Zbtb16基因在微波辐射致脾脏组织淋巴细胞损伤中的应用

本发明涉及分子生物学领域，具体地，本发明涉及一种zbtb16基因在微波辐射致脾脏组织淋巴细胞损伤中的应用。

背景技术：

1、微波技术广泛应用于通信、交通、广播、农业和军事等领域，人们生活和工作环境中的微波辐射越来越复杂，其所带来的健康危害也备受关注。国内外流行病学调查和实验研究已证实，微波辐射具有广泛的生物学效应，免疫器官是微波辐射敏感的靶部位。脾脏作为最大的外周免疫器官，在机体免疫功能发挥中发挥着重要的作用。然迄今，微波辐射对免疫器官的敏感分子靶标缺乏。

2、因此，迫切需要开发出一种微波辐射致免疫器官的敏感基因。

技术实现思路

1、本发明旨在至少在一定程度上解决现有技术中存在的技术问题至少之一。为此，本发明提供了一种zbtb16基因在微波辐射致脾脏组织淋巴细胞损伤中的应用，本发明将zbtb16基因作为敏感基因，通过检测生物样本中zbtb16基因的表达量，可确定经微波辐射后生物样本的脾脏组织淋巴细胞是否发生损伤，将其作为敏感基因进行检测具有检测效率高、结果准确度高等优点。

2、需要说明的是，本发明是基于发明人的下列工作而完成的：

3、脾脏是机体最大的外周免疫器官，是产生淋巴细胞和淋巴细胞聚集的主要场所，其在机体的免疫反应中发挥着重要作用。而目前为了判断微波辐射后生物样本是否会出现脾脏组织淋巴细胞受损的现象，通常需要对生物样本的脾脏组织结构以及脾脏组织中的免疫细胞和免疫因子进行观察，该方法需要对多个指标进行检测，操作复杂。含16锌指和btb结构域蛋白(zinc finger and btb domain containing 16，简称zbtb16)也称为早幼粒细胞白血病锌指蛋白(plzf)或锌指蛋白145(zfp145)，隶属于zbtb(zinc-finger and btb/poz domain containing protein)家族。zbtb16在各种正常组织中广泛表达，通过一些辅助分子调节细胞周期和细胞分化潜能，近年来研究发现，其与先天性免疫反应有关。

4、有鉴于此，发明人通过大量试验，对脾脏组织中的多种基因进行检测，最终发现，zbtb16基因可作为确定经微波辐射后生物样本的脾脏组织淋巴细胞是否发生损伤的敏感基因，且zbtb16基因对经微波辐射后引起的脾脏组织淋巴细胞损伤的敏感性高，将zbtb16基因作为敏感基因，具有操作简单、检测效率高、结果准确度高等优点。

5、在本发明的一个方面，本发明提出了一种用于检测zbtb16基因的试剂在制备试剂盒中的用途。根据本发明的实施例，所述试剂盒用于确定经微波辐射后生物样本是否发生脾脏组织淋巴细胞损伤。

6、发明人发现，zbtb16基因作为敏感基因，其对于经微波辐射后的脾脏组织淋巴细胞损伤具有敏感性高的特点，采用上述试剂盒对生物样本脾脏组织中的敏感基因进行检测，可快速、准确地确定经微波辐射后的生物样本是否发生了脾脏组织淋巴细胞损伤，可用于对微波辐射后的脾脏组织淋巴细胞损伤的模型动物检测，以便得到合格的模型动物，同时为微波辐射损伤提供有效的诊断指标和防治靶点，为微波辐射的生物医学研究和临床诊断分析奠定了基础。

7、根据本发明的实施例，上述用途还可以进一步包括如下附加技术特征的至少之一：

8、根据本发明的实施例，所述zbtb16基因具有如seq id no.5所述的核苷酸序列或具有与seq id no.5所示的核苷酸序列90％以上同源性的核苷酸序列。

9、其中，seq id no.5的序列如下所示：

10、atggatctgacaaagatgggtatgatccaactgcagaaccctagccaccccacggggctgctgtgcaaggccaatcagatgcgactggccgggactttgtgcgatgtggtcatcatggtggacagtcaggagttccatgcccaccggacggtgctagcctgcaccagcaagatgtttgagatcctcttccaccggaacagccagcactacaccctggacttcctctcgccgaaaaccttccagcagatcctcgagtatgcctacacagccacactgcaagccaaagcagaggacctggatgacctgctgtacgcagctgagatcctagagatcgagtacctggaggagcagtgcctgaagatcctggagaccatccaagcatctgatgacaatgacacagaagccaccatggccgacggtgggggcgaagaagaagaggaccgtaaggctcgatacctcaagaacatcttcatctcgaagcattccggcgaggagagcggctatgccaatgtggctggacagagcctccctgggcccatggtagaccagagcccctcggtctccacctcttttggtctctcagccatgagtcctaccaaggcagcagtggacagtttgatgaccataggacagtcactcctgcaaggagctcttcagccacctgcagggcctgaggaacccacactggcagggggtgggcggcaccctggggtggctgaggtgcatatggagatgatgcaggtagatgaagcccccggccaggacagccctggggcagctgagtctagcgtctcaggagggatgggggacaagcttgaagagaggagcaaagaggggcctgggacccccactagaggcagtgtcatcaccagtgctagggagctgcactatgggagagaggagagtggtgagcagctctcaccccctgttgaagctggccagggaccccctggacgacaggagtccctggcaccaccagtggagaagcatttgggcatctactcagtgttgcccaaccacaaggccgatgccgtgttgagcatgccgtcttcagtgacatctggtctccatgtgcaacctgccctggcagtctccatggacttcagcacctatgggggtctgctgcctcagggcttcatccagagggagctgttcagcaagctaggtgagctggccgtgggcatgaaggcggagagccgtcctctcggggagcagtgcagtgtgtgtggggtcgaacttccggacaacgaggccgtggagcagcacaggaagctgcacagtgggatgaagacatacggatgcgaactctgtggaaaacggttcctggatagtttgcgactgagaatgcatttactggctcattcagcgggtgccaaagcctttgtatgtgatcagtgtggcgcccagttctcaaaggaagatgccctggagacacacagacagacccatactggcacggacatggctgtcttctgtctgctgtgtgggaagcgctttcaggcacagagtgcactccagcaacacatggaggtccacgcaggcgtgcgcagctatatctgcagcgagtgcaaccgcaccttccccagccacacggctctcaagcgccaccttcgctcacatacaggtgaccacccatatgagtgtgagttctgtggcagctgcttccgggatgagagcacactcaagagccacaagcgcatccacacaggggagaagccctatgagtgtaatggctgtggcaagaagttcagcctcaagcaccagctggagacgcactacagggttcacacaggtgagaagccctttgagtgcaaactctgccaccagcgctcccgagactactcggccatgatcaagcacctgagaacacacaatggtgcctcaccctaccaatgcaccatctgcacggaatactgccccagcctctcctccatgcagaagcacatgaagggccacaagccggaggagatcccgcctgactggaggatagagaagacatacctctacctgtgttatgtgtga。

11、根据本发明的实施例，所述生物样本的脾脏淋巴细胞损伤具有如下至少之一的症状：脾脏组织淋巴细胞结构损伤、脾脏组织淋巴细胞超微结构损伤、脾脏组织淋巴细胞失调、脾脏组织促炎症因子失衡。发明人通过大量实验发现，当生物样本经过微波辐射后，通过对生物样本脾脏组织的zbtb16基因表达量进行检测，能够快速、准确地判断出经微波辐射后生物样本是否发生了上述症状。

12、需要说明的是，淋巴细胞失调是指待测样品淋巴细胞的数量和/或比例与正常样品淋巴细胞的数量和/或比例存在差异。

13、根据本发明的实施例，所述脾脏组织淋巴细胞结构损伤包含脾脏组织淋巴细胞核碎裂。由此，通过对生物样本脾脏组织的zbtb16基因表达量进行检测，能够快速、准确地判断出经微波辐射后生物样本脾脏组织是否发生了上述症状。

14、根据本发明的实施例，所述脾脏组织淋巴细胞超微结构损伤包含脾脏组织淋巴细胞核染色质浓缩、脾脏组织淋巴细胞胞浆细胞器凝固中的至少之一。由此，通过对生物样本脾脏组织的zbtb16基因表达量进行检测，能够快速、准确地判断出经微波辐射后生物样本脾脏组织是否发生了上述症状。

15、根据本发明的实施例，所述脾脏组织促炎症因子包括干扰素γ、肿瘤生长因子α和白介素6中的至少之一。由此，通过对生物样本脾脏组织的zbtb16基因表达量进行检测，能够快速、准确地判断出经微波辐射后生物样本脾脏组织是否发生了上述炎症因子的变化。

16、根据本发明的实施例，所述试剂包括用于检测所述敏感基因的第一引物组。采用上述试剂，能够快速、准确地对生物样本中的zbtb16基因表达量进行检测，且具有准确度高、使用方便等优点。

17、根据本发明的实施例，所述第一引物组包含具有如seq id no.1和2所述的核苷酸序列。

18、其中，seq id no.1序列为：5’-nnnnnnnnnngtgagaagcc-3’；

19、seq id no.2序列为：5’-nnnnnnnnnnggtagggtga-3’。

20、需要说明的是，“n”是指可为任意碱基，第一引物对的两个序列只需满足分别与seq id no.1和2的3’端十个碱基相同即可。

21、发明人经过大量试验，通过对不同引物组进行检测，最终发现，上述引物组对zbtb16基因表达量的检测准确性较高。

22、根据本发明的实施例，所述试剂进一步包括用于检测内参基因的第二引物组。采用内参基因作为参照物，能够减少对zbtb16基因检测误差，提高对zbtb16基因检测结果的准确性。

23、根据本发明的实施例，所述内参基因为gapdh基因。发明人通过对比多种内参基因，发现采用上述内参基因的检测结果准确性较高。

24、根据本发明的实施例，所述第二引物组包含具有如seq id no.3和4所述的核苷酸序列。

25、其中，seq id no.3序列为：5’-nnnnnnnnnnaatgggaagc-3’；

26、seq id no.4序列为：5’-nnnnnnnnnngtagactcca-3’。

27、需要说明的是，“n”是指可为任意碱基，第二引物对的两个序列只需满足分别与seq id no.3或4的3’端十个碱基相同即可。

28、发明人经过大量试验，通过对不同引物组进行检测，最终发现，上述引物组对gapdh基因表达量的检测准确性较高。

29、根据本发明的实施例，当所述试剂检测出所述敏感基因的表达量降低，则所述试剂盒可用于确定经微波辐射后生物样本的脾脏组织淋巴细胞损伤；当所述试剂检测出所述敏感基因的表达量未降低，则所述试剂盒可用于确定经微波辐射后生物样本的脾脏组织淋巴细胞未损伤。由此，能够对经微波辐射后生物样本的脾脏组织淋巴细胞是否损伤进行准确判断，该方法具有操作简单、检测速度快、准确度高等优点。

30、在本发明的又一方面，本发明提出了一种基于为zbtb16基因含量分析的系统。根据本发明的实施例，所述系统包括：提取装置，用于提取生物样本的脾脏组织中基因组；测定装置，所述测定装置与所述提取装置相连，用于测定所述生物样本的脾脏组织中敏感基因的表达量；确定装置，所述确定装置与所述测定装置相连，用于基于所述敏感基因的变化确定经微波辐射后生物样本的脾脏组织淋巴细胞是否损伤。由此，利用根据本发明实施例的系统可以快速、准确地确定判断经微波辐射后生物样本的脾脏组织淋巴细胞是否损伤，该系统具有操作简单、检测准确度高等优点。

31、本发明的附加方面和优点将在下面的描述中部分给出，部分将从下面的描述中变得明显，或通过本发明的实践了解到。