1.鉴定粟酒裂殖酵母(schizosaccharomycespombe)的引物,其特征在于,其序列如seqidno:2、seqidno:3所示。
2.应用权利要求1所述引物鉴定粟酒裂殖酵母(schizosaccharomycespombe)的方法,其特征在于,包括步骤:将待测样品制成菌悬液,将菌悬液稀释涂布获得单菌落,以seqidno:2、seqidno:3所示序列为引物进行菌落pcr,通过凝胶电泳观察pcr产物,如果电泳图谱上pcr产物在100-250bp之间有条带,则说明样品中含有粟酒裂殖酵母,如果pcr产物不在100~250bp之间或者没有条带时,说明样品中没有粟酒裂殖酵母。
3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述样品为发酵食品成品或者取自发酵食品发酵过程中的样品,包括大曲或酒醅。
4.根据权利要求2或3所述的方法,其特征在于,所述样品中含有库德里阿兹威毕赤酵母(pichiakudriavzevii)、酿酒酵母(saccharomycescerevisiae)、拜尔结合酵母(zygosaccharomycesbailii)、白色假丝酵母(candidahumilis)和巴氏哈萨克斯坦酵母(kazachstaniabarnettii)。
5.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,还对100-250bp之间的pcr产物进行测序,并将测序结果与粟酒裂殖酵母的乙醇脱氢酶编码基因序列进行比对。
6.应用权利要求1所述引物定量检测粟酒裂殖酵母(schizosaccharomycespombe)的方法,其特征在于,包括步骤:
(1)配置不同菌浓的、已知浓度的粟酒裂殖酵母菌悬液,分别提取菌悬液中的基因组;
(2)利用seqidno:2、seqidno:3所示引物对基因组分别进行荧光定量pcr,以ct值为横坐标,以细胞数量或细胞数量的lg值为纵坐标,绘制标准曲线;
(3)提取待测样品中的基因组,利用seqidno:2、seqidno:3所示引物对待测样品的基因组进行荧光定量pcr,将荧光定量pcr的ct值代入标准曲线,换算得到样品中的粟酒裂殖酵母的数量。
7.区分粟酒裂殖酵母与库德里阿兹威毕赤酵母(pichiakudriavzevii)、酿酒酵母(saccharomycescerevisiae)、拜尔结合酵母(zygosaccharomycesbailii)、白色假丝酵母(candidahumilis)、巴氏哈萨克斯坦酵母(kazachstaniabarnettii)的方法,其特征在于,以seqidno:2、seqidno:3所示序列为引物,进行菌落pcr或分别以上述酵母的基因组为模板进行pcr,通过凝胶电泳观察pcr产物,如果电泳图谱上pcr产物在100-250bp之间有条带,则说明相应菌株是粟酒裂殖酵母(schizosaccharomycespombe)。
8.用于粟酒裂殖酵母(schizosaccharomycespombe)的定性、定量的检测试剂盒,其特征在于,含有seqidno:2、seqidno:3所示引物,还包括dna聚合酶及缓冲液。
9.使用权利要求8所述试剂盒对粟酒裂殖酵母进行定性检测的方法,其特征在于,包括:将待测样品制成菌悬液,将菌悬液稀释涂布获得单菌落,以seqidno:2、seqidno:3所示序列为引物进行菌落pcr,通过凝胶电泳观察pcr产物,如果电泳图谱上pcr产物在100-250bp之间有条带,则说明样品中含有粟酒裂殖酵母(schizosaccharomycespombe)。
10.使用权利要求8所述试剂盒对粟酒裂殖酵母进行定量检测的方法,其特征在于,包括:(1)配置不同菌浓的、已知浓度的粟酒裂殖酵母菌悬液,分别提取菌悬液中的基因组;(2)利用seqidno:2、seqidno:3所示引物对基因组分别进行荧光定量pcr,以ct值为横坐标,以细胞数量或细胞数量的lg值为纵坐标,绘制标准曲线;(3)提取待测样品中的基因组,利用seqidno:2、seqidno:3所示引物对待测样品的基因组进行荧光定量pcr,将荧光定量pcr的ct值代入标准曲线,换算得到样品中的粟酒裂殖酵母的数量。