一种微生物除臭剂的制备方法与流程

1.本发明涉及发酵除臭技术领域，更具体的说是涉及一种微生物除臭剂的 制备方法。


背景技术：

2.除臭剂具有除臭、除味、净化空气等作用，其中包含物理除臭剂、化学 除臭剂、微生物型除臭剂和复合除臭剂。微生物除臭剂是利用微生物的生理 代谢活动和其代谢产物，使含有恶臭气味的物质分解掉。该除臭方法具有持 久性强，作用迅速，受干扰因素小，安全、价格低廉等特点。
3.20世纪50年代，微生物除臭技术成为发展起来的新兴除臭技术，通过微 生物的生理代谢活动降解恶臭气味，将其氧化成无臭，无害的气味。70年代 后，各国开始在这一领域开展广泛研究，其中，日本，德国取得的成就最为 显著，主要研究内容包括除臭的基本原理和方法，装备设置及操作工艺条件 等。我国20世纪90年代后开展此方面的实验室研究工作，目前已有一些研究 报道。
4.现有技术中的除臭菌种包括芽孢芽孢杆菌、酵母菌、乳酸菌、醋酸杆菌， 单一的菌种对除臭具有效果，但效果有限。因此，如何将利用单一菌种的特 点进行互补组合得到复合菌种使其具有更好的除臭效果是本领域技术人员亟 待解决的问题。


技术实现要素：

5.有鉴于此，本发明提供了一种复合微生物除臭剂的制备工艺。
6.为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
7.一种微生物除臭剂的制备方法，包括以下步骤：
8.(1)分别配置氨化细菌固体培养基、柴那斯固体培养基、h2s实验固体 培养基和pda+氨水固体培养基，然后取厨余垃圾渗沥液分别涂布在四种固体 培养基上进行培养；
9.(2)选取各固体培养基上的优势菌株分别对应接种至氨化细菌液体培 养基、柴那斯液体培养基、h2s实验液体培养基和pda+氨水液体培养基中， 置于摇床上继续培养，分别得到氨化细菌培养基除臭菌、柴那斯培养基除臭 菌、h2s实验培养基除臭菌和pda+氨水培养基除臭菌；
10.(3)将步骤(2)培养后的四种除臭菌进行复配得到微生物除臭剂，1kg 微生物除臭剂中菌量浓度比例为氨化细菌培养基除臭菌：柴那斯培养基除臭 菌：h2s实验培养基除臭菌：pda+氨水培养基除臭菌＝3亿：4亿：2亿：1 亿。
11.优选的，所述的氨化细菌固体培养基中各组分及质量体积比为：
12.蛋白胨：k2hpo4：fe2so4：nacl：mso4·
h2o：琼脂：去离子水＝5g： (0.9
‑
1.1)g：(0.010
‑
0.012)g：(0.25
‑
0.26)g：(0.50
‑
0.55)g：(10
‑
25) g：1000ml；
13.所述的氨化细菌固体培养基ph＝7.2，121℃灭菌20min。
14.优选的，所述柴那斯固体培养基中各组分及质量体积比为：
15.柠檬酸铁：蛋白胨：琼脂：去离子水＝(0.50
‑
0.55g)：(10.0
‑
10.1g)： (15.0
‑
15.2g)：1000ml。
16.优选的，所述h2s实验固体培养基中各组分及质量体积比为：
17.nacl：牛肉膏：蛋白胨：琼脂粉：去离子水＝(5.0
‑
5.1)g：(3.0
‑
3.1)g： (10.0
‑
10.1)g：(15.0
‑
15.1)g：1000ml；
18.所述的h2s实验固体培养基ph＝7.4
‑
7.6、121
°
c灭菌20min。
19.优选的，所述pda+氨水固体培养基中各组分及质量体积比为：土豆：琼 脂：葡萄糖：去离子水＝(200
‑
205)g：(10
‑
25)g：(20.0
‑
20.1)g：1000ml。
20.优选的，所述的氨化细菌液体培养基中各组分及质量体积比为：
21.蛋白胨：k2hpo4：fe2so4：nacl：mso4·
h2o：去离子水＝5g：(0.9
‑
1.1) g：(0.010
‑
0.012)g：(0.25
‑
0.26)g：(0.50
‑
0.55)g：1000ml；
22.所述的氨化细菌固体培养基ph＝7.2，121℃灭菌20min。
23.优选的，所述柴那斯液体培养基中各组分及质量体积比为：
24.柠檬酸铁：蛋白胨：去离子水＝(0.50
‑
0.55g)：(10.0
‑
10.1g)：1000ml。
25.优选的，所述h2s实验液体培养基中各组分及质量体积比为：
26.nacl：牛肉膏：蛋白胨：去离子水＝(5.0
‑
5.1)g：(3.0
‑
3.1)g：(10.0
‑
10.1) g：1000ml；
27.所述的h2s实验固体培养基ph＝7.4
‑
7.6、121
°
c灭菌20min。
28.优选的，所述pda+氨水液体培养基中各组分及质量体积比为：土豆：葡 萄糖：去离子水＝(200
‑
205)g：(20.0
‑
20.1)g：1000ml
29.优选的，步骤(2)中所述的摇床上培养温度为33.5
‑
34℃，摇床摇速 170
‑
175r/min，培养时间3
‑
4d。
30.经由上述的技术方案可知，与现有技术相比，本发明公开提供了微生物 除臭剂的制备方法，具有如下有益效果：
31.本发明的技术方案中采用不同的培养基对各种优势菌进行培养，优势菌 种对氨气和硫化氢气体有去除效果，经过提取菌种后将优势菌种进行复配形 成复合微生物除臭剂，具有更加优异的除臭效果。
具体实施方式
32.下面将结合本发明的实施例对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完 整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部 的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性 劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
33.实施例1
34.首先制备固体培养基和液体培养基，具体如下：
35.一、固体培养基的制备
36.(1)具有定向筛选除氨气菌种的固体培养基：
37.①
氨化细菌固体培养基：蛋白胨5g、k2hpo40.9
‑
1.1g、fe2so
4 0.010g
‑
0.012g、nacl 0.25g
‑
0.26g、mso4·
h2o 0.50g
‑
0.55g、琼脂10
‑
25g、去 离子水1000ml。培养基ph＝7.2，混
合均匀后121℃灭菌20min自然冷却；
38.②
pda+氨水固体培养基：土豆200g
‑
205g、琼脂10g
‑
25g、葡萄糖 20.0g
‑
20.1g、去离子水1000ml。
39.(2)具有定向筛选除硫化氢菌种的固体培养基：
40.①
柴纳斯固体培养基：柠檬酸铁0.50g
‑
0.55g、蛋白胨10.0g
‑
10.1g、琼脂 15.0g
‑
15.2g、去离子水1000ml。
41.②
h2s实验固体培养基：nacl 5.0g
‑
5.1g、牛肉膏3.0g
‑
3.1g、蛋白胨 10.0g
‑
10.1g、琼脂粉15.0g
‑
15.1g、1000ml去离子水。培养基的ph＝7.4
‑
7.6、 ph7.0，混合均匀后121℃灭菌20min自然冷却。
42.二、液体培养基的制备
43.(1)具有定向筛选除氨气菌种的液体培养基：
44.①
氨化细菌液体培养基：蛋白胨5g、k2hpo40.9
‑
1.1g、fe2so
4 0.010g
‑
0.012g、nacl 0.25g
‑
0.26g、mso4·
h2o 0.50g
‑
0.55g、去离子水1000ml。 培养基ph＝7.2，混合均匀后121℃灭菌20min自然冷却；
45.②
pda+氨水液体培养基：土豆200g
‑
205g、葡萄糖20.0g
‑
20.1g、去离子 水1000ml。
46.(2)具有定向筛选除硫化氢菌种的液体培养基：
47.①
柴纳斯液体培养基：柠檬酸铁0.50g
‑
0.55g、蛋白胨10.0g
‑
10.1g、去离 子水1000ml。
48.②
h2s实验液体培养基：nacl 5.0g
‑
5.1g、牛肉膏3.0g
‑
3.1g、蛋白胨 10.0g
‑
10.1g、1000ml去离子水。培养基的ph＝7.4
‑
7.6，混合均匀后121℃灭菌 20min自然冷却
49.三、菌种培养及除臭剂的制备
50.(1)取厨余垃圾渗沥液分别涂布在氨化细菌固体培养基、柴那斯固体培 养基、h2s实验固体培养基和pda+氨水固体培养基上进行培养；
51.(2)选取各固体培养基上的优势菌株分别对应接种至氨化细菌液体培 养基、柴那斯液体培养基、h2s实验液体培养基和pda+氨水液体培养基中， 置于摇床上33.5
‑
34℃、170
‑
175r/min培养时间3
‑
4d，分别得到氨化细菌培养 基除臭菌、柴那斯培养基除臭菌、h2s实验培养基除臭菌和pda+氨水培养基 除臭菌；
52.(3)将步骤(2)培养后的四种除臭菌进行复配得到复合微生物除臭剂， 1kg复合微生物除臭剂中菌量浓度比例为氨化细菌培养基除臭菌：柴那斯培养 基除臭菌：h2s实验培养基除臭菌：pda+氨水培养基除臭菌＝3亿：4亿：2 亿：1亿。
53.四、效果试验
54.(一)试验除臭效果测试
55.在氨气与硫化氢气体浓度各自为100ppm的密闭空间内，将4种菌种以不 同的含菌量放入密闭空间内，用手持便携式氨气检测仪和手持便携式硫化氢 检测仪检测2小时后和24小时后密闭空间内的氨气与硫化氢气体的浓度，计 算去除率，同时设置空白对照实验组，菌种换成同体积去离子水。每组实验 重复三次。
56.测试结果表明，氨化细菌培养基除臭菌含量在3亿时的除臭效果最好，2 小时氨气有效去除率能达到84.56％，硫化氢有效去除率能达到79.51％。柴纳 斯培养基除臭菌含量在4亿时的除臭效果最好，2小时氨气有效去除率能达到 75.39％，硫化氢有效去除率能达
到84.26％。h2s实验培养基除臭菌含量在2 亿时的除臭效果最好，2小时氨气有效去除率能达到80.12％，硫化氢有效去 除率能达到74.25％。pda+氨水培养基除臭菌含量在1亿时的除臭效果最好， 2小时氨气有效去除率能达到82.67％，硫化氢有效去除率能达到79.27％。
57.通过随机含菌量组合复配的方式进行除氨气和硫化氢的测试后发现，以 每1kg复合除臭剂浓度氨化细菌培养基除臭菌：柴纳斯培养基除臭菌：h2s 实验培养基除臭菌：pda+氨水培养基除臭菌＝3亿:4亿:2亿:1亿进行复配效 果最好，2小时内氨气有效去除率能达到93.87％，硫化氢有效去除率能达到 90.58％。通过感官测试，气味明显减少，不再有刺鼻感。
58.其中，去除率＝(初始浓度
‑
(2小时/24小时)浓度)/初始浓度。
59.(二)实际除臭效果测试
60.用手持便携式氨气检测仪和手持便携式硫化氢检测仪在氨气浓度为 40.56ppm、硫化氢浓度为6.34ppm的新鲜羊粪堆表面进行喷洒上述方案制得 的复合微生物除臭剂，经过2小时氨气有效去除率能达到92.35％、硫化氢有 效去除率能达到90.12％，经过24小时检测氨气有效去除率能达到87.65％、 硫化氢有效去除率能达到85.16％。
61.通过对腐熟过程中的畜禽粪便进行除臭效果测试，用手持便携式氨气检 测仪和手持便携式硫化氢检测仪在氨气浓度为32.10ppm、硫化氢浓度为 0.65ppm的添加腐熟剂正在腐熟的羊粪堆表面进行喷洒上述方案制得的复合 微生物除臭剂，经过2个小时氨气有效去除率能达到94.33％，硫化氢有效去 除率能达到99.99％，经过24小时检测氨气有效去除率能达到89.35％、硫化 氢有效去除率能达到99.89％。
62.其中，复合微生物除臭剂在畜禽粪便的腐熟过程中施用量0.1
‑
0.15kg/m3。
63.(三)喷洒复合微生物除臭剂对粪便堆肥腐熟的影响
[0064][0065]
注：白色菌体量越多，“+”越多。
[0066][0067]
注：白色菌体量越多，“+”越多。
[0068]
上述测试结果可以表明，对添加腐熟剂粪堆的除臭测试中发现，喷洒复 合微生物除臭剂的堆体可以加快腐熟进度，缩短腐熟周期，迅速提升堆体的 温度，并且均可达到60℃以上的温度，在腐熟结束后经鼻闻无臭味，有泥土 芳香，可以看见大量白色菌体附着在上面。而不添加除臭剂用去离子水处理 的对照腐熟周期要更长，堆体的升温速度更慢，可达到60℃以上的温度，在 腐熟结束后经鼻闻无臭味，有泥土芳香，可以看见白色菌体附着在上面，但 菌体数量要少。所以根据以上的对比可发现，除臭剂与腐熟剂可产生协同增 益效果，加快腐熟过程。
[0069]
本说明书中各个实施例采用递进的方式描述，每个实施例重点说明的都 是与其他实施例的不同之处，各个实施例之间相同相似部分互相参见即可。 对于实施例公开的装置而言，由于其与实施例公开的方法相对应，所以描述 的比较简单，相关之处参见方法部分说明即可。
[0070]
对所公开的实施例的上述说明，使本领域专业技术人员能够实现或使用 本发明。对这些实施例的多种修改对本领域的专业技术人员来说将是显而易 见的，本文中所定义的一般原理可以在不脱离本发明的精神或范围的情况下， 在其它实施例中实现。因此，本发明将不会被限制于本文所示的这些实施例， 而是要符合与本文所公开的原理和新颖特
点相一致的最宽的范围。