一种大肠杆菌及其在高产制备D-脯氨酸中的应用的制作方法

文档序号:27144627发布日期:2021-10-30 01:18阅读:来源:国知局

技术特征:
1.一株产d

脯氨酸的大肠杆菌菌株(escherichia coli),其特征在于,已于2021年8月13日保藏于中国典型微生物保藏中心,保管编号为cctcc no:m 20211024。2.如权利要求1所述的大肠杆菌菌株在生产d

脯氨酸中的应用。3.一种制备d

脯氨酸的方法,其特征在于,采用如权利要求1所述的大肠杆菌菌株,以葡萄糖为碳源、以硫酸铵为氮源,发酵产生d

脯氨酸,从发酵液中获得d

脯氨酸。4.如权利要求3所述的方法,其特征在于,在发酵培养基中的葡萄糖添加量为2%

6%(w/v);所述的硫酸铵的添加量为1%

3%。5.如权利要求4所述的方法,其特征在于,发酵的培养组成为:所述发酵培养的培养基的配方为:k2hpo
4 12~16g,kh2po
4 4~8g,mgso4·
7h2o 100~300mg,(nh4) 2
so
4 12~28g,mnso
4 1~3 mg,fe
2 (so4)
3 20~40 mg,zncl
2 3~10 mg,cacl
2 100~200 mg,葡萄糖 20~60 g,h2o 1l。6.如权利要求5所述的方法,其特征在于,所述液体发酵培养所用的培养基配方为:k2hpo
4 14 g,kh2po
4 6 g,mgso4·
7h2o 200 mg,(nh4) 2
so
4 20 g,mnso
4 1 .7 mg,fe
2 (so4)
3 25 mg,zncl
2 7 mg , cacl
2 140 mg,葡萄糖 25 g,h2o 1l。7.如权利要求4所述的方法,其特征在于,其于30

37℃、800

1200 rpm、融氧度为饱和25%

35%发酵培养。8.如权利要求4所述的方法,其特征在于,发酵期间检测发酵液中葡萄糖的量,当其耗尽时,补入葡萄糖以保持糖浓度不超过1 g/l,且发酵过程中使用硫酸铵将ph保持在7.0。9.如权利要求4所述的方法,其特征在于,当发酵时的菌株细胞od600达到25

35时,加入阿拉伯糖诱导物。10.如权利要求8所述的方法,其特征在于,加入阿拉伯糖的用量达到发酵液总量的0.02%。11.如权利要求3

10任一项所述的方法,其特征在于,发酵时间为28

44小时。

技术总结
本申请从水环境中微生物种群筛选分离出能够代谢葡萄糖合成D


技术研发人员:ꢀ(74)专利代理机构
受保护的技术使用者:天津工微生物科技有限公司
技术研发日:2021.09.28
技术公布日:2021/10/29
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