技术特征：
1.一种病原体核酸检测试剂盒，其包括如下：1)ucp免疫层析试纸；所述免疫层析试纸按样品流动方向依次包括含有ucp颗粒标记抗体的样品结合垫、含有t线和c线的nc膜和吸水垫；所述t线由链霉亲和素形成；所述c线由所述ucp颗粒标记抗体的二抗形成；2)crispr反应系统；所述crispr反应系统包括crrna、cas蛋白、两端标记生物素和fam的探针、重组酶聚合酶扩增引物；所述cas蛋白为第二类v型或vi型crispr系统中的cas蛋白；所述探针的两个末端分别标记生物素和能与所述ucp颗粒标记抗体结合的基团；所述crrna包括病原体核酸的靶标序列；所述重组酶聚合酶扩增引物为能够扩增靶标序列的重组酶聚合酶扩增引物。2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：所述cas蛋白为cas12a蛋白。3.根据权利要求1或2所述的试剂盒，其特征在于：所述探针的核苷酸探针的两端分别标记生物素和荧光素。4.根据权利要求1-3任一所述的试剂盒，其特征在于：所述ucp颗粒标记抗体为抗fam抗体。5.根据权利要求1-4任一所述的试剂盒，其特征在于：所述病原体为鼠疫菌；所述crrna为特异结合鼠疫菌核酸的pla基因的crrna、特异结合鼠疫菌核酸的lcrv基因的crrna和/或特异结合鼠疫菌核酸的ymt基因的crrna。6.根据权利要求5所述的试剂盒，其特征在于：所述重组酶聚合酶扩增引物为能够特异性扩增鼠疫菌核酸的pla基因全长或部分的引物、能够特异性扩增鼠疫菌核酸的lcrv基因全长或部分的引物和/或能够特异性扩增鼠疫菌核酸的ymt基因全长或部分的引物。7.根据权利要求1-6任一所述的试剂盒，其特征在于：所述crrna的核苷酸序列为序列表中序列1、序列2或序列3；或，所述重组酶聚合酶扩增引物由序列4所示的单链dna分子和序列5所述的单链dna分子组成；或，所述重组酶聚合酶扩增引物由序列6所示的单链dna分子和序列7所述的单链dna分子组成；或，所述重组酶聚合酶扩增引物由序列8所示的单链dna分子和序列9所述的单链dna分子组成；或，所述两端标记生物素和fam的探针的核苷酸序列为5个c组成。8.权利要求1-7任一所述的试剂盒在制备具有如下1)-4)中至少一种功能的产品中的应用：1)检测目标核酸是否为病原体核酸；2)检测待测样品中是否含有病原体核酸；
3)检测待测菌是否为鼠疫菌；4)检测待测样品中是否含有鼠疫菌。9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于：所述病原体核酸为鼠疫菌核酸。
技术总结
本发明公开了基于CRISPR/Cas12a系统和上转换发光颗粒免疫层析的核酸检测试剂盒及应用。本发明提供了本发明提供的试剂盒，其包括如下：1)UCP免疫层析试纸；2)CRISPR反应系统；所述CRISPR反应系统包括crRNA、Cas蛋白、两端标记生物素和FAM的探针、重组酶聚合酶扩增引物；本发明将CRISPR/Cas12a特异性识别靶标核酸序列的特性和UCP免疫层析试纸相结合，建立了一种基于CRISPR/Cas12a系统和UCP免疫层析技术相结合的核酸检测方法，用UCP免疫层析和生物传感器进行CRISPR/Cas核酸检测结果的判读。本方法具有背景低、干扰小、可实现定量检测的特点。的特点。
技术研发人员：杜宗敏 游旸 张平平 杨瑞馥
受保护的技术使用者：中国人民解放军军事科学院军事医学研究院
技术研发日：2021.03.09
技术公布日：2022/9/13