本发明涉及药物化学
技术领域：
，具体涉及一种磷酸特地唑胺的纯化方法。
背景技术：
：磷酸特地唑胺(tedizolidphosphate)是恶唑烷酮类抗生素，其可通过与细菌核糖体50s亚单位结合介导导致蛋白合成的抑制，主要用于治疗金黄色葡萄球菌(包括耐甲氧西林菌株、甲氧西林敏感菌株)和各种链球菌属和粪肠球菌等革兰氏阳性细菌引起的急性细菌性皮肤和皮肤结构感染(absssi)。现有的磷酸特地唑胺的制备方法主要分为以下两种：ⅰ通过将特地唑胺磷酸双(四丁基酯)与甲醇钠反应，得到磷酸特地唑胺二钠盐，其再与三氟乙酸反应，乙醇和乙醚结晶，制备获得。但是，磷酸特地唑胺在甲醇钠的强碱性条件下，容易产生降解杂质；因此,强碱性的反应条件不能得到纯度较高的磷酸特地唑胺。ⅱ通过将特地唑胺与三氯氧磷反应得到磷酸特地唑胺，其纯度约95.3％(auc)。但是，由于三氯氧磷活性较高，不可避免的产生二聚体杂质，双磷酸酯杂质，焦磷酸酯，氯代杂质、开环杂质等杂质，导致采用三氯氧磷制备得到的磷酸特地唑胺纯度较低。经研究，现有技术中公开的磷酸特地唑胺的制备方法制得的磷酸特地唑胺中存在的杂质含量高，且种类多(约为18种)，这些杂质会直接影响其药效，因此，必须对其进行纯化。现有的磷酸特地唑胺的纯化方法大致有以下几种：(1)将磷酸特地唑胺转化为二钠盐后用三氟乙酸调ph，浓缩后，用乙醇和乙醚重结晶得到；但是该纯化方法除杂能力较弱，不能得到高纯度的磷酸特地唑胺，而且由于乙醚闪点低，不适用于工业化生产。(2)将磷酸特地唑胺粗品用二甲亚砜加热溶解，溶解澄清后，向其中加入极性质子溶剂，控制温度并搅拌，降温进行析晶，抽滤；将所得滤饼加入到水中，用氢氧化钠或氢氧化钾水溶液调节溶液的ph至碱性，然后缓慢加入到水溶性非质子有机溶剂中析晶，抽滤，将在水溶性非质子有机溶剂中析晶并抽滤后所得滤饼加入到水和四氢呋喃的混合溶剂中，用盐酸水溶液快速调节ph至1-2，搅拌析晶，抽滤；最后所得滤饼用二甲亚砜溶解后缓慢加入到控制温度的水和乙醇的混合溶剂中，降温析晶，抽滤，干燥得高纯度磷酸特地唑胺。但是该纯化方法繁琐，而且纯化过程中采用的高沸点溶剂二甲亚砜或者n-甲基吡咯烷酮较难去除。因此，开发一种除杂能力强、简单方便且利于工业化生产的磷酸特地唑胺的纯化方法十分必要。技术实现要素：本发明需要解决的技术问题是克服现有技术中的磷酸特地唑胺的纯化方法存在的上述缺陷，从而提供一种除杂能力强、简单方便且利于工业化生产的磷酸特地唑胺的纯化方法，且该方法在纯化过程中无需使用较难除去的高沸点溶剂。为解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案是：一种磷酸特地唑胺的纯化方法，包括如下步骤：将磷酸特地唑胺粗品与无水乙醇混合，过滤，过滤所得固体溶于氢氧化钠水溶液中得磷酸特地唑胺二钠盐的水溶液；将磷酸特地唑胺二钠盐的水溶液酸化，搅拌析晶，分离，分离所得固体经洗涤，干燥，即得磷酸特地唑胺。所述磷酸特地唑胺粗品是指现有公开的任一种磷酸特地唑胺的制备方法制备得到。可选地，酸化之前，还包括采用微滤膜过滤磷酸特地唑胺二钠盐的水溶液步骤。可选地，所述磷酸特地唑胺粗品与无水乙醇的质量体积比为1g：(20-30)ml。可选地，所述磷酸特地唑胺粗品与氢氧化钠水溶液的质量体积比为1g:(10-15)ml。可选地，所述氢氧化钠水溶液的浓度为20-35wt％。可选地，所述酸化是指采用浓盐酸调节磷酸特地唑胺二钠盐的水溶液的ph为1-3。可选地，搅拌析晶步骤中搅拌的速率为50-100rpm。可选地，采用无水乙醇洗涤。可选地，干燥的温度为50-60℃；时间为4-6h。本发明还提供了上述的磷酸特地唑胺的纯化方法纯化得到的磷酸特地唑胺由于采用了上述技术方案，本发明取得的技术进步是：1、现有的磷酸特地唑胺的纯化方法都是将磷酸特地唑胺粗品先溶解于溶剂中，然后析晶来达到纯化的目的。但是这种方法在析晶的过程中杂质很容易伴随磷酸特地唑胺一起析出，导致纯化得到的磷酸特地唑胺纯度较差，氢氧化钠溶液不澄清；也就是说现有的磷酸特地唑胺的纯化方法除杂能力弱。本发明创造性地首先将磷酸特地唑胺粗品与无水乙醇混合，将磷酸特地唑胺粗品中比磷酸特地唑胺极性较小的杂质溶解在无水乙醇中，然后通过过滤除去，磷酸特地唑胺留在过滤后的固体中；结合后续的将磷酸特地唑胺固体转化为磷酸特地唑胺二钠盐，及酸化，析晶等步骤，可将其它杂质进行去除；纯化得到的磷酸特地唑胺纯度高，氢氧化钠溶液澄清，且该纯化方法在纯化过程中无需使用较难除去的高沸点溶剂；简单方便且利于工业化生产。2、本发明提供的磷酸特地唑胺的纯化方法，通过在酸化之前，采用微滤膜过滤磷酸特地唑胺二钠盐的水溶液，可将不溶于碱性水溶液的杂质进行去除，结合采用无水乙醇溶解比磷酸特地唑胺极性较小的杂质；及后续的析晶等步骤，可进一步提高磷酸特地唑胺的纯度，氢氧化钠溶液澄清。3、本发明提供的磷酸特地唑胺的纯化方法，通过限定所述磷酸特地唑胺粗品与无水乙醇的质量体积比为1g：(20-30)ml；提高极性较小的杂质在无水乙醇中的溶解度，提高除杂效果的同时，减少溶剂使用量，且乙醇还可回收有限次地重复利用，节约成本，减少废液。4、本发明提供的磷酸特地唑胺的纯化方法，所述磷酸特地唑胺粗品与氢氧化钠水溶液的质量体积比为1g:(10-15)ml；可保证磷酸特地唑胺完全转化为二钠盐，结合后续地酸化、析晶等步骤，可进一步提高磷酸特地唑胺产品的纯度及收率。5、本发明提供的磷酸特地唑胺的纯化方法，通过限定磷酸特地唑胺二钠盐的水溶液的ph为1-3；可保证所有的磷酸特地唑胺二钠盐均转化为磷酸特地唑胺，结合后续的析晶等步骤，进一步提高磷酸特地唑胺产品的纯度及收率。6、本发明提供的磷酸特地唑胺的纯化方法，通过限定搅拌析晶步骤中搅拌的速率为50-100rpm，一方面防止搅拌过快，导致正在生长的晶体被大的切削力打碎，产生大量细碎结晶的同时增加晶体表面缺陷，晶体表面可能吸附杂质导致纯度下降；另一方面，可防止采用静置结晶时，晶体中可能夹杂着一些杂质导致纯度下降。7、本发明提供的磷酸特地唑胺的纯化方法，通过采用无水乙醇洗涤分离得到的磷酸特地唑胺，可进一步将附着在磷酸特地唑胺表面的杂质除去，提高纯化效果；同时降低后续干燥的温度及时间；防止由于干燥的温度过高，时间过长对磷酸特地唑胺产品的性质和活性产生影响。具体实施方式为方便对比，各实施例和对比例中的磷酸特地唑胺粗品均采用以下制备方法制得，但是本发明中的磷酸特地唑胺的纯化方法并不仅限适用于以下制备方法制得的磷酸特地唑胺粗品，现有公开的任一种磷酸特地唑胺的制备方法制得的磷酸特地唑胺粗品均适用于本发明。磷酸特地唑胺粗品的制备方法：在3000ml的四口圆底烧瓶中，安装机械搅拌，回流冷凝管，温度计，氮气保护下向圆底烧瓶中加入1500ml四氢呋喃、100g(5r)-3-(4-溴-3-氟苯基)-5-羟甲基恶唑烷-2-酮、105g2-(2-甲基-2h-四唑-5-基)吡啶-5-硼酸频哪醇酯、28g四(三苯基膦)钯，开启搅拌至固体溶解，加入配制好的140g少量水溶解的碳酸钾溶液，升温至回流，搅拌反应12小时，降温至室温。抽滤，滤饼用水洗涤后用丙酮洗涤。滤饼真空45℃干燥48小时，得80.2g3-[3-氟-4-[6-(2-甲基-2h-四唑-5-基)-3-吡啶基]苯基]-5-(羟基甲基)-2-恶唑烷酮。在2000ml三口瓶中，依次加入800ml四氢呋喃、80g3-[3-氟-4-[6-(2-甲基-2h-四唑-5-基)-3-吡啶基]苯基]-5-(羟基甲基)-2-恶唑烷酮、90ml三乙胺，开启搅拌，降温至-5℃，缓慢滴加99.4g三氯氧磷，滴加完保温反应5小时，反应结束，将反应液缓慢倾入冰水中并搅拌过夜。抽滤，滤饼用水洗涤后再用甲醇洗涤。滤饼真空45℃干燥12小时，得73.8g白色磷酸特地唑胺粗品。下面结合实施例对本发明做进一步详细说明：实施例1本实施例提供一种磷酸特地唑胺的纯化方法，包括如下步骤：将1g磷酸特地唑胺粗品与30ml无水乙醇混合均匀后，过滤，过滤所得固体溶于12ml氢氧化钠水溶液(35wt％)中得磷酸特地唑胺二钠盐的水溶液；用浓盐酸调节磷酸特地唑胺二钠盐的水溶液的ph为2，在100rpm搅拌速率下析晶2.5h，然后过滤，过滤所得固体用无水乙醇洗涤3次(每次15ml)，50℃干燥6h，即得白色粉末磷酸特地唑胺产品，产率为81.6％。取上述磷酸特地唑胺产品0.1g，加0.1mol/l氢氧化钠溶液10ml溶解，然后按照中国药典2010版附录ⅰxb中澄清度检查法进行检查，上述氢氧化钠溶液澄清。实施例2本实施例提供一种磷酸特地唑胺的纯化方法，包括如下步骤：将1g磷酸特地唑胺粗品与20ml无水乙醇混合均匀后，过滤，过滤所得固体溶于15ml氢氧化钠水溶液(25wt％)中得磷酸特地唑胺二钠盐的水溶液；用0.25um的微滤膜过滤磷酸特地唑胺二钠盐的水溶液；用浓盐酸调节过滤后磷酸特地唑胺二钠盐的水溶液的ph为1，在50rpm搅拌速率下析晶3h，然后过滤，过滤所得固体用无水乙醇洗涤3次(每次12ml)，55℃干燥4h，即得白色粉末磷酸特地唑胺产品，产率为75.1％。取上述磷酸特地唑胺产品0.1g，加0.1mol/l氢氧化钠溶液10ml溶解，然后按照中国药典2010版附录ⅰxb中澄清度检查法进行检查，上述氢氧化钠溶液澄清。实施例3本实施例提供一种磷酸特地唑胺的纯化方法，包括如下步骤：将1g磷酸特地唑胺粗品与25ml无水乙醇混合均匀后，过滤，过滤所得固体溶于10ml氢氧化钠水溶液(20wt％)中得磷酸特地唑胺二钠盐的水溶液；用0.25um的微滤膜过滤磷酸特地唑胺二钠盐的水溶液；用浓盐酸调节过滤后磷酸特地唑胺二钠盐的水溶液的ph为3，在70rpm搅拌速率下析晶2h，然后过滤，过滤所得固体用无水乙醇洗涤3次(每次10ml)，60℃干燥5h，即得白色粉末磷酸特地唑胺产品，产率为76.3％。取上述磷酸特地唑胺产品0.1g，加0.1mol/l氢氧化钠溶液10ml溶解，然后按照中国药典2010版附录ⅰxb中澄清度检查法进行检查，上述氢氧化钠溶液澄清。实施例4本实施例提供一种磷酸特地唑胺的纯化方法，包括如下步骤：将1g磷酸特地唑胺粗品与30ml无水乙醇混合均匀后，过滤，过滤所得固体溶于12ml氢氧化钠水溶液(35wt％)中得磷酸特地唑胺二钠盐的水溶液；用0.25um的微滤膜过滤磷酸特地唑胺二钠盐的水溶液；用浓盐酸调节过滤后的磷酸特地唑胺二钠盐的水溶液的ph为2，在100rpm搅拌速率下析晶2.5h，然后过滤，过滤所得固体用无水乙醇洗涤3次(每次15ml)，50℃干燥6h，即得白色粉末磷酸特地唑胺产品，产率为74.3％。取上述磷酸特地唑胺产品0.1g，加0.1mol/l氢氧化钠溶液10ml溶解，然后按照中国药典2010版附录ⅰxb中澄清度检查法进行检查，上述氢氧化钠溶液澄清。实施例5本实施例提供一种磷酸特地唑胺的纯化方法，包括如下步骤：将1g磷酸特地唑胺粗品与30ml无水乙醇混合均匀后，过滤，过滤所得固体溶于12ml氢氧化钠水溶液(35wt％)中得磷酸特地唑胺二钠盐的水溶液；用0.25um的微滤膜过滤磷酸特地唑胺二钠盐的水溶液；用浓盐酸调节过滤后的磷酸特地唑胺二钠盐的水溶液的ph为2，在300rpm搅拌速率下析晶2.5h，然后过滤，过滤所得固体用无水乙醇洗涤3次(每次15ml)，50℃干燥6h，即得白色粉末磷酸特地唑胺产品，产率为75.1％。取上述磷酸特地唑胺产品0.1g，加0.1mol/l氢氧化钠溶液10ml溶解，然后按照中国药典2010版附录ⅰxb中澄清度检查法进行检查，上述氢氧化钠溶液澄清。实施例6本实施例提供一种磷酸特地唑胺的纯化方法，包括如下步骤：将1g磷酸特地唑胺粗品与30ml无水乙醇混合均匀后，过滤，过滤所得固体溶于12ml氢氧化钠水溶液(35wt％)中得磷酸特地唑胺二钠盐的水溶液；用0.25um的微滤膜过滤磷酸特地唑胺二钠盐的水溶液；用浓盐酸调节过滤后的磷酸特地唑胺二钠盐的水溶液的ph为2后，静置析晶2.5h，然后过滤，过滤所得固体用无水乙醇洗涤3次(每次15ml)，50℃干燥6h，即得白色粉末磷酸特地唑胺产品，产率为76.7％。取上述磷酸特地唑胺产品0.1g，加0.1mol/l氢氧化钠溶液10ml溶解，然后按照中国药典2010版附录ⅰxb中澄清度检查法进行检查，上述氢氧化钠溶液澄清。实施例7本实施例提供一种磷酸特地唑胺的纯化方法，包括如下步骤：将1g磷酸特地唑胺粗品与50ml无水乙醇混合均匀后，过滤，过滤所得固体溶于12ml氢氧化钠水溶液(35wt％)中得磷酸特地唑胺二钠盐的水溶液；用0.25um的微滤膜过滤磷酸特地唑胺二钠盐的水溶液；用浓盐酸调节过滤后的磷酸特地唑胺二钠盐的水溶液的ph为2，在100rpm搅拌速率下析晶2.5h，然后过滤，过滤所得固体用无水乙醇洗涤3次(每次15ml)，50℃干燥6h，即得白色粉末磷酸特地唑胺产品，产率为75.1％。取上述磷酸特地唑胺产品0.1g，加0.1mol/l氢氧化钠溶液10ml溶解，然后按照中国药典2010版附录ⅰxb中澄清度检查法进行检查，上述氢氧化钠溶液澄清。实施例8本实施例提供一种磷酸特地唑胺的纯化方法，包括如下步骤：将1g磷酸特地唑胺粗品与10ml无水乙醇混合均匀后，过滤，过滤所得固体溶于12ml氢氧化钠水溶液(35wt％)中得磷酸特地唑胺二钠盐的水溶液；用0.25um的微滤膜过滤磷酸特地唑胺二钠盐的水溶液；用浓盐酸调节过滤后的磷酸特地唑胺二钠盐的水溶液的ph为2，在100rpm搅拌速率下析晶2.5h，然后过滤，过滤所得固体用无水乙醇洗涤3次(每次15ml)，50℃干燥6h，即得白色粉末磷酸特地唑胺产品，产率为74.2％。取上述磷酸特地唑胺产品0.1g，加0.1mol/l氢氧化钠溶液10ml溶解，然后按照中国药典2010版附录ⅰxb中澄清度检查法进行检查，上述氢氧化钠溶液澄清。对比例1本对比例提供一种磷酸特地唑胺的纯化方法，包括如下步骤：将1g磷酸特地唑胺粗品与30ml体积分数为80％的乙醇水溶液混合均匀后，过滤，过滤所得固体溶于12ml氢氧化钠水溶液(35wt％)中得磷酸特地唑胺二钠盐的水溶液；用0.25um的微滤膜过滤磷酸特地唑胺二钠盐的水溶液；用浓盐酸调节过滤后的磷酸特地唑胺二钠盐的水溶液的ph为2，在100rpm搅拌速率下析晶2.5h，然后过滤，过滤所得固体用无水乙醇洗涤3次(每次15ml)，50℃干燥6h，即得白色粉末磷酸特地唑胺产品，产率为78.5％。取上述磷酸特地唑胺产品0.1g，加0.1mol/l氢氧化钠溶液10ml溶解，然后按照中国药典2010版附录ⅰxb中澄清度检查法进行检查，上述氢氧化钠溶液不澄清。对比例2本对比例提供一种磷酸特地唑胺的纯化方法，包括如下步骤：将1g磷酸特地唑胺粗品，10ml二甲亚砜加入反应瓶中，搅拌，加热至50℃左右，溶解澄清后，向其中加入1ml纯化水和10ml甲醇的混合溶剂，升温至70℃，搅拌9小时，降温至10℃，搅拌0.5小时，抽滤得滤饼；所得滤饼转入到反应瓶中，加入5ml纯化水，搅拌，缓慢加入3.85wt％氢氧化钠水溶液，调节溶液的ph至7.8，然后将上述溶液缓慢加入到30ml丙酮中，析晶0.5小时，抽滤，所得滤饼加入到12ml纯化水和12ml四氢呋喃的混合溶剂中，搅拌溶解，用2n的盐酸水溶液快速调ph为1.5，搅拌1小时，抽滤得滤饼；所得滤饼溶解于10ml二甲亚砜中，缓慢加入到控温在50℃的5ml纯化水和15ml乙醇的混合溶剂中，降温至30℃，搅拌1小时，抽滤，50℃干燥，即得白色粉末磷酸特地唑胺产品，产率为75.0％。取上述磷酸特地唑胺产品0.1g，加0.1mol/l氢氧化钠溶液10ml溶解，然后按照中国药典2010版附录ⅰxb中澄清度检查法进行检查，上述氢氧化钠溶液不澄清。实验例将上述各实施例及对比例制得的磷酸特地唑胺产品分别进行含量、有关物质及异构体的检测。有关物质的结构如下表1所示。表1有关物质结构1、有关物质ⅰ供试品溶液的配置：取各实施例及对比例制得的磷酸特地唑胺产品加流动相a溶解并稀释制成每1ml中约含0.5mg磷酸特地唑胺产品的溶液；对照溶液的配置：精密量取上述供试品溶液适量，用流动相a稀释制成每lml中约含0.5μg磷酸特地唑胺产品的溶液；对照品溶液的配置：分别称取特地唑胺开环杂质、去甲基特地唑胺杂质2各适量，然后先用dmso溶解，再用流动相a稀释至刻度制成各杂质含量均为0.5μg/ml的溶液；系统适用性溶液的配置：取磷酸特地唑胺标准品、特地唑胺开环杂质、去甲基特地唑胺杂质2、杂质1.10、杂质1.13、杂质1.19、杂质1.24、杂质1.26、杂质d各适量，然后一起用0.5-1.0mldmso超声使溶解并用流动相a稀释制成每lml中含磷酸特地唑胺及各杂质均为0.5μg的混合溶液；检测方法：照高效液相色谱法(中国药典2010版通则0512)试验，色谱柱：用watersxterrac18色谱柱(4.6mm×250mm，5μm)；(4.6mm×250mm，5μm)；流动相a：0.02mol/l磷酸氢二铵(取磷酸氢二铵2.64g加水1000ml溶解，用磷酸调节ph至6.0)-乙腈(体积比为90：10)；流动相b：乙腈-水(体积比为90：10)；检测波长：300nm；柱温：30℃；流速：1.0ml/min；线性洗脱梯度如下表所示：表2流动相梯度时间/min流动相a％流动相b％090105802020604030505040307040.019010469010精密量取供试品溶液、对照溶液、对照品溶液及系统适用性溶液各10μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。有关物质ⅰ的检测结果如下：表3有关物质ⅰ的检测结果系统适用性溶液中出峰顺序依次为去甲基特地唑胺杂质2、杂质1.19、特地唑胺开环杂质、磷酸特地唑胺、杂质d、杂质1.24、杂质1.13、杂质1.10、杂质1.26；且各杂质峰之间的分离度符合要求。供试品溶液的色谱图中与杂质1.10、杂质1.13、杂质1.19、杂质1.24、杂质1.26和杂质d保留时间一致的色谱峰，按外加校正因子主成分自身对照法计算，杂质1.10、杂质1.13、杂质1.19、杂质1.24、杂质1.26、杂质d的峰面积与其相对校正因子的乘积均小于等于对照溶液主峰面积的0.1％；其中杂质1.10的校正因子为1.0；杂质1.13的校正因子为1.8；杂质1.19的校正因子为1.6；杂质1.24的校正因子为1.5；杂质1.26的校正因子为1.3；杂质d的校正因子为1.5。供试品溶液的色谱图中与特地唑胺开环杂质和去甲基特地唑胺杂质2保留时间一致的色谱峰，按外标法以峰面积计算。供试品溶液中含各杂质含量均小于等于0.1％，其他单个杂质的峰面积小于等于对照溶液的主峰面积的0.1％，杂质总含量小于等于0.5％。供试品溶液色谱图中与系统适用性溶液中保留时间一致的色谱峰及小于对照溶液主峰面积0.3倍的峰均忽略不计。由上表中的数据可知，本发明提供的磷酸特地唑胺的纯化方法，除杂效果好，纯化得到的磷酸特地唑胺纯度高。2、有关物质ⅱ供试品溶液的配置：取各实施例及对比例制得的磷酸特地唑胺产品加流动相a溶解并稀释制成每1ml中约含0.5mg磷酸特地唑胺产品的溶液；对照溶液的配置：精密量取上述供试品溶液适量，用流动相a稀释制成每lml中约含0.5μg磷酸特地唑胺产品的溶液；系统适用性溶液的配置：取磷酸特地唑胺标准品、杂质1.22和杂质1.23适量，加少量dmso溶解并用流动相a稀释制成每lml中含磷酸特地唑胺及各杂质均为0.5μg的混合溶液。检测方法：照高效液相色谱法(中国药典2010版通则0512)试验，用watersxterrac18色谱柱(4.6mm×250mm，5μm)；流动相a：0.02mol/l磷酸氢二铵(取磷酸氢二铵2.64g加水1000ml溶解，用磷酸调节ph至6.0)-乙腈(体积比为90：10)；流动相b：乙腈-水(体积比为70：30)；检测波长：300nm；柱温：35℃；流速：1.0ml/min；线性洗脱梯度如下表所示：表4洗脱梯度时间/min流动相a％流动相b％0802020604030505035406035.018020408020精密量取供试品溶液、对照溶液和系统适用性溶液各10μ1，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。有关物质ⅱ的检测结果如下：表5有关物质ⅱ的检测结果其中，统适用性溶液中出峰顺序依次为磷酸特地唑胺、杂质1.22、杂质1.23；且各杂质峰之间的分离度符合要求。供试品溶液的色谱图中与杂质1.22、杂质1.23保留时间一致的色谱峰，按外加校正因子主成分自身对照法计算，杂质1.22(校正因子为1.3)、杂质1.23(校正因子1.4)的峰面积与其相对校正因子的乘积小于等于对照溶液主峰面积的0.1％，其他单个杂质的峰面积小于等于对照溶液的主峰面积的0.1％。供试品溶液色谱图中小于对照溶液主峰面积0.3倍的峰忽略不计。由上表中的数据可知，本发明提供的磷酸特地唑胺的纯化方法，除杂效果好，纯化得到的磷酸特地唑胺纯度高。3、异构体检测供试品溶液的配置：取各实施例及对比例制得的磷酸特地唑胺产品加[(甲醇-醋酸-三乙胺的体积比为100:2:3)-水(体积比15:85)]溶解并稀释制成每1ml中约含0.2mg的磷酸特地唑胺产品的溶液；对照溶液的配置：精密量取上述供试品溶液0.3ml置100ml容量瓶中用[(甲醇-醋酸-三乙胺的体积比为100:2:3)-水(体积比15:85)]溶解并稀释至刻度，摇匀即得；对照品溶液的配置：精密称取磷酸特地唑胺异构体对照品适量，用[(甲醇-醋酸-三乙胺的体积比为100:2:3)-水(体积比15:85)]稀释制成每lml中约含0.6μg的磷酸特地唑胺异构体溶液；检测方法照高效液相色谱法(中国药典2010版通则0512)试验色谱柱：chiralpakagp(4.0mm×150mm，5μm)；流动相：0.05mol/l磷酸氢二铵(取磷酸氢二铵6.603g加水1000ml溶解，用磷酸调节ph至6.0)-甲醇(88：12)；检测波长：300nm；柱温：25℃；流速：0.5ml/min。精密量取供试品溶液、对照溶液和对照品溶液各10μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。测试结果如下表所示：表6磷酸特地唑胺异构体检测结果各供试品溶液的色谱图中与对照品溶液保留时间一致的色谱峰，峰面积均小于等于对照溶液中主峰面积的0.3％。且由上表中的数据可知，本发明提供的磷酸特地唑胺的纯化方法纯化得到的磷酸特地唑胺中不含其异构体。4、含量测定供试品溶液的配置：取各实施例及对比例制得的磷酸特地唑胺产品用流动相溶解并稀释制成每1ml中约含0.1mg的磷酸特地唑胺产品的溶液；对照品溶液的配置：精密称取磷酸特地唑胺对照品适量，用流动相稀释制成每lml中约含0.6μg的磷酸特地唑胺对照品的溶液；检测方法照高效液相色谱法(中国药典2010版通则0512)试验色谱柱：watersxterrac18(4.0mm×150mm，5μm)；流动相：0.02mol/l磷酸氢二铵缓冲溶液(用磷酸调ph至6.5)-乙腈(体积比80：20)为流动相；；检测波长：300nm；柱温：30℃；流速：1.0ml/min。精密量取供试品溶液和对照品溶液各10μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。各色谱图中的各峰的理论塔板数按磷酸特地唑胺峰计不低于5000。测试结果如下表所示：表7含量测试结果注：含量按外标法计算。由上表中的数据可知，本发明提供的磷酸特地唑胺的纯化方法除杂效果好，得到的磷酸特地唑胺纯度高，均为99.9％以上。显然，所描述的实施例仅仅是本发明的一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。当前第1页12