1.拓展的多潜能干细胞在制备心肌细胞中的应用。
2.如权利要求1所述的应用,其特征在于,所述应用包括:将拓展的多潜能干细胞诱导分化为心肌细胞。
3.如权利要求2所述的应用,其特征在于,所述诱导分化方法包括:通过小分子分阶段调控wnt信号通路,诱导eps细胞分化为心肌细胞。
4.一种拓展性多能干细胞诱导分化为心肌细胞的方法,其特征在于,所述方法包括:通过小分子分阶段调控wnt信号通路,诱导eps细胞分化为心肌细胞。
5.如权利要求4所述的方法,其特征在于,所述方法包括:通过小分子分阶段调控wnt信号通路,诱导eps细胞分化为心肌细胞,在小分子分阶段调控前,所述方法还包括将epsc经mtesrtm1和/或knockouttmdmem/f-12+b27+fgf2+tgfβ快速过渡转化;
优选的,b27细胞培养添加剂中含有胰岛素;培养时间控制为1-4天;
进一步优选的,当拓展性多能干细胞汇合度达到50%以上时即可起始诱导分化形成心肌细胞,优选大于85%,更优选为95%以上。
6.如权利要求4所述的方法,其特征在于,所述小分子分阶段调控,具体包括:先添加化学小分子chir99021,进行培养;再添加wnt信号通路抑制化学小分子iwr和iwp2,进行培养。
7.如权利要求6所述的方法,其特征在于,所述chir99021的使用浓度控制为5-10μm,优选为7.5μm;使用iwr的浓度范围为2.5-7.5μm,优选为5μm;使用iwp2的浓度范围1-5μm,优选为2.5μm;
在小分子分阶段调控时期,使用的细胞培养基包括1640+b27;优选的,b27细胞培养添加剂中不含有胰岛素;
优选的,小分子分阶段调控时期培养时间控制为3-7天,优选为4-5天。
8.权利要求3-7任一项所述方法获得的心肌细胞。
9.权利要求3-7任一项所述方法和/或权利要求8所述心肌细胞在如下任意一种或多种中的应用:
a)制备心肌产品用于相关基础研究;
b)药物筛选及心脏相关疾病诊断;
c)心脏相关疾病治疗。
10.如权利要求9所述应用,其特征在于,
所述应用a)中,所述相关基础研究包括对心肌细胞结构功能、特性、信号通路以及电生理检测及研究;
所述应用b)中,包括药物安全评价和新药分子研发;
所述应用c)中,所述心脏相关疾病包括心梗;所述治疗方法包括细胞治疗。