本发明涉及鲑鱼加工技术领域,具体是指一种鲑鱼蛋白多糖提取工艺。
背景技术:
鲑鱼,又名三文鱼,溯河洄游性鱼类,世界著名经济鱼种之一。新鲜的鲑鱼,鱼鳞鲜亮、鱼皮完整、肉质细腻并呈现橘红色,适合切片生食。鲑鱼富含维生素a、b、d、e和各种矿物元素(如锌、硒、磷),还含有大量人体无法合成的多不饱和脂肪酸,尤其是ω-3脂肪酸,它是脑黄金和深海鱼油的主要成分对人体健康十分有益。随着人们食品保健意识的增强,国内市场对鲑鱼的需求量也越来越大。鲑鱼的加工生产会导致产生较多的下脚料,很多下脚料处理不当不仅会导致资源的浪费,而且会对环境造成破坏。鲑鱼软骨中含有的硫酸软骨素具有增加骨密度、促进神经细胞分裂与发育、消炎、抗肿瘤、抗病毒、抗氧化、降血脂、提高免疫力等多种生物活性,能够有效防止人体的动脉硬化,防治冠状动脉心脏病的发作。目前硫酸软骨素已经成为流行的保健品添加剂,也常作为膳食补充剂用于缓解关节不适,改善关节疼痛。硫酸软骨素的生产大多数工厂采用浓碱法、稀碱法、中性盐法等,大量的盐、碱等会对环境造成污染,且产品纯度偏低。
技术实现要素:
本发明的目的是提供一种鲑鱼蛋白多糖提取工艺,通过采用碱提-酶解-醇沉的方式进行提取鲑鱼中的蛋白多糖,减少碱、盐等的使用,增加脱色步骤,提高产品的纯度,以解决背景技术中提到的问题。
为解决上述技术问题,本发明提供的技术方案为:
一种鲑鱼蛋白多糖提取工艺,包括以下原材料:鲑鱼鱼头软骨,所述提取方法包括以下步骤:
(1)原料预处理:鲑鱼鱼头清洗干净后,放入清水中煮3-4h,经过水煮的鱼头软骨冷却后用清水洗去表面的残留物,清洗后的鱼头软骨放入鼓风干燥机中烘干至恒重,烘干后的鱼头软骨先用粉碎机粉碎,粉碎后的鱼头软骨再用超微粉碎机进行进一步粉碎获得鱼头软骨超微粉;
(2)碱提:称取一定质量的鱼头软骨超微粉,加入5%naoh溶液,在摇床内提取12h;
(3)超声:碱提后的溶液用超声波辅助提取;
(4)离心过滤:超声波提取之后的溶液置于离心机内进行离心,离心后保留上清液备用,滤渣中按照固液比1:2的比例加入5%naoh溶液,再用超声波辅助提取1h,离心过滤后保留上清液,合并两次滤液;
(5)酶解:滤液中加入酸或碱溶液调节ph至8.0-9.0,按照固液比1:1000的比例加入酶a,混合液在40-50℃下酶解2-3h,酶解后升高温度至85-90℃灭活20-30min,灭活后的溶液冷却至室温后,调节溶液,按照固液比1:1000的比例加入酶b,混合液在55-65℃下酶解4-5h,酶解后升高温度至85-90℃灭活20-30min,灭活后的溶液冷却至室温;
(6)脱色:酶解后的溶液进行加压抽滤,过滤后保留滤液,向滤液中加入吸附剂进行吸附脱色,快速升温至90℃搅拌30min,冷却后减压抽滤,保留滤液备用;
(7)醇沉:滤液调节ph至6.8-7.2,按照固液比1:4的比例加入95%乙醇沉淀9-10h,除去上清液,用入95%乙醇洗涤沉淀3-4次,然后在6000r/min条件下离心15-20min,离心后保留沉淀;
(8)干燥:收集沉淀置于电热恒温鼓风干燥箱60-80℃烘干,得鲑鱼蛋白多糖。
所述步骤(2)碱提过程中,naoh溶液加入量按照按照固液比1:30的比例加入,摇床的参数设置为转速120r/min,温度为20-30℃。
进一步的,所述步骤(3)超声过程中,超声的参数设置为功率400w,温度设置为45℃,时间3-4h。
进一步的,所述酶a为胰蛋白酶,所述酶b为木瓜蛋白酶。
进一步的,所述步骤(5)酶解过程中溶液置于摇床中,摇床的转速为120r/min。
进一步的,所述吸附剂为活性炭和高岭土。
采用以上提取工艺后,本发明具有如下优点:
本发明采用碱提-酶解-醇沉的方式进行提取鲑鱼中的蛋白多糖,与现有的浓碱法、稀碱法和中性盐法等提取方式相比,提取得率增加,仅使用naoh溶液、乙醇以及少量的酸碱用以调节ph,再无添加其他试剂,提取过程中不用再增加除杂步骤,环保经济,产品安全性高;碱提时增加超声波辅助提取环节,滤渣进行二次提取,二者均可提高物质的提取得率;本发明还增加了脱色这一步骤,脱色使用高岭土和活性炭,不引入试剂和杂质,而且提高了产品最终的纯度;胃蛋白酶使用时要求溶液的ph较小,反应时还需要再加入大量酸溶液进行调节,本发明使用木瓜蛋白酶替代胃蛋白酶,该酶在中性和弱酸性条件下均可发挥作用且作用温度范围广。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明做进一步的详细说明。
实施例一
一种鲑鱼蛋白多糖提取工艺,包括以下原材料:鲑鱼鱼头软骨,所述提取方法包括以下步骤:
(1)原料预处理:鲑鱼鱼头清洗干净后,放入清水中煮3h,经过水煮的鱼头软骨冷却后用清水洗去表面的残留物,清洗后的鱼头软骨放入鼓风干燥机中烘干至恒重,烘干后的鱼头软骨先用粉碎机粉碎,粉碎后的鱼头软骨再用超微粉碎机进行进一步粉碎获得鱼头软骨超微粉;
(2)碱提:称取10kg的鱼头软骨超微粉,加入300l5%naoh溶液,摇床的参数设置为转速120r/min,温度为20℃,提取12h;
(3)超声:碱提后的溶液用超声波辅助提取,超声的参数设置为功率400w,温度设置为45℃,时间3h;
(4)离心过滤:超声波提取之后的溶液置于离心机内进行离心,离心后保留上清液备用,滤渣中按照固液比1:2的比例加入5%naoh溶液,再用超声波辅助提取1h,离心过滤后保留上清液,合并两次滤液;
(5)酶解:滤液中加入酸或碱溶液调节ph至8.0,按照固液比1:1000的比例加入胰蛋白酶,混合液在40℃下酶解3h,酶解后升高温度至85℃灭活30min,灭活后的溶液冷却至室温后,调节溶液,按照固液比1:1000的比例加入木瓜蛋白酶,混合液在55℃下酶解5h,酶解后升高温度至85℃灭活30min,灭活后的溶液冷却至室温;
(6)脱色:酶解后的溶液进行加压抽滤,过滤后保留滤液,向滤液中加入活性炭和高岭土进行吸附脱色,快速升温至90℃搅拌30min,冷却后减压抽滤,保留滤液备用;
(7)醇沉:滤液调节ph至6.8,按照固液比1:4的比例加入95%乙醇沉淀9h,除去上清液,用入95%乙醇洗涤沉淀3次,然后在6000r/min条件下离心15min,离心后保留沉淀;
(8)干燥:收集沉淀置于电热恒温鼓风干燥箱60℃烘干,得鲑鱼蛋白多糖。
实施例二
一种鲑鱼蛋白多糖提取工艺,包括以下原材料:鲑鱼鱼头软骨,所述提取方法包括以下步骤:
(1)原料预处理:鲑鱼鱼头清洗干净后,放入清水中煮4h,经过水煮的鱼头软骨冷却后用清水洗去表面的残留物,清洗后的鱼头软骨放入鼓风干燥机中烘干至恒重,烘干后的鱼头软骨先用粉碎机粉碎,粉碎后的鱼头软骨再用超微粉碎机进行进一步粉碎获得鱼头软骨超微粉;
(2)碱提:称取30kg的鱼头软骨超微粉,加入900l5%naoh溶液,摇床的参数设置为转速120r/min,温度为30℃提取12h;
(3)超声:碱提后的溶液用超声波辅助提取,超声的参数设置为功率400w,温度设置为45℃,时间4h;
(4)离心过滤:超声波提取之后的溶液置于离心机内进行离心,离心后保留上清液备用,滤渣中按照固液比1:2的比例加入5%naoh溶液,再用超声波辅助提取1h,离心过滤后保留上清液,合并两次滤液;
(5)酶解:滤液中加入酸或碱溶液调节ph至9.0,按照固液比1:1000的比例加入胰蛋白酶,混合液在50℃下酶解2h,酶解后升高温度至90℃灭活20min,灭活后的溶液冷却至室温后,调节溶液,按照固液比1:1000的比例加入木瓜蛋白酶,混合液在65℃下酶解4h,酶解后升高温度至90℃灭活20min,灭活后的溶液冷却至室温;
(6)脱色:酶解后的溶液进行加压抽滤,过滤后保留滤液,向滤液中加入高岭土和活性炭进行吸附脱色,快速升温至90℃搅拌30min,冷却后减压抽滤,保留滤液备用;
(7)醇沉:滤液调节ph至7.2,按照固液比1:4的比例加入95%乙醇沉淀10h,除去上清液,用入95%乙醇洗涤沉淀4次,然后在6000r/min条件下离心20min,离心后保留沉淀;
(8)干燥:收集沉淀置于电热恒温鼓风干燥箱80℃烘干,得鲑鱼蛋白多糖。
实施例三
一种鲑鱼蛋白多糖提取工艺,包括以下原材料:鲑鱼鱼头软骨,所述提取方法包括以下步骤:
(1)原料预处理:鲑鱼鱼头清洗干净后,放入清水中煮4h,经过水煮的鱼头软骨冷却后用清水洗去表面的残留物,清洗后的鱼头软骨放入鼓风干燥机中烘干至恒重,烘干后的鱼头软骨先用粉碎机粉碎,粉碎后的鱼头软骨再用超微粉碎机进行进一步粉碎获得鱼头软骨超微粉;
(2)碱提:称取100kg的鱼头软骨超微粉,加入3000l5%naoh溶液,摇床的参数设置为转速120r/min,温度为30℃提取12h;
(3)超声:碱提后的溶液用超声波辅助提取,超声的参数设置为功率400w,温度设置为45℃,时间4h;
(4)离心过滤:超声波提取之后的溶液置于离心机内进行离心,离心后保留上清液备用,滤渣中按照固液比1:2的比例加入5%naoh溶液,再用超声波辅助提取1h,离心过滤后保留上清液,合并两次滤液;
(5)酶解:滤液中加入酸或碱溶液调节ph至8.5,按照固液比1:1000的比例加入胰蛋白酶,混合液在45℃下酶解3h,酶解后升高温度至90℃灭活30min,灭活后的溶液冷却至室温后,调节溶液,按照固液比1:1000的比例加入木瓜蛋白酶,混合液在60℃下酶解4.5h,酶解后升高温度至90℃灭活30min,灭活后的溶液冷却至室温;
(6)脱色:酶解后的溶液进行加压抽滤,过滤后保留滤液,向滤液中加入高岭土和活性炭进行吸附脱色,快速升温至90℃搅拌30min,冷却后减压抽滤,保留滤液备用;
(7)醇沉:滤液调节ph至7.0,按照固液比1:4的比例加入95%乙醇沉淀10h,除去上清液,用入95%乙醇洗涤沉淀4次,然后在6000r/min条件下离心20min,离心后保留沉淀;
(8)干燥:收集沉淀置于电热恒温鼓风干燥箱70℃烘干,得鲑鱼蛋白多糖。
以上所述,仅为本发明较佳的具体实施方式,但本发明的保护范围并不局限于此,任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内,根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变,都应涵盖在本发明的保护范围之内。