1.一种利用定向拆分的内切半乳聚糖酶生产阿拉伯半乳低聚糖的方法,其特征在于:先采用超滤技术对微生物生产的天然半乳聚糖酶液进行组分拆分,获得截留分子量为10-100kda的内切半乳聚糖酶;以阿拉伯半乳聚糖为底物,采用获得的内切半乳聚糖酶进行酶解,制备获得阿拉伯半乳低聚糖。
2.根据权利要求1所述的利用定向拆分的内切半乳聚糖酶生产阿拉伯半乳低聚糖的方法,其特征在于,所述的微生物生产的天然半乳聚糖酶液是由黑曲霉(aspergillusnigernl02)分泌的半乳聚糖酶。
3.根据权利要求1所述的利用定向拆分的内切半乳聚糖酶生产阿拉伯半乳低聚糖的方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)用黑曲霉nl02制备获取天然半乳聚糖酶;
(2)半乳聚糖酶液的定向拆分;
(3)将阿拉伯半乳聚糖与步骤(1)得到的内切半乳聚糖酶混合,加入ph缓冲液混合至底物浓度为10-30g/l,控制ph值为4.0-6.0,反应体系中内切半乳聚糖酶用量为37.5-600u/g阿拉伯半乳聚糖,于40-50℃下水解24-48h,水解结束后于100℃下灭酶活10min,离心得到的上清即为含阿拉伯半乳低聚糖的溶液。
4.根据权利要求3所述的利用定向拆分的内切半乳聚糖酶生产阿拉伯半乳低聚糖的方法,其特征在于,步骤(1)中,天然半乳聚糖酶的制备过程包括:
1)黑曲霉nl02的活化培养:50ml活化培养基置于250ml带棉塞的三角瓶中,121℃灭菌30min,冷却至室温,接入适量保藏于试管斜面的黑曲霉孢子,摇瓶置于恒温摇床中于30±3℃、170rpm条件下培养36h后用于产酶;
2)黑曲霉天然半乳聚糖酶的制备:50ml产酶培养基于在250ml带棉花塞的三角瓶中,121℃灭菌30min,冷却至室温,按10%接种量接入种子;于30±3℃、170rpm的摇床中培养72h;
3)产酶结束后,用离心机在3000rpm条件下离心10min将培养液中的固体物质分离除去,即半乳聚糖酶液。
5.根据权利要求3所述的利用定向拆分的内切半乳聚糖酶生产阿拉伯半乳低聚糖的方法,其特征在于,步骤(2)中,半乳聚糖酶液的定向拆分:选用截留分子量为10-100kda的超滤膜,对天然半乳聚糖酶进行超滤,收集透过超滤膜的酶组分,即透过液酶组分。
6.根据权利要求1或3所述的利用定向拆分的内切半乳聚糖酶生产阿拉伯半乳低聚糖的方法,其特征在于,透过液酶组分中,内切半乳聚糖酶活力不低于40iu/ml,外切半乳聚糖酶活力不高于20iu/ml。