技术特征：
1.检测epas1基因变异的引物，其特征在于，包括扩增epas1基因全外显子的引物，其碱基序列为：epas1
‑
1f：
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2r：
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6f：
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‑5‑
6r：
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13
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13
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15r：
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16f
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2：
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3：
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3：
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aacagctatgaccatgacttcactttacattggcatagc。2.如权利要求1所述的引物，其特征在于，还包括检测epas1基因的测序引物，其碱基序列为：m13 f：tgtaaaacgacggccagtm13 r：aacagctatgaccatg。3.检测epas1基因突变情况的方法，包括以下步骤：
(1)抽提血液中的基因组dna；(2)用pcr扩增步骤1中提取的dna；其中pcr扩增引物为：epas1
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1f：
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
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1r：
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aacagctatgaccatgtctcagcactcttctcccaaepas1
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2f：
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2r：
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3f：
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‑5‑
6r：
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7f：
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7r：
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8f：
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8r：
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9f：
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9r：
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10f：
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10r：
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11f：
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tgtaaaacgacggccagtgaacctttgggtccaggaagepas1
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11r：
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12f：
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3：
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aacagctatgaccatgacttcactttacattggcatagc(3)对步骤2中的扩增产物进行测序；测序引物碱基序列为：m13 f：tgtaaaacgacggccagtm13 r：aacagctatgaccatg；(4)测序结果和正常序列进行比对，确定epas1基因是否发生变异。4.检测epas1基因突变位点的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括：
(i)血液dna抽提试剂；(ii)检测体系pcr扩增反应液；包括扩增epas1基因的引物，其碱基序列为：epas1
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1f：
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6r：
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7f：
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7r：
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8f：
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8r：
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9f：
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9r：
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10f：
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10r：
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11f：
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11r：
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15f：
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15r：
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aacagctatgaccatggaacttgtgaggaggttcccepas1
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1：
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1：
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aacagctatgaccatgtttaggaaaagccacgctgtepas1
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2：
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2：
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tgtaaaacgacggccagtccatgagatggtttagacgggepas1
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3：
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aacagctatgaccatgacttcactttacattggcatagc(iii)测序体系试剂；包括检测epas1基因的测序引物，其碱基序列为：m13 f：tgtaaaacgacggccagtm13 r：aacagctatgaccatg。
技术总结
本发明公开了一种检测EPAS1基因变异的引物、试剂盒和方法，其包括扩增EPAS1基因全外显子的引物；采用Sanger测序技术。本发明可快速地将EPAS1基因全外显子的变异检测出来。利用本发明完成的检测结果准确，可以辅助诊断家族性红细胞增多症(ECYT4)，对疾病的诊疗有重要的参考意义。的参考意义。
技术研发人员：刘赵玲 王淑一
受保护的技术使用者：济南艾迪康医学检验中心有限公司
技术研发日：2021.10.08
技术公布日：2021/12/21