抗PVRIG蛋白抗体或抗体片段及其用途的制作方法

本发明涉及医药领域，更具体地，本发明涉及抗pvrig蛋白抗体或抗体片段以及在癌症治疗方面的用途。

背景技术：

1、肿瘤细胞通过多种机制逃避免疫系统的监视。免疫检查点通路用于自身耐受的维持以及活化的淋巴细胞效应功能的控制，但癌细胞可利用该通路来避免受到破坏。最近报道指出，pvrig是一个非常重要的免疫检查点。pvrig主要表达于活化的t细胞和nk细胞上，通过与表达在靶细胞或者dc细胞上的配体cd112相互作用，来抑制t细胞和nk细胞的效应功能。多种肿瘤细胞表面高表达cd112，从而通过pvrig信号通路来抑制免疫系统的功能，实现免疫逃逸。

2、已经有研究表明，pvrig的缺失，可以导致cd8+t细胞的效应功能增强。此外，使用阻断pvrig与其配体cd112结合的抗体也能够有效恢复肿瘤浸润的cd8+t细胞的功能并抑制肿瘤的生长。已经有一种靶向人pvrig的抗体正在进行临床实验，表现出了较好的治疗效果。

3、靶向pvrig的抗体还需要进一步改进。

技术实现思路

1、本发明的目的是提供一种能够促进抗肿瘤功能的抗体或抗体片段及其用途。所提供的抗体或者抗体片段，能够有效结合pvrig，并能够阻断pvrig与其配体cd112的结合。所提供的抗体或者抗体片段经过验证，与人pvrig具有高的亲和力。且能够有效阻断人pvrig和cd112的相互作用。

2、本发明的第一方面，本发明提供了一种抗体或抗体片段，所述抗体或抗体片段包括重链互补决定区hcdr1、hcdr2和hcdr3，以及轻链互补决定区lcdr1、lcdr2和lcdr3；

3、其中hcdr1选自gytfssfs、gytfstfa或gysftayt所示序列，

4、hcdr2选自ilpgsnst、ilpginnt、ilpggnnt或者inpynggt所示序列，

5、hcdr3选自ssywfay、stywfay或aregnyygsrgdfdy所示序列；

6、所述轻链包括轻链互补决定区lcdr1、lcdr2和lcdr3；

7、其中，lcdr1选自qsllnsgnqkny或qtivtn所述序列，

8、lcdr2选自gas或yas所示序列；

9、lcdr3选自qnahsyppt、qnahsyppa或qqshswpft所示序列。

10、在本发明的第二方面，本发明提供了一种抗体或抗体片段，所述抗体或抗体片段分别选自下列中的一种：

11、(1)所述抗体或抗体片段包括重链互补决定区和轻链互补决定区，所述重链互补决定区包括gytfssfs、ilpgsnst和ssywfay；所述轻链互补决定区包括qsllnsgnqkny、gas和qnahsyppt；

12、(2)所述抗体或抗体片段包括重链互补决定区和轻链互补决定区，所述重链互补决定区包括gytfstfa、ilpginnt和stywfay；所述轻链互补决定区包括qsllnsgnqkny、gas和qnahsyppt；

13、(3)所述抗体或抗体片段包括重链互补决定区和轻链互补决定区，所述重链互补决定区包括gytfstfa、ilpggnnt和stywfay；所述轻链互补决定区包括qsllnsgnqkny、gas和qnahsyppa；

14、(4)所述抗体或抗体片段包括重链互补决定区和轻链互补决定区，所述重链互补决定区包括gysftayt、inpynggt和aregnyygsrgdfdy；所述轻链互补决定区包括qtivtn、yas和qqshswpft。

15、在本发明的第三方面，本发明提供了一种抗体或抗体片段，所述抗体或抗体片段选自下列至少之一：

16、(1)所述抗体或抗体片段包括重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区为seqid no:1所示序列或者与seq id no:1所示序列相比具有至少一个氨基酸取代的序列，所述轻链可变区为seq id no:2所示序列或者与seq id no:2所示序列相比具有至少一个氨基酸取代的序列；

17、(2)所述抗体或抗体片段包括重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区选自seqid no:3、seq id no:6、seq id no:9、seq id no:12、seq id no:15、seq id no:18、seq idno:21、seq id no:24、seq id no:27、seq id no:30、seq id no:33所示序列或者与seq idno:3、seq id no:6、seq id no:9、seq id no:12、seq id no:15、seq id no:18、seq idno:21、seq id no:24、seq id no:27、seq id no:30、seq id no:33所示序列相比具有至少一个氨基酸取代的序列，所述轻链可变区为seq id no:36所示序列或者与seq id no:36所示序列相比具有至少一个氨基酸取代的序列；

18、(3)所述抗体或抗体片段包括重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区为seqid no:39所示序列或者与seq id no:39所示序列相比具有至少一个氨基酸取代的序列，所述轻链可变区为seq id no:40所示序列或者与seq id no:40所示序列相比具有至少一个氨基酸取代的序列；

19、(4)所述抗体或抗体片段包括重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区为seqid no:41所示序列或者与seq id no:41所示序列具有至少一个氨基酸取代的序列，所述轻链可变区为seq id no:42所示序列或者与seq id no:42所示序列相比具有至少一个氨基酸取代的序列；

20、(5)所述抗体或抗体片段包括重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区为seqid no:43所示序列或者与seq id no:43所示序列具有至少一个氨基酸取代的序列，所述轻链可变区为seq id no:44所示序列或者与seq id no:44所示序列相比具有至少一个氨基酸取代的序列。

21、在本发明的第四方面，本发明提供了一种可分离的核酸，所述核酸编码上述任一所述的抗体或抗体片段。

22、在本发明的第五方面，本发明提供了一种表达载体，所述表达载体含有上述所述的核酸。

23、在本发明的第六方面，本发明提供了一种重组细胞，所述重组细胞表达上述任一所述的抗体或抗体片段。

24、在本发明的第七方面，本发明提供了一种药物组合物，所述药物组合物包括上述所述抗体或抗体片段和药学上可接受的载体。

25、在本发明的第八方面，本发明提供了一种上述所述抗体或抗体片段或者上述所述的药物组合物在制备治疗癌症的药物中的用途。

26、在本发明的第九方面，本发明提供了一种药物联合，包括：(1)上述所述的抗体或抗体片段，或者上述所述的药物组合物；和(2)不同于(1)的用于癌症治疗的抗体。

27、在本发明的第十方面，本发明提供了一种预防或者治疗癌症的方法，包括给予受试者有效量的上述所述的抗体或抗体片段或者上述所述的药物组合物。

28、在本发明的第十一方面，本发明提供了一种在体外抑制样本中pvrig蛋白活性的方法，包括将所述样本和上述任一项所述的抗体或抗体片段，或者上述所述的药物组合物接触。根据本发明的实施例，所述样本可以为细胞样本。

29、本发明所提供的抗体或抗体片段能够特异性结合pvrig抗原，且能够大幅提升人pbmc的杀伤效果，并且在小鼠模型中表现出较好的抗肿瘤效果。本发明的其它特征和优点将在随后的具体实施方式部分予以详细说明。