cl2提取，通过快速色谱法纯化，得到968mg，产率：89.5％。[0525]b→c[0526]向b(500mg)在acoh的溶液中加入pto2(45mg)，在h2(8atm)气氛下于25℃下搅拌过夜。当反应完成时，真空浓缩溶液。然后加入水，并使用na2co3将溶液调节至ph＝7。用ch2cl2提取溶液，通过快速色谱法纯化粗产物，得到300mg产物，产率：59.3％。[0527]c→化合物12和13[0528]将c(300mg)溶解于hcho(37％,20ml)和acoh(20ml)的溶液中。将反应混合物加热回流6小时，然后真空浓缩并用ch2cl2提取。将残余物通过快速色谱法和tlc纯化，得到两种产物，一种为化合物12(15.6mg)，另一种为化合物13(19.6mg)。[0529]化合物12.1hnmr(cdcl3)δ＝6.71(s,1h),6.66(s,1h),6.60(s,1h),6.51(s,1h),4.41-4.05(m,1h),4.01-3.95(m,1h),3.85(s,6h),3.83(s,6h),3.76-3.71(m,1h),3.10-3.05(m,1h),2.95-2.94(m,2h),2.10-1.90(m,2h),1.24(m,1h),0.95-0.90(t,3h)。ms:m/z(apci-esi):384.2(m++1)。[0530]化合物13.1hnmr(cdcl3)δ＝6.70(s,1h),6.68(s,1h),6.60(s,1h),6.58(s,1h),4.40-3.98(m,1h),3.88(s,6h),3.85(s,6h),3.74(s,1h),3.10-3.08(m,1h),3.10-3.08(m,1h),2.98-2.92(m,1h),2.60-2.54(m,2h),1.42-1.37(m,2h),0.83-0.78(t,3h)。ms:m/z(apci-esi):384.2(m++1)。[0531]46.化合物14和15的制备[0532][0533]向210mg(1.10mmol)a在10ml甲苯中的溶液加入180mg(1.11mmol)b，并将混合物回流加热2小时。使混合物冷却至室温并静置过夜。收集形成的晶体，用乙醚洗涤并真空干燥。获得350mg粗产物14。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ＝7.88(d,j＝8.7hz,1h),7.56-7.51(m,1h),7.41-7.39(m,2h),6.94(s,1h),6.75(s,1h),5.27(d,j＝6.0hz,1h),4.6-4.58(m,2h),3.69(s,3h),3.68(s,3h),3.18-3.09(m,1h),3.01-2.90(m,1h),2.72-2.67(br,1h)。ms:m/z(apci-esi):354.1(m++1)。[0534]将200mg(0.57mmol)化合物14在acoh的溶液回流加热24小时。蒸发溶剂，将残余物用pe和etoac洗涤纯化，得到90mg化合物15。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ＝7.97(d,j＝7.6hz,1h),7.59-7.43(m,3h),7.12(s,1h),6.78(s,1h),5.19(d,j＝4.4hz),4.80(d,j＝5.7hz),4.45(d,j＝4.5hz),3.77(s,3h),3.75(s,3h),2.90-2.66(m,3h)。ms:m/z(apci-esi):354.1(m++1)。[0535]47.化合物16的制备[0536][0537]a+b→c[0538]在20℃下向a(1.82g,10mmol)、b(1.81g,10mmol)在dcm(30ml)中的溶液中加入edci(2.83g,12mmol)和et3n(1.0g,9.93mmol)，并将溶液搅拌过夜。tlc分析表明反应完成。加入水，收集有机层，干燥并浓缩，得到2.85gc。[0539]c→d[0540]在环境温度下向c(2.55g,7.2mmol)在甲苯(20ml)中的搅拌溶液中加入pocl3(8ml)。将反应混合物搅拌回流4小时。当反应完成时，蒸发掉溶剂和过量的pocl3。将残余物倒入冰水中并用na2co3调节ph》7。用etoac提取溶液，将有机层干燥并浓缩，得到粗产物，其不经进一步纯化直接用于下一步。[0541]d→e[0542]在10℃下向d在meoh(30ml)中的搅拌溶液中加入nabh4(1.0g)。将反应混合物在室温下搅拌6小时。tlc分析表明反应完成。除去溶剂并用etoac和水提取残余物。将有机层干燥并浓缩，得到粗品e(1.3g)。[0543]e→化合物16[0544]将粗品e(0.6g)添加到37％hcho(15ml)和acoh(15ml)中。将反应混合物加热至100℃并搅拌8小时。tlc分析表明反应完成。除去水和acoh。用na2co3水溶液和etoac提取残余物。将有机相干燥并浓缩成粗产物。粗物质通过柱色谱法进一步纯化，得到160mg化合物16。ms(m+1):342.1。1hnmr(cdcl3)δ(ppm)6.64(s,1h),6.62-6.63(s,2h),6.73(s,1h),3.89-3.94(m,1h),3.86-3.94(s,3×3h),3.55-3.66(m,2h),3.11-3.27(m,3h),2.84-2.88(t,1h),2.60-2.69(m,2h)。[0545]48.化合物17的制备[0546][0547]a+b→c[0548]在20℃下向a(1.82g,10mmol)、b(1.81g,10mmol)在dcm(30ml)中的溶液中加入edci(2.83g,12mmol)和et3n(1.0g,9.93mmol)，并将溶液搅拌过夜。tlc分析表明反应完成。加入水，收集有机层，干燥并浓缩，得到2.3gc。[0549]c→d[0550]在环境温度下向c(0.25g,0.72mmol)在甲苯(10ml)中的搅拌溶液中加入pocl3(1.5ml)。将反应混合物搅拌回流4小时。当反应完成时，蒸发掉溶剂和过量的pocl3。将残余物倒入冰水中并用na2co3调节ph》7。用etoac提取溶液，将有机层干燥并浓缩，得到粗产物，其不经进一步纯化直接用于下一步。[0551]d→e[0552]在10℃下向d在meoh(8ml)中的搅拌溶液中加入nabh4(130mg,3.42mmol)。将反应混合物在室温下搅拌6小时。tlc分析表明反应完成。除去溶剂并用etoac和水提取残余物。将有机层干燥并浓缩，得到粗品e(140mg)。[0553]e→化合物17[0554]将粗品e(120mg)添加到37％hcho(5ml)和acoh(5ml)中。将反应混合物加热至100℃并搅拌8小时。tlc分析表明反应完成。除去水和acoh。用na2co3水溶液和etoac提取残余物。将有机相干燥并浓缩成粗产物。将粗物质通过柱色谱法进一步纯化，得到200mg化合物17。ms(m+1):342.1。1hnmr(cdcl3)δ(ppm)6.72-6.73(s,2h),6.611(s,1h),6.554(s,1h),3.89-3.94(m,1h),3.87-3.90(s,3×3h),3.55-3.69(m,2h),3.11-3.24(m,3h),2.79-2.84(t,1h),2.60-2.68(m,2h)。[0555]49.化合物19和20的制备[0556][0557]a+b→c[0558]将200mg(1.10mmol)a和165mg(1.10mmol)b的混合物加热至160℃，持续1小时，然后冷却；将该油状物溶解于2mlmeoh中。分批加入50mg(1.32mmol)nabh4。室温下1小时后，反应完成，真空除去溶剂。残余物用乙酸乙酯溶解，用水、盐水洗涤，并用无水硫酸钠干燥。获得320mg纯产物。产率：92.4％。[0559]c→化合物19[0560]向150mg(0.48mmol)的c在2mlacoh中的溶液中加入1.0g的cuso4，然后加入2ml(30％)乙二醛水溶液。将反应混合物加热回流3小时。真空除去大部分溶剂，然后用etoac提取。将有机相用水、盐水洗涤并用无水naso4干燥。真空除去溶剂，将粗产物用柱色谱法纯化，用ea:meoh＝20:1洗脱。获得35mg标题化合物。产率：21.0％。1hnmr(cdcl3,300mhz)δ＝8.81(s,1h),8.41(br,1h),7.99(d,j＝8.7hz),7.51(d,j＝8.7hz),6.94(s,1h),6.35(s,2h),4.66(t,j＝5.7hz,2h),3.81(s,3h),3.78(s,3h),3.06(t,j＝6.2hz,2h)。ms:m/z(apci-esi):352.1(m++1)。[0561]化合物19→化合物20[0562]向14mg(0.04mmol)的化合物19在2ml1,2-二氯乙烷中的悬浮液中加入1mlpocl3。将混合物在80℃下搅拌30分钟，然后真空除去溶剂。将残余物溶解于meoh中，然后在0℃下分批加入nabh4。30分钟后，反应完成。真空除去溶剂，将残余物用ch2cl2提取，用水、盐水洗涤并用无水naso4干燥。用制备tlc纯化产物。获得3mg标题化合物。产率：22.2％。1hnmr(cdcl3,300mhz)δ＝6.73-6.61(m,4h),5.95(d,j＝11.0hz2h),4.11(d,j＝15.3hz,1h),3.89(s,3h),3.87(s,3h),3.66-3.52(m,2h),3.31-3.06(m,3h),2.86-2.60(m,3h)。ms:m/z(apci-esi):340.1(m++1)。[0563]50.化合物1的手性分离[0564]使用以下hplc系统对化合物1进行手性hplc：[0565]色谱柱chiralceloj-h色谱柱尺寸0.46cmi.d.×15cml注入10μl流动相己烷/ipa/dea＝95/5/0.1(v/v/v)流速1.0ml/min.波长uv220nm温度35℃样品溶液在流动相中xmg/mlhplc设备shimadzulc20，带有uv检测器spd-20a溶剂品牌tedia,hplc级[0566]如方案所示，分离并指定化合物1的(r,s)和(s,r)对映异构体。在这些条件下，13s,14r-对映异构体(化合物31)的保留时间为约7分钟，13r,14s-对映异构体(化合物32)的保留时间为约13分钟。[0567][0568]51.化合物23-26、29的制备[0569][0570]向化合物34(50mg,0.154mmol)在丙酮中的溶液中加入r-br(0.308mmol)和k2co3(63.7mg,0.462mmol)，然后将混合物在小安瓿中在约70℃下加热3小时。然后通过制备tlc将其纯化，得到产物。[0571]化合物23:1hnmr(cdcl3):δ7.50-7.46(m,2h),7.42-7.33(m,3h),6.90-6.80(m,2h),6.72(s,1h),6.58(s,1h),5.92-5.91(m,2h),5.03(dd,2h,j1＝11.1hz,j2＝31.2hz),4.20(d,1h,j＝15.9hz),3.87(s,3h),3.50-3.40(m,2h),3.30-3.09(m,3h),2.90-2.75(m,1h),2.65-2.55(m,2h)。ms:m/z＝416.0(m++1)。[0572]化合物24:1hnmr(cdcl3,300mhz):δ7.43-7.35(m,3h),7.19-7.16(m,1h),6.91-6.80(m,2h),6.72(s,1h),6.58(s,1h),5.92-5.91(m,2h),5.03(dd,2h,j1＝11.1hz,j2＝31.2hz),4.20(d,1h,j＝15.9hz),3.86(s,3h),3.52-3.47(m,2h),3.30-3.05(m,3h),2.90-2.75(m,1h),2.65-2.55(m,2h)。ms:m/z＝500.0(m++1)。[0573]化合物25:1hnmr(cdcl3):δ7.50(s,1h),7.35-7.29(m,3h),6.91-6.80(m,2h),6.72(s,1h),6.58(s,1h),5.92-5.91(m,2h),5.00(dd,2h,j1＝11.1hz,j2＝31.2hz),4.20(d,1h,j＝15.9hz),3.86(s,3h),3.55-3.40(m,2h),3.30-3.05(m,3h),2.90-2.75(m,1h),2.65-2.55(m,2h)。ms:m/z＝450.0(m++1)。[0574]化合物26:1hnmr(cdcl3,300mhz):δ8.16-8.11(m,2h),7.76-7.71(m,2h),7.75-7.46(m,2h),7.93-7.80(m,2h),6.73(s,1h),6.58(s,1h),5.92-5.91(m,2h),5.42-5.41(m,2h),4.96(s,1h),2.23(d,1h,j＝15.9hz),3.80(s,3h),3.60-3.50(m,2h),3.30-3.05(m,3h),2.90-2.75(m,1h),2.65-2.55(m,2h)。ms:m/z＝461.0(m++1)。[0575]化合物29:1hnmr(cdcl3,300mhz):δ6.85-6.76(m,2h),6.72(s,1h),6.58(s,1h),5.59(m,1h),5.92(s,2h),4.27-4.26(m,2h),4.22-4.03(m,2h),3.83(s,3h),3.56-3.49(m,2h),3.30-3.05(m,3h),2.90-2.65(m,3h),1.38(t,3h,j＝6.9hz)。ms:m/z＝354.1(m++1)。[0576]52.化合物27和28的制备[0577][0578]向化合物34(50mg，0.154mmol)在ch2cl2中的溶液中加入磺酰氯(0.185mmol)和na2co3(20mg)，然后将混合物在室温下在小安瓿中搅拌过夜。然后通过制备tlc将其纯化，得到产物。[0579]化合物27:1hnmr(cd3oh,300mhz):δ7.03(d,j＝8.4hz,1h),6.83(d,j＝8.7hz,1h),6.71(s,1h),6.59(s,1h),5.91(dd,j＝1.5,2.1hz,2h),4.27(d,j＝16.2hz,1h),4.00-3.89(m,1h),3.87(s,3h),3.83-3.60(m,2h),3.27-3.16(m,3h),2.85-2.64(m,3h),2.32-2.10(m,4h),2.95-2.65(m,4h)；ms:m/z＝326.1(m++1)。[0580]化合物28:1hnmr(cdcl3,300mhz):δ7.55-7.7.51(m,5h),7.06(d,j＝8.4hz,1h),6.87(d,j＝8.4hz,1h),6.70(s,1h),6.57(s,1h),5.08(dd,j＝1.2,2.1hz,2h),4.75(q,j＝16.5hz,2h),4.19(d,j＝15.9hz,3h),3.64-3.54(m,2h),3.26-3.3.02(m,3h),2.86-2.77(m,1h),2.65-2.55(m,2h)；ms:m/z＝480.0(m++1)。[0581]53.化合物30的制备[0582][0583]在室温下向naoh(4g,100mmol)在水(20ml)中的搅拌溶液中加入氯化小檗碱(2.0g,5.4mmol)。然后在相同温度下缓慢加入丙酮(1.6ml)并搅拌1小时。tlc分析表明反应完成。过滤反应液，用80％甲醇充分洗涤，并干燥，得到1.7g的化合物30。1hnmr(cdcl3):δ7.13(s,1h)；6.77-6.75(m,2h)；6.57(s,1h)；5.94-5.93(m,2h)；5.89(s,1h,)；5.34-5.30(m,1h,)；3.89(s,3h)；3.84(s,3h)；3.36-3.30(m,2h)；3.11-3.04(m,1h)；2.84-2.76(m,2h)；2.44-2.38(m,1h,)；2.04(s,3h)。ms:m/z(apci-esi)336.0(m+h)+。[0584]54.化合物33和37的制备[0585][0586]向1.0g(2.7mmol)氯化小檗碱在50ml的meoh中的溶液中加入kcn(175mg，溶解于最少量的水中)。过滤立即出现的黄色沉淀物并用甲醇洗涤。在真空下干燥固体。获得810mg化合物33。产率：82.9％。[0587]1hnmr(cdcl3,300mhz):δ7.17(s,1h),6.86(dd,j＝8.7,15.3hz,2h),6.60(s,1h),6.15(s,1h),5.97(dd,j＝1.4,5.1hz,2h),5.75(s,1h),3.97(s,1h),3.87(s,1h),3.49-3.38(m,1h),3.30-3.24(m,1h),3.05-2.80(m,2h)；ms:m/z＝336.0(m+-cn)。[0588]在0℃下在30分钟内将200mg化合物33溶解于1.0ml浓hcl(conc.hcl)中，然后将混合物溶解于15ml甲醇中。分批加入nabh4，直到黄色溶液变为无色。将反应用水淬灭，并用dcm提取。有机相用水、盐水洗涤并用无水naso4干燥。真空除去溶剂，将残余物通过柱色谱法纯化，得到化合物37。产率：78mg(37.0％)。[0589]1hnmr(cdcl3,300mhz):δ7.06(s,1h),6.97(s,1h),6.95-6.85(m,3h),6.65(s,1h),5.94(q,j＝0.9hz,2h),4.01(s,1h),3.77(s,3h),3.68(s,3h),3.43-3.19(m,3h),2.89-2.56(m,3h),2.46-2.38(m,1h)；ms:m/z＝383.0(m++1)。[0590]55.化合物35的制备[0591][0592]将200mg(0.59mmol)a(四氢小檗碱)在3mlchcl3中的溶液与110mg(0.64mmol)m-cpba在室温下搅拌过夜。将反应混合物用10mldcm稀释，用10％na2co3水溶液洗涤，干燥并(63.7mg,0.46mmol)，然后将混合物在小安瓿中在约70℃下加热3小时。然后通过制备tlc对其进行纯化，得到标题化合物39。1hnmr(cdcl3,300mhz):δ6.79(dd,j＝8.1,19.8hz,2h),6.72(s,1h),6.58(s,1h),5.91(s,2h),4.61-4.53(m,1h),4.24(d,j＝15.9hz,1h),3.81(s,3h),3.53-3.50(m,2h),3.24-3.10(m,3h),2.86-2.80(m,h),2.67-2.57(m,2h),1.30(d,j＝2.7hz,3h),1.28(d,j＝2.4hz,3h)；ms:m/z＝368.1(m++1)。[0603]58.化合物41、44、45和46的制备[0604][0605]在室温下向a(100mg，0.31mmol)在dcm(1.5ml)和吡啶(1.5ml)中的搅拌溶液中加入b(33μl,0.34mmol)。然后将反应混合物加热至40℃并搅拌8小时。tlc分析表明反应完成。减压除去溶剂。将残余物用etoac和水提取，干燥并浓缩，得到粗产物。将粗物质用et2o充分洗涤并干燥，得到35mg化合物41。1hnmr(cdcl3):δ6.97(d,j＝8.7hz,1h)；6.81d,j＝8.7hz,1h)；6.72(s,1h)；6.58(s,1h)；5.91(s,2h,)；5.01(d,j＝8.1hz,1h)；4.07(d,j＝15.6hz,1h)；3.90–3.86(m,1h)；3.82(s,3h)；3.60-3.48(m,2h)；3.25-3.04(m,3h)；2.86-2.77(m,1h,)；2.66–2.55(m,2h)；1.24-1.12(m,6h)。ms:m/z(apci-esi)411.1(m+h)+。[0606]使用合适的异氰酸酯类似地制备化合物44、45和46。[0607]化合物44:1hnmr(cdcl3):δ7.46(dd,j＝4.8hz,2h),7.16(dd,j＝8.4hz,2h),7.04(dd,j＝8.4hz,1h),6.85(dd,j＝8.4hz,1h),6.73(s,1h),6.58(m,1h),5.92(s,2h),4.12-4.17(m,1h),3.82(s,3h),3.55-3.56(m,2h),3.14-3.25(m,3h),2.98-2.75(m,1h),2.61-2.61(m,2h)。ms:m/z＝529.0(m++1)。[0608]化合物45:1hnmr(cdcl3):δ7.48(m,1h),7.03(dd,j＝8.1hz,1h),6.85(dd,j＝8.4hz,1h),6.75(s,1h),6.67(s,2h),6.59(s,1h),6.19(s,1h),5.92(s,2h),4.16-4.21(m,1h),3.83(s,3h),3.70(s,6h),3.48-3.64(m,2h),3.13-3.31(m,3h),2.83-2.92(m,1h),2.57-2.83(m,2h)。ms:m/z＝505.1(m++1)。[0609]化合物46:1hnmr(cdcl3):δ7.4(m,1h),7.16-7.23(m,2h),7.03(dd,1h,j＝8.4hz),6.83-6.90(m,2h),6.75(s,2h),6.58(s,1h),6.19(s,1h),5.92(s,2h),4.14-4.19(m,1h),3.83(s,3h),3.49-3.63(m,2h),3.08-3.31(m,3h),2.81-2.90(m,1h),2.57-2.67(m,2h),2.29(s,3h)。ms:m/z＝459.1(m++1)。[0610]59.化合物43的制备[0611][0612]将100mga(0.31mmol)溶解于5.0mldcm中，溶液变为黄色。然后加入0.5ml氯-n,3.58(m,2h),3.50(s,3h),3.27-3.05(m,3h),2.88-2.61(m,3h)；ms:m/z＝502.0(m++1)。[0621]化合物56:1hnmr(cdcl3,300mhz):δ7.78-7.73(m,2h),7.16-7.13(m,1h),7.04(d,j＝8.4hz,1h),6.77-6.70(m,2h),6.59(s,1h),5.91(s,2h),4.22(d,j＝15.9hz,1h),3.63-3.55(m,2h),3.59(s,3h),3.27-3.04(m,3h),2.86-2.60(m,3h)；ms:m/z＝472.0(m++1)。[0622]化合物57:1hnmr(cdcl3,300mhz):δ7.89-7.85(m,2h),7.36-7.33(m,2h),7.01(d,j＝8.7hz,1h),6.71(d,j＝7.2hz,1h),6.70(s,1h),6.58(s,1h),5.91(s,2h),4.20(d,j＝15.9hz,1h),3.62-3.54(m,2h),3.45(s,3h),3.28-3.02(m,3h),2.85-2.53(m,3h),2.47(s,3h)；ms:m/z＝480.0(m++1)。[0623]化合物58:1hnmr(cdcl3,300mhz):δ8.04-7.99(m,2h),7.27-7.21(m,2h),7.02(d,j＝8.4hz,1h),6.71(d,j＝7.5hz,1h),6.70(s,1h),6.59(s,1h),5.91(s,2h),4.24(d,j＝15.9hz,1h),3.67-3.56(m,2h),3.46(s,3h),3.28-3.03(m,3h),2.86-2.59(m,3h)；ms:m/z＝484.0(m++1)。[0624]化合物59:1hnmr(cdcl3,300mhz):δ7.90-7.82(m,1h),7.08-6.97(m,3h),6.71-6.68(m,2h),6.59(s,1h),5.91(s,2h),4.27(d,j＝15.9hz,1h),3.69-3.55(m,2h),3.40(s,3h),3.26-3.05(m,3h),2.85-2.59(m,3h)；ms:m/z＝502.0(m++1)。[0625]化合物60:1hnmr(cdcl3,300mhz):δ7.82-7.76(m,2h),7.49-7.41(m,2h),7.01(d,j＝8.7hz,1h),6.72(d,j＝9.0hz,1h),6.70(s,1h),6.58(s,1h),5.91(s,2h),4.20(d,j＝15.9hz,1h),3.61-3.54(m,2h),3.46(s,3h),3.27-3.04(m,3h),2.85-2.55(m,3h),2.45(s,3h)；ms:m/z＝480.0(m++1)。[0626]61.化合物47的制备[0627][0628]向65.0mg(0.2mmol)a在2mldcm和1ml吡啶中的溶液中加入0.22mmolrnco。将混合物在40℃下搅拌6小时。然后通过制备tlc将其纯化，得到标题化合物。[0629]化合物47:1hnmr(cdcl3):δ8.12(br,1h),7.70-7.58(m,2h),7.41-7.28(m,2h),7.04(d,j＝8.7hz,1h),6.86(d,j＝8.4hz,1h),6.76(s,1h),6.58(m,1h),5.94(s,2h),4.26(d,j＝15.9hz,1h),3.85(s,3h),3.71-3.3.57(m,2h),3.36-3.14(m,3h),2.96-2.69(m,3h)。ms:m/z＝513.0(m++1)。[0630]62.化合物48的制备[0631][0632]向a(50mg,0.15mmol)在ch2cl2中的溶液中加入氯甲酸乙酯(0.20mmol)和两滴et3n，然后将混合物在小安瓿中在室温下搅拌3小时。然后通过制备tlc将其纯化，得到标题化合物。[0633]化合物48:1hnmr(cdcl3,300mhz):δ7.01(d,j＝8.1hz,1h),6.83(d,j＝8.4hz,1h),6.58(s,1h),5.91(s,2h),4.36-4.29(m,2h),4.12(d,j＝15.9hz,1h),3.83(s,3h),3.57-3.48(m,2h),3.26-3.11(m,3h),3.68-2.62(m,3h),1.41-1.37(m,3h)；ms:m/z＝398.1(m++1)。[0634]63.化合物54的制备[0635][0636]在室温下，向a(50mg,0.15mmol)在dcm(2ml)和et3n(3滴)中的搅拌溶液中加入b(40μl)。然后将反应混合物加热至40℃并搅拌3小时。当tlc分析表明反应完成时，减压除去溶剂。将残余物用etoac溶解。将该溶液用水洗涤，干燥并浓缩，得到粗产物。将粗物质通过制备tlc进一步纯化，得到20mg化合物54。[0637]化合物54:1hnmr(cdcl3,300mhz):δ8.26-8.23(m,2h),7.68-7.63(m,1h),7.56–7.50(m,2h),7.06(d,j＝9.3hz,1h),6.88(d,j＝8.4hz,1h),6.74(s,1h),6.57(s,1h),5.92(s,2h),4.08(d,j＝14.1hz,1h),3.79(s,3h),3.61-3.47(m,2h),3.28-3.24(m,1h),3.09-3.06(m,2h),2.91-2.81(m,1h),2.64-2.56(m,2h)；ms:m/z＝430.0(m++1)。[0638]64.化合物55的制备[0639][0640]在室温下向a(50mg,0.15mmol)和et3n(3滴)在dcm(2ml)中的搅拌溶液中加入b(40μl)。然后将反应混合物加热至40℃并搅拌3小时。当tlc分析表明反应完成时，减压除去溶剂。将残余物用etoac溶解。将该溶液用水洗涤，干燥并浓缩，得到粗产物。将粗物质通过制备tlc进一步纯化，得到26mg化合物55。[0641]化合物55:1hnmr(cdcl3,300mhz)δ7.46-7.39(m,5h),7.01(d,j＝8.4hz,1h),6.83(d,j＝8.4hz,1h),6.69(s,1h),6.58(s,1h),5.91(s,2h),5.29(s,2h),4.18(d,j＝12.6hz,2h),3.81-3.53(m,2h),3.76(s,3h),3.28-3.18(m,3h),2.94-2.68(m,3h)；ms:m/z＝460.1(m++1)。[0642]65.化合物61的制备[0643][0644]在室温下向a(50mg,0.15mmol)和吡啶(0.5ml)在dcm(2ml)中的搅拌溶液中加入b(20mg,0.17mmol)。然后将反应混合物加热至40℃并搅拌6小时。当tlc分析表明反应完成时，减压除去溶剂。将残余物用etoac溶解。将该溶液用水洗涤，干燥并浓缩，得到粗产物。将粗物质通过制备tlc进一步纯化，得到50mg化合物61。1hnmr(cdcl3,300mhz)δ7.45(d,j＝7.8hz,2h),7.30(t,j＝7.5hz,2h),7.10-7.01(m,2h),6.86(d,j＝8.4hz,1h),6.70(s,1h),6.58(s,1h),5.93-5.92(m,2h),4.32(d,j＝16.5hz,1h),3.83(s,3h),3.72(br,2h),3.30-3.23(m,2h),2.95-2.70(m,4h)；ms:m/z＝445.0(m++1)。[0645]66.化合物62的制备[0646][0647]在室温下向a(50mg,0.15mmol)在dcm(2ml)中的搅拌溶液中加入溴丙烷(21mg,0.17mmol)、cs2co3(65mg,0.20mmol)和ki(25mg,0.15mmol)。然后将反应混合物加热至40℃并搅拌6小时。当tlc分析表明反应完成时，减压除去溶剂。将残余物用etoac溶解。将该溶液用水洗涤，干燥并浓缩，得到粗产物。将粗物质通过制备tlc进一步纯化，得到20mg化合物62。1hnmr(cdcl3,300mhz)δ6.81(dd,j＝8.4hz,21hz,2h),6.72(s,1h),6.59(s,1h),5.91(t,j＝1.5hz,2h),4.27(d,j＝15.6hz,1h),4.0-3.89(m,2h),3.82(s,3h),3.59-3.55(m,2h),3.25-3.19(m,3h),2.88-2.80(m,1h),2.70-2.66(m,2h),1.83-1.76(m,2h),1.04(t,j＝7.2hz,3h)。ms:m/z＝368.1(m++1)。[0648]67.化合物63、65和66的制备[0649][0650]在室温下向a(50mg,0.15mmol)在dcm(2ml)中的搅拌溶液中加入b(0.17mmol)，加入et3n(0.1ml)并搅拌4小时。当tlc分析表明反应完成时，减压除去溶剂。通过制备tlc进一步纯化残余物以提供标题化合物。[0651]化合物63:1hnmr(cdcl3,300mhz)δ8.92(t,j＝2.1hz,1h),8.56-8.54(m,1h),8.39-8.34(m,1h),7.80(t,j＝8.4hz,1h),7.38(d,j＝8.7hz,1h),6.76-6.72(m,2h),6.60(s,1h),5.92(s,2h),4.30(d,j＝15.6hz,1h),3.72(d,j＝15.3hz,1h),3.62-3.59(m,1h),3.50(s,3h),3.28-3.05(m,3h),2.89-2.79(m,1h),2.69-2.60(m,2h)。ms:m/z＝511.0(m++1)。[0652]化合物65:1hnmr(cdcl3,300mhz)δ8.52-8.47(m,2h),8.24-8.20(m,2h),7.11(d,j＝8.4hz,1h),6.94(d,j＝8.4hz,1h),6.92(s,1h),6.68(s,1h),5.96(s,2h),4.05(d,j＝15.9hz,1h),3.50-3.42(m,2h),3.36(s,3h),3.06-2.84(m,2h),2.67-2.42(m,4h)；ms:m/z＝511.0(m++1)。[0653]化合物66:1hnmr(cdcl3,300mhz)δ9.26-9.24(m,1h),8.41-8.12(m,3h),7.65-7.57(m,2h),6.96(d,j＝8.4hz,1h),6.68(s,1h),6.58(d,j＝9.9hz,1h),6.57(s,1h),5.90(s,2h),4.30(d,j＝15.9hz,1h),3.64-3.52(m,2h),3.23-3.00(m,3h),3.02(s,3h),2.83-2.49(m,3h)；ms:m/z＝517.0(m++1)。[0654]68.化合物64的制备[0655][0656]向5.2ga中加入苯硼酸和甲苯。将混合物在回流下加热1小时，将水收集在dean-stark分水器(dean-starktrap)中。将热溶液倒在不锈钢高压容器中的分子筛(3.7g)上。添加多聚甲醛(6.4g)。将高压容器密封并在110℃的油浴中加热48小时。打开高压容器并过滤热溶液。蒸发甲苯，向残余物中加入水。在回流加热2小时后，将混合物冷却至室温并用dcm提取。将溶液干燥并除去溶剂。将残余物用乙醚洗涤，得到2.5gb。[0657]向b(1.0g,5.2mmol)在20ml丙酮中的溶液中加入k2co3(810mg,5.8mmol)，然后加入bnbr(0.7ml,5.8mmol)。将混合物在室温下搅拌过夜。然后将混合物用etoac稀释，用水、盐水洗涤，并用无水na2so4干燥。真空除去溶剂。将残余物通过快速色谱法纯化，得到1.2gc。[0658]向c(200mg,0.7mmol)在6mlmeoh中的溶液中滴加3,4-二甲氧基苯乙胺(0.3ml,1.8mmol)。将混合物在室温下搅拌3小时。将反应混合物用etoac稀释，用h2o、盐水洗涤，用无水na2so4干燥。然后在真空下除去溶剂。用快速色谱法纯化残余物，得到310mgd。[0659]将化合物d(101mg,0.25mmol)悬浮在2ml甲苯中。在氮气下搅拌混合物。然后一次性加入0.15ml磷酰氯，并将混合物在回流下加热2小时。将反应混合物在氮气下冷却。真空蒸发过量的磷酰氯和甲苯。将残余物溶解于甲醇中，然后分批加入100mgnabh4。将混合物在室温下搅拌30分钟。然后除去溶剂，将残余物用etoac稀释，用h2o、盐水洗涤，用无水na2so4干燥。然后真空除去溶剂。用快速色谱法纯化残余物，得到42mge(化合物64)。[0660]化合物64:1hnmr(cdcl3,300mhz),δ7.50-7.30(m,5h),6.86(dd,j＝8.4,23.7hz,2h),6.73(s,1h),6.61(s,1h),5.04(dd,j＝11.4,33.9hz,2h),4.22(d,j＝15.9hz,1h),3.89(s,3h),3.87(s,3h),3.86(s,3h),3.55-3.42(m,2h),3.30-3.11(m,3h),2.89-2.58(m,3h)；ms:m/z＝432.1(m++1)。[0661]69.包括化合物156和120在内的生物素标记化合物的制备[0662](1)156的合成[0663][0664]将34(325mg,1.0mmol)、生物素(245mg,1.0mmol)、dcc(210mg,1.0mmol)和dmap(125mg,1.0mmol)在dmf中的溶液在室温下搅拌过夜。然后将反应混合物用dcm稀释，用水(3次)、盐水洗涤，并用无水na2so4干燥。真空除去溶剂。将残余物通过快速柱硅胶色谱法纯化，然后通过制备tlc纯化，得到15mg标题化合物。[0665]化合物156:1hnmr(cdcl3,300mhz)δ6.99(d,j＝8.4hz,1h),6.81(d,j＝8.4hz,1h),6.70(s,1h),6.57(s,1h),6.00(d,j＝8.1hz,1h),5.90(s,2h),5.35(s,1h),4.47-4.45(m,1h),4.33-4.30(m,1h),3.98(d,j＝15.6hz,1h),3.79(s,3h),3.57-3.54(m,1h),3.43(d,j＝15.6hz,1h),3.24-2.59(m,9h),2.15-1.95(m,2h),1.86-1.53(m,6h)；ms:m/z＝552.1(m++1)。[0666](4)化合物120的制备[0667][0668]将102(30mg,0.06mmol)、生物素(15mg,0.06mmol)、dcc(15mg,0.06mmol)和dmap(10mg,0.08mmol)在dmf中的溶液在室温下搅拌过夜。然后将反应混合物用dcm稀释，用水(3次)、盐水洗涤，并用无水na2so4干燥。真空除去溶剂。将残余物通过快速柱硅胶色谱法纯化，然后通过制备tlc纯化，得到10mg标题化合物。[0669]化合物120:1hnmr(cdcl3,300mhz)δ8.01-7.53(m,5h),7.03(d,j＝8.7hz,1h),6.79(s,2h),6.72(d,j＝8.7hz,1h),5.78(s,1h),5.20(s,1h),4.48-4.46(m,1h),4.34-4.30(m,1h),4.20(d,j＝16.2hz,1h),3.83(s,3h),3.65-3.57(m,2h),3.44(s,1h),3.33-2.58(m,11h),1.89-1.53(m,6h)；ms:m/z＝694.1(m++1)。[0670]70.r1/r2类似物的制备[0671][0672]这部分工作最重要的是各种中间体的制备。几种中间体胺的制备和所需化合物的合成路径如方案2所示。[0673]方案2[0674][0675]对于类似物tm-6，开发了不同的合成路径，如方案3所示。[0676]方案3[0677][0678]此外，将cooh基团引入所需化合物中以提高该系列化合物的溶解度。如方案4所示，用羧酸基团制备了一些具有胺的中间体，例如21和22。[0679]方案4[0680][0681]制备中间体化合物20c的合成路径设计如下：[0682][0683](1)化合物113的制备[0684]方案：[0685][0686]a到b[0687]向a(2.0g,13.1mmol)和k2co3(2.17g,15.7mmol)在100ml丙酮中的混合物中加入ch3ch2br(1.5ml,20.0mmol)。在回流温度下加热一天后，冷却反应混合物。除去丙酮。然后将反应混合物用dcm稀释，用水洗涤，用无水na2so4干燥，蒸发溶剂，将残余物在硅胶色谱上用洗脱液(etoac:pe＝1:8)纯化，得到2.49gb。[0688]b到c[0689]将b(2.49g,13.8mmol)和aconh4(0.16g,1.4mmol)溶解于20mlch3no2中。将混合物在回流温度下搅拌2h。完成后，将反应混合物冷却至室温。真空除去溶剂，残余物用dcm稀释，用水洗涤，用无水na2so4干燥。除去溶剂，得到1.60g的c。[0690]c到d[0691]将在50mlthf中的c(1.60g,7.2mmol)添加到lialh4(1.36g,35.9mmol)在80mlthf中的溶液中。将混合物在回流温度下搅拌8h。完成后，将反应混合物冷却至室温。加入1.4ml水、1.4ml15％naoh(aq)和4.0ml水。过滤固体。除去溶剂并在硅胶色谱上用洗脱液(meoh:dcm＝1:12)纯化，得到0.8g的d。[0692]d到e[0693]将meoh20ml添加到m(300mg,0.9mmol)、d(193mg,1.0mmol)和1mlet3n的混合物中。将所得溶液在回流温度下搅拌8h。然后将反应混合物用dcm稀释，用水、aq.nacl(nacl水溶液)洗涤，用无水na2so4干燥。真空除去溶剂；将残余物通过硅胶色谱法纯化，得到300mg的e。[0694]e到化合物113[0695]将e(150mg,0.3mmol)和pocl3(1ml)在甲苯(5ml)中的混合物在120℃下搅拌2h。通过tlc(dcm:meoh＝10:1,v/v)监测反应。完成后，将反应混合物冷却至室温。真空除去溶剂。在5℃下分批加入53mgnabh4。将反应混合物在室温下再搅拌30分钟。除去溶剂，将残余物用dcm稀释。将溶液用nacl水溶液、水洗涤，用无水na2so4干燥。真空除去溶剂；将残余物通过硅胶色谱法纯化，得到20mg化合物113。[0696]化合物113:1hnmr(cdcl3,300mhz)δ7.99-8.02(m,2h),7.65-7.71(m,1h),7.54-7.60(m,2h),7.03(d,j＝8.4hz,1h),6.70-6.73(m,2h),6.62(s,1h),4.21(d,j＝15.9hz,1h),4.05-4.15(m,2h),3.86(s,3h),3.56-3.63(m,2h),3.44(s,3h),3.23-3.30(m,1h),3.07-3.16(m,2h),2.78-2.89(m,1h),2.56-2.68(m,2h),1.47-1.49(t,3h)。ms:m/z＝496.1(m++1)。[0697](2)化合物114的制备[0698][0699]a→b[0700]将硝酸(2.5ml,40mmol)在乙酸(2ml)中的溶液缓慢滴加到(4-羟基苯基)乙酸(5.0g,33mmol)在乙酸(23ml)中的在冰浴中冷却的溶液中，以使反应液的温度不超过20℃。将反应液搅拌2h后，滴加水(100ml)，通过过滤收集沉淀的晶体。将固体从ea/pe中重结晶得到b(5.0g)。[0701]b→c[0702]在室温下将(4-羟基-3-硝基苯基)乙酸(1.3g，6.6mmol)溶解于socl2(15ml)中并搅拌10min。然后将反应液加热回流并搅拌2小时。除去溶剂并将残余物溶解于thf中并再次浓缩。向残余物中加入氨水溶液(10ml25％溶液)和thf(5ml)，将混合物在室温下搅拌30min。将获得的悬浮液用水稀释，减压蒸发thf。通过过滤收集沉淀，用水洗涤并减压干燥，得到1.1g的c。[0703]c→d[0704]将c(1.1g,5.1mmol)和碳酸钾(1.1g,8.0mmol)悬浮于dmf(20ml)中并在室温下加入甲基碘(0.44ml,7.1ml)。将混合物搅拌3h。反应混合物用etoac稀释并用水洗涤。浓缩有机层得到1.0g的d。[0705]d→e[0706]在室温下，向d(1.0g,4.8mmol)在thf(5ml)中的溶液中缓慢加入1.0m硼烷-thf溶液(15ml)，并将混合物回流5h。浓缩反应混合物，将残余物冷却至室温并加入甲醇(20ml)。将混合物进一步回流过夜。将反应混合物用etoac和水提取，收集有机层并浓缩，得到700mge。[0707]e+f→g[0708]在20℃下向e(1.6g,8.2mmol)、f(3.0g,9.0mmol)在meoh(40ml)中的溶液中加入et3n(1.4ml,9.8mmol)并将溶液搅拌过夜。当tlc分析表明反应完成时，将反应混合物用etoac稀释，并用水洗涤。收集有机层，干燥，浓缩并通过色谱法纯化，得到3.0g的g。[0709]g→h[0710]将g(200mg,0.4mmol)和pd/c(50mg)在meoh(4ml)中的反应混合物在室温和h2下搅拌8h。然后滤出固体，浓缩滤液得到粗产物。通过制备tlc进一步纯化残余物，得到150mg的h。[0711]h→i[0712]在室温下向h(150mg,0.3mmol)在meoh中的搅拌溶液中加入hcho.h2o(96mg,1.2mmol)，保持1h。将反应液冷却至0℃，加入nabh3cn(96mg,1.5mmol)并在室温下搅拌30min。当tlc分析表明反应完成时，加入水和etoac，收集有机层，干燥，浓缩并通过色谱法纯化，得到50mg的i。[0713]i→化合物114[0714]在环境温度下向i(50mg,0.1mmol)在甲苯(3ml)中的搅拌溶液中加入pocl3(20μl)。将反应混合物搅拌回流2h。当反应完成时，蒸发掉溶剂和过量的pocl3。将残余物倒入冰水中并用na2co3调节ph》7。用etoac提取溶液，有机层并浓缩干燥。将所得残余物溶解于(3ml)中并在0℃下加入nabh4(7.6mg,0.2mmol)。在该温度下将反应混合物搅拌30min。tlc分析表明反应完成。除去溶剂并用etoac和水提取残余物。将有机层干燥、浓缩并通过色谱法纯化，得到15mg化合物114。[0715]化合物114:1hnmr(cdcl3,300mhz)δ8.02-7.98(m,2h),7.72-7.65(m,1h),7.59-7.54(m,2h),7.04(d,j＝8.4hz,1h),7.03(d,j＝8.4hz,1h),6.57(s,1h),6.32(s,1h),4.28(d,j＝18.3hz,1h),3.84(s,3h),3.73(s,1h),3.46(s,3h),3.33-3.26(m,1h),3.19-3.10(m,2h),2.85(m,3h),2.71-2.66(m,2h),2.24-2.17(m,1h)。ms:m/z＝481.1(m++1)。[0716](3)化合物115的制备[0717][0718]a→b[0719]将a(5.0g,36.2mmol)、碳酸铯(26g,72.4mmol)、1,2-二溴乙烷(7.0ml,72.4mmol)和无水dmf(50ml)在70℃下搅拌16h。冷却后，减压蒸发溶剂，将残余物进行快速色谱法(sio2柱用ch2cl2洗脱)，从而分离出5.8g的b。[0720]b→c[0721]将b(500mg,3.0mmol)和aconh4(23mg,0.3mmol)溶解于ch3no2(5ml)中。将混合物在回流温度下搅拌2h。完成后，将反应混合物冷却至室温。真空除去溶剂，将残余物用dcm稀释，用水洗涤，用无水na2so4干燥。除去溶剂，得到600mg的c。[0722]c→d[0723]将在thf(5ml)中的c(600mg,2.9mmol)添加到lialh4(550mg,14.5mmol)在thf(5ml)中的溶液中。将混合物在回流温度下搅拌8h。完成后，将反应混合物冷却至室温。加入0.5ml水、0.5ml25％naoh(aq)和1.5ml水。过滤固体。除去溶剂并在硅胶色谱上用洗脱液(meoh:dcm＝1:12)纯化残余物，得到500mg的d。[0724]d+e→f[0725]在20℃下向d(250mg,1.4mmol)、e(520mg,1.5mmol)在meoh(15ml)中的溶液中加入et3n(250μl,1.7mmol)，并将溶液搅拌过夜。当tlc分析表明反应完成时，加入水，收集有机层，干燥，浓缩，通过色谱法纯化，得到600mg的f。[0726]f→化合物115[0727]在环境温度下向f(100mg,0.2mmol)在甲苯(5ml)中的搅拌溶液中加入pocl3(30μl)。将反应混合物搅拌回流2h。当反应完成时，蒸发掉溶剂和过量的pocl3。将残余物倒入冰水中并用na2co3将ph调节至》7。用etoac提取溶液，将有机层干燥、浓缩并溶解于meoh(5ml)中，在0℃下加入nabh4(15mg,0.4mmol)。在该温度下将反应混合物搅拌30min。tlc分析表明反应完成。除去溶剂并用etoac和水提取残余物。将有机层干燥、浓缩并通过色谱法纯化，得到30mg化合物115。[0728]化合物115：1hnmr(cdcl3,300mhz)δ8.01-7.98(m,2h),7.70-7.65(m,1h),7.59-7.54(m,2h),7.02(d,j＝8.4hz,1h),6.73-6.70(m,2h),6.63(s,1h),4.28-4.24(m,5h),3.72-3.62(m,2h),3.44(s,3h),3.27(dd,j＝3.9,16.2hz1h),3.20-3.07(m,2h),2.95-2.82(m,1h),2.70-2.65(m,2h)。ms:m/z＝480.0(m++1)。[0729](4)化合物116的制备[0730][0731]将化合物a(200mg,0.41mmol)悬浮于5ml甲苯中。在氮气下搅拌混合物。然后一次性加入0.5ml磷酰氯，并将混合物在回流下加热2h。将反应混合物在氮气下冷却。真空蒸发过量的磷酰氯和甲苯。将残余物溶解于甲醇中，分批加入100mgnabh4。将混合物在室温下搅拌30min。除去溶剂，将残余物用etoac稀释，用h2o和盐水洗涤，并用无水na2so4干燥。真空除去溶剂。用快速色谱法纯化残余物，得到120mg化合物116。[0732]化合物116:1hnmr(cdcl3,300mhz),δ＝8.02-7.99(m,1h),7.70-7-65(m,1h),7.59-7.54(m,2h),7.16(d,j＝8.7hz),7.02(d,j＝8.4hz),6.80-6.65(m,3h),4.22(d,j＝15.9hz,1h),3.80(s,3h),3.63-3.57(m,2h),3.44(s,3h),3.34-3.12(m,3h),2.87-2.58(m,3h)；ms:m/z＝452.1(m++1)。[0733](5)化合物117的制备[0734][0735]a到b[0736]将a(5.0g,32.9mmol)和2-氯-2,2-二氟乙酸乙酯(5.7g,36.0mmol)、碳酸钾(4.5g,32.9mmol)在无水dmf(90ml)中的混合物在60℃下在n2气氛下搅拌6小时。然后将反应在室温下再搅拌60小时。向混合物中加入乙醚(200ml)并分离层。将有机相用水(100ml*3)洗涤，用na2so4燥，蒸发并在硅胶色谱上用洗脱液(etoac:pe＝1:12)纯化，得到b2.3g。[0737]b到c[0738]将b(500mg,2.48mmol)和aconh4(19mg,0.25mmol)溶解于15mlch3no2中。将混合物在回流温度下搅拌2h。完成后，将反应混合物冷却至室温。真空除去溶剂，将残余物用dcm稀释，用水洗涤，用无水na2so4干燥。除去溶剂，得到590mg的c。[0739]c到d[0740]将5mlthf中的c(300mg,1.2mmol)添加到lialh4(232mg,6.1mmol)在10mlthf中的溶液中。将混合物在回流温度下搅拌8h。完成后，将反应混合物冷却至室温。加入1.4ml水、1.4ml15％naoh(水溶液)和4.0ml水。过滤固体。除去溶剂并在硅胶色谱上用洗脱液(meoh:dcm＝1:10)纯化，得到85mg的d。[0741]d到e[0742]将10mlmeoh添加到x(147mg,0.4mmol)、d(80mg,0.4mmol)和1mlet3n的混合物中。将所得溶液在回流温度下搅拌8h。然后将反应混合物用dcm稀释，用水、aq.nacl(nacl水溶液)洗涤，用无水na2so4干燥。真空除去溶剂；将残余物通过硅胶色谱法纯化，得到132mg的e。[0743]e到化合物117[0744]将e(130mg,0.2mmol)和pocl3(1ml)在甲苯(10ml)中的混合物在120℃下搅拌2h。通过tlc(dcm:meoh＝10:1,v/v)监测反应。完成后，将反应混合物冷却至室温。真空除去溶剂。在5℃下分批加入46mgnabh4。将反应混合物在室温下再搅拌30分钟。除去溶剂，用dcm稀释残余物。将溶液用nacl水溶液、水洗涤，用无水na2so4干燥。真空除去溶剂；将残余物通过硅胶色谱法纯化，得到20mg化合物117。[0745]化合物117:1hnmr(cdcl3,300mhz)δ7.97-8.02(m,2h),7.54-7.71(m,3h),6.71-7.05(m,4h),6.54(t,j＝75.3,1h),4.22(d,j＝15.9hz,1h),3.88(s,3h),3.60-3.66(m,2h),3.45(s,3h),3.24-3.31(m,1h),3.04-3.16(m,2h),2.81-2.90(m,1h),2.57-2.72(m,2h)。ms:m/z＝518.1(m++1)。[0746](6)化合物118的制备[0747][0748]a→b[0749]在室温下，向a(150mg,0.3mmol)在meoh中的搅拌溶液中加入hcho.h2o(96mg,1.2mmol)，保持3h。将反应液冷却至0℃，加入nabh3cn(96mg,1.5mmol)并在室温下搅拌1h。当tlc分析表明反应完成时，加入水和etoac，收集有机层，干燥，浓缩，并通过色谱法纯化，得到100mg的b。[0750]b→化合物118[0751]在环境温度下向i(100mg,0.19mmol)在甲苯(3ml)中的搅拌溶液中加入pocl3(50μl)。将反应混合物搅拌回流2h。当反应完成时，蒸发掉溶剂和过量的pocl3。将残余物倒入冰水中并用na2co3调节至ph》7。用etoac提取溶液，将有机层干燥、浓缩并溶解于meoh(3ml)中，在0℃下加入nabh4(22.8mg,0.6mmol)。在该温度下将反应混合物搅拌30min。tlc分析表明反应完成。除去溶剂并用etoac和水提取残余物。将有机层干燥、浓缩并通过色谱法纯化，得到10mg化合物118。[0752]化合物118:1hnmr(cdcl3,300mhz)δ8.02-7.99(m,2h),7.68-7.66(m,1h),7.58-7.54(m,2h),7.04(d,j＝8.4hz,1h),6.73-6.67(s,3h),4.21(d,j＝15.9hz,1h),3.89(s,3h),3.61-3.56(m,2h),3.45(s,3h),3.32-3.27(m,1h),3.13-3.07(m,2h),2.90-2.83(m,1h),2.78(s,6h),2.67-2.57(m,2h)。ms:m/z＝495.1(m++1)。[0753](7)化合物119的制备[0754][0755]a→b[0756]在室温下向a(150mg,0.3mmol)在dcm(3ml)中的搅拌溶液中加入et3n(100μl)、氯甲酸乙酯(100μl)，保持3h。当tlc分析表明反应完成时，加入水，收集有机层，干燥，浓缩，所得残余物通过色谱法纯化，得到100mg的b。[0757]b→化合物119[0758]在环境温度下向i(100mg,0.17mmol)在甲苯(3ml)中的搅拌溶液中加入pocl3(50μl)。将反应混合物搅拌回流2h。当反应完成时，蒸发掉溶剂和过量的pocl3。将残余物倒入冰水中并用na2co3调节至ph》7。用etoac提取溶液，将有机层干燥、浓缩并溶解在meoh(3ml)中，在0℃下加入nabh4(22.8mg,0.6mmol)。在该温度下将反应混合物搅拌30min。tlc分析表明反应完成。除去溶剂并用etoac和水提取残余物。将有机层干燥、浓缩并通过色谱法纯化，得到70mg化合物119。[0759]化合物119:1hnmr(cdcl3,300mhz)δ7.99-7.96(m,2h),7.86(s,1h),7.68-7.66(m,1h),7.59-7.54(m,2h),7.17(s,1h),7.05(d,j＝8.7hz,1h),6.76(d,j＝8.7hz,1h),6.68(s,1h),4.40(d,j＝15.3hz,1h),4.22(q,j＝7.2,14.1hz,2h),4.11-4.04(m,1h),3.97-3.91(m,1h),3.85(s,3h),3.47(s,3h),3.43-3.32(m,2h),3.22-3.13(m,1h),3.05-2.84(m,3h)。ms:m/z＝539.1(m++1)。[0760](8)化合物121的制备[0761][0762]a+b→c[0763]在20℃下，向a(67.5mg,0.5mmol)、b(167mg,0.5mmol)在meoh(5ml)中的溶液中加入et3n(83μl,0.6mmol)，并将溶液加热回流过夜。当tlc分析表明反应完成时，加入水和etoac，收集有机层，干燥，浓缩，残余物通过色谱法纯化，得到190mg的c。[0764]c→化合物121[0765]在环境温度下向c(94mg,0.2mmol)在甲苯(5ml)中的搅拌溶液中加入pocl3(30μl)。将反应混合物搅拌回流2h。当反应完成时，蒸发掉溶剂和过量的pocl3。将残余物倒入冰水中并用na2co3调节至ph》7。用etoac提取溶液，将有机层干燥、浓缩并溶解在meoh(5ml)中，在0℃下加入nabh4(15mg,0.4mmol)。在该温度下将反应混合物搅拌10min。tlc分析表明反应完成。除去溶剂并用etoac和水提取残余物。将有机层干燥、浓缩并通过色谱法纯化，得到30mg化合物121。[0766]化合物121:1hnmr(cdcl3,300mhz)δ8.02-7.99(m,2h),7.68-7.65(m,1h),7.59-7.54(m,2h),7.14(d,j＝8.1hz,1h),7.04-6.96(m,3h),6.72(d,j＝8.4hz,1h),4.22(d,j＝15.9hz,1h),3.65-3.58(m,2h),3.44(s,3h),3.32(dd,j＝4.2,16.2hz1h),3.16-3.11(m,2h),2.88-2.79(m,1h),2.75-2.57(m,2h),2.32(s,3h)。ms:m/z＝436.1(m++1)。[0767](9)化合物122的制备[0768]方案[0769][0770]程序[0771]a到b[0772]将100mlmeoh添加到a(2.0g,6.0mmol)、x(2.1g,7.2mmol)和3mlet3n的混合物中。将所得溶液在回流温度下搅拌5h。然后将反应混合物用dcm稀释，用水、nacl水溶液洗涤，并用无水na2so4干燥。真空除去溶剂；残余物通过硅胶色谱法纯化，得到3.08g的b。[0773]b到c[0774]在120℃下将b(2.7g,4.6mmol)和pocl3(4ml)在甲苯(50ml)中的混合物搅拌2h。通过tlc(dcm:meoh＝10:1,v/v)监测反应。完成后，将反应混合物冷却至室温。真空除去溶剂。在5℃下分批加入874mgnabh4。将反应混合物在室温下再搅拌30分钟。除去溶剂，用dcm稀释残余物。将溶液用nacl水溶液、水洗涤，并用无水na2so4干燥。真空除去溶剂；残余物通过硅胶色谱法纯化，得到1g的c。[0775]c到化合物122[0776]在20atm(大气压)h2下，向c(600mg,1.1mmol)在meoh(50ml)中的搅拌溶液中加入pd/c(120mg)。将反应混合物在75℃下搅拌过夜。然后滤出固体。真空除去溶剂；残余物通过硅胶色谱法纯化，得到200mg化合物122。[0777]化合物122:1hnmr(cdcl3,300mhz)δ7.98-8.02(m,2h),7.54-7.71(m,3h),7.02(d,j＝8.4hz,1h),6.80(s,1h),6.71(d,j＝8.4hz,1h),6.60(s,1h),5.50(s,1h),4.21(d,j＝15.9hz,1h),3.88(s,3h),3.54-3.62(m,2h),3.42(s,3h),3.24-3.30(m,1h),3.10-3.15(m,2h),2.80-2.85(m,1h),2.60-2.64(m,2h)。ms:m/z＝468.1(m++1)。[0778](10)化合物123和化合物124的制备[0779][0780]a到b[0781]在20℃下向a(2.4g,9.0mmol)和苯磺酸盐c(2.7g,8.1mmol)在meoh(20ml)中的溶液中加入et3n(3ml)并将溶液加热回流过夜。当tlc分析表明反应完成时，加入水和etoac，收集有机层，干燥，浓缩，通过色谱法纯化，得到3g的b。[0782]b到化合物123[0783]在环境温度下向b(1g,1.8mmol)在甲苯(60ml)中的搅拌溶液中加入pocl3(3ml)。将反应混合物搅拌回流2h。当反应完成时，蒸发掉溶剂和过量的pocl3。将残余物倒入冰水中并用na2co3调节至ph》7。用etoac提取溶液，干燥并浓缩有机层。将所得残余物溶解在meoh(20ml)中，并在0℃加入nabh4(400mg)。在该温度下将反应混合物搅拌10min。tlc分析表明反应完成。除去溶剂并用etoac和水提取残余物。将有机层干燥、浓缩，并通过色谱法纯化残余物，得到200mg化合物123。[0784]化合物123到化合物124[0785]向化合物123(160mg)在meoh(50ml)中的溶液中加入10％pd/c(20mg)。内压为2mpa，将反应在70℃下搅拌过夜。停止反应后，过滤并除去溶剂。通过制备tlc纯化，得到约30mg的化合物124。[0786]化合物123:1hnmr(cdcl3,300mhz)δ7.99-8.01(d,j＝9hz,1h),7.68-7.65(m,1h),7.59-7.54(m,2h),7.46-7.32(m,5h),7.18-7.15(d,j＝9hz,1h),6.01-6.04(d,j＝9hz,1h),6.87-6.84(m,1h),6.70-6.75(m,1h),5.05(s,2h),4.20-4.26(d,j＝9hz,1h),3.59-3.64(m,2h),3.44(s,3h),3.32(dd,j＝4.2,16.2hz1h),3.16-3.11(m,2h),2.88-2.58(m,3h)。ms:m/z＝528.1(m++1)。[0787]化合物124:1hnmr(cdcl3,300mhz)δ7.99-8.01(d,j＝9hz,1h),7.68-7.65(m,1h),7.59-7.54(m,2h),7.18-7.15(d,j＝9hz,1h),6.01-6.04(d,j＝9hz,1h),6.87-6.84(m,1h),6.70-6.75(m,1h),4.20-4.26(d,j＝9hz,1h),3.59-3.64(m,2h),3.44(s,3h),3.32(dd,j＝4.2,16.2hz1h),3.16-3.11(m,2h),2.88-2.58(m,3h)。ms:m/z＝438.1(m++1)。[0788](11)化合物125的制备[0789][0790]化合物122到化合物125:[0791]向化合物122(30mg,0.06mmol)和k2co3(8mg,0.06mmol)在dmf(5ml)中的搅拌混合物中加入2-溴乙酸乙酯(9μl,0.08mmol)。将反应混合物在室温下搅拌过夜。除去溶剂，用dcm稀释残余物。将该溶液用水、nacl书溶液洗涤，用无水na2so4干燥。真空除去溶剂；残余物通过硅胶色谱法纯化，得到10mg化合物125。[0792]化合物125:1hnmr(cdcl3,300mhz)δ7.98-8.02(m,2h),7.54-7.71(m,3h),7.01(d,j＝8.4hz,1h),6.64-6.75(m,3h),4.68(s,2h),4.26(q,j＝7.1hz,2h),4.17(d,j＝15.1hz,1h),3.57(s,3h),3.54-3.64(m,2h),3.43(s,3h),3.07-3.27(m,3h),2.57-2.85(m,3h),1.31(t,j＝7.2hz,3h)。ms:m/z＝554.1(m++1)。[0793](12)化合物126的制备[0794]方案[0795][0796]向化合物102(200mg,0.43mmol)和k2co3(70mg,0.50mmol)在dmf(2ml)中的搅拌混合物中加入2-溴乙酸乙酯(50μl,0.45mmol)。将反应混合物在室温下搅拌过夜。真空除去溶剂，用dcm稀释残余物。将该溶液用水、盐水洗涤，并用无水na2so4干燥。真空除去溶剂；残余物通过硅胶色谱法纯化，得到160mg化合物125。[0797]化合物125:1hnmr(cdcl3,300mhz)δ8.01-7.98(m,2h),7.67-7.53(m,3h),7.02(d,j＝8.3hz,1h),6.73-6.70(m,2h),6.56(s,1h),4.66(s,2h),4.26(q,j＝7.1hz2h),4.17(d,j＝15.1hz,1h),3.88(s,3h),3.64-3.53(m,2h),3.43(s,3h),3.28-3.01(m,3h),2.85-2.60(m,3h),1.28(t,j＝7.2hz,3h)。ms:m/z＝554.1(m++1)。[0798](12)化合物127的制备[0799][0800]a到b[0801]在20℃下向a(240mg,1.4mmol)和上述苯磺酸盐(400mg,1.1mmol)在meoh(20ml)中的溶液中加入et3n(0.5ml)，然后将溶液加热回流过夜。当tlc分析表明反应完成时，加入水和etoac，收集有机层，干燥，浓缩，并通过色谱法纯化，得到500mg的b。[0802]b到化合物127[0803]在环境温度下向b(400mg,0.75mmol)在甲苯(60ml)中的搅拌溶液中加入pocl3(2ml)。将反应混合物搅拌回流2h。当反应完成时，蒸发掉溶剂和过量的pocl3。将残余物倒入冰水中并用na2co3调节至ph》7。用etoac提取溶液，将有机层干燥、浓缩并溶解在meoh(20ml)中，在0℃下加入nabh4(200mg)。在该温度下将反应混合物搅拌10min。tlc分析表明反应完成。除去溶剂并用etoac和水提取残余物。将有机层干燥、浓缩并通过色谱法纯化，得到130mg化合物127。[0804]化合物127:1hnmr(cdcl3,300mhz)δ7.82-7.79(m,2h),7.75-7.71(m,1h),7.60-7.52(m,1h),7.42-7.36(m,1h),7.07-7.04(dd,j＝9hz,1h),6.71-6.75(m,2h),6.62(s,1h),4.26-4.22(d,j＝12hz,1h),3.89(s,3h),3.87(s,3h),3.67-3.59(m,2h),3.49(s,3h),3.32-3.26(dd,j＝12hz,1h),3.19-3.08(m,2h),2.88-2.79(m,1h),2.70-2.63(m,2h)。ms:m/z＝500.1(m++1)。[0805](13)化合物128的制备(300μl)。将反应混合物搅拌回流2h。当反应完成时，蒸发掉溶剂和过量的pocl3。将残余物倒入冰水中并用na2co3调节至ph》7。用etoac提取溶液，干燥并浓缩有机层。将所得残余物溶解在meoh(5ml)中，并在0℃下加入nabh4(86mg,2.26mmol)。在该温度下将反应混合物搅拌30min。tlc分析表明反应完成。除去溶剂并用etoac和水提取残余物。将有机层干燥、浓缩并通过色谱法纯化，得到70mg化合物129。[0818]化合物129:1hnmr(cdcl3,300mhz)δ7.80-7.77(m,1h),7.72-7.69(m,1h),7.59-7.55(m,1h),7.41-7.35(m,1h),7.03(d,j＝8.4hz,1h),6.76-6.72(m,2h),6.63(s,1h),4.34(d,j＝15.6hz,1h),4.24-4.20(m,4h),3.78-3.70(m,2h),3.48(s,3h),3.33-3.26(m,2h),3.14-3.08(m,1h),2.96-2.87(m,1h),2.74-2.69(s,2h)。ms:m/z＝498.1(m++1)。[0819](15)化合物130的制备[0820][0821]a+b→c[0822]在20℃下向a(115mg,0.85mmol)、b(300mg,0.85mmol)在meoh(5ml)中的溶液中加入et3n(130μl,0.94mmol)，并将溶液加热回流过夜。当tlc分析表明反应完成时，加入水和etoac，收集有机层，干燥，浓缩，并通过色谱法纯化，得到300mg的c。[0823]c→化合物130[0824]在环境温度下，向c(300mg,0.62mmol)在甲苯(5ml)中的搅拌溶液中加入pocl3(300μl)。将反应混合物搅拌回流2h。当反应完成时，蒸发掉溶剂和过量的pocl3。将残余物倒入冰水中并用na2co3调节至ph》7。用etoac提取溶液，干燥并浓缩有机层。将所得残余物溶解于meoh(5ml)中，并在0℃下加入nabh4(94mg,2.48mmol)。在该温度下反应混合物搅拌10min。tlc分析表明反应完成。除去溶剂并用etoac和水提取残余物。将有机层干燥、浓缩并通过色谱法纯化，得到180mg化合物130。[0825]化合物130:1hnmr(cdcl3,300mhz)δ7.82-7.84(m,1h),7.73-7.69(m,1h),7.60-7.53(m,1h),7.41-7.35(m,1h),7.26-6.97(m,4h),6.76(d,j＝8.7hz,1h),4.40(d,j＝15.9hz,1h),3.94-3.81(m,2h),3.49(s,3h),3.43-3.36(m,2h),3.25-3.21(m,1h),3.01-2.80(m,3h),2.31(s,3h)。ms:m/z＝454.1(m++1)。[0826](16)化合物131和化合物132的制备[0827][0828]a+b→c[0829]在20℃下向a(3.1g,15mmol)和b(5.0g,15mmol)在meoh(80ml)中的溶液中加入et3n(2.5ml,18mmol)，并将溶液加热回流过夜。当tlc分析表明反应完成时，加入水和etoac，收集有机层，干燥，浓缩，并通过色谱法纯化，得到6.5g的c。[0830]c→化合物131[0831]在环境温度下向c(5.4g,10mmol)在甲苯(50ml)中的搅拌溶液中加入pocl3(2ml)。将反应混合物搅拌回流2h。当反应完成时，蒸发掉溶剂和过量的pocl3。将残余物倒入冰水中并用na2co3调节至ph》7。用etoac提取溶液，将有机层干燥、浓缩并溶解在meoh(50ml)中，在0℃下加入nabh4(1.6g,40mmol)。在该温度下反应将混合物搅拌10min。tlc分析表明反应完成。除去溶剂并用etoac和水提取残余物。将有机层干燥、浓缩并通过色谱法纯化，得到4.0g化合物131。[0832]化合物131→化合物132[0833]在室温下向131(509mg,1mmol)在thf(5ml)中的搅拌溶液中缓慢加入lah(114mg,3mmol)，保持2h。tlc分析表明反应完成。依次加入水(0.1ml)、naoh(25％水溶液，0.1ml)和水(0.3ml)，过滤混合物，浓缩溶液并用etoac和水提取。将有机层干燥、浓缩并通过色谱法纯化，得到430mg化合物132。[0834]化合物131:1hnmr(cdcl3,300mhz)δ8.01-7.98(m,2h),7.72-7.65(m,2h),7.59-7.53(m,2h),7.03(d,j＝8.4hz,1h),6.72-6.70(m,2h),4.24(d,j＝15.9hz,1h),3.90(s,3h),3.89(s,3h),3.65-3.57(m,2h),3.41(s,3h),3.39-3.33(m,1h),3.23-3.13(m,2h),2.85-2.75(m,2h),2.67-2.58(m,1h)。ms:m/z＝510.1(m++1)。[0835]化合物132:1hnmr(cdcl3,300mhz)δ8.01-7.98(m,2h),7.70-7.65(m,1h),7.59-7.54(m,2h),7.14(s,1h),7.02(d,j＝8.7hz,1h),6.71(d,j＝8.7hz,1h),6.63(s,1h),4.68-4.66(m,2h),4.22(d,j＝15.9hz,1h),3.85(s,3h),3.64-3.57(m,2h),3.41(s,3h),3.36-3.30(m,1h),3.17-3.12(m,2h),2.85-2.57(m,3h),2.35-2.29(m,1h)。ms:m/z＝482.1(m++1)。[0836](17)化合物133的制备[0837][0838]a→133[0839]在环境温度下，向a(88mg,0.2mmol)在5ml无水dmf中的溶液中加入0.1ml溴乙烷和k2co3(100mg)。将反应混合物在100℃下搅拌加热过夜。当反应完成时，将反应混合物冷却并通过真空除去溶剂。将残余物用dcm提取，并通过制备tlc纯化，得到约30mg化合物133(pe:ea＝3:1)。[0840]化合物133:1hnmr(cdcl3,300mhz)δ8.01-7.98(d,j＝9hz,2h),7.70-7.65(m,1h),7.59-7.54(m,2h),7.14(d,j＝8.4hz,1h),7.02(d,j＝8.4hz,1h),6.79-6.65(m,3h),4.27-4.21(d,j＝18hz,1h),4.06-3.99(m,2h),3.65-3.60(m,2h),3.44(s,3h),3.29-3.28(m,1h),3.17-3.14(m,2h),2.75-2.63(m,3h),1.43-1.38(t,3h)。ms:m/z＝466.1(m++1)。[0841](18)化合物134的制备[0842]方案[0843][0844]a→化合物134[0845]在环境温度下向白色固体a(130mg,0.28mmol)中加入pocl3(300μl)。将反应混合物搅拌回流2h。当反应完成时，蒸发掉过量的pocl3。将残余物倒入冰水中并用na2co3调节至ph》7。用etoac提取溶液，将有机层干燥、浓缩并溶解在meoh(5ml)中，然后在0℃下加入nabh4(86mg,2.26mmol)。在该温度下将反应混合物搅拌30min。tlc分析表明反应完成。除去溶剂并用etoac和水提取残余物。将有机层干燥、浓缩并通过色谱法纯化，得到10mg化合物134。[0846]化合物134:1hnmr(cdcl3,300mhz)δ8.02-7.99(d,j＝9hz,2h),7.68-7.66(m,1h),7.59-7.57(m,2h),7.26-7.13(m,4h),7.03(d,j＝8.4hz,1h),6.74(m,j＝8.4hz,1h),4.30-4021(d,j＝15.6hz,1h),3.72-3.65(m,2h),3.44(s,3h),3.37-3.33(m,1h),3.20-3.16(m,2h),2.88-2.74(m,3h)。ms:m/z＝422.1(m++1)。[0847](19)化合物135和化合物136的制备[0848][0849]化合物131→化合物135[0850]在室温下向naoh(400mg,10mmol)在水(4ml)和丙酮(2ml)中的搅拌溶液中加入化合物131(400mg,0.78mmol)，然后加热回流2h。当tlc分析表明反应完成时，在室温下用浓hcl(conc.hcl)将反应液调节至ph＝3。将混合物用etoac提取，干燥，浓缩，并通过硅胶纯化，得到230mg化合物135。[0851]化合物135→化合物136[0852]在室温下将化合物135(49.5mg,0.1mmol)、二甲胺盐酸盐(16.3mg,0.2mmol)、edci(38.4mg,0.2mmol)和三乙胺(55μl,0.4mmol)的混合物添加到dcm(5ml)中，并搅拌过夜。当tlc分析表明完成时，将混合物浓缩，用etoac提取，干燥，浓缩，并通过硅胶纯化，得到30mg化合物136。[0853]化合物135:1hnmr(dmso-d6,300mhz)δ11.74(s,1h),7.96(d,j＝7.2hz,2h),7.89-7.84(m,1h),7.75-7.70(m,3h),7.31(d,j＝8.4hz,1h),7.12-7.04(m,2h),4.864.83(m,1h),4.72(d,j＝15.6hz,1h),4.54-4.51(m,1h),3.95-3.81(m,5h),3.59-3.43(m,2h),3.38(s,3h),3.16-3.03(m,2h)。ms:m/z＝494.0(m+-1)。[0854]化合物136:1hnmr(cdcl3,300mhz)δ8.00-7.97(m,2h),7.69-7.64(m,1h),7.58-7.53(m,2h),7.13(s,1h),6.99(d,j＝8.7hz,1h),6.70(d,j＝8.7hz,1h),6.63(s,1h),4.24(d,j＝15.9hz,1h),3.81(s,3h),3.64-3.61(m,2h),3.41(s,3h),3.30(dd,j＝3.9,16.2hz,1h),3.19-3.14(m,2h),3.11(s,3h),2.87(s,3h),2.84-2.60(m,3h)。ms:m/z＝523.1(m++1)。[0855](20)化合物137的制备[0856][0857]化合物135→化合物137[0858]在环境温度下向135(49.5mg,0.1mmol)和dmf(2滴)在dcm(2ml)中的搅拌溶液中滴加零烷(zeroane,1.0ml)，然后加热回流1h。将反应液浓缩并重新溶解于dcm(1.5ml)中并添加到dcm(1.5ml)中的2-氨基乙-1-醇(12μl,0.2mmol)中，并在室温下保持2h。当tlc分析表明反应完成时，将混合物用dcm提取，用水洗涤，干燥，浓缩，并通过硅胶纯化，得到30mg化合物137。[0859]化合物137:1hnmr(cdcl3,300mhz)δ8.32(t,j＝5.7hz,1h),8.11(s,1h),7.98(d,j＝7.8hz,2h),7.67(t,j＝7.5hz,1h),7.55(t,j＝8.1hz,2h),7.01(d,j＝8.1hz,1h),6.71-6.68(m,2h),4.25(d,j＝15.6hz,1h),3.98(s,3h),3.84-3.80(m,2h),3.65-3.60(m,4h),3.50-3.42(m,1h),3.38(s,3h),3.25-3.14(m,2h),2.84-2.75(m,2h),2.67-2.59(m,1h)。ms:m/z＝539.1(m++1)。[0860](21)化合物138的制备[0861][0862]将化合物a(0.35mmol)溶解于5mletoh中，并向其滴加5ml浓hcl。将反应混合物回流2h。然后将其用饱和nahco3水溶液中和并用etoac提取。将有机提取物用无水na2so4干燥并蒸发，得到油状残余物，将其用硅胶纯化得到化合物138。[0863]化合物138:1hnmr(cdcl3,300mhz)δ＝8.02-7.99(m,2h),7.71-7.66(m,2h),7.60-7.54(m,2h),7.03(d,j＝8.4hz,1h),6.73-6.68(m,3h),4.22(d,j＝16.0hz,1h),4.13-4.10(m,2h),3.92(br,2h),3.87(s,3h),3.64-3.59(m,2h),3.43(s,3h),3.31-3.05(m,3h),2.88-2.57(m,3h)；ms:m/z＝512.1(m++1).[0864](22)化合物141的制备[0865][0866]在室温下向化合物127(1.497g,3.0mmol)在meoh(10ml)和dcm(20ml)中的搅拌溶液中加入85％的h3po4(115mg,1.0mmol)并搅拌2h。除去溶剂，得到化合物141。[0867]化合物141:1hnmr(dmso-d6,300mhz)δ7.82-7.70(m,4h),7.13(d,j＝8.7hz,1h),6.96(d,j＝8.7hz,1h),6.88(s,1h),6.69(s,1h),4.01(d,j＝15.9hz,1h),3.75(s,3h),3.73(s,3h),3.48-3.38(m,6h),3.04-2.88(m,2h),2.64-2.58(m,2h),2.53-2.42(m,1h)。ms:m/z＝500.1(m++1)。[0868](23)化合物142的制备[0869][0870]将化合物a(200mg,0.35mmol)溶解在5mletoh，并滴加5ml浓hcl。将反应混合物回流2h。然后将其用饱和nahco3水溶液中和，并用etoac提取。将有机层用无水na2so4干燥并蒸发，得到油状残余物，将其用硅胶纯化得到化合物142。[0871]化合物142:1hnmr(cdcl3,300mhz)δ＝8.02-7.99(m,2h),7.68-7.66(m,1h),7.59-7.54(m,2h),7.18-7.15(d,j＝8.4hz,1h),7.04-7.01(m,1h),6.82-6.68(m,3h),4.27(d,j＝16.0hz,1h),4.10-4.07(m,2h),3.97-3.95(m,2h),3.80-3.66(m,2h),3.44(s,3h),3.34-3.30(m,1h),3.18-3.13(m,2h),2.84-2.64(m,3h)；ms:m/z＝482.1(m++1)。[0872](24)化合物143的制备[0873][0874]化合物122到化合物143:[0875]向化合物122(100mg,0.21mmol)和cs2co3(68mg,0.21mmol)在dmf(10ml)中的搅拌混合物中加入2-溴乙-1-醇(31mg,0.25mmol)。将反应混合物在80℃下搅拌过夜。除去溶剂，用dcm稀释残余物。将该溶液用水洗涤并用无水na2so4干燥。真空除去溶剂；残余物通过硅胶色谱法纯化，得到10mg化合物143。[0876]化合物143:1hnmr(cdcl3,300mhz)δ7.99-8.02(m,2h),7.66-7.71(m,1h),7.55-7.60(m,2h),7.03(d,j＝8.4hz,1h),6.82(s,1h),6.71(s,1h),6.64(s,1h),4.24(d,j＝15.9hz,1h),4.11-4.20(m,2h),3.92(t,j＝4.2hz,2h),3.86(s,3h),3.58-3.66(m,2h),3.44(s,3h),3.27(dd,j＝15.9hz,1h),3.12-3.17(m,2h),2.62-2.89(m,4h)。ms:m/z＝512.1(m++1)。[0877](25)化合物144的制备[0878][0879]化合物125到化合物144：[0880]在室温下向化合物125(100mg,0.18mmol)在丙酮(5ml)中的搅拌溶液中加入2nlioh(0.1ml,0.18mmol)，然后加热回流2h。当tlc分析表明反应完成时，在室温下用浓hcl将反应液调节ph＝3。将混合物用dcm提取，干燥，浓缩，并通过硅胶纯化，得到90mg化合物144。[0881]化合物144:1hnmr(meoh-d4,300mhz)δ7.92-7.95(m,2h),7.74-7.80(m,1h),7.62-7.67(m,2h),7.14(d,j＝8.4hz,1h),6.90(s,1h),6.87(s,1h),6.79(s,1h),4.39(s,2h),4.26(d,j＝15.9hz,1h),3.87(s,3h),3.63-3.71(m,2h),3.47-3.53(m,2h),3.40(s,3h),3.10-3.23(m,2h),2.68-2.82(m,2h)。ms:m/z＝524.1(m-‑1)。[0882](26)化合物145的制备[0883][0884]a到b[0885]将20mlmeoh添加到a(500mg,1.5mmol)、x(349mg,1.8mmol)和1mlet3n的混合物中。将所得溶液在回流温度下搅拌2h。然后将反应混合物用dcm稀释，用水洗涤，用无水na2so4干燥。真空除去溶剂，残余物通过硅胶色谱纯化，得到700mgb。[0886]b到化合物145[0887]在环境温度下向b(200mg,0.4mmol)在ch3cn(15ml)中的搅拌溶液中加入pocl3(1ml)。将反应混合物搅拌回流2h。当反应完成时，蒸发掉溶剂和过量的pocl3。将残余物倒入冰水中并用na2co3调节至ph》7。用dcm提取溶液，将有机层干燥、浓缩并溶解于在0℃下加入了nabh4(72mg,1.9mmol)的meoh(20ml)中。在该温度下将反应混合物搅拌30min。tlc分析表明反应完成。除去溶剂并用dcm和水提取残余物。将有机层干燥、浓缩并通过色谱法纯化，得到50mg化合物145。[0888]化合物145:1hnmr(cdcl3,300mhz)δ7.93(d,j＝7.5hz,2h),7.60(t,j＝7.5hz,1h),7.50(t,j＝7.5hz,2h),6.97(d,j＝8.7hz,1h),6.71(s,1h),6.65(d,j＝8.7hz,1h),6.52(s,1h),4.15(d,j＝16.2hz,1h),3.80(s,3h),3.50-3.55(m,2h),3.37(s,3h),3.19-3.25(m,1h),3.01-3.09(m,2h),2.72(s,6h),2.50-2.62(m,3h)。ms:m/z＝495.2(m++1)。[0889](27)化合物146和化合物147的制备[0890][0891]a+b→c[0892]在20℃下向a(1.27g,3.6mmol)和b(627mg,3.0mmol)在meoh(30ml)中的溶液中加入et3n(600μl,4.5mmol)，并将溶液加热回流过夜。当tlc分析表明反应完成时，加入水和etoac，收集有机层，干燥，浓缩并通过色谱法纯化，得到1.2g的c。[0893]c→化合物146[0894]在环境温度下向c(1.2g,2.14mmol)在甲苯(50ml)中的搅拌溶液中加入pocl3(0.6ml)。将反应混合物搅拌回流2h。当反应完成时，蒸发掉溶剂和过量的pocl3。将残余物倒入冰水中并用na2co3调节至ph》7。用etoac提取溶液，将有机层干燥、浓缩并溶解于在0℃下加入了nabh4(244mg,6.42mmol)的meoh(50ml)中。在该温度下将反应混合物搅拌10min。tlc分析表明反应完成。除去溶剂并用etoac和水提取残余物。将有机层干燥、浓缩并通过制备tlc纯化，得到800mg化合物146。[0895]化合物146→化合物147[0896]在室温下向naoh(600mg,15mmol)在水(4ml)和meoh(2ml)中的搅拌溶液中加入146(400mg,0.76mmol)，然后加热回流4h。当tlc分析表明反应完成时，在室温下用浓hcl将反应液调节至ph＝3。将混合物用etoac提取，干燥，浓缩，并通过硅胶纯化，得到200mg化合物147。[0897]化合物146:1hnmr(cdcl3,300mhz)δ7.82-7.79(m,1h),7.74-7.71(m,2h),7.60-7.53(m,1h),7.43-7.36(m,1h),7.06(d,j＝8.7hz,1h),6.75-6.72(m,2h),4.26(d,j＝15.9hz,1h),3.91(s,3h),3.90(s,3h),3.68-3.59(m,2h),3.47(s,3h),3.37(dd,j＝3.9,15.9hz,1h),3.23-3.14(m,2h),2.87-2.76(m,2h),2.70-2.61(m,1h)。ms:m/z＝528.2(m++1)。[0898]化合物147:1hnmr(dmso-d6,300mhz)δ12.74(br,1h),12.16-12.14(m,1h),9.22(s,1h),7.72(s,1h),7.03(s,1h),6.95(d,j＝8.7hz,1h),6.76(d,j＝8.7hz,1h),4.71(t,j＝9.0hz,1h),4.50(d,j＝15.0hz,1h),4.26-4.18(m,1h),3.83(s,3h),3.80(s,3h),3.72-3.42(m,4h),3.18-2.98(m,2h)。ms:m/z＝354.1(m+-1)。[0899]第3部分对r4的修饰[0900]为了使r4缺失，开发了方案5所示的以下合成路径。[0901]方案5[0902][0903](1)化合物149、化合物150和化合物151的制备[0904][0905]a到b[0906]在环境温度下向a(5.0g,13.7mmol)在ch3cn(350ml)中的搅拌溶液中加入pocl3(5ml)。将反应混合物搅拌回流2h。当反应完成时，蒸发掉溶剂和过量的pocl3。将溶液用dcm和水提取，将有机层干燥、浓缩并溶解于在0℃下加入了nabh4(2.6g,68.5mmol)的meoh(300ml)中。在该温度下将反应混合物搅拌30min。tlc分析表明反应完成。除去溶剂并用dcm和水提取残余物。将有机层干燥、浓缩并通过色谱法纯化得到4.3g的b。[0907]b到c[0908]在室温下向b(2.0g,5.8mmol)和k2co3(2.4g,17.3mmol)在丙酮(100ml)中的搅拌混合物中加入m(0.5g,5.8mmol)。将混合物搅拌3h。除去溶剂并用dcm和水提取残余物。将有机层干燥、浓缩和纯化，得到1.3g的c。[0909]c到d[0910]在环境温度下向c(1.3g,3.5mmol)在ch3cn(150ml)中的搅拌溶液中加入pocl3(1.5ml)。将反应混合物搅拌回流2h。当反应完成时，蒸发掉溶剂和过量的pocl3。将溶液用dcm和水提取，将有机层干燥、浓缩并溶解于在0℃下加入了nabh4(0.67g,17.7mmol)的meoh(120ml)中。在该温度下将反应混合物搅拌30min。tlc分析表明反应完成。除去溶剂并用dcm和水提取残余物。将有机层干燥、浓缩并通过色谱法纯化，得到0.78gd。[0911]d到化合物149[0912]在室温下向d(100mg,0.3mmol)在dcm(10ml)中的搅拌溶液中加入n(60mg,0.3mmol)和et3n(0.5ml)。将混合物搅拌2h。用水洗涤混合物。将有机层干燥、浓缩并纯化，得到120mg化合物149。[0913]化合物149:1hnmr(cdcl3,300mhz)δ7.70-7.74(m,1h),7.62-7.66(m,1h),7.55-7.61(m,1h),7.40-7.46(m,1h),7.38(d,j＝8.7hz,1h),7.21(d,j＝8.7hz,1h),6.81(dd,j＝8.7hz,1h),6.66-6.70(m,2h),4.07(d,j＝15.6hz,1h),3.81(s,3h),3.51-3.56(m,1h),3.29-3.41(m,2h),3.10-3.13(m,2h),2.56-2.77(m,3h)。ms:m/z＝518.0(m++1)。[0914]化合物149到化合物150[0915]在室温下向149(50mg,0.1mmol)和pd/c(20mg)在meoh(10ml)中的搅拌混合物中加入et3n(0.5ml)。将混合物搅拌过夜。然后滤出固体。真空除去溶剂，用dcm和水提取残余物。将有机层干燥、浓缩并纯化，得到30mg化合物150。[0916]化合物150:1hnmr(cdcl3,300mhz)δ7.72(d,j＝7.8hz,1h),7.52-7.65(m,2h),7.37-7.44(m,1h),7.09-7.16(m,3h),6.77-6.80(m,2h),7.66(s,1h),4.08(d,j＝15.9hz,1h),3.80(s,3h),3.51-3.56(m,1h),3.30-3.35(m,2h),3.07-3.20(m,2h),2.53-2.90(m,3h)。ms:m/z＝440.1(m++1)。[0917]d到化合物151[0918]在室温下向d(100mg,0.3mmol)和pd/c(40mg)在meoh(15ml)中的搅拌混合物中加入et3n(1ml)。将混合物搅拌过夜。然后滤出固体。真空除去溶剂，用dcm和水提取残余物。将有机层干燥、浓缩并纯化，得到80mg化合物151。[0919]化合物151:1hnmr(cdcl3,300mhz)δ7.19(d,j＝8.7hz,1h),6.99(t,j＝7.8hz,1h),6.72-6.81(m,2h),6.67(s,1h),6.51(d,j＝7.8hz,1h),4.19(d,j＝15.6hz,1h),3.81(s,3h),3.46-3.66(m,2h),3.18-3.36(m,3h),2.64-2.93(m,3h)ms:m/z＝282.1(m++1)。[0920]第4部分13-取代的化合物的方法[0921]为了合成13-取代的化合物，开发了方案6所示的以下路径。[0922]方案6[0923][0924](1)化合物139的制备[0925][0926]a→b[0927]在室温下向a(166g,1.0mol)在acoh(2.0l)中的搅拌溶液中滴加溴(56ml,1.1mol)。将溶液搅拌过夜。当反应完成时，蒸发掉溶剂。残余物用etoac提取，用水洗涤并浓缩，得到225g的b。[0928]b→c[0929]在室温下向b(150g,0.6mol)在meoh(1.0l)中的搅拌溶液中缓慢加入socl2(87ml,1.2mol)，并加热回流2h。蒸发掉溶剂和过量的socl2，得到150g的c。[0930]c→d[0931]在室温下向c(51.8g,0.2mol)在thf(700ml)中的搅拌溶液中加入60％的nah(8.8g,0.22mol)并搅拌30min。然后加入mei(13ml,0.21mol)并搅拌1h。当tlc分析表明反应完成时，小心地加入水。将混合物浓缩，用水和etoac提取残余物，收集有机层，干燥，浓缩并纯化，得到46g的d。[0932]d→e[0933]在室温下在钢高压容器中在n2下向cuso4(2.7g,17mmol)、naoh(100g,2.5mol)在水(1.0l)中的搅拌溶液中加入d(46g,168mol)。然后将溶液加热至150℃过夜。当反应完成时，在室温下用浓hcl将反应液调节至ph＝3。将溶液用etoac提取，干燥，浓缩，纯化得到30g的e。[0934]e→f[0935]向30ge(153mmol)中加入苯硼酸(56g,306mmol)和甲苯(1.0l)。将混合物回流加热1h，并将水收集在dean-stark分水器中。将热溶液倒在不锈钢高压容器中的分子筛(10g)上。添加多聚甲醛(10g,306mmol)。将高压容器密封并在110℃下在油浴中加热48h。打开高压容器并过滤热溶液。蒸发甲苯并向残余物中加入水(500ml)。在回流加热2h后，将混合物冷却至室温并用dcm提取。将溶液干燥并除去溶剂。残余物用乙醚洗涤，得到13g的f。[0936]f→g[0937]在室温下向f(13g,62.5mmol)在dcm(200ml)中的搅拌溶液中加入氯苯砜(16.2ml,125mmol)：然后加入et3n(25ml)并搅拌4h。当tlc分析表明反应完成时，减压除去溶剂。将残余物进一步纯化得到5g的g。[0938]g+h→i[0939]在20℃下向g(69.6mg,0.2mmol)、h(54.3mg,0.3mmol)在meoh(5ml)中的溶液中加入et3n(41.5μl,0.3mmol)，并将溶液加热回流过夜。当tlc分析表明反应完成时，加入水和etoac，收集有机层，干燥，浓缩并通过色谱法纯化，得到86mg的i。[0940]i→化合物139[0941]在环境温度下向i(86mg,0.16mmol)在甲苯(5ml)中的搅拌溶液中加入pocl3(0.1ml)。将反应混合物搅拌回流2h。当反应完成时，蒸发掉溶剂和过量的pocl3。将残余物倒入冰水中并用na2co3调节至ph》7。用etoac提取溶液，将有机层干燥、浓缩并溶解于在0℃下加入了nabh4(15.2mg,0.4mmol)的meoh(5ml)中。在该温度下将反应混合物搅拌10min。tlc分析表明反应完成。除去溶剂并用etoac和水提取残余物。将有机层干燥、浓缩并通过制备tlc纯化，得到50mg化合物139。[0942]化合物139:1hnmr(cdcl3,300mhz)δ7.94(d,j＝7.5hz,2h),7.69-7.64(m,1h),7.57-7.52(m,2h),7.10(d,j＝8.7hz,1h),6.78(m,j＝8.7hz,1h),6.70(s,1h),6.61(s,1h),4.22(dd,j＝16.5,28.5hz,2h),3.94(d,j＝7.8hz,1h),3.84(s,3h),3.82(s,3h),3.47(s,3h),3.15-3.03(m,4h),2.90-2.84(m,1h),1.50(d,j＝6.9hz,3h)。ms:m/z＝496.1(m++1)。[0943](2)化合物140的制备[0944][0945]a+b→c[0946]在20℃下向a(69.6mg,0.2mmol)和b(45.3mg,0.3mmol)在meoh(5ml)中的溶液中加入et3n(41.5μl,0.3mmol)，并将溶液加热回流过夜。当tlc分析表明反应完成时，加入水和etoac，收集有机层，干燥，浓缩并通过色谱法纯化，得到50mg的c。[0947]c→化合物140[0948]在环境温度下向c(50mg,0.1mmol)在甲苯(5ml)中的搅拌溶液中加入pocl3(0.1ml)。将反应混合物搅拌回流2h。当反应完成时，蒸发掉溶剂和过量的pocl3。将残余物倒入冰水中并用na2co3调节至ph》7。用etoac提取溶液，将有机层干燥、浓缩并溶解于在0℃下加入了nabh4(11.4mg,0.3mmol)的meoh(5ml)中。在该温度下反应混合物搅拌10min。tlc分析表明反应完成。除去溶剂并用etoac和水提取残余物。将有机层干燥、浓缩并通过制备tlc纯化，得到7.3mg化合物140。[0949]化合物140:1hnmr(cdcl3,300mhz)δ7.99-7.96(m,2h),7.70-7.64(m,1h),7.58-7.53(m,2h),7.15(d,j＝5.6hz,1h),7.08(m,j＝5.6hz,1h),6.74-6.65(m,3h),4.08-3.86(m,2h),3.78(s,3h),3.61(d,j＝8.4hz,1h),3.47(s,3h),3.03-2.89(m,4h),2.76-2.70(m,1h),1.45(d,j＝6.9hz,3h)。ms:m/z＝466.1(m++1)。[0950](3)化合物148的制备[0951][0952]a+b→c[0953]在20℃下向a(3.66g,10mmol)和b(2.09g,10mmol)在meoh(50ml)中的溶液中加入et3n(2.1ml,15mmol)，并将溶液加热回流过夜。当tlc分析表明反应完成时，加入水和etoac，收集有机层，干燥，浓缩并通过色谱法纯化，得到4.0g的c。[0954]c→化合物148[0955]在环境温度下向c(4.0g,6.96mmol)在甲苯(100ml)中的搅拌溶液中加入pocl3(2ml)。将反应混合物搅拌回流2h。当反应完成时，蒸发掉溶剂和过量的pocl3。将残余物倒入冰水中并用na2co3调节至ph》7。用etoac提取溶液，将有机层干燥、浓缩并溶解于在0℃下加入了nabh4(793mg,20.87mmol)的meoh(100ml)中。在该温度下将反应混合物搅拌10min。tlc分析表明反应完成。除去溶剂并用etoac和水提取残余物。将有机层干燥、浓缩并通过制备tlc纯化，得到2.0g化合物148。[0956]化合物148:1hnmr(cdcl3,300mhz)δ7.78-7.68(m,3h),7.58-7.51(m,1h),7.40-7.26(m,1h),7.11(d,j＝11.7hz,1h),4.14-3.94(m,2h),3.88(s,3h),3.87(s,3h),3.62(d,j＝8.4hz,1h),3.48(s,3h),3.04-2.92(m,4h),2.80-2.74(m,1h),1.47(d,j＝3.9hz,3h)。ms:m/z＝542.1(m++1)。[0957](4)化合物152和化合物153的制备[0958][0959]a到b[0960]将30mlmeoh添加到m(0.88g,3.0mmol)、a(1.0g,2.8mmol)和1mlet3n的混合物中。将所得溶液在回流温度下搅拌2h。然后除去溶剂，将残余物用dcm稀释，用水洗涤并用无水na2so4干燥。真空除去溶剂，残余物通过硅胶色谱法纯化，得到930mg的b。[0961]b到化合物152[0962]在环境温度下向b(930mg,1.5mmol)在甲苯(60ml)中的搅拌溶液中加入pocl3(1ml)。将反应混合物搅拌回流2h。当反应完成时，蒸发掉溶剂和过量的pocl3。用dcm和水提取溶液，将有机层干燥、浓缩并在0℃下溶解于加入了nabh4(283mg,7.5mmol)的meoh(50ml)中。在该温度下将反应混合物搅拌30min。tlc分析表明反应完成。除去溶剂并用dcm和水提取残余物。将有机层干燥、浓缩并通过色谱法纯化，得到330mg化合物152。[0963]化合物152:1hnmr(cdcl3,300mhz)δ7.77-7.80(m,1h),7.68-7.73(m,1h),7.51-7.58(m,1h),7.29-7.45(m,6h),7.11(d,j＝9.0hz,1h),6.74-6.77(m,2h),6.65(s,1h),5.12(s,2h),3.95-4.13(m,2h),3.88(s,3h),3.62(d,j＝8.7hz,1h),3.51(s,3h),2.73-3.04(m,5h),1.49(d,j＝6.9hz,3h)。ms:m/z＝590.2(m++1)。[0964]化合物152到化合物153[0965]将10ml浓hcl滴加到152(330mg,0.6mmol)在10mletoh中的溶液中。将反应混合物回流2h。然后将其用饱和nahco3水溶液中和并用dcm提取。将有机层干燥、浓缩并通过色谱法纯化，得到130mg化合物153。[0966]化合物153:1hnmr(cdcl3,300mhz)δ7.78-7.81(m,1h),7.67-7.73(m,1h),7.53-7.59(m,1h),7.35-7.41(m,1h),7.11(d,j＝8.7hz,1h),6.76(d,j＝8.7hz,1h),6.69(d,j＝7.5hz,2h),5.56(s,1h),3.96-4.14(m,2h),3.88(s,3h),3.61(d,j＝8.4hz,1h),3.52(s,3h),2.72-3.03(m,5h),1.48(d,j＝6.9hz,3h)。ms:m/z＝500.1(m++1)。[0967](5)化合物154和化合物155的制备[0968][0969]a+b→c[0970]在20℃下向a(1.27g,3.6mmol)和b(627mg,3.0mmol)在meoh(30ml)中的溶液中加入et3n(600μl,4.5mmol)，并将溶液加热回流过夜。当tlc分析表明反应完成时，加入水和etoac，收集有机层，干燥，浓缩并通过色谱法纯化，得到1.8g的c。[0971]c→化合物154[0972]在环境温度下向c(1.8g,30.4mmol)在甲苯(50ml)中的搅拌溶液中加入pocl3(2ml)。将反应混合物搅拌回流2h。当反应完成时，蒸发掉溶剂和过量的pocl3。将残余物倒入冰水中并用na2co3调节至ph》7。用etoac提取溶液，将有机层干燥、浓缩并在0℃下溶解于加入了nabh4(244mg,6.42mmol)的meoh(50ml)中。在该温度下将反应混合物搅拌10min。tlc分析表明反应完成。除去溶剂并用etoac和水提取残余物。将有机层干燥、浓缩并通过制备tlc纯化，得到500mg化合物154。[0973]化合物154→化合物155[0974]将化合物154(400mg,0.71mmol)溶解于5mletoh中，并向其滴加5ml浓hcl。将反应混合物回流2h。然后将其用饱和nahco3水溶液中和，并用etoac提取。将有机层用无水na2so4干燥并蒸发得到白色残余物，将其用硅胶纯化得到化合物155。[0975]化合物154:1hnmr(cdcl3,300mhz)δ7.84-7.80(m,2h),7.76-7.73(m,1h),7.47-7.33(m,6h),7.12-7.05(m,2h),6.88-6.86(d,j＝8.7hz,1h),6.75-6.72(m,2h),5.06(s,2h),4.23-4.17(d,j＝15.9hz,1h),3.76-3.75(m,1h),3.62-3.56(d,j＝18hz,1h),3.49(s,3h),3.29-3.26(m,1h),3.16-3.05(m,2h),2.64-2.56(m,2h),0.94-0.92(d,j＝6.0hz,1h)。ms:m/z＝560.1(m++1)。[0976]化合物155:1hnmr(dmso-d6,300mhz)δ7.84-7.72(m,2h),7.60-7.52(m,1h),7.38-7.26(m,1h),7.08-7.04(m,2h),6.78-6.69(m,2h),6.58-6.57(m,1h),4.22-4.17(d,j＝15.9hz,1h),3.74(m,1h),3.61-3.56(d,j＝15hz,1h),3.50(s,3h),3.12-3.09(m,1h),3.16-3.05(m,2h),2.62-2.56(m,2h),0.93-0.91(d,j＝6.0hz,1h)。ms:m/z＝470.1(m++1)。[0977]实施例9[0978]下述表5的化合物根据上述程序或对其的稍微改进而合成，并通过质谱进行表征。每个化合物在质谱中都给出了预期的mh+峰。[0979][0980][0981][0982][0983][0984][0985][0986][0987][0988][0989][0990][0991][0992][0993][0994][0995][0996][0997][0998][0999][1000][1001][1002][1003][1004][1005][1006][1007][1008][1009][1010]实施例10：(14r,13s)-crdl盐酸盐在wister大鼠中的降脂作用[1011]使用雄性wister大鼠作为动物模型来检查(14r,13s)-crdl在血浆脂质水平方面的体内作用。[1012]在一项实验中，将18只高脂肪和高胆固醇饮食的wister雄性大鼠分成2组。一组通过口胃管口服(14r,13s)-crdl盐酸盐，每日剂量75mg/kg，持续4周，对照组接受每日等量溶媒(0.1m磷酸钠，ph3.5)处理。每周测量血清脂质水平。crdl处理导致血清脂质水平的强烈时间依赖性降低。[1013]图7a显示，与对照组相比，crdl治疗将tc降低至33.8％，并将tc降低至预处理水平的33.0％。[1014]图7b显示，crdl将ldl-c水平降低至对照的25.6％，并且crdl处理将ldl-c水平降低至第0天的22.4％。[1015]图7c显示tg水平降低至对照的29％，并降低至预处理水平的27％(第0天)。[1016]整个处理过程中未观察到任何不良反应。在处理结束时，处死大鼠并收集血液和血清以测量肝功能和肾功能的几个关键参数。图7d显示crdl处理组的血清ast和alt水平低于对照组，表明肝功能未受损，反而具有统计学意义上的改善。处理未改变肾功能和血糖水平。[1017]实施例11.(14r,13s)-crdl盐酸盐对wister大鼠的减重作用[1018]在为期4周的处理期间，每周测量食物摄取和体重增加。图8a显示了处理期间的食物摄取。在第一周，crdl处理组的食物消耗量降低。然而，在第二周crdl处理组的食物摄取量增加到与对照组相同的量，并在其余处理时间维持在与对照组相似的水平。图8b显示了处理期间体重的变化。有趣的是，虽然对照组在喂食高脂肪和高胆固醇饮食的4周期间体重增加了31％，从260.5g增加到341.5g，但crdl处理组中的wister大鼠在整个治疗期间在同样的高脂肪和高胆固醇饮食下体重保持不变。crdl激活ampk信号传导通路以增加能量消耗和减少脂肪积累的能力可能有助于这种减重作用。[1019]实施例12.化合物128(+)、128(-)在兔中的降脂作用[1020]在另一项实验中，研究了新化合物128(+)和128(-)以及辛伐他汀(smv)和阿托伐他汀(atv)在高脂血症兔中的降ldl-c和总胆固醇作用。给42只雄性日本兔喂食富含胆固醇的兔饮食两周，以诱导高胆固醇血症。然后用化合物128(+)和128(-)以30mg/kg的剂量以及smv和atv以3mg/kg的剂量每天一次通过口服管饲法处理兔。在第0天(药物处理前)和第7天收集血清样品。处理7天后，将化合物128(+)和128(-)的化合物剂量增加到60mg/kg，并将smv和atv的化合物剂量增加到10mg/kg，处理再持续7天。在总共14天的处理结束时处死所有测试的动物，并分析血清样品的tc、ldl-c、tg和hdl-c。除了脂质曲线之外，还分析了许多生化参数，以了解药物处理对肝功能、肌肉功能、肾功能和心脏功能的影响。对于ldl-c的降低，结果总结在图13中，对于从剂量前(predose)到14天的总胆固醇变化，结果总结在表6中，表7显示了所有测量的脂质和血液化学参数的最终结果。总之，这些数据清楚地表明了化合物128(-)和128(-)在没有任何副作用的情况下强烈地降低tc和ldl-c，这与其降脂作用与对肝脏、肌肉甚至肾脏和心脏的显著毒性相关的他汀类的作用相反。mrna表达，这6种化合物都是d-(+)对映异构体。[1024]a：化合物结构[1025][1026]b：生物活性[1027]将从美国组织培养物保藏中心(americantissueculturecollection,manassas,va,usa)获得的hepg2细胞以0.8x106个细胞/孔的密度接种在6孔培养板中，在含有0.5％fbs的emem中培养，并用每种纯化的化合物以指定剂量处理8小时。分离总rna，使用m-mlv(promega)在37℃下用随机引物对2μg每个样品进行反转录1小时。pcr在94℃进行30sec(秒)、在60℃进行30sec以及在72℃进行30sec，酶在94℃下初始激活1分钟。对ldlr和gapdh进行了30个循环。对于ldlr使用引物hldlr-up和hldlr-lo进行pcr，对于gapdh，使用引物hgapdh-up和hgapdh-lo进行pcr。在1％琼脂糖凝胶上分离pcr产物并定量条带强度。通过测量gapdhmrna水平来校正ldlrmrna水平。[1028]通过半定量rt-pcr分析的(+)–clmd、14r–(+)–crpm、14r,13s–(+)–crdl和14r–(+)–thp对hepg2细胞中ldlrmrna表达的强效和剂量依赖性影响显示于图3中。[1029]由类似的实验确定了+/-thp在上调ldlrmrna表达中的特定立体化学要求。用指定浓度的纯14r-(+)-thp或纯14s-(-)-thp处理hepg2细胞24小时。通过半定量rt-pcr评估未处理和化合物处理的hepg2细胞中的ldlrmrna和gapdhmrna水平。结果示于图4中。[1030]实施例14.紫堇属植物来源的化合物以及一些式i、式ii、式iii和式iv的新化合物刺激hepg2细胞中的ldlr配体摄取活性。[1031]用指定浓度的各种化合物将24孔培养板中的hepg2细胞(2x105个细胞/孔)处理20小时。在处理结束时，将浓度为2μg/ml的荧光1.1'-双十八烷基-3,3,3',3'-四甲基吲哚羰花青高氯酸盐(dii-ldl)(biomedicaltechnologies,stoughton,massachusetts)添加到细胞中。4小时后，除去培养基，用冷pbs洗涤细胞，并立即在荧光显微镜(nikon)下以200x放大倍数检查。将化合物处理的细胞中的荧光强度与未处理的对照细胞中的荧光强度进行比较。化合物活性分级如下：+：与对照相比荧光强度略有增加；++：与对照相比荧光强度适度增加；+++：与对照相比荧光强度明强烈增加。结果总结在下表8中。在这些实验中，氯化小檗碱用于比较。[1032]表8[1033][1034][1035]实施例15.[1036]测定了式i、式ii、式iii和式iv的一些化合物对ldlrmrna表达的活性。分别以小于或等于10μm剂量的用新化合物将hepg2细胞处理24小时。使用实施例16b中描述的方法收获总rna，用于定量实时rt-pcr分析。通过用化合物处理的细胞中归一化的ldlrmrna的量除以未处理的对照细胞中的ldlrmrna的量得出倍数活性。在这些实验中，包括了氯化小檗碱用于比较。结果示于表9中。[1037]表9[1038][1039][1040]实施例16.紫堇属来源的活性化合物对erk和ampk信号传导通路的双重激活。[1041]将在60mm培养皿中培养的hepg2细胞用浓度为15μg/ml的各种化合物处理2小时。分离总细胞裂解物，并在sds-page上分离50μg蛋白质并将其转移到硝酸纤维素膜上。使用抗磷酸化erk和抗磷酸化ampk抗体进行蛋白质印迹，以检测erk和ampk的激活。再次用抗erk和抗ampk抗体探测膜，以证明蛋白质的加载相等。图10中的结果表明，与未处理的对照细胞相比，化合物处理的细胞中磷酸化和活化的erk和ampk的水平显著增加。[1042]进行蛋白质印迹分析以确定14r,13s–(+)–crdl和14r–(+)–thp对hepg2细胞中erk的激活。分别用20μg/ml14r,13s–(+)–crdl和4r–(+)–thp将hepg2细胞处理0.5、2或8小时。然后裂解细胞。使用bcatm蛋白质测定试剂(pierce)进行蛋白质定量后，对每个样品的50μg蛋白质进行sds-page，然后使用抗磷酸化erk(cellsignaling)进行蛋白质印迹，随后用抗β-肌动蛋白的抗体重新探测。结果如图5所示。[1043]图6显示了14r-(+)-thp诱导acc磷酸化的蛋白质印迹分析。将hepg2细胞用20μg/ml14r–(+)–thp处理0.5、2或8小时。裂解细胞，对每个样品的50μg蛋白质进行sds-page，然后使用抗磷酸化acc(cellsignaling)进行蛋白质印迹，随后用抗β-肌动蛋白的抗体重新探测。[1044]实施例17.紫堇属植物来源的活性化合物对细胞甘油三酯含量的降低[1045]将接种在12孔板中的hepg2细胞用各种活性化合物(20μg/ml)处理24小时或不处理。处理后，将细胞用trisbuffer(75μmnacl,50μmtris-hcl,ph7.4)洗涤两次，并用1ml己烷:异丙醇(3:2)提取细胞脂质两次。将提取液在化学通风橱中蒸发过夜。第二天，将干燥的脂质溶解在含有10％triton-x100的100μl异丙醇中。使用从stanbio获得的市售试剂盒，将每个样品的10μl用于tg测量。为了用细胞蛋白归一化tg含量，在提取脂质后，将细胞在0.1nnaoh中裂解，以使用bcaproteinassayreagent(pierce)测定蛋白浓度。结果(图11)表明，与对照相比，化合物处理降低了总细胞tg含量。已经证明ampk激活刺激能量消耗并减少tg合成。化合物处理的细胞中激活的ampk可以解释用这些化合物处理的细胞中tg含量降低的原因。[1046]实施例18.证明用本文公开的化合物处理的hepg2细胞中细胞内甘油三酯的降低[1047]用氯化小檗碱进行比较。未处理的对照细胞中的tg量定义为100％，化合物处理的细胞中的tg量除以该值。结果示于表10中。[1048]表10[1049][1050]实施例19.本文公开的化合物的立体异构体的生物学作用比较[1051]为了确定这些化合物在上调ldlr蛋白表达、抑制pcsk9蛋白表达和诱导acc磷酸化的生物学活性方面是否表现出立体异构差异，用化合物127(+)、127(-)、128(+)和128(-)以20μm的浓度处理hepg2细胞。在处理1、2和3天后收获细胞，并使用针对ldlr和pcsk9的抗体进行蛋白质印迹分析。鸡抗ldlr购自abcam，小鼠抗pcsk9购自caymanchemicals，抗pacc购自cellsignaling。图12的结果表明，虽然所有这些化合物都能有效提高ldlr蛋白水平，并强烈抑制pcsk9表达，并诱导acc磷酸化，但具有负旋转特性的对映异构体的活性似乎强于具有正旋转的对映异构体的活性。这种经证明的立体异构偏好不同于本文公开的具有正旋光特性的立体异构偏好的天然化合物。[1052]实施例20.他汀类和新化合物127(+)对ldlr和pcsk9蛋白表达的联合作用的检查[1053]为了确定他汀类对ldlr蛋白表达的刺激作用是否可以通过本文发明的一些新化合物得以增强，在不存在或存在化合物127(+)的情况下，用低剂量瑞舒伐他汀(rsv)以0.3μm和1μm的浓度处理hepg2细胞或不处理，或将其用低浓度的化合物127(+)单独处理2天。进行蛋白质印迹分析以检查ldlr和pcsk9蛋白水平。化合物127(+)是具有正旋光性的化合物127的单一对映异构体。结果示于图13中。这些数据表明，他汀类上调ldlr表达的活性不受化合物127(+)的抑制。相反，向他汀类处理的细胞中添加化合物127(+)进一步改善了他汀类对ldlr蛋白表达的刺激作用。此外，rsv对pcsk9蛋白水平的诱导作用被化合物127(+)拮抗。这些初步结果表明，天然来源或合成来源的紫堇属植物来源的活性化合物具有与hmgcoa还原酶抑制剂一起用在联合疗法中以治疗高脂血症患者的潜力。[1054]实施例21.本技术的化合物对ldlr和pcsk9mrna表达的影响[1055]检查了式i、式ii、式iii和式iv的化合物对ldlrmrna上调和pcsk9mrna表达抑制的时间依赖性作用(hortonjd,cohenjc,hobbshh."molecularbiologyofpcsk9:itsroleinldlmetabolism"trendsinbiochemicalsciences2007；32:71-77)。将hepg2细胞用20μm剂量的新化合物分别处理1天、2天和3天。分离总rna，并用2μg在含有随机引物和m-mlv的反应中在37℃下、在25μl的体积中、在1小时内生成cdna。使用mceprealplex2system(eppendorf)和universalmastermix(appliedbiosystems)对cdna进行实时pcr。用人ldlr、pcsk9和gapdhpre-developedtaqmanassayreagents(appliedbiosystems)评估hepg2中mrna的表达水平。将ldlrmrna或pcsk9mrna的水平归一化为gapdh的水平。分析每个rna样品，一式三份。未处理的细胞中ldlrmrna或pcsk9mrna的丰度定义为1，并且将化合物处理的细胞的ldlrmrna或pcsk9的量相对于该值作图(图10)。显示的数据是平均值±s.d.。这些结果表明，这些新化合物在上调ldlrmrna的同时强烈抑制pcsk9的mrna表达，从而提供了另一种通过减少pcsk9介导的ldlr蛋白降解来增加ldlr表达的方式。[1056]实施例22.辛伐他汀和新化合物91对ldlr和pcsk9mrna表达的比较。[1057]将hepg2细胞用指定浓度的辛伐他汀或化合物91处理24小时。使用实施例16b中描述的方法收获总rna用于定量实时rt-pcr分析。通过用化合物处理的细胞中归一化的ldlr或pcsk9mrna的量除以未处理的对照细胞中的ldlr或pcsk9mrna的量得出倍数活性。图15a和图15b中所示的这些结果证明，新化合物91剂量依赖性地增加ldlrmrna表达，但抑制pcsk9mrna表达，而辛伐他汀增加ldlr和pcsk9mrna表达。[1058]实施例23.本发明化合物对ldlr和pcsk9的mrna表达的影响[1059]使用定量实时rt-pcr测定检测了23种化合物对ldlr和pcsk9的mrna表达的影响。用各种化合物亦10μm和40μm的浓度将hepg2细胞处理24小时。分离总rna，并使用2μg在包含随机引物和m-mlv反应中，在37℃下、在25μl的体积中、在1小时内生成cdna。使用mceprealplex2system(eppendorf)和universalmastermix(appliedbiosystems)对cdna进行实时pcr。用人ldlr、pcsk9和gapdhpre-developedtaqmanassayreagents(appliedbiosystems)评估hepg2中mrna的表达水平。将ldlr和pcsk9mrna的水平归一化为gapdh的水平。分析每个rna样品，一分两份。通过用化合物处理的细胞中的mrna丰度除以对照的mrna丰度来计算倍数活性。数据(平均值±s.d.)总结在表11的第2-5列中。这些结果表明，这些合成化合物以剂量依赖性方式强烈增加ldlrmrna表达，并且还表现出对pcsk9mrna表达的抑制活性。[1060]这些新化合物可能通过mrna稳定机制及它们对pcsk9(降解ldlr蛋白的分泌蛋白酶)的抑制活性的对升高ldlrmrna水平的有益联合作用，使得ldl配体摄取活性通过增加受体表面丰度的强烈增加。通过测量荧光标记的ldl的细胞内积累，证明了配体摄取活性。简而言之，将24孔培养板中的hepg2细胞(2x105个细胞/孔)用各种化合物以10μm和40μm的浓度处理20小时。在处理结束时，将浓度为2μg/ml的荧光1.1'-双十八烷基-3,3,3',3'-四甲基吲哚羰花青高氯酸盐(dii-ldl)(biomedicaltechnologies,stoughton,massachusetts)添加到细胞中。4小时后，除去培养基；用冷pbs洗涤细胞，并立即在荧光显微镜(nikon)下以200x放大倍数检查。将化合物处理的细胞中的荧光强度与未处理的对照细胞中的荧光强度进行比较。化合物活性分级如下：+：与对照相比荧光强度略有增加；++：与对照相比荧光强度适度增加；+++：与对照相比荧光强度强烈增加。结果总结在下表11中。[1061]为了进一步证明化合物对ldlr蛋白表达的刺激作用及其对pcsk9表达的抑制活性，使用针对ldlr和pcsk9的抗体进行蛋白质印迹分析。鸡抗ldlr购自abcam，小鼠抗pcsk9购自caymanchemicals。将在60-mm培养皿中培养的hepg2细胞在含有0.5％胎牛血清的培养基中孵育过夜，然后在1-3天内添加浓度为20μm的化合物。分离总细胞裂解物，在sds-page上分离50μg蛋白质，并将其转移到硝酸纤维素膜上，用抗ldlr、抗pcsk9和抗p-acc进行免疫印迹。结果示于图16中。这些结果证实了从mrna分析和配体摄取测定中获得的数据，并清楚地证明了这一系列化合物在增强ldlr蛋白表达和降低pcsk9蛋白酶水平方面的生物活性。[1062]表11[1063][1064]实施例24.本发明的化合物在nash模型中的作用[1065]在自由选择饮食诱导的nash仓鼠模型中，喂食仓鼠自由选择饮食(在具有正常自来水的食物饮食(chowdiet)或具有10％富含果糖的自来水的高脂肪/胆固醇饮食(安全饮食)之间自由选择)长达20周(15周饮食和5周处理)。15周饮食后，将仓鼠随机分为3个同质组(n＝10/组)，并用溶媒、化合物128(c128)(以100mg/kg的剂量)或ppar双激动剂elafibranor(15mg/kg的剂量)口服qd(一天一次)处理5周。在该nash模型中，c128显著降低了纤维化和肝细胞气球样变，并显示出较低的脂肪变性和炎症评分的趋势，导致nas评分显著降低，这也是用参考药物elafibranor观察到的效果，elafibranor在iii期临床研究中是nash候选药物。图17到图19说明了研究结果。[1066]图17比较了来自仓鼠nash模型的肝组织，包括溶媒处理、c128处理和elafibranor处理的仓鼠。长方形表示评分为3的小叶小泡性脂肪变性，伴有几个气球样肝细胞并存在混合细胞炎症(白色圆圈)。箭头表示溶媒处理的仓鼠肝脏中评分为3的纤维化，这在c128处理的仓鼠的肝组织中未检测到。elafibranor处理也减少了肝细胞气球样变。[1067]图18还比较了仓鼠nash模型的肝组织，包括溶媒处理、c128处理和elafibranor处理的仓鼠。正方形和长方形表示溶媒处理的仓鼠的肝脏中的小泡性脂肪变性，伴有几个气球样肝细胞并存在混合细胞炎症(白色虚线圆圈)，这在c128处理的仓鼠的肝组织中未检测到。elafibranor处理也减少了纤维化，尽管与c128相比程度较小。[1068]如图19所示，c128(标记为lm001)在测试模型中表现出治疗nash的统计显著性益处，包括显著较低的肝细胞气球样变(19b)和纤维化(19c)以及较低的炎症(19d)和脂肪变性(19e)评分的趋势，从而导致nas评分显著降低(19a)，用参考药物elafibranor也观察到这一点。[1069]实施例25本发明的化合物在nafld模型中的作用[1070]在高脂肪和高胆固醇饮食(hfhcd)诱导的非酒精性脂肪性肝病(nafld)仓鼠模型中，给仓鼠喂食hfhcd两周，然后用c128以10mg/kg、20mg/kg和40mg/kg的剂量以及作为阳性对照的非诺贝特以50mg/kg的剂量处理4周。使用标准技术测量血清脂质和肝酶。还进行了油红o染色和h&e染色的肝组织组织病理学。[1071]如图20所述，在该模型中，c128显著降低循环胆固醇和甘油三酯，并随着血清肝酶水平和肝脏脂肪含量的降低而减轻。体重和肝重未受c128处理的影响。相比之下，非诺贝特组的肝重以统计学显著的量升高。如图21所示，在这种饮食诱导的nafld仓鼠模型中，c128显著降低了肝组织中饮食诱导的肝酶升高和脂肪积累。[1072]同样在该模型中，如图22所示，与正常饮食对照组相比，hfhc饮食(hfhcd)溶媒对照组显示出肝内大量具有脂滴空泡的肝细胞、局部浸润淋巴细胞和中性粒细胞，表明对高脂饮食有炎症反应。在20mg/kg和40mg/kgc128处理的组中，肝细胞中的脂滴和细胞炎症均有不同程度的减轻。在40mg/kg组中，肝细胞脂滴、肝细胞气球样变和细胞炎症均显著减少。[1073]在图23中，油红“o”染色结果表明，脂肪滴被染成红色，细胞核呈蓝色。正常饮食对照组的肝脏结构清晰，未见明显红色染色物质。与正常饮食对照组相比，hfhc饮食溶媒对照组的肝组织内大量肝细胞被染红，染红的脂滴呈水泡状，一些肝细胞呈粉红色。在40mg和20mg剂量组中，肝细胞中的染红的面积和染红的泡状脂滴显著减少。在阳性对照组中，细胞内脂肪染红面积和染红的脂滴也减少。[1074]实施例26.本发明的化合物在肥胖模型中的作用[1075]在处理阶段之前，给12只肥胖的食蟹猴喂食含有0.5％胆固醇的高脂肪饮食6周。在用化合物127(c127)或溶媒处理之前，所有动物都接受了使用双能x射线吸收测定法(dualenergyx-rayabsorptiometry,dexa)的全身扫描对全身和脂肪成分的评估，以测量体脂肪含量和骨矿物质密度/含量(参考文献：black,a.,tilmont,_e.m.,baer,d.j.,rumplerw.v.,et.al.accuracyandprecisionofdual-energyx-rayabsorptiometryforbodycompositionmeasurementsinrhesusmonkeys.journalofmedicalprimatology,30:94-99,2001)。六只猴子通过po(口服)接受溶媒，六只猴子通过po以40mg/kg/天的剂量接受c127，持续三周；从第4-6周，c127剂量增加到80mg/kg/天。6周处理后结束剂量给药，然后对所有动物进行dexa扫描。研究结果示于图24a-f中，c127处理降低了体重、bmi和体脂肪，并提高了骨矿物质含量。用双尾t-检验与溶媒相比，*p《0.05。如图25a-c所示，c127处理也表现出降低喂食高脂肪饮食的肥胖食蟹猴中血清ldl-c、tc以及显著降低肝酶alt的趋势。[1076]实施例27.本发明的化合物在nafld仓鼠模型中的作用[1077]在高脂肪和高胆固醇饮食(hfhcd)诱导的nafld仓鼠模型中，给仓鼠喂食hfhcd两周，然后用c127以80mg/kg的剂量或非诺贝特以50mg/kg的剂量处理4周。如图26a-f所示，c127对高脂血症金仓鼠模型具有显著的降血脂作用，且其降血脂作用随治疗时间延长而增强，并有效降低金仓鼠肝脏内的高脂质沉积，从而改善了肝肥胖程度并且对高脂血症金仓鼠有显著的抗脂肪肝作用。图27显示来自喂食hfhcd和溶媒(27a)、hfhcd和80mg/kgc127(27b)以及hfhcd和50mg/kg非诺贝特(27c)的仓鼠肝组织的代表性h&e染色。结果与用c128(图22)观察到的结果相似，其中肝细胞脂滴空泡和网状形状减少，细胞和中性粒细胞浸润也减少。类似地，肝组织的油红o脂肪染色(图28)也表明c127处理组的改善，与c128处理组一样(图23)。[1078]本文引用的每一篇专利、专利申请和出版物(例如期刊、文章和/或教科书)的公开内容均通过引用整体并入本文，除非它们与本文的定义相抵触。此外，如本文和所附权利要求所用，诸如“一个/一种(a)”、“一个/一种(an)”和“一个/一种(one)”等单数冠词旨在表述单数或复数。尽管本文已经结合优选方面描述了本技术，但本领域普通技术人员在阅读上述说明书后，可以对本技术的化合物或本文所述的其盐、药物组合物、衍生物、前药、代谢物、互变异构体或外消旋混合物进行改变、等同替代和其他形式的改变。每一上述方面也可以包括或并入有关任何或所有其他方面所公开的这类变化或方面。本技术也不限于本文描述的具体方面，这些具体方面旨在作为本技术各个方面的单一说明。可以在不背离本技术的精神和范围的情况下对本技术进行许多修改和变化，这对于本领域技术人员来说是显而易见的。除了本文列举的那些之外，对于本领域技术人员来说，根据前面的描述，本技术范围内的功能等效方法应是显而易见的。应当理解，本技术不限于具体方法、试剂、化合物、组合物、标记的化合物或生物系统，它们当然可以变化。还应理解，本文所用的术语仅出于描述具体方面的目的，并不旨在进行限制。因此，意欲本说明书仅视为是示例性的，本技术的广度、范围和精神仅由所附权利要求、其中的定义及其任何等同物表示。当前第1页12当前第1页12