一种抗SARS-CoV-2的重组抗体及其应用的制作方法

文档序号:26010980发布日期:2021-07-23 21:31阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种抗sars-cov-2重组抗体,其特征在于:所述重组抗体包含抗sars-cov-2s蛋白抗体可变区域的氨基酸序列和抗sars-cov-2n蛋白抗体可变区域的氨基酸序列。

2.根据权利要求1所述的抗sars-cov-2重组抗体,其特征在于:所述抗sars-cov-2s蛋白抗体可变区域的氨基酸序列包括抗sars-cov-2s蛋白抗体重链可变区和抗sars-cov-2s蛋白抗体轻链可变区,所述抗sars-cov-2s蛋白抗体重链可变区包含

vhcdr1:氨基酸序列为wrprp或与其具有至少85%的同源性,和/或,

vhcdr2:氨基酸序列为spgltalspsiqtmkrr或与其具有至少85%的同源性,和/或,

vhcdr3:氨基酸序列为etarlgs或与其具有至少85%的同源性,

所述抗sars-cov-2s蛋白抗体轻链可变区包含

vlcdr1:氨基酸序列为cadsvsmkrrllardy或与其具有至少85%的同源性,和/或,

vlcdr2:氨基酸序列为gdstylq或与其具有至少85%的同源性,和/或,

vlcdr3:氨基酸序列为efglgqmnslraedtevh或与其具有至少85%的同源性;

所述抗sars-cov-2n蛋白抗体可变区域的氨基酸序列包括抗sars-cov-2n蛋白抗体重链可变区和抗sars-cov-2n蛋白抗体轻链可变区,所述抗sars-cov-2n蛋白抗体重链可变区包含

vhcdr1:氨基酸序列为qtrer或与其具有至少85%的同源性,和/或,

vhcdr2:氨基酸序列为rrlrfalsmpgtelrdy或与其具有至少85%的同源性,和/或,

vhcdr3:氨基酸序列为vrhvtkl或与其具有至少85%的同源性,

所述抗sars-cov-2n蛋白抗体轻链可变区包含

vlcdr1:氨基酸序列为vqlleseisrdnsknt或与其具有至少85%的同源性,和/或,

vlcdr2:氨基酸序列为idvchvq或与其具有至少85%的同源性,和/或,

vlcdr3:氨基酸序列为qcgfdlfppkpkdtlmis或与其具有至少85%的同源性。

3.根据权利要求1或2所述的抗sars-cov-2重组抗体,其特征在于:所述抗sars-cov-2重组抗体为人源化igg抗体。

4.一种重组核苷酸分子,其特征在于,所述核苷酸分子编码权利要求1至3中任一项所述s蛋白抗体可变区域的氨基酸序列和所述n蛋白抗体可变区域的氨基酸序列。

5.根据权利要求4所述的重组核苷酸分子,其特征在于,其序列之间的排列顺序为:真核kozak-信号肽-抗sars-cov-2s蛋白抗体可变区域碱基序列-linker-抗sars-cov-2n蛋白可变区域碱基序列。

6.根据权利要求5所述的重组核苷酸分子,其特征在于,所述真核kozak的碱基序列为gccacc;所述信号肽的碱基序列为aagttcctggtcaacgtcgctctcgtgttcatg;所述linker的碱基序列为ggaggcggcggatct和/或gaagccgctgccaag。

7.根据权利要求4所述的重组核酸分子,其特征在于,所述重组核苷酸分子还包括人iggfc片段。

8.根据权利要求7所述的重组核苷酸分子,其特征在于,所述重组核苷酸分子的碱基序列如seqidno:33所示。

9.一种重组表达载体,其特征在于:所述重组表达载体包含权利要求4至8中任一项所述的重组核苷酸分子。

10.一种宿主细胞,其特征在于:用权利要求9所述的重组表达载体转染哺乳动物细胞获得所述宿主细胞。

11.一种如权利要求1至3中任一项所述的抗sars-cov-2重组抗体的制备方法,其特征在于:所述制备方法包括如下步骤:

(1)人工合成编码权利要求1至3中任一项所述的可变区基因序列并构建在载体pfuse-higg1-fc2上制备重组质粒;

(2)将步骤(1)的重组质粒转染哺乳动物细胞表达重组蛋白。

(3)对步骤(2)的重组蛋白进行纯化处理,即得所述抗sars-cov-2重组抗体。

12.一种如权利要求1至3中任一项所述的抗sars-cov-2重组抗体在sars-cov-2病毒和/或sars-cov-2病毒中和抗体检测中的应用。

13.一种sars-cov-2中和抗体检测复合质控品,其特征在于:所述复合质控品的原料包括权利要求1至3中任一项所述的抗sars-cov-2重组抗体。


技术总结
本发明涉及一种抗SARS‑CoV‑2的重组抗体及其应用,所述重组抗体包含抗SARS‑CoV‑2S蛋白抗体可变区域的氨基酸序列和抗SARS‑CoV‑2N蛋白抗体可变区域的氨基酸序列。本发明的重组抗体,极大地提高了原料的筛选效率,批间差异小且稳定性高;作为SARS‑CoV‑2中和抗体检测试剂盒的质控品及SARS‑CoV‑2检测试剂原料,在使用过程中可节约存储成本、减小配制工作量、提高工作效率,并减少了试剂死体积,降低原料成本。

技术研发人员:曹长春;王健;赵婷;张小飞;颜松;周玥;宋佳;黄敬双;万文琴;吴斌
受保护的技术使用者:苏州携创生物技术有限公司
技术研发日:2021.03.11
技术公布日:2021.07.23
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