一种熊去氧胆酸的合成工艺的制作方法

1.本发明属于医药合成技术领域，具体涉及一种熊去氧胆酸的合成工艺。


背景技术：

2.熊去氧胆酸可通过熊的胆汁提取获得，医学上用于增加胆汁酸分泌，并使胆汁成分改变，降低胆汁中胆固醇及胆固醇脂，有利于胆结石中的胆固醇逐渐溶解从而治疗胆结石。
3.受限于原料的来源，许多企业通过其他动物来源的去氧胆酸合成获得熊去氧胆酸，其中猪去氧胆酸来源丰富，猪去氧胆酸结晶为白色或略带微黄色粉末，味苦，略溶于醇，几不溶于水。猪去氧胆酸带有腥臭味，而熊去氧胆酸无气味，且猪去氧胆酸是熊去氧胆酸的同分异构体，为现有的熊去氧胆酸合成提供思路，但是现有的熊去氧胆酸的合成过程复杂且产率不高，不利于工业化生产。


技术实现要素：

4.本发明的目的在于提供一种熊去氧胆酸的合成工艺，以解决背景技术中的问题。
5.本发明的目的可以通过以下技术方案实现：一种熊去氧胆酸的合成工艺，包括如下制备步骤：
6.步骤一：将猪胆汁冷冻干燥，备用；将干燥后的猪胆汁与3倍体积的质量分数为65-70％的甲醇溶液搅拌混合15-30min获得原料浆液，向原料浆液中缓慢滴加质量分数为70％的硫酸，滴加完毕后搅拌反应24-36h；将无水碳酸氢钠固体磨成细粉后添加到反应后的浆液中，调节ph至7，抽滤后收集滤液，滤饼用质量分数为65-70％的甲醇溶液洗涤2-3次，合并洗涤液和抽滤时获得的滤液并用乙醚萃取3-4次，合并有机相；将有机相用饱和食盐水洗涤2-3次后用无水硫酸钠干燥，过滤后将滤液减压分馏除去乙醚，得到原料稠膏；原料浆液和硫酸的用量比为500ml:3-5ml；
7.步骤二：将原料稠膏用6-7倍体积的乙酸乙酯溶解，在78℃的条件下回流提取50-60min，抽滤获得第一次滤液，将第一次滤液和蒙脱石混合后获得混合液；将混合液在78℃的条件下回流提取30-40min，抽滤取第二次滤液并将第二次滤液旋转蒸发，结晶，得到猪去氧胆酸粗品；第一次滤液和蒙脱石的用量比为50ml：3-5g；
8.步骤三：将3,5,7-三羟基黄酮用无水乙醇溶解并加入反应釜中，再向反应釜中加入猪去氧胆酸粗品搅拌25-30min，加入脱水剂和催化剂回流反应2-3h，减压分馏得到中间产物1，将猪去氧胆酸分子末端的羧基保护，方便后续反应；其中脱水剂为二环己基碳二亚胺，催化剂为4-二甲氨基吡啶，猪去氧胆酸粗品、3,5,7-三羟基黄酮、无水乙醇、脱水剂和催化剂的用量比为145g：100g：500ml：1.5-1.8g：5-6g；
9.反应过程如下所示：
[0010][0011]
步骤四：将中间产物1和对甲苯磺酰氯、吡啶混合，回流反应2-3h得到中间产物2；甲苯磺酰氯作为酰化剂，吡啶作为缚酸剂；将中间产物2与n,n-二甲基甲酰胺和醋酸钾混合，在反应釜中进行消去反应，选择性消去6位上的对甲苯磺酰氧基得到中间产物3；中间产物1、对甲苯磺酰氯和吡啶的用量比为661g：21.4g：10g；中间产物2、n,n-二甲基甲酰胺和醋酸钾的用量比为350g：0.8-0.95l:35-40g；
[0012]
反应过程如下所示：
[0013][0014]
步骤五：将中间产物3和甲醇加入反应釜中，加入质量分数为70％的浓硫酸并不断搅拌，在140℃的条件下脱水反应1.5-2h，分馏，得到中间产物4；将中间产物4与二氯甲烷、二氧化硅、叔丁基过氧化氢和pdc混合，回流反应7.5-8h，分馏，得到中间产物5；将中间产物5用甲醇溶解，加入三(三甲基硅基)硅烷作为还原剂、喹啉作为促进剂，回流反应3-4h后减压分馏收集余液，蒸发浓缩得到中间产物6，将步骤三中接枝的3,5,7-三羟基黄酮脱去，释放保护的羧基；中间产物3、甲醇和浓硫酸的用量比为314g：1.5-2l:35ml；中间产物4、二氯甲烷、二氧化硅、叔丁基过氧化氢、pdc的用量比为160g：800ml：15-18g：50-60ml：10g；中间产物5、甲醇、三(三甲基硅基)硅烷和喹啉的用量比为300g：5l：4g：8ml；
[0015]
反应过程如下所示：
[0016]
[0017][0018]
步骤六：将中间产物6与无水乙醇混合，加入硼氢化钠并不断搅拌，在65℃的条件下保温反应3.5-4h；反应后将温度降至0℃并加入金属钠，待金属钠完全消失后搅拌反应14-16h，减压干燥后再次用去离子水搅拌溶解，并加入质量分数为37％的盐酸调节ph至6，抽滤，将滤饼用去离子水洗涤2-3次，得到熊去氧胆酸；中间产物6、无水乙醇、硼氢化钠、金属钠的用量比为80g：1.5-2l：5-6g：0.3-0.5g。
[0019]
反应过程如下所示：
[0020][0021]
本发明的有益效果：
[0022]
猪胆汁在获取后通过冷冻干燥，保持了猪胆汁的新鲜程度，首先通过乙醚进行萃取并浓缩，获得富集猪去氧胆酸后的稠膏，再通过乙酸乙酯进行二次萃取，可以减少乙酸乙酯萃取时的用量，有利于减小成本，并且获得的猪去氧胆酸粗品的纯度更高，有利于后续熊去氧胆酸的合成。
[0023]
合成过程中首先通过3,5,7-三羟基黄酮对猪去氧胆酸上的羧基进行保护，获得的中间产物1，其余不能够反应的物质在减压分馏的过程中被除去，避免杂质对后续反应步骤产生影响；中间产物1上的酚羟基会显示出弱酸性，通过吡啶作为缚酸剂稳定反应液的ph，甲苯磺酰氯作为酰化剂将中间产物1上的醇羟基酰化得到中间产物2，中间产物2经过亲核取代和消去反应后获得中间产物3，再次保护3α位的醇羟基，便于顺利地将中间产物4的烯丙位氧化，然后将醇羟基和羧基脱保护后得到中间产物6，将羰基还原并将双键加氢后得到熊去氧胆酸。反应过程中各原料易得，且熊去氧胆酸的产率高，能够带来更好的经济效益，便于工业化生产。
附图说明
[0024]
下面结合附图对本发明作进一步的说明。
[0025]
图1是本发明熊去氧胆酸合成工艺的流程图。
具体实施方式
[0026]
下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例，都属于本发明保护的范围。
[0027]
实施例1
[0028]
制备猪去氧胆酸粗品，包括如下步骤：
[0029]
将猪胆汁冷冻干燥，备用；将干燥后的猪胆汁与3倍体积的质量分数为65％的甲醇溶液搅拌混合15min获得原料浆液；向500ml原料浆液中缓慢滴加3ml质量分数为70％的硫酸，滴加完毕后搅拌反应24h；将无水碳酸氢钠固体磨成细粉后添加到反应后的浆液中，调节ph至7，抽滤后除去滤饼，滤饼用质量分数为65％的甲醇溶液洗涤2次，合并洗涤液和抽滤时获得的滤液合并用乙醚萃取3次，合并有机相；将有机相用饱和食盐水洗涤2次后用无水硫酸钠干燥，过滤后将滤液减压分馏除去乙醚，得到原料稠膏；将原料稠膏用6倍体积的乙酸乙酯溶解，在78℃的条件下回流提取50min，抽滤获得第一次滤液，将50ml第一次滤液和3g蒙脱石混合后获得混合液；将混合液在78℃的条件下回流提取30min，抽滤取第二次滤液并将第二次滤液旋转蒸发，结晶，得到猪去氧胆酸粗品。
[0030]
实施例2
[0031]
制备猪去氧胆酸粗品，包括如下步骤：
[0032]
将猪胆汁冷冻干燥，备用；将干燥后的猪胆汁与3倍体积的质量分数为68％的甲醇溶液搅拌混合20min获得原料浆液；向500ml原料浆液中缓慢滴加4ml质量分数为70％的硫酸，滴加完毕后搅拌反应30h；将无水碳酸氢钠固体磨成细粉后添加到反应后的浆液中，调节ph至7，抽滤后除去滤饼，滤饼用质量分数为68％的甲醇溶液洗涤2次，合并洗涤液和抽滤时获得的滤液合并用乙醚萃取4次，合并有机相；将有机相用饱和食盐水洗涤2次后用无水硫酸钠干燥，过滤后将滤液减压分馏除去乙醚，得到原料稠膏；将原料稠膏用6倍体积的乙酸乙酯溶解，在78℃的条件下回流提取55min，抽滤获得第一次滤液，将50ml第一次滤液和4g蒙脱石混合后获得混合液；将混合液在78℃的条件下回流提取35min，抽滤取第二次滤液并将第二次滤液旋转蒸发，结晶，得到猪去氧胆酸粗品。
[0033]
实施例3
[0034]
制备猪去氧胆酸粗品，包括如下步骤：
[0035]
将猪胆汁冷冻干燥，备用；将干燥后的猪胆汁与3倍体积的质量分数为70％的甲醇溶液搅拌混合30min获得原料浆液；向500ml原料浆液中缓慢滴加5ml质量分数为70％的硫酸，滴加完毕后搅拌反应36h；将无水碳酸氢钠固体磨成细粉后添加到反应后的浆液中，调节ph至7，抽滤后除去滤饼，滤饼用质量分数为70％的甲醇溶液洗涤3次，合并洗涤液和抽滤时获得的滤液合并用乙醚萃取4次，合并有机相；将有机相用饱和食盐水洗涤3次后用无水硫酸钠干燥，过滤后将滤液减压分馏除去乙醚，得到原料稠膏；将原料稠膏用7倍体积的乙酸乙酯溶解，在78℃的条件下回流提取60min，抽滤获得第一次滤液，将50ml第一次滤液和5g蒙脱石混合后获得混合液；将混合液在78℃的条件下回流提取40min，抽滤取第二次滤液并将第二次滤液旋转蒸发，结晶，得到猪去氧胆酸粗品。
[0036]
实施例4
4-二甲氨基吡啶回流反应2h，减压分馏得到中间产物1；
[0051]
将661g中间产物1和21.4g对甲苯磺酰氯和10g吡啶混合，回流反应2.5h得到中间产物2；甲苯磺酰氯作为酰化剂，吡啶作为缚酸剂；将350g中间产物2、0.9l n,n-二甲基甲酰胺和36.5g醋酸钾混合，在反应釜中进行消去反应，选择性消去6位上的对甲苯磺酰氧基得到中间产物3；
[0052]
将314g中间产物3和1.8l甲醇加入反应釜中，加入35ml质量分数为70％的浓硫酸并不断搅拌，在140℃的条件下脱水反应1.8h，分馏，得到中间产物4；向160g中间产物4中加入800ml二氯甲烷、16g二氧化硅、54.7ml叔丁基过氧化氢和10g pdc，回流反应7.8h，分馏，得到中间产物5；将300g中间产物5用5l甲醇溶解，加入4g三(三甲基硅基)硅烷作为还原剂、8ml喹啉作为促进剂，回流反应3.5h后减压分馏收集余液，蒸发浓缩得到中间产物6；
[0053]
将80g中间产物6与1.8l无水乙醇混合，加入5.7g硼氢化钠并不断搅拌，在65℃的条件下保温反应3.8h；反应后将温度降至0℃并加入0.33g金属钠，待金属钠完全消失后搅拌反应15h，减压干燥后用去离子水搅拌溶解，并加入质量分数为37％的盐酸调节ph至6，抽滤，将滤饼用去离子水洗涤3次，得到熊去氧胆酸。
[0054]
实施例7
[0055]
请参阅图1，一种熊去氧胆酸的合成工艺，包括如下步骤：
[0056]
步骤一：将猪胆汁冷冻干燥，备用；将干燥后的猪胆汁与3倍体积的质量分数为68％的甲醇溶液搅拌混合20min获得原料浆液；向500ml原料浆液中缓慢滴加4ml质量分数为70％的硫酸，滴加完毕后搅拌反应30h；将无水碳酸氢钠固体磨成细粉后添加到反应后的浆液中，调节ph至7，抽滤后除去滤饼，滤饼用质量分数为68％的甲醇溶液洗涤2次，合并洗涤液和抽滤时获得的滤液合并用乙醚萃取4次，合并有机相；将有机相用饱和食盐水洗涤2次后用无水硫酸钠干燥，过滤后将滤液减压分馏除去乙醚，得到原料稠膏；将原料稠膏用6倍体积的乙酸乙酯溶解，在78℃的条件下回流提取55min，抽滤获得第一次滤液，将50ml第一次滤液和4g蒙脱石混合后获得混合液；将混合液在78℃的条件下回流提取35min，抽滤取第二次滤液并将第二次滤液旋转蒸发，结晶，得到猪去氧胆酸粗品。
[0057]
步骤二：将100g 3,5,7-三羟基黄酮用500ml无水乙醇溶解并加入反应釜中，再向反应釜中加入145g猪去氧胆酸粗品搅拌28min，加入1.7g二环己基碳二亚胺和5.5g 4-二甲氨基吡啶回流反应2h，减压分馏得到中间产物1；
[0058]
将661g中间产物1和21.4g对甲苯磺酰氯和10g吡啶混合，回流反应2.5h得到中间产物2；甲苯磺酰氯作为酰化剂，吡啶作为缚酸剂；将350g中间产物2、0.9l n,n-二甲基甲酰胺和36.5g醋酸钾混合，在反应釜中进行消去反应，选择性消去6位上的对甲苯磺酰氧基得到中间产物3；
[0059]
将314g中间产物3和1.8l甲醇加入反应釜中，加入35ml质量分数为70％的浓硫酸并不断搅拌，在140℃的条件下脱水反应1.8h，分馏，得到中间产物4；向160g中间产物4中加入800ml二氯甲烷、16g二氧化硅、54.7ml叔丁基过氧化氢和10g pdc，回流反应7.8h，分馏，得到中间产物5；将300g中间产物5用5l甲醇溶解，加入4g三(三甲基硅基)硅烷作为还原剂、8ml喹啉作为促进剂，回流反应3.5h后减压分馏收集余液，蒸发浓缩得到中间产物6。
[0060]
步骤三：将80g中间产物6与1.8l无水乙醇混合，加入5.7g硼氢化钠并不断搅拌，在65℃的条件下保温反应3.8h；反应后将温度降至0℃并加入0.33g金属钠，待金属钠完全消
失后搅拌反应15h，减压干燥后用去离子水搅拌溶解，并加入质量分数为37％的盐酸调节ph至6，抽滤，将滤饼用去离子水洗涤3次，得到熊去氧胆酸。
[0061]
实施例8
[0062]
请参阅图1，一种熊去氧胆酸的合成工艺，包括如下步骤：
[0063]
步骤一：将猪胆汁冷冻干燥，备用；将干燥后的猪胆汁与3倍体积的质量分数为65％的甲醇溶液搅拌混合15min获得原料浆液；向500ml原料浆液中缓慢滴加3ml质量分数为70％的硫酸，滴加完毕后搅拌反应24h；将无水碳酸氢钠固体磨成细粉后添加到反应后的浆液中，调节ph至7，抽滤后除去滤饼，滤饼用质量分数为65％的甲醇溶液洗涤2次，合并洗涤液和抽滤时获得的滤液合并用乙醚萃取3次，合并有机相；将有机相用饱和食盐水洗涤2次后用无水硫酸钠干燥，过滤后将滤液减压分馏除去乙醚，得到原料稠膏；将原料稠膏用6倍体积的乙酸乙酯溶解，在78℃的条件下回流提取50min，抽滤获得第一次滤液，将50ml第一次滤液和3g蒙脱石混合后获得混合液；将混合液在78℃的条件下回流提取30min，抽滤取第二次滤液并将第二次滤液旋转蒸发，结晶，得到猪去氧胆酸粗品。
[0064]
步骤二：将100g 3,5,7-三羟基黄酮用500ml无水乙醇溶解并加入反应釜中，再向反应釜中加入145g实施例3中制得的猪去氧胆酸粗品搅拌30min，加入1.8g二环己基碳二亚胺和6g 4-二甲氨基吡啶回流反应3h，减压分馏得到中间产物1；
[0065]
将661g中间产物1和21.4g对甲苯磺酰氯和10g吡啶混合，回流反应3h得到中间产物2；甲苯磺酰氯作为酰化剂，吡啶作为缚酸剂；将350g中间产物2、0.95l n,n-二甲基甲酰胺和40g醋酸钾混合，在反应釜中进行消去反应，选择性消去6位上的对甲苯磺酰氧基得到中间产物3；
[0066]
将314g中间产物3和2l甲醇加入反应釜中，加入35ml质量分数为70％的浓硫酸并不断搅拌，在140℃的条件下脱水反应2h，分馏，得到中间产物4；向160g中间产物4中加入800ml二氯甲烷、18g二氧化硅、60ml叔丁基过氧化氢和10g pdc，回流反应8h，分馏，得到中间产物5；将300g中间产物5用5l甲醇溶解，加入4g三(三甲基硅基)硅烷作为还原剂、8ml喹啉作为促进剂，回流反应4h后减压分馏收集余液，蒸发浓缩得到中间产物6。
[0067]
步骤三：将80g中间产物6与2l无水乙醇混合，加入6g硼氢化钠并不断搅拌，在65℃的条件下保温反应4h；反应后将温度降至0℃并加入0.5g金属钠，待金属钠完全消失后搅拌反应16h，减压干燥后用去离子水搅拌溶解，并加入质量分数为37％的盐酸调节ph至6，抽滤，将滤饼用去离子水洗涤3次，得到熊去氧胆酸。
[0068]
对比例1：步骤一：将猪胆汁冷冻干燥，备用；将干燥后的猪胆汁与2倍体积的质量分数为65％的甲醇溶液搅拌混合15min获得原料浆液；向250ml原料浆液中缓慢滴加3ml质量分数为70％的硫酸，滴加完毕后搅拌反应12h；将无水碳酸氢钠固体磨成细粉后添加到反应后的浆液中，调节ph至7，抽滤后除去滤饼，滤饼用质量分数为65％的甲醇溶液洗涤2次，合并洗涤液和抽滤时获得的滤液合并用乙醚萃取1次，合并有机相；将有机相用饱和食盐水洗涤2次后用无水硫酸钠干燥，过滤后将滤液减压分馏除去乙醚，得到原料稠膏；将原料稠膏用6倍体积的乙酸乙酯溶解，在78℃的条件下回流提取50min，抽滤获得第一次滤液，将25ml第一次滤液和3g蒙脱石混合后获得混合液；将混合液在78℃的条件下回流提取30min，抽滤取第二次滤液并将第二次滤液旋转蒸发，结晶，得到猪去氧胆酸粗品。
[0069]
步骤二：将60g 3,5,7-三羟基黄酮用300ml无水乙醇溶解并加入反应釜中，再向反
应釜中加入100g实施例3中制得的猪去氧胆酸粗品搅拌30min，加入1.8g二环己基碳二亚胺和5g 4-二甲氨基吡啶回流反应3h，减压分馏得到中间产物1；
[0070]
将300g中间产物1和20g对甲苯磺酰氯和10g吡啶混合，回流反应3h得到中间产物2；甲苯磺酰氯作为酰化剂，吡啶作为缚酸剂；将350g中间产物2、0.95l n,n-二甲基甲酰胺和40g醋酸钾混合，在反应釜中进行消去反应，选择性消去6位上的对甲苯磺酰氧基得到中间产物3；
[0071]
将200g中间产物3和2l甲醇加入反应釜中，加入30ml质量分数为70％的浓硫酸并不断搅拌，在140℃的条件下脱水反应2h，分馏，得到中间产物4；向150g中间产物4中加入600ml二氯甲烷、18g二氧化硅、60ml叔丁基过氧化氢和10g pdc，回流反应8h，分馏，得到中间产物5；将300g中间产物5用5l甲醇溶解，加入4g三(三甲基硅基)硅烷作为还原剂、8ml喹啉作为促进剂，回流反应3h后减压分馏收集余液，蒸发浓缩得到中间产物6。
[0072]
步骤三：将60g中间产物6与2l无水乙醇混合，加入6g硼氢化钠并不断搅拌，在65℃的条件下保温反应4h；反应后将温度降至0℃并加入0.5g金属钠，待金属钠完全消失后搅拌反应12h，减压干燥后用去离子水搅拌溶解，并加入质量分数为37％的盐酸调节ph至6，抽滤，将滤饼用去离子水洗涤3次，得到熊去氧胆酸。
[0073]
测试实施例7-8和对比例1中熊去氧胆酸的收率和纯度，结果如表1所示：
[0074]
表1
[0075]
项目实施例7实施例8对比例1产率162.2g/kg162.5g/kg112.8g/kg纯度/％≥99％≥99％≥90％
[0076]
由表1可以看出，实施例7-8中的合成方法获得的熊去氧胆酸产率和纯度高，满足生产需求。
[0077]
需要说明的是，在本文中，诸如术语“包括”、“包含”或者其任何其他变体意在涵盖非排他性的包含，从而使得包括一系列要素的过程、方法、物品或者设备不仅包括那些要素，而且还包括没有明确列出的其他要素，或者是还包括为这种过程、方法、物品或者设备所固有的要素。
[0078]
尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。