技术特征:
1.一种提高组氨酸发酵纯度的方法,步骤为:a、斜面活化培养,从冰箱取出保藏菌种的甘油管,均匀涂布斜面培养茄瓶进行活化,活化温度28
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32℃,培养6
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10h,形成菌落;b、种子过程控制,取50ml无菌水于步骤a的茄瓶,刮下菌落形成菌悬液,接入种子培养罐中的种子培养基中,培养温度28
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32℃,流加氨水控制ph6.5
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7.5,培养至种子液的od650达到8
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12,过程中控制溶氧≥30%;c、发酵过程控制,将步骤b的种子液接种量5
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15%入发酵罐的发酵培养基中,控制温度28
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32℃,流加氨水控制ph6.5
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7.5,过程中控制溶氧20
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50%;所述的步骤c中,所述发酵培养基水解后还原糖下降至2
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4%后,流加浓度为45
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75%的蔗糖,调整蔗糖流速控制溶氧20
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50%。2.根据权利要求1所述的提高组氨酸发酵纯度的方法,其特征在于:所述步骤b种子培养基配比,蔗糖20
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40g/l,甘蔗糖蜜3.0
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11.5g/l,玉米浆12
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18g/l,酵母粉0.5
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2.0g/l,硫酸铵2.0
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5.0g/l,磷酸二氢钾0.5
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2.0/l,硫酸镁0.1
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0.5g/l,硫酸锰0.5
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2.0mg/l,硫酸亚铁2
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8mg/l,生物素0.1
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0.5mg/l,硫胺素0.1
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0.5mg/l,溶解于水。3.根据权利要求2所述的提高组氨酸发酵纯度的方法,其特征在于:所述步骤b种子培养基配比,蔗糖35g/l,甘蔗糖蜜7g/l,玉米浆18g/l,酵母粉2g/l,硫酸铵4g/l,磷酸二氢钾1g/l,硫酸镁0.5g/l,硫酸锰1mg/l,硫酸亚铁5mg/l,生物素0.1mg/l,硫胺素0.1mg/l,溶解于水。4.根据权利要求1所述的提高组氨酸发酵纯度的方法,其特征在于:所述步骤c的发酵培养基配比,蔗糖40
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120g/l,甘蔗糖蜜3.0
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11.5g/l,玉米浆12
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18g/l,酵母粉0.5
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2.0g/l,硫酸铵2.0
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4.0g/l,磷酸二氢钾0.5
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2.0g/l,硫酸镁0.1
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0.5g/l,硫酸锰0.5
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2.0mg/l,硫酸亚铁2
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8mg/l,生物素0.1
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0.5mg/l,硫胺素0.1
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0.5mg/l,溶解于水。5.根据权利要求4所述的提高组氨酸发酵纯度的方法,其特征在于:所述步骤c的发酵培养基配比,蔗糖80g/l,甘蔗糖蜜7g/l,玉米浆18g/l,酵母粉2g/l,硫酸铵4g/l,磷酸二氢钾1g/,硫酸镁0.5g/l,硫酸锰1mg/l,硫酸亚铁5mg/l,生物素0.2mg/l,硫胺素0.2mg/l,溶解于水。6.根据权利要求1所述的提高组氨酸发酵纯度的方法,其特征在于:所述步骤a斜面活化培养活化温度30℃,培养8h。7.根据权利要求1所述的提高组氨酸发酵纯度的方法,其特征在于:所述步骤b种子过程控制中,所述培养温度30℃,流加氨水控制ph7.0,培养至种子液的od650达到10。8.根据权利要求1所述的提高组氨酸发酵纯度的方法,其特征在于:所述步骤c发酵过程控制中,种子液接种量10%入发罐,控制温度30℃,流加氨水控制ph7.0,发酵前10小时内,控制溶氧≥30%,之后控制溶氧20
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30%。9.根据权利要求1所述的提高组氨酸发酵纯度的方法,其特征在于:所述步骤c流加蔗糖时,过程控制水解后还原糖下降至3%后开始流加浓度为60%的蔗糖,调整蔗糖流速控制溶氧20
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30%。
技术总结
本发明属于生物技术的发酵工程技术领域,具体涉及一种提高组氨酸发酵纯度的方法。它包括A、斜面活化培养,从冰箱取出保藏菌种的甘油管,均匀涂布斜面培养茄瓶进行活化,活化温度28
技术研发人员:刘佳 王海波 谢畅丰
受保护的技术使用者:广东肇庆星湖生物科技股份有限公司
技术研发日:2021.10.20
技术公布日:2022/1/4