技术特征：
1.用于体外诊断对象病毒感染的方法中的用途的诊断肽，所述肽由式(i)表示：[a]-[b]-[c](i)其中：[a]是具有650-900nm发射波长的荧光剂，[b]是包含氨基酸序列x
aa1,
x
aa2,
x
aa3
的肽，其中x
aa1
是疏水性或碱性氨基酸，其中x
aa2
是极性、中性或碱性氨基酸，其中x
aa3
是极性、中性或碱性氨基酸，[c]是具有650-900nm吸收波长的非荧光剂，以用于淬灭所述荧光剂的所述发射，其中x
aa1,
x
aa2,
x
aa3
代表病毒编码的蛋白酶的切割位点，其中所述切割位点的切割导致从所述肽释放所述非荧光剂，其中所述非荧光剂的释放指示存在病毒，优选地其中[b]代表基于[a]-[b]-[c]的总质量，按重量计所述诊断肽的总质量的最多50％。2.如权利要求1所述用途的诊断肽，其由式(ia)表示：[a]-[连接子1]-[b]-[-连接子2]-[c](ia)其中所述连接子独立地选自任选取代的烃基和非蛋白水解烃基。3.如权利要求1或2所述用途的诊断肽，其中所述烃基连接子选自：β-丙氨酸基、4-氨基丁酰基、2-(氨基乙氧基)乙酰基、3-(2-氨基乙氧基)丙基、5-氨基戊酰基、6-氨基己基、8-氨基-3,6-二氧杂辛基和12-氨基-4,7,10-三氧杂十二烷基，优选地为6-氨基己基。4.如前述权利要求中任一项所述用途的诊断肽，其中x
aa1
选自：丙氨酸、亮氨酸、缬氨酸、正亮氨酸、正缬氨酸、异亮氨酸、异缬氨酸、别异亮氨酸、苯丙氨酸、组氨酸、精氨酸和赖氨酸，优选地选自：组氨酸、精氨酸和赖氨酸，优选地为组氨酸。5.如前述权利要求中任一项所述用途的诊断肽，其中x
aa2
选自：组氨酸、天冬酰胺和谷氨酰胺，优选地为谷氨酰胺。6.如前述权利要求中任一项所述用途的诊断肽，其中x
aa3
选自：丝氨酸、苏氨酸和甘氨酸，优选地，其中x
aa3
为丝氨酸。7.如前述权利要求中任一项所述用途的诊断肽，其包含选自hqs、rqs或kqs的序列。8.如前述权利要求中任一项所述用途的诊断肽，其中所述感染选自小儿毛细支气管炎、病毒性肺炎、急性呼吸系统综合征(sars)、covid-19、猪流行性腹泻病毒、猫传染性腹膜炎、犬冠状病毒感染、犊牛肠炎。9.如前述权利要求中任一项所述用途的诊断肽，其中所述方法包括以下步骤：i)使体液样品与所述诊断肽接触，以及ii)监测650-900nm范围内的荧光。10.用于体外诊断对象病毒感染的方法，所述方法包括以下步骤：(i)使体液样品与肽接触，所述肽包含具有650-900nm发射波长的荧光剂和用于淬灭所述荧光剂的所述发射的具有650-900nm吸收波长的非荧光剂，以及位于所述荧光剂和第一非荧光剂之间的切割位点，所述切割位点特异性针对病毒蛋白酶；(ii)监测来自步骤(i)中所述肽的650-900nm范围内的荧光，其中650-900nm范围内荧光的增加指示所述样品中病毒蛋白酶的存在。11.如权利要求10所述的方法，其中所述体液样品为血液、唾液、痰、支气管肺泡液、组织活检切片和/或泪液。
12.如权利要求10或11所述的方法，其中所述病毒蛋白酶选自：肝炎编码的丝氨酸蛋白酶或金属-蛋白酶(ns2和ns3)、鼻病毒基因组编码的半胱氨酸蛋白酶(3c和2a)、冠状病毒基因组编码的半胱氨酸蛋白酶(3cl)、腺病毒基因组编码的以丝氨酸为中心的中性蛋白酶、逆转录病毒编码的天冬氨酰蛋白酶，优选地其中所述冠状病毒蛋白酶为sars冠状病毒基因组编码的半胱氨酸蛋白酶、sars冠状病毒19主蛋白酶(ec编号3.4.22.69)。13.如权利要求10至12中任一项所述的方法，其中所述肽是权利要求1-9之一所限定的诊断肽。14.如权利要求10至13中任一项所述的方法，其中在测定缓冲液中稀释所述样品，优选地其中所述样品的稀释倍数范围为1:10至1:10000，更优选地为1:100至1:1000。15.如权利要求10至14中任一项所述的方法，其中使所述样品与裂解剂接触。16.用于体外诊断对象病毒感染的试剂盒，其包含：a)含有权利要求1至9中任一项所限定的肽的容器，b)用于执行权利要求10至15中任一项所述方法的一套说明书。17.用于体外诊断对象病毒感染的系统，其包含：a)用于接收体液样品的容器，b)包含权利要求1-9中任一项所限定的肽的容器，c)适于接收所述容器并监测在所述肽与所述体液样品接触时从所述肽发射的荧光信号的装置。18.由式(ib)表示的诊断肽：[a]-[连接子1]-[b]-[-连接子2]-[c](ib)其中：[a]是具有650-900nm发射波长的荧光剂，[b]是包含3-10个氨基酸且具有氨基酸序列x
aa1,
x
aa2,
x
aa3
的肽其中x
aa1
是组氨酸、精氨酸或赖氨酸，其中x
aa2
是谷氨酰胺，其中x
aa3
是极性、中性或碱性氨基酸，[c]是具有650-900nm吸收波长的非荧光剂，以用于淬灭所述荧光剂的所述发射，[连接子1]和[连接子2]独立地选自任选取代的烃基和非蛋白水解烃基，其中x
aa1,
x
aa2,
x
aa3
代表病毒编码的蛋白酶的切割位点，其中所述切割位点的切割导致从所述肽释放所述非荧光剂，其中所述非荧光剂的释放指示属于冠状病毒科的病毒的存在，优选地其中所述病毒是sars-cov-2(sars-cov-19)。
技术总结
本发明涉及用于体外诊断对象感染的诊断肽以及方法、试剂盒和系统。使用本发明肽的方法包括以下步骤：i)提供体液样品，ii)使体液样品与肽接触，所述肽包含具有650-900nm发射波长的荧光剂和用于淬灭所述荧光剂的所述发射的具有650-900nm吸收波长的非荧光剂，以及位于所述荧光剂和第一非荧光剂之间的切割位点，所述切割位点特异性针对病毒蛋白酶，iii)监测来自步骤ii)中的肽的650-900nm范围内的荧光，其中650-900nm范围内荧光的增加指示所述样品中病毒蛋白酶的存在。中病毒蛋白酶的存在。
技术研发人员：马修
受保护的技术使用者：奥里基诺G有限公司
技术研发日：2021.03.30
技术公布日：2022/11/18