一种枯草芽孢杆菌水分散粒剂及制备方法与应用与流程

1.本发明涉及一种农用枯草芽孢杆菌水分散粒剂，以及其制备方法与应用，属于农业微生物技术领域。


背景技术：

2.化学肥料在促进粮食和农业生产发展中起了不可替代的作用，为粮食的丰收和农民的增收保驾护航。由于施肥技术水平参差不齐，不合理施肥现象普遍存在，盲目过多使用化学肥料，不但造成不可再生资源的浪费和环境的污染，而且果蔬品质和产量也没有得到相应的提高。
3.微生物属于可再生资源，且有益菌种较多，对环境无污染，近几年微生物肥料品种越来越多，是肥料结构发展中主要的中坚力量。枯草芽孢杆菌广泛分布在土壤及腐败的有机物中,具有孢子休眠期、生殖生长期两个生长时期，在生长环境恶劣、营养物质缺乏等不适宜的环境下进入孢子休眠期，并且形成具有极强抗逆作用、在高温、酸碱等极性环境下亦可生存的芽胞，从而适应环境得以生存，且枯草芽孢杆菌能分泌枯草菌素、多粘菌素、短杆菌肽，合成淀粉酶、蛋白酶、维生素等活性物质，抑制病菌生长，改善果蔬品质，降低化肥使用量，提高肥料利用率，将其制成制剂，可作为优质的微生物肥料用于农业种植中。
4.目前含枯草芽孢杆菌的微生物肥料主要有液剂、粉剂和颗粒剂。因液剂产品含有大量水分，孢子在水溶液中萌发，会出现产气和有效菌数衰减等问题，不适合长期储运；粉剂产品使用过程中易产生扬尘，造成环境污染和人体损害，使用效果不佳；颗粒剂产品因存在水中分散性差、粒度大等问题，仅可以用于底施，不适合滴管和叶喷，限制了其使用层面。
5.水分散粒剂具有使用方便、无粉尘飞扬、不污染环境、安全等特点，能较快地崩解、分散，形成高悬浮的固液分散体系，能很好的解决微生物液剂、粉剂、颗粒剂的缺陷，是一种优良的微生物肥料剂型。经检索发现，仅以玉米淀粉和玉米浆粉为碳氮源的发酵工艺中发酵活菌数低，中国专利文献cn101935624b发酵液活菌数150亿cfu/ml。水分散粒剂制备过程中均加入有机润湿剂、分散剂、不溶载体等外源物质，这些物质基本不能被植物吸收利用，过多使用会对作物生长产生危害，且在使用中会起泡过多，影响使用，有机润湿剂和分散剂会对孢子萌发产生抑制作用。如中国专利文献cn110612979a、cn109997877a、cn104396950b等制备的微生物水分散粒剂，在制备过程中均加入有机润湿剂、分散剂。中国专利文献cn102870822b实施例二在制备木霉菌厚垣孢子生物农药水分散粒剂过程中未加入有机润湿剂，所制备的水分散粒剂悬浮率低（43.2%），不利于叶喷使用，且会局部浓度过高，对叶片产生灼伤。


技术实现要素：

6.针对以上现有技术的不足，为提高发酵质量、微生物肥料的安全性、有效性及方便使用性，本发明提供一种枯草芽孢杆菌水分散粒剂及制备方法。所制备的枯草芽孢杆菌活菌数高，喷雾干燥收率高，水分散粒剂兼有不易飞散、货架期长、起泡量少、易于溶解分散，
且产品效果稳定易于保存等特点，同时使用方式多样化，既可以常规的沟施、穴施、撒施，更适用于微滴灌、飞防等集约化农业中的微生物制剂。
7.一种枯草芽孢杆菌水分散粒剂及制备方法，包括如下步骤：（1）菌种活化：将低温保存的枯草芽孢杆菌菌株接种于营养琼脂平板培养基上，于35
‑
38℃培养24
‑
36h；（2）种子液制备：挑取步骤（1）中大菌落转接到种子培养基上，摇床200
‑
300rpm，于35
‑
38℃培养15
‑
20h，作为种子液；所述种子培养基的组成成分及其重量百分比为：葡萄糖1
‑
2％，蛋白胨1
‑
1.5％，酵母粉0.6
‑
1％，牛肉膏0.5
‑
0.7％，氯化钠0.4
‑
0.6％，其余为水；（3）发酵培养：按照1
‑
5％的接种量向发酵培养基中接入步骤(2)制备的种子液，通气量为0.4
‑
1.5vvm，搅拌速度为200
‑
500rpm，温度35
‑
38℃，培养时间为30
‑
40h，得到发酵液；所述发酵培养基的组成成分及其重量百分比为：5
‑
9%玉米淀粉（60
‑
70℃水解1
‑
2h）、7000活力单位淀粉酶（淀粉用量的0.01
‑
0.03%）、5
‑
8%玉米浆干粉、0.1
‑
0.5%葡萄糖、0.1
‑
0.5%碳酸钙、0.1
‑
0.2%硫酸镁、0.05
‑
0.1%磷酸氢二钠、0.02
‑
0.05%硫酸锰、0.02
‑
0.05%硫酸锌，其余为水，调ph6.0
‑
8.0；（4）喷雾干燥：向发酵液中加入保护剂1和保护剂2，搅拌0.5
‑
1h至保护剂完全溶解，过80
‑
100目筛，再以进风口温度150
‑
200℃，出风口温度50
‑
90℃条件进行喷雾干燥，得到枯草芽孢杆菌菌粉；所述保护剂组成成分及其重量百分比为：保护剂1：包括但不限于硫酸钾、氯化钾等可溶无机盐中的一种或几种混合，添加量为发酵液总量的2
‑
4%；保护剂2：包括但不限于葡萄糖、蔗糖、乳糖、糖醇、氨基酸粉等可溶有机物中的一种或几种混合，添加量为发酵液总量的2
‑
4%；（5）制粒：将载体1和载体2粉碎过80
‑
100目筛，与步骤（4）所制得的菌粉混合均匀，加入到沸腾造粒内，进行沸腾造粒，沸腾时喷入3
‑
10%水，待观察到基本都已成为较为均匀微粒时，停机取出，得到枯草芽孢杆菌水分散粒剂；所述载体组成成分及其重量百分比为：载体1：包括但不限于磷酸二氢钾、氯化钾等可溶无机盐中的一种或几种混合，添加量为总量的40
‑
80%；载体2：包括但不限于葡萄糖、蔗糖、糊精、可溶淀粉、氨基酸粉、黄腐酸粉、玉米浆干粉等可溶有机物中的一种或几种混合，添加量为总量的10
‑
40%，其余为枯草芽孢杆菌菌粉。
8.本发明的技术特点及优良效果：1.本发明发酵工艺，发酵液中活菌数高（200
‑
280亿cfu/ml），干燥收率高（≥90%）；2.本发明发酵过程、制粒过程采用全水溶物料，含有微量元素、中量元素、大量元素及有机养分，均可作为孢子萌发和植物生长的营养原料，益于孢子萌发和植物吸收及成长；3.本发明所制备的枯草芽孢杆菌水分散粒剂未添加外源有机润湿剂、分散剂，不影响孢子正常萌发，不危害植物生长；4.本发明制粒所用原料只需要普通粉碎即可，不需要过气流粉碎机，降低能耗和设备投入；
5.本发明制备工艺成粒率高，40
‑
60目占比≥80%6.本发明所制备的枯草芽孢杆菌水分散粒剂基本无粉尘（gb/t30360
‑
2013法测定≤30mg）、起泡量少（gb/t28137
‑
2011法测定≤20ml）、润湿快（gb/t5451
‑
2001法测定≤60s）、悬浮率高（gb/t14825
‑
2006法测定≥90%）、湿筛通过率高（gb/t16150
‑
1995测定法75μm通过率≥99%），易于使用，安全系数高；7.本发明所制备的枯草芽孢杆菌水分散粒剂可有效提高肥料利用率，降低化肥使用量。
9.8.本发明枯草芽孢杆菌水分散粒剂的制备过程无“三废”污染，无危化品应用，原料低廉易得，操作工艺简便，可应用于工业化大规模生产；附图说明：图1为所制备的枯草芽孢杆菌水分散粒剂外观图，1
‑
1为实施例1所制备，1
‑
2为实施例2所制备；图2为实施例1发酵干燥后菌粉配置成溶液后1小时孢子萌发状态图，2
‑
1为直接发酵菌粉，未添加任何物质；2
‑
2为发酵菌粉，加入一般造粒载体白炭黑、高岭土；2
‑
3为发酵菌粉，加入实施例1中造粒所需的磷酸氢二钾和氨基酸；图3为实施例1发酵干燥后菌粉配置成溶液后4小时孢子萌发状态图，3
‑
1为直接发酵菌粉，未添加任何营养源；3
‑
2为发酵菌粉，加入一般造粒载体白炭黑、高岭土；3
‑
3为发酵菌粉，加入实施例1中造粒所需的磷酸氢二钾和氨基酸；图4为实施例1发酵干燥后菌粉培养皿试验图，4
‑
1中心打孔后滴入30μl去离子水，4
‑
2中心打孔后滴入30μl皂角粉稀释液，4
‑
3中心打孔后滴入30μl 脂肪醇聚氧乙烯醚aeo
‑
9稀释液。
具体实施方式
10.以下通过具体的实施例对本发明的上述内容作出进一步详细说明，但不应将此理解为本发明的内容仅限于下述实例，本发明的保护范围并不限于此。
11.以下实施例制备方法中未特别说明的均按照现有技术实施。
12.发酵培养：实施例1一种枯草芽孢杆菌培养方法，步骤如下：（1）菌种活化：将低温保存的枯草芽孢杆菌菌株接种于营养琼脂平板培养基上，于37℃培养30h；（2）种子液制备：挑取步骤（1）中大菌落转接到种子培养基上，摇床260rpm，于37℃培养16h，作为种子液；所述种子培养基的组成成分及其重量百分比为：葡萄糖1.5％，蛋白胨1％，酵母粉0.7％，牛肉膏0.7％，氯化钠0.5％，其余为水；（3）发酵培养：按照3％的接种量向发酵培养基中接入步骤(2)制备的种子液，通气量为1vvm，搅拌速度为300rpm，温度37℃，培养时间为33h，得到发酵液；所述发酵培养基的组成成分及其重量百分比为：7%玉米淀粉（65℃水解1.5h）、7000活力单位淀粉酶（淀粉用量的0.02%）、6%玉米浆干粉、0.3%葡萄糖、0.3%碳酸钙、0.1%硫
酸镁、0.08%磷酸氢二钠、0.03%硫酸锰、0.03%硫酸锌，其余为水，调ph7.5；在此条件下发酵结束芽孢率94.5%，发酵液活菌数247亿cfu/ml。
13.实施例2一种枯草芽孢杆菌培养方法，步骤如下：（1）菌种活化：将低温保存的枯草芽孢杆菌菌株接种于营养琼脂平板培养基上，于36℃培养33h；（2）种子液制备：挑取步骤（1）中大菌落转接到种子培养基上，摇床260rpm，于36℃培养18h，作为种子液；所述种子培养基的组成成分及其重量百分比为：葡萄糖1.6％，蛋白胨1.2％，酵母粉0.7％，牛肉膏0.7％，氯化钠0.5％，其余为水；（3）发酵培养：按照5％的接种量向发酵培养基中接入步骤(2)制备的种子液，通气量为1.2vvm，搅拌速度为260rpm，温度36℃，培养时间为36h，得到发酵液；所述发酵培养基的组成成分及其重量百分比为：9%玉米淀粉（70℃水解1h）、7000活力单位淀粉酶（淀粉用量的0.02%）、8%玉米浆干粉、0.4%葡萄糖、0.2%碳酸钙、0.2%硫酸镁、0.1%磷酸氢二钠、0.04%硫酸锰、0.04%硫酸锌，其余为水，调ph7.0；在此条件下发酵结束芽孢率92.1%，发酵液活菌数273亿cfu/ml。
14.实施例3一种枯草芽孢杆菌培养方法，步骤如下：（1）菌种活化：将低温保存的枯草芽孢杆菌菌株接种于营养琼脂平板培养基上，于36℃培养30h；（2）种子液制备：挑取步骤（1）中大菌落转接到种子培养基上，摇床260rpm，于36℃培养20h，作为种子液；所述种子培养基的组成成分及其重量百分比为：葡萄糖1.7％，蛋白胨1.3％，酵母粉0.8％，牛肉膏0.6％，氯化钠0.5％，其余为水；（3）发酵培养：按照3％的接种量向发酵培养基中接入步骤(2)制备的种子液，通气量为1vvm，搅拌速度为260rpm，温度36℃，培养时间为30h，得到发酵液；所述发酵培养基的组成成分及其重量百分比为：5%玉米淀粉（70℃水解1h）、7000活力单位淀粉酶（淀粉用量的0.02%）、5%玉米浆干粉、0.5%葡萄糖、0.2%碳酸钙、0.2%硫酸镁、0.1%磷酸氢二钠、0.05%硫酸锰、0.05%硫酸锌，其余为水，调ph7.0；在此条件下发酵结束芽孢率95.7%，发酵液活菌数212亿cfu/ml。
15.对比例1一种枯草芽孢杆菌培养方法，步骤如下：与实施例1相同的发酵过程，发酵培养基降低玉米淀粉和玉米浆粉用量分别到3.5%、3%，发酵培养时间20h。
16.在此条件下发酵结束芽孢率94.9%，制备的发酵液活菌数157亿cfu/ml。
17.对比例2一种枯草芽孢杆菌培养方法，步骤如下：与实施例1相同的发酵过程，发酵培养基提高玉米淀粉和玉米浆粉用量分别到10%、8.5%，发酵培养时间40h。
18.在此条件下发酵过程中芽孢率92.3%，发酵液活菌数256亿cfu/ml。
19.对比例3一种枯草芽孢杆菌培养方法，步骤如下：与实施例1相同的发酵过程，发酵培养基将玉米浆粉替换为蛋白胨、酵母浸粉、脱脂奶粉、胨化牛奶中的一种，发酵培养时间33h。
20.在此条件下发酵结束芽孢率分别为93.8%、92.5%、94.6%、91.2%，制备的发酵液活菌数165亿cfu/ml、143亿cfu/ml、172亿cfu/ml、166亿cfu/ml。
21.对比例4一种枯草芽孢杆菌培养方法，步骤如下：与实施例1相同的发酵过程，去掉淀粉酶，发酵培养基将玉米淀粉替换为葡萄糖、蔗糖、麦芽糊精、甘油中的一种，发酵培养时间33h。
22.在此条件下发酵结束芽孢率分别为92.7%、94.3%、93.4%、92.6%，制备的发酵液活菌数142亿cfu/ml、159亿cfu/ml、166亿cfu/ml、148亿cfu/ml。
23.喷雾干燥：实施例4向实施例1步骤（3）发酵液中加入保护剂（2%硫酸钾和2.5%氨基酸），搅拌1h至保护剂完全溶解，过80目筛，再以进风口温度180℃，出风口温度80℃条件进行喷雾干燥，得到枯草芽孢杆菌菌粉；此条件下，喷雾干燥收率为收率92.1%。
24.实施例5向实施例1步骤（3）发酵液中加入保护剂（3%氯化钾和3%葡萄糖），搅拌1h至保护剂完全溶解，过80目筛，再以进风口温度170℃，出风口温度75℃条件进行喷雾干燥，得到枯草芽孢杆菌菌粉；此条件下，喷雾干燥收率为收率93.7%。
25.实施例6向实施例1步骤（3）发酵液中加入保护剂（4%氯化钾和4%蔗糖），搅拌1h至保护剂完全溶解，过80目筛，再以进风口温度175℃，出风口温度75℃条件进行喷雾干燥，得到枯草芽孢杆菌菌粉；此条件下，喷雾干燥收率为收率95.4%。
26.对比例5与实施例4相同工艺，不添加保护剂。
27.此条件下，喷雾干燥收率为收率65.5%。
28.对比例6与实施例4相同工艺，保护剂添加量改为硫酸钾1.9%、氨基酸1.9%。
29.此条件下，喷雾干燥收率为收率84.2%。
30.对比例7与实施例4相同工艺，保护剂添加量改为硫酸钾4.5%、氨基酸4.5%。
31.此条件下，喷雾干燥收率为收率95.2%。
32.对比例8
与实施例4相同工艺，保护剂添加量改为硫酸钾4.5%。
33.此条件下，喷雾干燥收率为收率71.1%。
34.对比例9与实施例4相同工艺，保护剂添加量改为氨基酸4.5%。
35.此条件下，喷雾干燥收率为收率83.5%。
36.对比例10与实施例4相同工艺，保护剂添加量改为2%（尿素、磷酸二氢钾、磷酸一铵、硼酸中的一种或多种混合）、氨基酸2.5%。
37.此条件下，喷雾干燥收率为收率72
‑
84%。
38.制粒：实施例7一种枯草芽孢杆菌水分散粒剂及制备方法，步骤如下：将1kg实施例4枯草芽孢杆菌菌粉、3kg氯化钾和1kg氨基酸分别粉碎过80目筛，将原料混合均匀，加入到沸腾造粒内，进行沸腾造粒，沸腾时喷入5%水，待观察到基本都已成为较为均匀微粒时，停机取出，得到枯草芽孢杆菌水分散粒剂。
39.在此条件下制备的枯草芽孢杆菌水分散粒剂40
‑
60目占比86.7%，粉尘量27.7mg、起泡量10.6ml、润湿时间53s、悬浮率92.3%、湿筛通过率99.7%。
40.实施例8一种枯草芽孢杆菌水分散粒剂及制备方法，步骤如下：将1kg实施例4枯草芽孢杆菌菌粉、9kg磷酸二氢钾和2kg黄腐酸分别粉碎过80目筛，将原料混合均匀，加入到沸腾造粒内，进行沸腾造粒，沸腾时喷入7%水，待观察到基本都已成为较为均匀微粒时，停机取出，得到枯草芽孢杆菌水分散粒剂。
41.在此条件下制备的枯草芽孢杆菌水分散粒剂40
‑
60目占比84.5%，粉尘量19.1mg、起泡量7.4ml、润湿时间33s、悬浮率95.1%、湿筛通过率99.9%。
42.实施例9一种枯草芽孢杆菌水分散粒剂及制备方法，步骤如下：将1kg实施例4枯草芽孢杆菌菌粉、2kg磷酸二氢钾和2kg蔗糖分别粉碎过80目筛，将原料混合均匀，加入到沸腾造粒内，进行沸腾造粒，沸腾时喷入5%水，待观察到基本都已成为较为均匀微粒时，停机取出，得到枯草芽孢杆菌水分散粒剂。
43.在此条件下制备的枯草芽孢杆菌水分散粒剂40
‑
60目占比85.6%，粉尘量26.3mg、起泡量4.9ml、润湿时间49s、悬浮率94.2%、湿筛通过率99.9%。
44.实施例10一种枯草芽孢杆菌水分散粒剂及制备方法，步骤如下：将1kg实施例4枯草芽孢杆菌菌粉、2kg磷酸二氢钾、2kg氯化钾和2kg可溶淀粉分别粉碎过80目筛，将原料混合均匀，加入到沸腾造粒内，进行沸腾造粒，沸腾时喷入8%水，待观察到基本都已成为较为均匀微粒时，停机取出，得到枯草芽孢杆菌水分散粒剂。
45.在此条件下制备的枯草芽孢杆菌水分散粒剂40
‑
60目占比86.6%，粉尘量20.3mg、起泡量10.5ml、润湿时间37s、悬浮率91.0%、湿筛通过率99.9%。
46.实施例11
一种枯草芽孢杆菌水分散粒剂及制备方法，步骤如下：将1kg实施例4枯草芽孢杆菌菌粉、2kg氯化钾和1kg可溶淀粉、1kg糊精分别粉碎过80目筛，将原料混合均匀，加入到沸腾造粒内，进行沸腾造粒，沸腾时喷入7%水，待观察到基本都已成为较为均匀微粒时，停机取出，得到枯草芽孢杆菌水分散粒剂。
47.在此条件下制备的枯草芽孢杆菌水分散粒剂40
‑
60目占比84.1%，粉尘量24.5mg、起泡量12.6ml、润湿时间52s、悬浮率93.8%、湿筛通过率99.6%。
48.对比例11一种枯草芽孢杆菌水分散粒剂及制备方法，步骤如下：将1kg实施例4枯草芽孢杆菌菌粉、1kg氯化钾和1kg氨基酸分别粉碎过80目筛，将原料混合均匀，加入到沸腾造粒内，进行沸腾造粒，沸腾时喷入5%水，待观察到基本都已成为较为均匀微粒时，停机取出，得到枯草芽孢杆菌水分散粒剂。
49.在此条件下制备的过程中成粒均一度低，出现较大颗粒，且枯草芽孢杆菌水分散粒剂润湿时间长达135s，不满足使用。
50.对比例12一种枯草芽孢杆菌水分散粒剂及制备方法，步骤如下：将1kg实施例4枯草芽孢杆菌菌粉、3kg氯化钾和0.4kg氨基酸分别粉碎过80目筛，将原料混合均匀，加入到沸腾造粒内，进行沸腾造粒，沸腾时喷入5%水。
51.在此条件下制备的枯草芽孢杆菌水分散粒剂成粒率低，40
‑
60目占比51.0%。
52.对比例13一种枯草芽孢杆菌水分散粒剂及制备方法，步骤如下：将1kg实施例4枯草芽孢杆菌菌粉、9kg氯化钾和1kg氨基酸分别粉碎过80目筛，将原料混合均匀，加入到沸腾造粒内，进行沸腾造粒，沸腾时喷入5%水。
53.在此条件下制备的枯草芽孢杆菌水分散粒剂成粒率低，40
‑
60目占比42.5%。
54.对比例14一种枯草芽孢杆菌水分散粒剂及制备方法，步骤如下：将0.5kg实施例4枯草芽孢杆菌菌粉、8kg氯化钾和1kg氨基酸分别粉碎过80目筛，将原料混合均匀，加入到沸腾造粒内，进行沸腾造粒，沸腾时喷入5%水。
55.在此条件下制备的枯草芽孢杆菌水分散粒剂成粒率低，40
‑
60目占比46.1%。
56.对比例15一种枯草芽孢杆菌水分散粒剂及制备方法，步骤如下：将1kg实施例4枯草芽孢杆菌菌粉、3kg氯化钾和3kg氨基酸分别粉碎过80目筛，将原料混合均匀，加入到沸腾造粒内，进行沸腾造粒，沸腾时喷入5%水。
57.在此条件下制备的过程中成粒均一度低，出现较大颗粒，且枯草芽孢杆菌水分散粒剂润湿时间长达135s，不满足使用。
58.对比例16一种枯草芽孢杆菌水分散粒剂及制备方法，步骤如下：将1kg实施例4枯草芽孢杆菌菌粉、3kg（尿素、磷酸二氢铵、硫酸铁、硫酸铜、硫酸铵、硫酸锌、硫酸锰、氯化锌、氯化铁、氯化铜、氯化锰、氯化铵中的一种或其混合物）和1kg氨基酸分别粉碎过80目筛，将原料混合均匀，加入到沸腾造粒内，进行沸腾造粒，沸腾时喷入
5%水，待观察到基本都已成为较为均匀微粒时，停机取出，得到枯草芽孢杆菌水分散粒剂。
59.在此条件下制备的过枯草芽孢杆菌水分散粒剂存储不稳定，出现结块现象。
60.对比例17一种枯草芽孢杆菌水分散粒剂及制备方法，步骤如下：将1kg实施例4枯草芽孢杆菌菌粉、3kg（硫酸镁、硫酸钾、氯化镁、氯化钙、硼酸、硼酸钠、硼酸钾中的一种或其混合物）和1kg氨基酸分别粉碎过80目筛，将原料混合均匀，加入到沸腾造粒内，进行沸腾造粒，沸腾时喷入5%水，待观察到基本都已成为较为均匀微粒时，停机取出，得到枯草芽孢杆菌水分散粒剂。
61.在此条件下制备的过枯草芽孢杆菌水分散粒剂存储不稳定，出现粉化现象。
62.对比例18一种枯草芽孢杆菌水分散粒剂及制备方法，步骤如下：采用市售枯草芽孢杆菌菌粉和实施例7中相同载体、相同工艺制备水分散粒剂。
63.在此条件下制备的枯草芽孢杆菌水分散粒剂40
‑
60目占比57.8%，粉尘量72.9mg、起泡量11.7ml、润湿时间132s、悬浮率83.2%、湿筛通过率90.5%。
64.试验例：枯草芽孢水分散粒剂喷施对番茄生长的影响通过盆栽试验，验证实施例1所制备的枯草芽孢水分散粒剂喷施对番茄生长的影响。
65.本试验于2020.8.20
‑
2020.10.15在温室采用盆栽方式进行，每盆土5kg，共6个处理，每个处理6个重复，具体设计如表1。选择长势一致的番茄苗移栽至塑料盆中，缓苗15天后开始处理，每10天喷施一次，共喷施3次。
66.表1试验设计表2不同处理对番茄生理生长指标的影响
由表2可以看出，试验相对于对照1、2、3、4、5在番茄生长各项测试指标均有显著提高，说明实施例1所制备的枯草芽孢杆菌水分散粒剂，有助于作物生长；试验、对照4、对照5与对照2、3比较可以得出，枯草芽孢杆菌与大量元素、有机养分具有协同增效的作用，且经过制粒的效果优于简单混合；试验、对照4、对照5与对照3比较可以得出，使用菌剂可以提高肥料利用率，有效降低化肥使用量，促进作物生长，且经过本发明发酵菌粉制粒的效果优于简单混合和市售菌粉制粒的效果。