一种依鲁替尼核心片段的有关物质及其合成方法与流程

本发明属于医药技术及药物合成领域，更具体的说涉及依鲁替尼中间体5-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-4,5-二氢-1h-吡唑-4-腈的有关物质(有关物质也称为杂质)及其制备方法，以及该有关物质作为依鲁替尼中间体5-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-4,5-二氢-1h-吡唑-4-腈产品质量控制标准品的用途。
背景技术：
：ibrutinib(暂译名:依鲁替尼)是一种口服的布鲁顿酪氨酸激酶(btk)抑制药，中文化学名为1-[(3r)-3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)1h-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-哌啶基]-2丙烯-1-酮。依鲁替尼是一种首创的口服布鲁顿酪氨酸激酶(btk)抑制剂，可与btk活性位点上的半胱氨酸残基(cys-481)选择性地共价结合，不可逆地抑制btk的活性，进而抑制bcr信号通路的激活，有效阻止肿瘤从b细胞迁移至适宜肿瘤生长的淋巴组织，减少b细胞恶性增殖并诱导细胞的凋亡，从而发挥治疗cll和mcl的作用。此外，依鲁替尼单药及组合疗法针对广泛类型的血液系统恶性肿瘤展现出了强大的疗效，包括慢性淋巴细胞白血病(cll)、套细胞淋巴瘤(mcl)、waldenstrom巨球蛋白血症(wm)、弥漫性大b细胞淋巴癌(clbcl)、滤泡性淋巴瘤(fl)、多发性骨髓瘤(mm)及边缘区淋巴瘤(mzl)等。美国食品药品管理局(fda)于2013年11月13日加速审批依鲁替尼上市，剂型为140mg胶囊，商品名imbruvica，用于治疗套细胞淋巴瘤。2014年2月12日fda授予依鲁替尼突破性治疗药物的资格，批准依鲁替尼用于先前接受过至少一种药物治疗的慢性淋巴细胞白血病(chroniclymphocyticleukemia，cll)患者。这是fda推出突破性新药新政以来，第2个获准享此待遇的药品。自2014年10月，依鲁替尼先后三次获得欧盟ema的上市批准，治疗复发性或难治性mcl、同时治疗cll、携带del17p删除突变或tp53突变的cll、waldenstrom巨球蛋白血症(wm)。2015年获得日本pmda的批准，治疗复发或难治性的cll。任何影响药物纯度的物质统称为杂质，也称为药物的有关物质。杂质的研究是药品研发的一项重要内容,它包括选择合适的分析方法,准确地分辨与测定杂质的含量并综合药学、毒理及临床研究的结果确定杂质的合理限度。这一研究贯穿于药品研发的整个过程。药品中的杂质按其理化性质一般分为三类:有机杂质、无机杂质及残留溶剂。按照其来源,杂质可以分为工艺杂质(包括合成中未反应完全的反应物及试剂、中间体、副产物等)、降解产物、从反应物及试剂中混入的杂质等。按照其毒性分类,杂质又可分为毒性杂质和普通杂质等。杂质还可按其化学结构分类,如甾体、生物碱、几何异构体、光学异构体和聚合物等。有机杂质包括工艺中引入的杂质和降解产物等,可能是已知的或未知的、挥发性的或不挥发性的。由于这类杂质的化学结构一般与活性成分类似或具渊源关系,故通常又可称之为有关物质。药物杂质检查分析方法应灵敏、专属。通过合适的分析技术将不同结构的杂质进行分离、检测,从而达到对杂质的有效控制。随着分离、检测技术的发展与更新,高效、快速的分离技术与灵敏、稳定、准确、适用的检测手段相结合,几乎所有的有机杂质均能在合适的条件下得到很好的分离与检测。在质量标准中,目前普遍采用的杂质检测方法主要为高效液相色谱法(highperformanceliquidchromatography；hplc)、薄层色谱法(thinlayerchromatography：tlc)、气相色谱法(gaschromatography：gc)和毛细管电泳法(capillaryelectrophoresis；ce)。近年来,质谱技术在药物杂质分析方面应用日益广泛,气相色谱联用技术、液相色谱联用技术已经成为药物杂质分析的重要手段。目前国外对依鲁替尼及其关键片段的有关物质研究的文献报道很少，在国内罕见报道。因此，对依鲁替尼及其关键片段的有关物质进行研究，可以提高和保障依鲁替尼产品的质量。技术实现要素：依鲁替尼的合成路线如下，该路线从4-苯氧基苯甲酸出发，经8步反应实现依鲁替尼的制备。在依鲁替尼关键片段5-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1h-吡唑-4-甲腈(式5)的制备过程中，发现制备出的式5含有一个杂质，本发明确认了依鲁替尼关键片段5-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1h-吡唑-4-甲腈的一个有关物质--5-氨基-1-(2-甲氧基丙-2-基)-3-(4-苯氧基苯基)-1h-吡唑-4-甲腈(式9)，该有关物质的结构如下：为了更好地控制依鲁替尼关键片段和依鲁替尼原料药的质量，本发明对5-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1h-吡唑-4-甲腈(式5)中发现的杂质进行了系统的研究，发现了一种全新结构的杂质----5-氨基-1-(2-甲氧基丙-2-基)-3-(4-苯氧基苯基)-1h-吡唑-4-腈(式9)。通过其他方法单独合成了该杂质，通过杂质的液相定位均与依鲁替尼关键片段式5中的未知杂质相符合，通过核磁共振氢谱、碳谱和单晶结构衍射进一步证实该有关物质的结构与5-氨基-1-(2-甲氧基丙-2-基)-3-(4-苯氧基苯基)-1h-吡唑-4-腈相吻合。本发明提供该杂质的合成方法。本发明所合成的有关物质化合物5-氨基-1-(2-甲氧基丙-2-基)-3-(4-苯氧基苯基)-1h-吡唑-4-甲腈(式9)可作为杂质对照品,可用于5-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1h-吡唑-4-甲腈(式5)和依鲁替尼原料药的质量分析,同时也可以为工艺条件的选择提供参考,有利于生产过程中产品和药品质量的控制。作为本发明还提供一种上述化合物5-氨基-1-(2-甲氧基丙-2-基)-3-(4-苯氧基苯基)-1h-吡唑-4-甲腈(式9)的合成方法,该方法包括以5-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1h-吡唑-4-甲腈(式5)为起始物料在碱存在下和2,2-二氯丙烷/甲醇钠反应得到杂质化合物式9，合成路线如下：本发明所述的制备方法如下：(1)将5-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1h-吡唑-4-腈与1,2-二氯丙烷分散于无水dmf中；(2)将氢化钠与无水dmf混合搅拌降温至-20±5℃；(3)控制温度-20±5℃条件下，向步骤(2)的反应液中滴加步骤(1)的混合液；滴加时间1h，继续搅拌3h；(4)步骤(3)的反应完成后，控制温度0±5℃条件下，向步骤(3)的反应液中加入甲醇钠，继续搅拌3h；(5)步骤(4)的反应完成后，抽滤，得到滤液，70℃减压脱干溶剂，得到略红色粘稠状固体；(6)控制温度20±5℃条件下，向步骤(5)的固体中加入去离子水，打浆搅拌2h，得到类红色固体，即得到杂质式1粗品；(7)控制温度20±5℃条件下，向步骤(6)中得到的杂质粗品加入甲醇，打浆搅拌2h，抽滤，得到滤液，30±5℃条件下减压旋蒸，鼓风干燥得到红色固体，即得杂质式9。本发明的创新点在于：选择了5-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-4,5-二氢-1h-吡唑-4-腈、2,2-二氯丙烷以及甲醇钠作为起始原料，通过一步反应即可便捷的得到依鲁替尼关键片段的有关物质：5-氨基-1-(2-甲氧基丙-2-基)-3-(4-苯氧基苯基)-1h-吡唑-4-甲腈(式9)。式5的hplc分析方法(式9的hplc分析方法和式5的hplc方法相同)：分析仪器：shimadzulc-20at色谱柱：ods-3v4.6×150mm流动相：a：10mmol/lnh4hco3水溶液b：acetonitrile,吸收波长：uv＝254nm柱温：rt流速：1.0ml/min进样量：2μl分析时间：20min积分方法：面积归一梯度程序：time(min)a(％)b(％)0.095512.059515.059515.1955附图说明图1：杂质式9的hplc图谱(出峰时间13.215min)。图2：5-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1h-吡唑-4-甲腈(式5)的hplc图谱(式5出峰时间10.219min,式9杂质出峰时间13.363min,杂质式9的含量为1.27％，杂质式9的相对保留时间1.308)。图3：添加了式9的5-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1h-吡唑-4-甲腈(式5)的hplc图谱(式5出峰时间10.335min,式9杂质出峰时间13.472min,杂质式9的含量为2.62％，杂质式9的相对保留时间1.304)。图4：杂质式9的核磁共振氢谱图。图5：杂质式9的核磁共振碳谱图。图6：杂质式9的单晶结构衍射图。具体实施方式应该理解，本领域技术人员给予此处公开的内容，可以对本发明进行各种不偏离本发明精神和范围内的各种修改和改进。它们都应当落在本申请的权利要求定义的专利保护范围内。此外，应该理解，此处提供的实施例仅用于说明发明的目的，而不应理解为对本发明的限制。下面结合具体实施例对本发明进一步详细描述。实施例1向反应瓶中加入0.92g氢化钠，150ml无水dmf，氮气置换5次，搅拌降温至-20℃，待用。5-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-4,5-二氢-1h-吡唑-4-腈(10g)和2,2-二氯丙烷(4.6g)分散到100ml无水dmf中。控制温度-20℃左右，向氢化钠的分散液中滴加二氯丙烷/5-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-4,5-二氢-1h-吡唑-4-腈的溶液，滴加时间1h，搅拌3h，控制温度0℃左右，再加入甲醇钠(1.45g)，搅拌3h后抽滤，得到滤液，70℃减压脱干溶剂，得到粘稠状固体。再加入50ml水，20℃左右打浆搅拌2h抽滤，得到类红色粗品。即得杂质式9的粗品5.0g，摩尔收率42％。实施例2向反应瓶中杂质式9的粗品(5.0g)、甲醇(25ml)，打浆搅拌2h，抽滤，去除不溶物，得到滤液，滤液30℃左右减压旋蒸去除溶剂，得到红色固体。红色固体40℃鼓风烘箱干燥24h，即得杂质式9的纯品4.0g，收率80％。1hnmr(600mhz,dmso-d6)δ7.81(d,j＝6.8hz,2h),7.42(t,j＝6.7hz,2h),7.18(d,j＝6.3hz,1h),7.08(dd,j＝20.8,6.9hz,4h),6.49(s,2h),3.15(s,3h),1.69(s,6h).；13cnmr(151mhz,meod)δ157.90,157.11,153.86,148.29,130.95,128.40,127.65,124.57,119.64,119.51,116.50,93.20,71.98,50.72,25.67。当前第1页12