抑制HIF2-α活性的化合物和组合物及其使用方法与流程

抑制hif2-α
活性的化合物和组合物及其使用方法
技术领域
1.本发明提供了螺[咪唑并[1,2-a]吡啶类化合物、其用于抑制或调节hif2α的用途和使用其治疗疾病的方法。


背景技术：

[0002]
缺氧诱导因子(hif)(如hif1α和hif2α)是众所周知的作为氧稳态的主要调节因子的转录因子，该转录因子控制对o2可用性减少(缺氧)的转录反应。hif是由o2调节的hif-α亚基和组成型表达的hif-1β亚基组成的异源二聚体蛋白，也称为arnt。在充分充氧或常氧条件下，hif-α与希佩尔-林道(von hippel-lindau)(vhl)蛋白结合，该蛋白募集靶向hif-α的泛素连接酶用于蛋白酶体降解(kaelin和ratcliffe,2008)。vhl结合取决于脯氨酰基羟化酶phd对hif-α中特定脯氨酸残基的羟基化，该脯氨酰基羟化酶phd使用o2作为底物，使得其在缺氧条件下的活性受到抑制。hif1α和hif2α是调节许多基因的表达的转录因子，这些基因参与关键的生理功能，如发育、代谢、血管生成、细胞增殖和细胞存活。尽管hif1α广泛表达，但hif2α转录物受限于特定的细胞类型，包括血管内皮细胞、神经嵴细胞衍生物、肺ii型肺细胞、肝实质和肾脏中的间质细胞。hif2α被描述为细胞对缺氧(hypoxia)适应的关键介质，在生理过程(如红细胞生成和血管化)中起着重要作用。正常胚胎发育需要hif2α，而产后消融导致严重的贫血和红系发育受损。与这些发现一致的是，据报道，红细胞生成素(epo)主要由hif2α控制，而一些其他hif依赖性基因可以由两种hif-α同种型调节。
[0003]
缺氧在许多常见障碍的进展中起着至关重要的作用，并且已有证据表明hif转录程序的调节可以是多种疾病的有益治疗策略，这些疾病像缺血、炎症、慢性肺病和癌症(semenza,2011)。特别地，在癌症中，肿瘤内缺氧与患者预后不良和对放射和化学疗法治疗抗性相关。
[0004]
在许多晚期人类癌症(如脑癌、乳腺癌、结肠癌、肺癌和肾细胞癌)中报道了hif激活。与透明细胞肾细胞癌(ccrcc)中的氧水平无关，vhl基因中经常报道的遗传改变(例如突变或沉默)导致肿瘤中hif-α的累积。尽管在大多数ccrcc肿瘤样品中表达hif2α，但只有一个子集累积hif1α(gordan,2008)。此外，在ccrcc中，hif2α被描述为关键的致癌事件，而hif1α显示出肿瘤抑制特性(shen和kaelin,2013,gordan 2008)。例如，hif2α的过表达导致vhl缺陷型786-0rcc肿瘤异种移植的体内生长的增加。相反，在vhl缺陷型786-0和a498 rcc模型中，通过诱导型shrna或药理学抑制下调hif2α似乎足以抑制肿瘤生长(kondo等人,2002；kondo等人,2003；zimmer等人,2004；cho等人,2016)。这些结果支持hif2α作为抗癌疗法的有吸引力的靶标。


技术实现要素：

[0005]
本发明提供了如下所定义的具有式(i)的化合物或其药学上可接受的盐。具有式(i)的化合物是hif2α抑制剂或调节剂，并且因此潜在地可用于治疗由hif2α介导的病症、疾病和障碍。
[0006]
在本发明的一个方面，提供了具有式(i)的化合物，
[0007][0008]
或其药学上可接受的盐，
[0009]
其中：
[0010]
r1是f、cl、br、och3、och2f、ochf2、或ocf3；
[0011]
r2是f、cl、cf3、或cn；
[0012]
x是(ch2)
1-2
、chf、chd、cd2或cf2；
[0013]
y是(ch2)
0-2
、chf、chd、cd2、o、s、och2或cf2；
[0014]
z是ch2、cd2、chf、cdf、cf2、ch(oh)、co、ch(ch3)、o、或s，
[0015]
其中，当y是o、och2、或s时，那么z是ch2；
[0016]
其中，当z是o、s、或nch3时，那么y是(ch2)
0-2
或cf2；
[0017]
其中，当z是ch(oh)时，那么y是chf或cf2；
[0018]
j是crj；
[0019]
其中rj是h、f、cl、br、ch3、cd3、cf3、chf2、cdf2、或cn；
[0020]
e是cre或n；
[0021]
其中re是h、f、cl、br、i、cn、ch3、ch2ch3、ch(ch3)2、cd3、chd2、ch2d、chf2、cdf2、c(ch3)f2、c(cd3)f2、cf3、环丙基、och3、och2ch2oh、ocf3、sch3或schf2；以及
[0022]
g是ch或n；
[0023]
所述化合物呈游离形式或药学上可接受的盐形式。
[0024]
在另一个方面，本发明提供了药物组合物，该药物组合物包含具有式(i)或其子式的化合物或其药学上可接受的盐以及一种或多种药学上可接受的载体。
[0025]
在另一个方面，本发明提供了组合、特别是药物组合，该组合包含具有式(i)或其子式的化合物或其药学上可接受的盐以及一种或多种治疗剂。在某些情况下，将本发明的化合物与其他治疗剂(如其他抗癌剂(特别是mtor抑制剂，如依维莫司(everolimus))、抗恶心剂(或抗呕剂)、化学疗法、镇痛剂、细胞保护剂、及其组合)组合。
[0026]
这些mtor抑制剂包括西罗莫司(temsirolimus)地磷莫司(ridaforolimus)(正式地称为deferolimus，(1r,2r,4s)-4-[(2r)-2[(1r,9s,12s,15r,16e,18r,19r,21r,23s,24e,26e,28z,30s,32s,35r)-1,18-二羟基-19,30-二甲氧基-15,17,21,23,29,35-六甲基-2,3,10,14,20-五氧杂-11,36-二氧杂-4-氮杂三环[30.3.1.0
4,9
]三十六碳-16,24,26,28-四烯-12-基]丙基]-2-甲氧基环己基二甲基次膦酸酯，也称为ap23573和mk8669，并且描述于pct公开号wo 03/064383中)；依维莫司(或rad001)；雷帕霉素(rapamycin)(ay22989，)；塞马莫德(simapimod)(cas 164301-51-3)；(5-{2,4-双[(3s)-3-甲基吗啉-4-基]吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-基}-2-甲氧基
苯基)甲醇(azd8055)；2-氨基-8-[反式-4-(2-羟基乙氧基)环己基]-6-(6-甲氧基-3-吡啶基)-4-甲基-吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8h)-酮(pf04691502，cas 1013101-36-4)；n
2-[1,4-二氧代-4-[[4-(4-氧代-8-苯基-4h-1-苯并吡喃-2-基)吗啉鎓-4-基]甲氧基]丁基]-l-精氨酰甘氨酰-l-α-天冬氨酰l-丝氨酸-，内盐(sf1126，cas 936487-67-1)；和n-[4-[[[3-[(3,5-二甲氧基苯基)氨基]-2-喹喔啉基]氨基]磺酰基]苯基]-3-甲氧基-4-甲基-苯甲酰胺(xl765,也称为sar245409)；以及(1r,4r)-4-(4-氨基-5-(7-甲氧基-1h-吲哚-2-基)咪唑并[1,5-f][1,2,4]三嗪-7-基)环己烷甲酸(osi-027)。
[0027]
考虑用于组合疗法的一般化学治疗剂包括阿那曲唑比卡鲁胺硫酸博来霉素白消安白消安注射液卡培他滨n4-戊氧羰基-5-脱氧-5-氟胞苷、卡铂卡莫司汀苯丁酸氮芥顺铂克拉屈滨环磷酰胺(或)、阿糖胞苷、胞嘧啶阿拉伯糖苷(cytosar-)、阿糖胞苷脂质体注射液达卡巴嗪(dtic-)、更生霉素(放线菌素d、cosmegan)、盐酸柔红霉素柠檬酸柔红霉素脂质体注射液地塞米松、多西他赛盐酸多柔比星盐酸多柔比星依托泊苷磷酸氟达拉滨5-氟尿嘧啶氟他胺替扎他滨(tezacitibine)、吉西他滨(二氟脱氧胞苷)、羟基脲伊达比星异环磷酰胺伊立替康l-天冬酰胺酶亚叶酸钙、美法仑6-巯基嘌呤甲氨蝶呤米托蒽醌麦罗塔、紫杉醇nab-紫杉醇菲尼克斯(phoenix)(钇90/mx-dtpa)、喷司他丁、聚苯丙生(polifeprosan)20与卡莫司汀的植入物枸橼酸他莫昔芬替尼泊苷6-硫代鸟嘌呤、噻替派、替拉扎明注射用盐酸托泊替康长春花碱长春新碱和长春瑞滨
[0028]
在另一个方面，本发明提供了抑制或调节有需要的受试者中hif2α活性的方法，该方法包括向有需要的受试者施用具有式(i)或其子式的化合物或其药学上可接受的盐。
[0029]
在另一个方面，本发明提供了具有式(i)或其子式的化合物或其药学上可接受的盐，用于在治疗或预防癌症中使用，其中该癌症选自肾上腺皮质癌、乳腺癌、透明细胞肾细胞癌(ccrcc)、结直肠癌(可以包括结肠癌)、生殖细胞肿瘤(例如颅和颅外生殖细胞肿瘤、性腺和性腺外生殖细胞肿瘤)、多形性成胶质细胞瘤(gbm)、胶质瘤、头颈癌(可以包括唇癌、口腔癌(oral cavity，mouth cancer))、肝细胞癌、肾癌、肺癌、恶性胶质瘤、眼癌、胰腺癌、副神经节瘤、嗜铬细胞瘤、前列腺癌、和肾细胞癌。
[0030]
在另一个方面，本发明提供了(s)-1'-氯-8-(二氟甲氧基)-8',8'-二氟-6-(三氟
甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉]游离形式的结晶形式。
[0031]
在另一个方面，本发明提供了(s)-1'-氯-8-(二氟甲氧基)-8',8'-二氟-6-(三氟甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉]的富马酸盐的结晶形式。
[0032]
在另一个方面，本发明提供了用于式(i)，
[0033][0034]
或其药学上可接受的盐的方法，
[0035]
所述方法包括以下步骤：任选地在碱的存在下，使具有式(iv)的化合物、
[0036][0037]
或其盐、溶剂化物、立体异构体、复合物、共晶体、酯、或噁唑啉，和具有式(ii)的化合物、
[0038][0039]
或其盐、溶剂化物、立体异构体、复合物、共晶体、酯、或噁唑啉，与具有式(iii)的化合物
[0040][0041]
或其盐、溶剂化物、立体异构体、复合物、共晶体、酯、或噁唑啉反应，
[0042]
其中
[0043]
r1是f、cl、br、och3、och2f、ochf2、或ocf3；
[0044]
r2是f、cl、cf3、或cn；
[0045]
x是ch2、chf、或cf2；
[0046]
y是ch2、chf、o、s、单键、ch2ch2、och2、或cf2；
[0047]
z是ch2、cd2、chf、cdf、cf2、ch(oh)、co、ch(ch3)、o或s；
[0048]
其中，当y是o、och2、或s时，那么z是ch2；
[0049]
其中，当z是o、s、或nch3时，那么y是ch2、单键、ch2ch2或cf2；
[0050]
其中，当z是ch(oh)时，那么y是chf或cf2；
[0051]
j是crj；
[0052]
其中rj是h、f、cl、br、ch3、cd3、cf3、chf2、cdf2、cn；
[0053]
e是cre或n；
[0054]
其中re是h、f、cl、br、i、cn、ch3、ch2ch3、ch(ch3)2、cd3、chd2、ch2d、chf2、cdf2、c(ch3)f2、c(cd3)f2、cf3、环丙基、och3、och2ch2oh、ocf3、sch3、或schf2；
[0055]
g是ch或n；以及
[0056]
lg是选自f、cl、或br的离去基团；
[0057]
所述碱选自k2co3或et3n，
[0058]
以获得具有式(1)的化合物或其药学上可接受的盐。
附图说明
[0059]
图1：展示了本发明的(s)-1'-氯-8-(二氟甲氧基)-8',8'-二氟-6-(三氟甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉]的形式a的代表性x射线粉末衍射(xrpd)。x轴显示散射角(以
°
2-θ)，y轴显示散射的x射线束的强度(以检测到的光子的计数)。
[0060]
图2：展示了本发明的(s)-1'-氯-8-(二氟甲氧基)-8',8'-二氟-6-(三氟甲基)-7',8
’‑
二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉]的形式a的代表性差示扫描量热法曲线(dsc)。x轴显示温度(以摄氏度(℃))，y轴显示随吸热峰上升的热流速(以瓦/克(w/g))。
[0061]
图3：展示了本发明的(s)-1'-氯-8-(二氟甲氧基)-8',8'-二氟-6-(三氟甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉]的结晶形式a的代表性热重量分析(tga)。x轴显示温度(以摄氏度(℃))，y轴显示样品的质量(损失)(以重量百分比(w-％))。
[0062]
图4：展示了本发明的(s)-1'-氯-8-(二氟甲氧基)-8',8'-二氟-6-(三氟甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉]的结晶形式a在0至95％相对湿度的范围内的代表性动态蒸汽吸附(dvs)分析。x轴显示出在温度为(25.0
±
0.1)℃下测量的相对湿度(以百分比(％))，y轴显示出平衡质量变化(以重量百分比(w-％))。吸附循环用三角形标记，而解吸附循环用正方形标记。这些值显示为未校正的值。
[0063]
图5：展示了本发明的(s)-1'-氯-8-(二氟甲氧基)-8',8'-二氟-6-(三氟甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉]富马酸盐的形式a的代表性x射线粉末衍射(xrpd)。x轴显示散射角(以
°
2-θ)，y轴显示散射的x射线束的强度(以检测到的光子的计数)。
[0064]
图6：展示了本发明的(s)-1'-氯-8-(二氟甲氧基)-8',8'-二氟-6-(三氟甲基)-7',8
’‑
二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉]富马酸盐的形式a的代表性差
示扫描量热法曲线(dsc)。x轴显示温度(以摄氏度(℃))，y轴显示随吸热峰上升的热流速(以瓦/克(w/g))。
[0065]
图7：展示了本发明的(s)-1'-氯-8-(二氟甲氧基)-8',8'-二氟-6-(三氟甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉]富马酸盐的结晶形式a的代表性热重量分析(tga)。x轴显示温度(以摄氏度(℃))，y轴显示样品的质量(损失)(以重量百分比(w-％))。
[0066]
图8：展示了本发明的(s)-1'-氯-8-(二氟甲氧基)-8',8'-二氟-6-(三氟甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉]富马酸盐的结晶形式a在0至95％相对湿度的范围内的代表性动态蒸汽吸附(dvs)分析。x轴显示出在温度为(25.0
±
0.1)℃下测量的相对湿度(以百分比(％))，y轴显示出平衡质量变化(以重量百分比(w-％))。吸附循环用三角形标记，而解吸附循环用正方形标记。这些值显示为未校正的值。
[0067]
图9a：展示了实例31对786-o小鼠模型中肿瘤生长的影响，其中*：p《0.05对比媒介物对照(秩anova和图基(tukey)事后检验)。
[0068]
图9b：展示了实例31对786-o小鼠模型中hccndi转录水平的影响，其中*：p《0.05对比媒介物对照(非配对双尾t检验)。
[0069]
图10a：展示了实例31对skrc-01小鼠模型中肿瘤生长的影响，其中*：p《0.05对比媒介物对照(秩anova和图基(tukey)事后检验)。
[0070]
图10b：展示了实例31对skrc-01小鼠模型中hccndi转录水平的影响，其中*：p《0.05对比媒介物对照(非配对双尾t检验)。
[0071]
图11a：展示了实例32对skrc-01小鼠模型中肿瘤生长的影响，其中*：p《0.05对比媒介物对照(秩anova和邓尼特(dunn)事后检验)。
[0072]
图11b：展示了实例32对skrc-01小鼠模型中hccndi转录水平的影响，其中*：p《0.05对比媒介物对照(秩anova和邓尼特(dunn)事后检验)。
[0073]
图12：展示了携带hkix2207皮下异种移植的雌性裸小鼠，这些雌性裸小鼠用化合物a以30mg/kg p.o.qd或化合物c以2mg/kg p.o.qd或其组合或媒介物对照处理。治疗在肿瘤接种后25天开始并持续26天。值为平均值
±
sem；样品量(n＝5-6只小鼠/组)。第0天的初始肿瘤体积约为307mm3。统计分析的显著水平设定为p《0.05对比媒介物对照(秩anova和图基事后检验)和p《0.05对比最佳单一药剂(单因素方差分析(图基检验(tukey's test)))。
[0074]
图13：展示了携带hkix2967皮下异种移植的雌性裸小鼠，这些雌性裸小鼠用化合物a以30mg/kg p.o.qd或化合物c以2mg/kg p.o.qd或其组合或媒介物对照处理。治疗在肿瘤接种后20天开始并持续35天。值为平均值
±
sem；样品量(n＝5-6只小鼠/组)。第0天的初始肿瘤体积约为283mm3。统计分析的显著水平设定为p《0.05对比媒介物对照(秩anova和图基事后检验)和p《0.05对比最佳单一药剂(单因素方差分析(图基检验))。
[0075]
图14：展示了携带hkix2967皮下异种移植的雌性裸小鼠，这些雌性裸小鼠用化合物a以30mg/kg p.o.qd或化合物c以10mg/kg p.o.qd或其组合或媒介物对照处理。治疗在肿瘤接种后20天开始并持续35天。值为平均值
±
sem；样品量(n＝5-6只小鼠/组)。第0天的初始肿瘤体积约为283mm3。统计分析的显著水平设定为p《0.05对比媒介物对照(秩anova和图基事后检验)和p《0.05对比最佳单一药剂(单因素方差分析(图基检验))。
具体实施方式
[0076]
本发明提供了具有式(i)的化合物
[0077][0078]
或其药学上可接受的盐，
[0079]
其中
[0080]
r1是f、cl、br、och3、och2f、ochf2、或ocf3；
[0081]
r2是f、cl、cf3、或cn；
[0082]
x是(ch2)
1-2
、chf、chd、cd2或cf2；
[0083]
y是(ch2)
0-2
、chf、chd、cd2、o、s、och2或cf2；
[0084]
z是ch2、cd2、chf、cdf、cf2、ch(oh)、co、ch(ch3)、o、或s，
[0085]
其中，当y是o、och2、或s时，那么z是ch2；
[0086]
其中，当z是o、s、或nch3时，那么y是(ch2)
0-2
或cf2；
[0087]
其中，当z是ch(oh)时，那么y是chf或cf2；
[0088]
j是crj；
[0089]
其中rj是h、f、cl、br、ch3、cd3、cf3、chf2、cdf2、och3或cn；
[0090]
e是cre或n；
[0091]
其中re是h、f、cl、br、i、cn、ch3、ch2ch3、ch(ch3)2、cd3、chd2、ch2d、chf2、cdf2、c(ch3)f2、c(cd3)f2、cf3、环丙基、och3、och2ch2oh、ocf3、sch3或schf2；并且
[0092]
g是ch或n；
[0093]
所述化合物呈游离形式或药学上可接受的盐形式。
[0094]
在本文中描述了本发明的各种实施例，应认识到，每个实施例中指定的特征可以与其他指定特征组合以提供本发明的另外实施例。
[0095]
在实施例1中，本发明提供了如上所述的具有式(i)的化合物、或其药学上可接受的盐。
[0096]
在实施例2中，本发明提供了如实施例1所述的具有式(i)的化合物、或其药学上可接受的盐，其中
[0097]
r1是f、cl或ochf2；
[0098]
r2是cf3或cn；
[0099]
x是ch2或chf；
[0100]
y是(ch2)
0-2
或chf；
[0101]
z是chf、cdf、cf2、o、或s；
[0102]
j是crj；
[0103]
其中rj是h、f、cl、ch3或cd3；
[0104]
e是cre或n；
[0105]
其中re是h、f、br、或cf3；并且
[0106]
g是ch。
[0107]
在实施例3中，本发明提供了如实施例1或2所述的具有式(i)的化合物、或其药学上可接受的盐，其中
[0108]
r1是ochf2；
[0109]
r2是cf3；
[0110]
x是ch2或chf；
[0111]
y是(ch)
0-2
；
[0112]
z是cf2或o；
[0113]
j是crj；
[0114]
其中rj是h、f、cl、ch3或cd3；
[0115]
e是cre或n；
[0116]
其中re是h、f、br、或cf3；并且
[0117]
g是ch。
[0118]
在实施例4中，本发明提供了如实施例1至3中所述的具有式(i)的化合物，该化合物呈游离形式或药学上可接受的盐形式，其中如式(ia)所示定义立体化学
[0119][0120]
在实施例5中，本发明提供了如权利要求1至4中任一项所述的具有式(i)的化合物，该化合物呈游离形式的或药学上可接受的盐形式，其中如式(ib)所示定义立体化学
[0121][0122]
在实施例6中，本发明提供了如实施例5所述的具有式(i)的化合物、或其药学上可接受的盐，
[0123]
其中
[0124]
x是ch2或chf；
[0125]
y是(ch2)
0-2
；
[0126]
z是o、s或cf2；
[0127]
e是cre或n；
[0128]
其中re是h、f、br、或cf3；并且
[0129]
j是crj；
[0130]
其中rj是h、f、cl、ch3或cd3。
[0131]
在实施例7中，本发明提供了如实施例1所述的具有式(i)的化合物、或其药学上可接受的盐，该化合物选自由以下组成的组：
[0132]
(s)-5'-溴-8-(二氟甲氧基)-4'-氟-6-(三氟甲基)-2',3'-二氢-3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-茚]；
[0133]
(s)-8-(二氟甲氧基)-4',5'-二氟-6-(三氟甲基)-2',3'-二氢-3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-茚]；
[0134]
(s)-8'-(二氟甲氧基)-3,6'-双(三氟甲基)-5,6-二氢-3'h-螺[环戊并[c]吡啶-7,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]；
[0135]
(s)-5'-溴-8-(二氟甲氧基)-4'-氟-2',3'-二氢-3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-茚]-6-甲腈；
[0136]
(s)-5'-溴-4'-氟-8-(氟甲氧基)-6-(三氟甲基)-2',3'-二氢-3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-茚]；
[0137]
(s)-8-(二氟甲氧基)-5',6-双(三氟甲基)-2',3'-二氢-3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-茚]；
[0138]
(s)-6'-溴-8-(二氟甲氧基)-5'-氟-6-(三氟甲基)-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]；
[0139]
(s)-6'-溴-8-(二氟甲氧基)-5'-氟-6-(三氟甲基)-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]-4'(3'h)-酮；
[0140]
(1's,3'r)-6'-溴-8-(二氟甲氧基)-3',5'-二氟-6-(三氟甲基)-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]-4'(3'h)-酮；
[0141]
(1's,3'r,4's)-6'-溴-8-(二氟甲氧基)-3',5'-二氟-6-(三氟甲基)-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]-4'-醇；
[0142]
(s)-6'-溴-8-(二氟甲氧基)-6-(三氟甲基)-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]；
[0143]
(s)-8-(二氟甲氧基)-6-(三氟甲基)-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]；
[0144]
(s)-6'-溴-8-(二氟甲氧基)-5'-氟-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]-6-甲腈；
[0145]
(s)-6'-溴-8-(二氟甲氧基)-4',4',5'-三氟-6-(三氟甲基)-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]；
[0146]
(s)-8-(二氟甲氧基)-4',4',5'-三氟-6-(三氟甲基)-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]-6'-甲腈；
[0147]
(s)-6'-溴-8-氯-5'-氟-6-(三氟甲基)-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]
吡啶-2,1'-萘]；
[0148]
(s)-6'-溴-8-(二氟甲氧基)-3',3',5'-三氟-6-(三氟甲基)-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]-4'(3'h)-酮；
[0149]
(1's,4's)-6'-溴-8-(二氟甲氧基)-3',3',5'-三氟-6-(三氟甲基)-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]-4'-醇；
[0150]
(1's,4'r)-6'-溴-8-(二氟甲氧基)-3',3',5'-三氟-6-(三氟甲基)-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]-4'-醇；
[0151]
(1's,3'r)-8-(二氟甲氧基)-3',5'-二氟-6-(三氟甲基)-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]-4'(3'h)-酮；
[0152]
(1's,3'r)-8-(二氟甲氧基)-3',5'-二氟-6-(三氟甲基)-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]-4'(3'h)-酮；
[0153]
(s)-8-(二氟甲氧基)-5'-氟-6-(三氟甲基)-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]-6'-甲腈；
[0154]
(s)-8-(二氟甲氧基)-4',4',5'-三氟-6-(三氟甲基)-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]；
[0155]
(2s,4's)-6'-溴-8-(二氟甲氧基)-4',5'-二氟-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]-6-甲腈；
[0156]
(1's,4's)-8-(二氟甲氧基)-4',5'-二氟-6-(三氟甲基)-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]-6'-甲腈；
[0157]
(s)-8-(二氟甲氧基)-5'-氟-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]-6-甲腈；
[0158]d2-(s)-8-(二氟甲氧基)-5'-氟-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]-6-甲腈；
[0159]
(s)-8-(二氟甲氧基)-5'-氟-6-(三氟甲基)-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]；
[0160]
(s)-5',6',8-三氟-6-(三氟甲基)-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]；
[0161]
(s)-1'-氯-8',8'-二氟-8-甲氧基-6-(三氟甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉]；
[0162]
(s)-1'-氯-8-(二氟甲氧基)-8',8'-二氟-6-(三氟甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉]；
[0163]
(s)-8-(二氟甲氧基)-8',8'-二氟-1'-甲基-6-(三氟甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉]；
[0164]
(s)-8-(二氟甲氧基)-8',8'-二氟-1'-(甲基-d3)-6-(三氟甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉]；
[0165]
(s)-8-(二氟甲氧基)-8',8'-二氟-1'-甲氧基-6-(三氟甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉]；
[0166]
(s)-8-(二氟甲氧基)-6'-氟-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]-6-甲腈；
[0167]
(s)-1'-氯-8-(二氟甲氧基)-6-(三氟甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉]；
[0168]
(s)-3'-氯-8-(二氟甲氧基)-6-(三氟甲基)-6',7'-二氢-3h,5'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,8'-异喹啉]；
[0169]
(s)-8-(二氟甲氧基)-6-(三氟甲基)-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]-6'-甲腈；
[0170]
(s)-7-溴-8'-(二氟甲氧基)-8-氟-6'-(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]；
[0171]
(s)-8'-(二氟甲氧基)-8-氟-6',7-双(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]；
[0172]
(s)-7-氯-8'-(二氟甲氧基)-6'-(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]；(s)-7-溴-8-氟-8'-(氟甲氧基)-6'-(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]；
[0173]
(s)-7-氯-8'-(二氟甲氧基)-8-氟-6'-(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]；
[0174]
(s)-8'-(二氟甲氧基)-6',7-双(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]；
[0175]
(s)-8'-(二氟甲氧基)-7,8-二氟-6'-(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]；
[0176]
(s)-8'-(二氟甲氧基)-8-氟-7-甲基-6'-(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]；
[0177]
(s)-8'-(二氟甲氧基)-8-氟-6'-(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]；(s)-8-氯-8'-(二氟甲氧基)-6'-(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]；(s)-7-溴-8'-(二氟甲氧基)-8-氟-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]-6'-甲腈；
[0178]
(s)-7-溴-8'-(二氟甲氧基)-6'-(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]；(s)-8'-(二氟甲氧基)-8-氟-7-碘-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]-6'-甲腈；(s)-7-溴-6'-氯-8'-(二氟甲氧基)-8-氟-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]；(s)-8'-氯-6',7-双(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]；
[0179]
(s)-7,8'-双(二氟甲氧基)-8-氟-6'-(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]；
[0180]
(s)-8'-(二氟甲氧基)-8-(二氟甲基)-6'-(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]；
[0181]
(s)-8'-氯-8-(二氟甲氧基)-6-(三氟甲基)-2',3'-二氢-3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,4'-吡喃并[2,3-c]吡啶]；
[0182]
(2's,3r)-7-溴-8'-(二氟甲氧基)-3,8-二氟-6'-(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]；
[0183]
(2's,3s)-7-溴-8'-(二氟甲氧基)-3,8-二氟-6'-(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]；
[0184]
(2's,3r)-7-溴-8'-(二氟甲氧基)-3-氟-6'-(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]；
[0185]
(2's,3r)-8'-(二氟甲氧基)-3-氟-7-碘-6'-(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]；
[0186]
(2's,3r)-8'-(二氟甲氧基)-3-氟-6',7-双(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]；
[0187]
(2's,3r)-8'-(二氟甲氧基)-3,8-二氟-6'-(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]；
[0188]
(s)-8-(二氟甲氧基)-8'-氟-6-(三氟甲基)-3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,4'-异色满]；(s)-7'-氯-8-(二氟甲氧基)-8'-氟-3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,4'-硫代色满]-6-甲腈；
[0189]
(s)-8-(二氟甲氧基)-8'-氟-6-(三氟甲基)-3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,4'-硫代色满]；
[0190]
(s)-8-(二氟甲氧基)-8'-氟-3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,4'-硫代色满]-6-甲腈；
[0191]
(s)-8-(二氟甲氧基)-8'-氟-6,7'-双(三氟甲基)-2',3'-二氢-3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,4'-硫代吡喃并[3,2-c]吡啶]；
[0192]
(s)-8-(二氟甲氧基)-8'-氟-3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,4'-异硫代色满]-6-甲腈；(s)-8'-(二氟甲氧基)-9-氟-6'-(三氟甲基)-3,4-二氢-2h,3'h-螺[苯并[b]噁庚英-5,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]；
[0193]
(s)-8-(二氟甲氧基)-1'-(二氟甲基)-8',8'-二氟-6-(三氟甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉]；
[0194]
(s)-5'-溴-4',8-二氯-6-(三氟甲基)-2',3'-二氢-3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-茚]；
[0195]
(s)-5'-溴-8-(二氟甲氧基)-6-(三氟甲基)-2',3'-二氢-3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-茚]；
[0196]
(s)-8-(二氟甲氧基)-5'-碘-2',3'-二氢-3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-茚]-6-甲腈；
[0197]
(s)-8-(二氟甲氧基)-4'-氟-5',6-双(三氟甲基)-2',3'-二氢-3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-茚]；
[0198]
(s)-8-(二氟甲氧基)-6-(三氟甲基)-2',3'-二氢-3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-茚]；(s)-5',8-二氟-6'-甲氧基-6-(三氟甲基)-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]；
[0199]
(s)-8-氟-6,6'-双(三氟甲基)-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]；
[0200]
外消旋-5',6',8-三氟-6-(三氟甲基)-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]；
[0201]
(s)-8-氯-5'-氟-6-(三氟甲基)-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]；
[0202]
(s)-6'-溴-5'-氟-8-甲氧基-6-(三氟甲基)-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]；
[0203]
外消旋-5'-溴-8-(二氟甲氧基)-6-(三氟甲基)-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]；
[0204]
(s)-5'-氯-8-(二氟甲氧基)-6'-氟-6-(三氟甲基)-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]；
[0205]
(2s,3'r,4'r)-6'-溴-8-(二氟甲氧基)-3',4',5'-三氟-6-(三氟甲基)-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]；
[0206]
(s)-8-(二氟甲氧基)-5'-氟-6'-甲氧基-6-(三氟甲基)-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]；
[0207]
(s)-8-(二氟甲氧基)-5',6'-二氟-6-(三氟甲基)-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]；
[0208]
(s)-8-(二氟甲氧基)-6,6'-双(三氟甲基)-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]；
[0209]
外消旋-8-(二氟甲氧基)-5',6-双(三氟甲基)-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]；
[0210]
(s)-5'-氯-8-(二氟甲氧基)-6-(三氟甲基)-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]；
[0211]
(s)-6'-溴-6-氯-8-(二氟甲氧基)-5'-氟-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]；
[0212]
(s)-6'-溴-8-(二氟甲氧基)-6-(三氟甲基)-2',3'-二氢-3h,4'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]-4'-酮；
[0213]
(s)-8-(二氟甲氧基)-5',6'-二氟-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]-6-甲腈；
[0214]
(s)-6'-溴-8-(二氟甲氧基)-4',4',5'-三氟-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]-6-甲腈；
[0215]
外消旋-8-(二氟甲氧基)-6-(三氟甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉]；
[0216]
(s)-1'-氯-8-(二氟甲氧基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉]-6-甲腈；
[0217]
(s)-8-氯-8'-(氟甲氧基)-6'-(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]；(s)-8-氯-8'-(二氟甲氧基)-6'-(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]-7-甲腈；
[0218]
(3r,4s)-7-氯-8'-(二氟甲氧基)-3,8-二氟-6'-(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]；
[0219]
(3r,4s)-8'-(二氟甲氧基)-3,7,8-三氟-6'-(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]；
[0220]
(s)-8'-(二氟甲氧基)-8-氟-7-(甲硫基)-6'-(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]；
[0221]
(s)-7-溴-8-氯-8'-(二氟甲氧基)-6'-(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]；
[0222]
外消旋-8'-(二氟甲氧基)-3,8-二氟-6'-(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]；
[0223]
(s)-7,8-二溴-8'-(二氟甲氧基)-6'-(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]；
[0224]
(s)-8'-(二氟甲氧基)-8-氟-7-甲氧基-6'-(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]；
[0225]
(s)-8'-(二氟甲氧基)-6',8-双(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]；
[0226]
(s)-8'-(二氟甲氧基)-8-氟-7-(三氟甲氧基)-6'-(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]；
[0227]
(s)-8'-(二氟甲氧基)-7-((二氟甲基)硫代)-8-氟-6'-(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]；
[0228]
(s)-8-溴-8'-(二氟甲氧基)-6'-(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]；外消旋-8-(二氟甲氧基)-8'-氟-6,7'-双(三氟甲基)-3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,4'-异色满]；
[0229]
(2s)-8-(二氟甲氧基)-8'-氟-3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,4'-硫代色满]-6-甲腈-2',2',3'-d3；
[0230]
(s)-7'-溴-8-(二氟甲氧基)-8'-氟-3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,4'-硫代色满]-6-甲腈；
[0231]
(s)-8-(二氟甲氧基)-8'-氟-6-(三氟甲基)-3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,4'-硫代色满]-7'-甲腈；
[0232]
(s)-8-(二氟甲氧基)-7',8'-二氟-3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,4'-硫代色满]-6-甲腈；
[0233]
(s)-8-(二氟甲氧基)-7',8'-二氟-6-(三氟甲基)-3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,4'-硫代色满]；
[0234]
(s)-8'-氟-8-(氟甲氧基)-6,7'-双(三氟甲基)-2',3'-二氢-3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,4'-硫代吡喃并[3,2-c]吡啶]；
[0235]
(s)-8-(二氟甲氧基)-8'-氟-6-(三氟甲基)-3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,4'-异硫代色满]；
[0236]
(s)-8-(二氟甲氧基)-7'-氟-6-(三氟甲基)-3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,4'-异硫代色满]；
[0237]
(s)-8'-(二氟甲氧基)-8,9-二氟-6'-(三氟甲基)-3,4-二氢-2h,3'h-螺[苯并[b]噁庚英-5,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]；
[0238]
外消旋-9-氯-8'-(二氟甲氧基)-6'-(三氟甲基)-3,4-二氢-2h,3'h-螺[苯并[b]噁庚英-5,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]；以及
[0239]
(s)-8-氯-8'-(二氟甲氧基)-9-氟-6'-(三氟甲基)-3,4-二氢-1h,3'h-螺[苯并[c]噁庚英-5,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]。
[0240]
在实施例8中，本发明提供了如实施例1所述的具有式(i)的化合物、或其药学上可接受的盐，该化合物选自由以下组成的组：
[0241]
(s)-8-(二氟甲氧基)-8'-氟-3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,4'-硫代色满]-6-甲腈；
[0242]
(s)-8'-(二氟甲氧基)-9-氟-6'-(三氟甲基)-3,4-二氢-2h,3'h-螺[苯并[b]噁庚英-5,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]；
[0243]
(s)-8'-(二氟甲氧基)-6',7-双(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]；
[0244]
(s)-7-溴-8'-(二氟甲氧基)-8-氟-6'-(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]；
[0245]
(2's,3r)-8'-(二氟甲氧基)-3,8-二氟-6'-(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]；
[0246]
(s)-8'-(二氟甲氧基)-7,8-二氟-6'-(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]；
[0247]
(s)-1'-氯-8-(二氟甲氧基)-8',8'-二氟-6-(三氟甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉]；
[0248]
(s)-8-(二氟甲氧基)-8',8'-二氟-1'-(甲基-d3)-6-(三氟甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉]；以及
[0249]
(s)-8-(二氟甲氧基)-8',8'-二氟-1'-甲基-6-(三氟甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉]。
[0250]
在实施例9中，本发明提供了化合物或药学上可接受的盐形式，该化合物选自由以下组成的组：
[0251][0252]
在实施例10中，本发明提供了化合物或其药学上可接受的盐，该化合物是：
[0253][0254]
在实施例11中，本发明提供了一种药物组合物，该药物组合物包含治疗有效量的如实施例1至10中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐、以及一种或多种药学上可
接受的载体。
[0255]
在实施例12中，本发明提供了一种组合，该组合包含治疗有效量的如实施例1至10中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐、以及一种或多种治疗活性剂。
[0256]
在实施例13中，本发明提供了如实施例8所述的组合，其中所述治疗剂选自mtor抑制剂，该mtor抑制剂选自西罗莫司；地磷莫司；依维莫司(rad001)；雷帕霉素；塞马莫德；(5-{2,4-双[(3s)-3-甲基吗啉-4-基]吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-基}-2-甲氧基苯基)甲醇(azd8055)；2-氨基-8-[反式-4-(2-羟基乙氧基)环己基]-6-(6-甲氧基-3-吡啶基)-4-甲基-吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8h)-酮；n
2-[1,4-二氧代-4-[[4-(4-氧代-8-苯基-4h-1-苯并吡喃-2-基)吗啉鎓-4-基]甲氧基]丁基]-l-精氨酰甘氨酰-l-α-天冬氨酰l-丝氨酸-；n-[4-[[[3-[(3,5-二甲氧基苯基)氨基]-2-喹喔啉基]氨基]磺酰基]苯基]-3-甲氧基-4-甲基-苯甲酰胺；或(1r,4r)-4-(4-氨基-5-(7-甲氧基-1h-吲哚-2-基)咪唑并[1,5-f][1,2,4]三嗪-7-基)环己烷甲酸。
[0257]
在实施例14中，本发明提供了如实施例9所述的组合，其中所述mtor抑制剂是依维莫司。
[0258]
在实施例15中，本发明提供了一种调节受试者中hif2α活性的方法或用途，其中所述方法包括向所述受试者施用治疗有效量的如实施例1至10中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐。
[0259]
在实施例16中，本发明提供了一种治疗障碍或疾病的方法或用途，所述障碍或疾病是癌症，所述方法包括向所述受试者施用治疗有效量的如实施例1至10中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐。
[0260]
在实施例17中，本发明提供了一种如实施例12所述的治疗方法或用途，其中所述癌症选自：肾上腺皮质癌、乳腺癌、透明细胞肾细胞癌(ccrcc)、结直肠癌、生殖细胞肿瘤、多形性成胶质细胞瘤(gbm)、胶质瘤、头颈癌、肝细胞癌、肾癌、肺癌、恶性胶质瘤、眼癌、胰腺癌、副神经节瘤、嗜铬细胞瘤、前列腺癌、和肾细胞癌，所述方法包括向所述受试者施用治疗有效量的如实施例1至10中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐。
[0261]
在实施例18中，本发明提供了如实施例1至10中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，用于作为药物使用。
[0262]
在实施例19中，本发明提供了如实施例1至10中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，用于在治疗障碍或疾病中使用，所述障碍或疾病是癌症。
[0263]
在实施例20中，本发明提供了如实施例1至10中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，用于在治疗障碍或疾病中使用，所述障碍或疾病选自：肾上腺皮质癌、乳腺癌、透明细胞肾细胞癌(ccrcc)、结直肠癌、生殖细胞肿瘤、多形性成胶质细胞瘤(gbm)、胶质瘤、头颈癌、肝细胞癌、肾癌、肺癌、恶性胶质瘤、眼癌、胰腺癌、副神经节瘤、嗜铬细胞瘤、前列腺癌、和肾细胞癌。
[0264]
在实施例21中，本发明提供了一种(s)-1'-氯-8-(二氟甲氧基)-8',8'-二氟-6-(三氟甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉]富马酸盐的结晶形式，该结晶形式特征在于当在20℃至30℃范围内的温度、用具有0.15406nm的波长的cu-kα1,2辐射测量时，具有粉末x射线衍射图，所述粉末x射线衍射图包含在2-θ角为(24.9
±
0.2)
°
、(6.2
±
0.2)
°
和(20.9
±
0.2)
°
处的反射。
[0265]
在实施例22中，本发明提供了一种(s)-1'-氯-8-(二氟甲氧基)-8',8'-二氟-6-(三氟甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉]富马酸盐的结晶形式，该结晶形式特征在于当在20℃至30℃范围内的温度、用具有0.15406nm的波长的cu-kα1,2辐射测量时，具有粉末x射线衍射图，所述粉末x射线衍射图包含在2-θ角为(24.9
±
0.2)
°
、(6.2
±
0.2)
°
、(20.9
±
0.2)
°
、(10.9
±
0.2)
°
和(18.5
±
0.2)
°
处的反射。
[0266]
在实施例23中，本发明提供了一种(s)-1'-氯-8-(二氟甲氧基)-8',8'-二氟-6-(三氟甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉]富马酸盐的结晶形式，该结晶形式特征在于当在20℃至30℃范围内的温度、用具有0.15406nm的波长的cu-kα1,2辐射测量时，具有粉末x射线衍射图，所述粉末x射线衍射图包含在2-θ角为(24.9
±
0.2)
°
、(6.2
±
0.2)
°
、(20.9
±
0.2)
°
、(10.9
±
0.2)
°
、(18.5
±
0.2)
°
、(22.8
±
0.2)
°
、(12.9
±
0.2)
°
和(16.1
±
0.2)
°
处的反射。
[0267]
在实施例24中，本发明提供了实施例21-23中任一项所述的结晶形式，该结晶形式特征在于当以10k/min的速率从10℃加热到250℃时，具有热重量分析曲线，所述热重量分析曲线显示出基于所述结晶形式的重量不超过0.4重量％的质量损失。
[0268]
在实施例25中，本发明提供了一种(s)-1'-氯-8-(二氟甲氧基)-8',8'-二氟-6-(三氟甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉]游离形式的结晶形式，该结晶形式特征在于当在20℃至30℃范围内的温度、用具有0.15406nm的波长的cu-kα1,2辐射测量时，具有粉末x射线衍射图，所述粉末x射线衍射图包含在2-θ角为(9.7
±
0.2)
°
、(18.4
±
0.2)
°
和(19.4
±
0.2)
°
处的反射。
[0269]
在实施例26中，本发明提供了一种(s)-1'-氯-8-(二氟甲氧基)-8',8'-二氟-6-(三氟甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉]游离形式的结晶形式，该结晶形式特征在于当在20℃至30℃范围内的温度、用具有0.15406nm的波长的cu-kα1,2辐射测量时，具有粉末x射线衍射图，所述粉末x射线衍射图包含在2-θ角为(9.7
±
0.2)
°
、(18.4
±
0.2)
°
、(19.4
±
0.2)
°
、(13.4
±
0.2)
°
和(20.7
±
0.2)
°
处的反射。
[0270]
在实施例27中，本发明提供了一种(s)-1'-氯-8-(二氟甲氧基)-8',8'-二氟-6-(三氟甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉]游离形式的结晶形式，该结晶形式特征在于当在20℃至30℃范围内的温度、用具有0.15406nm的波长的cu-kα1,2辐射测量时，具有粉末x射线衍射图，所述粉末x射线衍射图包含在2-θ角为(9.7
±
0.2)
°
、(18.4
±
0.2)
°
、(19.4
±
0.2)
°
、(13.4
±
0.2)
°
、(20.7
±
0.2)
°
、(24.2
±
0.2)
°
、(22.1
±
0.2)
°
和(10.3
±
0.2)
°
处的反射。
[0271]
在实施例28中，本发明提供了实施例25-27中任一项所述的结晶形式，该结晶形式特征在于当以10k/min的速率从10℃加热到250℃时，具有热重量分析曲线，所述热重量分析曲线显示出基于所述结晶形式的重量不超过0.2重量％的质量损失。
[0272]
在实施例29中，本发明提供了如实施例21至28中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，用于作为药物使用。
[0273]
在实施例30中，本发明提供了如实施例29所述的化合物或其药学上可接受的盐，用于在治疗障碍或疾病中使用，所述障碍或疾病是癌症。
[0274]
在实施例31中，本发明提供了如实施例30所述的化合物或其药学上可接受的盐，用于在治疗障碍或疾病中使用，所述障碍或疾病选自：肾上腺皮质癌、乳腺癌、透明细胞肾
细胞癌(ccrcc)、结直肠癌、生殖细胞肿瘤、多形性成胶质细胞瘤(gbm)、胶质瘤、头颈癌、肝细胞癌、肾癌、肺癌、恶性胶质瘤、眼癌、胰腺癌、副神经节瘤、嗜铬细胞瘤、前列腺癌、和肾细胞癌。
[0275]
在实施例32中，本发明提供了一种用于产生具有式(i)的化合物
[0276][0277]
或其药学上可接受的盐的方法，
[0278]
所述方法包括以下步骤：任选地在碱的存在下，使具有式(iv)的化合物、
[0279][0280]
或其盐、溶剂化物、立体异构体、复合物、共晶体、酯、或噁唑啉，和具有式(ii)的化合物、
[0281][0282]
或其盐、溶剂化物、立体异构体、复合物、共晶体、酯、或噁唑啉，与具有式(iii)的化合物
[0283][0284]
或其盐、溶剂化物、立体异构体、复合物、共晶体、酯、或噁唑啉反应，
[0285]
其中
[0286]
r1是f、cl、br、och3、och2f、ochf2或ocf3；
[0287]
r2是f、cl、cf3或cn；
[0288]
x是(ch2)
1-2
、chf、chd、cd2或cf2；
[0289]
y是(ch2)
0-2
、chf、chd、cd2、o、s、och2或cf2；
[0290]
z是ch2、cd2、chf、cdf、cf2、ch(oh)、co、ch(ch3)、o、或s，
[0291]
其中，当y是o、och2、或s时，那么z是ch2；
[0292]
其中，当z是o、s、或nch3时，那么y是(ch2)
0-2
或cf2；其中，当z是ch(oh)时，那么y是chf或cf2；
[0293]
j是crj；
[0294]
其中rj是h、f、cl、br、ch3、cd3、cf3、chf2、cdf2、och3或cn；
[0295]
e是cre或n；
[0296]
其中re是h、f、cl、br、i、cn、ch3、ch2ch3、ch(ch3)2、cd3、chd2、ch2d、chf2、cdf2、c(ch3)f2、c(cd3)f2、cf3、环丙基、och3、och2ch2oh、ocf3、sch3、schf2，
[0297]
g是ch或n；并且
[0298]
lg是选自f、cl、或br的离去基团；
[0299]
所述碱选自k2co3或et3n，
[0300]
以获得具有式(1)的化合物或其药学上可接受的盐。
[0301]
在实施例33中，本发明提供了如实施例32所述的方法，其中在选自吡啶或et3n的碱的存在下，将具有式(ii)的化合物用试剂环化，所述试剂选自甲苯中的socl2、甲苯磺酰氯、或甲磺酰氯，以给出具有式(i)的化合物。
[0302]
定义
[0303]
如本文所用，术语“盐(salt或salts)”是指本发明的化合物的酸加成盐或碱加成盐。“盐”特别包括“药学上可接受的盐”。术语“药学上可接受的盐”是指保留本发明化合物的生物有效性和特性，并且典型地不是生物学上或其他方面不希望的盐。在许多情况下，由于氨基和/或羧基基团或与其类似的基团的存在，本发明的化合物能够形成酸盐和/或碱盐。
[0304]
可以用无机酸和有机酸形成药学上可接受的酸加成盐。
[0305]
可以衍生出盐的无机酸包括，例如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等。
[0306]
可以衍生出盐的有机酸包括例如乙酸、丙酸、乙醇酸、草酸、马来酸、丙二酸、琥珀酸、富马酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、甲苯磺酸、磺基水杨酸等。
[0307]
可以用无机碱和有机碱形成药学上可接受的碱加成盐。
[0308]
可以衍生出盐的无机碱包括例如铵盐和来自元素周期表第i至xii列的金属。在某些实施例中，盐衍生自钠、钾、铵、钙、镁、铁、银、锌和铜；特别合适的盐包括铵盐、钾盐、钠盐、钙盐和镁盐。
[0309]
可以衍生出盐的有机碱包括例如伯胺、仲胺和叔胺；取代的胺(包括天然存在的取代的胺)；环胺；碱性离子交换树脂等。某些有机胺包括异丙胺、苄星、胆碱盐、二乙醇胺、二乙胺、赖氨酸、葡甲胺、哌嗪和氨丁三醇。
[0310]
本文中给出的任何式还旨在代表所述化合物的非标记形式以及同位素标记形式。除了一个或多个原子被具有选定原子量或质量数的原子替换以外，同位素标记的化合物具有本文中给出的式所描述的结构。可以掺入本发明化合物中的同位素包括例如氢的同位素。
[0311]
此外，掺入某些同位素，特别是氘(即2h或d)可以提供更高代谢稳定性导致的某些治疗优势，例如增加的体内半衰期或减少的剂量要求或治疗指数或耐受性的改善。应当理
解，在本上下文中氘被认为是本发明的化合物的取代基。氘的浓度可以由同位素富集因子定义。如本文所用的术语“同位素富集因子”是指同位素丰度与指定同位素的天然丰度之间的比率。如果本发明化合物中的取代基指示为氘，则这种化合物具有的针对每个指定的氘原子的同位素富集因子为至少3500(在每个指定的氘原子上52.5％氘掺入)、至少4000(60％氘掺入)、至少4500(67.5％氘掺入)、至少5000(75％氘掺入)、至少5500(82.5％氘掺入)、至少6000(90％氘掺入)、至少6333.3(95％氘掺入)、至少6466.7(97％氘掺入)、至少6600(99％氘掺入)、或至少6633.3(99.5％氘掺入)。应理解，术语“同位素富集因子”可以以与对氘描述的相同方式应用于任何同位素。
[0312]
可以掺入本发明的化合物的同位素的其他实例包括氢、碳、氮、氧、磷、氟和氯的同位素，如分别是3h、
11
c、
13
c、
14
c、
15
n、
18
f、
31
p、
32
p、
35
s、
36
cl、
123
i、
124
i、
125
i。因此，应当理解，本发明包括掺入任何上述同位素中一种或多种的化合物，包括例如放射性同位素，如3h和
14
c，或其中掺入非放射性同位素如2h和
13
c的那些。此类同位素标记的化合物可用于代谢研究(用
14
c)、反应动力学研究(例如用2h或3h)、检测或成像技术(如正电子发射断层扫描(pet)或单光子发射计算机断层扫描(spect)，包括药物或底物组织分布测定)，或用于患者的放射性治疗。特别地，
18
f或标记的化合物对于pet或spect研究可能是特别期望的。同位素标记的本发明的化合物通常可以通过本领域技术人员已知的常规技术或通过与所附实例和制备中所述的那些类似的方法，使用适当的同位素标记的试剂代替未标记的先前使用的试剂来制备。
[0313]
如本文所用，术语“药物组合物”是指呈适于口服或肠胃外施用的形式的本发明化合物、或其药学上可接受的盐，以及至少一种药学上可接受的载体。
[0314]
如本文使用的，术语“药学上可接受的载体”是指可用于制备或使用药物组合物的物质，并且包括例如适合的稀释剂、溶剂、分散介质、表面活性剂、抗氧化剂、防腐剂、等渗剂、缓冲液、乳化剂、吸收延迟剂、盐、药物稳定剂、黏合剂、赋形剂、崩解剂、润滑剂、润湿剂、甜味剂、调味剂、染料及其组合，如本领域技术人员已知的(参见，例如，remington the science and practice of pharmacy[雷明顿：药物科学与实践],第22版,pharmaceutical press[药物出版社],2013,第1049-1070页)。
[0315]
术语“治疗有效量”的本发明的化合物是指将引起受试者的生物或医学应答(例如，酶或蛋白活性的减小或抑制，或改善症状、缓解病症、减缓或延迟疾病进展或预防疾病等)的本发明的化合物的量。在一个实施例中，术语“治疗有效量”是指本发明的化合物的以下量，当向受试者施用时，该量有效地：(1)至少部分地缓解、预防和/或改善(i)由hif2α介导、或(ii)与hif2α活性相关、或(iii)以hif2α的活性(正常或异常)为特征的病症或障碍或疾病；或(2)降低或抑制hif2α的活性；或(3)降低或抑制hif2α的表达。在另一个实施例中，术语“治疗有效量”是指本发明化合物的如下量，该量当被施用至细胞、或组织、或非细胞生物材料、或介质时有效地至少部分降低或抑制hif2α的活性；或至少部分地降低或抑制hif2α的表达。
[0316]
如本文所用，术语“受试者”是指灵长类(例如，人(男性或女性))、狗、兔、豚鼠、猪、大鼠和小鼠。在某些实施例中，受试者为灵长类。在又其他的实施例中，受试者是人。
[0317]
如本文所用，术语“抑制(inhibit、inhibition或inhibiting)”是指减少或抑制给定的病症、症状或障碍、或疾病，或在生物活性或过程的基线活性方面的显著降低。
[0318]
如本文所用，术语任何疾病或障碍的“治疗(treat、treating或treatment)”是指缓解或改善疾病或障碍(即，减慢或阻止疾病或其至少一种临床症状的发展)；或缓解或改善与该疾病或障碍相关的至少一种物理参数或生物标记，包括患者可能无法辨别的那些物理参数或生物标记。
[0319]
如本文所用，术语任何疾病或障碍的“预防(prevent、preventing或prevention)”是指疾病或障碍的预防性治疗；或延迟疾病或障碍的发作或进展。
[0320]
如本文所用，如果受试者将在生物学上、在医学上或在生活质量上从治疗中获益，则这样的受试者是“需要”这种治疗的。
[0321]
如本文所用，术语“一个/种(a，an)”，“所述/该(the)”以及在本发明的上下文中使用的类似术语(特别是在权利要求的上下文中)应被解释为涵盖单数和复数两者，本文中除非另外指示或与上下文明显相矛盾。
[0322]
在本文描述的所有方法能够以任何适合顺序进行，除非本文另外指示或另外与上下文明显矛盾。本文提供的任何和所有实例或示例性语言(例如“如”)的使用仅旨在更好地说明本发明，而不对另外要求保护的本发明范围做出限制。
[0323]
本发明的一种或多种化合物的任何非对称原子(例如，碳等)可以以外消旋或对映异构体富集的形式存在，例如，(r)-、(s)-或(r,s)-构型。在某些实施例中，每个非对称原子具有至少50％对映异构体过量、至少60％对映异构体过量、至少70％对映异构体过量、至少80％对映异构体过量、至少90％对映异构体过量、至少95％对映异构体过量、或至少99％对映异构体过量的(r)-或(s)-构型。如果可能，在具有不饱和双键的原子上的取代基可以以顺式-(z)-或反式-(e)-形式存在。
[0324]
因此，如本文所用，本发明的化合物可以呈可能的立体异构体、旋转异构体、阻转异构体、互变异构体或其混合物之一的形式，例如，作为基本上纯的几何(顺式或反式)立体异构体、非对映异构体、光学异构体(对映体)、外消旋体或其混合物。
[0325]
可以基于组分的物理化学差异，例如通过色谱法和/或分级结晶法将任何所得的立体异构体混合物分离成纯的或基本上纯的几何或光学异构体、非对映异构体、外消旋体。
[0326]
对于单独的实例的子集、或结合在hif2α的pas-b结构域中，或来自用于制备这些实例的中间体，通过单晶x射线结构分析指定螺环中心的立体化学。基于其hif2α亲和力，通过类比指定其余实例的立体化学：例如，在实例44的hif2αspa测定中发现测定的ic
50
比对应的对映异构体(r)-8'-(二氟甲氧基)-6',7-双(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]低大于700倍(hif2αspa ic
50
》10000nm)。
[0327]
通用条件：
[0328]
通常，具有式(i)的化合物可根据下文提供的方案制备。
[0329]
下文提供的方案旨在代表单个非对映立体异构体/对映异构体及其异构体混合物。非对映立体异构体/对映异构体的分离可以根据本文所述的技术进行。
[0330]
方案1：具有式(i)的化合物的通用合成
[0331][0332]
步骤1：将具有式(iv)的化合物用具有式(iii)的吡啶进行芳基化，以给出具有式(ii)的化合物，其中lg是离去基团。芳基化反应可以是亲核芳香族取代反应，其中lg是基团(如氟、氯或溴)，并且该反应可以在碱(如k2co3或et3n)的存在下，伴随加热进行。可替代地，该反应可以是过渡金属催化的偶联反应，例如布赫瓦尔德(buchwald)反应或乌尔曼(ullmann)型胺化反应，其中lg是基团(如氯、溴或溴)，在碱(如kotbu或k3po4)的存在下，使用例如pd催化剂或cu催化剂(如cui、cubr、或噻吩-2-甲酸铜盐(i))。
[0333]
步骤2：将具有式(ii)的化合物环化以给出具有式(i)的化合物。可通过加热使用试剂(如甲苯中的socl2)，或在碱(如吡啶或et3n)的存在下伴随或不伴随加热使用甲苯磺酰氯或甲磺酰氯，将醇基团活化为离去基团。
[0334]
在一些情况下，步骤1和步骤2均可以在以下中进行：在用两个或更多个当量的吡啶(iii)进行步骤1的一锅反应中，在醇也被该吡啶进行芳基化以提供用于环化反应的离去基团的反应中。
[0335]
方案2：具有式(i)的化合物的通用合成
[0336][0337]
步骤1：在一些情况下，用受保护的氨基醇进行芳基化反应。氨基醇(iv)的合适的受保护的形式是噁唑烷酮(vi)，其通过与光气或光气等价物(如羰基二咪唑或三光气)反应制备，并且该反应可以在碱的存在下进行。
[0338]
步骤2：将具有式(vi)的化合物用吡啶(iii)进行芳基化，以给出具有式(ii)的化合物，其中lg是离去基团。芳基化反应可以是过渡金属催化的偶联反应，在碱(如kotbu)的存在下，使用例如pd催化剂。可替代地，该芳基化反应可以是乌尔曼型胺化反应，在碱(如kotbu或k3po4)的存在下，使用例如cu催化剂(如cui、cubr、或噻吩-2-甲酸铜盐(i))。
[0339]
步骤3：具有式(v)的噁唑烷酮在水解反应中脱保护以给出水性酸或碱中具有式(ii)的氨基醇，如etoh中的naoh、meoh中的cs2co3，这种水解反应可以在另外的溶剂(如thf)的存在下进行。
[0340]
步骤4：可以类似于方案1的步骤2所述的方式进行环化反应。
[0341]
方案3：具有式(i)的化合物的通用合成
[0342][0343]
步骤1：在酰化反应中，具有式(viii)的醇转化为具有式(vii)的氨基甲酸酯。可以用酰化剂(如三氯乙酰基异氰酸酯)进行反应，然后在第二步骤中在碱性条件下(如meoh中的k2co3或etoh水溶液中的naoh)将该酰化剂水解。
[0344]
步骤2：在氮烯插入反应中，具有式(vii)的氨基甲酸酯环化为具有式(vi)的噁唑烷酮。可以通过氧化过程，使用氧化剂(如亚碘酰苯二乙酸酯)形成氮烯中间体，并且通过添加催化剂，如rh2(oac)4、rh2[oc(o)ph]4、rh2(esp)2，并且使用添加剂(如mgo)使其稳定以在插入步骤中反应。
[0345]
步骤3-5：可以类似于方案2的等效步骤所述的方式进行噁唑烷酮(vi)向具有式(i)的化合物的转化。
[0346]
方案4：具有式(i)的化合物的通用合成
[0347][0348]
步骤1：具有式(i)的化合物(其中r1是f、cl、或br)可以与钠或钾醇盐进行亲核芳香族亲核取代反应，以给出中间体(其中r1是醚基)，该中间体可以进一步脱保护为相应的具有式(ix)的苯酚。当醇盐衍生自2-(甲基磺酰基)乙醇和dmf中的nah时，将醚原位脱保护，以直接给出具有式(ix)的化合物。
[0349]
步骤2：可以将具有式(ix)的化合物的苯酚基烷基化以给出具有式(i)的化合物，其中r1是och2f、ochf2。可以用试剂如溴二氟甲基)三甲基硅烷和koh、或二溴二氟甲烷和nah，然后通过dcm中的agbf4进行烷基化反应。
[0350]
通过具有式(i)的化合物(其中r1是f、cl、或br)与meoh和naotbu的反应，可以直接
获得具有式(i)的化合物(其中r1是ome)。
[0351]
方案5：具有式(i)的化合物的通用合成
[0352][0353]
步骤1：可以使用过渡金属催化的偶联反应将具有式(i)的化合物(其中e或j是crj或cre，其中rj和re独立地是cl、br、或i)并且转化为具有式(i)的化合物(其中rj或re是cl、h、cn、me、d
3-me、scf3、chf2、cf2me、meo)。过渡金属催化的偶联反应可以是醚的形成，如用叔丁基brettphos-pd-g3、naotbu和1,4-二噁烷中的meoh；硫醇的形成，如用3-巯基丙酸2-乙基己酯、pd2(dba)3、xantphos、和1,4-二噁烷中的ipr2net；然后在与etoh中的naoet的反应中形成游离硫醇；如与2,2-二氟-1-苯基乙酮、pd(dba)2、sphos、和甲苯中的cs2co3的二氟甲基化反应；然后用试剂(如甲苯中的koh水溶液)将中间体脱酰基；如与dmso、cui和dabco的硫代甲基化；如用pd碳催化剂、用meoh和thf中的氢的氢化反应；如与六氰基高铁酸钾(ii)、xphos、xphos pd g3和水中的koac以及1,4-二噁烷的氰化反应；如与二苯基(三氟甲基)锍三氟甲烷磺酸盐和dmf中的cu粉的三氟甲基化反应；如与双(频哪醇)二硼、pdcl2(dppf).ch2cl2加合物和1,4-二噁烷中的koac的硼基化反应；然后通过用试剂(如meoh和水中的cucl2)处理，硼酸酯可以进一步转化为相应的氯衍生物。
[0354]
利用反应，如三氟甲基化以转化硫醇为三氟甲基硫醇，使用(溴二氟甲基)膦酸二乙酯和accn中的koh，可以将具有式(i)的过渡金属催化的偶联反应的产物转化为式(i)的另外的衍生物。
[0355]
方案6：具有式(i)的化合物的通用合成
[0356][0357]
步骤1：利用氟化反应(如甲硅烷基烯醇醚中间体与accn中的selectfluor反应)，可以将具有式(i)的化合物(其中z＝c＝o)转化为具有式(i)的化合物(其中z＝c＝o且y＝chf)，如通过与叔丁基二甲基甲硅烷基三氟甲烷磺酸酯和dcm中的et3n的甲硅烷基化反应，可以从具有式(i)的化合物(其中z＝c＝o)制备该甲硅烷基烯醇醚中间体，利用如与etoh中的nabh4的还原反应，重复该顺序以给出具有式(i)的化合物(其中z＝c＝o且y＝cf2，其中z＝ch(oh))，利用如与dcm中的dast的氟化反应，可以将醇进一步转化为具有式(i)的化合物(其中z＝chf)。
[0358]
通过具有式(i)的化合物(其中z＝ch2)的氧化，通过例如与氧、n-羟基邻苯二甲酰亚胺和accn中的硝酸铁(iii)氧化，或者由具有式(i)的化合物(其中z＝硫缩酮)通过例如与丙酮水溶液中的n-溴琥珀酰亚胺的脱保护反应制备具有式(i)的化合物(其中z＝c＝o)。
[0359]
方案7：具有式(i)的化合物的通用合成
[0360][0361]
步骤1：通过锂化反应并向羰基化合物中添加所得的有机锂中间体，随后通过如与thf中的nbuli的氟化反应将具有式(i)的化合物(其中crj或cre是br或i)转化为具有式(i)的化合物(其中crj或cre是chf2)，随后添加dmf，然后在如与dcm中的dast的氟化反应中，将甲酰化中间体氟化。
[0362]
本发明进一步包括本发明方法的任何变型，其中将可在其任何阶段获得的中间体产物用作起始材料并进行其余步骤，或其中起始物质在反应条件下原位形成，或其中将反应组分以其盐或光学纯物质的形式使用。本发明化合物和中间体还可以根据本领域技术人员通常已知的方法彼此转化。
[0363]
在另一方面，本发明提供了药物组合物，该药物组合物包含本发明化合物、或其药学上可接受的盐，和药学上可接受的载体。在另外的实施例中，组合物包含至少两种药学上可接受的载体，例如本文所述的那些。药物组合物可以配制用于特定的施用途径，如口服施用、肠胃外施用(例如通过注射、输注、透皮或局部施用)、和直肠施用。局部施用也可以涉及吸入或鼻内应用。本发明的药物组合物可以以固体形式(包括但不限于胶囊、片剂、丸剂、颗粒、粉末或栓剂)、或以液体形式(包括但不限于溶液、混悬液或乳液)制成。片剂可根据本领域已知的方法添加薄膜包衣或肠溶包衣。典型地，药物组合物是包含活性成分及以下中的一种或多种的片剂或明胶胶囊：
[0364]
a)稀释剂，例如乳糖、右旋糖、蔗糖、甘露醇、山梨醇、纤维素和/或甘氨酸；
[0365]
b)润滑剂，例如二氧化硅、滑石、硬脂酸、其镁或钙盐和/或聚乙二醇；就片剂而言还包含
[0366]
c)粘合剂，例如硅酸铝镁、淀粉糊、明胶、黄芪胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠和/或聚乙烯吡咯烷酮；如果希望的话
[0367]
d)崩解剂，例如淀粉、琼脂、海藻酸或其钠盐、或泡腾混合物；以及
[0368]
e)吸附剂、着色剂、调味剂和甜味剂。
[0369]
本发明的使用方法
[0370]
呈游离形式或药学上可接受的盐形式的具有式(i)和(ia)中任一种的化合物展示出有价值的药理学特性，例如，抑制或调节hif2α，例如，如在下一个部分中提供的体外和体内测试所示，并且因此指示用于疗法或用作研究化学品，例如作为工具化合物。
[0371]
本发明的化合物可用于治疗或预防癌症，其中该癌症选自肾上腺皮质癌、乳腺癌、透明细胞肾细胞癌(ccrcc)、结直肠癌(可以包括结肠癌)、生殖细胞肿瘤(例如颅和颅外生殖细胞肿瘤、性腺和性腺外生殖细胞肿瘤)、多形性成胶质细胞瘤(gbm)、胶质瘤、头颈癌(可以包括唇癌、口腔癌(oral cavity，mouth cancer))、肝细胞癌、肾癌、肺癌、恶性胶质瘤、眼癌、胰腺癌、副神经节瘤、嗜铬细胞瘤、前列腺癌、和肾细胞癌。
[0372]
因此，作为另外的方面，本发明提供了具有式(i)或(ia)的化合物，或如前述实施例中任一项所述的化合物，或其药学上可接受的盐在疗法中的用途。在另外的实施例中，该疗法选自可以通过抑制或调节hif2α而治疗的疾病。在另一个实施例中，该疾病选自肾上腺
皮质癌、乳腺癌、透明细胞肾细胞癌(ccrcc)、结直肠癌(可以包括结肠癌)、生殖细胞肿瘤(例如颅和颅外生殖细胞肿瘤、性腺和性腺外生殖细胞肿瘤)、多形性成胶质细胞瘤(gbm)、胶质瘤、头颈癌(可以包括唇癌、口腔癌(oral cavity，mouth cancer))、肝细胞癌、肾癌、肺癌、恶性胶质瘤、眼癌、胰腺癌、副神经节瘤、嗜铬细胞瘤、前列腺癌、和肾细胞癌。
[0373]
因此，作为另外的方面，本发明提供了具有式(i)或(ia)中任一种的化合物，或如前述实施例中任一项所述的化合物，或其药学上可接受的盐，用于在疗法中使用。在另外的实施例中，该疗法选自可以通过抑制或调节hif2α而治疗的疾病。在另一个实施例中，该疾病选自前述列表，合适地选自特别是癌症。
[0374]
因此，作为另外的方面，本发明提供了具有式(i)或(ia)中任一种的化合物，或如前述实施例中任一项所述的化合物，或其药学上可接受的盐用于制造药物的用途。在另外的实施例中，该药物用于治疗或预防疾病，该疾病可以通过抑制或调节hif2α治疗。在另一个实施例中，该疾病选自前述列表，合适地选自特别是癌症。
[0375]
对于约50-70kg的受试者，本发明的药物组合物或组合可以呈约1-1000mg一种或多种活性成分，或约1-500mg或约1-250mg或约1-150mg或约0.5-100mg或约1-50mg活性成分的单位剂量。化合物、药物组合物、或其组合的治疗有效剂量取决于受试者的物种、体重、年龄和所治疗的个体病症、障碍或疾病或其严重程度。具有普通技能的医师、临床医生或兽医可以容易地确定预防、治疗或抑制障碍或疾病进展所必需的每种活性成分的有效量。
[0376]
有利地使用哺乳动物(例如，小鼠、大鼠、狗、猴)或其分离的器官、组织和制品使用体外和体内测试证明上述剂量特性。本发明化合物可以以溶液(例如水溶液)的形式体外应用，和例如以混悬剂或以水溶液的形式肠内、肠胃外(有利地，静脉内)体内应用。体外剂量可以在约10-3
摩尔浓度和10-9
摩尔浓度之间的范围内。根据施用途径，体内治疗有效量的范围可以在约0.1-500mg/kg之间、或在约1-100mg/kg之间。
[0377]“组合”是指呈一种剂量单位形式的固定组合，或组合施用，其中本发明化合物与组合伴侣(例如下文所解释的另一种药物，也称为“治疗剂”或“共药剂”)可以同时独立地施用或在时间间隔内分开地施用，特别是在这些时间间隔允许组合伴侣显示协作(例如协同)效应的情况下。单个组分可以包装在一个试剂盒中或分开包装。可以在施用之前将一种或两种组分(例如粉末或液体)重构或稀释至所希望的剂量。如本文所用，术语“共同施用”或“组合施用”等旨在涵盖将所选择的组合伴侣施用至有需要的单一受试者(例如患者)，并且旨在包括其中药剂不一定通过相同的施用途径施用或同时施用的治疗方案。如本文所用，术语“药物组合”意指由多于一种治疗剂的混合或组合所产生的产品，并且包括治疗剂的固定和非固定组合两者。术语“固定组合”意指治疗剂(例如，本发明化合物和组合伴侣)以单一实体或剂量的形式同时地施用至患者。术语“非固定组合”意指治疗剂(例如，本发明化合物和组合伴侣)作为分开的实体同时地、并行地或依序地施用至患者(没有特定的时间限制)，其中这种施用在患者体内提供治疗有效水平的两种化合物。后者也适用于鸡尾酒疗法，例如三种或更多种治疗剂的施用。
[0378]
如本文所用，术语“药物组合”是指呈一个剂量单位形式的固定组合、或用于组合施用的非固定组合或成套药盒，其中两种或更多种治疗剂可以同时独立地施用或在时间间隔内分开地施用，特别是在这些时间间隔允许组合伴侣显示协作(例如协同)效应的情况下。
[0379]
术语“组合疗法”是指施用两种或更多种治疗剂以治疗在本披露中描述的治疗性病症或障碍。这种施用涵盖以基本上同时的方式共同施用这些治疗剂，如以具有固定比率的活性成分的单个胶囊施用。可替代地，这种施用涵盖在多个容器中、或在每种活性成分的独立容器(例如，片剂、胶囊、粉末、和液体)中共同施用。可以将粉末和/或液体在施用之前重构或稀释到所希望的剂量。另外，这种施用也涵盖在大致相同的时间或在不同的时间顺序使用每种类型的治疗剂。在任何一种情况下，治疗方案将在治疗本文所述的病症或障碍方面提供药物组合的有益作用。
[0380]
本发明化合物可以与一种或多种其他治疗剂同时施用或者在其之前或之后施用。本发明化合物可以通过与其他药剂相同或不同的施用途径分开施用，或在相同的药物组合物中一起施用。治疗剂是例如化学化合物、肽、抗体、抗体片段或核酸，当将该治疗剂与本发明的化合物组合施用患者时，该治疗剂具有治疗活性或增强治疗活性。
[0381]
在一个实施例中，本发明提供了作为组合制剂的产品，该产品包含具有式(i)或(ia)的化合物，或如前述实施例中任一项所述的化合物，或其药学上可接受的盐，以及至少一种其他治疗剂，用于在疗法中同时、分开或依序使用。
[0382]
在一个实施例中，该疗法是治疗或预防由抑制或调节hif2α介导的疾病或病症。作为组合制剂提供的产品包括组合物，该组合物包含一起在同一药物组合物中的具有式(i)或(ia)中任一种的化合物或其药学上可接受的盐以及一种或多种其他治疗剂，或者呈分开的形式(例如呈试剂盒的形式)的具有式(i)或(ia)中任一种的化合物或其药学上可接受的盐以及一种或多种其他治疗剂。
[0383]
在一个实施例中，本发明提供了一种药物组合，该药物组合包含具有式(i)或(ia)中任一种的化合物，或如前述实施例中任一项所述的化合物，或其药学上可接受的盐，以及另一种或多种治疗剂。任选地，该药物组合可以包含如上所述的药学上可接受的载体。
[0384]
在一个实施例中，本发明提供了一种试剂盒，该试剂盒包含两种或更多种单独的药物组合物，其中至少一种含有具有式(i)或(ia)中任一种的化合物，或如前述实施例中任一项所述的化合物，或其药学上可接受的盐。在一个实施例中，该试剂盒包含用于分别保留所述组合物的装置(例如容器、分开的瓶子、或分开的箔包)。这种试剂盒的实例是泡罩包装，如典型地用于片剂、胶囊及类似物的包装。
[0385]
本发明的试剂盒可以用于施用不同剂型(例如，口服和肠胃外)，用于以不同剂量间隔施用单独组合物或用于相对在彼此滴定单独组合物。为了有助于依从性，本发明的试剂盒典型地包含用于施用的用法说明书。
[0386]
在本发明的组合疗法中，本发明的化合物和其他治疗剂可以由相同或不同的制造商制造和/或配制。此外，可以以下述方式将本发明化合物和其他治疗剂一起形成组合疗法：(i)在将组合产品发放给医师之前(例如在包含本发明化合物和其他治疗剂的试剂盒的情况下)进行；(ii)在施用前不久，由医师自己(或在医师的指导下)进行；(iii)由患者自己、例如在依次施用本发明的化合物和其他治疗剂期间进行。
[0387]
因此，本发明提供了具有式(i)或(ia)中任一种的化合物，或如前述实施例中任一项所述的化合物，或其药学上可接受的盐用于治疗或预防由抑制或调节hif2α介导的疾病或病症的用途，其中药物被制备用于与另一种治疗剂一起施用。本发明还提供了另一种治疗剂用于治疗或预防由抑制或调节hif2α介导的疾病或病症的用途，其中将药物与具有式
(i)或(ia)中任一种的化合物或其药学上可接受的盐一起施用。
[0388]
本发明还提供了具有式(i)或(ia)中任一种的化合物，或如前述实施例中任一项所述的化合物，或其药学上可接受的盐，其用于在治疗或预防由抑制或调节hif2α介导的疾病或病症的方法中使用，其中具有式(i)或(ia)的化合物，或如前述实施例中任一项所述的化合物，或其药学上可接受的盐被制备用于与另一种治疗剂一起施用。本发明还提供了另一种治疗剂，该治疗剂用于在治疗或预防由抑制或调节hif2α介导的疾病或病症的方法中使用，其中其他治疗剂被制备用于与具有式(i)或(ia)的化合物，或如前述实施例中任一项所述的化合物，或其药学上可接受的盐一起施用。本发明还提供了具有式(i)或(ia)的化合物，或如前述实施例中任一项所述的化合物，或其药学上可接受的盐，用于治疗或预防由抑制或调节hif2α介导的疾病或病症的方法，其中具有式(i)或(ia)的化合物，或如前述实施例中任一项所述的化合物，或其药学上可接受的盐与另一种治疗剂一起施用。本发明还提供了另一种治疗剂，该治疗剂用于在治疗或预防由抑制或调节hif2α介导的疾病或病症的方法中使用，其中将其他治疗剂与具有式(i)或(ia)的化合物，或如前述实施例中任一项所述的化合物，或其药学上可接受的盐一起施用。
[0389]
使用电喷雾方法、化学方法和电子轰击离子化方法在lc-ms、sfc-ms或gc-ms系统上使用一系列以下配置的仪器中获取质谱：带有沃特世sq检测器的waters acquity uplc，[m+h]
+
是指化学物质的质子化分子离子，以及[m-h]-是指化学物质的去质子化分子离子。
[0390]
nmr光谱使用bruker ultrashield
tm
400(400mhz)和bruker ultrashield
tm
600(600mhz)光谱仪运行，均以或不以四甲基硅烷作为内标。将化学位移(δ值)以四甲基硅烷的低场ppm报告，光谱分裂模式被指定为，单信号(s)、双信号(d)、三重信号(t)、四重信号(q)、多重信号、未解析的或更多重叠信号(m)、宽信号(br)。溶剂在括号中给出。
[0391]
celite：(celite公司)＝基于硅藻土的助滤剂
[0392]
相分离器：biotage-溶质相分离器-(部件号：120-1908-f，70ml，部件号：120-1909-j，150ml)
[0393]
仪器法
[0394]
微波：除非另有说明，否则所有微波反应均在biotage引发器中进行，以0-400w从磁控管在2.45ghz在robot eight/robot sixty的处理能力情况下进行辐照。
[0395]
uplc-ms方法：使用带沃特世sq检测器的沃特斯acquity uplc。
[0396]
综述
[0397][0398]
方法
[0399][0400]
uplc-ms 6
[0401][0402]
uplc-ms 7
[0403][0404]
手性hplc/sfc方法：
[0405]
c-hplc 1
[0406][0407]
c-hplc 7
[0408][0409]
c-sfc 8
[0410][0411]
c-hplc 9
[0412][0413]
c-sfc 10
[0414][0415]
c-hplc 12
[0416][0417][0418]
c-hplc 15
[0419][0420]
c-hplc 16
[0421][0422]
c-hplc 17
[0423][0424]
c-sfc 19
[0425][0426][0427]
c-sfc 20
[0428][0429]
hplc 22
[0430][0431]
c-hplc 28
[0432][0433]
c-hplc 29
[0434][0435][0436]
c-sfc 30
[0437]
[0438]
c-hplc 31
[0439][0440]
c-hplc 33
[0441][0442]
c-hplc 37
[0443][0444][0445]
c-sfc 42
[0446][0447]
c-sfc 43
[0448][0449]
c-hplc 44
[0450][0451]
c-hplc 45
[0452][0453]
c-hplc 47
[0454][0455]
c-hplc 49
[0456][0457]
c-sfc 50
[0458][0459]
制备型方法：
[0460]
正相色谱法：
[0461]
除非另有说明，否则正相色谱法是在使用硅胶的预填充柱(如下所述)上进行的，或者是根据标准快速色谱法使用玻璃柱进行的。
[0462][0463]
超临界流体色谱法sfc 1：
[0464]
在带有沃特世2998光电二极管阵列检测器和沃特世ms单四极杆检测器的沃特世制备型sfc-100-ms系统上进行纯化。
[0465][0466]
反相hplc：
[0467]
rp-hplc 1
[0468][0469]
rp-hplc 2
[0470][0471]
rp-hplc 3
[0472][0473][0474]
rp-hplc 6
[0475][0476]
固体样品：使用以下仪器和方法分析固体。
[0477][0478][0479][0480]
[0481][0482]
[0483][0484]
缩写：
[0485]
[0486]
[0487][0488]
以下实例旨在说明本发明，而不应被解释为对其的限制。温度以摄氏度给出。如果没有另外提及，所有蒸发都在减压下进行，典型地在约15mm hg与100mm hg(＝20-133毫巴)之间。使用的缩写为本领域中常规缩写。
[0489]
用于合成本发明化合物的所有起始物质、结构单元、试剂、酸、碱、脱水剂、溶剂和催化剂是可商购获得的或可通过本领域普通技术人员已知的有机合成方法制备。此外，本发明的化合物可以通过本领域普通技术人员已知的有机合成方法生产，如以下实例所示。
[0490]
最终化合物的制备
[0491]
实例1：(s)-5'-溴-8-(二氟甲氧基)-4'-氟-6-(三氟甲基)-2',3'-二氢-3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-茚]
[0492][0493]
将(s)-5'-溴-8-(二氟甲氧基)-4'-氟-6-(三氟甲基)-2',3'-二氢-3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-茚](中间体g，12.5g，21.5mmol)溶解于ar冲洗烧的瓶中的甲苯(100ml)中。逐滴添加甲苯(10ml)中的socl2(9.89ml，135mmol)，并且将rm加热至80℃，持续2小时。将rm在tbme(100ml)、etoac(100ml)、meoh(100ml)和nahco3饱和水溶液(200ml)之间分配。将水层用etoac萃取，然后将合并的有机层用盐水洗涤，经na2so4干燥并蒸发。将粗产物吸附在isolute上并通过正相色谱法(2x120g sio2柱；洗脱液：己烷:[dcm:meoh 5:1]100:0至50:50)纯化，然后通过反相色谱法(rp-hplc 1)纯化。将含有级分的产物合并，并且将accn通过蒸发除去。将剩余的主要是水性的溶液用固体nahco3处理直至碱性，然后用dcm萃取3x。将有机层合并，经na2so4干燥，并且蒸发以给出呈黄色固体的标题化合物。
[0494]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ7.97(s,1h),7.57-7.12(m,2h),7.07(d,1h),6.98(s,1h),4.27(q,2h),3.06-2.88(m,2h),2.29-2.19(m,2h)。
[0495]
lc-ms：rt＝0.91min；ms m/z[m+h]
+
453/455；uplc-ms 1。
[0496]
实例2：(s)-8-(二氟甲氧基)-4',5'-二氟-6-(三氟甲基)-2',3'-二氢-3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-茚]
[0497][0498]
将(s)-(1-氨基-4,5-二氟-2,3-二氢-1h-茚-1-基)甲醇(中间体k，504mg，2.53mmol)、2-氯-3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶(中间体a，1.38g，5.56mmol)、cui(337mg，1.77mmol)、k3po4(1.01g，5.06mmol)和dmf(1.8ml)的混合物在微波中在160℃下加热1小时。将rm冷却并且添加另外的cui(337mg，1.77mmol)，然后在160℃下再加热1小时。将甲苯(1.8ml)和socl2(922μl，12.64mmol)添加至冷却的rm中，然后将其在80℃下加热40min。然后将冷却的rm用etoac稀释，将有机相用nahco3饱和水溶液和盐水洗涤，并且将有机层蒸发，并在高真空下维持1小时。然后将残余物吸收到dcm中，并且将有机相用nahco3饱和水溶液和盐水洗涤(相分离筒)，然后蒸发。将粗产物通过正相色谱法(25g sio
2 snap柱，洗脱液：己烷:etoac 100:0至75:25)纯化，然后通过反相色谱法(rp-hplc 3，梯度：经20min，30％至70％b)纯化，并且从meoh中结晶，给出呈黄色粉末的标题化合物。
[0499]1h nmr(400mhz,meoh-d4)δ7.81(s,1h),7.00-7.08(m,1h),6.97(s,1h),6.67-7.24(m,2h),4.22-4.45(m,2h),3.08-3.19(m,1h),2.88-3.05(m,1h),2.23-2.51(m,2h)。
[0500]
lc-ms：rt＝0.71min；ms m/z[m+h]
+
393.0；uplc-ms 1。
[0501]
实例3：(s)-8'-(二氟甲氧基)-3,6'-双(三氟甲基)-5,6-二氢-3'h-螺[环戊并[c]吡啶-7，2'-咪唑并[1，2-a]吡啶]
[0502][0503]
向50ml烧瓶中装入(s)-3,6'-双(三氟甲基)-5,6-二氢-3'h-螺[环戊并[c]吡啶-7,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]-8'-醇(中间体m，50mg，133μmol)、koh(4.1m，114μl，466μmol)水溶液和dcm(6ml)。使用冰浴将rm冷却至0℃，并且逐滴添加(溴二氟甲基)三甲基硅烷(27μl，173μmol)。将rm在0℃下搅拌5min，然后用水淬灭并且用乙酸乙酯萃取。将有机层依次用盐水洗涤，经相分离器干燥并且在真空中浓缩。将粗混合物通过反相色谱法(rp hplc 3)纯化。将含有产物的级分合并并冻干以得到标题化合物。
[0504]1h-nmr(400mhz,dmso-d6):δ8.69(s,1h),8.02(s,1h),7.85(s,1h),7.52-7.15(t,1h),7.03(s,1h),4.44-4.35(q,2h),3.13-2.98(m,2h),2.31-2.28(t,2h)。
[0505]
lc-ms：rt＝2.95min；ms(m/z)＝[m+h]
+
426.2；uplc-ms 4。
[0506]
实例4：(s)-5'-溴-8-(二氟甲氧基)-4'-氟-2',3'-二氢-3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-茚]-6-甲腈
[0507][0508]
向(s)-(1-氨基-5-溴-4-氟-2,3-二氢-1h-茚-1-基)甲醇(中间体j，50.0mg，0.19mmol)在dmf(1.80ml)中的溶液中添加6-氯-5-(二氟甲氧基)烟腈(中间体b，89.0mg，0.30mmol)、k3po4(81.0mg，0.38mmol)和cubr(8.19mg，0.06mmol)，并且将rm在120℃下在微波中搅拌2.5小时。将rm在tbme和h2o之间分配，并且将各层分离。将水层用tbme洗涤，然后将合并的有机层用盐水洗涤，用na2so4干燥，过滤并蒸发。将残余物溶解于meoh中，并且通过sfc(sfc 1)纯化。将含有级分的产物合并并且蒸发，以给出呈黄色泡沫的标题化合物。
[0509]1h nmr(600mhz,dmso-d6)δ8.21(d,1h),7.58-7.53(m,1h),7.32(t,1h),7.11-7.05(m,2h),4.36-4.25(m,2h),3.07-2.92(m,2h),2.34-2.22(m,2h)。
[0510]
lc-ms：rt＝0.76min；ms m/z[m+h]
+
409.9/411.9；uplc-ms 1。
[0511]
实例5：(s)-5'-溴-4'-氟-8-(氟甲氧基)-6-(三氟甲基)-2',3'-二氢-3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-茚]
[0512][0513]
将(s)-5-溴-4-氟-3'-(3-(氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)-2,3-二氢螺[茚-1,4'-噁唑烷]-2'-酮(中间体n，40mg，62μmol)在4m naoh水溶液(0.154ml，618μmol)和etoh(2ml)中的溶液在80℃下搅拌20min。将冷却的rm用etoac稀释，并且将有机层用nahco3饱和水溶液洗涤，使用相分离器将各层分离并且浓缩。将残余物再次溶解于甲苯(2ml)中并添加socl2(6.76μl，0.093mmol)，并且将rm在80℃下加热20min。冷却后，将rm用meoh淬灭，浓缩，在etoac和nahco3饱和水溶液之间分配，将有机层干燥并浓缩。将残余物通过反相色谱法(rp-hplc 3)纯化，并且将含有级分的产物合并并蒸发以给出呈黄色固体的标题化合物。
[0514]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ7.90(s,1h),7.55(t,1h),7.07(d,1h),6.78(s,br,1h),5.89(d,2h),4.34-4.35(m,2h),3.09-2.91(m,2h),2.32-2.22(m,2h)。
[0515]
lc-ms：rt＝3.25min；ms m/z[m+h]
+
435.1/437.1；uplc-ms 4。
[0516]
实例6：(s)-8-(二氟甲氧基)-5',6-双(三氟甲基)-2',3'-二氢-3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-茚]
[0517][0518]
向(s)-5',6-双(三氟甲基)-2',3'-二氢-3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-茚]-8-醇(中间体q，138mg，369μmol)在dcm(1ml)中的溶液(用冰浴冷却)中添加koh(20％在水中，352μl，1.25mmol)和(溴二氟甲基)三甲基硅烷(82mg，396μmol)。将rm在0℃下搅拌30min，用dcm稀释，将有机相用h2o洗涤并且然后用盐水洗涤，通过穿过相分离筒分离并且浓缩。通过反相色谱法(rp-hplc 3)纯化，随后将含有级分的产物冻干，用meoh稀释并蒸发以给出呈黄色固体的标题化合物。
[0519]1h nmr(400mhz,meoh-d4)δ7.82(s,1h),7.49-7.66(m,2h),7.43(d,1h),6.99(s,1h),6.95(br t,1h),4.22-4.51(m,2h),3.08-3.22(m,1h),2.93-3.07(m,1h),2.24-2.52(m,2h)。
[0520]
lc-ms：rt＝3.66min；ms m/z[m+h]
+
424.2；uplc-ms 4。
[0521]
实例7：(s)-6'-溴-8-(二氟甲氧基)-5'-氟-6-(三氟甲基)-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]
[0522][0523]
将(s)-(1-氨基-6-溴-5-氟-1,2,3,4-四氢化萘-1-基)甲醇(中间体r，1.0g，3.61mmol)、2-氯-3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶(中间体a，1.81g，7.22mmol)、cubr(264mg，1.81mmol)、k3po4(1.53g，7.22mmol)、和dmf(12ml)的混合物在氩气下在微波中在140℃下加热7小时。将冷却的rm用nahco3饱和水溶液稀释，并用etoac萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经na2so4干燥，过滤并蒸发。将残余物吸收在isolute上并且通过正相色谱法(120g sio2柱；洗脱液：庚烷:etoac 100:0至75:25)纯化。将含有级分的产物合并，并且蒸发以给出棕色的固体，将该棕色的固体溶解于甲苯(10.5ml)中并且添加socl2(0.17ml，2.33mmol)。将rm加热至70℃，持续45min。将rm用nahco3饱和水溶液淬灭，并用etoac萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经na2so4干燥，并蒸发。将残余物吸收在isolute上并且通过正相色谱法(80g sio2柱，洗脱液：庚烷:etoac 100:0至75:25)纯化。将含有级分的产物合并，蒸发并干燥以给出呈黄色固体的标题化合物。
[0524]1h nmr(600mhz,dmso-d6)δ7.93(s,1h),7.53-7.45(m,1h),7.32(d,1h),7.07(d,1h),7.01(s,1h),4.22(d,1h),4.07(d,1h),2.83-2.75(m,1h),2.75-2.67(m,1h),1.96(s,1h),1.85(dd,2h),1.72(s,1h)。
[0525]
lc-ms：rt＝0.87min；ms m/z[m+h]
+
467.1/469.1；uplc-ms 1。
[0526]
实例8：(s)-6'-溴-8-(二氟甲氧基)-5'-氟-6-(三氟甲基)-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]-4'(3'h)-酮
[0527][0528]
将水(6ml)添加至(s)-6'-溴-8-(二氟甲氧基)-5'-氟-6-(三氟甲基)-2',3'-二氢-3h,4'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]-4'-酮(中间体s，2.66g，4.58mmol)在丙酮(60ml)中的溶液中，并且将rm冷却至0℃。添加nbs(6.52g，36.7mmol)并且将rm在0℃下搅拌5min，然后用硫代硫酸钠饱和水溶液淬灭，然后用nahco3饱和水溶液碱化并用etoac萃取2x。将合并的有机层用盐水洗涤，经na2so4干燥并蒸发。将残余物吸收在isolute上并且通过正相色谱法(80g sio2柱，洗脱液：dcm:meoh 100:0至95:5)纯化。将含有级分的产物合并并且蒸发，以给出呈橙色固体的标题化合物。
[0529]1h nmr(600mhz,dmso-d6)δ8.03-7.88(m,2h),7.54-7.23(m,2h),7.07(s,1h),4.44(d,1h),4.18(d,1h),2.77(dtq,2h),2.24(dtd,2h)。
[0530]
lc-ms：rt＝0.76min；ms m/z[m+h]
+
480.9/482.9；uplc-ms 1。
[0531]
实例9：(1's,3'r)-6'-溴-8-(二氟甲氧基)-3',5'-二氟-6-(三氟甲基)-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]-4'(3'h)-酮
[0532][0533]
在氩气下，将(s)-6'-溴-4'-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-8-(二氟甲氧基)-5'-氟-6-(三氟甲基)-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘](中间体u，137mg，228μmol)溶解于accn(2ml)中。将rm冷却至0℃并且添加(89mg，251μmol)。将rm在0℃下搅拌30min，然后在rt下搅拌1.3小时。将rm用nahco3饱和水溶液淬灭并用etoac萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经na2so4干燥并蒸发。将残余物吸收在isolute上并且通过正相色谱法(40g sio2柱，洗脱液：庚烷:etoac 100:0至75:25)纯化。将含有级分的产物合并，蒸发并经受sfc(sfc1)。将含有级分的产物蒸发以给出作为第一洗脱峰的(1's,3's)-6'-溴-8-(二氟甲氧基)-3',5'-二氟-6-(三氟甲基)-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]-4'(3'h)-酮，rt 5.86min(sfc 1)。
[0534]1h nmr(600mhz,dmso-d6)δ8.03-7.97(m,2h),7.36(t,1h),7.26(d,1h),7.13(s,1h),5.61(ddd,1h),4.69(d,1h),4.03(d,1h),2.75-2.67(m,1h),2.49-2.41(m,1h)。
[0535]
lc-ms：rt＝0.98min；ms m/z[m+h]
+
499.0/500.9；uplc-ms 1。
[0536]
获得作为第二洗脱峰的(1's,3'r)-6'-溴-8-(二氟甲氧基)-3',5'-二氟-6-(三氟甲基)-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]-4'(3'h)-酮，rt 8.32min(sfc 1)。
[0537]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.07(d,1h),7.99-7.95(m 1h),7.32(t,1h),7.28(d,1h),7.06(d,1h),5.86-5.63(m,1h),4.61(d,1h),4.28(d,1h),2.72-2.54(m,2h)。
[0538]
lc-ms：rt＝0.89min；ms m/z[m+h]
+
499.0/500.9；uplc-ms 1。
[0539]
实例10(1's,3'r,4's)-6'-溴-8-(二氟甲氧基)-3',5'-二氟-6-(三氟甲基)-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]-4'-醇
[0540][0541]
将(1's,3'r)-6'-溴-8-(二氟甲氧基)-3',5'-二氟-6-(三氟甲基)-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]-4'(3'h)-酮(实例9，60mg，118μmol)溶解于etoh(2ml)中。将rm冷却至0℃并且添加四氢硼酸钠(5.11mg，0.13mmol)。将rm在0℃下搅拌30min。将rm用2m hcl水溶液淬灭并且在rt下搅拌5min，用nahco3饱和水溶液碱化并用etoac萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经na2so4干燥并蒸发。将残余物通过sfc(sfc 1)纯化，并且将含有级分的产物蒸发以给出作为第一洗脱峰的(1's,3'r,4'r)-6'-溴-8-(二氟甲氧基)-3',5'-二氟-6-(三氟甲基)-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]-4'-醇，rt 6.06min。(sfc 3)。
[0542]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ7.93(s,1h),7.63(t,1h),7.36(t,1h),7.05(d,2h),6.07(d,1h),4.96(dt,2h),4.83(d,1h),4.39(d,1h),4.03(d,1h),2.39(d,1h),2.15(q,1h)。
[0543]
lc-ms：rt＝0.74min；ms m/z[m+h]
+
501.1/503.1；uplc-ms 1。
[0544]
获得作为第二洗脱峰的(1's,3'r,4's)-6'-溴-8-(二氟甲氧基)-3',5'-二氟-6-(三氟甲基)-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]-4'-醇，rt7.79min。(sfc 3)。
[0545]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ7.91(s,1h),7.66(t,1h),7.36(t,1h),7.14-6.95(m,2h),5.79(d,1h),5.06(s,1h),4.88(dd,1h),4.42(d,1h),3.84(d,1h),2.09(t,1h)。
[0546]
lc-ms：rt＝0.74min；ms m/z[m+h]
+
501.0/503.0；uplc-ms 1。
[0547]
实例11：(s)-6'-溴-8-(二氟甲氧基)-6-(三氟甲基)-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]
[0548][0549]
将(s)-6'-溴-6-(三氟甲基)-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]-8-醇(中间体w，305mg，764μmol)溶解于dcm(7ml)中并且冷却至0℃。将koh水溶液(20％，0.4ml，1.64mmol)添加至rm中，随后添加至(溴二氟甲基)三甲基硅烷(127μl，802μmol)中。将rm在0℃下搅拌10min，然后用dcm稀释并用盐水洗涤，经na2so4干燥并且蒸发。将残余物吸收在isolute上并且通过正相色谱法(40g sio2柱，洗脱液：庚烷:etoac 100:0至75:25)纯化。将含有级分的产物合并并且蒸发，以给出标题化合物。
[0550]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.05-7.80(br,m,1h),7.34-6.90(br,m,4h),7.32(t,1h),4.30-3.96(br,m,2h),2.79-2.72(m,2h),1.98-1.62(br,m,4h)。
[0551]
lc-ms：rt＝0.85min；ms m/z[m+h]
+
449.1/451.1；uplc-ms 1。
[0552]
实例12：(s)-8-(二氟甲氧基)-6-(三氟甲基)-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]
[0553][0554]
将(s)-6'-溴-8-(二氟甲氧基)-6-(三氟甲基)-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘](实例11，43mg，85μmol)溶解于meoh:thf(1:1)溶液中并且添加5％pd/c(20mg)。将rm在正氢气压力(0.1巴)下在rt下搅拌10.5小时。用n2冲洗后，将rm通过硅藻土垫过滤，用meoh洗涤，并且将滤液蒸发。将残余物吸收在isolute上并且通过正相色谱法(24g sio2柱，洗脱液：庚烷:etoac 100:0至75:25)纯化。将含有级分的产物合并并且蒸发，以给出呈黄色薄膜的标题化合物。
[0555]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ7.91(s,1h),7.59-7.98(m,6h),4.30-3.98(m,2h),2.77(t,2h),1.97-1.83(m,3h),1.73(dt,1h)。
[0556]
lc-ms：rt＝0.76min；ms m/z[m+h]
+
371.2；uplc-ms 1。
[0557]
实例13：(s)-6'-溴-8-(二氟甲氧基)-5'-氟-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]-6-甲腈
[0558][0559]
在ar下，向微波小瓶中装入(s)-(1-氨基-6-溴-5-氟-1,2,3,4-四氢化萘-1-基)甲醇(中间体r，1.5g，5.42mmol)、6-氯-5-(二氟甲氧基)烟腈(中间体b，2.22g，10.8mmol)、k3po4(2.3g，10.8mmol)、cubr(0.389g，2.65mmol)和dmf(15ml)。将rm在微波中在120℃下加热145min，用nahco3饱和水溶液稀释并且用etoac萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经na2so4干燥，过滤并蒸发。将残余物吸收在isolute上并且通过正相色谱法(120g sio2柱，洗脱液：庚烷:etoac 100:0至70:30)纯化。将含有级分的产物合并并且蒸发，以给出呈黄色固体的标题化合物。
[0560]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.12(s,1h),7.57-6.97(m,4h),4.35-3.92(m,2h),2.72(dt,2h),1.84(dt,4h)。
[0561]
lc-ms：rt＝0.82min；ms m/z[m+h]
+
424.2/426.2；uplc-ms 1。
[0562]
实例14：(s)-6'-溴-8-(二氟甲氧基)-4',4',5'-三氟-6-(三氟甲基)-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]
[0563][0564]
将nis(194mg，861μmol)在ar下悬浮于dcm(3ml)中并且冷却至-78℃。向rm中逐滴添加吡啶氢氟化物(107μl，861μmol；70％)，随后逐滴添加(s)-6'-溴-8-(二氟甲氧基)-5'-氟-6-(三氟甲基)-2',3'-二氢-3h-二螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘-4',2
”‑
[1,3]二硫环戊烷](中间体s，120mg，215μmol)在dcm(5ml)中的溶液。将rm在-78℃下搅拌4.5小时，然后用etoac稀释并用硫代硫酸钠饱和水溶液淬灭，并且用etoac萃取2x。将合并的有机层用盐水洗涤，经na2so4干燥，过滤并蒸发。将残余物吸收在isolute上并且通过正相色谱法(40g sio2柱；洗脱液：庚烷:etoac 100:0至50:50)纯化。经含有级分的产物合并并蒸发，并且进一步通过sfc(sfc 1)纯化，并且将含有级分的产物蒸发并干燥以给出标题化合物。
[0565]1h nmr(600mhz,dmso-d6)δ7.97(s,1h),7.87(t,1h),7.49-7.21(m,2h),7.06(s,1h),4.36(d,1h),4.21(d,1h),2.58(d,1h),2.38(s,1h),2.09(s,1h),2.03(t,1h)。
[0566]
lc-ms：rt＝0.94min；ms m/z[m+h]
+
503.0/505.0；uplc-ms 1。
[0567]
实例15：(s)-8-(二氟甲氧基)-4',4',5'-三氟-6-(三氟甲基)-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]-6'-甲腈
[0568][0569]
在ar下，向微波小瓶中装入(s)-6'-溴-8-(二氟甲氧基)-4',4',5'-三氟-6-(三氟甲基)-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘](实例14，160mg，312μmol)、xphos pd g3(26.4mg，31μmol)、xphos(30.3mg，62μmol)、六氰基高铁酸钾(ii)(65.8mg，156μmol)、乙酸钾(6.12mg，62μmol)和1,4-二噁烷(1.5ml)和水(1.5ml)。将rm在微波中在100℃下加热1.5小时，用nahco3饱和水溶液稀释并且用etoac萃取2x。将合并的有机层用盐水洗涤，经na2so4干燥，过滤并蒸发。将残余物用thf稀释并添加硫醇(0.212mmol，150mg，粒度：40-63μm，载量1.41mmol/g，silicycle)，并且将rm在40℃下搅拌1小时。将rm过滤，用thf洗涤并且将滤液蒸发。将残余物吸收在isolute上并且通过正相色谱法(sio2柱；洗脱液：庚烷:etoac 100:0至75:25)纯化。将含有级分的产物合并，并且蒸发。将残余物用己烷研磨，过滤，并且干燥以给出呈黄色固体的标题化合物。
[0570]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.08(t,1h),7.99(s,1h),7.56-7.13(m,2h),7.08(s,1h),4.38(d,1h),4.25(d,1h),2.60(s,2h),2.13(d,1h),2.05(d,1h)。
[0571]
lc-ms：rt＝0.87min；ms m/z[m+h]
+
450.1；uplc-ms 1。
[0572]
实例16：(s)-6'-溴-8-氯-5'-氟-6-(三氟甲基)-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]
[0573][0574]
在ar下，将(s)-(6-溴-1-((3-氯-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)氨基)-5-氟-1,2,3,4-四氢化萘-1-基)甲醇(中间体p1，215mg，427μmol)溶解于甲苯(2ml)中并且添加socl2(0.05ml，685μmol)。将rm加热到80℃，持续1小时，冷却，然后用nahco3饱和水溶液淬灭并且用etoac萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经na2so4干燥，过滤并蒸发。将残余物吸收在isolute上并且通过正相色谱法(40g sio2柱；洗脱液：庚烷:etoac100:0至70:30)纯化。将含有级分的产物合并，并且蒸发。将残余物用几滴etoac溶解于et2o中，然后添加庚烷。将所得溶液保存在冰箱中在4℃持续18小时。将沉淀的杂质通过过滤除去。将母液蒸发并且将剩余的固体干燥以给出呈黄色泡沫的标题化合物。
[0575]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.00(s,1h),7.57-7.39(m,2h),7.05(d,1h),4.20(dd,2h),2.86-2.63(m,2h),2.05-1.92(m,1h),1.92-1.77(m,2h),1.77-1.63(m,1h)。
[0576]
lc-ms：rt＝0.82min；ms m/z[m+h]
+
435.1/437.1；uplc-ms 1。
[0577]
实例17：(s)-6'-溴-8-(二氟甲氧基)-3',3',5'-三氟-6-(三氟甲基)-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]-4'(3'h)-酮
[0578][0579]
在ar下，将(s)-6'-溴-4'-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-8-(二氟甲氧基)-3',5'-二氟-6-(三氟甲基)-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘](中间体x，177mg，274μmol)溶解于accn(5ml)中。将rm冷却至0℃并且添加(126mg，356μmol)。将rm在rt下搅拌5小时，然后用nahco3饱和水溶液淬灭并且用etoac萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经na2so4干燥，过滤并蒸发。将残余物吸收在isolute上并且通过正相色谱法(24g sio2柱；洗脱液：庚烷:etoac 100:0至75:25)纯化。将含有级分的产物合并并蒸发，并且干燥以给出标题化合物。
[0580]1h nmr(600mhz,dmso-d6)δ8.11(dd,1h),8.04(s,1h),7.49-7.21(m,2h),7.15(d,1h),4.54(d,1h),4.21(d,1h),3.10-2.95(m,2h)。
[0581]
lc-ms：rt＝1.08min，宽峰；ms m/z[m+h]
+
516.9/518.9；uplc-ms 1。
[0582]
实例18和19：(1's,4's)-6'-溴-8-(二氟甲氧基)-3',3',5'-三氟-6-(三氟甲基)-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]-4'-醇和(1's,4'r)-6'-溴-8-(二氟甲氧基)-3',3',5'-三氟-6-(三氟甲基)-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]-4'-醇
cellulose-5，5μm 250x30mm，25℃；洗脱液：正庚烷(用meoh饱和)/iproh 8:2；检测:uv 230nm；流速20ml/min；进样体积1.0ml)分离以给出作为第二洗脱峰的(1's,3'r)-8-(二氟甲氧基)-3',5'-二氟-6-(三氟甲基)-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]-4'(3'h)-酮，rt 8.8min(c-hplc-18)。
[0593]1h nmr(600mhz,dmso-d6)δ7.99(s,1h),7.71(m,1h),7.57-7.22(m,3h),7.12(s,1h),5.61(m,1h),4.69(d,1h),4.03(d,1h),2.71(m,1h),2.47-2.38(m,1h)。
[0594]
lc-ms：rt＝0.68min；ms m/z[m+h]
+
421.0；uplc-ms 1。
[0595]
获得作为第一洗脱峰的(1's,3's)-8-(二氟甲氧基)-3',5'-二氟-6-(三氟甲基)-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]-4'(3'h)-酮，rt 4.9min(c-hplc-18)。
[0596]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.08(s,1h),7.70(td,1h),7.58-7.17(m,3h),7.06(s,1h),5.69(m,1h),4.64(d,1h),4.29(d,1h),2h由于溶剂峰未指定。
[0597]
lc-ms：rt＝0.77min；ms m/z[m+h]
+
421.0；uplc-ms 1。
[0598]
实例22：(s)-8-(二氟甲氧基)-5'-氟-6-(三氟甲基)-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]-6'-甲腈
[0599][0600]
在ar下，向微波小瓶中装入(s)-6'-溴-8-(二氟甲氧基)-5'-氟-6-(三氟甲基)-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘](实例7，245mg，524μmol)、xphos pd g3(44.4mg，52μmol)、xphos(51mg，105μmol)、六氰基高铁酸钾(ii)(111mg，262μmol)、乙酸钾(6.4mg，66μmol)、1,4-二噁烷(2ml)和水(1ml)。将rm在微波中在100℃下加热1.5小时。将rm用nahco3饱和水溶液稀释并用etoac萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经na2so4干燥，过滤并蒸发。将残余物吸收在isolute上并且通过正相色谱法(80g sio2柱；洗脱液：庚烷:etoac 100:0至75:25)纯化。将含有级分的产物合并，并且蒸发。将残余物溶解于meoh(4ml)中并且通过stratosphere spe pl-硫醇筒(500mg/6ml；安捷伦科技公司(agilent technologies))过滤并且将滤液蒸发。将残余物通过反相色谱法(rp-hplc 2)再次纯化。将含有级分的产物合并，并且在dcm和nahco3饱和水溶液之间分配。将合并的有机层经na2so4干燥，过滤并且蒸发以给出呈黄色泡沫的标题化合物。
[0601]1h nmr(600mhz,dmso-d6,用tfa添加剂)δ8.76(s,1h),8.22(d,1h),7.90(dd,1h),7.77(d,1h),7.51(t,1h),4.93(d,1h),4.71(d,1h),2.87-2.79(m,1h),2.78-2.71(m,1h),2.35-2.28(m,1h),2.09-1.98(m,2h),1.86-1.76(m,1h)。
[0602]
lc-ms：rt＝0.77min；ms m/z[m+h]
+
414.2；uplc-ms 1。
[0603]
实例23：(s)-8-(二氟甲氧基)-4',4',5'-三氟-6-(三氟甲基)-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]
[0604][0605]
将nis(261mg，1.16mmol)在ar下悬浮于dcm(5ml)中并且冷却至-78℃。向rm中逐滴添加吡啶氢氟化物(0.144ml，1.16mmol)，随后逐滴添加(s)-8-(二氟甲氧基)-5'-氟-6-(三氟甲基)-2',3'-二氢-3h-二螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘-4',2
”‑
[1,3]二硫环戊烷](中间体y，140mg，0.29mmol)在dcm(10ml)中的溶液。将rm在78℃下搅拌4小时。将rm用etoac和硫代硫酸钠饱和水溶液稀释并用etoac萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经na2so4干燥，过滤并蒸发。将残余物吸收在isolute上并且通过正相色谱法(40g sio2柱；洗脱液：庚烷:etoac 100:0至80:20)纯化。将含有级分的产物合并并蒸发，并且干燥以给出呈黄色固体的标题化合物。
[0606]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ7.96(s,1h),7.62-7.13(m,4h),7.04(s,1h),4.36(d,1h),4.22(d,1h),2.64-2.27(m,2h),2.10 1.95(m,2h)。
[0607]
lc-ms：rt＝0.78min；ms m/z[m+h]
+
425.0；uplc-ms 1。
[0608]
实例24：(2s,4's)-6'-溴-8-(二氟甲氧基)-4',5'-二氟-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]-6-甲腈和(2s,4'r)-6'-溴-8-(二氟甲氧基)-4',5'-二氟-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]-6-甲腈
[0609][0610]
在ar下，将dast(6.5μl，48μmol)添加至dcm(0.5ml)(冷却至-78℃)中的(1's)-6'-溴-8-(二氟甲氧基)-5'-氟-4'-羟基-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]-6-甲腈(中间体ac和ad，11mg，24μmol)中。将rm在rt下搅拌1小时，然后添加另外的dast(6.5μl，48μmol)，并且将rm在rt下再搅拌45min。将rm用nahco3饱和水溶液淬灭并用etoac萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经na2so4干燥，过滤并蒸发。将残余物通过sfc(sfc 1)纯化，并且将含有级分的产物蒸发以给出具有对hif2 pas-b结构域的最高亲合力的第一洗脱的非对映异构体，其数据包括在活性表中。
[0611]
lc-ms：rt＝0.82min；ms m/z[m+h]
+
442.0/444.0；uplc-ms 1。
[0612]
将第二洗脱的非对映异构体吸收在isolute上并且通过正相色谱法(12g sio2柱；洗脱液：庚烷:etoac 100:0至30:70)纯化。将含有级分的产物合并，并且蒸发。
[0613]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.13(d,1h),7.79-7.72(m,1h),7.31(t,1h),7.14-7.09(m,2h),5.86(d,1h),4.33(d,1h),3.85(d,1h),2.26-1.95(m,3h),1.88-1.80(m,1h)。
[0614]
lc-ms：rt＝0.78min；ms m/z[m+h]
+
442.0/444.0；uplc-ms 1。
[0615]
实例25：(1's,4's)-8-(二氟甲氧基)-4',5'-二氟-6-(三氟甲基)-3',4'-二氢-2'
h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]-6'-甲腈
[0616][0617]
在ar下在，将dast(0.02ml，151μmol)添加至来自dcm(2ml)(冷却至-78℃)中的(s)-8-(二氟甲氧基)-5'-氟-4'-氧代-6-(三氟甲基)-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]-6'-甲腈(中间体ae/af，30mg，68μmol)的还原的第一洗脱的非对映立体异构体中。将rm在0℃下搅拌2.5小时，然后用nahco3饱和水溶液淬灭并且用etoac萃取。将含有级分的产物合并并蒸发，并且将非对映立体异构体通过sfc(sfc-1)分离以给出呈黄色固体的作为第一洗脱峰的标题化合物，rt＝5.7min。
[0618]1h nmr(600mhz,dmso-d6)δ7.99-7.91(m,2h),7.44(d,1h),7.31(t,1h),7.07(d,1h),5.89(dd,1h),4.36(d,1h),3.88(d,1h),2.31-2.20(m,1h),2.18-1.98(m,2h),1.94-1.87(m,1h)。
[0619]
lc-ms：rt＝0.79min；ms m/z[m+h]
+
432.1；uplc-ms 1。
[0620]
获得呈黄色固体的作为第二洗脱峰的(1's,4'r)-8-(二氟甲氧基)-4',5'-二氟-6-(三氟甲基)-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]-6'-甲腈，rt＝8.1min。
[0621]1h nmr(600mhz,dmso-d6)δ8.02-7.99(m,1h),7.97-7.93(m,1h),7.48(d,1h),7.29(t,1h),7.02(d,1h),5.96(d,1h),4.53(d,1h),4.26(d,1h),2.46-2.32(m,1h),2.17-2.08(m,2h),1.94-1.89(m,1h)。
[0622]
lc-ms：rt＝0.74min；ms m/z[m+h]
+
432.1；uplc-ms 1。
[0623]
实例26：(s)-8-(二氟甲氧基)-5'-氟-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]-6-甲腈
[0624][0625]
向(s)-(1-氨基-5-氟-1,2,3,4-四氢化萘-1-基)甲醇(中间体aa，700mg，3.59mmol)、6-氯-5-(二氟甲氧基)烟腈(中间体b，1.47g，7.17mmol)、碘化铜(205mg，1.08mmol)和磷酸钾(1.52g，7.17mmol)在dmf(18ml)中的溶液在140℃下在微波中加热1.5小时。将rm倒入nahco3饱和水溶液中并且用etoac萃取3x。将合并的有机萃取物用2x水洗涤，干燥(相分离器)并蒸发。将粗材料溶解于thf(20ml)中，添加硫醇(粒度：40-63μm，载量1.35mmol/g，6.45mmol，4.78g)并且将混合物在40℃下涡旋1小时。将混合物过滤，并且将滤液蒸发。将粗残余物通过正相快速色谱法(120g sio2柱，洗脱液：etoac:c-己烷0:100至25:75)纯化以给出呈黄色泡沫的标题化合物。
[0626]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.14(d,1h),7.30(t,1h),7.22(m,1h),7.07-7.03(m,2h),7.06(d,1h),4.22(d,1h),4.09(d,1h),2.77-2.72(m,1h),2.69-2.64(m,1h),1.97(m,1h),1.90-1.82(m,2h),1.73(m,1h)。
[0627]
lc-ms：rt＝2.51min；ms m/z[m+h]
+
346.2；uplc-ms 6。
[0628]
实例27：d
2-(s)-8-(二氟甲氧基)-5'-氟-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]-6-甲腈
[0629][0630]
向(s)-(1-氨基-5-氟-1,2,3,4-四氢化萘-1-基-4,4-d2)甲醇(中间体ag，22mg，0.10mmol)、6-氯-5-(二氟甲氧基)烟腈(中间体b，39.7mg，0.19mmol)、碘化铜(5.54mg，0.03mmol)和磷酸钾(41.2mg，0.19mmol)在dmf(0.5ml)中的溶液在140℃下在微波中加热1.5小时。将rm倒入nahco3饱和水溶液中并且用3x etoac萃取。将合并的有机萃取物用水洗涤2x，干燥(相分离器)并蒸发。将粗残余物溶解于thf(2ml)中，添加硫醇(粒度：40-63μm，载量1.35mmol/g，0.09mmol，64mg)并且将混合物在40℃下涡旋1小时。将混合物过滤，用thf洗涤并且将滤液蒸发。将粗产物通过反相制备型hplc(rp-hplc 2)纯化，将含有级分的产物用nahco3饱和水溶液中和，用dcm萃取并且蒸发。将残余物再次通过反相制备型hplc(rp-hplc 3)纯化，并且将含有级分的产物用dcm萃取并蒸发以给出呈黄色泡沫的标题化合物。
[0631]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.14(s,1h),7.30(t,1h),7.23(m,1h),7.09-7.02(m,3h),4.24(d,1h),4.10(d,1h),2.00-1.94(m,1h),1.91-1.82(m,2h),1.76-1.68(m,1h)。
[0632]
lc-ms：rt＝2.52min；ms m/z[m+h]
+
348.2；uplc-ms 6。
[0633]
实例28：(s)-8-(二氟甲氧基)-5'-氟-6-(三氟甲基)-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]
[0634][0635]
在ar下，将socl2(0.07ml，0.959mmol)添加至溶解于甲苯(6ml)中的(s)-(1-((3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)氨基)-5-氟-1,2,3,4-四氢化萘-1-基)甲醇(中间体ck，290mg，607μmol)中。将rm加热到80℃，持续45min，冷却，然后用nahco3饱和水溶液淬灭并且用etoac萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经na2so4干燥，过滤并蒸发。将残余物溶解于meoh中并且通过stratosphere spe pl-硫醇筒(500mg/6ml；安捷伦科技公司)过滤并且将滤液蒸发。将残余物吸收在isolute上并且通过正相色谱法(80g sio2柱；洗脱液：庚烷:etoac100:0至80:20)纯化。将含有级分的产物合并并蒸发，并且干燥以给出标题化合
物。
[0636]1h nmr(600mhz,dmso-d6)δ7.92(s,1h),7.37(t,1h),7.20(dt,1h),7.08(dd,1h),7.03(ddd,1h),6.99(d,1h),4.21(d,1h),4.07(d,1h),2.78-2.70(m,1h),2.70-2.59(m,1h),2.00-1.92(m,1h),1.91-1.80(m,2h),1.76-1.65(m,1h)。
[0637]
lc-ms：rt＝0.78min；ms m/z[m+h]
+
389.2；uplc-ms 1。
[0638]
实例29：(s)-5',6',8-三氟-6-(三氟甲基)-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]
[0639][0640]
向(s)-(5,6-二氟-1-((3-氟-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)氨基)-1,2,3,4-四氢化萘-1-基)甲醇(中间体o1，90mg，167μmol)在甲苯(5ml)中的溶液中添加socl2(122μl，1.67mmol)。将小瓶密封并且在80℃下搅拌5min，冷却至rt并用etoac稀释。将该混合物用na2so4饱和水溶液洗涤2x。将水层用etoac萃取，将合并的有机相用盐水洗涤，经na2so4干燥，过滤并在真空中浓缩。将残余物通过正相色谱法(硅胶，洗脱液：庚烷:meoh中的含有1％7m nh3的etoac)纯化以得到呈浅棕色固体的标题化合物。
[0641]1h nmr(600mhz,dmso-d6)δ7.90(s,1h),7.32-7.18(m,2h),7.13 7.09(m,1h),4.22(d,1h),4.09(d,1h),2.82-2.69(m,2h),2.01-1.94(m,1h),1.93-1.80(m,2h),1.77-1.70(m,1h)。
[0642]
lc-ms：rt＝0.74min；ms m/z[m+h]
+
359.2；uplc-ms 1。
[0643]
实例30：(s)-1'-氯-8',8'-二氟-8-甲氧基-6-(三氟甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉]
[0644][0645]
在rt下在氩气气氛下，将meoh(41μl，1.006mmol)添加至在1,4-二噁烷(2ml)中的混合物(s)-1'-氯-8,8',8'-三氟-6-(三氟甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉](中间体ah，80mg，201μmol)和naotbu(26mg，262μmol)。将rm在50℃下加热18小时，冷却并且用nahco3饱和水溶液稀释。将混合物用dcm萃取3x，将合并的有机层通过穿过相分离器干燥并且浓缩。将残余物通过正相柱色谱法(硅胶，洗脱液：庚烷:etoac 100:0至0:100)纯化，然后通过手性sfc(柱：chiralpak ic，5μm，250x30mm；洗脱液：40％iproh+0.1％nh4oh水溶液；温度：40℃；流速：80ml/min；压力：120巴)纯化以给出呈白色粉末的标题化合物。
[0646]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.47(d,1h),7.69(s,1h),7.38(d,1h),6.50(s,1h),4.31(q,2h),3.77(s,3h),2.69-2.31(m,2h),2.18-1.91(m,2h)。
[0647]
lc-ms：rt＝0.64min；ms m/z[m+h]
+
406.1/408.0；uplc-ms 1。
[0648]
实例31：(s)-1'-氯-8-(二氟甲氧基)-8',8'-二氟-6-(三氟甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉]
[0649][0650]
在rt下在氩气气氛下，将socl2(3.87ml，53.1mmol)逐滴添加至(s)-(1-氯-5-((3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)氨基)-8,8-二氟-5,6,7,8-四氢异喹啉-5-基)甲醇(中间体aj，12.84g，26.5mmol)在甲苯(160ml)中的溶液中。然后将rm在80℃下加热30min，冷却至0℃，添加meoh并且蒸发。将残余物在etoac和nahco3饱和水溶液之间分配，用etoac萃取，将合并的有机层经na2so4干燥并且浓缩。将残余物通过正相色谱法(330g硅胶，洗脱液：庚烷:etoac 100:0至70:30)纯化并且将含有级分的产物蒸发，并吸收到最小体积的meoh中并且在rt下静置18小时。在真空下干燥后，通过过滤获得呈黄色固体的标题化合物。在正相色谱法和从meoh中结晶后，可以从滤液中获得第二批标题化合物。
[0651]1h nmr(600mhz,dmso-d6)δ8.49(d,1h),8.00(s,1h),7.51(d,1h),7.33(t,1h),7.09(d,1h),4.37(d,1h),4.27(d,1h),2.68-2.54(m,1h),2.47-2.33(m,1h),2.17-2.10(m,1h),2.06-1.97(m,1h)。
[0652]
lc-ms：rt＝0.80min；ms m/z[m+h]
+
442.4/444.4；uplc-ms 1。
[0653]
通过用适当的抗衡离子沉淀，从上述(s)-1'-氯-8-(二氟甲氧基)-8',8'-二氟-6-(三氟甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉]的游离碱形式制备以下盐。
[0654]
具有1:1化学计量比的富马酸盐(mw 557.77)，mp(dsc)171.9以及179.8℃(起始)：将游离碱(76.0mg，172μmol)置于2ml玻璃小瓶中并添加iproh(500μl)，并且将黄色悬浮液在55℃下搅拌。在55℃下搅拌4小时后，添加富马酸(19.95mg，172μmol)，rm保持为浆液。停止加热并且将浆液在rt下搅拌18小时，将固体通过离心分离，并且将粉末在真空下在40℃下干燥以给出标题化合物。
[0655]
具有1:1化学计量比的硫酸盐(mw 539.78)，mp(dsc)135.8℃(起始)：将游离碱(56.67mg，128μmol)置于2ml玻璃小瓶中并添加iproh(400μl)，并且将黄色悬浮液在rt下搅拌。然后添加h2so4水溶液(1n，128μl)，在大约10min内将rm转换为灰白色浆液。将浆液在rt下搅拌18小时，将固体通过离心分离，并且将粉末在真空下在40℃下干燥18小时以给出标题化合物。
[0656]
实例32：(s)-8-(二氟甲氧基)-8',8'-二氟-1'-甲基-6-(三氟甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉]
[0657][0658]
将(s)-1'-氯-8-(二氟甲氧基)-8',8'-二氟-6-(三氟甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉](实例31，50mg，112μmol)、三甲基环三硼氧烷(13μl，90μmol)、cs2co3(73mg，224μmol)和pdcl2(dppf).ch2cl2复合物(9.2mg，11μmol)在1,4-二噁烷(0.9ml)和水(0.1ml)中的混合物在氩气气氛下在100℃下加热20小时，然后在120℃下加热4小时。将冷却的rm在nahco3饱和水溶液和dcm之间分配，用dcm萃取2x，将合并的有机层通过穿过相分离筒干燥并且蒸发。将残余物吸收到meoh中并且用biotage spe-pl硫醇树脂涡旋，然后通过sfc纯化(用princeton 4-ep 60a 5μm 250x30mm柱的sfc 1，洗脱液：2％-22％meoh)以给出作为第一洗脱峰的(s)-8-(二氟甲氧基)-8',8'-二氟-1'-甲基-6-(三氟甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉]，rt 6.73min。
[0659]1h nmr(600mhz,dmso-d6)δ8.51(d,1h),7.97(m,1h),7.34(t,1h),7.26(d,1h),7.06(s,1h),4.36(d,1h),4.21(d,1h),2.67(s,3h),2.61-2.36(m,2h),2.11-1.98(m,2h)。
[0660]
lc-ms：rt＝0.68min；ms m/z[m+h]
+
422.1；uplc-ms 1。
[0661]
获得作为第二洗脱峰的(s)-8-(二氟甲氧基)-8',8'-二氟-6-(三氟甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉]，rt 7.36min。
[0662]1h nmr(400mhz,氯仿-d)δ8.97(s,1h),8.72(d,1h),7.47(s,1h),7.28-7.22(m,1h),7.06(s,1h),7.03(t,1h),4.39(d,1h),4.27(d,1h),2.78-2.69(m,1h),2.51-2.27(m,2h),2.25-2.19(m,1h)。
[0663]
lc-ms：rt＝0.64min；ms m/z[m+h]
+
408.1；uplc-ms 1。
[0664]
通过以下替代程序也可以合成实例32：
[0665]
在n2气氛下，将三甲基环三硼氧烷(5.1g，40.7mmol)在iproac(10ml)中的溶液添加至(s)-1'-氯-8-(二氟甲氧基)-8',8'-二氟-6-(三氟甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉](实例31，18.0g，40.7mmol)和cs2co3(26.6g，81.5mmol)在iproac(290ml)中的混合物中。然后在n2保护下添加pdcl2(dppf)(298mg，0.4mmol)并且将混合物用n2吹扫10min。将反应器转移到预热的油浴中并且在100℃下搅拌24小时。在n2保护下，添加另外的pdcl2(dppf)(298mg，0.4mmol)和三甲基环三硼氧烷(1.4g，11.2mmol)，并且将rm再次回流17小时。将冷却的rm过滤并用iproac(150ml)洗涤，然后将滤液用水(250ml)洗涤。将分离的水相用iproac(200ml)萃取。将合并的有机相用10％nacl水溶液(200ml)洗涤，经无水mgso4干燥，过滤并且浓缩。将残余物通过正相色谱法(200-300目硅胶，洗脱液：庚烷:etoac77:34至50:50)纯化以给出灰白色固体。添加mtbe/庚烷1:5(240ml)并且将混合物在无真空下在旋转蒸发仪上搅拌并且浴温为60℃。溶解后变成亮红色/黄色溶液，固体从混合物中沉淀，允许将混合物冷却至rt。将固体通过过滤收集，并且将庚烷(120ml)添加至母液中以给出第二批材料。从mtbe:庚烷1:5中进一步重结晶后获得标题化合物并且将其干燥。
[0666]
通过接种并通过用适当的抗衡离子沉淀，从上述(s)-8-(二氟甲氧基)-8',8'-二
氟-1'-甲基-6-(三氟甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉]的游离碱形式制备以下结晶形式和盐。
[0667]
结晶变型a mp(dsc)129.9℃(起始)：将游离碱(3.13g，7.06mmol，测定95.5％)和iproh(3ml)添加至100ml容器中并且将混合物在以250rpm机械搅拌下加热至65℃(夹套温度)。将正庚烷(9ml)经1小时添加至混合物中，随后在65℃下添加变型a的晶种(30mg)。所得混合物变浑浊，并且将其在65℃下维持约1小时。经10小时添加另外的正庚烷(51ml)，将温度在65℃下再维持1小时，然后将混合物经4小时冷却至4℃。在4℃下浆液维持2.5小时后，在25℃下使用玻璃过滤器将固体通过过滤收集，并且用iproh和正庚烷的混合物(v/v＝1:20，4.2ml)洗涤。将固体在真空下在60℃下干燥3.5小时，以给出呈粉末的标题化合物(2.46g)。
[0668]
具有1:1化学计量比的富马酸盐(mw 537.37)，mp(dsc)172.3(起始)：将游离碱(2.0g)置于100ml easymax反应器中，并且添加iproh和庚烷的混合物(80:20，40ml)。添加富马酸(1.73mg)，并且将rm加热至50℃，然后在50℃下维持18-24小时。将混合物经4小时冷却至25℃，然后在25℃下搅拌4-6小时。在25℃下使用玻璃过滤器将所得固体通过过滤收集，并且用iproh和正庚烷的混合物(4:1，10ml)洗涤。将固体在真空下在40℃下干燥12小时，以给出呈灰白色粉末的标题化合物。
[0669]
实例33：(s)-8-(二氟甲氧基)-8',8'-二氟-1'-(甲基-d3)-6-(三氟甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉]
[0670][0671]
在氩气下，将2-(甲基-d3)-1,3,2-二氧代硼杂(中间体av，127mg，1.11mmol)添加至(s)-1'-氯-8-(二氟甲氧基)-8',8'-二氟-6-(三氟甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉](实例31，200mg，444μmol)、k2co3(153mg，1.11mmol)和四(三苯基膦)钯(51mg，44μmol)在1,4-二噁烷(1.5ml)、thf(1.5ml)和水(1.5ml)中的混合物中。将rm在90℃下搅拌48小时并添加另外的d
3-2-(甲基-d3)-1,3,2-二氧代硼杂(23mg，222μmol)、k2co3(31mg，222μmol)和四(三苯基膦)钯(26mg，22μmol)，并且将rm在90℃下再搅拌5小时。将冷却的rm在etoac和nahco3饱和水溶液之间分配，将水层用etoac再次萃取，将合并的有机层用盐水洗涤，通过穿过相分离器干燥并且蒸发。将残余物溶解于meoh中并用2.0g的spe-pl硫醇树脂从biotage中处理，并且在40℃下涡旋1小时然后过滤，用meoh洗涤，并且将滤液蒸发。将粗产物吸收在isolute上并且通过正相色谱法(40g sio2筒，洗脱液：庚烷/etoac 10:90至50:50)纯化，然后通过手性sfc：(柱：chiralcel od-h，250x30mm i.d.，5μm，40℃；洗脱液：co2/iproh(+0.1％nh3)94:6；流速：80ml/min；检测：dad 190-400nm)纯化以给出作为第一洗脱峰的标题化合物(rt 10.5min)。(s)-8-(二氟甲氧基)-8',8'-二氟-6-(三氟甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉]在rt为16.7min洗脱。将所希望的产物(360mg)溶解于etoh(1.5ml)中，并且添加h2o(1.5ml)，随后添加(s)-8-(二氟甲氧基)-8',8'-二氟-1'-甲基-6-(三氟甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]
吡啶-2,5'-异喹啉]的晶种。将所得悬浮液超声处理5min并且将固体通过过滤收集，用h2o洗涤，然后干燥，以给出呈黄色晶体的标题化合物。
[0672]
通过以下替代程序也可以合成实例33：
[0673]
在手套箱中，向圆底烧瓶中装入ni(甘醇二甲醚)br2(6.46g，20.9mmol)、1,10-菲咯啉(7.54g，41.8mmol)和dmf(300ml)。允许反应混合物在手套箱中在室温下搅拌30min以形成深绿色悬浮液。向上述混合物中添加co(salen)(3.40g，10.5mmol)，并且将混合物在手套箱中搅拌10min以形成深棕色溶液。平行地，向第二圆底烧瓶中装入(s)-1'-氯-8-(二氟甲氧基)-8',8'-二氟-6-(三氟甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉](实例31，61.6g，139.5mmol)、mn(38.31g，697.3mmol)、dmf(300ml)和tsocd3(84.0g，94.3％测定，418.6mmol)。在手套箱中，将含有ni催化剂的第一溶液转移到第二反应混合物中，将烧瓶用橡胶塞密封并且在40-45℃下在n2下搅拌16小时。然后将反应混合物冷却至室温，将固体材料通过过滤除去，用etoh洗涤。将滤液合并并且在50℃下浓缩，然后伴随剧烈的搅拌添加etoac(1.0l)。形成沉淀物并且将悬浮液通过硅胶垫(100g)过滤，用etoac(1.5l)洗涤。将滤液浓缩以形成深绿色油状物，然后通过具有庚烷/etoac＝2:1(3l)的硅胶垫(200g)再次过滤。将滤液浓缩并且添加ipa(60ml)和水(300ml)。通过过滤获得呈浅黄色固体的粗产物。将粗产物用ipa(240ml)和h2o(480ml)浆化，过滤并在真空中在40℃下干燥以给出呈黄色固体的标题化合物。
[0674]1h nmr(600mhz,dmso-d6)δ8.52(d,1h),7.98(d,1h),7.49-7.19(m,2h),7.08(d,1h),4.29(dd,2h),2.58(dd,1h),2.43-2.39(m,1h),2.17-1.95(m,2h)。
[0675]
lc-ms：rt＝0.59min；ms m/z[m+h]
+
425.2；uplc-ms 7。
[0676]
实例34：(s)-8-(二氟甲氧基)-8',8'-二氟-1'-甲氧基-6-(三氟甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉]
[0677][0678]
将(s)-1'-氯-8-(二氟甲氧基)-8',8'-二氟-6-(三氟甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉](实例31，1.99g，4.37mmol)通过正相色谱法(220g redisep gold柱，洗脱液：c-己烷/etoac 100-0至73-27)纯化，在所希望的产物之前洗脱次要组分。将次要组分通过正相色谱法(4g redisep gold柱，洗脱液：c-己烷:etoac 100:0至81:19)再次纯化给出呈黄色固体的标题化合物。
[0679]1h nmr(600mhz,dmso-d6)δ8.24(d,1h),7.97(s,1h),7.34(t,1h),7.07(s,1h),6.98(d,1h),4.34(d,1h),4.20(d,1h),3.92(s,3h),2.60-2.49(m,1h),2.37-2.26(m,1h),2.10-1.94(m,2h)。
[0680]
lc-ms：rt＝3.11min；ms m/z[m+h]
+
438.0；uplc-ms 6。
[0681]
实例35：(s)-8-(二氟甲氧基)-6'-氟-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]-6-甲腈
[0682][0683]
将(s)-(1-氨基-6-氟-1,2,3,4-四氢化萘-1-基)甲醇游离碱(中间体ao，100mg，461μmol)、6-氯-5-(二氟甲氧基)烟腈(中间体b，277mg，1.01mmol)、k3po4(196mg，922μmol)和cui(62mg，323μmol)在dmf(3ml)中的混合物在微波中在氩气气氛下在160℃下加热30min。将rm在tbme(20ml)和h2o(20ml)之间分配，将水层用tbme萃取，并且将合并的有机层用盐水洗涤，经na2so4干燥并蒸发。将残余物通过正相色谱法(12g sio2柱，洗脱液：己烷:tbme从0％-50％)纯化，然后通过反相色谱法(rp-hplc 1)纯化。将含有级分的产物合并，将accn在真空下除去，将主要是水性的相用na2co3碱化并且用dcm萃取3x，将合并的有机层经na2so4干燥，并且蒸发以给出呈黄色固体的标题化合物。
[0684]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.10(s,1h),7.27(t,1h),7.25-7.20(m,1h),7.03-6.89(m,3h),4.19(d,1h),4.02(d,1h),2.79-2.73(m,2h),1.95-1.62(m,4h)。
[0685]
lc-ms：rt＝0.62min；ms m/z[m+h]
+
346.1；uplc-ms 1。
[0686]
手性hplc(c-hplc 9)表明样品具有72％的ee：标题化合物在rt＝17.8分钟洗脱，并且(r)-8-(二氟甲氧基)-6'-氟-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]-6-甲腈在rt＝15.7分钟洗脱。
[0687]
实例36：(s)-1'-氯-8-(二氟甲氧基)-6-(三氟甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉]
[0688][0689]
向(s)-(1-氯-5-((3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)氨基)-5,6,7,8-四氢异喹啉-5-基)甲醇(中间体ap，330mg，0.78mmol)在甲苯(4.8ml)中的溶液中添加亚硫酰氯(0.11ml，1.56mmol)并且将反应混合物在80℃下搅拌45min。将冷却的rm倒入nahco3饱和水溶液中并且用dcm萃取2x。将合并的有机萃取物干燥(相分离器)并且蒸发。将粗化合物通过正相快速色谱法(12g sio2柱，洗脱液：etoac:c-己烷0:100至23:77)纯化以给出呈黄色泡沫的标题化合物。
[0690]1h nmr(600mhz,dmso-d6)δ8.20(d,1h),7.96(m,1h),7.36(t,1h),7.34(d,1h),7.05(d,1h),4.25(d,1h),4.13(d,1h),2.80-2.68(m,2h),2.01(m,1h),1.91(m,1h),1.84(td,1h),1.78(m,1h)。
[0691]
lc-ms：rt＝2.64min；ms m/z[m+h]
+
406.2/408.2；uplc-ms 6。
[0692]
实例37：(s)-3'-氯-8-(二氟甲氧基)-6-(三氟甲基)-6',7'-二氢-3h,5'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,8'-异喹啉]
[0693][0694]
在ar下,将socl2(0.04ml，548μmol)添加至甲苯(2ml)中的(3-氯-8-((3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)氨基)-5,6,7,8-四氢异喹啉-8-基)甲醇(中间体aq，130mg，279μmol)中。将rm加热到80℃，持续45min，冷却，然后用nahco3饱和水溶液淬灭并且用etoac萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经na2so4干燥，过滤并蒸发。将残余物吸收在isolute上并且通过正相色谱法(40g sio2柱；洗脱液：庚烷:etoac100:0至70:30)纯化。将含有级分的产物合并，蒸发并干燥以给出呈黄色固体的标题化合物。
[0695]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.30(s,1h),7.93(s,1h),7.30(t,1h),7.27(s,1h),7.02(d,1h),4.24(d,1h),4.14(d,1h),2.79(t,2h),1.95-1.66(m,4h)。
[0696]
lc-ms：rt＝0.68min；ms m/z[m+h]
+
406.1/408.1；uplc-ms 1。
[0697]
实例38：(s)-8-(二氟甲氧基)-6-(三氟甲基)-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]-6'-甲腈
[0698][0699]
在ar下，向微波小瓶中装入(s)-6'-溴-8-(二氟甲氧基)-6-(三氟甲基)-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘](实例11，223mg，402μmol)、xphos pd g3(34mg，40μmol)、xphos(39.1mg，80μmol)、六氰基高铁酸钾(ii)(85mg，201μmol)、乙酸钾(4.93mg，50μmol)、1,4-二噁烷(2ml)和水(1ml)。将rm在微波中在100℃下加热1.5小时。将冷却的rm用nahco3饱和水溶液稀释并用etoac萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经na2so4干燥，过滤并蒸发。将残余物吸收在isolute上并且通过正相色谱法(80g sio2柱；洗脱液：庚烷:etoac 100:0至70:30)纯化。将含有级分的产物合并，并且蒸发。将残余物溶解于meoh(4ml)中并且通过stratosphere spe pl-硫醇筒(500mg/6ml；安捷伦科技公司)过滤并将滤液蒸发，并且干燥以给出呈黄色泡沫的标题化合物。
[0700]1h nmr(600mhz,dmso-d6,用tfa添加剂)δ8.75(t,1h),8.21(d,1h),7.90(d,1h),7.78(dd,1h),7.75(d,1h),7.51(t,1h),4.93(d,1h),4.72(d,1h),2.87(d,2h),2.36-2.29(m,1h),2.13-2.05(m,1h),1.99(td,1h),1.86-1.76(m,1h)。
[0701]
lc-ms：rt＝0.71min；ms m/z[m+h]
+
396.2；uplc-ms 1。
[0702]
实例39：(s)-7-溴-8'-(二氟甲氧基)-8-氟-6'-(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]
[0703][0704]
向(s)-(7-溴-4-((3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)氨基)-8-氟色满-4-基)甲醇(中间体ar，5.32g，10.9mmol)在甲苯(43ml)中的溶液中添加亚硫酰氯(1.59ml，21.8mmol)并且将rm在80℃下搅拌15min。将冷却的rm用meoh淬灭并且蒸发。将残余物溶解于dcm中并且倒入nahco3饱和水溶液中。分离各层，并且将水层用dcm反萃取2x。将合并的有机萃取物干燥(相分离器)并且蒸发。将粗材料通过正相快速色谱法(120g sio2柱，洗脱液：etoac:c-己烷0:100至20:80，然后转换为meoh:ch2cl
2 0:100至40:60)纯化以给出呈黄色泡沫的标题化合物。
[0705]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ7.98(br s,1h),7.36(t,1h),7.16(dd,1h),7.06(dd,1h),7.03(d,1h),4.46(m,1h),4.49(m,1h),4.27(s,2h),2.17-2.04(m,2h)。
[0706]
lc-ms：rt＝3.70min；ms m/z[m+h]
+
469.0/471.0；uplc-ms 6。
[0707]
实例40：(s)-8'-(二氟甲氧基)-8-氟-6',7-双(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]
[0708][0709]
将(s)-8'-(二氟甲氧基)-8-氟-7-碘-6'-(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶](中间体aw，147mg，285μmol)、二苯基(三氟甲基)锍三氟甲烷磺酸盐(173mg，427μmol)和cu粉(54mg，854μmol)在dmf(2.5ml)中的混合物在密封管中在60℃下加热18小时。将冷却的rm在etoac和nahco3饱和水溶液之间分配，将水相用etoac萃取，将合并的有机层用盐水洗涤，干燥并且浓缩。将残余物通过反相色谱法(rp-hplc 2)纯化并且将含有级分的产物用nahco3饱和水溶液中和，用dcm萃取，将合并的有机相通过穿过相分离筒干燥并且浓缩以给出呈黄色固体的标题化合物。
[0710]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.00(s,1h),7.33-7.25(m,1h),7.25-7.18(m,1h),7.62-7.11(m,1h),7.05(s,1h),4.58-4.43(m,1h),4.40-4.19(m,2h),4.27(br s,1h),2.24-1.98(m,2h)。
[0711]
lc-ms：rt＝4.09min；ms m/z[m+h]
+
459.2；uplc-ms 4。
[0712]
实例41：(s)-7-氯-8'-(二氟甲氧基)-6'-(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]
[0713][0714]
向(s)-(7-氯-4-((3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)氨基)色满-4-基)甲醇(中间体ax，4.79g，11.3mmol)在甲苯(75ml)中的溶液中添加亚硫酰氯(1.65ml，22.6mmol)并且将反应混合物在80℃下搅拌1小时。将冷却的rm通过添加nahco3饱和溶液淬灭。添加etoac并分离各层。将水层用etoac反萃取2x并将合并的有机萃取物干燥(相分离器)并蒸发。将粗材料通过正相色谱法(220g redisep gold柱，洗脱液：c-己烷:etoac 70:30)纯化以给出标题化合物。
[0715]
tlc，rf(环己烷/etoac 1:1):0.55
[0716]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ7.96(br s,1h),7.36(t,1h),7.27(d,1h),7.02(br s,1h),7.94(dd,1h),6.87(d,1h),4.37(m,1h),4.25(s,2h),4.19(m,1h),2.06(m,2h)。
[0717]
lc-ms：rt＝3.49min；ms m/z[m+h]
+
407.1/409.1；uplc-ms 6。
[0718]
实例42：(s)-7-溴-8-氟-8'-(氟甲氧基)-6'-(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]
[0719][0720]
将(s)-7-溴-8-氟-3'-(3-(氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)螺[色满-4,4'-噁唑烷]-2'-酮(中间体ay，70mg，117μmol)在naoh水溶液(2m，293μl，1.17mmol)和etoh(3ml)中的溶液在80℃下搅拌20min。将rm用etoac稀释，用nahco3饱和水溶液洗涤，干燥并且浓缩。将残余物溶解于甲苯(3ml)中并添加socl2(13μl，176μmol)，并且将rm在80℃下搅拌20min。将meoh添加至冷却的rm中，然后将其浓缩，在etoac和nahco3饱和水溶液之间分配，干燥并且浓缩。将残余物通过正相色谱法(硅胶，洗脱液：c-己烷:etoac 100:0至50:50)纯化以给出呈黄色固体的标题化合物。
[0721]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ7.87(s,br,1h),7.15(t,1h),7.02(d,1h),6.79(s,br,1h),5.90(d,2h),4.52-4.40(m,1h),4.31-4.18(m,3h),2.20-2.05(m,2h)。
[0722]
lc-ms：rt＝0.79min；ms m/z[m+h]
+
451.2/453.2；uplc-ms 1。
[0723]
实例43：(s)-7-氯-8'-(二氟甲氧基)-8-氟-6'-(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]
[0724]
[0725]
将(s)-8'-(二氟甲氧基)-8-氟-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-6'-(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶](中间体az，550mg，1.07mmol)和氯化铜(ii)(430mg，3.20mmol)在meoh(5ml)和水(5ml)的混合物中的溶液在100℃下搅拌8小时。将rm倒入nahco3饱和水溶液中并且用etoac萃取2x。向合并的有机萃取物中添加nh4cl饱和水溶液，然后将混合物在rt下搅拌1小时。将有机层分离，用nh4cl饱和水溶液洗涤，干燥(相分离器)并且蒸发。将粗材料溶解于thf(10ml)中，添加硫醇(粒度：40-63μm，载量1.39mmol/g，13mmol，9.86g)并且将混合物在40℃下涡旋1小时。将混合物过滤，并且将滤液蒸发。将粗残余物通过反相制备型hplc(rp hplc 3)纯化，并且将含有级分的产物用dcm萃取并蒸发以给出呈黄色固体的标题化合物。
[0726]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ7.94(s,br,1h),7.33(t,1h),7.12(m,1h),7.02(m,2h),4.50(m,1h),4.34-4.29(m,3h),2.16(m,2h)。
[0727]
lc-ms：rt＝3.65min；ms m/z[m+h]
+
425.1/427.1；uplc-ms 6。
[0728]
实例44：(s)-8'-(二氟甲氧基)-6',7-双(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]
[0729][0730]
向(s)-(4-((3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)氨基)-7-(三氟甲基)色满-4-基)甲醇(中间体ba，3.18g，6.24mmol)在甲苯(40ml)中的溶液中添加亚硫酰氯(0.91ml，12.5mmol)并且将黄色悬浮液在80℃下搅拌1小时。将冷却的rm通过添加nahco3饱和溶液淬灭，并且用etoac萃取2x。将合并的有机萃取物干燥(相分离器)并且蒸发。将残余物通过正相快速色谱法(120g sio2柱；洗脱液：c-己烷:etoac 100:0至70:30)纯化以给出呈黄色固体的标题化合物。
[0731]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ7.98(br,s,1h),7.49(d,1h),7.37(t,1h),7.22(d,1h),7.10(s,1h),7.04(s,1h),4.41(m,1h),4.29(s,2h),4.23(m,1h),2.16-2.03(m,2h)。
[0732]
lc-ms：rt＝3.92min；ms m/z[m+h]
+
441.1；uplc-ms 6。
[0733]
通过用适当的抗衡离子沉淀，从上述(s)-8'-(二氟甲氧基)-6',7-双(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]的游离碱形式制备以下盐。
[0734]
具有1:1化学计量比的盐酸盐(mw 476.76)，mp(dsc)58.3℃(起始)：将游离碱(50.12mg，114μmol)置于2ml玻璃小瓶中并添加etoac(100μl)，并且将澄清黄色溶液在rt下搅拌。然后在rt下添加盐酸(1n，114μl)并且将溶液在rt下搅拌18小时。然后在rt下将庚烷(500μl)添加至溶液中，导致在添加10min内沉淀。将悬浮液在rt下搅拌2小时，将固体通过离心分离，并且将粉末在真空下在40℃下干燥18小时以给出标题化合物。
[0735]
实例45：(s)-8'-(二氟甲氧基)-7,8-二氟-6'-(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]
[0736][0737]
将(s)-(4-((3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)氨基)-7,8-二氟色满-4-基)甲醇(中间体bc，2.7g，6.33mmol)和亚硫酰氯(0.93ml，12.7mmol)在甲苯(38ml)中的溶液在80℃下搅拌1小时。将冷却的rm通过添加meoh淬灭并且蒸发。将残余物用dcm稀释，用nahco3饱和水溶液洗涤，干燥(相分离器)并且蒸发。将残余物通过正相快速色谱法(120g sio2柱；洗脱液：c-己烷:etoac 100:0至75:25)纯化以给出呈黄色泡沫的标题化合物。
[0738]1h nmr(600mhz,dmso-d6)δ7.99(br,s,1h),7.37(t,1h),7.15-7.09(m,1h),7.04(d,1h),6.97-6.89(m,1h),4.49-4.45(m,1h),4.34-4.27(m,1h),4.26(s,2h),2.16-2.04(m,2h)。
[0739]
lc-ms：rt＝3.12min；ms m/z[m+h]
+
409.2；uplc-ms 6。
[0740]
通过用适当的抗衡离子沉淀，从上述(s)-8'-(二氟甲氧基)-7,8-二氟-6'-(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]的游离碱形式制备以下盐。
[0741]
具有1:1化学计量比的盐酸盐(mw 444.76)，mp(dsc)67℃(起始)：将游离碱(44.24mg，108μmol)置于2ml玻璃小瓶中，添加tbuome(500μl)，并且将混合物在55℃下搅拌以给出澄清黄色溶液。在55℃下添加盐酸(1n，108μl)并且将溶液在55℃下搅拌4小时，随后在rt下搅拌18小时。然后添加庚烷(200μl)，并且将澄清的溶液蒸发以给出玻璃状物质。向玻璃状物质中再次添加庚烷(200μl)并且将混合物在rt下搅拌24小时，导致形成浆液。将浆液分离，并且将固体在真空下在40℃下干燥18小时以给出标题化合物。
[0742]
实例46：(s)-8'-(二氟甲氧基)-8-氟-7-甲基-6'-(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]
[0743][0744]
将(s)-7-溴-8'-(二氟甲氧基)-8-氟-6'-(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶](实例39，100mg，0.21mmol)、三甲基环三硼氧烷(26.8mg，0.21mmol)、tbuok(71.8mg，0.64mmol)、xphos-pd-g3(18.0mg，0.021mmol)、thf(2ml)和水(1ml)添加至微波小瓶中，用氩气吹扫，密封并在微波下搅拌，在100℃下加热1.5小时。将rm倒入nahco3饱和水溶液中并且用etoac萃取2x。将合并的有机萃取物干燥(相分离器)并且蒸发。将粗材料溶解于thf(3ml)中，添加硫醇(粒度：40-63μm，载量1.39mmol/g，0.085mmol，64mg)并且将混合物在40℃下涡旋1小时。将混合物过滤，并且将滤液蒸发。将粗残余物通过反相制备型hplc(rp-hplc 3)纯化并且将含有级分的产物冻干以给出标题化合物。
[0745]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ7.97(br,s,1h),7.37(t,1h),7.01(br s,1h),6.93(d,1h),6.75(t,1h),4.40(m,1h),4.24(s,2h),4.22(m,1h),2.19(s,3h),2.09-2.05(m,2h)。
[0746]
lc-ms：rt＝3.37min；ms m/z[m+h]
+
405.1；uplc-ms 6。
[0747]
实例47：(s)-8'-(二氟甲氧基)-8-氟-6'-(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]
[0748][0749]
将pd-c(5％，75mg，0.71mmol)添加至(s)-7-溴-8'-(二氟甲氧基)-8-氟-6'-(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶](实例39，600mg，1.28mmol)在thf(15ml)和meoh(15ml)中的溶液中，并且将混合物在rt下在氢气气氛下振荡3小时。将rm通过硅藻土垫过滤，用meoh洗涤，将滤液蒸发，并且将粗残余物通过正相色谱法(80g sio2柱，洗脱液：dcm:meoh 100:0至70:30)纯化，然后通过反相制备型hplc(rp-hplc 3)纯化。将含有级分的产物用dcm萃取并且蒸发以给出呈黄色固体的标题化合物。
[0750]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ7.97(br,s,1h),7.37(t,1h),7.13-7.05(m,2h),7.02(d,1h),6.89-6.81(m,1h),4.45-4.37(m,1h),4.30-4.19(m,3h),2.14-2.06(m,2h)。
[0751]
lc-ms：rt＝2.85min；ms m/z[m+h]
+
391.1；uplc-ms 6。
[0752]
实例48：(s)-8-氯-8'-(二氟甲氧基)-6'-(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]
[0753][0754]
将(s)-(4-氨基-8-氯色满-4-基)甲醇(中间体be，423mg，1.98mmol)、2-氯-3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶(中间体a，1.00g，4.05mmol)、cubr(113mg，791μmol)和k3po4(839mg，3.95mmol)在dmf(5ml)中的混合物在密封的小瓶中在n2气氛下在140℃下加热90min。向冷却的rm中添加另外的2-氯-3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶(1.00g，4.05mmol)、cubr(113mg，791μmol)和k3po4(839mg，3.95mmol)，并且在140℃下继续加热90min。将rm在etoac和nahco3饱和水溶液之间分配，用etoac萃取2x，干燥并且蒸发。将残余物通过正相色谱法(50g snap sio2筒，洗脱液：己烷:etoac 100:0至65:35)纯化，然后通过反相色谱法(rp-hplc 2)纯化，并且将含有级分的产物蒸发以留下主要是水性的相，将该主要是水性的相用nahco3饱和水溶液碱化，用dcm萃取，将有机层干燥并蒸发以给出呈黄色泡沫的标题化合物。
[0755]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ7.97(s,1h),7.34-7.19(m,2h),7.61-7.14(m,1h),7.02(d,1h),6.90(t,1h),4.55-4.38(m,1h),4.35-4.20(m,3h),2.17-2.00(m,2h)。
[0756]
lc-ms：rt＝3.10min；ms m/z[m+h]
+
407.2/409.2；uplc-ms 4。
[0757]
实例49：(s)-7-溴-8'-(二氟甲氧基)-8-氟-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]-6'-甲腈
[0758][0759]
将(s)-(4-氨基-7-溴-8-氟色满-4-基)甲醇(中间体at，200mg，0.72mmol)、6-氯-5-(二氟甲氧基)烟腈(中间体b，326mg，1.59mmol)、溴化铜(i)(31.2mg，0.22mmol)和磷酸钾(308mg，1.45mmol)在dmf(4.8ml)中的溶液在120℃下在微波中加热1.5小时。将rm倒入nahco3饱和水溶液中并且用etoac萃取3x。将合并的有机萃取物用水洗涤2x，干燥(相分离器)并浓缩。将残余物溶解于thf(3ml)中，添加，硫醇(粒度：40-63μm，载量1.35mmol/g，0.087mmol，64mg)并且将混合物在40℃下涡旋1小时。将混合物过滤，并且将滤液蒸发。将粗残余物通过正相快速色谱法(40g sio2柱，洗脱液：etoac:c-己烷0:100至50:50)纯化以给出呈黄色泡沫的标题化合物。
[0760]1h nmr(600mhz,dmso-d6)δ8.21(d,1h),7.28(t,1h),7.19-7.15(m,1h),7.11(d,1h),7.05(dd,1h),4.48-4.43(m,1h),4.33-4.27(m,1h),4.27(s,2h),2.19-2.05(m,2h)。
[0761]
lc-ms：rt＝3.34min；ms m/z[m+h]
+
426.1/428.1；uplc-ms 6。
[0762]
实例50：(s)-7-溴-8'-(二氟甲氧基)-6'-(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]
[0763][0764]
在ar下，将socl2(0.15ml，2.06mmol)添加至甲苯(10ml)中的(s)-(7-溴-4-((3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)氨基)色满-4-基)甲醇(中间体bf，615mg，1.11mmol)中。将rm加热到80℃，持续1小时，冷却，然后用nahco3饱和水溶液淬灭并且用etoac萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经na2so4干燥，过滤并蒸发。将残余物吸收在isolute上并且通过正相色谱法(80g sio2柱；洗脱液：庚烷:etoac100:0至70:30)纯化。将含有级分的产物合并并且蒸发，以给出黄色泡沫。将产物溶解于iproh(12ml)中并且在80℃下搅拌5min，然后允许溶液冷却至rt并搅拌5天以重结晶。将晶体通过过滤分离，用iproh洗涤，然后干燥以给出呈黄色晶体的标题化合物。
[0765]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ7.96(s,1h),7.36(t,2h),7.20(d,1h),7.07(dd,1h),7.04-6.97(m,2h),4.44-4.31(m,1h),4.23(s,2h),4.21-4.13(m,1h),2.11-1.98(m,2h)。
[0766]
lc-ms：rt＝0.79min；ms m/z[m+h]
+
451.1/453.1；uplc-ms 1。
[0767]
实例51：(s)-8'-(二氟甲氧基)-8-氟-7-碘-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]-6'-甲腈
[0768][0769]
将(s)-7-溴-8'-(二氟甲氧基)-8-氟-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]-6'-甲腈(实例49，232mg，544μmol)、cui(52mg，272mmol)、nai(163mg，1.09mmol)和反式-n,n'-二甲基-1,2-环己烷二胺(8.6μl，54μmol)在1,4-二噁烷(2ml)中的混合物在密封管中在110℃下在氮气气氛下加热18小时。将冷却的rm在dcm和30％nh3水溶液之间分配，将水相用dcm萃取3x，将合并的有机相通过穿过相分离筒干燥并且浓缩。将残余物通过反相色谱法(rp-hplc 2)纯化，并且将含有级分的产物冻干，然后用meoh研磨以给出呈黄色粉末的标题化合物。
[0770]1h nmr(400mhz,meoh-d4)δ7.95(s,1h),7.29(dd,1h),7.01(s,1h),6.86(d,1h),7.20-6.71(m,1h),4.56-4.42(m,1h),4.41-4.22(m,3h),2.33-2.06(m,2h)。
[0771]
lc-ms：rt＝3.45min；ms m/z[m+h]
+
474.1；uplc-ms 4。
[0772]
实例52：(s)-7-溴-6'-氯-8'-(二氟甲氧基)-8-氟-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]
[0773][0774]
将(s)-(4-氨基-7-溴-8-氟色满-4-基)甲醇(中间体at，100mg，0.36mmol)、2-溴-5-氯-3-(二氟甲氧基)吡啶(中间体f、186mg、0.72mmol)、cubr(15.6mg，0.11mmol)和磷酸钾(154mg，0.72mmol)在dmf(3.6ml)中的混合物在140℃在微波中加热4小时。将rm倒入nahco3饱和水溶液中，用etoac萃取3x。将合并的有机萃取物干燥(相分离器)并且浓缩。将粗材料溶解于thf(5ml)中，添加硫醇(粒度：40-63μm，载量1.35mmol/g，0.44mmol，323mg)并且将混合物在40℃下涡旋1小时，过滤并且将滤液蒸发。将粗残余物通过正相快速色谱法(12g sio2柱，洗脱液：c-己烷:etoac 100:0至50:50)纯化，然后通过反相制备型hplc(rp-hplc 2)纯化，并且将含有级分的产物用nahco3饱和水溶液碱化，用dcm萃取，将有机层干燥并蒸发以给出呈黄色固体的标题化合物。
[0775]1h nmr(600mhz,dmso-d6)δ7.60(br,s,1h),7.36(t,1h),7.16(dd,1h),7.04(d,1h),6.98(br,s,1h),4.45(m,1h),4.29(m,1h),4.20(s,2h),2.12-2.03(m,2h)。
[0776]
lc-ms：rt＝3.20min；ms m/z[m+h]
+
435.1/437.1；uplc-ms 6。
[0777]
实例53：(s)-8'-氯-6',7-双(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]
[0778][0779]
向(4-((3-氯-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)氨基)-7-(三氟甲基)色满-4-基)甲醇(中间体p2，57mg，135μmol)在甲苯(2ml)中的溶液中添加亚硫酰氯(0.05ml，0.67mmol)并且将rm在80℃下搅拌2.5小时。允许rm冷却至rt，将其倒入nahco3饱和水溶液中并用dcm萃取3x。将合并的有机萃取物干燥(相分离器)并且浓缩。将粗残余物通过反相制备型hplc(rp-hplc 2)纯化并且将含有级分的产物用nahco3饱和水溶液碱化，用dcm萃取，将有机层干燥(相分离器)并蒸发以给出外消旋标题化合物。将对映异构体通过制备型手性hplc(仪器：gilson plc2020；柱：chiralpak id；5μm，250x20mm，rt；洗脱液：庚烷/etoh 80/20+0.1％et2nh；流速：10ml/min；检测：250nm；进样体积：1.5ml)分离以给出作为第二洗脱峰的标题化合物(黄色固体)。
[0780]1h nmr(600mhz,dmso-d6)δ8.08(br,s,1h),7.53(d,1h),7.48(d,1h),7.24(dd,1h),7.12(d,1h),4.44-4.39(m,1h),4.37(d,1h),4.33(d,1h),4.27-4.22(m,1h),2.18-2.05(m,2h)。
[0781]
lc-ms：rt＝3.68min；ms m/z[m+h]
+
409.2/411.2；uplc-ms 6。
[0782]
手性-hplc：rt＝9.99min；以(r)-8'-氯-6',7-双(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]洗脱作为手性-hplc第一峰：rt＝3.95min；(c-hplc 28)。
[0783]
实例54：(s)-7,8'-双(二氟甲氧基)-8-氟-6'-(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]
[0784][0785]
向(s)-8'-(二氟甲氧基)-8-氟-6'-(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]-7-醇(中间体bi，20mg，46μmol)和koh(52mg，925μmol)在accn(1ml)和水(1ml)的混合物中的溶液中添加(溴二氟甲基)膦酸二乙酯(37.1mg，139μmol)并且将rm在rt下搅拌30min。然后将rm用etoac萃取并且将合并的有机层用盐水洗涤，通过相分离器过滤并且将滤液蒸发。将残余物通过反相色谱法(rp-hplc 2)纯化。将含有级分的产物合并，并且在dcm和nahco3饱和水溶液之间分配。将合并的有机层通过相分离器过滤并且将滤液蒸发。将残余物吸收在isolute上并且通过正相色谱法(4g sio2柱；洗脱液：dcm:meoh 100:0至80:20)再次纯化。将含有级分的产物合并，蒸发并且干燥以给出标题化合物。
[0786]1h nmr(600mhz,dmso-d6)δ7.99(s,1h),7.52-7.32(m,1h),7.24(d,1h),7.17-7.08(m,1h),7.05(d,1h),6.88(t,1h),4.47(ddd,1h),4.33-4.23(m,3h),2.18-2.05(m,2h)。
[0787]
lc-ms：rt＝0.84min；ms m/z[m+h]
+
457.2；uplc-ms 1。
[0788]
实例55：(s)-8'-(二氟甲氧基)-8-(二氟甲基)-6'-(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,
2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]
[0789][0790]
在rt下，将dast(20μl，148μmol)添加到(s)-8'-(二氟甲氧基)-6'-(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]-8-甲醛(中间体bj，40mg，74μmol)在dcm(1ml)中的溶液中并且搅拌16小时。添加另外的dast(10μl，74μmol)并且将rm在rt下搅拌5天。然后将rm在dcm(20ml)和nahco3饱和水溶液(20ml)之间分配，用dcm(5ml)萃取2x，将合并的有机层通过穿过相分离筒干燥并且蒸发。将残余物通过正相色谱法(4g sio2柱；洗脱液：己烷:tbme 90:10至10:90)纯化以给出呈米色固体的标题化合物。
[0791]1h nmr(400mhz,氯仿-d)δ7.52-7.42(m,2h),7.30-7.21(m,1h),7.04-6.72(m,4h),4.61-4.56(m,1h),4.40-4.21(m,3h),2.45-2.36(m,1h),2.21-2.08(m,1h)。
[0792]
lc-ms：rt＝0.78min；ms m/z[m+h]
+
423.2；uplc-ms 1。
[0793]
实例56：(s)-8'-氯-8-(二氟甲氧基)-6-(三氟甲基)-2',3'-二氢-3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,4'-吡喃并[2,3-c]吡啶]
[0794][0795]
将(s)-8'-氯-3-(3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)-2',3'-二氢螺[噁唑烷-4,4'-吡喃并[2,3-c]吡啶]-2-酮(中间体bk，408mg，813μmol)、naoh水溶液(4m，2.03ml，8.13mmol)和etoh(10ml)的混合物在80℃下搅拌20min。将冷却的rm用etoac萃取，用nahco3饱和水溶液洗涤，干燥并且浓缩。将残余物吸收到甲苯(10ml)中并添加socl2(89μl，1.22mmol)，并且将rm在80℃下搅拌20min。将meoh添加至冷却的rm中，然后将其浓缩，在etoac和nahco3饱和水溶液之间分配，将合并的有机层干燥并且浓缩。将残余物通过反相色谱法(rp-hplc 2)纯化，并且将含有级分的产物合并并蒸发。将残余物在dcm和nahco3饱和水溶液之间分配，将合并的有机层干燥并浓缩以给出呈黄色固体的标题化合物。
[0796]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.03(s,br,1h),7.93(d,1h),7.61-6.96(m,3h),4.56-4.46(m,1h),4.39-4.20(m,3h),2.24-2.05(m,br,2h)。
[0797]
lc-ms：rt＝2.42min；ms m/z[m+h]
+
408.1/410.1；uplc-ms 4。
[0798]
实例57：(2's,3r)-7-溴-8'-(二氟甲氧基)-3,8-二氟-6'-(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]
[0799][0800]
将((3r,4s)-4-氨基-7-溴-3,8-二氟色满-4-基)甲醇(中间体bo，273mg，928μmol)、2-氯-3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶(中间体a，306mg，1.11mmol)、cubr(53mg，371μmol)、k3po4(394mg，1.86mmol)和dmf(1.5ml)的混合物在n2气氛下密封在小瓶中并且在140℃下在微波中加热90min。将冷却的rm在nahco3饱和水溶液和etoac之间分配，将合并的有机层干燥并且浓缩。添加另外的2-氯-3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶(306mg，1.11mmol)、cubr(53mg，371μmol)、k3po4(394mg，1.86mmol)和dmf(1.5ml)并且将混合物在n2气氛下密封在小瓶中，并且在140℃下在微波中再次加热90min。将冷却的rm在nahco3饱和水溶液和etoac之间分配，将合并的有机层干燥并且浓缩。将残余物通过正相色谱法(50g sio
2 snap筒，洗脱液：己烷:(95:5tbme:meoh)100:0至65:35)纯化，然后通过反相色谱法(rp-hplc 3)纯化并且将含有级分的产物用dcm萃取，将合并的有机层干燥并浓缩。将残余物吸收到meoh中并且体积减少以使得标题化合物结晶为黄色固体，将该黄色固体通过过滤收集。
[0801]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ7.98(s,1h),7.63-7.17(m,2h),7.16-6.97(m,2h),5.23-4.93(m,1h),4.73-4.53(m,1h),4.51-4.33(m,1h),4.33-4.08(m,2h)。
[0802]
lc-ms：rt＝3.83min；ms m/z[m+h]
+
487.1/489.0；uplc-ms 4。
[0803]
实例58：(2's,3s)-7-溴-8'-(二氟甲氧基)-3,8-二氟-6'-(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]
[0804][0805]
通过与实例57相似的方法，通过用((3s,4s)-4-氨基-7-溴-3,8-二氟色满-4-基)甲醇(中间体bu)代替((3r,4s)-4-氨基-7-溴-3,8-二氟色满-4-基)甲醇(中间体bo)制备标题化合物。正相色谱法(25g sio
2 snap筒，洗脱液：己烷:etoac 100:0至80:20)后，获得呈淡橙色粉末的标题化合物。
[0806]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.10(br,s,1h),7.57-7.11(m,4h),5.12-4.85(m,1h),4.69-4.35(m,4h)。lc-ms：rt＝5.20min；ms m/z[m+h]
+
487.1/489.0；uplc-ms 4。
[0807]
实例59：(2's,3r)-7-溴-8'-(二氟甲氧基)-3-氟-6'-(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]
[0808][0809]
通过与实例57相似的方法，通过用((3r,4s)-4-氨基-7-溴-3-氟色满-4-基)甲醇(中间体bv)代替((3r,4s)-4-氨基-7-溴-3,8-二氟色满-4-基)甲醇(中间体bo)制备标题化合物。正相色谱法(50g二氧化硅snap柱，洗脱液：己烷:etoac 100:0至80:20)后，获得呈淡黄色固体的标题化合物。
[0810]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ7.97(s,1h),7.63-7.17(m,2h),7.16-7.11(m,1h),7.08(dd,2h),5.14-4.89(m,1h),4.59-4.42(m,1h),4.40-4.14(m,3h)。
[0811]
lc-ms：rt＝3.42min；ms m/z[m+h]
+
469.0/471.0；uplc-ms 4。
[0812]
实例60：(2's,3r)-8'-(二氟甲氧基)-3-氟-7-碘-6'-(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]
[0813][0814]
通过与实例51相似的方法，通过用(2's,3r)-7-溴-8'-(二氟甲氧基)-3-氟-6'-(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶](实例59)代替(s)-7-溴-8'-(二氟甲氧基)-8-氟-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]-6'-甲腈(实例49)制备标题化合物。用meoh研磨后，获得呈黄色粉末的标题化合物。
[0815]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ7.96(br,s,1h),7.66-7.14(m,3h),7.12-6.92(m,2h),5.14-4.85(m,1h),4.47-4.34(m,1h),4.38-4.10(m,3h)。
[0816]
lc-ms：rt＝3.69min；ms m/z[m+h]
+
517.0；uplc-ms 4。
[0817]
实例61：(2's,3r)-8'-(二氟甲氧基)-3-氟-6',7-双(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]
[0818][0819]
通过与实例40相似的方法，通过用(2's,3r)-8'-(二氟甲氧基)-3-氟-7-碘-6'-(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶](实例60)代替(s)-8'-(二氟甲氧基)-8-氟-7-碘-6'-(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶](中间体aw)制备标题化合物。正相色谱法(40g sio2redisep筒，洗脱液：己烷:tbme 100:0至0:100)纯化，然后通过反相色谱法(rp-hplc 2)纯化后，获得呈黄色针状物的标题化合物，并且将含有级分的产物在dcm和nahco3饱和水溶液之间分配，用dcm萃取2x，将合并的有机层通过穿过相分
离筒干燥并且蒸发。
[0820]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ7.98(s,1h),7.61-7.21(m,4h),7.12(s,1h),5.21-4.93(m,1h),4.65-4.48(m,1h),4.46-4.15(m,3h)。
[0821]
lc-ms：rt＝4.06min；ms m/z[m+h]
+
459.1；uplc-ms 4。
[0822]
实例62：(2's,3r)-8'-(二氟甲氧基)-3,8-二氟-6'-(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]
[0823][0824]
将((3r,4s)-4-氨基-3,8-二氟色满-4-基)甲醇(中间体bw，5.0g，22.77mmol)、2-氯-3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶(中间体a，11.27g，45.5mmol)、cubr(1.31g，9.11mmol)和k2po4(9.67g，45.5mmol)在dmf(24ml)中的混合物在密封的小瓶中在氩气气氛下在140℃下加热1.5小时。将冷却的rm过滤，用etoac(150ml)洗涤，将滤液用nahco3饱和水溶液洗涤，干燥并且浓缩。将另外的2-氯-3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶(11.27g，45.5mmol)、cubr(1.31g，9.11mmol)、k2po4(9.67g，45.5mmol)和dmf(5ml)添加至残余物中并且将混合物在密封的小瓶中在氩气气氛下在140℃下加热1.5小时。将冷却的rm过滤，用etoac(150ml)洗涤，将滤液用nahco3饱和水溶液洗涤，干燥并且浓缩。将残余物通过正相色谱法(340g硅胶，洗脱液：c-己烷:etoac 100:0至70:30)纯化。将含有级分的产物合并并且蒸发，将残余物吸收到1n hcl水溶液中并且将水层用etoac洗涤，并用etoac再次洗涤3x。将酸性水层用nahco3饱和水溶液(ph 8)变成碱性，用dcm萃取3x，将合并的dcm层干燥并且蒸发。然后将残余物吸收到最小体积的meoh中并且将溶液在旋转蒸发仪上缓慢蒸发，直至第一固体材料沉淀。然后允许溶液在rt下静置3小时并将形成的沉淀通过过滤收集，并且干燥以给出呈淡黄色粉末的标题化合物。
[0825]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ7.98(s,1h),7.40(t,1h),7.19(t,1h),7.11(s,1h),7.07(d,1h),6.97-6.89(m,1h),5.08(dd,1h),4.62-4.53(m,1h),4.42-4.22(m,3h)。
[0826]
lc-ms：rt＝0.67min；ms m/z[m+h]
+
409.0；uplc-ms 1。
[0827]
通过用适当的抗衡离子沉淀，从上述(2's,3r)-8'-(二氟甲氧基)-3,8-二氟-6'-(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]的游离碱形式制备以下盐。
[0828]
具有1:1化学计量比的盐酸盐(mw 444.76)：将游离碱(50.8mg，124μmol)置于2ml玻璃小瓶中并添加tbuome(1ml)，并且将澄清溶液在55℃下搅拌。然后在55℃下缓慢添加盐酸(1n，124μl)，并且溶液缓慢变成悬浮液。在55℃下持续搅拌4小时，然后在rt下搅拌18小时，将固体通过离心分离，并且将粉末在真空下在40℃下干燥18小时以给出标题化合物。
[0829]
具有1:1化学计量比的硫酸盐iproh溶剂化物(1:1)(mw 506.38)，mp(dsc)广泛的吸热转变147℃以及206℃(起始)：将游离碱(50.74mg，124μmol)置于2ml玻璃小瓶中并添加iproh(1.2ml)。然后在55℃下添加盐酸(1n，124μl)并且将溶液在55℃下搅拌4小时，然后在rt下搅拌18小时导致沉淀。将固体通过离心分离，并且将粉末在真空下在40℃下干燥18小时以给出标题化合物。
[0830]
具有1:1化学计量比的柠檬酸盐accn溶剂化物(1:1)(mw 600.42)，mp(dsc)广泛的吸热转变140℃以及176℃(起始)：将游离碱(51.84mg，126μmol)置于2ml玻璃小瓶中并添加accn(0.6ml)。然后在55℃下添加柠檬酸(24.4mg，127μmol)并且将浆液在55℃下搅拌4小时，然后在rt下搅拌18小时。将固体通过离心分离，并且将粉末在真空下在40℃下干燥18小时以给出标题化合物。
[0831]
实例63：(s)-8-(二氟甲氧基)-8'-氟-6-(三氟甲基)-3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,4'-异色满]
[0832][0833]
向外消旋-(4-((3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)氨基)-8-氟异色满-4-基)甲醇(中间体bz，598mg，1.39mmol)在甲苯(9ml)中的溶液中添加亚硫酰氯(0.20ml，2.78mmol)并且将rm在80℃下搅拌1小时。将rm通过添加nahco3饱和溶液淬灭，并且用etoac萃取2x。将合并的有机萃取物干燥(相分离器)，蒸发，并且将粗残余物通过正相快速色谱法(80g二氧化硅柱，洗脱液：c-己烷:etoac 100:0至50:50)纯化以给出外消旋标题化合物。将对映异构体通过制备型手性hplc(仪器：trilution hplc系统；柱：chiralcel oj-h；5μm，250x30mm，rt；洗脱液：庚烷/iproh 70/30+0.1％et2nh；流速：20ml/min；检测：230nm；进样体积：1.5ml)分离以给出作为第二洗脱峰的标题化合物(黄色固体)。
[0834]1h nmr(600mhz,dmso-d6)δ7.97(br s,1h),7.36(t,1h),7.33(m,1h),7.21(d,1h),7.11(t,1h),7.07(br s,1h),4.75(d,1h),4.87(d,1h),4.43(d,1h),4.00(d,1h),3.86(d,1h),3.58(d,1h)。
[0835]
lc-ms：rt＝2.85min；ms m/z[m+h]
+
391.1；uplc-ms 6。
[0836]
手性-hplc：rt＝7.37min；获得作为第一洗脱峰的((r)-8-(二氟甲氧基)-8'-氟-6-(三氟甲基)-3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,4'-异色满]，rt＝5.89min；(c-hplc 29)。
[0837]
实例64：(s)-7'-氯-8-(二氟甲氧基)-8'-氟-3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,4'-硫代色满]-6-甲腈
[0838][0839]
将cs2co3(1.15g，3.54mmol)添加至6-(7'-氯-8'-氟-2-氧代螺[噁唑烷-4,4'-硫代色满]-3-基)-5-(二氟甲氧基)烟腈(中间体ca，3.43g，5.90mmol)在meoh(113ml)中的悬浮液中并且将rm在90℃下搅拌2小时。允许rm冷却至rt并用etoac萃取。将有机相用nahco3饱和水溶液洗涤，经相分离器干燥并且在真空中浓缩。将残余物溶解于甲苯(113ml)中并添加socl2(1.29ml，17.70mmol)，并且将所得混合物在90℃下搅拌1小时。将rm冷却至rt，缓慢添加meoh，并且将所得混合物在真空中浓缩。将残余物吸收到etoac中，用nahco3饱和水溶液
洗涤，经相分离器干燥并且浓缩。将残余物通过快速柱色谱法(硅胶，洗脱液：庚烷:etoac 100:0至30:70)纯化以给出外消旋标题化合物。将对映异构体通过手性sfc：(仪器：mg ii制备型sfc；柱：chiralpak ad，250
×
30mm 5μm在38℃下；洗脱液：co2:含有0.1％nh3水溶液的etoh；梯度：35％含有0.1％aq.nh3水溶液的etoh；流速：50ml/min；检测：220nm)分离以给出作为第二洗脱峰的标题化合物。
[0840]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.16(s,1h),7.50-7.15(m,3h),7.10(s,1h),4.36-4.08(m,2h),3.26-3.08(m,2h),2.30-2.01(m,2h)。
[0841]
lc-ms：rt＝3.78min；ms m/z[m+h]
+
398.0；uplc-ms 4。
[0842]
手性-sfc：rt＝5.28min；(r)-7'-氯-8-(二氟甲氧基)-8'-氟-3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,4'-硫代色满]-6-甲腈作为第一洗脱峰，rt＝4.83min；c-sfc 30。
[0843]
实例65：(s)-8-(二氟甲氧基)-8'-氟-6-(三氟甲基)-3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,4'-硫代色满]
[0844][0845]
将(4-氨基-8-氟硫代色满-4-基)甲醇(中间体ce，100mg，445μmol)、2-溴-3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶(中间体cc，199mg，668μmol)、k2co3(123mg，891μmol)和cui(8.48mg，45μmol)溶解于dmf(2.6ml)中。将所得绿色悬浮液在160℃下在微波炉中辐照30min。将冷却的rm用etoac稀释，将有机层用nahco3饱和水溶液和盐水洗涤，通过相分离器过滤并且浓缩。将残余物通过正相色谱法(硅胶，洗脱液：庚烷:etoac)纯化以给出外消旋标题化合物。将对映异构体通过手性hplc(仪器：gilson plc2020 hplc系统；柱：chiralcel od-h；5μm，250x20mm在25℃下；洗脱液：庚烷:异丙醇＝80:20+0.1％et2nh；流速：10ml/min；检测：250nm)分离以给出作为第二洗脱峰的呈黄色粉末的标题化合物。
[0846]1h nmr(600mhz,dmso-d6)δ7.94(d,1h),7.38(ddd,1h),7.17(d,1h),7.14-7.06(m,2h),7.04(d,1h),4.30-4.12(m,2h),3.25-3.01(m,2h),2.25-2.05(m,2h)。
[0847]
lc-ms：rt＝3.20min；ms m/z[m+h]
+
407.1；uplc-ms 4。
[0848]
手性-hplc：rt＝11.52min；(r)-8-(二氟甲氧基)-8'-氟-6-(三氟甲基)-3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,4'-硫代色满作为第一洗脱峰，rt＝6.10min；c-hplc 31。
[0849]
实例66：(s)-8-(二氟甲氧基)-8'-氟-3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,4'-硫代色满]-6-甲腈
[0850][0851]
将(s)-5-(二氟甲氧基)-6-(8'-氟-2-氧代螺[噁唑烷-4,4'-硫代色满]-3-基)烟腈(中间体cd，4.11g，9.99mmol)溶解于meoh(75ml)中以给出澄清黄色溶液，将该澄清黄色
溶液置于两个微波小瓶中。向每个小瓶中添加cs2co3(976mg，2x2.99mmol)。将小瓶密封，加热至90℃并在此温度下搅拌60min。将rm冷却至rt，用etoac(300ml)和水(100ml)稀释，并且将各相分离。将水相用etoac(2x200ml)萃取，将合并的有机相用盐水洗涤，经na2so4干燥，过滤并在真空中浓缩。将残余物溶解于甲苯(75ml)中并添加socl2(2.5ml，35.0mmol)，得到黄色浆液，将该黄色浆液在90℃下搅拌15min。将冷却的rm通过添加nahco3饱和溶液淬灭。然后将混合物用etoac萃取2x，将合并的有机相用盐水洗涤，经na2so4干燥，过滤并浓缩。将残余物通过正相色谱法(硅胶，洗脱液：庚烷:etoac)纯化以提供标题化合物。
[0852]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.14(d,1h),7.28(t,1h),7.17-7.02(m,4h),4.25(d,1h),4.16(d,1h),3.21-3.13(m,1h),3.12-3.03(m,1h),2.21-2.15(m,1h),2.14-2.07(m,1h)。
[0853]
lc-ms：rt＝0.72min；ms m/z[m+h]
+
364.2；uplc-ms 1。
[0854]
实例67：(s)-8-(二氟甲氧基)-8'-氟-6,7'-双(三氟甲基)-2',3'-二氢-3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,4'-硫代吡喃并[3,2-c]吡啶]
[0855][0856]
将socl2(88μl，1.20mmol)添加至(s)-(4-((3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)氨基)-8-氟-7-(三氟甲基)-3,4-二氢-2h-硫代吡喃并[3,2-c]吡啶-4-基)甲醇(中间体cf，66mg，120μmol)在甲苯(2ml)中的溶液中，并且将rm在80℃下搅拌1小时。将冷却的rm在na2co3饱和水溶液(20ml)和dcm(20ml)之间分配，用dcm(20ml)萃取，将合并的有机层用盐水(20ml)洗涤，干燥并且蒸发。将残余物溶解于etoac中并且吸收在isolute上用于正相纯化(12g sio2柱，洗脱液：己烷:(tbme:meoh 95:5)从90:10至50:50)以给出呈黄色固体的标题化合物。
[0857]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.47(s,1h),7.97(s,1h),7.34(t,1h),7.08(s,1h),4.31(dd,2h),3.34
ꢀ‑
3.26(m,1h),3.23-3.16(m,1h),2.24-2.17(m,1h),2.16-2.09(m,1h)。
[0858]
lc-ms：rt＝0.97min；ms m/z[m+h]
+
476.1；uplc-ms 1。
[0859]
实例68：(s)-8-(二氟甲氧基)-8'-氟-3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,4'-异硫代色满]-6-甲腈
[0860][0861]
将(4-氨基-8-氟异硫代色满-4-基)甲醇(中间体cg，50mg，232μmol)、6-氯-5-(二氟甲氧基)烟腈(中间体b，99mg，348μmol)、k3po4(99mg，464μmol)和cui(4.42mg，23μmol)悬浮于dmf(1.37ml)中。然后将棕色悬浮液在160℃下在微波炉中辐照30min。将etoac添加至冷却的rm中，将有机层用nahco3饱和水溶液和盐水洗涤，经过相分离器过滤并且浓缩。将残
余物通过正相色谱法(硅胶，洗脱液：庚烷:etoac 100:0至30:70，然后通过dcm:meoh 100:0至90:10第二次纯化)纯化以得到外消旋标题化合物。将对映异构体通过手性hplc(仪器：gilson plc2020 hplc系统；柱：chiralcel id；5μm，250x20mm在25℃下；洗脱液：庚烷:etoh 80:20+0.1％et2nh；流速：10ml/min；检测：220nm)分离以给出作为第二洗脱峰的呈黄色粉末的标题化合物。
[0862]1h nmr(600mhz,dmso-d6)δ8.18(d,1h),7.44
ꢀ‑
7.07(m,5h),4.54(d,1h),4.04(d,1h),3.95(d,1h),3.65(d,1h),2.98(dd,1h),2.80(dd,1h)。
[0863]
lc-ms：rt＝2.84min；ms m/z[m+h]
+
364.1；uplc-ms 4。
[0864]
手性-hplc：rt＝10.82min；(r)-8-(二氟甲氧基)-8'-氟-3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,4'-异硫代色满]-6-甲腈作为第一洗脱峰，rt＝7.04min；c-hplc 33。
[0865]
实例69：(s)-8'-(二氟甲氧基)-9-氟-6'-(三氟甲基)-3,4-二氢-2h,3'h-螺[苯并[b]噁庚英-5,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]
[0866][0867]
将naoh水溶液(2m，20.18ml，40.4mmol)添加至3'-(3-(二氟甲氧基)-5-(三氟-甲基)吡啶-2-基)-9-氟-3,4-二氢-2h-螺[苯并[b]噁庚英-5,4'-噁唑烷]-2'-酮(中间体ch，2.08g，4.04mmol)在etoh(42.9ml)中的溶液中，并且将rm在80℃下搅拌1小时。lc-ms分析显示形成了中间体(5-((3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)氨基)-9-氟-2,3,4,5-四氢苯并[b]噁庚英-5-基)甲醇。允许rm冷却至rt并且将其用etoac相稀释，将有机层用nahco3饱和水溶液洗涤，经相分离器干燥并且浓缩。将甲苯(43ml)添加至残余物中，随后添加socl2(2.95ml，40.4mmol)并且在90℃下加热15min。将冷却的rm通过添加meoh淬灭并且浓缩。将残余物吸收到etoac中，并且用nahco3饱和水溶液洗涤，经相分离器干燥并且浓缩。将残余物通过正相色谱法(硅胶，洗脱液：庚烷:etoac＝100:0至60:40)纯化以得到外消旋标题化合物。将对映异构体通过手性hplc(仪器：gilson trilution i系统；柱：chiralpak ad-h；5μm，250x30mm在25℃下；洗脱液：正庚烷(用meoh饱和):etoh 80:20+0.1％et2nh；流速：20ml/min；检测：265nm)分离以给出作为第一洗脱峰的呈黄色粉末的标题化合物。
[0868]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ7.88(s,1h),7.48(t,1h),7.24(d,1h),7.15-7.11(m,1h),7.09-7.02(m,1h),7.01(s,1h),4.59(d,1h),4.47-4.41(m,1h),3.96(d,1h),3.60-3.53(m,1h),2.26-2.18(m,1h),1.96-1.92(m,2h),1.82
ꢀ‑
1.76(m,1h)。
[0869]
lc-ms：rt＝3.15min，宽峰；ms m/z[m+h]
+
405.1；uplc-ms 4。
[0870]
手性-hplc：rt＝3.06min；(r)-8'-(二氟甲氧基)-9-氟-6'-(三氟甲基)-3,4-二氢-2h,3'h-螺[苯并[b]噁庚英-5,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]作为第二洗脱峰，rt＝5.23min；c-hplc 37。
[0871]
实例70：(s)-8-(二氟甲氧基)-1'-(二氟甲基)-8',8'-二氟-6-(三氟甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉]
[0872][0873]
在正ar压力下，将dast(58μl，436μmol)添加至(s)-8-(二氟甲氧基)-8',8'-二氟-6-(三氟甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉]-1'-甲醛(中间体ci，80mg，175μmol)在dcm(1ml)中的搅拌溶液(用冰浴冷却)中。在0℃下1小时后，添加另外的dast(58μl，436μmol)并且将rm在0℃下搅拌1小时，随后在rt下搅拌1小时。将rm在dcm和nahco3饱和水溶液之间分配，将水层用dcm萃取，通过穿过相分离器干燥并且蒸发。将残余物通过正相色谱法(12g sio2筒，洗脱液：庚烷:etoac 90:10至0:100)纯化以给出呈黄色泡沫的标题化合物。
[0874]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.83(d,1h),8.01(s,1h),7.70(d,1h),7.32(t,1h),7.24(t,1h),7.09(d,1h),4.35(dd,2h),2.73-2.40(m,2h),2.22-2.02(m,2h)。
[0875]
lc-ms：rt＝0.83min；ms m/z[m+h]
+
458.3；uplc-ms 1。
[0876]
使用与用于制备实例1至70类似的方法制备以下实例。
[0877]
实例71：(s)-5'-溴-4',8-二氯-6-(三氟甲基)-2',3'-二氢-3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-茚]
[0878][0879]
按照与所述的制备中间体j(步骤4a)、k、p和实例28的程序类似的程序制备。lc-ms：rt＝0.89min；ms m/z[m+h]
+
437.0/439.0/441.0；uplc-ms 1。
[0880]
实例72：(s)-5'-溴-8-(二氟甲氧基)-6-(三氟甲基)-2',3'-二氢-3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-茚]
[0881][0882]
按照与所述的制备中间体a、at(步骤2)和实例4的程序类似的程序制备。lc-ms：rt＝0.83min；ms m/z[m+h]
+
434.9/436.9；uplc-ms 1。
[0883]
实例73：(s)-8-(二氟甲氧基)-5'-碘-2',3'-二氢-3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-茚]-6-甲腈
[0884][0885]
按照与所述的制备中间体at(步骤2b)和实例2的程序类似的程序制备。lc-ms：rt＝3.18min；ms m/z[m+h]
+
440.1；uplc-ms 4。
[0886]
实例74：(s)-8-(二氟甲氧基)-4'-氟-5',6-双(三氟甲基)-2',3'-二氢-3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-茚]
[0887][0888]
按照与所述的制备中间体j(步骤4a和5a)，中间体p、q、aw和实例28、40和3的程序类似的程序制备。lc-ms：rt＝0.87min；ms m/z[m+h]
+
443.2；uplc-ms 1。
[0889]
实例75：(s)-8-(二氟甲氧基)-6-(三氟甲基)-2',3'-二氢-3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-茚]
[0890][0891]
按照与所述的制备中间体a、at(步骤2)和实例4的程序类似的程序制备。lc-ms：rt＝0.71min；ms m/z[m+h]
+
357.0；uplc-ms 1。
[0892]
实例76：(s)-5',8-二氟-6'-甲氧基-6-(三氟甲基)-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]
[0893][0894]
按照与所述的制备中间体k、p、实例28和一般程序方案5的程序类似的程序制备。lc-ms：rt＝0.72min；ms m/z[m+h]
+
371.2；uplc-ms 1。
[0895]
实例77：(s)-8-氟-6,6'-双(三氟甲基)-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]
[0896][0897]
按照与所述的制备中间体j(步骤1和2)，中间体k、p和实例16的程序类似的程序制备。lc-ms：rt＝0.83min；ms m/z[m+h]
+
391.2；uplc-ms 1。
[0898]
实例78：外消旋-5',6',8-三氟-6-(三氟甲基)-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]
[0899][0900]
按照与所述的制备中间体j(步骤1和2)，中间体k、p和实例16的程序类似的程序制备。lc-ms：rt＝0.74min；ms m/z[m+h]
+
359.2；uplc-ms 1。
[0901]
实例79：(s)-8-氯-5'-氟-6-(三氟甲基)-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]
[0902][0903]
按照与所述的制备中间体at(步骤1和2)，中间体p和实例28的程序类似的程序制备。lc-ms：rt＝0.72min；ms m/z[m+h]
+
357.2/359.1；uplc-ms 1。
[0904]
实例80：(s)-6'-溴-5'-氟-8-甲氧基-6-(三氟甲基)-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]
[0905][0906]
按照与所述的制备中间体k、p、实例28和一般程序方案5的程序类似的程序制备。lc-ms：rt＝0.84min；ms m/z[m+h]
+
431.2/433.2uplc-ms 2。
[0907]
实例81：外消旋-5'-溴-8-(二氟甲氧基)-6-(三氟甲基)-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]
[0908]
[0909]
按照与所述的制备中间体a、j(步骤1和2)，中间体k、p和实例28的程序类似的程序制备。lc-ms：rt＝0.84min；ms m/z[m+h]
+
449.1/451.1；uplc-ms 1。
[0910]
实例82：(s)-5'-氯-8-(二氟甲氧基)-6'-氟-6-(三氟甲基)-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]
[0911][0912]
按照与所述的制备中间体a、j(步骤1和2)，中间体k、p和实例28的程序类似的程序制备。lc-ms：rt＝0.89min；ms m/z[m+h]
+
423.2/425.2；uplc-ms 1。
[0913]
实例83：(2s,3'r,4'r)-6'-溴-8-(二氟甲氧基)-3',4',5'-三氟-6-(三氟甲基)-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]
[0914][0915]
按照与所述的制备实例10和24的程序类似的程序制备。lc-ms：rt＝0.91min；ms m/z[m+h]
+
503.1/505.1；uplc-ms 1。
[0916]
实例84：(s)-8-(二氟甲氧基)-5'-氟-6'-甲氧基-6-(三氟甲基)-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]
[0917][0918]
按照与所述的制备中间体k、p，实例28和一般程序方案5的程序类似的程序制备。lc-ms：rt＝0.80min；ms m/z[m+h]
+
419.2；uplc-ms 1。
[0919]
实例85：(s)-8-(二氟甲氧基)-5',6'-二氟-6-(三氟甲基)-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]
[0920][0921]
按照与所述的制备中间体a、j(步骤1和2)、k、p和实例28的程序类似的程序制备。lc-ms：rt＝0.79min；ms m/z[m+h]
+
407.1；uplc-ms 1。
[0922]
实例86：(s)-8-(二氟甲氧基)-6,6'-双(三氟甲基)-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑
并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]
[0923][0924]
按照与所述的制备中间体a、j(步骤1和2)、k、o、q和实例28和3的程序类似的程序制备。lc-ms：rt＝0.90min；ms m/z[m+h]
+
439.2；uplc-ms 1。
[0925]
实例87：外消旋-8-(二氟甲氧基)-5',6-双(三氟甲基)-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]
[0926][0927]
按照与所述的制备中间体j(步骤1和2)、k、o、q和实例28和3的程序类似的程序制备。lc-ms：rt＝0.88min；ms m/z[m+h]
+
439.2；uplc-ms 1。
[0928]
实例88：(s)-5'-氯-8-(二氟甲氧基)-6-(三氟甲基)-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]
[0929][0930]
按照与所述的制备中间体j(步骤1和2)、k、o、q和实例3和28的程序类似的程序制备。lc-ms：rt＝0.84min；ms m/z[m+h]
+
405.2/407.2；uplc-ms 1。
[0931]
实例89：(s)-6'-溴-6-氯-8-(二氟甲氧基)-5'-氟-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]
[0932][0933]
按照与所述的制备中间体k、o、q和实例3和28的程序类似的程序制备。lc-ms：rt＝0.85min；ms m/z[m+h]+433.1/435.1/437.1；uplc-ms 1。
[0934]
实例90：(s)-6'-溴-8-(二氟甲氧基)-6-(三氟甲基)-2',3'-二氢-3h,4'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]-4'-酮
[0935][0936]
按照与所述的制备中间体a、aq(步骤1-4)、k、z(步骤1-3)和实例23的程序类似的程序制备。lc-ms：rt＝3.32min；ms m/z[m+h]
+
463.2/465.2；uplc-ms 4。
[0937]
实例91：(s)-8-(二氟甲氧基)-5',6'-二氟-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]-6-甲腈
[0938][0939]
按照与所述的制备中间体b、j(步骤1和2)、k和实例2的程序类似的程序制备。lc-ms：rt＝0.72min；ms m/z[m+h]
+
364.2；uplc-ms 1。
[0940]
实例92：(s)-6'-溴-8-(二氟甲氧基)-4',4',5'-三氟-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]-6-甲腈
[0941][0942]
按照与所述的制备中间体b、j(步骤1和2)、k、z(步骤1-3)、g，实例4和23的程序类似的程序制备。lc-ms：rt＝4.17min；ms m/z[m+h]
+
460.2/462.2；uplc-ms 4。
[0943]
实例93：外消旋-8-(二氟甲氧基)-6-(三氟甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉]
[0944][0945]
按照与所述的制备中间体a、k和实例4的程序类似的程序制备。lc-ms：rt＝0.52min；ms m/z[m+h]
+
372.3；uplc-ms 1。
[0946]
实例94：(s)-1'-氯-8-(二氟甲氧基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉]-6-甲腈
[0947][0948]
按照与所述的制备中间体b、j(步骤1和2)、k和实例2的程序类似的程序制备。lc-ms：rt＝0.59min；ms m/z[m+h]
+
363.2；uplc-ms 1。
[0949]
实例95：(s)-8-氯-8'-(氟甲氧基)-6'-(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]
[0950][0951]
按照与所述的制备中间体e、j(步骤1和2)、k和实例4的程序类似的程序制备。lc-ms：rt＝0.70min；ms m/z[m+h]
+
389.1/391.2；uplc-ms 1。
[0952]
实例96：(s)-8-氯-8'-(二氟甲氧基)-6'-(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]-7-甲腈
[0953][0954]
按照与所述的制备中间体a、aq(步骤1-4)、g、h、i和实例28的程序类似的程序制备。lc-ms：rt＝0.82min；ms m/z[m+h]
+
432.1/434.1；uplc-ms 1。
[0955]
实例97：(3r,4s)-7-氯-8'-(二氟甲氧基)-3,8-二氟-6'-(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]
[0956][0957]
按照与所述的制备中间体a、ab、aq(步骤1-4)、k、g、h、i和实例9和28以及一般程序方案5的程序类似的程序制备。lc-ms：rt＝0.84min；ms m/z[m+h]
+
443.1/445.0；uplc-ms 1。
[0958]
实例98：(3r,4s)-8'-(二氟甲氧基)-3,7,8-三氟-6'-(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]
[0959][0960]
按照与所述的制备中间体a、ab、aq(步骤1-4)、k和实例4和9的程序类似的程序制备。lc-ms：rt＝0.78min；ms m/z[m+h]
+
427.1；uplc-ms 1。
[0961]
实例99：(s)-8'-(二氟甲氧基)-8-氟-7-(甲硫基)-6'-(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]
[0962][0963]
按照与所述的制备中间体a、j(步骤1和2)、k、aw、bh和实例4的程序类似的程序制备。lc-ms：rt＝0.80min；ms m/z[m+h]
+
437.0；uplc-ms 1。
[0964]
实例100：(s)-7-溴-8-氯-8'-(二氟甲氧基)-6'-(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]
[0965][0966]
按照与所述的制备中间体a、aq(步骤1-4)、k、g、h、i和实例28的程序类似的程序制备。lc-ms：rt＝0.88min；ms m/z[m+h]
+
485.1/487.0/489.0；uplc-ms 1。
[0967]
实例101：外消旋-8'-(二氟甲氧基)-3,8-二氟-6'-(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]
[0968][0969]
按照与所述的制备中间体a、ab、aq(步骤1-4)、k、g、h、i和实例9和28的程序类似的程序制备。lc-ms：rt＝0.71min；ms m/z[m+h]
+
409.2；uplc-ms 1。
[0970]
实例102：(s)-7,8-二溴-8'-(二氟甲氧基)-6'-(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]
[0971][0972]
按照与所述的制备中间体a、aq(步骤1-4)、k、g、h、i和实例28的程序类似的程序制备。lc-ms：rt＝0.89min；ms m/z[m+h]
+
529.0/531.0/533.0；uplc-ms 1。
[0973]
实例103：(s)-8'-(二氟甲氧基)-8-氟-7-甲氧基-6'-(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]
[0974][0975]
按照与所述的制备中间体a、j(步骤1和2)、k，实例4以及一般程序方案5的程序类似的程序制备。lc-ms：rt＝0.71min；ms m/z[m+h]
+
421.2；uplc-ms 1。
[0976]
实例104：(s)-8'-(二氟甲氧基)-6',8-双(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]
[0977][0978]
按照与所述的制备中间体a、j(步骤1和2)、k和实例28的程序类似的程序制备。lc-ms：rt＝3.79min；ms m/z[m+h]
+
441.2；uplc-ms 4。
[0979]
实例105：(s)-8'-(二氟甲氧基)-8-氟-7-(三氟甲氧基)-6'-(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]
[0980][0981]
按照与所述的制备中间体a、aq(步骤1-4)、k、g、h、i和实例28的程序类似的程序制备。lc-ms：rt＝0.92min；ms m/z[m+h]+475.2；uplc-ms 1。
[0982]
实例106：(s)-8'-(二氟甲氧基)-7-((二氟甲基)硫代)-8-氟-6'-(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]
[0983][0984]
按照与所述的制备中间体a、aq(步骤1-4)、k、aw、l(步骤1和2)和实例28的程序类似的程序制备。lc-ms：rt＝0.89min；ms m/z[m+h]
+
473.1；uplc-ms 1。
[0985]
实例107：(s)-8-溴-8'-(二氟甲氧基)-6'-(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]
[0986][0987]
按照与所述的制备中间体a、j(步骤1和2)、k、g、h、i和实例28的程序类似的程序制备。lc-ms：rt＝0.77min；ms m/z[m+h]
+
451.0/453.0；uplc-ms 1。
[0988]
实例108：外消旋-8-(二氟甲氧基)-8'-氟-6,7'-双(三氟甲基)-3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,4'-异色满]
[0989][0990]
按照与所述的制备中间体a、bz(步骤1-6)、o和实例28的程序类似的程序制备。lc-ms：rt＝0.97min；ms m/z[m+h]
+
459.1；uplc-ms 1。
[0991]
实例109：(2s)-8-(二氟甲氧基)-8'-氟-3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,4'-硫代色满]-6-甲腈-2',2',3'-d3[0992][0993]
按照与所述的制备中间体b、aq(步骤1-4)、k、g、h、i、cf(步骤2)、cb(步骤3)和实例28的程序类似的程序制备。lc-ms：rt＝2.71min；ms m/z[m+h]
+
367.3/368.3；uplc-ms 4。
[0994]
实例110：(s)-7'-溴-8-(二氟甲氧基)-8'-氟-3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,4'-硫代色满]-6-甲腈
[0995][0996]
按照与所述的制备中间体b、cb(步骤1-4)、ao、j(步骤1和2)、k和实例2的程序类似的程序制备。lc-ms：rt＝3.94min；ms m/z[m+h]
+
442.1/444.1；uplc-ms 4。
[0997]
实例111：(s)-8-(二氟甲氧基)-8'-氟-6-(三氟甲基)-3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2，4'-硫代色满]-7'-甲腈
[0998][0999]
按照与所述的制备中间体a、cb(步骤1-4)、ao，实例2和实例15的程序类似的程序制备。lc-ms：rt＝3.43min；ms m/z[m+h]
+
432.2/433.2；uplc-ms 4。
[1000]
实例112：(s)-8-(二氟甲氧基)-7',8'-二氟-3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,4'-硫代色满]-6-甲腈
[1001][1002]
按照与所述的制备中间体b、cb(步骤1-4)、ao、g、h、i和实例28的程序类似的程序制备。lc-ms：rt＝0.79min；ms m/z[m+h]
+
382.2；uplc-ms 1。
[1003]
实例113：(s)-8-(二氟甲氧基)-7',8'-二氟-6-(三氟甲基)-3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,4'-硫代色满]
[1004][1005]
按照与所述的制备中间体a、cb(步骤1-4)、ao、g、h、i和实例28的程序类似的程序制备。lc-ms：rt＝0.81min；ms m/z[m+h]
+
425.2；uplc-ms 1。
[1006]
实例114：(s)-8'-氟-8-(氟甲氧基)-6,7'-双(三氟甲基)-2',3'-二氢-3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,4'-硫代吡喃并[3,2-c]吡啶]
[1007][1008]
按照与所述的制备中间体e、cf(步骤1-9)和实例4的程序类似的程序制备。lc-ms：rt＝0.82min；ms m/z[m+h]
+
458.1；uplc-ms 1。
[1009]
实例115：(s)-8-(二氟甲氧基)-8'-氟-6-(三氟甲基)-3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,4'-异硫代色满]
[1010][1011]
按照与所述的制备中间体a、cg、j(步骤1和2)、k和实例2的程序类似的程序制备。lc-ms：rt＝3.43min；ms m/z[m+h]
+
407.1；uplc-ms 4。
[1012]
实例116：(s)-8-(二氟甲氧基)-7'-氟-6-(三氟甲基)-3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,4'-异硫代色满]
[1013][1014]
按照与所述的制备中间体a、cb(步骤1和2)、j(步骤1和2)、k和实例2的程序类似的程序制备。lc-ms：rt＝3.33min；ms m/z[m+h]
+
407.1；uplc-ms 4。
[1015]
实例117：(s)-8'-(二氟甲氧基)-8,9-二氟-6'-(三氟甲基)-3,4-二氢-2h,3'h-螺[苯并[b]噁庚英-5,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]
[1016][1017]
按照与所述的制备中间体a、ch(步骤1-9)、g和实例28的程序类似的程序制备。lc-ms：rt＝0.78min；ms m/z[m+h]
+
423.2；uplc-ms 1。
[1018]
实例118：外消旋-9-氯-8'-(二氟甲氧基)-6'-(三氟甲基)-3,4-二氢-2h,3'h-螺[苯并[b]噁庚英-5,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]
[1019][1020]
按照与所述的制备中间体a、ch(步骤1和2)、j(步骤1和2)和实例2的程序类似的程序制备。lc-ms：rt＝0.76min；ms m/z[m+h]
+
421.1/423.1；uplc-ms 1。
[1021]
实例119：(s)-8-氯-8'-(二氟甲氧基)-9-氟-6'-(三氟甲基)-3,4-二氢-1h,3'h-螺[苯并[c]噁庚英-5,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]
[1022][1023]
按照与所述的制备中间体a、cj(步骤1-10)、g和实例28的程序类似的程序制备。lc-ms：rt＝0.78min；ms m/z[m+h]
+
439.2/441.2；uplc-ms 1。
[1024]
中间体的制备
[1025]
中间体a：2-氯-3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶
[1026][1027]
使用vapourtec(r2c/r4/vapourtec flow commander r系列平台报告版本：1.9.9.5)将2-氯-5-(三氟甲基)吡啶-3-醇在乙腈(0.5mol/l，流速3.08ml/min)中的溶液与koh在水中的溶液(6mol/l，流速3.85ml/min)混合，随后通过第二t型件(t-piece)添加(溴二氟甲基)膦酸二乙酯在乙腈中的溶液(1mol/l，流速3.08ml/min)，然后在10ml pfa线圈中反应，停留时间为1min。将所得的两相混合物在rt下搅拌过夜，分离各层并且将水层用tbme萃取。将合并的有机层用2n naoh水溶液洗涤2x，然后用盐水洗涤2x，经na2so4干燥，过滤并且使用旋转蒸发仪浓缩(最低压力10毫巴/浴温40℃)。将粗产物蒸馏并且将含有级分的产物合并以给出呈无色液体的标题化合物。
[1028]1h nmr(600mhz,dmso-d6)δ8.77(dd,1h),8.30(d,1h),7.50(t,1h)。
[1029]
通过以下替代路线也可以合成中间体a：
[1030]
将(溴二氟甲基)膦酸二乙酯(17.4ml，101mmol)逐滴添加至2-氯-5-(三氟甲基)吡啶-3-醇(10g，50.6mmol)和koh(56.8g，1012mmol)在乙腈(100ml)和水(100ml)中的溶液(用冰浴冷却)中：注意：放热反应！在0℃下搅拌10min后，将反应混合物在rt下再搅拌1小时，然后在水和dcm之间分配。将有机层用盐水洗涤，经na2so4干燥并且在真空下浓缩以给出呈黄色油状物的标题化合物。
[1031]
中间体b：6-氯-5-(二氟甲氧基)烟腈
5-(三氟甲基)吡啶-3-醇(3.50g，17.5mmol)在dmf(40ml)中的溶液中。在rt下搅拌30min后，经2min逐滴添加乙腈(17.5ml，35.1mmol)中的溴氟甲烷并且将rm在rt下搅拌18小时。然后将rm在etoac和h2o之间分配，将水层用etoac进一步萃取，然后将合并的有机层用盐水洗涤，经na2so4干燥并蒸发。将粗产物吸收在isolute上并且通过正相色谱法(80g硅胶筒；洗脱液：己烷:tbme 100:0至50:50)纯化。将含有级分的产物合并并且蒸发，以给出呈白色结晶固体的标题化合物。
[1047]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.71-8.52(m,1h),8.13(s,1h),6.12(d,2h)。
[1048]
中间体f：2-溴-5-氯-3-(二氟甲氧基)吡啶
[1049][1050]
在rt下，将2-氯-2,2-二氟乙酸钠(731mg，4.80mmol)添加至2-溴-5-氯吡啶-3-醇(500mg，2.40mmol)和碳酸钾(398mg，2.88mmol)在dmf(6ml)和水(0.75ml)中的混合物中，然后将rm加热至100℃持续17小时。将冷却的rm倒入水中并用etoac萃取3x，将合并的有机层用水洗涤2x，并且用相分离器分离。将有机层在真空中浓缩以给出呈黄色液体油状物的标题化合物。
[1051]1h nmr(600mhz,dmso-d6)δ8.44(d,1h),8.07(d,1h),7.43(t,1h)。
[1052]
中间体g：(s)-(5-溴-1-((3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)氨基)-4-氟-2,3-二氢-1h-茚-1-基)甲醇
[1053][1054]
向(s)-5-溴-3'-(3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)-4-氟-2,3-二氢螺[茚-1,4'-噁唑烷]-2'-酮(中间体h，820mg，1.24mmol)在etoh(4ml)中的悬浮液中添加thf(10ml)，随后添加30％naoh水溶液(2.47ml，9.90mmol)。将rm在70℃下搅拌4小时，冷却并且在na2co3饱和水溶液和etoac之间分配。将水层用etoac萃取，将合并的有机层用盐水洗涤，经na2so4干燥并蒸发。将粗产物吸收在isolute上并且通过正相色谱法(40g sio2柱，洗脱液：己烷:[dcm-meoh 95:5]90:10至40:60)纯化。将含有级分的产物合并并且蒸发，以给出呈棕色树脂的标题化合物。
[1055]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.02(s,1h),7.57(s,1h),7.55-7.16(m,2h),6.88(d,1h),6.61(s,1h),5.54(t,1h),3.59(m,2h),3.12(dd,1h),2.94(m,1h),2.65(q,1h),2.34-2.18(m,1h)。
[1056]
lc-ms：rt＝1.30min；ms m/z[m+h]
+
471.0/472.9；uplc-ms 1。
[1057]
中间体h：(s)-5-溴-3'-(3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)-4-氟-2,3-二氢螺[茚-1,4'-噁唑烷]-2'-酮
[1058][1059]
在ar气氛下，向(s)-5-溴-4-氟-2,3-二氢螺[茚-1,4'-噁唑烷]-2'-酮(中间体i，1.0g，3.29mmol)在dmf(12ml)中的溶液中添加2-氯-3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶(中间体a，1.06g，4.27mmol)、cs2co3(2.14g，6.57mmol)和溴化铜(i)(0.24g，1.64mmol)。将rm在120℃下在加热块中搅拌1小时，然后在140℃下在微波中持续1小时。添加另外的2-氯-3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶(中间体a，400mg，1.62mmol)，并且将rm在120℃下在加热块中再搅拌1.5小时。然后将冷却的rm通过hyflo助滤剂垫过滤并且将滤液在nahco3饱和水溶液和etoac之间分配。将水层用etoac萃取，将合并的有机层用h2o和盐水洗涤，经na2so4干燥并蒸发。将粗产物吸收在isolute上并且通过正相色谱法(40g sio2柱，洗脱液：己烷:tbme 100:0至40:60)纯化。将含有级分的产物合并并且蒸发，以给出呈红棕色固体的标题化合物。
[1060]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.63(s,1h),8.09(s,1h),7.64-7.16(m,2h),7.13(d,1h),4.67(dd,2h),2.97(q,3h),2.57(dt,1h)。
[1061]
lc-ms：rt＝1.26min；ms m/z[m+h]
+
496.8/498.8；uplc-ms 1。
[1062]
中间体i：(s)-5-溴-4-氟-2,3-二氢螺[茚-1,4'-噁唑烷]-2'-酮
[1063][1064]
向(s)-(1-氨基-5-溴-4-氟-2,3-二氢-1h-茚-1-基)甲醇(中间体j，10g，38.1mmol)和et3n(11.1ml，80mmol)在dcm(150ml)中的溶液中经1小时逐滴添加dcm(50ml)中的三光气(4.52g，15.2mmol)，同时保持温度低于25℃。将rm在rt下搅拌1小时，用nh4cl饱和水溶液(100ml)淬灭然后在rt下搅拌15min。将混合物用nh4cl饱和水溶液和dcm稀释。将水层用dcm萃取2x，将合并的有机层经na2so4干燥并蒸发以给出呈米色固体的标题化合物。
[1065]
lc-ms：rt＝0.85min；ms m/z[m+h]
+
286.0/287.9；uplc-ms 1。
[1066]
中间体j：(s)-(1-氨基-5-溴-4-氟-2,3-二氢-1h-茚-1-基)甲醇
[1067]
步骤1：外消旋-5'-溴-4'-氟-2',3'-二氢螺[咪唑烷-4,1'-茚]-2,5-二酮
[1068][1069]
向5-溴-4-氟茚满酮(100g，436mmol)和碳酸铵(502g，5.23mol)在甲醇(1.2l)和水(1.2l)中的混合物中添加kcn(35.5g，545mmol)，并且将反应混合物在60℃下搅拌24小时。然后在减压下将meoh从冷却的rm中除去并且通过过滤将沉淀的产物收集。将固体用水(500ml)洗涤3x，并且在高真空下在50℃下干燥8小时以给出呈黑色固体的标题化合物。
[1070]1h nmr:(400mhz,dmso-d6)δ10.93(br,s,1h),8.49(s,1h),7.60-7.55(m,1h),6.99(d,1h),3.12-2.98(m,2h),2.65-2.54(m,1h),2.26-15(m,1h)。
[1071]
步骤2：外消旋-1-氨基-5-溴-4-氟-2,3-二氢-1h-茚-1-甲酸
[1072][1073]
向h2o(1.2l)中的5'-溴-4'-氟-2',3'-二氢螺[咪唑烷-4,1'-茚]-2,5-二酮(步骤1，120g，401mmol)中添加koh(225g，4.01mol)，并且将rm加热至回流16小时。将rm冷却至rt，用6n hcl水溶液中和至ph＝6～7，并且将沉淀通过过滤收集，用水(500ml)和tbme(500ml)洗涤。将固体在真空下在50℃下干燥6小时以给出呈黑色固体的标题化合物。
[1074]1h nmr:(400mhz,dmso-d6)δ7.58-7.51(m,1h),7.19-7.12(m,1h),3.13-2.99(m,2h),2.75-2.60(m,1h),2.16
ꢀ‑
2.02(m,1h)。
[1075]
步骤3：外消旋-乙基1-氨基-5-溴-4-氟-2,3-二氢-1h-茚-1-甲酸酯
[1076][1077]
将socl2(156ml)添加至etoh(2.0l)中，在-10℃下冷却并且将溶液在-10℃下搅拌30min。然后将dmf(7ml)和1-氨基-5-溴-4-氟-2,3-二氢-1h-茚-1-甲酸(步骤2，130g，474mmol)添加至溶液中，并且将混合物在80℃下加热4.5小时。将rm蒸发并且将残余物溶解于h2o(500ml)和dcm(1.0l)中。添加k2co3饱和水溶液(400ml)，将水相用etoac萃取2x，将合并的有机层用盐水洗涤，干燥并浓缩以给出呈黑色油状物的标题化合物。
[1078]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ7.64-7.49(m,1h),7.17(d,1h),4.13-4.01(m,2h),3.19-2.91(m,2h),2.77
ꢀ‑
2.58(m,1h),2.24-2.04(m,1h),1.13(t,3h)。
[1079]
步骤4：(s)-(1-氨基-5-溴-4-氟-2,3-二氢-1h-茚-1-基)甲醇
[1080][1081]
将乙基1-氨基-5-溴-4-氟-2,3-二氢-1h-茚-1-甲酸酯(步骤3，135g，447mmol)溶解于thf(1.5l)中并且将溶液用冰浴冷却。然后在0℃下将lialh4(22g，581mmol)分批添加至搅拌的rm中，并且在rt下再继续搅拌3小时。然后将rm重新冷却至0℃，小心地逐滴添加水(20ml)，随后添加15％naoh水溶液(60ml)和水(20ml)。添加mgso4并将悬浮液搅拌30min，并且将混合物过滤。将滤液浓缩，并且将粗产物通过正相色谱法(硅胶，洗脱液：石油醚:etoac 50:50至0:100)纯化以给出呈灰色固体的外消旋产物。然后将外消旋体通过sfc(仪器：thar 200制备型sfc；柱：cellulose-2，300
×
50mm i.d.，10μm，38℃；洗脱液：co2:[异丙醇+0.1％nh4oh]80:20；流速：200ml/min；检测：220nm；bpr：100巴；进样：600x5ml)分离以给出作为第一洗脱峰的标题化合物。
[1082]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ7.51-7.40(m,1h),7.08(d,1h),3.34(d,2h),3.00-2.84(m,1h),2.84-2.65(m,1h),2.33-2.19(m,1h),1.88-1.71(m,1h)。
[1083]
lc-ms：rt＝0.55min；ms m/z[m+h]
+
260.1/262.0；uplc-ms 2。
[1084]
手性-hplc：rt＝6.19min；(r)-(1-氨基-5-溴-4-氟-2,3-二氢-1h-茚-1-基)甲醇作为第二峰洗脱rt＝7.31min；c-hplc 3。
[1085]
通过以下替代路线也可以合成中间体j：
[1086]
步骤1a：外消旋-5-溴-1-((叔丁氧羰基)氨基)-4-氟-2,3-二氢-1h-茚-1-甲酸
[1087][1088]
将boc-酸酐(11.14ml，48.0mmol)和na2co3(8.48g，80mmol)添加至外消旋-1-氨基-5-溴-4-氟-2,3-二氢-1h-茚-1-甲酸(步骤2，10.96g，40mmol)在水(20ml)和accn(100ml)中的混合物中并且在rt下搅拌2小时。然后将rm用冰浴冷却并用20％khso4水溶液酸化，并且将混合物用etoac萃取，将合并的有机层用盐水洗涤，经mgso4干燥，过滤并浓缩。将残余物用et2o-己烷2:1研磨，过滤，并且干燥以给出呈米色固体的标题化合物。
[1089]
lc-ms：rt＝1.07min；ms m/z[m-h]-372.0/374.0；uplc-ms 1。
[1090]
步骤2a：(s)-5-溴-1-((叔丁氧羰基)氨基)-4-氟-2,3-二氢-1h-茚-1-甲酸向外消旋-5-溴-1-((叔丁氧羰基)氨基)-4-氟-2,3-二氢-1h-茚-1-甲酸(步骤1a，12.72g，34mmol)在etoh(50ml)中的悬浮液中添加辛可尼定(6.01g，20.40mmol)和net3(1.90ml，13.60mmol)并且将混合物加热以给出澄清溶液。将澄清溶液浓缩(除去约90％-95％的etoh)并且在55℃下将剩余的油状物溶解于tbme(80ml)中，然后用(r)-5-溴-1-((叔丁氧羰基)氨基)-4-氟-2,3-二氢-1h-茚-1-甲酸辛可尼定盐的晶体引晶，并允许rm缓慢冷却至rt。将己烷(25ml)添加至悬浮液中并且继续搅拌18小时。添加另外的己烷(10ml)并将rm用冰浴冷却，并且通过过滤收集米色固体。在75℃下，将固体溶解于iproh(40ml)中并添加tbme(30ml)和庚烷(40ml)，并且将溶液用(r)-5-溴-1-((叔丁氧羰基)氨基)-4-氟-2,3-二氢-1h-茚-1-甲酸辛可尼定盐的晶体引晶。允许混合物静置18小时并将晶体通过过滤收集，并且干燥以给出(r)-5-溴-1-((叔丁氧羰基)氨基)-4-氟-2,3-二氢-1h-茚-1-甲酸辛可尼定盐(99％ee)。将母液从iproh-tbme-己烷的第二结晶2x中结晶，给出呈浅米色固体的标题化合物的辛可尼定盐(99.6％ee)。
[1091]
步骤3a：(s)-5-溴-1-((叔丁氧羰基)氨基)-4-氟-2,3-二氢-1h-茚-1-甲酸
[1092][1093]
将(s)-5-溴-1-((叔丁氧羰基)氨基)-4-氟-2,3-二氢-1h-茚-1-甲酸辛可尼定盐(步骤2a，1.34g，2.0mmol)的悬浮液悬浮在etoh中并且用冰浴冷却。添加hcl水溶液(4n)至ph 3-4，并且将rm搅拌10min并用etoac萃取3x。将合并的有机层用冷的hcl水溶液(0.2n)洗涤，用盐水洗涤2x，经mgso4干燥，过滤并浓缩以给出呈泡沫的标题化合物。
[1094]
可替代地，可以将外消旋-5-溴-1-((叔丁氧羰基)氨基)-4-氟-2,3-二氢-1h-茚-1-甲酸通过手性sfc(仪器：thar 200制备型sfc；柱：chiralpak ad 300
×
50mm i.d.10μm，38℃；洗脱液：co2：[meoh+0.1％nh4oh]70:30；流速：200ml/min；检测：220nm；bpr：100巴)分离以给出作为第一洗脱峰的标题化合物。
[1095]
lc-ms：rt＝1.03min；ms m/z[m-h]-372.1/374.1；uplc-ms 2。
[1096]
手性-hplc：rt＝2.74min；(r)-5-溴-1-((叔丁氧羰基)氨基)-4-氟-2,3-二氢-1h-茚-1-甲酸作为第二峰洗脱rt＝3.82min；c-sfc 19。
[1097]
步骤4a：(s)-1-氨基-5-溴-4-氟-2,3-二氢-1h-茚-1-甲酸盐酸盐
[1098][1099]
将1,4-二噁烷(4n，10ml，40mmol)中的hcl的溶液添加至(s)-5-溴-1-((叔丁氧羰基)氨基)-4-氟-2,3-二氢-1h-茚-1-甲酸(步骤3a，2.13g，5.7mmol)在dcm(3ml)中的溶液中并且将rm在rt下搅拌1小时。将rm浓缩并将残余物用et2o研磨。过滤并干燥后获得呈白色结晶固体的标题化合物。
[1100]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ7.72-7.63(m,1h),7.35(d,1h),3.33-3.25(m,1h),3.23-3.15(m,1h),2.86
ꢀ‑
2.82(m,1h),2.51-2.42(m,1h)。
[1101]
步骤5a：(s)-(1-氨基-5-溴-4-氟-2,3-二氢-1h-茚-1-基)甲醇盐酸盐
[1102][1103]
在rt下在正氩气压力下，向(s)-1-氨基-5-溴-4-氟-2,3-二氢-1h-茚-1-甲酸盐酸盐(步骤4a，1.77g，5.7mmol)在thf(30ml)中的悬浮液中添加bh3在thf(1m，17.10ml，17.10mmol)中的溶液。将rm在rt下搅拌18小时然后通过逐滴添加meoh/thf混合物淬灭。将rm用meoh蒸发3x，添加hcl在et2o(2m，3.1ml，6.2mmol)中的溶液，并且将混合物用et2o再次稀释并伴随冰浴冷却搅拌1小时。将白色固体通过过滤收集并干燥以给出标题化合物。
[1104]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.62(s,2h),7.63(t,1h),7.47(d,1h),3.81-3.69(m,2h),3.25-2.90(m,2h),2.52-2.43(m,1h),2.35-2.22(m,1h)。
[1105]
中间体k：(s)-(1-氨基-4,5-二氟-2,3-二氢-1h-茚-1-基)甲醇
[1106][1107]
通过与中间体m，步骤7相似的方法，通过用外消旋-1-氨基-4,5-二氟-2,3-二氢-1h-茚-1-甲酸代替7-氨基-3-(三氟甲基)-6,7-二氢-5h-环戊并[c]吡啶-7-甲酸(中间体m，步骤6)制备标题化合物。将对映异构体通过手性hplc(仪器：vwr laprep hplc制备型；柱：chiralcel oz-i 20μm，5x42cm；洗脱液：庚烷:etoh:meoh 95:2.5:2.5+0.1％et2nh；流速：100ml/min；检测：260nm)分离以给出作为第一洗脱峰的标题化合物。
[1108]
lc-ms：rt＝0.41min；ms m/z[m+h]
+
200.1；uplc-ms 1。
[1109]
手性-hplc：rt＝5.60min；(r)-(1-氨基-4,5-二氟-2,3-二氢-1h-茚-1-基)甲醇作为第二洗脱峰，rt＝8.8min；c-hplc 1。
[1110]
中间体l：(s)-8-(二氟甲氧基)-4'-氟-6-(三氟甲基)-2',3'-二氢-3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-茚]-5'-硫醇
[1111]
步骤1：2-乙基己基3-(((s)-8-(二氟甲氧基)-4'-氟-6-(三氟甲基)-2',3'-二氢-3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-茚]-5'-基)硫代)丙酸酯
[1112][1113]
将(s)-5'-溴-8-(二氟甲氧基)-4'-氟-6-(三氟甲基)-2',3'-二氢-3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-茚](实例1，30.0mg，0.07mmol)、3-巯基丙酸2-乙基己酯(0.023ml，0.10mmol)、xantphos(3.83mg，6.62μmol)、dipea(0.017ml，0.10mmol)、pd2(dba)3(6.06mg，6.62μmol)和1,4-二噁烷(0.5ml)的混合物在100℃下搅拌24小时。将冷却的rm在etoac和水之间分配，将水相用etoac萃取2x，并且将干燥的有机层蒸发。将分离出的材料通过正相色谱法(10g snap筒，洗脱液：己烷:etoac 100:0至0:100)纯化并且将含有级分的产物蒸发以给出标题化合物。
[1114]
lc-ms：rt＝1.22min；ms m/z[m+h]
+
591.3；uplc-ms 1。
[1115]
步骤2：(s)-8-(二氟甲氧基)-4'-氟-6-(三氟甲基)-2',3'-二氢-3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-茚]-5'-硫醇
[1116][1117]
将etoh(28μl，0.075mmol)中的naoet添加至2-乙基己基3-(((s)-8-(二氟甲氧基)-4'-氟-6-(三氟甲基)-2',3'-二氢-3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-茚]-5'-基)硫代)丙酸酯(步骤1，22.49mg，0.038mmol)在etoh(0.5ml)中的溶液中。在rt下搅拌1小时后，将rm在nh4cl饱和水溶液和etoac之间分配，并且将干燥的有机层蒸发。将分离出的材料通过正相色谱法(10g snap筒，洗脱液：己烷:etoac 100:0至50:50)纯化并且将含有级分的产物蒸发以给出呈黄色固体的标题化合物。
[1118]
lc-ms：rt＝0.76min；ms m/z[m+h]
+
407.2；uplc-ms 1。
[1119]
中间体m：(s)-3,6'-双(三氟甲基)-5,6-二氢-3'h-螺[环戊并[c]吡啶-7,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]-8'-醇
[1120]
步骤1：5-溴-2-(三氟甲基)异烟醛
[1121][1122]
使用丙酮/干冰浴，将二异丙基酰胺锂(2m，11.68ml，23.36mmol)在thf(25ml)中的溶液冷却至-78℃，并且逐滴添加5-溴-2-(三氟甲基)吡啶(4.4g，19.47mmol)在thf(5ml)中的溶液。将rm在此温度下搅拌1小时，然后添加dmf(1.81ml，23.36mmol)，并且将rm再搅拌1小时。将rm用nahco3饱和水溶液淬灭，缓慢温热至rt并用etoac萃取。将有机层依次用盐水洗涤，用相分离器干燥并且在真空中浓缩。将残余物通过正相色谱法(洗脱液：环己烷:etoac 100:0至80:20)纯化以给出标题化合物。
[1123]1h nmr(400mhz,dmso-d6):δ10.18(s,1h),9.19(s,1h),8.10(s,1h)。
[1124]
步骤2：(e)-3-(5-溴-2-(三氟甲基)吡啶-4-基)-n-甲氧基-n-甲基丙烯酰胺
[1125][1126]
向5-溴-2-(三氟甲基)异烟醛(步骤1，2.0g，7.64mmol)在dcm(50ml)中的溶液中添加n-甲氧基-n-甲基-2-(三苯基亚正膦基)-乙酰胺(4.16g，11.46mmol)。将rm在rt下搅拌30min，然后用盐水淬灭并且用dcm萃取。将有机层合并，用相分离器干燥并在真空中浓缩。将粗残余物通过正相色谱法(洗脱液：环己烷:etoac 100:0至80:20)纯化以得到标题化合物。
[1127]
lc-ms：rt＝1.00min；ms m/z[m+h]
+
339.0；uplc-ms 1。
[1128]
步骤3：3-(5-溴-2-(三氟甲基)吡啶-4-基)-n-甲氧基-n-甲基丙酰胺
[1129][1130]
向玻璃高压灭菌器(hastelloy)中装入(e)-3-(5-溴-2-(三氟甲基)吡啶-4-基)-n-甲氧基-n-甲基丙烯酰胺(步骤2，2.69g，7.93mmol)、rh氧化铝粉5％(engelhard 8011，675m g)和etoac(100ml)。将高压灭菌器密封并且施加2.1巴h2压力。将反应在此条件下在rt下搅拌5小时。然后添加另外的催化剂(0.2g)并且将反应在h2气氛(2.1巴)下搅拌2小时。将rm通过硅藻土垫过滤。将硅藻土用etoac洗涤两次，并将合并的滤液在真空中浓缩。将粗产物不经进一步纯化即用于下一步骤。
[1131]
lc-ms：rt＝0.98min；ms m/z[m+h]
+
341.1；uplc-ms 1。
[1132]
步骤4：3-(三氟甲基)-5,6-二氢-7h-环戊并[c]吡啶-7-酮
[1133][1134]
使用丙酮/干冰浴，将3-(5-溴-2-(三氟甲基)吡啶-4-基)-n-甲氧基-n-甲基丙酰胺(步骤3，2.64g，7.20mmol)在thf(60ml)中的溶液冷却至-78℃，并且逐滴添加n-buli在己烷中的溶液(1.6m，6.75ml，10.80mmol)。将反应在-78℃下搅拌1小时。然后将反应混合物用nh4oh饱和水溶液淬灭，温热至rt并用etoac萃取。将有机层依次用1n hcl水溶液洗涤，经相
分离器干燥并且浓缩。将残余物通过正相色谱法(洗脱液：环己烷:etoac 100:0至70:30)纯化以给出标题化合物。
[1135]
lc-ms：rt＝0.77min；ms m/z[m+h]
+
202.1；uplc-ms 1。
[1136]
步骤5：3-(三氟甲基)-5,6-二氢螺[环戊并[c]吡啶-7,4'-咪唑烷]-2',5'-二酮
[1137][1138]
将3-(三氟甲基)-5,6-二氢-7h-环戊并[c]吡啶-7-酮(步骤4，1.25g，5.66mmol)、碳酸铵(6.52g，67.9mmol)、etoh(25ml)、水(25ml)和kcn(921mg，14.1mmol)的混合物在50℃下加热15小时。向冷却的rm中添加水并且将rm用etoac萃取。将合并的有机层依次用1n hcl水溶液洗涤，经相分离器干燥并在真空中浓缩以给出标题化合物，将其不经进一步纯化直接使用。
[1139]
lc-ms：rt＝0.62min；ms m/z[m+h]
+
272.1；uplc-ms 1。
[1140]
步骤6：7-氨基-3-(三氟甲基)-6,7-二氢-5h-环戊并[c]吡啶-7-甲酸
[1141][1142]
将3-(三氟甲基)-5,6-二氢螺[环戊并[c]吡啶-7,4'-咪唑烷]-2',5'-二酮(步骤5，1.31g，4.83mmol)、koh(1.491g，26.6mmol)和水(20ml)的混合物在100℃下伴随搅拌加热2天。使用1n hcl水溶液将冷却的rm酸化至ph 3-4并用etoac洗涤。将水层冻干以得到标题化合物，其含有nacl，并且将其不经进一步纯化用于下一步骤。
[1143]
lc-ms：rt＝0.34min；ms m/z[m+h]
+
247.2；uplc-ms 1。
[1144]
步骤7：(s)-(7-氨基-3-(三氟甲基)-6,7-二氢-5h-环戊并[c]吡啶-7-基)甲醇
[1145][1146]
在rt下，向7-氨基-3-(三氟甲基)-6,7-二氢-5h-环戊并[c]吡啶-7-甲酸(步骤6，2.40g，4.84mmol)在thf(30ml)中的溶液中添加硼烷四氢呋喃复合物(1m，15.0ml，15.0mmol)。将rm在rt下搅拌4小时，然后小心地用甲醇淬灭并且浓缩。将残余物再次溶解于甲醇中并浓缩至干(再浓缩两次)。然后添加乙醇(1.25n，50ml)中的hcl，将所得混合物在rt下搅拌15min并使用旋转蒸发仪浓缩至干。将残余物用nahco3饱和水溶液碱化并用乙酸乙酯萃取。将合并的有机层依次用盐水洗涤，经相分离器干燥并且在真空中浓缩以得到外消旋产物。然后将外消旋体通过手性hplc(仪器：gilson prep hplc系统；柱：luxcel-2，5μm，21.2x250mm，25℃；洗脱液：庚烷:meoh:etoh 90:5:5+0.1％et2nh；流速：10ml/min；检测：254nm；进样体积：2ml)分离以给出作为第一洗脱峰的标题化合物。
[1147]
lc-ms：rt＝0.41min；ms m/z[m+h]
+
233.2；uplc-ms 1。
[1148]
手性-hplc：rt＝11.82min；(r)-(7-氨基-3-(三氟甲基)-6,7-二氢-5h-环戊并[c]
吡啶-7-基)甲醇作为第二峰洗脱，rt＝16.08min；c-hplc 17。
[1149]
步骤8：(s)-(7-((3-氟-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)氨基)-3-(三氟甲基)-6,7-二氢-5h-环戊并[c]吡啶-7-基)甲醇
[1150][1151]
向微波小瓶中装入(s)-(7-氨基-3-(三氟甲基)-6,7-二氢-5h-环戊并[c]吡啶-7-基)甲醇(步骤7，148mg，637μmol)、2,3-二氟-5-(三氟甲基)吡啶(95μl，765μmol)、iproh(3ml)和二异丙基乙胺(334μl，1.91mmol)。将小瓶密封在微波中加热至160℃持续6小时。将rm用nahco3饱和水溶液淬灭并用etoac萃取。将有机层经相分离器干燥并且浓缩。将粗残余物通过正相色谱法(洗脱液：环己烷:etoac 100:0至50:50)纯化以得到标题化合物。
[1152]
lc-ms：rt＝1.16min；ms m/z[m+h]
+
396.2；uplc-ms 1。
[1153]
步骤9：(s)-8'-氟-3,6'-双(三氟甲基)-5,6-二氢-3'h-螺[环戊并[c]吡啶-7,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]
[1154][1155]
向(s)-(7-((3-氟-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)氨基)-3-(三氟甲基)-6,7-二氢-5h-环戊并[c]吡啶-7-基)甲醇(步骤8，140mg，350μmol)在甲苯(5ml)中的溶液中添加亚硫酰氯(260μl，3.54mmol)。将rm加热至80℃持续1小时然后用meoh淬灭并且浓缩至干。使用nahco3饱和水溶液将残余物碱化并用etoac萃取。将有机经相分离器干燥并在真空中浓缩。将粗残余物通过正相色谱法(洗脱液：环己烷:etoac 100:0至0:100)纯化以得到标题化合物。
[1156]
lc-ms：rt＝0.66min；ms m/z[m+h]
+
378.2；uplc-ms 1。
[1157]
步骤10：(s)-3,6'-双(三氟甲基)-5,6-二氢-3'h-螺[环戊并[c]吡啶-7,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]-8'-醇
[1158][1159]
使用冰浴，将2-(甲基磺酰基)乙醇(92mg，0.73mmol)在dmf(3ml)中的溶液冷却至0℃并添加nah(60％在矿物油中，35.0mg，0.88mmol)。30min后，逐滴添加(s)-8'-氟-3,6'-双
(三氟甲基)-5,6-二氢-3'h-螺[环戊并[c]吡啶-7,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶](步骤9，110mg，290μmol)在dmf(1ml)中的溶液。允许rm温热至rt并搅拌4小时。将rm用水淬灭并用etoac萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，干燥(相分离器)并浓缩。将粗残余物通过正相色谱法(洗脱液：dcm:meoh 100:0至80:20)纯化以得到标题化合物。
[1160]
lc-ms：rt＝0.67min；ms m/z[m+h]
+
376.2；uplc-ms 1。
[1161]
中间体n：(s)-5-溴-4-氟-3'-(3-(氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)-2,3-二氢螺[茚-1,4'-噁唑烷]-2'-酮
[1162][1163]
将(s)-5-溴-4-氟-2,3-二氢螺[茚-1,4'-噁唑烷]-2'-酮(中间体i，40mg，0.120mmol)、2-氯-3-(氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶(中间体e，41.4mg，0.180mmol)、cui(11.45mg，0.060mmol)和cs2co3(78mg，0.240mmol)在dmf(2ml)中的混合物在120℃下在ace压力管中搅拌4小时。将冷却的rm用etoac稀释，将有机相用nahco3饱和水溶液洗涤2x，干燥并且浓缩。将残余物通过反相色谱法(硅胶，洗脱液：c-己烷/etoac 100/0至50/50)纯化，并且将含有级分的产物合并并蒸发以给出呈黄色固体的标题化合物。
[1164]
lc-ms：rt＝1.24min；ms m/z[m+h]
+
479.1/481.1；uplc-ms 1。
[1165]
中间体o：(s)-(5-溴-4-氟-1-((3-氟-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)氨基)-2,3-二氢-1h-茚-1-基)甲醇
[1166][1167]
将(s)-(1-氨基-5-溴-4-氟-2,3-二氢-1h-茚-1-基)甲醇(中间体j，900mg，3.39mmol)、2,3-二氟-5-(三氟甲基)吡啶(517μl，4.07mmol)和dipea(2.4ml，13.56mmol)在iproh(2.6ml)中的混合物在160℃下在微波中加热2小时。将冷却的rm蒸发，将残余物吸收到dcm中并且蒸发到isolute上用于通过正相色谱法(12g柱，洗脱液：c-己烷中从0％至60％etoac)纯化。将含有级分的产物合并并且蒸发，以给出标题化合物。
[1168]
lc-ms：rt＝6.59min；ms m/z[m+h]
+
423.2/425.1；uplc-ms 4。
[1169]
使用用于制备中间体o的方法来制备以下中间体o1、o2和o3。
[1170][1171][1172]
中间体p：(s)-(5-溴-1-((3-氯-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)氨基)-2,3-二氢-1h-茚-1-基)甲醇
[1173][1174]
在rt下，向(s)-(1-氨基-5-溴-2,3-二氢-1h-茚-1-基)甲醇(中间体cl，5.15g，21.27mmol)在iproh(22ml)中的溶液中添加3-氯-2-氟-5-(三氟甲基)吡啶(4.80g，24.04mmol)和dipea(7.43ml，42.5mmol)。将rm进行超声处理并且在rt下搅拌10min，然后在170℃下在微波中加热80min。将rm倒入nahco3饱和水溶液中并且用etoac萃取2x。将有机层用nahco3饱和水溶液和盐水洗涤并且蒸发。将残余物通过正相色谱法(120g二氧化硅redisep柱，洗脱液：庚烷:etoac)纯化以给出标题化合物。
[1175]
lc-ms：rt＝1.36min；ms m/z[m+h]
+
421.1/423.1；uplc-ms 1。
[1176]
使用用于制备中间体p的方法来制备以下中间体p1和p2。
[1177][1178][1179]
中间体q：(s)-5',6-双(三氟甲基)-2',3'-二氢-3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-茚]-8-醇
[1180]
步骤1：(s)-8-氟-5',6-双(三氟甲基)-2',3'-二氢-3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-茚]
[1181][1182]
在rt下在密封的小瓶中，将socl2(0.54ml，7.41mmol)添加至(s)-(1-((3-氟-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)氨基)-5-(三氟甲基)-2,3-二氢-1h-茚-1-基)甲醇(中间体o2，292mg，0.741mmol)在甲苯(2ml)中的溶液中。将rm搅拌并且在80℃下加热30min，冷却，然后用dcm稀释。将有机相用nahco3饱和水溶液洗涤，随后用盐水洗涤，用相分离筒分离。浓缩有机层给出黄色油状物，将其用meoh研磨，过滤并干燥以给出呈黄色粉末的标题化合物。
[1183]1h nmr(400mhz,meoh-d4)δ7.80(s,1h),7.49-7.64(m,2h),7.45(d,1h),7.11(d,1h),4.23-4.51(m,2h),3.08-3.22(m,1h),2.91-3.08(m,1h),2.26-2.52(m,2h)。
[1184]
lc-ms：rt＝3.30min；ms m/z[m+h]
+
377.1；uplc-ms 4。
[1185]
步骤2：(s)-5',6-双(三氟甲基)-2',3'-二氢-3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-茚]-8-醇
[1186][1187]
将氢化钠(57mg，1.35mmol)添加至2-(甲基磺酰基)乙醇(57mg，459μmol)在dmf(1.5ml)中的搅拌溶液(用冰浴冷却)中。将rm在0℃下搅拌10min，然后添加(s)-8-氟-5',6-双(三氟甲基)-2',3'-二氢-3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-茚](步骤1 169mg，450μmol)。搅拌90min后，将rm重新冷却至0℃，并且制备并添加另外的0.3当量的dmf中的醇钠溶液。在rt下再搅拌30min后，然后将rm倒入nh4cl饱和水溶液中，用etoac萃取2x，将合并的有机相用盐水洗涤，并且浓缩。将残余物通过正相色谱法(10g sio
2 snap筒，洗脱液：dcm:meoh 100:0至90:10)纯化以给出呈灰色粉末的标题化合物。
[1188]
lc-ms：rt＝0.78min；ms m/z[m+h]
+
375.1；uplc-ms 1。
[1189]
中间体r：(s)-(1-氨基-6-溴-5-氟-1,2,3,4-四氢化萘-1-基)甲醇盐酸盐
[1190][1191]
在ar下，将(s)-1-氨基-6-溴-5-氟-1,2,3,4-四氢化萘-1-甲酸(5g，15.3mmol)悬浮于thf(10ml)中，并且冷却至0℃。向rm中经30min逐滴添加thf(1m，100ml，100mmol)中的硼烷thf复合物。将rm在rt下搅拌18小时，然后小心地用meoh淬灭并且蒸发，用meoh再共蒸发3x。将残余物用meoh稀释并添加et2o(10ml，20mmol)中的2m hcl溶液。添加另外的et2o直至形成沉淀，并且将rm在rt下搅拌30min。将固体通过过滤收集并干燥以给出呈白色固体的标题化合物。
[1192]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.52(s,3h),7.65(t,1h),7.51(d,1h),5.79(t,1h),3.65(d,2h),2.85-2.73(m,1h),2.73-2.60(m,1h),2.22(dd,1h),1.95-1.82(m,1h),1.82-1.69(m,2h)。
[1193]
lc-ms：rt＝0.57min；ms m/z[m+h]
+
274.1/276.1；uplc-ms 1。
[1194]
中间体s：(s)-6'-溴-8-(二氟甲氧基)-5'-氟-6-(三氟甲基)-2',3'-二氢-3h-二螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘-4',2
”‑
[1,3]二硫环戊烷]
[1195]
步骤1：(s)-6'-溴-3-(3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)-5'-氟-2',3'-二氢二螺[噁唑烷-4,1'-萘-4',2
”‑
[1,3]二硫环戊烷]-2-酮
[1196][1197]
在ar下在微波中在120℃下，将(s)-6'-溴-5'-氟-2',3'-二氢二螺[噁唑烷-4,1'-萘-4',2
”‑
[1,3]二硫环戊烷]-2-酮(中间体t，795mg，1.96mmol)、2-氯-3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶(中间体a，963mg，3.85mmol)、碘化铜(i)(235mg，1.23mmol)和碳酸铯
(1.28g，3.91mmol)在dmf(13ml)中的混合物加热2.5小时。添加另外的2-氯-3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶(中间体a，198mg，0.8mmol)和碘化铜(i)(50mg，260μmol)，并且在120℃下继续加热2小时。用2-氯-3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶(中间体a，198mg，0.8mmol)和碘化铜(i)(50mg，260μmol)将该程序重复。将冷却的rm用nahco3饱和水溶液稀释并用etoac萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经na2so4干燥，过滤并蒸发。将残余物吸收在isolute上并且通过正相色谱法(120g sio2柱；洗脱液：庚烷:etoac 100:0至85:15)纯化。将含有级分的产物合并并且蒸发，以给出呈灰白色泡沫的标题化合物。
[1198]
lc-ms：rt＝1.36min；ms m/z[m+h]
+
600.8/603.0；uplc-ms 1。
[1199]
步骤2：(s)-(7'-溴-4'-((3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)氨基)-8'-氟-3',4'-二氢-2'h-螺[[1,3]二硫环戊烷-2,1'-萘]-4'-基)甲醇
[1200][1201]
将naoh水溶液(2m，11ml，22mmol)添加至悬浮在etoh(15ml)中的(s)-6'-溴-3-(3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)-5'-氟-2',3'-二氢二螺[噁唑烷-4,1'-萘-4',2
”‑
[1,3]二硫环戊烷]-2-酮(步骤1，1.8g，2.84mmol)中，并且将rm在80℃下搅拌135min。将rm用水稀释并用etoac萃取2x。将合并的有机层用盐水洗涤，经na2so4干燥，过滤并且蒸发以给出呈灰白色泡沫的标题化合物，将其直接用于下一步骤。
[1202]
lc-ms：rt＝1.37min；ms m/z[m+h]
+
575.0/577.0；uplc-ms 1。
[1203]
步骤3：(s)-6'-溴-8-(二氟甲氧基)-5'-氟-6-(三氟甲基)-2',3'-二氢-3h-二螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘-4',2
”‑
[1,3]二硫环戊烷]
[1204][1205]
将socl2(0.35ml，4.8mmol)逐滴添加至(s)-(7'-溴-4'-((3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)氨基)-8'-氟-3',4'-二氢-2'h-螺[[1,3]二硫环戊烷-2,1'-萘]-4'-基)甲醇(步骤2，1.6g，2.59mmol)在甲苯(15ml)中的溶液中，并且将rm在ar下在80℃下加热1小时。将rm用nahco3饱和水溶液淬灭并用etoac萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经na2so4干燥，过滤并蒸发。将残余物吸收在isolute上并且通过正相色谱法(120g sio2柱；洗脱液：庚烷:etoac 100:0至75:25)纯化。将含有级分的产物合并并且蒸发，以给出呈黄色固体的标题化合物。
[1206]
lc-ms：rt＝0.96min；ms m/z[m+h]
+
557.0/559.1；uplc-ms 1。
[1207]
中间体t：(s)-6'-溴-5'-氟-2',3'-二氢二螺[噁唑烷-4,1'-萘-4',2
”‑
[1,3]二硫
环戊烷]-2-酮
[1208]
步骤1：(s)-6-溴-5-氟-3,4-二氢-2h-螺[萘-1,4'-噁唑烷]-2'-酮
[1209][1210]
在0℃下，将三光气(1.06g，3.57mmol)在dcm(50ml)中的溶液逐滴添加至(s)-(1-氨基-6-溴-5-氟-1,2,3,4-四氢化萘-1-基)甲醇(中间体r，2.5g，8.94mmol)和et3n(2.62ml，18.77mmol)在dcm(50ml)中的溶液中，并且在rt下搅拌45min。将rm用nh4cl饱和水溶液和dcm淬灭。将rm在rt下搅拌20min，用dcm萃取，将合并的有机层用盐水洗涤，干燥(相分离器)并浓缩以给出标题化合物，将其直接用于下一步骤。
[1211]
lc-ms：rt＝0.96min；ms m/z[m+h]
+
300.1/302.1；uplc-ms 1。
[1212]
步骤2：(s)-6-溴-5-氟-2h-螺[萘-1,4'-噁唑烷]-2',4(3h)-二酮
[1213][1214]
将九水合硝酸铁(iii)(662mg，1.61mmol)添加至(s)-6-溴-5-氟-3,4-二氢-2h-螺[萘-1,4'-噁唑烷]-2'-酮(步骤1，2.51g，8.03mmol)和n-羟基邻苯二甲酰亚胺(0.327g，2.01mmol)在accn(50ml)中的溶液中，并且将rm在o2气氛下在35℃下搅拌18小时。将rm用dcm萃取，将有机层用盐水洗涤，干燥(相分离器)并浓缩。将残余物用dcm研磨，并且过滤后获得呈白色固体的标题化合物。通过对母液进行纯化可以获得另外的材料，用dcm研磨后，通过正相色谱法(硅胶：c-己烷:etoac 100:0至50:50)以给出标题化合物。
[1215]
lc-ms：rt＝0.69min；无明显的分子离子信号；uplc-ms 1。
[1216]
步骤3：(s)-6'-溴-5'-氟-2',3'-二氢二螺[噁唑烷-4,1'-萘-4',2
”‑
[1,3]二硫环戊烷]-2-酮
[1217][1218]
在0℃下，将三氟化硼醚化物(303μl，2.39mmol)逐滴添加至(s)-6-溴-5-氟-2h-螺[萘-1,4'-噁唑烷]-2',4(3h)-二酮(步骤2，1.5g，4.78mmol)和乙烷-1,2-二硫醇(803μl，9.55mmol)在dcm(30ml)中的溶液中，并且将rm在rt下搅拌18小时。将rm混合物倒入naoh水溶液(1n，100ml)中，用dcm萃取，干燥(相分离器)并浓缩。将残余物通过正相色谱法(硅胶，洗脱液：c-己烷:etoac 100:0至50:50)纯化以给出标题化合物。
[1219]
lc-ms：rt＝0.98min；无明显的分子离子信号；uplc-ms 1。
[1220]
中间体u：(s)-6'-溴-4'-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-8-(二氟甲氧基)-5'-氟-6-(三氟甲基)-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]
[1221][1222]
在0℃下在ar下，将叔丁基二甲基甲硅烷基三氟甲烷磺酸酯(90μl，381μmol)逐滴添加至dcm(2ml)中的(s)-6'-溴-8-(二氟甲氧基)-5'-氟-6-(三氟甲基)-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]-4'(3'h)-酮(实例8，121mg，249μmol)和三乙胺(173μl，1.25mmol)中。将rm在0℃下搅拌10min，然后在rt下搅拌20min，用水稀释并且用etoac萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经na2so4干燥并蒸发。将残余物吸收在isolute上并且通过正相色谱法(40g sio2柱，洗脱液：庚烷:etoac 100:0至75:25)纯化。将含有级分的产物合并，蒸发并干燥以给出呈黄色固体的标题化合物。
[1223]
lc-ms：rt＝1.38min；ms m/z[m+h]
+
595.1/597.1；uplc-ms 1。
[1224]
中间体v：(s)-(1-氨基-6-溴-1,2,3,4-四氢化萘-1-基)甲醇
[1225][1226]
通过与中间体m，步骤7相似的方法，通过用外消旋-1-氨基-6-溴-1,2,3,4-四氢化萘-1-甲酸(中间体au8)代替7-氨基-3-(三氟甲基)-6,7-二氢-5h-环戊并[c]吡啶-7-甲酸(中间体m，步骤6)制备标题化合物。将对映异构体通过手性hplc：(仪器：gilson trilution hplc制备型系统；柱：chiralpak id 5μm，3x25cm，25℃；洗脱液：庚烷:tbme:etoh80:10:10+0.05％et2nh；流速：10ml/min；检测：230nm)分离以给出作为第一洗脱峰的标题化合物，rt＝8.82min；c-hplc 7。
[1227]
lc-ms：rt＝0.56min；ms m/z[m+h]
+
256.1/258.1；uplc-ms 1。
[1228]
手性-hplc：rt＝8.82min；(r)-(1-氨基-6-溴-1,2,3,4-四氢化萘-1-基)甲醇作为第二洗脱峰，rt＝11.87min；c-hplc 7。
[1229]
中间体w：(s)-6'-溴-6-(三氟甲基)-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]-8-醇
[1230]
步骤1：(s)-6'-溴-8-氟-6-(三氟甲基)-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]
[1231][1232]
在氩气下，将socl2(74μl，1.01mmol)添加至甲苯(2.5ml)中的(6-溴-1-((3-氟-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)氨基)-1,2,3,4-四氢化萘-1-基)甲醇(中间体o3，330mg，779μmol)中。将rm加热至80℃，持续75min。将rm用nahco3饱和水溶液淬灭并用etoac萃取。将合并的
有机层用盐水洗涤，经na2so4干燥并蒸发。将残余物吸收在isolute上并且通过正相色谱法(40g sio2柱，洗脱液：庚烷:etoac 100:0至70:30)纯化。将含有级分的产物合并，蒸发并且干燥以给出标题化合物。
[1233]
lc-ms：rt＝0.79min；ms m/z[m+h]
+
401.2/403.2；uplc-ms 1。
[1234]
步骤2：(s)-6'-溴-6-(三氟甲基)-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]-8-醇
[1235][1236]
在rt下在ar下，将nah(在矿物油中的55％分散体，98mg，2.24mmol)添加至在dmf(1.5ml)中的2-(甲基磺酰基)乙醇(122mg，972μmol)中。将rm冷却至0℃，在0℃下搅拌15min并且添加(s)-6'-溴-8-氟-6-(三氟甲基)-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘](步骤1，300mg，748μmol)在dmf(4.5ml)中的溶液。将rm在rt下搅拌30min，然后用nh4cl饱和水溶液淬灭并且用etoac萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经na2so4干燥，并且蒸发以给出呈橙色固体的标题化合物。
[1237]
lc-ms：rt＝0.83min；ms m/z[m+h]
+
399.1/401.1；uplc-ms 1。
[1238]
中间体x：(s)-6'-溴-4'-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-8-(二氟甲氧基)-3',5'-二氟-6-(三氟甲基)-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]
[1239][1240]
与中间体u中所述方法相似的方法，通过用(1's)-6'-溴-8-(二氟甲氧基)-3',5'-二氟-6-(三氟甲基)-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]-4'(3'h)-酮(实例9，作为非对映异构体混合物)代替(s)-6'-溴-8-(二氟甲氧基)-5'-氟-6-(三氟甲基)-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]-4'(3'h)-酮(实例8)制备标题化合物。将粗产物通过正相色谱法(40g sio2柱；洗脱液：庚烷:etoac 100:0至80:20)纯化以给出呈黄色固体的标题化合物。
[1241]
lc-ms：rt＝1.49min；ms m/z[m+h]
+
613.0/614.9；uplc-ms 1。
[1242]
中间体y：(s)-8-(二氟甲氧基)-5'-氟-6-(三氟甲基)-2',3'-二氢-3h-二螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘-4',2
”‑
[1,3]二硫环戊烷]
[1243][1244]
通过与中间体s相似的方法，通过用(s)-5'-氟-2',3'-二氢二螺[噁唑烷-4,1'-萘-4',2
”‑
[1,3]二硫环戊烷]-2-酮(中间体z)代替(s)-6'-溴-5'-氟-2',3'-二氢二螺[噁唑烷-4,1'-萘-4',2
”‑
[1,3]二硫环戊烷]-2-酮(中间体t)制备标题化合物。将粗产物不经纯化直接用于下一步骤。
[1245]1h nmr(600mhz,dmso-d6)δ7.91(s,1h),7.51-7.23(m,2h),7.07(q,2h),7.01(s,1h),4.31(d,1h),4.12(d,1h),3.65-3.50(m,3h),3.43-3.36(m,1h),2.47(dd,1h),2.32(dd,1h),2.09-2.00(m,2h)。
[1246]
lc-ms：rt＝0.84min；ms m/z[m+h]
+
479.0；uplc-ms 1。
[1247]
中间体z：(s)-5'-氟-2',3'-二氢二螺[噁唑烷-4,1'-萘-4',2
”‑
[1,3]二硫环戊烷]-2-酮
[1248]
步骤1：(s)-5-氟-3,4-二氢-2h-螺[萘-1,4'-噁唑烷]-2'-酮
[1249][1250]
在0℃-5℃下，向(s)-(1-氨基-5-氟-1,2,3,4-四氢化萘-1-基)甲醇(中间体aa，1.08g，5.53mmol)和et3n(1.62ml，11.6mmol)在dcm(30ml)中的溶液中逐滴添加三光气(0.66g，2.21mmol)在dcm(30ml)中的溶液。将黄色溶液在rt下搅拌30min。将rm倒入nahco3饱和水溶液中并且用dcm萃取2x。将合并的有机萃取物干燥(相分离器)并且蒸发以给出呈米色固体的标题化合物。
[1251]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.22(s,1h),7.33-7.29(m,2h),7.11(m,1h),4.35(d,1h),4.18(d,1h),2.70-2.57(m,2h),2.02-1.72(m,4h)。
[1252]
lc-ms：rt＝0.81min；ms m/z[m+nh4]
+
239.2；uplc-ms 1。
[1253]
步骤2：(s)-5-氟-2h-螺[萘-1,4'-噁唑烷]-2',4(3h)-二酮
[1254][1255]
将(s)-5-氟-3,4-二氢-2h-螺[萘-1,4'-噁唑烷]-2'-酮(500mg，2.26mmol)、n-羟基邻苯二甲酰亚胺(92mg，0.56mmol)和九水合硝酸铁(iii)(186mg，0.45mmol)置于微波小瓶中。添加ch3cn(14ml)并且将混合物用o2冲洗。将小瓶盖上，并且通过针将充满o2的气球连接到小瓶上。将rm在o2气氛下在35℃下搅拌16小时。然后将rm通过硅藻土垫过滤，用etoac
和meoh洗涤并且将滤液蒸发。将粗混合物悬浮于ch2cl2中并且过滤以给出呈褐色固体的标题化合物。
[1256]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.45(s,1h),7.76(m,1h),7.43(d,1h),7.30(dd,1h),4.59(d,1h),4.26(d,1h),2.87-2.79(m,1h),2.66-2.60(m,1h),2.31-2.27(m,2h)。
[1257]
lc-ms：rt＝0.53min；ms m/z[m-h]-234.2；uplc-ms 1。
[1258]
步骤3：(s)-5'-氟-2',3'-二氢二螺[噁唑烷-4,1'-萘-4',2
”‑
[1,3]二硫环戊烷]-2-酮
[1259][1260]
通过与中间体t相似的方法，通过用(s)-(1-氨基-5-氟-1,2,3,4-四氢化萘-1-基)甲醇(中间体aa)代替(s)-(1-氨基-6-溴-5-氟-1,2,3,4-四氢化萘-1-基)甲醇(中间体r)制备标题化合物。将粗产物通过正相色谱法(80g sio2柱；洗脱液：庚烷:etoac 100:0至40:60)纯化以给出呈棕色固体的标题化合物。
[1261]1h nmr(600mhz,dmso-d6)δ8.26(s,1h),7.42(td,1h),7.28(d,1h),7.14(dd,1h),4.45(d,1h),4.21(d,1h),3.66-3.58(m,1h),3.53(dd,2h),3.38-3.35(m,1h),2.44-2.30(m,2h),2.11(t,2h)。
[1262]
lc-ms：rt＝0.87min；ms m/z[m+h]
+
312.0；uplc-ms 1。
[1263]
中间体aa：(s)-(1-氨基-5-氟-1,2,3,4-四氢化萘-1-基)甲醇
[1264][1265]
通过与中间体m，步骤7相似的方法，通过用外消旋-1-氨基-5-氟-1,2,3,4-四氢化萘-1-甲酸(中间体au9)代替7-氨基-3-(三氟甲基)-6,7-二氢-5h-环戊并[c]吡啶-7-甲酸(中间体m，步骤6)制备标题化合物。将对映异构体通过手性sfc：(仪器：sepiatec sfc 100；柱：lux i-cel 5；5μm；250x30mm，40℃；洗脱液：co2/meoh 80:20+1％iprnh2；流速：80ml/min；检测：260nm；进样体积：4ml乙醇(300mg/进样))分离以给出呈米色固体的作为第一洗脱峰的标题化合物。
[1266]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ7.40(d,1h),7.16(m,1h),6.95(m,1h),4.79(br s,1h),3.45(d,1h),3.29(d,1h),2.65-2.61(m,2h),2.13-1.98(m,3h),1.84-1.76(m,1h),1.75-1.66(m,1h),1.48(m,1h)。
[1267]
lc-ms：rt＝0.45min；ms m/z[m+h]
+
196.1；uplc-ms 1。
[1268]
手性-hplc：rt＝7.45min；(r)-(1-氨基-5-氟-1,2,3,4-四氢化萘-1-基)甲醇作为第二峰洗脱，rt＝8.79min；c-hplc 47。
[1269]
中间体ab：(s)-4'-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-8-(二氟甲氧基)-5'-氟-6-(三氟甲基)-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]
[1270]
步骤1：(s)-8-(二氟甲氧基)-5'-氟-6-(三氟甲基)-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡
啶-2,1'-萘]-4'(3'h)-酮
[1271][1272]
将丙酮(120ml)和水(12ml)中的(s)-8-(二氟甲氧基)-5'-氟-6-(三氟甲基)-2',3'-二氢-3h-二螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘-4',2
”‑
[1,3]二硫环戊烷](中间体y，4.27g，8.03mmol)冷却至0℃并添加nbs(11.4g，64.3mmol)。在0℃下搅拌5min后，将硫代硫酸钠饱和水溶液添加至rm中。将rm用nahco3饱和水溶液碱化并用etoac萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经na2so4干燥，过滤并蒸发。将残余物吸收在isolute上并且通过正相色谱法(120g sio2柱；洗脱液：dcm:meoh 100:0至94:6)纯化。将含有级分的产物合并并且蒸发，以给出标题化合物。
[1273]
lc-ms：rt＝0.59min；ms m/z[m+h]
+
403.0；uplc-ms 1。
[1274]
步骤2：(s)-4'-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-8-(二氟甲氧基)-5'-氟-6-(三氟甲基)-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]
[1275][1276]
通过与中间体u相似的方法，通过用(s)-8-(二氟甲氧基)-5'-氟-6-(三氟甲基)-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]-4'(3'h)-酮(步骤1)代替(s)-6'-溴-8-(二氟甲氧基)-5'-氟-6-(三氟甲基)-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]-4'(3'h)-酮(实例8)制备标题化合物。将粗产物通过正相色谱法(120g sio2柱，洗脱液：庚烷:etoac 100:0至75:25)纯化以给出呈黄色固体的标题化合物。
[1277]
lc-ms：rt＝1.21min；ms m/z[m+h]
+
517.1；uplc-ms 1。
[1278]
中间体ac和ad：(2s,4's)-6'-溴-8-(二氟甲氧基)-5'-氟-4'-羟基-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]-6-甲腈和(2s,4'r)-6'-溴-8-(二氟甲氧基)-5'-氟-4'-羟基-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]-6-甲腈
[1279]
步骤1：(s)-6-(6'-溴-5'-氟-2-氧代-2',3'-二氢二螺[噁唑烷-4,1'-萘-4',2
”‑
[1,3]二硫环戊烷]-3-基)-5-(二氟甲氧基)烟腈
[1280][1281]
通过与中间体s，步骤1相似的方法，通过用6-氯-5-(二氟甲氧基)烟腈代替2-氯-3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶(中间体a)制备标题化合物。将粗产物通过正相色谱法(80g sio2柱；洗脱液：庚烷:etoac100:0至70:30)纯化以给出呈白色泡沫的标题化合物。
[1282]
lc-ms：rt＝1.24min；ms m/z[m+h]
+
558.1/559.9；uplc-ms 1。
[1283]
步骤2：(s)-6-((7'-溴-8'-氟-4'-(羟基甲基)-3',4'-二氢-2'h-螺[[1,3]二硫环戊烷-2,1'-萘]-4'-基)氨基)-5-(二氟甲氧基)烟腈
[1284][1285]
在ar下，将(s)-6-(6'-溴-5'-氟-2-氧代-2',3'-二氢二螺[噁唑烷-4,1'-萘-4',2
”‑
[1,3]二硫环戊烷]-3-基)-5-(二氟甲氧基)烟腈(步骤1，1.57g，2.53mmol)和碳酸铯(495mg，1.52mmol)悬浮于meoh(16ml)中。将rm在80℃下搅拌35min，然后用水稀释并且用etoac萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经na2so4干燥，过滤，蒸发并干燥以给出呈白色泡沫的标题化合物。
[1286]
lc-ms：rt＝1.22min；ms m/z[m+h]
+
532.0/534.0；uplc-ms 1。
[1287]
步骤3：(s)-6'-溴-8-(二氟甲氧基)-5'-氟-2',3'-二氢-3h-二螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘-4',2
”‑
[1,3]二硫环戊烷]-6-甲腈
[1288][1289]
通过中间体s，步骤3相似的方法，通过用(s)-6-((7'-溴-8'-氟-4'-(羟基甲基)-3',4'-二氢-2'h-螺[[1,3]二硫环戊烷-2,1'-萘]-4'-基)氨基)-5-(二氟甲氧基)烟腈(中间体ac和ad，步骤2)代替(s)-(7'-溴-4'-((3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)氨基)-8'-氟-3',4'-二氢-2'h-螺[[1,3]二硫环戊烷-2,1'-萘]-4'-基)甲醇(中间体s，步骤2)制备标题化合物。将粗产物通过正相色谱法(40g sio2柱；洗脱液：庚烷:etoac 100:0至70:30)纯化以给出呈黄色固体的标题化合物。
[1290]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.13(d,1h),7.61(dt,1h),7.46-6.99(m,3h),4.31(dd,
1h),4.12(dd,1h),3.69-3.59(m,1h),3.57(d,2h),3.40(s,1h),2.35(d,2h),2.03(d,2h)。
[1291]
lc-ms：rt＝0.93min；ms m/z[m+h]
+
514.0/516.0；uplc-ms 1。
[1292]
步骤4：(s)-6'-溴-8-(二氟甲氧基)-5'-氟-4'-氧代-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]-6-甲腈
[1293][1294]
将水(2.5ml)添加至丙酮(25ml)中的(s)-6'-溴-8-(二氟甲氧基)-5'-氟-2',3'-二氢-3h-二螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘-4',2
”‑
[1,3]二硫环戊烷]-6-甲腈(步骤3，867mg，1.65mmol)(用冰浴冷却)中。添加nbs(2.94g，16.5mmol)并且将rm在0℃下搅拌5min。将反应用硫代硫酸钠饱和水溶液淬灭，用nahco3饱和水溶液碱化并且用etoac萃取两次。将合并的有机层用盐水洗涤，经na2so4干燥，过滤并蒸发。将残余物通过sfc(sfc 1)纯化，并且将含有级分的产物合并并蒸发以给出标题化合物。
[1295]
lc-ms：rt＝0.72min，宽峰；ms m/z[m+h]
+
438.0/440.0；uplc-ms 1。
[1296]
步骤5：(2s,4's)-6'-溴-8-(二氟甲氧基)-5'-氟-4'-羟基-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]-6-甲腈和(2s,4'r)-6'-溴-8-(二氟甲氧基)-5'-氟-4'-羟基-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]-6-甲腈
[1297][1298]
在ar下，将四氢硼酸钠(20.3mg，514μmol)添加至悬浮在etoh(5ml)中的(s)-6'-溴-8-(二氟甲氧基)-5'-氟-4'-氧代-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]-6-甲腈(步骤4，256mg，467μmol)中，冷却至0℃。将rm在0℃下搅拌30分钟，然后用nahco3饱和水溶液淬灭并且用etoac萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经na2so4干燥并蒸发。将残余物吸收在isolute上并且通过正相色谱法(40g sio2柱；洗脱液dcm:meoh 100:0至95:5)纯化，然后通过sfc(sfc 1)纯化以给出呈非对映异构体混合物的标题化合物。将非对映异构体通过手性sfc(沃特世sfc100制备型系统，柱：chiralpak ig，5μm，250x30mm；洗脱液：co2:meoh+0.1％nh
3 65:35；温度：23℃；流速：80ml/min)分离以给出作为第一洗脱峰的(1's)-6'-溴-8-(二氟甲氧基)-5'-氟-4'-羟基-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]-6-甲腈(未指定醇立体化学)，rt 1.03min。
[1299]
lc-ms：rt＝0.59min；ms m/z[m+h]
+
440.0/442.0；uplc-ms 1。
[1300]
获得作为第二洗脱峰的(1's)-6'-溴-8-(二氟甲氧基)-5'-氟-4'-羟基-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]-6-甲腈(未指定醇立体化学)，rt 2.01min。
[1301]
lc-ms：rt＝0.59min；ms m/z[m+h]
+
440.1/442.1；uplc-ms 1。
[1302]
中间体ae和af：(1's,4's)-8-(二氟甲氧基)-5'-氟-4'-羟基-6-(三氟甲基)-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]-6'-甲腈和(1's,4'r)-8-(二氟甲氧基)-5'-氟-4'-羟基-6-(三氟甲基)-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]-6'-甲腈
[1303]
步骤1：(s)-8-(二氟甲氧基)-5'-氟-6-(三氟甲基)-2',3'-二氢-3h-二螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘-4',2
”‑
[1,3]二硫环戊烷]-6'-甲腈
[1304][1305]
在微波中在100℃下，将(s)-6'-溴-8-(二氟甲氧基)-5'-氟-6-(三氟甲基)-2',3'-二氢-3h-二螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘-4',2
”‑
[1,3]二硫环戊烷](中间体s，150mg，223μmol)、xphos pd g3(18.91mg，22μmol)、xphos(21.73mg，45μmol)、三水合铁氰化钾(47.2mg，112μmol)和koac(3.29mg，34μmol)在1,4-二噁烷(2ml)和水(2ml)中的混合物搅拌1.5小时。将rm用etoac稀释，用nahco3饱和水溶液洗涤，干燥并且浓缩。将残余物吸收到dcm(5ml)中并且添加硫醇(66μmol，48mg)，将混合物搅拌0.5小时，然后过滤，用dcm洗涤，并且将滤液浓缩。将残余物通过正相柱色谱法(硅胶；洗脱液：c-己烷:etoac 100:0至70:30)纯化以给出标题化合物。
[1306]
lc-ms：rt＝0.90min；ms m/z[m+h]
+
504.3；uplc-ms 1。
[1307]
步骤2：(s)-8-(二氟甲氧基)-5'-氟-4'-氧代-6-(三氟甲基)-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]-6'-甲腈
[1308][1309]
向n-碘代琥珀酰亚胺(168mg，0.747mmol)在dcm(1.5ml)中的溶液(用干冰/丙酮浴冷却)中逐滴添加氟化氢吡啶(70％，93μl，0.747mmol)，随后逐滴添加(s)-8-(二氟甲氧基)-5'-氟-6-(三氟甲基)-2',3'-二氢-3h-二螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘-4',2
”‑
[1,3]二硫环戊烷]-6'-甲腈(步骤1，100mg，0.187mmol)在dcm(1ml)中的溶液。将rm在-70℃下搅拌1小时，然后倒入nahco3饱和水溶液(50ml)(用冰浴冷却)中。添加na2s2o3的水溶液(10％，50ml)并且将混合物用dcm萃取，将有机层通过穿过相分离筒干燥，并且浓缩。将残余物通过反相色谱法(rp-hplc 3)纯化以给出(s)-8-(二氟甲氧基)-4',4',5'-三氟-6-(三氟甲基)-3',4'-二氢-2'h,3h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,1'-萘]-6'-甲腈(实例15)，然后是呈黄色固体的标题化合物。
[1310]
lc-ms：rt＝2.67min；ms m/z[m+h]
+
428.3；uplc-ms 4。
100:0至20:80)纯化以给出呈黄色粉末的标题化合物。
[1339]
lc-ms：rt＝1.03min；ms m/z[m+h]
+
460.1/462.1；uplc-ms 1。
[1340]
步骤2：(s)-1-氯-3'-(3-氟-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6,7-二氢-8h-螺[异喹啉-5,4'-噁唑烷]-2',8-二酮
[1341][1342]
在80℃下在密封的反应容器中，将(s)-1'-氯-3-(3-氟-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6',7'-二氢二螺[噁唑烷-4,5'-异喹啉-8',2
”‑
[1,3]二氧戊环]-2-酮(步骤1，761mg，1.39mmol)在thf(7.8ml)和1n hcl水溶液(6.95ml，6.95mmol)中的溶液加热18小时。将冷却的rm倒入nahco3饱和水溶液中，用dcm萃取3x，将合并的有机层通过穿过相分离器干燥并且浓缩。将残余物通过正相色谱法(硅胶，洗脱液：庚烷:etoac 100:0至20:80)纯化以给出呈白色粉末的标题化合物。
[1343]
lc-ms：rt＝1.00min；ms m/z[m+h]
+
416.1/418.1；uplc-ms 1。
[1344]
步骤3：(s)-1-氯-8,8-二氟-3'-(3-氟-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)-7,8-二氢-6h-螺[异喹啉-5,4'-噁唑烷]-2'-酮
[1345][1346]
在rt下在氩气下，将dast(1.49ml，11.24mmol)添加至(s)-1-氯-3'-(3-氟-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6,7-二氢-8h-螺[异喹啉-5,4'-噁唑烷]-2',8-二酮(步骤2，492mg，1.12mmol)在dcm(6ml)中的溶液中，并且将rm在40℃下在密封的反应容器中加热2天。将冷却的rm缓慢添加至nahco3饱和水溶液中，用冰浴冷却，注意：放热！将混合物用dcm萃取3x，将合并的有机层通过穿过相分离器干燥并且浓缩。将残余物通过快速柱色谱法(硅胶；洗脱液：庚烷:etoac 100:0至30:70)纯化以给出呈白色粉末的标题化合物。
[1347]
lc-ms：rt＝1.13min；ms m/z[m+h]
+
438.1/440.1；uplc-ms 1。
[1348]
步骤4：(s)-(1-氯-8,8-二氟-5-((3-氟-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)氨基)-5,6,7,8-四氢异喹啉-5-基)甲醇
[1349][1350]
在rt下，将(s)-1-氯-8,8-二氟-3'-(3-氟-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)-7,8-二氢-6h-螺[异喹啉-5,4'-噁唑烷]-2'-酮(步骤3，487.4mg，1.10mmol)悬浮于etoh(9ml)中并且
添加naoh水溶液(4m，2.76ml，11.02mmol)。将rm在rt下搅拌30min，然后在nahco3饱和水溶液和dcm之间分配，用dcm萃取3x，将合并的有机层通过穿过相分离器干燥并且蒸发以给出标题化合物，将其未经进一步纯化而直接使用。
[1351]
lc-ms：rt＝1.14min；ms m/z[m+h]
+
412.1/414.1；uplc-ms 1。
[1352]
步骤5：(s)-1'-氯-8,8',8'-三氟-6-(三氟甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉]
[1353][1354]
在rt下，将socl2(0.140ml，1.91mmol)添加至(s)-(1-氯-8,8-二氟-5-((3-氟-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)氨基)-5,6,7,8-四氢异喹啉-5-基)甲醇(步骤4，458mg，957μmol)在甲苯(7ml)中的溶液中。将rm在80℃下加热20min，冷却，添加meoh并且蒸发。将残余物溶解于含有1％-2％meoh的dcm中，并用nahco3饱和水溶液分配，将水相用dcm萃取2x，将合并的有机层通过穿过相分离器干燥并且浓缩。将残余物通过正相柱色谱法(硅胶，洗脱液：庚烷:etoac 100:0至40:60)纯化以给出呈黄色粉末的标题化合物。
[1355]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.49(d,1h),7.97(s,1h),7.51(d,1h),7.33(d,1h),4.35(q,2h),2.71-2.28(m,2h),2.21-1.98(m,2h)。
[1356]
lc-ms：rt＝3.03min；ms m/z[m+h]
+
394.3/396.3；uplc-ms 4。
[1357]
中间体ai：(s)-1'-氯-6',7'-二氢二螺[噁唑烷-4,5'-异喹啉-8',2
”‑
[1,3]二氧戊环]-2-酮
[1358]
步骤1：外消旋-1-(2-氯-4-碘吡啶-3-基)戊-4-烯-1-醇
[1359][1360]
在正氩气压力下，将2-氯-4-碘吡啶(38g，157mmol)在thf(140ml)中的溶液逐滴添加至thf中的lda的溶液中[通过将正丁基锂(2.5m，79ml，196mmol)添加至二异丙胺(28.0ml，196mmol)在thf(90ml)中的溶液中制备，同时保持内部温度低于0℃]，并且用干冰丙酮浴冷却以便保持内部温度低于-75℃。将rm在低于-75℃下搅拌30min，经30min添加戊-4-烯(23.47ml，238mmol)在thf(40ml)中的溶液，然后将rm用冰浴升温至0℃，并且在0℃下搅拌15min。添加nahco3饱和水溶液(250ml)和水(11ml)，并且将混合物用etoac(1x300ml，1x200ml)萃取，将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，并且浓缩。将残余物吸收在硅胶上并且通过正相柱色谱法(2x220g硅胶柱，洗脱液：庚烷:etoac 100:0至70:30)纯化以给出呈澄清橙色油状物的标题化合物。
[1361]
lc-ms：rt＝0.97min；ms m/z[m+h]
+
324.1/326.1；uplc-ms 1。
[1362]
通过以下替代路线也可以合成中间体ai，步骤1：
[1363]
在正n2压力下，以内部温度保持低于15℃的速率，将丁-3-烯-1-基溴化镁在thf(0.5m，1l)中的溶液添加至licl(21.7g，508mmol)和zncl2(71.4g，508mmol)在thf(80ml)中
的混合物(用冰浴冷却)中。将rm在环境温度下搅拌1小时。然后添加2-氯-4-碘代烟碱醛(27.0g，100mmol)在thf(80ml)中的溶液，并且允许rm在环境温度下搅拌2小时。将rm冷却至0℃并且缓慢添加四水合酒石酸钠钾饱和水溶液(240ml)并将混合物搅拌1小时，然后过滤，将滤饼用etoac(300ml)洗涤。将两相滤液分离，并且将水相用etoac(3x300ml)萃取。将合并的有机层用盐水(500ml)洗涤，经无水na2so4干燥并蒸发以给出标题化合物。
[1364]
步骤2：1-(2-氯-4-碘吡啶-3-基)戊-4-烯-1-酮
[1365][1366]
向外消旋-1-(2-氯-4-碘吡啶-3-基)戊-4-烯-1-醇(步骤1，32.0g，94mmol)在dcm(400ml)中的搅拌溶液中经30min分批添加戴斯-马丁高碘烷试剂(47.8g，113mmol)(轻微放热)，并且将rm温热至35℃。将rm在rt下搅拌1.5小时，然后添加na2s2o3饱和水溶液并在rt下继续搅拌0.5小时。将混合物用dcm萃取3x，将合并的有机层用nahco3饱和水溶液洗涤，通过穿过相分离筒干燥并蒸发。将残余物吸收在isolute上并且通过正相色谱法(2x120g sio2柱，洗脱液：己烷:etoac从0-15％)纯化以给出呈黄色油状物的标题化合物。
[1367]
lc-ms：rt＝1.12min；ms m/z[m+h]
+
321.9/323.9；uplc-ms 1。
[1368]
通过以下替代路线也可以合成中间体ai，步骤2：
[1369]
将phi(oac)2(4.45g，13.8mmol，1.95当量)添加至1-(2-氯-4-碘吡啶-3-基)戊-4-烯-1-醇(步骤1，2.7g，7.1mmol)和tempo(0.28g，1.8mmol)在dcm(25ml)中的混合物(用冰浴冷却)中。将混合物在rt下搅拌1小时，添加水(50ml)，随后添加na2so3(1.5g)。分离各相并且将水相用dcm(2x25ml)萃取。将合并的有机层经无水na2so4干燥，并且浓缩以给出呈棕色油状物的标题化合物。
[1370]
步骤3：1-氯-5-亚甲基-6,7-二氢异喹啉-8(5h)-酮
[1371][1372]
在氩气气氛下在55℃-60℃下，将1-(2-氯-4-碘吡啶-3-基)戊-4-烯-1-酮(步骤2，34.7g，106mmol)、ag2co3(21.98g，79mmol)、p(2-呋喃基)3(3.76g，15.86mmol)、pd(oac)2(1.80g，7.93mmol)和accn(563ml)的混合物加热3.5小时。将rm通过hyflo助滤剂过滤，用乙腈洗涤，并且蒸发。将残余物通过正相色谱法(2x220g硅胶柱，洗脱液：庚烷:etoac 10:90至45:55)纯化，将含有级分的产物合并，蒸发并用庚烷:etoac 60:40研磨以给出呈黄色粉末的标题化合物。
[1373]
lc-ms：rt＝0.78min；ms m/z[m+h]
+
194.0/196.0；uplc-ms 1。
[1374]
步骤4：1-氯-5-亚甲基-6,7-二氢-5h-螺[异喹啉-8,2'-[1,3]二氧戊环]
[1375][1376]
在氩气气氛下在60℃下，将1-氯-5-亚甲基-6,7-二氢异喹啉-8(5h)-酮(步骤3，
16g，79mmol)、hc(oet)3(39.2ml，236mmol)、对甲苯磺酸(2.70g，15.70mmol)和乙二醇(88ml，1570mmol)的混合物加热1.5小时。将rm在dcm和nahco3饱和水溶液之间分配，将水层用dcm萃取2x，将合并的有机层通过穿过相分离器干燥并且浓缩。将残余物通过正相柱色谱法(2x220g硅胶柱，洗脱液：庚烷:etoac 0:100至40:60)纯化，给出呈澄清淡黄色油状物的标题化合物。
[1377]
lc-ms：rt＝3.71min；ms m/z[m+h]
+
238.2/240.2；uplc-ms 4。
[1378]
步骤5：(r)-(1-氯-6,7-二氢-5h-螺[异喹啉-8,2'-[1,3]二氧戊环]-5-基)甲醇
[1379][1380]
在氩气气氛下，将9-bbn在thf(0.5m，616ml，308mmol)中的溶液逐滴添加至1-氯-5-亚甲基-6,7-二氢-5h-螺[异喹啉-8,2'-[1,3]二氧戊环](步骤4，37g，154mmol)在thf(118ml)中的溶液(用冰浴冷却)中。将rm在0℃下搅拌1小时，在rt下搅拌30min，在50℃下搅拌2小时，在rt下搅拌18小时。然后将rm用冰浴冷却并且添加naoh水溶液(4n，193ml，771mmol)，随后逐滴添加过氧化氢水溶液(30％，79ml，771mmol)，注意放热！将rm在rt下搅拌30min，用盐水稀释，用etoac萃取2x，将合并的有机层用10％na2s2o3水溶液(有机层阴性过氧化物试验)洗涤2x，经硫酸钠干燥并且浓缩。将残余物通过正相色谱法(硅胶，330g柱，洗脱液：dcm:etoh 98:2至90:10)纯化，将含有级分的产物蒸发并用含有2％dcm的二乙醚研磨以给出呈白色粉末的外消旋产物。通过正相色谱法(硅胶，330g柱，洗脱液：dcm:etoh 98:2至90:10)对滤液纯化，获得另外的外消旋产物。将对映异构体通过手性sfc：(仪器：thar 350制备型sfc；柱：chiralpak ad 10μm，300x50mm 38℃；洗脱液：co2:含有0.1％nh4oh的meoh，80:20；流速：200ml/min；检测：254nm)分离以给出作为主要的第二洗脱峰的标题化合物。
[1381]
lc-ms：rt＝2.02min；ms m/z[m+h]
+
256.3/258.3；uplc-ms 4。
[1382]
手性-sfc：rt＝3.45min；以(s)-(1-氯-6,7-二氢-5h-螺[异喹啉-8,2'-[1,3]二氧戊环]-5-基)甲醇作为第一洗脱峰，rt＝3.78min；c-sfc 8。
[1383]
步骤6：(r)-(1-氯-6,7-二氢-5h-螺[异喹啉-8,2'-[1,3]二氧戊环]-5-基)甲基氨基甲酸酯
[1384][1385]
在氩气气氛下，将三氯乙酰基异氰酸酯(9.28ml，78mmol)缓慢添加至(r)-(1-氯-6,7-二氢-5h-螺[异喹啉-8,2'-[1,3]二氧戊环]-5-基)甲醇(步骤5，16.76g，64.9mmol)在dce(300ml)中的溶液(用冰浴冷却)中。在0℃下搅拌30min后，添加k2co3(897mg，6.49mmol)，随后添加meoh(300ml)并且将rm在rt下搅拌过夜。将rm倒入nahco3饱和水溶液中，将混合物用dcm萃取2x。静置后，在有机萃取物中形成沉淀，将其通过过滤收集并干燥以给出呈白色粉末的标题化合物。将滤液经硫酸钠干燥，蒸发并用二乙醚研磨后，获得另外的产物。
[1386]
lc-ms：rt＝2.26min；ms m/z[m+h]
+
299.3/301.3；uplc-ms 4。
[1387]
步骤7：(s)-1'-氯-6',7'-二氢二螺[噁唑烷-4,5'-异喹啉-8',2
”‑
[1,3]二氧戊环]-2-酮
[1388][1389]
在氩气气氛下在45℃下，在ace压力管中将(r)-(1-氯-6,7-二氢-5h-螺[异喹啉-8,2'-[1,3]二氧戊环]-5-基)甲基氨基甲酸酯(步骤6，4.0g，13.26mmol)、二乙酰氧基碘苯(6.10g，18.56mmol)、mgo(1.29g，30.5mmol)和rh2(esp)2(262mg，331μmol)在dcm(133ml)中的混合物加热21小时。将另外的二乙酰氧基碘苯(1.28g，3.98mmol)、mgo(267mg，6.63mmol)和rh2(esp)2(50mg，66μmol)添加至rm中，将容器用氩气冲洗并且在45℃下再加热21小时。将冷却的rm倒入nahco3饱和水溶液中，将混合物用dcm萃取3x，将合并的有机层经na2so4干燥，过滤并浓缩。将残余物通过正相柱色谱法(硅胶，洗脱液：庚烷:etoac100:0至0:100)纯化，给出呈米色粉末的标题化合物。
[1390]
lc-ms：rt＝0.57min；ms m/z[m+h]
+
297.3/299.3；uplc-ms 1。
[1391]
通过以下替代路线也可以合成中间体ai：
[1392]
步骤1a：(s)-1-氯-5-亚甲基-5,6,7,8-四氢异喹啉-8-醇
[1393][1394]
在正氩气压力下，将rucl(对伞花烃)[(s,s)-ts-dpen](371mg，583μmol)在dcm(20ml)中的溶液逐滴添加至1-氯-5-亚甲基-6,7-二氢异喹啉-8(5h)-酮(步骤3，8.0g，38.8mmol)在dcm(100ml)中的溶液中。将rm用冰浴冷却并且逐滴添加甲酸(4.47ml，117mmol)。在5℃下搅拌2小时并在rt下搅拌18小时后，将rm在dcm(200ml)和nahco3饱和水溶液(100ml)之间分配，用dcm(50ml)萃取2x，将合并的有机层通过穿过相分离筒干燥并蒸发。将残余物通过正相色谱法(120g sio2柱；洗脱液：己烷:etoac 100:0至70:30)纯化以给出呈米色固体的标题化合物。
[1395]
lc-ms：rt＝0.70min；ms m/z[m+h]
+
196.1/198.1；uplc-ms 1。
[1396]
步骤2a：(s)-8-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-1-氯-5-亚甲基-5,6,7,8-四氢异喹啉
[1397][1398]
在rt下在正氩气压力下，将叔丁基二甲基甲硅烷基氯化物(9.31g，61.8mmol)添加至(s)-1-氯-5-亚甲基-5,6,7,8-四氢异喹啉-8-醇(步骤1a，8.95g，41.2mmol)和咪唑
(4.48g，65.9mmol)在dcm(150ml)中的溶液中。将rm在rt下搅拌20小时，在40℃下搅拌8小时并且在rt下静置66小时，用水(150ml)稀释，用dcm(30ml)萃取2x，将合并的有机层用nahco3饱和水溶液洗涤，干燥并蒸发。将残余物悬浮于二乙醚(30ml)和己烷(120ml)中，在rt下搅拌30min并且过滤。将滤液蒸发并通过正相色谱法(40g sio2柱；洗脱液：己烷:etoac 100:0至70:30)纯化以给出呈白色固体的标题化合物。
[1399]
lc-ms：rt＝1.59min；ms m/z[m+h]
+
310.2/312.1；uplc-ms 1。
[1400]
步骤3a：((5r,8s)-8-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-1-氯-5,6,7,8-四氢异喹啉-5-基)甲醇
[1401][1402]
在rt下在正氩气压力下，将9-硼杂双环[3.3.1]壬烷在thf(0.5m，167ml，84mmol)中的溶液逐滴添加至(s)-8-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-1-氯-5-亚甲基-5,6,7,8-四氢异喹啉(步骤2a，10.9g，33.4mmol)在1,2-dce(100ml)中的溶液中。将rm在60℃下搅拌4小时，冷却至5℃，并且添加naoh水溶液(4m，37.6ml，150mmol)和h2o2水溶液(30％，17.1ml，167mmol)，并且在rt下继续搅拌30min。将rm在dcm和nahco3饱和水溶液之间分配，用dcm萃取2x，将合并的有机层用na2s2o3水溶液洗涤，通过穿过相分离筒干燥并蒸发。将残余物通过正相色谱法(220g sio2柱；洗脱液：己烷:etoac 95:5至60:40)纯化以给出呈白色固体的标题化合物。
[1403]
lc-ms：rt＝1.31min；ms m/z[m+h]
+
328.1/320.1；uplc-ms 1。
[1404]
步骤4a：((5r,8s)-8-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-1-氯-5,6,7,8-四氢异喹啉-5-基)甲基氨基甲酸酯
[1405][1406]
将三氯乙酰基异氰酸酯(4.69ml，39.6mmol)逐滴添加至((5r,8s)-8-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-1-氯-5,6,7,8-四氢异喹啉-5-基)甲醇(步骤3a，11.5g，33.0mmol)在1,2-dce(150ml)中的溶液(用冰浴冷却)中。将rm在0℃下搅拌2.5小时并添加k2co3(0.46g，3.30mmol)和meoh(150ml)，并且在rt下继续搅拌16小时。将rm用nahco3饱和水溶液(200ml)和dcm(150ml)稀释，将水层用dcm(100ml)萃取2x，将合并的有机层通过穿过相分离器干燥并蒸发以给出呈白色结晶固体的标题化合物，将其未经进一步纯化而直接使用。
[1407]
lc-ms：rt＝1.27min；ms m/z[m+h]
+
371.2/373.2；uplc-ms 1。
[1408]
步骤5a：(5s,8s)-8-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-1-氯-7,8-二氢-6h-螺[异喹啉-5,4'-噁唑烷]-2'-酮
[1409][1410]
在45℃下在正n2压力下，将((5r,8s)-8-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-1-氯-5,6,7,8-四氢异喹啉-5-基)甲基氨基甲酸酯(步骤4a，14.0g，32.1mmol)、二乙酰氧基碘苯(14.76g，44.9mmol)、mgo(2.97g，73.8mmol)和rh2(esp)2(487mg，642μmol)在dcm(170ml)中的混合物搅拌48小时。添加另外rh2(esp)2(122mg，160μmol)并且将rm在45℃下再搅拌24小时。将rm在nahco3饱和水溶液(150ml)和dcm(100ml)之间分配，将水层用dcm(60ml)萃取2x，将合并的有机层通过穿过相分离筒干燥并且蒸发。将残余物通过正相色谱法(120g sio2柱；洗脱液：己烷:etoac 90:10至50:50)纯化以给出标题化合物。
[1411]
lc-ms：rt＝1.21min；ms m/z[m+h]
+
369.2/371.1；uplc-ms 1。
[1412]
步骤6a：(5s,8s)-1-氯-8-羟基-7,8-二氢-6h-螺[异喹啉-5,4'-噁唑烷]-2'-酮
[1413][1414]
将四-正丁基氟化铵在thf(1m，30.0ml，30.0mmol)中的溶液添加至(5s,8s)-8-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-1-氯-7,8-二氢-6h-螺[异喹啉-5,4'-噁唑烷]-2'-酮(步骤5a，9.72g，25.03mmol)在thf(100ml)中的溶液(用冰浴冷却)中。将rm在0℃搅拌1小时并在rt下搅拌16小时，然后用nahco3饱和水溶液(250ml)和dcm(150ml)稀释，将水层用dcm(150ml)萃取3x并用etoac(100ml)萃取2x，将合并的有机层通过穿过相分离筒干燥，并且蒸发。将残余物用etoac研磨2x并且将灰白色固体通过过滤收集以给出标题化合物，将其未经进一步纯化而直接使用。
[1415]
lc-ms：rt＝0.36min；ms m/z[m+h]
+
255.1/257.1；uplc-ms 1。
[1416]
步骤7a：(s)-1-氯-6,7-二氢-8h-螺[异喹啉-5,4'-噁唑烷]-2',8-二酮
[1417][1418]
在rt下，将戴斯-马丁高碘烷(4.41g，10.41mmol)添加至(5s,8s)-1-氯-8-羟基-7,8-二氢-6h-螺[异喹啉-5,4'-噁唑烷]-2'-酮(步骤6a，5.3g，5.20mmol)在dcm(80ml)中的悬浮液中并且在rt下搅拌1.5小时。然后将rm用na2s2o3水溶液(40ml)稀释并且在rt下搅拌30min，用dcm:meoh 3:1的混合物萃取4x，将合并的有机层通过穿过相分离器干燥并蒸发。将残余物通过正相色谱法(硅胶，洗脱液：庚烷:etoac 80:20至0:100)纯化。将含有级分的产物合并，蒸发，并且用dcm/庚烷的混合物在rt下搅拌20min。将不溶性材料通过过滤除去并将滤液干燥蒸发以给出呈灰白色固体的标题化合物。
[1419]
lc-ms：rt＝0.48min；ms m/z[m-h]-251.0/253.0；uplc-ms 1。
[1420]
步骤8a：(s)-1'-氯-6',7'-二氢二螺[噁唑烷-4,5'-异喹啉-8',2
”‑
[1,3]二氧戊环]-2-酮
[1421][1422]
将(s)-1-氯-6,7-二氢-8h-螺[异喹啉-5,4'-噁唑烷]-2',8-二酮(步骤7a，600mg，950μmol)，乙二醇(159μl，2.85mmol)，原甲酸三乙酯(506μl，3.04μmol)和对甲苯磺酸(32.7mg，190μmol)在甲苯(10ml)中的混合物在70℃下搅拌2小时并且在rt下搅拌18小时。添加另外的乙二醇(2ml)并且将rm在70℃下搅拌4小时。将rm用nahco3饱和水溶液(40ml)稀释，用dcm萃取3x，将合并的有机层通过穿过相分离筒干燥并且蒸发。将残余物通过正相色谱法(40g sio2柱；洗脱液：庚烷:etoac 90:10至0:100)纯化以给出呈灰白色固体的标题化合物。
[1423]
中间体aj：(s)-(1-氯-5-((3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)氨基)-8,8-二氟-5,6,7,8-四氢异喹啉-5-基)甲醇
[1424]
步骤1：(s)-1-氯-3'-(3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)-8,8-二氟-7,8-二氢-6h-螺[异喹啉-5,4'-噁唑烷]-2'-酮
[1425][1426]
在密封的小瓶中在氩气气氛下，将dast(2.76ml，20.9mmol)添加至(s)-1-氯-3'-(3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6,7-二氢-8h-螺[异喹啉-5,4'-噁唑烷]-2',8-二酮(中间体ak，1.0g，2.16mmol)在dcm(10ml)中的溶液中，并且将rm在40℃下加热72小时。将冷却的反应混合物逐滴添加至nahco3饱和水溶液中，注意：放热！，用dcm萃取3x，将合并的有机层经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将残余物通过正相色谱法(330g硅胶柱，洗脱液：庚烷:etoac 100:0至20:80)纯化以给出呈黄色粉末的标题化合物。
[1427]
lc-ms：rt＝5.74min；ms m/z[m+h]
+
486.4/488.4；uplc-ms 4。
[1428]
步骤2：(s)-(1-氯-5-((3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)氨基)-8,8-二氟-5,6,7,8-四氢异喹啉-5-基)甲醇
[1429]
[1430]
将naoh水溶液(4m，66.7ml，267mmol)小心地添加至etoh(200ml)中的(s)-1-氯-3'-(3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)-8,8-二氟-7,8-二氢-6h-螺[异喹啉-5,4'-噁唑烷]-2'-酮(步骤1，13.22g，26.7mmol)(用冰浴冷却)中。然后将rm在rt下搅拌1小时，稀释到nahco3饱和水溶液中，用dcm萃取3x，将合并的有机层经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将残余物通过正相色谱法(330g硅胶柱，洗脱液：庚烷:etoac 100:0至0:100，在40min内)纯化，获得呈黄色粉末的标题化合物。
[1431]
通过以下替代程序也可以合成中间体aj步骤2：
[1432]
将naoh水溶液(2wt％，181.2g，90.58mmol)小心地添加至etoh(200ml)中的(s)-1-氯-3'-(3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)-8,8-二氟-7,8-二氢-6h-螺[异喹啉-5,4'-噁唑烷]-2'-酮(步骤1，20.0g，41.17mmol)(用冰浴冷却)中。然后将反应混合物在40℃下搅拌16小时。将反应混合物用dcm(200ml)萃取。将水相分离并且用dcm(200ml)再次萃取。将有机相合并并用h2o(200ml)洗涤，将粗油状物通过穿过50g的硅胶过滤而纯化，通过mtbe洗脱。将含有产物的洗脱液在减压下浓缩以给出呈棕色油状物的标题化合物。
[1433]
lc-ms：rt＝5.84min；ms m/z[m+h]
+
460.4/462.4；uplc-ms 4。
[1434]
中间体ak：(s)-1-氯-3'-(3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6,7-二氢-8h-螺[异喹啉-5,4'-噁唑烷]-2',8-二酮
[1435][1436]
在rt下，将hcl(1n，174ml，174mmol)逐滴添加至(s)-1'-氯-3-(3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6',7'-二氢二螺[噁唑烷-4,5'-异喹啉-8',2
”‑
[1,3]二氧戊环]-2-酮(中间体al，18.23g，34.8mmol)在thf(200ml)中的溶液中，并且将rm在80℃下加热18小时。将rm倒入nahco3饱和水溶液中，用dcm萃取3x，将合并的有机层经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将残余物通过正相色谱法(2x330g硅胶柱，洗脱液：在30min内，庚烷:etoac 95:5至0:100)纯化以给出呈米色粉末的标题化合物。
[1437]
lc-ms：rt＝5.00min；ms m/z[m+h]
+
464.1/466.0；uplc-ms 4。
[1438]
通过以下替代路线也可以合成中间体ak：
[1439]
步骤1：(4'r,5'r)-1-氯-4',5'-二甲基-5-亚甲基-6,7-二氢-5h-螺[异喹啉-8,2'-[1,3]二氧戊环]
[1440][1441]
在n2气氛下，将1-氯-5-亚甲基-6,7-二氢异喹啉-8(5h)-酮(中间体ai，步骤3，3.5g，17.2mmol)、(2r,3r)-丁烷-2,3-二醇(3.14ml，34.3mmol)、hc(oet)3(8.58ml，51.5mmol)和对甲苯磺酸(591mg，3.43mmol)在甲苯(50ml)中的混合物在60℃下加热5小时。将冷却的rm在dcm和nahco3饱和水溶液之间分配，将水层用dcm再萃取2x，将合并的有机层
通过穿过相分离筒干燥并且蒸发。将残余物吸收在isolute上并且通过正相色谱法(40g sio2柱；洗脱液：庚烷:etoac 100:0至20:80)纯化以给出呈黄色固体的标题化合物。
[1442]
lc-ms：rt＝1.10min；ms m/z[m+h]
+
266.4/268.4；uplc-ms 1。
[1443]
步骤2：((4'r,5r,5'r)-1-氯-4',5'-二甲基-6,7-二氢-5h-螺[异喹啉-8,2'-[1,3]二氧戊环]-5-基)甲醇和((4'r,5s,5'r)-1-氯-4',5'-二甲基-6,7-二氢-5h-螺[异喹啉-8,2'-[1,3]二氧戊环]-5-基)甲醇
[1444][1445]
在rt下在正氩气压力下，将9-硼杂双环[3.3.1]壬烷在thf(0.5m，36.9ml，18.44mmol)中的溶液逐滴添加至(4'r,5'r)-1-氯-4',5'-二甲基-5-亚甲基-6,7-二氢-5h-螺[异喹啉-8,2'-[1,3]二氧戊环](步骤1，2.0g，7.38mmol)在1,2-dce(35ml)中的溶液中。将rm在60℃下搅拌2小时然后冷却至5℃，并且缓慢添加naoh水溶液(4m，8.30ml，33.2mmol)和h2o2水溶液(30％，3.77ml，36.9mmol)注意：放热反应！将rm在rt下搅拌2小时，在dcm和nahco3饱和水溶液之间分配，将水层用dcm萃取2x，将合并的有机层用na2s2o3水溶液洗涤，通过穿过相分离筒干燥并蒸发。将残余物通过正相色谱法(40g sio2柱；洗脱液：庚烷:etoac 80:20至0:100)纯化以给出呈灰白色泡沫的标题化合物作为非对映立体异构体的3:1混合物。
[1446]
lc-ms：rt＝3.06和3.08min；ms m/z[m+h]
+
284.3/286.3；uplc-ms 4。
[1447]
步骤3：((4'r,5r,5'r)-1-氯-4',5'-二甲基-6,7-二氢-5h-螺[异喹啉-8,2'-[1,3]二氧戊环]-5-基)甲基氨基甲酸酯和((4'r,5s,5'r)-1-氯-4',5'-二甲基-6,7-二氢-5h-螺[异喹啉-8,2'-[1,3]二氧戊环]-5-基)甲基氨基甲酸酯
[1448][1449]
将三氯乙酰基异氰酸酯(1.25ml，10.57mmol)逐滴添加至((4'r,5r,5'r)-1-氯-4',5'-二甲基-6,7-二氢-5h-螺[异喹啉-8,2'-[1,3]二氧戊环]-5-基)甲醇和((4'r,5s,5'r)-1-氯-4',5'-二甲基-6,7-二氢-5h-螺[异喹啉-8,2'-[1,3]二氧戊环]-5-基)甲醇(步骤2，2.0g，7.05mmol)在1,2-dce(15ml)中的溶液(用冰浴冷却)中。将rm在0℃下搅拌30min并在rt下搅拌30min，然后添加k2co3(97mg，705μmol)，随后添加meoh(15ml)，并且在rt下继续搅拌48小时。将rm在nahco3饱和水溶液(50ml)和dcm(50ml)之间分配，将水层用dcm萃取2x，将合并的有机层通过穿过相分离筒干燥并且蒸发。将残余物吸收在isolute上并且通过正相色谱法(40g sio2柱；洗脱液：庚烷:etoac 95:5至20:80)纯化以给出呈白色泡沫的标题化合物。
[1450]
lc-ms：rt＝0.77min；ms m/z[m+h]
+
327.3/329.3；uplc-ms 1。
[1451]
步骤4：(4s,4”r,5”r)-1'-氯-4”,5
”‑
二甲基-6',7'-二氢二螺[噁唑烷-4,5'-异喹啉-8',2
”‑
[1,3]二氧戊环]-2-酮和(4r,4”r,5”r)-1'-氯-4”,5
”‑
二甲基-6',7'-二氢二螺[噁唑烷-4,5'-异喹啉-8',2
”‑
[1,3]二氧戊环]-2-酮
[1452][1453]
在60℃下在正n2压力下，将((4'r,5r,5'r)-1-氯-4',5'-二甲基-6,7-二氢-5h-螺[异喹啉-8,2'-[1,3]二氧戊环]-5-基)甲基氨基甲酸酯和((4'r,5s,5'r)-1-氯-4',5'-二甲基-6,7-二氢-5h-螺[异喹啉-8,2'-[1,3]二氧戊环]-5-基)甲基氨基甲酸酯(步骤3，2.2g，6.46mmol)、二乙酰氧基碘苯(2.97g，9.05mmol)、mgo(599mg，14.87mmol)和rh2(esp)2(98mg，129μmol)在甲苯(15ml)中的混合物搅拌3小时。添加另外rh2(esp)2(25mg，32μmol)并且将rm在60℃下再搅拌2小时。将冷却的rm用nahco3饱和水溶液(50ml)和dcm(50ml)稀释，将水层用dcm(30ml)萃取2x，将合并的有机层通过穿过相分离筒干燥并且蒸发。将残余物通过正相色谱法(40g sio2柱，洗脱液：庚烷:etoac 90:10至0:100)纯化以给出呈米色泡沫的标题化合物。
[1454]
lc-ms：rt＝0.74min；ms m/z[m+h]
+
325.3/327.3；uplc-ms 1。
[1455]
步骤5：(4s,4”r,5”r)-1'-氯-3-(3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)-4”,5
”‑
二甲基-6',7'-二氢二螺[噁唑烷-4,5'-异喹啉-8',2
”‑
[1,3]二氧戊环]-2-酮
[1456][1457]
在密封的容器中在氩气气氛下，将(4s,4”r,5”r)-1'-氯-4”,5
”‑
二甲基-6',7'-二氢二螺[噁唑烷-4,5'-异喹啉-8',2
”‑
[1,3]二氧戊环]-2-酮和(4r,4”r,5”r)-1'-氯-4”,5
”‑
二甲基-6',7'-二氢二螺[噁唑烷-4,5'-异喹啉-8',2
”‑
[1,3]二氧戊环]-2-酮(步骤4，1.45g，4.29mmol)、2-氯-3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶(中间体a，1.68g，6.43mmol)、cubr(307mg，2.14mmol)和cs2co3(2.79g，8.57mmol)在dmf(20ml)中的混合物在130℃下加热2小时。将冷却的rm用etoac稀释，过滤并用nh4cl饱和水溶液分配。将水层用etoac进一步萃取，将合并的有机层用盐水洗涤，干燥并蒸发。将残余物通过正相色谱法(硅胶，洗脱液：庚烷:tbme 60:40)纯化以给出产物的2:1非对映异构体混合物。将非对映异构体通过手性sfc：(仪器：spiatec prep sfc100；柱：chiralpak ig 5μm，250x30mm 40℃；洗脱液：co2:含有0.1％nh4oh的iproh，85:15；流速：80ml/min；检测：276nm)分离以给出作为主要的第一洗脱峰的标题化合物。
[1458]
lc-ms：rt＝1.19min；ms m/z[m+h]
+
536.2/538.2；uplc-ms 1。
[1459]
手性-sfc：rt＝1.04min；(4r,4”r,5”r)-1'-氯-3-(3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲
基)吡啶-2-基)-4”,5
”‑
二甲基-6',7'-二氢二螺[噁唑烷-4,5'-异喹啉-8',2
”‑
[1,3]二氧戊环]-2-酮作为第二洗脱峰，rt＝2.21min；c-sfc 20。
[1460]
步骤6：(s)-1-氯-3'-(3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6,7-二氢-8h-螺[异喹啉-5,4'-噁唑烷]-2',8-二酮
[1461][1462]
将(s)-1-氯-3'-(3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6,7-二氢-8h-螺[异喹啉-5,4'-噁唑烷]-2',8-二酮(步骤5，722mg，1.35mmol)、hcl水溶液(5m，1.35ml，6.75mmol)和thf(5ml)的混合物在80℃下搅拌24小时。将冷却的rm在etoac和na2co3饱和水溶液之间分配，将水层用etoac萃取2x，将合并的水层用盐水洗涤，经na2so4干燥并且蒸发。将残余物通过正相色谱法(硅胶，洗脱液：庚烷:etoac 100:0至50:50)纯化以给出标题化合物。
[1463]
通过与上述路线相似的路线也可以合成中间体ak，在合成中间体ak的路线中通过(s,s)-1,2-二苯基-1,2-乙二醇代替(2r,3r)-丁烷-2,3-二醇。使用该路线获得非对映异构体硼氢化产物作为3:1混合物。
[1464]
中间体al：(s)-1'-氯-3-(3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6',7'-二氢二螺[噁唑烷-4,5'-异喹啉-8',2
”‑
[1,3]二氧戊环]-2-酮
[1465][1466]
在氩气气氛下在密封的ace压力管中，将(s)-1'-氯-6',7'-二氢二螺[噁唑烷-4,5'-异喹啉-8',2
”‑
[1,3]二氧戊环]-2-酮(中间体ai，15.0g，48.0mmol)、2-氯-3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶(中间体a，18.01g，72.0mmol)、和cs2co3(31.3g，96mmol)和cubr(3.44g，24.01mmol)在dmf(150ml)中的混合物在130℃下加热3.5小时。将冷却的rm用nahco3饱和水溶液稀释，用etoac萃取3x，将合并的有机层经na2so4干燥，过滤并浓缩。向残余物中添加dmf(150ml)中的2-氯-3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶(18.01g，72.0mmol)、和cs2co3(31.3g，96mmol)和cubr(3.44g，24.01mmol)，并且将rm在130℃下加热8小时。将冷却的rm稀释到nh4cl饱和水溶液中并且在rt下搅拌30min，用etoac萃取3x，将合并的有机层用盐水洗涤，干燥并浓缩。将残余物通过正相色谱法(2x220g硅胶柱，洗脱液：庚烷:etoac100:0至0:100)纯化，将含有级分的产物合并，蒸发并用etoac:et2o1:3的混合物研磨以给出呈棕色粉末的标题化合物。
[1467]
通过以下替代程序也可以合成中间体al：
[1468]
在环境温度下，在n2条件下，向反应器中装入(s)-1'-氯-6',7'-二氢二螺[噁唑
烷-4,5'-异喹啉-8',2
”‑
[1,3]二氧戊环]-2-酮(中间体ai，1.15g，86.9％测定，3.37mmol)、cutc(0.032g，0.168mmol)、cs2co3(2.20g，6.76mmol)和干dmso(10ml)。向所得混合物中添加2-氯-3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶(1.30g，98.2％测定，4.36mmol)在干dmso(10ml)中的溶液。允许反应混合物在80℃下搅拌3h。将反应混合物冷却至环境温度。添加h2o(60ml)和ipac(60ml)并且分离各层。将水相用ipac萃取2x。将合并的有机层用h2o洗涤3x，经无水na2so4干燥，过滤，在减压下浓缩。将残余物溶解于etoac中，穿过硅胶垫，并且在减压下浓缩以给出呈淡灰色固体的标题化合物。
[1469]
lc-ms：rt＝5.07min；ms m/z[m+h]
+
508.4/510.4；uplc-ms 4。
[1470]
中间体am：(r)-(1-氯-5,6,7,8-四氢异喹啉-5-基)甲醇
[1471]
步骤1：1-氯-5-亚甲基-5,6,7,8-四氢异喹啉
[1472][1473]
在氮气气氛下，向(三甲基甲硅烷基)甲基氯化镁(1m在et2o中，165ml，165mmol)的溶液(冷却至0℃-5℃)中缓慢添加1-氯-7,8-二氢异喹啉-5(6h)-酮(10g，55.1mmol)在et2o/ch2cl2(120ml/10ml)中的溶液。允许所得溶液经45min达到rt。将rm小心地倒入冷nh4cl饱和水溶液中，将各层分离并且将水层用ch2cl2萃取2x。将合并的有机萃取物干燥(相分离器)并蒸发以给出米色固体，将该米色固体溶解于ch2cl2(260ml)中。在氮气气氛下，向该溶液中缓慢添加bf3.et2o(2.72ml，22.0mmol)并且将rm在rt下搅拌30min。将rm倒入nahco3饱和水溶液中并且用dcm萃取2x。将合并的有机萃取物干燥(相分离器)并且蒸发以给出呈黄色固体的标题化合物。将化合物未经纯化而用于下一步骤。
[1474]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.18(d,1h),7.68(d,1h),5.86(s,1h),5.30(s,1h),2.78(t,2h),2.49(m,2h,与dmso峰重叠),1.85(m,2h)。
[1475]
lc-ms：rt＝1.09min；ms m/z[m+h]
+
180.1/182.1；uplc-ms 1。
[1476]
步骤2：(r)-(1-氯-5,6,7,8-四氢异喹啉-5-基)甲醇
[1477][1478]
在氮气气氛下，向1-氯-5-亚甲基-5,6,7,8-四氢异喹啉(步骤1，10.1g，54.8mmol)在thf(365ml)中的溶液(冷却至0℃-5℃)中添加bh3.thf(137ml，137mmol)。将rm在0℃-5℃下搅拌40min并再次添加bh3.thf(71ml，71mmol)。将rm再搅拌40min直至起始材料消耗。在0℃-5℃下，向rm中依次逐滴添加naoh(4m在水中，61.7ml，247mmol)和h2o2(35％，24ml，274mmol)(放热)并且将混合物在rt下搅拌50min。将rm用盐水稀释并用etoac萃取2x。将合并的有机萃取物用10％na2s2o3水溶液洗涤3x并且将有机层干燥(相分离器)并蒸发。将粗材料通过正相快速柱色谱法(120g sio2柱；洗脱液：c-己烷:etoac 100:0至30:70)纯化以给出呈白色固体的标题化合物。将对映异构体通过手性sfc：(仪器：mg制备型sfc(sfc-1)；柱：chiralpak ic，250x30mm i.d.，5μm，38℃；洗脱液：co2/iproh 60:40；流速：60ml/min；检
测：220nm)分离以给出作为第二洗脱峰的标题化合物(浅黄色油状物)。
[1479]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.12(d,1h),7.34(d,1h),4.86(t,1h),3.58(m,2h),2.86(m,1h),2.73-2.59(m,2h),1.88-1.79(m,2h),1.76-1.66(m,2h)。
[1480]
lc-ms：rt＝0.73min；ms m/z[m+h]
+
198.1/200.1；uplc-ms 1。
[1481]
手性-sfc：rt＝4.40min；(s)-(1-氯-5,6,7,8-四氢异喹啉-5-基)甲醇作为第一峰洗脱，rt＝4.10min；c-sfc 42。
[1482]
中间体an：(s)-1-氯-7,8-二氢-6h-螺[异喹啉-5,4'-噁唑烷]-2'-酮
[1483]
步骤1：(r)-(1-氯-5,6,7,8-四氢异喹啉-5-基)甲基氨基甲酸酯
[1484][1485]
在0℃-5℃下，在氮气气氛下，向(r)-(1-氯-5,6,7,8-四氢异喹啉-5-基)甲醇(中间体am，1.6g，8.09mmol)在1,2-二氯乙烷(40ml)中的溶液中缓慢添加三氯乙酰基异氰酸酯(1.16ml，9.71mmol)。将rm在0℃-5℃下搅拌30min。uplc指示中间体(三氯乙酰基氨基甲酸酯lc-ms：rt＝1.09min；ms m/z[m+h]
+
385.1/387.1；uplc-ms 2)的形成未完成。再次添加三氯乙酰基异氰酸酯(1.16ml，9.71mmol)并且将rm再搅拌10min。再次添加三氯乙酰基异氰酸酯(1.16ml，9.71mmol)以驱动反应完成。添加k2co3(112mg，0.81mmol)并继续搅拌10min，随后添加meoh(40ml)并且在rt下再搅拌14小时。再次添加k2co3(224mg，1.62mmol)，并且将混合物在rt下搅拌3小时，直至反应完成。将rm倒入水中并且用ch2cl2萃取2x。将合并的有机萃取物干燥(相分离器)并且蒸发。将粗残余物吸收在et2o中并滤出以给出呈白色固体的标题化合物。
[1486]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.15(d,1h),7.35(d,1h),6.56(m,2h),4.16-4.08(m,2h),3.09(m,1h),2.72-2.59(m,2h),1.89-1.72(m,4h)。
[1487]
lc-ms：rt＝0.76min；ms m/z[m+h]
+
241.1/243.1；uplc-ms 1。
[1488]
步骤2：(s)-1-氯-7,8-二氢-6h-螺[异喹啉-5,4'-噁唑烷]-2'-酮
[1489][1490]
在ace压力管中，将(r)-(1-氯-5,6,7,8-四氢异喹啉-5-基)甲基氨基甲酸酯(步骤1，1.46g，6.07mmol)、rh2(三苯基乙酸酯)4在与ch2cl2(38ml)中ch2cl2(218mg，0.15mmol)、phi(oac)2(2.74g，8.49mmol)、和mgo(562mg，13.9mmol)的复合物的悬浮液用氮气吹扫。将小瓶密封并且将混合物在45℃下搅拌15小时。再次添加与ch2cl2(218mg，0.15mmol)、phi(oac)2(2.74g，8.49mmol)、和mgo(562mg，13.9mmol)的复合物中的rh2(tpa)4，并且将rm在45℃下搅拌22小时。将rm倒入nahco3饱和水溶液中并且用dcm萃取3x。将合并的有机萃取物干燥(相分离器)并且蒸发。将粗残余物通过正相快速色谱法(80g sio2柱；洗脱液：c-己烷:etoac 100:0至0:100)纯化以给出呈白色固体的标题化合物。
[1491]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.32(s,1h),8.30(d,1h),7.48(d,1h),4.36(d,1h),4.22(d,1h),2.76-2.61(m,2h),2.03-1.90(m,2h),1.86-1.74(m,2h)。
[1492]
lc-ms：rt＝0.64min；ms m/z[m+h]
+
239.1/241.2；uplc-ms 1。
[1493]
中间体ao：(s)-(1-氨基-6-氟-1,2,3,4-四氢化萘-1-基)甲醇
[1494]
步骤1：(s)-n-(6-氟-3,4-二氢萘-1(2h)-亚基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺
[1495][1496]
在正n2压力下，将(s)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(4.35g，35.2mmol)逐滴添加至6-氟-1-四氢萘酮(4.58ml，33.5mmol)和ti(oipr)4(22.58ml，77mmol)的混合物中并且在50℃下加热3天。添加另外的ti(oipr)4(3.93ml，13.40mmol)并且将rm在50℃下搅拌1天。然后添加thf(100ml)和盐水(60ml)并且将混合物在rt下搅拌15min，通过hyflo过滤，用thf(30ml)洗涤3x。将滤液蒸发以留下主要是水性的相，将该主要是水性的相用水(100ml)稀释，并且用tbme(200于100ml)萃取2x，然后将合并的有机层用盐水(60ml)洗涤，经na2so4干燥，并且蒸发。将残余物通过正相色谱法(120g二氧化硅柱，洗脱液：庚烷:tbme 100:0至70:30)纯化以给出标题化合物。
[1497]
lc-ms：rt＝1.06min；ms m/z[m+h]
+
268.2；uplc-ms 1。
[1498]
步骤2：n-((s)-1-氰基-6-氟-1,2,3,4-四氢化萘-1-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺
[1499][1500]
向(s)-n-(6-氟-3,4-二氢萘-1(2h)-亚基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(步骤1，1.23g，4.37mmol)在dcm(10ml)中的搅拌溶液中添加csf(1.33g，8.74mmol)和tert.buoh(836μl，8.74mmol)，随后经4小时逐滴添加三甲基甲硅烷基氰化物(1.17ml，8.74mmol)：注意释放hcn的可能性！将rm在rt下搅拌18小时，然后一次性添加另外的三甲基甲硅烷基氰化物(2.34ml，17.48mmol)并且将rm在rt下搅拌4天。将rm在etoac(30ml)和na2co3水溶液(40ml)之间分配，用etoac(30ml)萃取1x，将合并的有机层用盐水(30ml)洗涤，经na2so4干燥，并且蒸发。将残余物通过正相色谱法(24g sio2柱，洗脱液：己烷:tbme 70:30至10:90)纯化，将含有级分的产物合并，蒸发并且将残余物用己烷:(ipr)2o研磨，过滤并干燥以给出标题化合物作为8:1非对映异构体的混合物。
[1501]
lc-ms：rt＝0.94min；ms m/z[m+h]
+
295.2；uplc-ms 1。
[1502]
步骤3：(s)-1-氨基-6-氟-1,2,3,4-四氢化萘-1-甲酸
[1503][1504]
将n-((s)-1-氰基-6-氟-1,2,3,4-四氢化萘-1-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(步
骤2，5.75g，18.95mmol)和浓盐酸(57.6ml，1.90mol)的混合物在100℃下搅拌10min，在rt下搅拌18小时，在100℃下搅拌1小时，并且在rt下搅拌18小时。将rm用h2o(30ml)稀释并用dcm(50ml)洗涤，将有机层用h2o(40ml)萃取，并且将合并的水层用dcm(20ml)洗涤。将合并的水层蒸发，并且将甲苯添加至残余物中，将该混合物蒸发以给出呈棕色树脂的标题化合物，将其未经进一步纯化而直接使用。
[1505]
步骤4：(s)-(1-氨基-6-氟-1,2,3,4-四氢化萘-1-基)甲醇
[1506][1507]
在rt下，将bh3.thf复合物(1m，50ml，50.0mmol)逐滴添加至thf(80ml)中的(s)-1-氨基-6-氟-1,2,3,4-四氢化萘-1-甲酸(步骤3，6.75g，13.74mmol)中，并且将rm在rt下搅拌3天。逐滴添加另外的bh3.thf复合物(55.0ml，55.0mmol)，并且将rm在rt下搅拌24小时，随后添加另外的bh3.thf复合物(20ml，20.00mmol)并且在rt下搅拌24小时。通过向rm中添加h2o(50ml)/hcl水溶液(4n，2ml)，将rm淬灭：注意气体释放！在40℃下搅拌30min后，将thf通过蒸发除去，并且将剩余的主要是水性的相用水(100ml)稀释并用tbme(100ml)洗涤2x。将水层用na2co3处理直至约ph 9，转移至分液漏斗中并且用dcm(80ml)萃取5x，将合并的有机层用盐水(70ml)洗涤，经na2so4干燥，并且蒸发。将残余物通过反相色谱法(rp-hplc 1)纯化以给出呈白色固体的标题化合物的三氟乙酸盐。通过将盐吸收到dcm和naoh水溶液中获得游离碱，用dcm再萃取2x，将合并的有机层经na2so4干燥，并且蒸发。
[1508]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ7.60-7.56(m,1h),6.96-6.90(m,1h),6.87-6.82(m,1h),4.77(t,1h),3.43-3.39(m,1h),3.27-3.23(m,1h),2.75-2.67(m,2h),2.05-1.98(m,1h),1.79-1.69(m,4h),1.50-1.43(m,1h)。
[1509]
中间体ap：(s)-(1-氯-5-((3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)氨基)-5,6,7,8-四氢异喹啉-5-基)甲醇
[1510]
步骤1：(s)-1-氯-3'-(3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)-7,8-二氢-6h-螺[异喹啉-5,4'-噁唑烷]-2'-酮
[1511][1512]
在ace压力管中，将(s)-1-氯-7,8-二氢-6h-螺[异喹啉-5,4'-噁唑烷]-2'-酮(中间体an，270mg，1.13mmol)、2-氯-3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶(中间体a，420mg，1.69mmol)、cubr(81mg，0.57mmol)和cs2co3(737mg，2.26mmol)在dmf(11ml)中的溶液在120℃下搅拌3.5小时。将rm倒入nahco3饱和水溶液中并且用etoac萃取3x。将合并的有机萃取物用水洗涤2x，干燥(相分离器)并蒸发。将粗材料溶解于thf(5ml)中，添加硫醇(粒度：40-63μm，载量1.40mmol/g，1.70mmol，1.21g)并且将混合物在40℃下涡旋1小时。将粗产物通过正相快速色谱法(40g sio2柱，洗脱液：c-己烷:etoac 100:0至75:25)纯化以给出呈米色固体的标题化合物。
[1513]1h nmr(600mhz,dmso-d6)δ8.61(m,1h),8.25(d,1h),8.16(m,1h),7.46(t,1h),7.34(d,1h),4.72(d,1h),4.52(d,1h),2.82(dd,1h),2.64-2.58(m,1h),2.46(m,1h),2.16(m,1h),2.01(m,1h),1.82(m,1h)。
[1514]
lc-ms：rt＝1.17min；ms m/z[m+h]
+
450.2/452.2；uplc-ms 1。
[1515]
步骤2：(s)-(1-氯-5-((3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)氨基)-5,6,7,8-四氢异喹啉-5-基)甲醇
[1516][1517]
将naoh(1.97ml，7.89mmol)添加至(s)-1-氯-3'-(3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)-7,8-二氢-6h-螺[异喹啉-5,4'-噁唑烷]-2'-酮(355mg，0.79mmol)在etoh(6.8ml)中的混合物中并且将rm在90℃下搅拌15min。将反应混合物倒入nahco3饱和水溶液中，用dcm萃取3x，将合并的有机萃取物干燥(相分离器)并且蒸发。将粗残余物不经纯化而用于下一步骤。
[1518]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.01(d,1h),7.96(s,1h),7.58(s,1h),7.37(t,1h),7.21(d,1h),6.71(s,1h),5.74(t,1h),3.71(dd,1h),3.45(dd,1h),2.87(m,1h),2.65(m,1h),2.37(m,1h与dmso重叠),1.98-1.82(m,3h)。
[1519]
lc-ms：rt＝1.19min；ms m/z[m+h]
+
424.2/426.2；uplc-ms 1。
[1520]
中间体aq：(s)-(3-氯-8-((3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)氨基)-5,6,7,8-四氢异喹啉-8-基)甲醇
[1521]
步骤1：(s)-n-(3-氯-6,7-二氢异喹啉-8(5h)-亚基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺
[1522][1523]
在rt下在n2流下，将(s)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(712mg，5.75mmol)添加至3-氯-6,7-二氢异喹啉-8(5h)-酮(1g，5.23mmol)和ti(oipr)4(4ml，12.8mmol)中，并且将rm在50℃下伴随n2流搅拌22.5小时。将冷却的rm用thf和盐水稀释，并且在rt下搅拌15min。将rm过滤，用thf洗涤。将滤液蒸发并且在水和etoac之间分配。将合并的有机层用盐水洗涤，经na2so4干燥并蒸发。将残余物吸收在isolute上并且通过正相色谱法(80g sio2柱；洗脱液：庚烷:etoac 100:0至40:60)纯化。将含有级分的产物合并并且蒸发，以给出呈黄色固体的标题化合物。
[1524]
lc-ms：rt＝0.98min；ms m/z[m+h]
+
285.1/287.2；uplc-ms 1。
[1525]
步骤2：(s)-n-(3-氯-8-氰基-5,6,7,8-四氢异喹啉-8-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺
[1526][1527]
在rt下在ar下，将三甲基硅烷甲腈(6.5ml，48.5mmol)随后是t-buoh(0.764ml，7.98mmol)添加至dcm(12ml)中的(s,e)-n-(3-氯-6,7-二氢异喹啉-8(5h)-亚基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(步骤1，1.16g，3.99mmol)和氟化铯(1.21g，7.98mmol)中。将rm在rt下搅拌135min并且添加另外的三甲基硅烷甲腈(2ml，14.9mmol)，随后在rt下搅拌18小时，然后添加另外的三甲基硅烷甲腈(1.5ml，11.2mmol)。在rt下再搅拌2.5小时后，将rm用etoac稀释，将有机层用盐水和nahco3饱和水溶液洗涤，经na2so4干燥并蒸发。将残余物吸收在isolute上并且通过正相色谱法(80g sio2柱；洗脱液：庚烷:etoac 100:0至30:70)纯化。将含有级分的产物合并并且蒸发，以给出呈灰白色泡沫的标题化合物。
[1528]
lc-ms：rt＝0.87min；ms m/z[m+h]
+
312.1/314.2；uplc-ms 1。
[1529]
步骤3：3-氯-8-((s)-1,1-二甲基乙基亚磺酰胺基)-5,6,7,8-四氢异喹啉-8-甲酰胺
[1530][1531]
将(s)-n-(3-氯-8-氰基-5,6,7,8-四氢异喹啉-8-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(步骤2，1.05g，3.3mmol)和(氢化(二甲基亚膦酸-kp)[氢双(二甲基膦-kp)]铂(ii)(parkin催化剂，142mg，330μmol)悬浮于etoh(10ml)和水(2.5ml)的混合物中。将rm在60℃下搅拌70min，然后过滤，用meoh洗涤并且将滤液蒸发。将滤液用nahco3饱和水溶液稀释并用etoac萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经na2so4干燥并蒸发。将残余物吸收在isolute上并且通过正相色谱法(80g sio2柱；洗脱液：庚烷:etoac 100:0至70:30)纯化。将含有级分的产物合并并且蒸发，以给出标题化合物作为非对映异构体的混合物。
[1532]
lc-ms：rt＝0.69/0.72min；ms m/z[m+h]
+
330.1/332.1；uplc-ms 1。
[1533]
步骤4：8-氨基-3-氯-5,6,7,8-四氢异喹啉-8-甲酸
[1534][1535]
将3-氯-8-((s)-1,1-二甲基乙基亚磺酰胺基)-5,6,7,8-四氢异喹啉-8-甲酰胺(步骤3，952mg，2.83mmol)在hcl水溶液(6m，5ml，30mmol)中的溶液在100℃下搅拌18小时。将冷却的rm用naoh水溶液(2m，16ml，32mmol)中和至约ph 7并蒸发以给出呈白色固体的标题化合物，将其不经进一步纯化而用于下一步骤。
[1536]
lc-ms：rt＝0.53min；ms m/z[m+h]
+
227.1/229.1；uplc-ms 3。
[1537]
步骤5：(s)-(8-氨基-3-氯-5,6,7,8-四氢异喹啉-8-基)甲醇
[1538][1539]
在0℃下在ar下，将硼烷-thf复合物溶液在thf(1m，10ml，10mmol)中的溶液经15min逐滴添加至thf(10ml)中的8-氨基-3-氯-5,6,7,8-四氢异喹啉-8-甲酸(步骤4，635mg，2.8mmol)中。将rm在rt下搅拌16小时，然后小心地用meoh淬灭并且蒸发，用meoh共蒸发3x。将残余物用meoh稀释并添加et2o(2m，1.5ml，3mmol)中的hcl。添加另外的et2o直至形成沉淀并且将rm在rt下搅拌30min。将rm过滤，并且将nahco3饱和水溶液添加至固体中，并将水相用etoac萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经na2so4干燥，并且蒸发以给出标题化合物作为对映异构体的混合物。将对映异构体通过手性hplc：(仪器：gilson trilution i hplc制备型系统；柱：lux i-cel-5，5μm，250x30mm 25℃；洗脱液：庚烷etoh:meoh 80:10:10+0.05％et2nh；流速：15ml/min；检测：220nm)分离以给出作为第一洗脱峰的标题化合物。手性-hplc：rt＝7.60min。
[1540]
lc-ms：rt＝0.38min；ms m/z[m+h]
+
213.1/215.1；uplc-ms 1。
[1541]
(r)-(8-氨基-3-氯-5,6,7,8-四氢异喹啉-8-基)甲醇作为第二洗脱峰，rt＝9.13min；c-hplc 49。
[1542]
步骤6：(s)-3-氯-6,7-二氢-5h-螺[异喹啉-8,4'-噁唑烷]-2'-酮
[1543][1544]
在0℃下在ar下，将双(三氯甲基)碳酸酯(86mg，288μmol)在dcm(3ml)中的溶液逐滴添加至dcm(5ml)中的(s)-(8-氨基-3-氯-5,6,7,8-四氢异喹啉-8-基)甲醇(步骤5，125mg，576μmol)和三乙胺(169μl，1.21mmol)中。将rm在rt下搅拌1小时，然后用nh4cl饱和水溶液淬灭并且用dcm萃取3x。将合并的有机层用盐水洗涤，经na2so4干燥，并且蒸发以给出呈灰白色固体的标题化合物。
[1545]
lc-ms：rt＝0.64min；ms m/z[m+h]
+
239.1/241.1；uplc-ms 1。
[1546]
步骤7：(s)-3-氯-3'-(3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6,7-二氢-5h-螺[异喹啉-8,4'-噁唑烷]-2'-酮
[1547][1548]
将(s)-3-氯-6,7-二氢-5h-螺[异喹啉-8,4'-噁唑烷]-2'-酮(步骤6，140mg，557μmol)、碘化铜(i)(53.3mg，280μmol)、碳酸铯(363mg，1.12mmol)和2-氯-3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶(中间体a，248mg，1.0mmol)在dmf(5ml)中的混合物在ar下在120℃下加热2小时。添加另外的2-氯-3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶(中间体a，74mg，0.3mmol)和碘化铜(i)(15.2mg，80μmol)，并且将rm在120℃下再加热1.5小时。将rm用nahco3饱和水溶液稀释并用etoac萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经na2so4干燥并蒸发。将残余物用thf
(15ml)稀释并添加硫醇(0.141mmol，141mg，粒度：40-63μm，载量1.41mmol/g，silicycle)，并且将rm在40℃下搅拌1小时。将rm过滤，用thf洗涤，并且将滤液蒸发。将残余物吸收在isolute上并且通过正相色谱法(40g sio2柱，洗脱液：庚烷:etoac 100:0至80:20)纯化。将含有级分的产物合并，并且蒸发。将残余物用己烷研磨并且过滤以给出呈白色泡沫的标题化合物。
[1549]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.61(d,1h),8.39(s,1h),8.14(d,1h),7.47(t,1h),7.34(s,1h),4.72(d,1h),4.52(dd,1h),2.79-2.65(m,2h),2.57(d,1h),2.22(d,1h),1.96-1.87(m,1h),1.85-1.75(m,1h)。
[1550]
lc-ms：rt＝1.15min；ms m/z[m+h]
+
450.1/452.1；uplc-ms 1。
[1551]
步骤8：(s)-(3-氯-8-((3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)氨基)-5,6,7,8-四氢异喹啉-8-基)甲醇
[1552][1553]
将(s)-3-氯-3'-(3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6,7-二氢-5h-螺[异喹啉-8,4'-噁唑烷]-2'-酮(步骤7，160mg，334μmol)悬浮于etoh(3ml)中，并且添加naoh水溶液(2m，1ml，2mmol)。将rm在80℃下搅拌1.5小时，将冷却的rm用水稀释并且用etoac萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经na2so4干燥并蒸发以给出标题化合物。
[1554]
lc-ms：rt＝1.19min；ms m/z[m+h]
+
424.1/426.2；uplc-ms 1。
[1555]
中间体ar：(s)-(7-溴-4-((3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)氨基)-8-氟色满-4-基)甲醇
[1556]
步骤1：(s)-7-溴-3'-(3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)-8-氟螺[色满-4,4'-噁唑烷]-2'-酮
[1557][1558]
在ace压力管中，将(s)-7-溴-8-氟螺[色满-4,4'-噁唑烷]-2'-酮(中间体as，5.4g，17.9mmol)、2-氯-3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶(中间体a，5.75g，23.2mmol)、cui(1.70g，8.94mmol)和碳酸铯(11.6g，35.8mmol)在dmf(140ml)中的溶液在130℃下搅拌2.5小时。将2-氯-3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶(中间体a，1.99g，8.04mmol)添加至rm中，将该混合物在130℃下再加热2小时。将rm倒入nh4cl饱和水溶液(200ml)中，在rt下搅拌1小时，然后用etoac萃取3x。将合并的有机萃取物用nh4cl饱和水溶液洗涤2x，经na2so4干燥，过滤并蒸发。将粗残余物通过正相快速色谱法(220g redisep gold柱；洗脱液，c-己烷:
etoac 100:0至65:35)纯化以给出呈黄色固体的标题化合物。
[1559]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.64(s,1h),8.13(s,1h),7.46(t,1h),7.15(dd,1h),7.04(dd,1h),4.80(d,1h),4.56-4.52(m,2h),4.32(m,1h),3.12(m,1h),2.48-2.39(m,1h与dmso峰重叠)。
[1560]
lc-ms：rt＝1.24min；ms m/z[m+hcoo]-557.0/559.0；uplc-ms 1。
[1561]
步骤2：(s)-(7-溴-4-((3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)氨基)-8-氟色满-4-基)甲醇
[1562][1563]
将(s)-7-溴-3'-(3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)-8-氟螺[色满-4,4'-噁唑烷]-2'-酮(步骤1，5.65g，11.0mmol)和naoh(4m，27.5ml，110mmol)在etoh(55ml)中的混合物在90℃下搅拌50min。将rm倒入水中并且用dcm萃取2x。将合并的有机萃取物经na2so4干燥，过滤并蒸发以得到呈浅黄色泡沫的标题化合物，将其不经进一步纯化用于下一步骤。
[1564]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.04(s,1h),7.60(s,1h),7.38(t,1h),7.00(dd,1h),6.94(br s,1h),5.73(br t,1h),4.46(m,1h),4.33(m,1h),3.87(dd,1h),3.61(dd,1h),2.90(dt,1h),2.05(dt,1h)。
[1565]
lc-ms：rt＝1.25min；ms m/z[m+h]
+
487.0/489.0；uplc-ms 1。
[1566]
中间体as：(s)-7-溴-8-氟螺[色满-4,4'-噁唑烷]-2'-酮
[1567][1568]
在0℃-5℃下，向(s)-(4-氨基-7-溴-8-氟色满-4-基)甲醇(中间体at，5g，18.1mmol)和三乙胺(5.30ml，38.0mmol)在dcm(100ml)中的溶液中逐滴添加三光气(2.15g，7.24mmol)在dcm(100ml)中的溶液。将黄色溶液在rt下搅拌50min。将rm倒入nahco3饱和水溶液中并且用dcm萃取3x。将合并的有机萃取物干燥(相分离器)并且蒸发以给出呈米色泡沫的标题化合物。
[1569]
lc-ms：rt＝0.82min；ms m/z[m+nh4]
+
319.1/321.0；uplc-ms 1。
[1570]
中间体at：(s)-(4-氨基-7-溴-8-氟色满-4-基)甲醇
[1571]
步骤1：外消旋-甲基4-氨基-7-溴-8-氟色满-4-甲酸酯
[1572][1573]
将4-氨基-7-溴-8-氟色满-4-甲酸(中间体au，250g，765mmol，hcl盐)和socl2(910g，7.66mol)在meoh(2l)中的悬浮液在65℃下搅拌16小时。将rm在减压下浓缩，并且将残余物在na2co3饱和水溶液(1l)和dcm(1l)之间分配。将水相用dcm(500ml)再萃取2x，将合并的有机层用盐水(600ml)洗涤，经na2so4干燥，过滤并浓缩以给出呈淡黄色固体的标题化合物。
[1574]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.83(br,s,3h),7.51(dd,1h),7.29(dd,1h),5.87(br s,1h),4.49-4.40(m,1h),4.38-4.26(m,1h),3.78(s,2h),3.36(br s,2h),2.44-2.34(m,1h),2.18-2.07(m,1h)。
[1575]
步骤2：(s)-(4-氨基-7-溴-8-氟色满-4-基)甲醇
[1576][1577]
在28℃下，向外消旋-甲基4-氨基-7-溴-8-氟色满-4-甲酸酯(步骤1，240g，723mmol)在meoh(2l)中的溶液中添加nabh4(137g，3.62mol)并且将rm在28℃下搅拌16小时。将溶剂在减压下除去并且将残余物吸收到dcm(1l)中，并且用盐水(600ml)洗涤。将水相用dcm(200ml)萃取2x并且将合并的有机层用盐水(300ml)洗涤，经na2so4干燥，过滤并浓缩。将残余物重新溶解于meoh(1.5l)中，并且添加hcl/meoh(4m，1l)，将混合物在25℃下搅拌1小时然后浓缩。将残余物用mtbe(200ml)研磨以给出呈灰白色固体的外消旋标题化合物。将对映异构体通过手性sfc：(仪器：thar 350制备型sfc；柱：chiralpak ad，10μm，50x300cm；温度38℃；洗脱液：co2:meoh+0.1％nh4oh，100:0至65:35；流速：200ml/min；背压：100巴；检测：220nm)分离以给出作为第二洗脱峰的标题化合物。
[1578]
lc-ms：rt＝1.75min；ms m/z[m+h]
+
276.2/278.2；uplc-ms 4。
[1579]
手性-hplc：rt＝4.78min；以(r)-(4-氨基-7-溴-8-氟色满-4-基)甲醇作为第一洗脱峰，rt＝4.16min；c-hplc 10。
[1580]
中间体au：4-氨基-7-溴-8-氟色满-4-甲酸
[1581]
步骤1：3-(3-溴-2-氟苯氧基)丙酸
[1582][1583]
在0℃下，向矿物油中的nah(60％，201g，5.03mol，60％纯度)在dmf(2l)中的分散体中添加3-溴-2-氟苯酚(800g，4.19mol)并且将混合物在28℃下搅拌3小时。向rm中添加β-丙内酯(362g，5.03mol)并且将混合物在28℃下搅拌32小时。将rm倒入冰水(8l)中，以给出灰白色沉淀。将固体通过过滤收集并且用乙腈(800ml)浆化以给出呈白色固体的标题化合物。
[1584]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ12.46(s,1h),7.29-7.18(m,2h),7.14-7.06(m,1h),
4.26(t,2h),2.72(t,2h)。
[1585]
步骤2：7-溴-8-氟色满-4-酮
[1586][1587]
在80℃下，向p2o5(421g，2.97mol)在甲磺酸(2l)中的悬浮液中添加3-(3-溴-2-氟苯氧基)丙酸(步骤1，400g 1.48mol)。在80℃下搅拌15min后，将rm倒入冰水(4l)中，然后用乙酸乙酯(800ml)萃取3x。将合并的有机层用盐水(300ml)洗涤2x，经na2so4干燥，过滤并浓缩。将残余物用accn(500ml)浆化以给出呈黄色固体的标题化合物。
[1588]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ7.50(dd,1h),7.35(dd,1h),4.69(t,2h),2.87(t,2h)。
[1589]
步骤3：外消旋-7-溴-8-氟螺[色满-4,4'-咪唑烷]-2',5'-二酮
[1590][1591]
在密封管中，将7-溴-8-氟色满-4-酮(步骤2，452g，1.84mol)、kcn(179g，2.75mol)和(nh4)2co3(1.94kg，20.2mol)在etoh(4l)和h2o(4l)的混合物中的溶液在100℃下搅拌16小时。将反应混合物在减压下浓缩并且过滤以给出粗产物。将粗产物用accn(500ml)浆化以给出呈浅黄色固体的标题化合物。
[1592]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ11.08(br,s,1h),8.62(br,s,1h),7.34-7.15(m,1h),6.91(br,d,1h),4.62(br,t,1h),4.33(td,1h),2.70-2.64(m,1h),2.38-2.29(m,1h),2.23-2.12(m,1h)。
[1593]
步骤4：外消旋-4-氨基-7-溴-8-氟色满-4-甲酸
[1594][1595]
将外消旋-7-溴-8-氟螺[色满-4,4'-咪唑烷]-2',5'-二酮(步骤3，400g1.27mol)和koh(712g 12.7mol)在水(2l)中的悬浮液在105℃下搅拌54小时。将rm调节至ph 7导致淡黄色沉淀形成，将该沉淀通过过滤收集。将固体用水(300ml)洗涤并且干燥以给出呈浅黄色固体的标题化合物。
[1596]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.02(br,s,2h),7.20-7.16(m,2h),4.62(br,t,1h),4.33(dt,1h),2.46-2.40(m,1h),2.07-1.99(m,1h)。
[1597]
通过以下替代路线也可以合成中间体au，作为非外消旋混合物，富集(s)-对映异构体：
[1598]
步骤1a：(s)-n-(7-溴-8-氟色满-4-亚基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺
[1599][1600]
在氮气流下在rt下，向7-溴-8-氟色满-4-酮(步骤2，4.36g，17.8mmol)和ti(oipr)4(12.0ml，40.9mmol)的混合物中添加(s)-(-)-叔丁烷亚磺酰胺(2.26g，18.7mmol)。将rm在50℃下在连续n2流下加热18小时。添加水(110ml)随后添加etoac(110ml)并且将所得悬浮液搅拌15min。将混合物通过硅藻土过滤并且将固体依次用水和etoac冲洗。向滤液中添加盐水(100ml)并且将混合物用etoac萃取。将有机层干燥(相分离器)并蒸发。将粗残余物通过正相快速色谱法(sio2柱；洗脱液，c-己烷:etoac 100:0至80:20)纯化以给出呈黄色油状物的标题化合物。
[1601]
lc-ms：rt＝1.16min；ms m/z[m+h]
+
348.2/350.0；uplc-ms 1。
[1602]
步骤2a：(s)-n-(7-溴-4-氰基-8-氟色满-4-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺
[1603][1604]
向ace压力管中装入(s)-n-(7-溴-8-氟色满-4-亚基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(步骤1a，3.87g，11.1mmol)和氟化铯(3.38g，22.2mmol)。添加dcm(55ml)，随后添加叔丁醇(2.24ml，22.2mmol)和三甲基甲硅烷基氰化物(6.95ml，55.6mmol)。将管密封并且将rm在rt下搅拌16小时。再次添加三甲基甲硅烷基氰化物(6.95ml，27.8mmol)并且将rm再搅拌5小时。将rm倒入nahco3饱和水溶液中并且用ch2cl2萃取2x。将合并的有机萃取物干燥(相分离器)并且蒸发。将粗材料通过正相快速色谱法(100g sio2柱；洗脱液：c-己烷:etoac 100:0至50:50)纯化以给出呈白色泡沫的标题化合物作为非对映异构体的混合物(dr＝75:25)。
[1605]
lc-ms：rt＝4.79和4.84min；ms m/z[m+nh4]
+
392.1./394.1；uplc-ms 6。
[1606]
步骤3a：7-溴-4-((s)-1,1-二甲基乙基亚磺酰胺基)-8-氟色满-4-甲酰胺
[1607][1608]
将(s)-n-(7-溴-4-氰基-8-氟色满-4-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(步骤2a，3:1非对映异构体混合物，2.97g，7.91mmol)溶解于thf/水3:1的混合物(31.6ml)中。添加乙酰胺(1.96g，33.2mmol)和pdcl2(140mg，0.79mmol)并且将混合物在rt下在氮气气氛下搅拌19小时。将rm倒入盐水中并且用ch2cl2萃取2x。将合并的有机层干燥(相分离器)并蒸发以给出呈棕色泡沫的标题化合物(3:1非对映异构体的混合物)，将其不经进一步纯化用于下一步
骤。
[1609]
lc-ms：rt＝0.85和0.87min；ms m/z[m+nh4]
+
393.1/395.1；uplc-ms 1。
[1610]
步骤4a：4-氨基-7-溴-8-氟色满-4-甲酸盐酸盐
[1611][1612]
将7-溴-4-((s)-1,1-二甲基乙基亚磺酰胺基)-8-氟色满-4-甲酰胺(步骤3a，3:1非对映异构体混合物，3.10g，7.17mmol)在hcl(5m，32.7ml)中稀释并且将混合物回流14小时。允许rm冷却至rt并添加ch2cl2。分离各层并且将水层浓缩以给出呈棕色固体的标题化合物(3:1非对映异构体混合物)，将其不经进一步纯化用于下一步骤。
[1613]
lc-ms：rt＝0.43min；ms m/z[m+h]
+
290.0/292.1；uplc-ms 1。
[1614]
使用用于制备中间体au的方法来制备以下中间体au1和au9。
[1615][1616]
中间体av：2-(甲基-d3)-1,3,2-二氧代硼杂
[1617]
步骤1：1,3-双((1,3,2-二氧代硼杂-2-基)氧基)丙烷
[1618]
[1619]
在迪安-斯达克(dean-stark)设备中，将丙烷-1,3-二醇(52.1ml，721mmol)和硼酸(30g，480mmol)在甲苯(400ml)中的混合物在回流下加热13小时，同时除去水。然后将冷却的rm蒸发并且将残余物在0.5毫巴真空下通过球到球蒸馏(bulb-to-bulb distillation)纯化。将级分在200-220℃之间蒸馏，获得呈粘性澄清无色油状物的标题化合物。
[1620]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ3.93(t,8h),3.69(t,4h),1.83(五重,4h),1.62(五重,2h)。
[1621]
步骤2：2-(甲基-d3)-1,3,2-二氧代硼杂
[1622][1623]
将1,3-双((1,3,2-二氧代硼杂-2-基)氧基)丙烷(步骤1，10.0g，36.9mmol)和硼酸三甲酯(3.84g，36.9mmol)的混合物在rt下搅拌0.5小时。然后将rm用et2o(110ml)稀释，用干冰/丙酮浴冷却，并且经1小时逐滴添加(甲基-d3)碘化镁在et2o中的溶液(1m，111ml，由d
3-甲基碘化物和mg制备，并且以i2开始)。将rm在-75℃下再搅拌2小时，然后允许其升温至rt，并且逐滴添加hcl在et2o(2m，55.4ml，111mmol)中的溶液。在rt下搅拌1小时后，将rm过滤，并在700毫巴的压力和35℃的浴温下，在旋转蒸发仪上减少滤液的体积。将残余物转移至蒸馏设备中，并且用100毫巴的真空分级蒸馏。在40-45℃之间蒸馏，收集呈澄清淡黄色油状物的标题化合物。
[1624]1h nmr(400mhz,氯仿-d)δ4.00(t,4h),1.96(五联,2h)。
[1625]
中间体aw：(s)-8'-(二氟甲氧基)-8-氟-7-碘-6'-(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]
[1626][1627]
将(s)-7-溴-8'-(二氟甲氧基)-8-氟-6'-(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶](实例39，150mg，320μmol)、cui(30mg，160mmol)、nai(96mg，639μmol)和反式-n,n'-二甲基-1,2-环己烷二胺(5μl，32μmol)在1,4-二噁烷(3ml)中的混合物在密封管中在110℃下在氮气气氛下加热18小时。向冷却的rm中添加另外的cui(30mg，160mmol)、nai(96mg，639μmol)和反式-n,n'-二甲基-1,2-环己烷二胺(5μl，32μmol)并且在110℃下继续加热18小时。将冷却的rm在dcm和30％nh3水溶液之间分配，将水相用dcm萃取3x，将合并的有机相通过穿过相分离筒干燥并且浓缩。将残余物通过正相色谱法(50g sio
2 snap筒；洗脱液：己烷:etoac 100:0至50:50)纯化以给出呈黄色固体的标题化合物。
[1628]
lc-ms：rt＝3.70min；ms m/z[m+h]
+
517.0；uplc-ms 4。
[1629]
中间体ax：(s)-(7-氯-4-((3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)氨基)色满-4-基)甲醇
[1630]
步骤1：(s)-(4-氨基-7-氯色满-4-基)甲醇
[1631][1632]
通过与中间体m，步骤7相似的方法，通过用4-氨基-7-氯色满-4-甲酸(中间体au1)代替7-氨基-3-(三氟甲基)-6,7-二氢-5h-环戊并[c]吡啶-7-甲酸(中间体m，步骤6)制备标题化合物。将对映异构体通过手性sfc：(仪器：mg制备型sfc；柱：chiralpak ic，250x30mm i.d.，5μm，38℃；洗脱液：co2/meoh(+0.1％nh4oh)75:25；流速：60ml/min；检测：220nm)分离以给出呈米色粉末的作为第一洗脱峰的标题化合物。
[1633]
lc-ms：rt＝0.43min；ms m/z[m+h]
+
214.1/216.1；uplc-ms 1。
[1634]
手性-hplc：c-sfc 10：rt＝3.48min；(r)-(4-氨基-7-氯色满-4-基)甲醇作为第二洗脱峰，rt＝3.77min；c-sfc 10。
[1635]
步骤2和3：(s)-(7-氯-4-((3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)氨基)色满-4-基)甲醇
[1636][1637]
通过与中间体ar和as相似的方法，通过用(s)-(4-氨基-7-氯色满-4-基)甲醇(步骤1)代替(s)-(4-氨基-7-溴-8-氟色满-4-基)甲醇(中间体at)制备标题化合物。将粗产物不经纯化而用于下一步骤。
[1638]
lc-ms：rt＝1.25min；ms m/z[m+h]
+
425.1/427.1；uplc-ms 1。
[1639]
中间体ay：(s)-7-溴-8-氟-3'-(3-(氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)螺[色满-4,4'-噁唑烷]-2'-酮
[1640][1641]
通过与中间体n相似的方法，通过用(s)-7-溴-8-氟螺[色满-4,4'-噁唑烷]-2'-酮(中间体as)代替(s)-5-溴-4-氟-2,3-二氢螺[茚-1,4'-噁唑烷]-2'-酮(中间体i)制备标题化合物。将粗产物通过正相色谱法(硅胶，洗脱液：c-己烷:etoac 100:0至70:30)纯化。
[1642]
lc-ms：rt＝1.24min；ms m/z[m+hco
2-]-539.3/541.2；uplc-ms 1。
[1643]
中间体az：(s)-8'-(二氟甲氧基)-8-氟-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-6'-(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]
[1644][1645]
在微波小瓶中，装入(s)-7-溴-8'-(二氟甲氧基)-8-氟-6'-(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶](实例39，500mg，1.07mmol)、双(频哪醇)二硼(541mg，2.13mmol)、pdcl2(dppf).ch2cl2加合物(43.5mg，0.05mmol)和koac(314mg，3.20mmol)。将小瓶置于氩气下并添加1,4-二噁烷(8ml)，并且将小瓶封闭。将rm在100℃下搅拌5小时。将rm倒入nahco3饱和水溶液中并且用etoac萃取2x。将合并的有机萃取物干燥(相分离器)并且蒸发以给出呈棕色油状物的标题化合物。将化合物未经纯化而用于下一步骤。
[1646]
lc-ms：rt＝0.96min；ms m/z[m+h]
+
517.2；uplc-ms 1。
[1647]
中间体ba：(s)-(4-((3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)氨基)-7-(三氟甲基)色满-4-基)甲醇
[1648][1649]
通过与中间体ar和as相似的方法，通过用(s)-(4-氨基-7-(三氟甲基)色满-4-基)甲醇(中间体bb)代替(s)-(4-氨基-7-溴-8-氟色满-4-基)甲醇(中间体at)制备标题化合物。将粗产物不经纯化而用于下一步骤。
[1650]
lc-ms：rt＝1.27min；ms m/z[m+h]
+
459.1；uplc-ms 1。
[1651]
中间体bb：(s)-(4-氨基-7-(三氟甲基)色满-4-基)甲醇
[1652][1653]
通过与中间体m，步骤7相似的方法，通过用4-氨基-7-(三氟甲基)色满-4-甲酸(中间体au2)代替7-氨基-3-(三氟甲基)-6,7-二氢-5h-环戊并[c]吡啶-7-甲酸(中间体m，步骤6)制备标题化合物。将对映异构体通过手性hplc：(仪器：thar 200制备型sfc；柱：chiralpak lc，10μm，300x50mm i.d.，38℃；洗脱液：co2/meoh(+0.1％nh4oh)85:15；流速：200ml/min；检测：220nm)分离以给出作为第一洗脱峰的标题化合物。
[1654]
lc-ms：rt＝0.54min；ms m/z[m+h]
+
248.2；uplc-ms 1。
[1655]
手性-sfc：rt＝2.11min；(r)-(4-氨基-7-(三氟甲基)色满-4-基)甲醇作为第二洗脱峰，rt＝2.34min；c-sfc 43。
[1656]
中间体bc：(s)-(4-((3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)氨基)-7,8-二氟色满-4-基)甲醇
[1657]
步骤1：(s)-7,8-二氟螺[色满-4,4'-噁唑烷]-2'-酮
炔-1-基氧基)苯(步骤1，11.88g，69.9mmol)在thf(253ml)中的溶液中，用干冰乙醇浴冷却，以此速率使得维持内部温度低于-60℃。将rm在-70℃下搅拌45min，然后添加多聚甲醛(3.15g，105mmol)。然后将rm升温至rt并在rt下搅拌18小时。将rm在nahco3饱和水溶液和etoac之间分配，将有机相用水和盐水洗涤，将合并的水层用etoac萃取，将合并的有机相经na2so4干燥，过滤并浓缩。将残余物通过正相色谱法(硅胶，庚烷:etoac 100:0至20:80)纯化以给出呈黄色油状物的标题化合物，将其在4℃下静置时固化。
[1673]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ7.23-6.98(m,3h),5.24(t,1h),4.97(s,2h),4.12(d,2h)。
[1674]
步骤3：(7,8-二氟-2h-色满-4-基)甲醇
[1675][1676]
将4-(2,3-二氟苯氧基)丁-2-炔-1-醇(步骤2，22.2g，104mmol)和碘化铟(iii)(6.09g，31.3mmol)在1,2-dce(651ml)中的混合物在60℃下加热2天。将硅胶直接添加至冷却的rm中，然后将其蒸发。将残余物通过正相色谱法(硅胶，洗脱液：庚烷:etoac 100:0至10:90)纯化以给出呈米色固体的标题化合物。
[1677]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ7.06-7.00(m,1h),6.95-6.86(m,1h),5.91-5.87(m,1h),5.27(t,1h),4.89(dt,2h),4.26(d,2h)。
[1678]
步骤4：(r)-(7,8-二氟色满-4-基)甲醇
[1679][1680]
在hastelloy高压灭菌器中，将rh(nbd)2bf4(215mg，575μmol)和(s,r,r)-chenphos(429mg，575μmol)在dcm(150ml)中的混合物在n2气氛下在rt下搅拌30min。添加(7,8-二氟-2h-色满-4-基)甲醇(步骤3，6.0g，28.8mmol)在dcm(25ml)中的溶液，并且将h2气氛引入高达25巴的压力。将rm在25巴的h2压力下在rt下搅拌16小时。将反应容器用n2冲洗，并且将rm在nahco3饱和水溶液和dcm之间分配，将水层用dcm萃取，将合并的有机层通过穿过相分离器干燥并且蒸发。将残余物通过正相色谱法(硅胶，洗脱液：庚烷:etoac 100:0至0:100)纯化以给出呈黄色油状物的标题化合物。
[1681]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ7.10-7.03(m,1h),6.89-6.80(m,1h),4.87(t,1h),4.31-4.14(m,2h),3.68-3.61(m,1h),3.56-3.38(m,1h),2.90-2.82(m,1h),2.04-1.90(m,2h)。
[1682]
步骤5：(r)-(7,8-二氟色满-4-基)甲基氨基甲酸酯
[1683][1684]
将三氯乙酰基异氰酸酯(8.49ml，71.2mmol)逐滴添加至(r)-(7,8-二氟色满-4-基)甲醇(步骤4，12.51g，59.5mmol)在1,2-dce(171ml)中的溶液(用冰浴冷却)中并且将rm在0℃下搅拌1小时。然后添加k2co3(2.46g，17.81mmol)并且将rm在0℃下搅拌10min，然后缓慢添加meoh(171ml)和水(49ml)，然后将rm在rt下搅拌18小时。将rm在nahco3饱和水溶液和dcm之间分配，将水层用dcm萃取，将合并的有机层通过穿过相分离筒干燥并且蒸发。将残余物通过正相色谱法(硅胶，庚烷:etoac 100:0至0:100)纯化以给出89％ee的呈白色粉末的标题化合物。
[1685]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ7.13-7.08(m,1h),6.95-6.85(m,1h),6.54(s,br,2h),4.34-4.03(m,4h),3.13-3.04(m,1h),2.08-1.83(m,2h)。
[1686]
通过手性hplc(c-hplc 21)测定光学纯度，以标题化合物作为第二洗脱对映异构体，rt＝1.98min，并且以(s)-(7,8-二氟色满-4-基)甲基氨基甲酸酯作为第一洗脱对映异构体，rt＝1.80min。
[1687]
步骤6：(s)-7,8-二氟螺[色满-4,4'-噁唑烷]-2'-酮
[1688][1689]
将(r)-(7,8-二氟色满-4-基)甲基氨基甲酸酯(步骤5，4.3g，17.15mmol)、二乙酰氧基碘苯(7.73g，24.0mmol)、mgo(1.59g，39.4mmol)和铑(ii)三苯基乙酸酯二聚物dcm加合物(617mg，429μmol)在dcm(90ml)中的混合物伴随搅拌在45℃下在氩气气氛下加热18小时。添加另外的二乙酰氧基碘苯(2.32g，7.2mmol)、mgo(0.80g，19.7mmol)和铑(ii)三苯基乙酸酯二聚物dcm加合物(123mg，86μmol)并且在45℃下继续加热24小时。将冷却的rm通过hyflo过滤并且将滤液在nahco3饱和水溶液和dcm之间分配。将水层用dcm再次萃取，将合并的有机层通过穿过相分离筒干燥并蒸发。将残余物通过正相色谱法(硅胶，洗脱液：dcm:meoh 100:0至85:15，随后第二个柱，用dcm:etoac 100:0至50:50洗脱)纯化以给出呈米色粉末的标题化合物。
[1690]
lc-ms：rt＝0.72min；ms m/z[m-h]-240.1；uplc-ms 1。
[1691]
中间体bd：(s)-(4-氨基-7,8-二氟色满-4-基)甲醇
[1692][1693]
将4-氨基-7,8-二氟色满-4-甲酸(中间体au3，24.6mmol)悬浮于thf(123ml)中并冷却至0-5℃(冰浴)，在氮气气氛下，通过滴液漏斗缓慢添加bh3.thf(1m在thf中，61.6ml，61.6mmol)，并且允许黄色悬浮液升温至rt并且搅拌16小时。缓慢添加meoh(220ml)，将混合
物在rt下搅拌2小时并且蒸发。将残余物溶解于meoh(220ml)中并且添加biotage mp-so3h树脂(载量4.56mmol/g，28.6g)。将混合物在rt下振荡3小时，过滤并用meoh洗涤。将树脂(批次-1)放在一边。将滤液蒸发，溶解于meoh(220ml)中并且用biotage mp-so3h树脂(载量4.56mmol/g，28.6g)再次处理，振荡2天并过滤以给出树脂批次-2。将树脂批次1和2合并，并且添加nh3(2n在meoh中，100ml)的溶液，将混合物在rt下振荡15min并且过滤。将滤液蒸发以给出呈米色固体的(外消旋)-(4-氨基-7,8-二氟色满-4-基)甲醇。将对映异构体通过手性hplc(仪器：vwr laprep hplc制备型；柱：chiralpak ad 20μm，7.65x39.3cm；洗脱液：庚烷:etoh:meoh 85:7.5:7.5+0.05％et2nh；流速：120ml/min；检测：220nm)分离以给出呈黄色固体的作为第二洗脱峰的标题化合物。
[1694]
lc-ms：rt＝0.42min；ms m/z[m+h]
+
216.1；uplc-ms 1。
[1695]
手性-hplc：rt＝13.8min；以(r)-(4-氨基-7,8-二氟色满-4-基)甲醇作为第一洗脱峰，rt＝7.8min；c-hplc 44。
[1696]
中间体be：(s)-(4-氨基-8-氯色满-4-基)甲醇
[1697][1698]
通过与中间体m，步骤7相似的方法，通过用4-氨基-8-氯色满-4-甲酸(中间体au4)代替7-氨基-3-(三氟甲基)-6,7-二氢-5h-环戊并[c]吡啶-7-甲酸(中间体m，步骤6)制备标题化合物。将对映异构体通过手性hplc：(仪器：gilson trilution；柱：chiralpak ad-h 5μm，30x250mm；洗脱液：庚烷:etoh:meoh 80:10:10+0.1％et2nh；流速：20ml/min；检测：220nm)分离以给出作为第二洗脱峰的标题化合物。
[1699]
lc-ms：rt＝0.40min；ms m/z[m-nh2]
+
197.1/199.2；uplc-ms 1。
[1700]
制备型手性hplc：rt＝12.2min；以(r)-(4-氨基-8-氯色满-4-基)甲醇作为第一洗脱峰，rt＝8.27min。
[1701]
中间体bf：(s)-(7-溴-4-((3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)氨基)色满-4-基)甲醇
[1702]
步骤1：(s)-7-溴螺[色满-4,4'-噁唑烷]-2'-酮
[1703][1704]
与中间体i中所述相似的方法，通过用(s)-(4-氨基-7-溴色满-4-基)甲醇(中间体bg)代替(s)-(1-氨基-5-溴-4-氟-2,3-二氢-1h-茚-1-基)甲醇(中间体j)制备(s)-7-溴螺[色满-4,4'-噁唑烷]-2'-酮。将粗产物不经纯化而用于下一步骤。
[1705]1h nmr(400mhz,氯仿-d6)δ7.33(d,1h),7.12(dd,1h),7.01(d,1h),5.49(s,1h),4.35-4.26(m,1h),4.21-4.07(m,1h),3.09(dq,2h),2.22(dd,2h)。
[1706]
步骤2：(s)-(7-溴-4-((3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)氨基)色满-4-基)甲醇
[1707][1708]
通过与中间体ar和as相似的方法，通过用(s)-(4-氨基-7-溴色满-4-基)甲醇(步骤1)代替(s)-(4-氨基-7-溴-8-氟色满-4-基)甲醇(中间体at)制备标题化合物。将分离出的材料未经进一步纯化用于下一反应。
[1709]
lc-ms：rt＝1.29min；ms m/z[m+h]
+
469.2/471.2；uplc-ms 1。
[1710]
中间体bg：(s)-(4-氨基-7-溴色满-4-基)甲醇
[1711][1712]
通过与中间体m，步骤7相似的方法，通过用4-氨基-7-溴色满-4-甲酸(中间体au5)代替7-氨基-3-(三氟甲基)-6,7-二氢-5h-环戊并[c]吡啶-7-甲酸(中间体m，步骤6)制备标题化合物。将对映异构体通过手性hplc：(仪器：gilson trilution hplc系统；柱：chiralpak id，5μm，250x20mm 25℃；洗脱液：庚烷:etoh 80:20+0.1％et2nh；流速：10ml/min；检测：220nm)分离以给出作为第一洗脱峰的标题化合物。
[1713]
lc-ms：rt＝0.50min；ms m/z[m+h]
+
258.0/260.0；uplc-ms 1。
[1714]
手性-sfc：rt＝6.9min；(r)-(4-氨基-7-溴色满-4-基)甲醇作为第二峰洗脱，rt＝13.0min；c-sfc 50。
[1715]
中间体bh：(s)-8'-(二氟甲氧基)-8-氟-7-(甲硫基)-6'-(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]
[1716][1717]
在密封的容器中在n2气氛下，将(s)-8'-(二氟甲氧基)-8-氟-7-碘-6'-(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶](中间体aw，134mg，259μmol)、cui(53mg，272μmol)和dabco(58mg，517μmol)在dmso(2ml)中的混合物在140℃下加热24小时。将冷却rm用dcm稀释，将有机相用h2o洗涤，然后用盐水洗涤，通过穿过相分离筒干燥，并且浓缩以给出标题化合物，将其未经进一步纯化而直接使用。
[1718]
lc-ms：rt＝0.80min；ms m/z[m+h]
+
436.9；uplc-ms 1。
[1719]
中间体bi：(s)-8'-(二氟甲氧基)-8-氟-6'-(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]-7-醇
[1720][1721]
向微波小瓶中装入thf(1ml)中的(s)-7-溴-8'-(二氟甲氧基)-8-氟-6'-(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶](实例39，50mg，0.11mmol)、吗啉(11μl，0.13mmol)、ruphos-pd-g3(8.9mg，10.7μmol)、ruphos(5mg，10.7μmol)和叔丁醇钠(15.4mg，0.16mmol)。将小瓶用氮气冲洗，密封并且将rm在100℃下在微波辐射下搅拌1.5小时。再次添加吗啉(11μl，0.13mmol)、ruphos-pd-g3(8.9mg，10.7μmol)、ruphos(5mg，10.7μmol)和叔丁醇钠(60mg，0.63mmol)，并且将rm在100℃下在微波加热下再搅拌2小时。将rm倒入水中并且用ch2cl2萃取2x。将合并的有机萃取物干燥(相分离器)并在真空中浓缩，并且将粗残余物通过正相快速色谱法(12g sio2柱，洗脱液：c-己烷:etoac 100:0至0:100，然后dcm:meoh 100:0至90:10)纯化以给出呈黄色泡沫的标题化合物。
[1722]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ7.23(s,1h),7.06(d,1h),6.65(t,1h),6.20(s,1h),4.76(d,1h),4.68(d,1h),4.50(m,1h),4.27(m,1h),3.74(m,4h),3.20(m,4h),2.30(m,2h)。
[1723]
lc-ms：rt＝0.70min；ms m/z[m+h]
+
426.2；uplc-ms 1。
[1724]
中间体bj：(s)-8'-(二氟甲氧基)-6'-(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]-8-甲醛
[1725]
步骤1：(s)-(4-氨基-8-溴色满-4-基)甲醇
[1726][1727]
通过与中间体m，步骤7相似的方法，通过用外消旋-4-氨基-8-溴色满-4-甲酸(中间体au6)代替7-氨基-3-(三氟甲基)-6,7-二氢-5h-环戊并[c]吡啶-7-甲酸(中间体m，步骤6)制备标题化合物。将对映异构体通过手性hplc：(仪器：gilson trilution；柱：chiralpak ad-h 5μm，25x250mm；洗脱液：庚烷:etoh:meoh 80:10:10+0.1％et2nh；流速：15ml/min；检测：220nm)分离以给出作为第二洗脱峰的标题化合物。
[1728]
lc-ms：rt＝1.32min；ms m/z[m+h]
+
241.0/242.9；uplc-ms 4。
[1729]
手性-hplc：rt＝11.40min；(r)-(4-氨基-8-溴色满-4-基)甲醇作为第二洗脱峰，rt＝7.92min；c-hplc 12。
[1730]
步骤2：(s)-8'-(二氟甲氧基)-8-碘-6'-(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]
[1731][1732]
通过与中间体as、ar、y和aw相似的方法，通过用(s)-(4-氨基-8-溴色满-4-基)甲
醇(步骤1)代替(s)-(4-氨基-7-溴-8-氟色满-4-基)甲醇(中间体at)制备标题化合物。正相色谱法(二氧化硅柱，洗脱液：己烷:tbme 90:10至30:70)后，获得呈米色泡沫的标题化合物。
[1733]
lc-ms：rt＝0.83min；ms m/z[m+h]
+
499.0；uplc-ms 1。
[1734]
步骤3：(s)-8'-(二氟甲氧基)-6'-(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶]-8-甲醛
[1735][1736]
在正氩气压力下，将n-buli在己烷(1m，298μl，298μmol)中的溶液逐滴添加至(s)-8'-(二氟甲氧基)-8-碘-6'-(三氟甲基)-3'h-螺[色满-4,2'-咪唑并[1,2-a]吡啶](步骤1，150mg，271μmol)在thf(2.5ml)中的溶液中，用干冰丙酮浴冷却。将rm在-75℃下搅拌10min并添加dmf(210μl，2.71mmol)。在-75℃下搅拌1小时后，添加nahco3饱和水溶液并且将混合物用dcm萃取3x，将合并的有机层通过穿过相分离筒干燥并蒸发。将残余物通过正相色谱法(4g sio2柱；洗脱液：己烷:tbme 90:10至10:90)纯化以给出呈米色泡沫的标题化合物。
[1737]
lc-ms：rt＝0.64min；ms m/z[m+h]
+
401.2；uplc-ms 1。
[1738]
中间体bk：(s)-8'-氯-3-(3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)-2',3'-二氢螺[噁唑烷-4,4'-吡喃并[2,3-c]吡啶]-2-酮
[1739][1740]
通过与中间体as和ar相似的方法，通过用(s)-(4-氨基-8-氯-3,4-二氢-2h-吡喃并[2,3-c]吡啶-4-基)甲醇(中间体bl)代替(s)-(4-氨基-7-溴-8-氟色满-4-基)甲醇(中间体at)制备标题化合物。正相色谱法(二氧化硅柱，洗脱液：c-己烷:etoac 100:0至50:50)后，获得标题化合物。
[1741]
lc-ms：rt＝1.07min；ms m/z[m+h]
+
452.1/454.0；uplc-ms 1。
[1742]
中间体bl：(s)-(4-氨基-8-氯-3,4-二氢-2h-吡喃并[2,3-c]吡啶-4-基)甲醇
[1743][1744]
通过与中间体au和m，步骤7相似的方法，通过用8-氯-2,3-二氢-4h-吡喃并[2,3-c]吡啶-4-酮(中间体bm)代替7-溴-8-氟色满-4-酮制备标题化合物。使用具有ellman(s)-亚磺酰胺助剂的路线，对映异构体比例为3:2s:r。将对映异构体通过手性hplc：(仪器：knauer hplc系统；柱：chiralpak ic 20μm，375x76.5mm；洗脱液：庚烷:iproh 70:30+0.1％
et2nh持续120min，然后50:50持续50min；流速：120ml/min；检测：280nm)分离以给出作为第一洗脱峰的标题化合物。
[1745]
lc-ms：rt＝0.32min；ms m/z[m+h]
+
215.1/217.1；uplc-ms 2。
[1746]
手性-hplc：rt＝6.70min；(r)-(4-氨基-8-氯-3,4-二氢-2h-吡喃并[2,3-c]吡啶-4-基)甲醇作为第二洗脱峰，rt＝17.2min；c-hplc 15。
[1747]
中间体bm：8-氯-2,3-二氢-4h-吡喃并[2,3-c]吡啶-4-酮
[1748]
步骤1：叔丁基3-((2-氯-4-碘吡啶-3-基)氧基)丙酸酯
[1749][1750]
在20℃下，向2-氯-4-碘吡啶-3-醇(中间体bn，7.3g，28.6mmol)、diad(6.67ml，34.3mmol)和pph3(8.99g，34.3mmol)在thf(120ml)中的溶液中添加叔丁基3-羟基丙酸酯(5.06ml，34.3mmol)。将rm搅拌2小时，然后另外添加叔丁基3-羟基丙酸酯(0.42ml，2.86mmol)、pph3(749mg，2.86mmol)和diad(0.56ml，2.86mmol)。将rm再搅拌0.5小时，浓缩并且将残余物通过正相色谱法(硅胶，洗脱液：c-己烷:etoac 100:0至80:20)纯化以给出标题化合物。
[1751]
lc-ms：rt＝1.24min；ms m/z[m+h]
+
384.1/386.1；uplc-ms 1。
[1752]
步骤2：3-((2-氯-4-碘吡啶-3-基)氧基)丙酸
[1753][1754]
在20℃下，向叔丁基3-((2-氯-4-碘吡啶-3-基)氧基)丙酸酯(步骤1，10.58g，27.3mmol)在dcm(120ml)中的溶液中添加cf3co2h(42.1ml，546mmol)。将rm在20℃下1.5小时搅拌并浓缩以给出标题化合物，将其未经进一步纯化而直接使用。
[1755]
lc-ms：rt＝0.74min；ms m/z[m+h]
+
328.0/330.0；uplc-ms 1。
[1756]
步骤3：3-((2-氯-4-碘吡啶-3-基)氧基)-n-甲氧基-n-甲基丙酰胺
[1757][1758]
向3-((2-氯-4-碘吡啶-3-基)氧基)丙酸(步骤2，13.67g，27.2mmol)在dcm(90ml)中的溶液中添加草酰氯(4.77ml，54.5mmol)和dmf(105μl，1.36mmol)。将rm在20℃下搅拌1小时并且浓缩。将残余物再次溶解于dcm(90ml)中，并且将所得溶液添加至nahco3(4.81g，57.2mmol)和n,o-二甲基羟胺盐酸盐(2.92g，30.0mmol)在水(90ml)中的搅拌溶液中。将rm在20℃下搅拌1小时，分离各相并且将水层用dcm萃取，将合并的有机层用nahco3饱和水溶液洗涤，通过穿过相分离筒干燥并浓缩。将残余物通过正相色谱法(硅胶，洗脱液：c-己烷:etoac 100:0至70:30)纯化以给出标题化合物。
[1759]
lc-ms：rt＝0.88min；ms m/z[m+h]
+
371.1/373.1；uplc-ms 1。
[1760]
步骤4：8-氯-2h-吡喃并[2,3-c]吡啶-4(3h)-酮
4-甲酸(中间体bp)代替7-氨基-3-(三氟甲基)-6,7-二氢-5h-环戊并[c]吡啶-7-甲酸(中间体m，步骤6)制备标题化合物。将标题化合物未经进一步纯化而直接使用。
[1776]
lc-ms：rt＝0.51min；ms m/z[m+h]
+
338.1/340.1；uplc-ms 1。
[1777]
中间体bp：(3r,4s)-4-氨基-7-溴-3,8-二氟色满-4-甲酸
[1778][1779]
通过与中间体au，步骤4相似的方法，通过用(3r,4s)-7-溴-4-(((s)-叔丁基亚磺酰基)氨基)-3,8-二氟色满-4-甲酰胺(中间体bq)代替7-溴-4-((s)-1,1-二甲基乙基亚磺酰胺基)-8-氟色满-4-甲酰胺(中间体au，步骤3)制备标题化合物。获得呈淡米色固体的标题化合物的盐酸盐，将其未经进一步纯化而直接使用。
[1780]
lc-ms：rt＝0.47min；ms m/z[m+h]
+
308.0/310.0；uplc-ms 1。
[1781]
中间体bq：(3r,4s)-7-溴-4-(((s)-叔丁基亚磺酰基)氨基)-3,8-二氟色满-4-甲酰胺
[1782][1783]
在n2气氛下在密封的小瓶，将(s)-n-((3s,4r)-7-溴-4-氰基-3,8-二氟色满-4-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺和(s)-n-((3r,4s)-7-溴-4-氰基-3,8-二氟色满-4-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(中间体br，1.45g，3.17mmol)、乙酰胺(1.22g，19.0mmol)和pdcl2(140mg，475μmol)在thf(40ml)和水(13ml)中的混合物在50℃下加热140min。将冷却的rm用盐水稀释，用dcm萃取，将合并的有机层干燥并浓缩。将残余物通过正相色谱法(硅胶，洗脱液：dcm:(tbme:etoh 2:1)100:0至50:50)纯化以给出呈米色泡沫的作为第二洗脱峰的标题化合物。
[1784]
lc-ms：rt＝0.85min；ms m/z[m+h]
+
411.1/413.1；uplc-ms 1。
[1785]
获得呈米色泡沫的作为第一洗脱峰的(3s,4r)-7-溴-4-(((s)-叔丁基亚磺酰基)氨基)-3,8-二氟色满-4-甲酰胺。
[1786]
lc-ms：rt＝0.88min；ms m/z[m+h]
+
411.1/413.1；uplc-ms 1。
[1787]
中间体br和bs：(s)-n-((3s,4r)-7-溴-4-氰基-3,8-二氟色满-4-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺和(s)-n-((3r,4s)-7-溴-4-氰基-3,8-二氟色满-4-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺和(s)-n-((3s,4s)-7-溴-4-氰基-3,8-二氟色满-4-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺以及(s)-n-((3r,4r)-7-溴-4-氰基-3,8-二氟色满-4-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺
[1788][1789]
在rt下在正n2压力下，向(s)-n-((r)-7-溴-3,8-二氟色满-4-亚基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺和(s)-n-((s)-7-溴-3,8-二氟色满-4-亚基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(中间体bt，3.64g，8.24mmol)在dcm(40ml)中的溶液中添加csf(2.5g，16.5mmol)、三甲基甲硅烷基氰化物(5.52ml，41.2mmol)和叔buoh(1.58ml，16.5mmol)：注意释放hcn的可能性！将rm在rt下搅拌4.5小时，用nahco3饱和水溶液(150ml)稀释，用dcm萃取，将合并的有机层经na2so4干燥并浓缩。将残余物通过正相色谱法(50g sio
2 snap柱，洗脱液：己烷:tbme 100:0至0:100)纯化以给出作为第一洗脱峰的回收的中间体bt。获得呈白色泡沫的作为第二洗脱峰的中间体br((s)-n-((3s,4r)-7-溴-4-氰基-3,8-二氟色满-4-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺和(s)-n-((3r,4s)-7-溴-4-氰基-3,8-二氟色满-4-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺，比例6:4)。
[1790]
lc-ms：rt＝1.01和1.02min；ms m/z[m+h]
+
393.1/395.1；uplc-ms 1。
[1791]
获得呈粉色固体的作为第三洗脱峰的中间体bs((s)-n-((3s,4s)-7-溴-4-氰基-3,8-二氟色满-4-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺和(s)-n-((3r,4r)-7-溴-4-氰基-3,8-二氟色满-4-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺，比例6:4)。
[1792]
lc-ms：rt＝1.01和1.02min；ms m/z[m+h]
+
393.1/395.1；uplc-ms 1。
[1793]
中间体bt：(s)-n-((r)-7-溴-3,8-二氟色满-4-亚基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺和(s)-n-((s)-7-溴-3,8-二氟色满-4-亚基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺
[1794]
步骤1：((7-溴-8-氟-2h-色满-4-基)氧基)(叔丁基)二甲基硅烷
[1795][1796]
将叔丁基二甲基甲硅烷基三氟甲烷磺酸酯(7.1ml，30.6mmol)逐滴添加至7-溴-8-氟色满-4-酮(中间体au步骤2，5.0g，20.40mmol)和et3n(14.1ml，102mmol)在dcm(50ml)中的溶液(用冰浴冷却)中。将rm在0℃下搅拌10min，将冷却浴除去并且再继续搅拌20min。将rm用h2o稀释，将有机相用h2o洗涤，然后用盐水洗涤，通过穿过相分离筒干燥并浓缩。将残余物通过正相色谱法(50g sio
2 snap筒；洗脱液：己烷:etoac 100:0至90:10)纯化以给出呈无色油状物的标题化合物。
[1797]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ7.23(dd,1h),7.01(dd,1h),5.14(t,1h),4.92(d,2h),0.96(s,9h),0.22(s,6h)。
[1798]
步骤2：外消旋-7-溴-3,8-二氟色满-4-酮
[1799][1800]
在正n2压力下，将selectfluor(7.25g，20.46mmol)添加至((7-溴-8-氟-2h-色满-4-基)氧基)(叔丁基)二甲基硅烷(步骤1，7.0g，19.48mmol)在accn(50ml)中的溶液(用冰浴冷却)中。将rm在0℃下搅拌30min然后蒸发。将残余物吸收到dcm中，将有机层用h2o洗涤，然后用nahco3饱和水溶液和盐水洗涤2x。将有机相通过穿过相分离筒干燥并浓缩以给出呈白色固体的标题化合物，将其未经进一步纯化而直接使用。
[1801]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ7.56(dd,1h),7.45(dd,1h),5.57-5.35(m,1h),5.02-4.77(m,2h)。
[1802]
步骤3：(s)-n-((r)-7-溴-3,8-二氟色满-4-亚基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺和(s)-n-((s)-7-溴-3,8-二氟色满-4-亚基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺
[1803][1804]
将外消旋-7-溴-3,8-二氟色满-4-酮(步骤2，4.98g，18.93mmol)、(s)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(2.81g，22.72mmol)和四乙氧基钛(10.36g，45.4mmol)在thf(10ml)中的混合物在72℃(加热块温度)下伴随穿过反应容器顶部的连续n2流加热4.5小时。然后将冷却的rm用etoac稀释，倒入盐水中并且将混合物在rt下搅拌15min。然后将所得悬浮液通过hyflo过滤，用etoac洗涤。将两相滤液分离并且将有机层用h2o洗涤，然后用盐水洗涤，干燥并浓缩。将残余物通过正相色谱法(2x50g sio
2 snap筒；洗脱液：己烷:etoac 100:0至70:30)纯化以给出呈黄色泡沫的标题化合物(3:2比例)。
[1805]
lc-ms：rt＝1.18和1.20min；ms m/z[m+h]
+
366.0/368.0；uplc-ms 1。
[1806]
中间体bu：((3s,4s)-4-氨基-7-溴-3,8-二氟色满-4-基)甲醇
[1807][1808]
通过与中间体bo、bp和bq相似的方法，通过用(s)-n-((3s,4s)-7-溴-4-氰基-3,8-二氟色满-4-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺和(s)-n-((3r,4r)-7-溴-4-氰基-3,8-二氟色满-4-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(中间体bs)代替(s)-n-((3s,4r)-7-溴-4-氰基-3,8-二氟色满-4-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺和(s)-n-((3r,4s)-7-溴-4-氰基-3,8-二氟色满-4-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(中间体br)制备标题化合物。将对映异构体通过手性hplc：(仪器：gilson trilution hplc系统；柱：chiralpak ad-h 5μm，250x25mm；洗脱液：庚烷:etoh:meoh 80:10:10+0.05％et2nh；流速：15ml/min；检测：230nm)分离以给出作为第二洗脱峰的标题化合物。
[1809]
lc-ms：rt＝2.25min；ms m/z[m+h]
+
294.1/296.1；uplc-ms 4。
[1810]
手性-hplc：rt＝16.27min；以((3r,4r)-4-氨基-7-溴-3,8-二氟色满-4-基)甲醇作为第一洗脱峰，rt＝9.62min；c-hplc 16。
[1811]
lc-ms：rt＝2.25min；ms m/z[m+h]
+
294.0/296.0；uplc-ms 4。
[1812]
中间体bv：((3r,4s)-4-氨基-7-溴-3-氟色满-4-基)甲醇
[1813][1814]
通过与中间体bt、br、bq、bp和bo相似的方法，通过用7-溴色满-4-酮代替7-溴-8-氟色满-4-酮(中间体au步骤2)制备标题化合物。获得呈白色粉末的标题化合物，将其未经进一步纯化而直接使用。
[1815]
lc-ms：rt＝0.51min；ms m/z[m+h]
+
276.1/278.1；uplc-ms 1。
[1816]
中间体bw：((3r,4s)-4-氨基-3,8-二氟色满-4-基)甲醇
[1817]
步骤1：(r)-n-((3r,4s)-3,8-二氟-4-(羟基甲基)色满-4-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺
[1818]
将氧气鼓泡通过(r)-n-((3r,4r)-3,8-二氟-4-乙烯基色满-4-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(中间体bx，17.64g，52.6mmol)在dcm(180ml)和meoh(180ml)中的溶液，用干冰/丙酮浴冷却。在o2鼓泡通过溶液5min后，然后将o3/o2的混合物在-78℃下鼓泡通过溶液直至灰色/蓝色在溶液中持续(约40min)，然后将氩气鼓泡穿过溶液，以从系统中吹扫o3/o2，并且添加硼氢化钠(4.38g，116mmol)。在-78℃下搅拌40min后，添加nh4cl饱和水溶液，将混合物升温至rt，用dcm萃取3x，将合并的有机层用nahco3饱和水溶液洗涤，干燥并浓缩。将残余物通过正相色谱法(硅胶，洗脱液：dcm:(tbme:meoh 2:1)100:0至80:20)纯化以给出标题化合物。
[1819]
lc-ms：rt＝0.77min；ms m/z[m+h]
+
320.1；uplc-ms 1。
[1820]
步骤2：((3r,4s)-4-氨基-3,8-二氟色满-4-基)甲醇
[1821][1822]
在rt下，将(r)-n-((3r,4s)-3,8-二氟-4-(羟基甲基)色满-4-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(步骤1，27.1g，83mmol)在meoh(300ml)和hcl水溶液(4n，104ml，416mmol)中的混合物搅拌30min。将rm浓缩，在nahco3饱和水溶液和etoac之间分配，用etoac萃取2x，将合并的有机层干燥并浓缩以给出标题化合物，将其未经进一步纯化而直接使用。
[1823]
lc-ms：rt＝0.32min；ms m/z[m+h]
+
216.1；uplc-ms 2。
[1824]
中间体bx：(r)-n-((3r,4r)-3,8-二氟-4-乙烯基色满-4-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺
酰胺
[1825][1826]
在rt下，将二甲基锌在甲苯(2m，126ml，252mmol)中的溶液逐滴添加至乙烯基溴化镁在thf(1m，126ml，126mmol)中的溶液中，将rm在rt下搅拌30min，然后用干冰/丙酮浴冷却至-78℃。逐滴添加(r)-n-((r)-3,8-二氟色满-4-亚基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺和(r)-n-((s)-3,8-二氟色满-4-亚基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(中间体by，18.64g，62.9mmol)在thf(200ml)中的溶液，并且将rm在-78℃下搅拌0.5小时并伴随冰浴持续0.5小时。然后将rm重新冷却至-70℃并且逐滴添加nh4cl饱和水溶液(200ml)：注意！放热反应。将混合物升温至rt，用et2o萃取2x，将合并的有机层用盐水洗涤，经na2so4干燥，过滤并浓缩。将残余物通过正相色谱法(硅胶，洗脱液：dcm:(tbme/etoh 2:1)100:0至90:10)纯化以给出标题化合物，该标题化合物在非对映异构体的混合物中作为主要成分和回收的(r)-n-((s)-3,8-二氟色满-4-亚基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺。将非对映异构体通过手性sfc：(仪器：thar 350制备型sfc(sfc-18)；柱：chiralcel oj 10μm，300x50mm；温度：38℃；洗脱液：co2:meoh+0.1％nh4oh 90:10；流速：200ml/min；检测：220nm)分离以给出标题化合物。
[1827]
lc-ms：rt＝1.00min；ms m/z[m+h]
+
316.1；uplc-ms 1。
[1828]
中间体by：(r)-n-((r)-3,8-二氟色满-4-亚基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺和(r)-n-((s)-3,8-二氟色满-4-亚基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺
[1829][1830]
通过与中间体bt相似的方法，通过用8-氟色满-4-酮代替7-溴-8-氟色满-4-酮(中间体au，步骤2)制备标题化合物。正相色谱法纯化(硅胶，洗脱液：c-己烷:etoac 100:0至70:30)后，获得标题化合物作为1:1非对映异构体的混合物。
[1831]
lc-ms：rt＝1.05和1.07min；ms m/z[m+h]
+
288.1；uplc-ms 1。
[1832]
中间体bz：外消旋-(4-((3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)氨基)-8-氟异色满-4-基)甲醇
[1833]
步骤1：(2-溴-6-氟苯基)甲醇
[1834][1835]
在氮气气氛下在0℃下，向2-溴-6-氟苯甲酸(6g，27.4mmol)在thf(120ml)中的溶液中添加bh3.thf(1m在thf中，54.8ml，54.8mmol)，并且将rm在50℃下搅拌16小时。将rm缓慢倒入hcl(2n溶液)中并且用etoac萃取2x。将合并的有机萃取物干燥(相分离器)并浓缩以
给出呈黄色固体的标题化合物，将其不经纯化用于下一步骤。
[1836]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ7.45(d,1h),7.31-7.20(m,2h),5.20(m,1h),4.57(m,2h)。
[1837]
步骤2：2-((2-溴-6-氟苄基)氧基)-n-甲氧基-n-甲基乙酰胺
[1838][1839]
在0℃下在氮气气氛下，向nah(1.07g，26.8mmol)在thf(150ml)中的悬浮液中缓慢添加(2-溴-6-氟苯基)甲醇(步骤1，5.25g，24.33mmol)。将混合物在0℃下搅拌15min，然后添加2-溴-n-甲氧基-n-甲基乙酰胺(3.48ml，26.8mmol)。将rm在0℃下搅拌1小时。将rm倒入水中并且用etoac萃取2x。将合并的有机萃取物干燥(相分离器)并且蒸发。将粗残余物通过正相快速色谱法(120g sio2柱；洗脱液：c-己烷:etoac 100:0至30:70)纯化两次以给出含有15％2-溴-n-甲氧基-n-甲基乙酰胺的标题化合物。将混合物溶解于thf(100ml)中，添加pl-tpp树脂(粒度：150-300μm，载量1.52mmol/g，14.6mmol，9.60g)并且将混合物在rt下振荡16小时，过滤并浓缩以给出呈淡黄色油状物的标题化合物。
[1840]
lc-ms：rt＝0.90min；ms m/z[m+h]
+
306.2/308.2；uplc-ms 1。
[1841]
步骤3：8-氟异色满-4-酮
[1842][1843]
在氩气气氛下，在-78℃下向2-((2-溴-6-氟苄基)氧基)-n-甲氧基-n-甲基乙酰胺(步骤2，6.4g，20.9mmol)在thf(110ml)中的溶液中逐滴添加nbuli(1.6m在己烷中，17.0ml，27.2mmol)。将rm在-78℃下搅拌1小时，然后倒入nh4cl饱和水溶液中，用etoac萃取2x。将合并的有机萃取物干燥(相分离器)并且蒸发。将粗残余物通过正相快速色谱法(80g sio2柱；洗脱液：c-己烷:etoac 100:0至30:70)纯化以给出呈白色固体的标题化合物。
[1844]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ7.78(d,1h),7.62-7.52(m,2h),4.99(s,2h),4.41(s,2h)。
[1845]
步骤4：8'-氟螺[咪唑烷-4,4'-异色满]-2,5-二酮
[1846][1847]
向ace压力管中装入8-氟异色满-4-酮(步骤3，2.36g，14.2mmol)、碳酸铵(15.01g，156mmol)、etoh(20ml)、水(20ml)和kcn(1.39g，21.3mmol)。将反应混合物密封并且在70℃下搅拌16小时。将冷却的rm用etoac萃取4x。将合并的有机萃取物经na2so4干燥，过滤并在减压下浓缩。将粗残余物通过正相快速色谱法(80g sio2柱；洗脱液：c-己烷:etoac 100:0至
0:100)纯化以给出呈白色固体的标题化合物。
[1848]
lc-ms：rt＝0.52min；ms m/z[m-h]-235.2；uplc-ms 1。
[1849]
步骤5：4-氨基-8-氟异色满-4-甲酸
[1850][1851]
将koh(4.22g，75mmol)在水(25ml)中的溶液添加至8'-氟螺[咪唑烷-4,4'-异色满]-2,5-二酮(步骤4，1.87g，7.52mmol)中，并且将rm在100℃下搅拌5天。将rm缓慢倒入hcl水溶液(6m，12.5ml，75mmol)中并且将酸性混合物在减压下浓缩并干燥(高真空，40℃)以给出标题化合物(含有kcl)，将其不经纯化用于下一步骤。
[1852]1h nmr(600mhz,dmso-d6)δ9.03(m,3h),7.48(q,1h),7.35(t,1h),7.20(d,1h),4.94(d,1h),4.85(d,1h),4.30(d,1h),4.16(d,1h)。
[1853]
步骤6：(4-氨基-8-氟异色满-4-基)甲醇
[1854][1855]
在氮气气氛下，在0-5℃下向4-氨基-8-氟异色满-4-甲酸(含有kcl，7.52mmol)在thf(45ml)中的悬浮液中添加bh3.thf(1m在thf中，18.8ml，18.8mmol)。允许rm达到rt并搅拌24小时。缓慢添加meoh，将溶剂蒸发并且将残余物悬浮于meoh中。添加biotage mp-so3h(5.45g，载量4.14mmol/g)并且将混合物在rt下振荡16小时，并过滤。向残余的树脂中添加nh3(2n在meoh中，70ml)并且将混合物在rt下振荡30min，过滤并蒸发以给出呈淡黄色固体的标题化合物。
[1856]
lc-ms：rt＝0.38min；ms m/z[m+h]
+
198.3；uplc-ms 1。
[1857]
步骤7-9：外消旋-(4-((3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)氨基)-8-氟异色满-4-基)甲醇
[1858][1859]
通过与中间体as和ar相似的方法，通过用(4-氨基-8-氟-2-甲基色满-4-基)甲醇代替(4-氨基-8-氟异色满-4-基)甲醇(中间体at)制备标题化合物。将标题化合物未经纯化而用于下一步骤。
[1860]
lc-ms：rt＝1.18min；ms m/z[m+h]
+
409.2；uplc-ms 1。
[1861]
中间体ca：外消旋-6-(7'-氯-8'-氟-2-氧代螺[噁唑烷-4,4'-硫代色满]-3-基)-5-(二氟甲氧基)烟腈
[1862][1863]
通过与所述的制备中间体as和ar相似的方法，通过用外消旋-(4-氨基-7-氯-8-氟硫代色满-4-基)甲醇(中间体cb)代替(s)-(4-氨基-7-溴-8-氟色满-4-基)甲醇(中间体at)制备标题化合物。
[1864]
lc-ms：rt＝1.15min；ms m/z[m+na]
+
465.0；uplc-ms 1。
[1865]
中间体cb：外消旋-(4-氨基-7-氯-8-氟硫代色满-4-基)甲醇
[1866]
步骤1：甲基3-((3-氯-2-氟苯基)硫代)丙酸酯
[1867][1868]
在氩气气氛下，将1-氯-2-氟-3-碘苯(8.47ml，66.3mmol)、甲基3-巯基丙酸(8.99ml，80mmol)、pd2dba3(3.04g，3.31mmol)、dppf(2.57g，4.64mmol)、et3n(15.92ml)和dmf(80ml)的混合物在110℃下加热3小时。将冷却的rm用etoac稀释并且用nahco3饱和水溶液洗涤2x。然后将有机相用盐水洗涤，干燥(相分离器)并浓缩。将残余物通过正相色谱法(硅胶，洗脱液：庚烷:etoac 100:0至70:30)纯化以给出呈黄色油状物的标题化合物。
[1869]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ7.49-7.42(m,2h),7.23(t,1h),2.93(s,3h),3.21(t,2h),2.65(t,2h)。
[1870]
步骤2：3-((3-氯-2-氟苯基)硫代)丙酸
[1871][1872]
将lioh(2.82g，118mmol)添加至thf(337ml)和水(112ml)中的甲基3-((3-氯-2-氟苯基)硫代)丙酸酯(14.64g，58.9mmol)中，并且在rt下搅拌5小时。将rm浓缩，用1n hcl水溶液稀释，并且用etoac萃取2x。将合并的有机层干燥(相分离器)并浓缩以给出呈黄色粉末的标题化合物，将其不经纯化用于下一步骤。
[1873]
lc-ms：rt＝0.92min；ms m/z[m-h]-233.0/235.0；uplc-ms 1。
[1874]
步骤3：7-氯-8-氟硫代色满-4-酮
[1875][1876]
将dmf(459μl，5.92mmol)添加至3-((3-氯-2-氟苯基)硫代)丙酸(13.9g，59.2mmol)和草酰氯(9.33ml，107mmol)在dcm(147ml)中的溶液中。将rm在rt下搅拌30min，然后浓缩以给出酸性氯化物。在氩气下，将残余物分批溶解于dcm(147ml)和alcl3(23.69g，178mmol)中。将rm在rt下搅拌30min然后冷却至0-5℃，并且用甲醇和6m hcl水溶液淬灭。将
混合物在rt下搅拌30min，用水稀释，并且用dcm萃取2x。将合并的有机层干燥(相分离器)并蒸发以给出呈棕色粉末的标题化合物，将其不经纯化用于下一步骤。
[1877]
lc-ms：rt＝1.06min；无明显的分子离子信号；uplc-ms 1。
[1878]
步骤4：外消旋-(4-氨基-7-氯-8-氟硫代色满-4-基)甲醇
[1879][1880]
通过与所述的制备中间体ao相似的方法，用7-氯-8-氟硫代色满-4-酮(步骤3)代替6-氟-1-四氢萘酮制备标题化合物。
[1881]
lc-ms：rt＝0.43min；ms m/z[m+h]
+
214.1；uplc-ms 1。
[1882]
中间体cc：2-溴-3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶
[1883][1884]
将(溴二氟甲基)膦酸二乙酯(711μl，4.13mmol)添加至2-溴-5-(三氟甲基)吡啶-3-醇(500mg，2.07mmol)和koh(2.32g，41.3mmol)在accn(5ml)和水(5ml)中的溶液中。将rm在rt下搅拌1小时，然后用dcm萃取，将有机层用盐水洗涤，干燥(相分离器)并且小心地在真空下浓缩。将残余物通过正相色谱法(硅胶，洗脱液：dcm:meoh 100:0至90:10)纯化以给出标题化合物。
[1885]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.72(s,1h),8.18(s,1h),7.48(t,1h)。
[1886]
中间体cd：(s)-5-(二氟甲氧基)-6-(8'-氟-2-氧代螺[噁唑烷-4,4'-硫代色满]-3-基)烟腈
[1887][1888]
通过与所述的制备中间体as和ar相似的方法，通过用(s)-(4-氨基-8-氟硫代色满-4-基)甲醇(中间体ce)代替(s)-(4-氨基-7-溴-8-氟色满-4-基)甲醇(中间体at)制备标题化合物。
[1889]
lc-ms：rt＝1.11min；ms m/z[m+h]
+
408.2；uplc-ms 1。
[1890]
中间体ce：(s)-(4-氨基-8-氟硫代色满-4-基)甲醇
[1891][1892]
在氩气下，将4-氨基-8-氟硫代色满-4-甲酸(中间体au7，79g，59.1mmol)溶解于thf(80ml)中并冷却至0℃。将thf(1m，148ml，148mmol)中的bh3.thf复合物缓慢添加至rm中，注意气体释放！将rm在0℃下搅拌1小时，将冰浴除去并且将rm在rt下搅拌2天。将rm重新
冷却至0℃，并且通过缓慢添加hcl(37％，24.26ml，295mmol)在水(100ml)中的混合物淬灭，随后添加meoh(100ml)。将rm在rt下搅拌1小时，然后在真空中浓缩并且与meoh共蒸发3x。将残余物用水稀释并通过添加2n naoh碱化，随后用dcm萃取3x。将合并的有机相用盐水洗涤，通过相分离筒过滤并在真空中浓缩以给出呈棕色油状物的外消旋标题化合物。将对映异构体通过手性柱色谱法(柱：amyc 20mm x 250mm，5μm，40℃，流速50ml/min，bpr 100barg，检测：210nm，等度条件：20:80etoh:co2(0.2％v/v nh3))分离以给出作为第一洗脱峰的标题化合物。
[1893]
lc-ms：rt＝0.44min；ms m/z[m+h]
+
214.1；uplc-ms 1。
[1894]
手性-hplc：rt＝9.39min；(r)-(4-氨基-8-氟硫代色满-4-基)甲醇作为第二峰洗脱，rt＝11.77min；c-hplc 45。
[1895]
中间体cf：(s)-(4-((3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)氨基)-8-氟-7-(三氟甲基)-3,4-二氢-2h-硫代吡喃并[3,2-c]吡啶-4-基)甲醇
[1896]
步骤1：5-溴-3-氟-2-(三氟甲基)吡啶-4-硫醇
[1897][1898]
在正氩气压力下，通过逐滴添加nbuli在己烷(1.6m，10.8ml，17.21mmol)中的溶液至ipr2nh(2.25ml，15.78mmol)(用冰浴冷却)中来制备lda在thf中的溶液。在低于5℃下搅拌20min后；将rm用thf(35ml)稀释并且将所得溶液逐滴添加至5-溴-3-氟-2-(三氟甲基)吡啶(3.5g，14.35mmol)在thf(60ml)中的溶液中，用干冰/丙酮浴冷却。在-75℃下继续搅拌1小时，并且将rm升温至0℃，并在0℃下搅拌30min，然后添加硫(0.55g，17.21mmol)。将rm在0℃下搅拌30min，添加nh4cl水溶液，并用tbme萃取2x，将合并的有机层用盐水洗涤，经na2so4干燥并蒸发以给出呈棕色固体的标题化合物，将其未经进一步纯化而直接使用。
[1899]
lc-ms：rt＝0.61min；ms m/z[m-h]-274.0/276.0；uplc-ms 1。
[1900]
步骤2：3-((5-溴-3-氟-2-(三氟甲基)吡啶-4-基)硫代)丙酸
[1901][1902]
经30min，分四步将3-溴丙酸(2.0g，13.04mmol)添加至k2co3(5.41g，39.1mmol)和5-溴-3-氟-2-(三氟甲基)吡啶-4-硫醇(步骤1，4.5g，13.04mmol)在dmf(40ml)中的悬浮液(用冰浴冷却)中。将rm在0℃下搅拌30min，允许升温至rt，并且在rt下搅拌4小时。添加另外的3-溴丙酸(600mg，3.94mmol)并且将rm在rt下搅拌16小时。随后添加另外的3-溴丙酸(600mg，3.94mmol)和k2co3(1.8g，13.0mmol)并且将rm在rt下再搅拌2小时。将rm在dcm(150ml)和h2o(200ml)之间分配，将水层用dcm(100ml)萃取2x，将合并的有机层用盐水(100ml)洗涤，通过穿过相分离筒干燥并蒸发以给出含有痕量dmf的标题化合物，将其未经进一步纯化而直接使用。
[1903]
lc-ms：rt＝0.98min；ms m/z[m+h]
+
348.1/350.0；uplc-ms 1。
[1904]
步骤3：3-((5-溴-3-氟-2-(三氟甲基)吡啶-4-基)硫代)-n-甲氧基-n-甲基丙酰胺
[1905][1906]
在rt下，将草酰氯(980μl，11.20mmol)添加至3-((5-溴-3-氟-2-(三氟甲基)吡啶-4-基)硫代)丙酸(步骤2，5.0g，8.62mmol)在dcm(40ml)中的溶液中，并且将rm在rt下搅拌2.5小时。添加另外的草酰氯(226μl，2.59mmol)并且将rm在rt下搅拌0.5小时并将rm蒸发。将残余物吸收到dcm(40.0ml)中，并且逐滴添加至nahco3(1.52g，18.10mmol)和n,o-二甲基羟胺盐酸盐(925mg，9.48mmol)在水(40.0ml)中的搅拌溶液中。将两相rm在rt下搅拌18小时，用dcm(100ml)和nahco3饱和水溶液(120ml)稀释，将水层用dcm(50ml)再萃取2x，将合并的有机层用盐水(100ml)洗涤，通过穿过相分离筒干燥并蒸发。将残余物吸收在isolute上并且通过正相色谱法(80g sio2柱；洗脱液：己烷:tbme从100:0至40:60)纯化以给出呈黄色油状物的标题化合物。
[1907]
lc-ms：rt＝1.09min；ms m/z[m+h]
+
391.1/393.1；uplc-ms 1。
[1908]
步骤4：8-氟-7-(三氟甲基)-2,3-二氢-4h-硫代吡喃并[3,2-c]吡啶-4-酮
[1909][1910]
在正氩气压力下，将叔buli在戊烷(7.11ml，12.08mmol)中的溶液添加至3-((5-溴-3-氟-2-(三氟甲基)吡啶-4-基)硫代)-n-甲氧基-n-甲基丙酰胺(步骤3，2.14g，5.25mmol)在thf(30ml)中的溶液中，用干冰/丙酮批冷却。将rm在-75℃下搅拌45min，然后允许升温至rt并添加nh4cl饱和水溶液(50ml)和tbme(30ml)。将水层用tbme(50ml)萃取，将合并的有机层用盐水洗涤，经na2so4干燥并蒸发。将残余物通过正相色谱法(40g sio2柱；洗脱液：己烷:tbme 100:0至40:60)纯化以给出呈米色固体的标题化合物。
[1911]
lc-ms：rt＝0.97min；ms m/z[m+h]
+
252.1；uplc-ms 1。
[1912]
步骤5：(s)-n-(8-氟-7-(三氟甲基)-2,3-二氢-4h-硫代吡喃并[3,2-c]吡啶-4-亚基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺
[1913][1914]
在rt下，将(s)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(552mg，4.46mmol)添加至8-氟-7-(三氟甲基)-2,3-二氢-4h-硫代吡喃并[3,2-c]吡啶-4-酮(步骤4，880mg，3.43mmol)和ti(oipr)4(3.02ml，10.30mmol)在thf(10ml)中的混合物中。将rm在70℃下搅拌4小时，冷却，并且添加dcm(50ml)、h2o(30ml)和盐水(20ml)。将水层用dcm(30ml)再萃取2x，将合并的有机层通过穿过相分离器干燥并蒸发以给出呈棕色树脂的标题化合物，将其未经进一步纯化而直接使用。
[1915]
lc-ms：rt＝1.14min；ms m/z[m+h]
+
355.1；uplc-ms 1。
[1916]
步骤6：(s)-n-((s)-4-氰基-8-氟-7-(三氟甲基)-3,4-二氢-2h-硫代吡喃并[3,2-c]吡啶-4-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺和(s)-n-((r)-4-氰基-8-氟-7-(三氟甲基)-3,4-二氢-2h-硫代吡喃并[3,2-c]吡啶-4-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺
[1917][1918]
向(s)-n-(8-氟-7-(三氟甲基)-2,3-二氢-4h-硫代吡喃并[3,2-c]吡啶-4-亚基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(步骤5，1.03g，2.47mmol)在thf(12ml)中的溶液中依次添加csf(751mg，4.94mmol)、三甲基甲硅烷基氰化物(994μl，7.41mmol)和叔buoh(473μl，4.94mmol)，并且将rm在rt下搅拌2.5小时。将rm在dcm(70ml)、nahco3饱和水溶液(20ml)和h2o(70ml)之间分配，将水层用dcm(40ml)再萃取2x，将合并的有机层用盐水洗涤，通过穿过相分离筒干燥并蒸发。将残余物通过正相色谱法(40g sio2柱；洗脱液：己烷:tbme 90:10至0:100)纯化以给出呈米色固体的标题化合物(1:4非对映异构体的混合物)。
[1919]
lc-ms：rt＝1.01min；ms m/z[m+h]
+
382.1；uplc-ms 1。
[1920]
步骤7：(s)-4-(((s)-叔丁基亚磺酰基)氨基)-8-氟-7-(三氟甲基)-3,4-二氢-2h-硫代吡喃并[3,2-c]吡啶-4-甲酰胺
[1921][1922]
在rt下在正氩气压力下，向(s)-n-((s)-4-氰基-8-氟-7-(三氟甲基)-3,4-二氢-2h-硫代吡喃并[3,2-c]吡啶-4-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺和(s)-n-((r)-4-氰基-8-氟-7-(三氟甲基)-3,4-二氢-2h-硫代吡喃并[3,2-c]吡啶-4-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(步骤6，780mg，1.74mmol)在etoh(10ml)和水(2ml)中的溶液中添加氢化(二甲基亚膦酸-kp)[氢双(二甲基膦-kp)]铂(ii)(74.6mg，174μmol)。将rm在80℃下搅拌1小时，冷却，并且在dcm(50ml)和盐水(30ml)之间分配，将水层用dcm(20ml)萃取2x，将合并的有机层通过穿过相分离筒干燥并蒸发。将残余物通过正相色谱法(24g sio
2 gold柱，洗脱液：己烷:(tbme:meoh 95:5)80:20至0:100)纯化以给出两种主要成分。将标题化合物分离为呈白色固体的第一洗脱峰。
[1923]
lc-ms：rt＝0.86min；ms m/z[m+h]
+
400.1；uplc-ms 1。
[1924]
将(r)-4-(((s)-叔丁基亚磺酰基)氨基)-8-氟-7-(三氟甲基)-3,4-二氢-2h-硫代吡喃并[3,2-c]吡啶-4-甲酰胺分离为呈白色结晶固体的第二洗脱峰。
[1925]
lc-ms：rt＝0.89min；ms m/z[m+h]
+
400.2；uplc-ms 1。
[1926]
步骤8：(s)-4-氨基-8-氟-7-(三氟甲基)-3,4-二氢-2h-硫代吡喃并[3,2-c]吡啶-4-甲酸
[1927][1928]
将(s)-4-(((s)-叔丁基亚磺酰基)氨基)-8-氟-7-(三氟甲基)-3,4-二氢-2h-硫代吡喃并[3,2-c]吡啶-4-甲酰胺(步骤7，154mg，308μmol)在hcl水溶液(4m，3.1ml，12.34mmol)中的悬浮液在80℃下加热20小时。添加另外的hcl水溶液(4m，1.0ml)并且将rm在80℃下再搅拌24小时。将冷却rm蒸发，再次溶解于甲苯中并且蒸发至干(两次)，以给出标题化合物，将其未经进一步纯化而直接使用。
[1929]
lc-ms：rt＝0.50min；ms m/z[m+h]
+
297.1；uplc-ms 1。
[1930]
步骤9：(s)-(4-氨基-8-氟-7-(三氟甲基)-3,4-二氢-2h-硫代吡喃并[3,2-c]吡啶-4-基)甲醇
[1931][1932]
在rt下，将硼烷在thf(1m，1.06ml，1.06mmol)中的溶液逐滴添加至(s)-4-氨基-8-氟-7-(三氟甲基)-3,4-二氢-2h-硫代吡喃并[3,2-c]吡啶-4-甲酸(步骤8，250mg，211μmol)在thf(5ml)中的溶液中。在rt下，在1小时(1ml)、20小时(2ml)、48小时(2ml)、72小时(1.5ml)后，将另外的等分试样的thf(1m)中的硼烷添加至搅拌的rm中。在rt下，将反应混合物再搅拌24小时并逐滴添加meoh注意：气体释放！将rm蒸发并且将残余物在4m hcl水溶液中在40℃下加热30min，然后冷却并蒸发至干。将残余物在dcm(20ml)和水(20ml)之间分配，将水层通过添加na2co3饱和水溶液(10ml)碱化，并且用dcm(10ml)萃取2x，将来自碱性萃取物的合并的有机层通过穿过相分离筒干燥并蒸发以给出呈黄色树脂的标题化合物，将其未经进一步纯化而直接使用。
[1933]
lc-ms：rt＝0.54min；ms m/z[m+h]
+
283.1；uplc-ms 1。
[1934]
步骤10：(s)-8'-氟-7'-(三氟甲基)-2',3'-二氢螺[噁唑烷-4,4'-硫代吡喃并[3,2-c]吡啶]-2-酮
[1935][1936]
将三光气(26.8mg，90μmol)在dcm(1ml)中的溶液在rt下逐滴添加至(s)-(4-氨基-8-氟-7-(三氟甲基)-3,4-二氢-2h-硫代吡喃并[3,2-c]吡啶-4-基)甲醇(步骤9，60mg，181μmol)和et3n(63μl，452μmol)在dcm(2ml)中的溶液中。将rm在rt下搅拌1小时并添加nh4cl饱和水溶液(3ml)。在rt下搅拌30min后，将两相混合物用nh4cl饱和水溶液(10ml)和h2o(10ml)稀释，用dcm(10ml)萃取3x，将合并的有机层通过穿过相分离筒干燥，并且蒸发。将残余物通过正相色谱法(12g sio2柱；洗脱液：己烷:(tbme:meoh 95:5)90:10至10:90)纯化以给出呈无色树脂的标题化合物。
螺[苯并[b]噁庚英-5,4'-噁唑烷]-2'-酮
[1951]
步骤1：1-(2-(2-溴乙氧基)-3-氟苯基)乙酮
[1952][1953]
在rt下，将1,2-二溴乙烷(28.0ml，324mmol)添加至1-(3-氟-2-羟基苯基)乙酮(10g，64.9mmol)和k2co3(18.83g，136mmol)在丁酮(125ml)中的混合物中。将黄色悬浮液在回流下加热18小时，冷却至rt，过滤，用etoac洗涤。将滤液用水洗涤3x，干燥(相分离器)并浓缩以给出呈黄色油状物的标题化合物，将其不经进一步纯化用于下一步骤。
[1954]
lc-ms：rt＝1.00min；ms m/z 261.1[m+h]
+
；uplc-ms 1。
[1955]
步骤2：9-氟-3,4-二氢苯并[b]噁庚英-5(2h)-酮
[1956][1957]
在rt下在正氩气压力下，将1-(2-(2-溴乙氧基)-3-氟苯基)乙酮(步骤1，17.51g，57.7mmol)在thf(30ml)中的溶液缓慢添加至nah(60％在矿物油中，3.69g，92mmol)在thf(45ml)中的浆液中。将rm加热至70℃，持续1.5小时，冷却至rt，通过添加水淬灭并用etoac萃取。将有机相用盐水洗涤。将合并的水相再次用etoac萃取。将所有有机相合并，干燥(相分离筒)并浓缩。将残余物通过正相色谱法(硅胶，洗脱液：庚烷:etoac 100:0至70:30)纯化以给出呈黄色粉末的标题化合物。
[1958]
lc-ms：rt＝3.53min；ms m/z 181.1[m+h]
+
；uplc-ms 4。
[1959]
步骤3、4、5、6、7和8：外消旋-9-氟-3,4-二氢-2h-螺[苯并[b]噁庚英-5,4'-噁唑烷]-2'-酮
[1960][1961]
通过与所述的制备中间体cf，步骤5至10相似的方法，通过用9-氟-3,4-二氢苯并[b]噁庚英-5(2h)-酮(步骤2)代替8-氟-7-(三氟甲基)-2,3-二氢-4h-硫代吡喃并[3,2-c]吡啶-4-酮(中间体cf，步骤4)制备标题化合物。
[1962]
lc-ms：rt＝2.81min；ms m/z 238.1[m+h]
+
；uplc-ms 4。
[1963]
步骤9：外消旋-3'-(3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)-9-氟-3,4-二氢-2h-螺[苯并[b]噁庚英-5,4'-噁唑烷]-2'-酮
[1964]
[1965]
在氩气下，将外消旋-9-氟-3,4-二氢-2h-螺[苯并[b]噁庚英-5,4'-噁唑烷]-2'-酮(步骤8，1.86g，7.76mmol)、2-氯-3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶(中间体a，2.88g，11.64mmol)、cui(739mg，3.88mmol)和cs2co3(5.06g，15.52mmol)在dmf(58ml)中的混合物在120℃下加热3小时。将rm用etoac稀释，用nahco3水溶液洗涤，并且将水层用etoac萃取2x。将合并的有机层用盐水洗涤，经na2so4干燥，并浓缩。将残余物通过正相色谱法(硅胶，洗脱液：庚烷:etoac 100:0至0:100)纯化以给出呈黄色粉末的标题化合物。
[1966]
lc-ms：rt＝1.19min；ms m/z 449.2[m+h]
+
；uplc-ms 1。
[1967]
中间体ci：(s)-8-(二氟甲氧基)-8',8'-二氟-6-(三氟甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉]-1'-甲醛
[1968][1969]
在rt下，将seo2(78mg，705μmol)添加至1,4-二噁烷(4ml)中的(s)-8-(二氟甲氧基)-8',8'-二氟-1'-甲基-6-(三氟甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉](实例32，200mg，470μmol)中。将rm在110℃下加热20小时，冷却并在dcm和nahco3饱和水溶液之间分配。将水层用dcm萃取，将合并的有机层干燥(相分离器)并蒸发。将残余物通过正相色谱法(12g sio2柱，洗脱液：庚烷:etoac 90:10至20:80)纯化以给出呈米色泡沫的标题化合物。
[1970]
lc-ms：rt＝0.64/0.68min宽双峰；ms m/z[m+h]
+
436.5；uplc-ms 1。
[1971]
中间体cj：3'-(3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)-9-氟-3,4-二氢-1h-螺[苯并[c]噁庚英-5,4'-噁唑烷]-2'-酮
[1972]
步骤1：1-溴-2-((丁-3-烯-1-基氧基)甲基)-3-氟苯
[1973][1974]
在0℃下，将油状物中作为分散体的nah(21.27mg，532μmol)添加至丁-3-烯-1-醇(48μl，532μmol)在thf(1ml)中的搅拌溶液中。将rm在0℃下搅拌15min并且添加thf(1ml)中的1-溴-2-(溴甲基)-3-氟苯(100mg，355μmol)。允许黄色的rm温热至rt并且在rt下搅拌18小时，用水稀释并用etoac萃取2x。将合并的有机相干燥(相分离器)并且浓缩。将残余物通过正相色谱法(硅胶，洗脱液：庚烷:etoac 100:0至80:20)纯化以给出呈无色油状物的标题化合物(大约85％的纯度)。
[1975]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ7.56(d,1h),7.40-7.26(m,2h),5.85-5.74(m,1h),5.13-4.97(m,2h),4.58(d,2h),3.52(t,2h),2.28(q,2h)。
[1976]
步骤2：9-氟-5-亚甲基-1,3,4,5-四氢苯并[c]噁庚英
[1977]
[1978]
在rt下在氩气气氛下，将ag2co3(77mg，279μmol)然后pd[p(c6h5)3]4(26.9mg，23μmol)添加至1-溴-2-((丁-3-烯-1-基氧基)甲基)-3-氟苯(步骤1，71mg，233μmol)在accn(3ml)中的溶液中。将rm在100℃下加热18小时，冷却至rt，浓缩，并且将残余物用水稀释并用etoac萃取2x。将合并的有机相干燥(相分离器)并且浓缩。将残余物通过正相色谱法(硅胶，洗脱液：庚烷:etoac＝100:0至70:30)纯化以给出呈黄色油状物的标题化合物。
[1979]
lc-ms：rt＝1.06min；无明显的分子离子信号；uplc-ms 1。
[1980]
步骤3：9-氟-3,4-二氢苯并[c]噁庚英-5(1h)-酮
[1981][1982]
在0℃下，将naio4(42.9mg，200μmol)和oso4水溶液(4％，157μl，20μmol)添加至9-氟-5-亚甲基-1,3,4,5-四氢苯并[c]噁庚英(步骤2，22.9mg，100μmol)在thf/水(1:1，1ml)中的搅拌溶液中。将rm升温至rt并搅拌1小时，用水稀释并且用etoac萃取。将有机相用盐水洗涤，干燥(相分离器)并浓缩以给出呈棕色油状物的标题化合物，将其不经进一步纯化用于下一步骤。
[1983]
lc-ms：rt＝0.78min；无明显的分子离子信号；uplc-ms 1。
[1984]
步骤4、5、6、7、8和9：9-氟-3,4-二氢-1h-螺[苯并[c]噁庚英-5,4'-噁唑烷]-2'-酮
[1985][1986]
通过与所述的制备中间体cf，步骤5至10相似的方法，通过用9-氟-3,4-二氢苯并[c]噁庚英-5(1h)-酮(步骤3)代替8-氟-7-(三氟甲基)-2,3-二氢-4h-硫代吡喃并[3,2-c]吡啶-4-酮(中间体cf，步骤4)制备标题化合物。
[1987]
lc-ms：rt＝0.67min；ms m/z[m+h]
+
238.2；uplc-ms 1。
[1988]
步骤10：3'-(3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)-9-氟-3,4-二氢-1h-螺[苯并[c]噁庚英-5,4'-噁唑烷]-2'-酮
[1989][1990]
将9-氟-3,4-二氢-1h-螺[苯并[c]噁庚英-5,4'-噁唑烷]-2'-酮(步骤9，144mg，577μmol)、2-氯-3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶(中间体a，214mg，865μmol)、cui(54.9mg，288μmol)和cs2co3(376mg，1.15mmol)在dmf(4.4ml)中的混合物在120℃下加热4小时。将冷却的rm用etoac稀释，将有机层用nahco3饱和水溶液洗涤2x，干燥(相分离器)并且浓缩。通过正相色谱法(硅胶，洗脱液：庚烷:etoac100:0至50:50)纯化，给出呈黄色油状物的标题化合物。
[1991]
lc-ms：rt＝1.19min；ms m/z[m+h]
+
449.2；uplc-ms 1。
[1992]
中间体ck：(s)-(1-((3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)氨基)-5-氟-1,2,3,4-四氢化萘-1-基)甲醇
[1993]
步骤1：(s)-3'-(3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)-5-氟-3,4-二氢-2h-螺[萘-1,4'-噁唑烷]-2'-酮
[1994][1995]
通过与中间体s，步骤1相似的方法，通过用(s)-5-氟-3,4-二氢-2h-螺[萘-1,4'-噁唑烷]-2'-酮(中间体z，步骤1)代替(s)-6'-溴-5'-氟-2',3'-二氢二螺[噁唑烷-4,1'-萘-4',2
”‑
[1,3]二硫环戊烷]-2-酮(中间体t)制备标题化合物。将粗产物通过正相色谱法(80g sio2柱；洗脱液：庚烷:etoac100:0至85:25)纯化以给出呈米色固体的标题化合物。
[1996]
lc-ms：rt＝1.27min；ms m/z[m+h]
+
433.3；uplc-ms 1。
[1997]
步骤2：(s)-(1-((3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)氨基)-5-氟-1,2,3,4-四氢化萘-1-基)甲醇
[1998][1999]
将(s)-3'-(3-(二氟甲氧基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)-5-氟-3,4-二氢-2h-螺[萘-1,4'-噁唑烷]-2'-酮(步骤1，308mg，570μmol)、naoh水溶液(2m，3ml，6mmol)和etoh(6ml)的混合物在80℃下搅拌1小时。然后将rm用水稀释并用etoac萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经na2so4干燥，并且蒸发以给出呈油状物的标题化合物。
[2000]
lc-ms：rt＝1.28min；ms m/z[m+h]
+
407.2；uplc-ms 1。
[2001]
中间体cl：(s)-(1-氨基-5-溴-2,3-二氢-1h-茚-1-基)甲醇
[2002][2003]
通过与所述的制备中间体j步骤1至4相似的方法，用5-溴-2,3-二氢-1h-茚-1-酮代替5-溴-4-氟茚满酮制备标题化合物。
[2004]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ7.34(s,1h),7.31(d,1h),7.21(d,1h),4.75(t,1h),3.30-3.23(m,2h),2.88-2.68(m,2h),2.20(m,1h),1.88(s,2h),1.73(m,1h)。
[2005]
本发明提供了(s)-1'-氯-8-(二氟甲氧基)-8',8'-二氟-6-(三氟甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉]的结晶形式，其在本文中也称为(s)-1'-氯-8-(二氟甲氧基)-8',8'-二氟-6-(三氟甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉]的“形式a”。
[2006]
(s)-1'-氯-8-(二氟甲氧基)-8',8'-二氟-6-(三氟甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉]可以通过根据以下式(a)的化学结构表示
[2007][2008]
本发明还提供了(s)-1'-氯-8-(二氟甲氧基)-8',8'-二氟-6-(三氟甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉]富马酸盐的结晶形式，其在本文中也称为(s)-1'-氯-8-(二氟甲氧基)-8',8'-二氟-6-(三氟甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉]富马酸盐的“形式a”。
[2009]
本发明的(s)-1'-氯-8-(二氟甲氧基)-8',8'-二氟-6-(三氟甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉]的结晶形式a和(s)-1'-氯-8-(二氟甲氧基)-8',8'-二氟-6-(三氟甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉]富马酸盐的结晶形式a可以通过制药工业领域中众所周知的用于表征固体的分析方法来表征。此类方法包括但不限于xrpd、sxrd、ftir、拉曼(raman)、dsc、tga、和dvs。它可以通过前述分析方法之一或者通过将它们中的两种或更多种组合来表征。特别地，本发明的(s)-1'-氯-8-(二氟甲氧基)-8',8'-二氟-6-(三氟甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉]或(s)-1'-氯-8-(二氟甲氧基)-8',8'-二氟-6-(三氟甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉]富马酸盐的形式a可以通过以下实施例中的任何一个或通过组合以下实施例中的两个或更多个来表征。
[2010]
xrpd实施例的示例：
[2011]
在一个实施例中，本发明涉及(s)-1'-氯-8-(二氟甲氧基)-8',8'-二氟-6-(三氟甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉](形式a)的结晶形式，该结晶形式特征在于具有xrpd，其包含在2-θ角为以下处的反射：
[2012]
(9.7
±
0.2)
°
、(18.4
±
0.2)
°
和(19.4
±
0.2)
°
；或
[2013]
(9.7
±
0.2)
°
、(18.4
±
0.2)
°
、(19.4
±
0.2)
°
和(13.4
±
0.2)
°
；或
[2014]
(9.7
±
0.2)
°
、(18.4
±
0.2)
°
、(19.4
±
0.2)
°
、(13.4
±
0.2)
°
和(20.7
±
0.2)
°
；或
[2015]
(9.7
±
0.2)
°
、(18.4
±
0.2)
°
、(19.4
±
0.2)
°
、(13.4
±
0.2)
°
、(20.7
±
0.2)
°
和(24.2
±
0.2)
°
；或
[2016]
(9.7
±
0.2)
°
、(18.4
±
0.2)
°
、(19.4
±
0.2)
°
、(13.4
±
0.2)
°
、(20.7
±
0.2)
°
、(24.2
±
0.2)
°
和(22.1
±
0.2)
°
；或
[2017]
(9.7
±
0.2)
°
、(18.4
±
0.2)
°
、(19.4
±
0.2)
°
、(13.4
±
0.2)
°
、(20.7
±
0.2)
°
、(24.2
±
0.2)
°
、(22.1
±
0.2)
°
和(10.3
±
0.2)
°
；
[2018]
(当在20℃至30℃范围内的温度、用具有0.15406nm的波长的cu-kα
1,2
辐射测量时)。
[2019]
在另一个实施例中，本发明涉及(s)-1'-氯-8-(二氟甲氧基)-8',8'-二氟-6-(三氟甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉]富马酸盐(形式a)的
结晶形式，该结晶形式特征在于具有xrpd，其包含在2-θ角为以下处的反射：
[2020]
(24.9
±
0.2)
°
、(6.2
±
0.2)
°
和(20.9
±
0.2)
°
；或
[2021]
(24.9
±
0.2)
°
、(6.2
±
0.2)
°
、(20.9
±
0.2)
°
和(10.9
±
0.2)
°
；或
[2022]
(24.9
±
0.2)
°
、(6.2
±
0.2)
°
、(20.9
±
0.2)
°
、(10.9
±
0.2)
°
和(18.5
±
0.2)
°
；或
[2023]
(24.9
±
0.2)
°
、(6.2
±
0.2)
°
、(20.9
±
0.2)
°
、(10.9
±
0.2)
°
、(18.5
±
0.2)
°
和(22.8
±
0.2)
°
；或
[2024]
(24.9
±
0.2)
°
、(6.2
±
0.2)
°
、(20.9
±
0.2)
°
、(10.9
±
0.2)
°
、(18.5
±
0.2)
°
、(22.8
±
0.2)
°
和(12.9
±
0.2)
°
；或
[2025]
(24.9
±
0.2)
°
、(6.2
±
0.2)
°
、(20.9
±
0.2)
°
、(10.9
±
0.2)
°
、(18.5
±
0.2)
°
、(22.8
±
0.2)
°
、(12.9
±
0.2)
°
和(16.1
±
0.2)
°
；
[2026]
(当在20℃至30℃范围内的温度、用具有0.15406nm的波长的cu-kα
1,2
辐射测量时)。
[2027]
在另一个实施例中，本发明涉及(s)-1'-氯-8-(二氟甲氧基)-8',8'-二氟-6-(三氟甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉](形式a)的结晶形式，该结晶形式特征在于当在20℃至30℃范围内的温度、用具有0.15406nm的波长的cu-kα
1,2
辐射测量时，具有与本发明的图1所示基本上相同的xrpd。
[2028]
在另一个实施例中，本发明涉及(s)-1'-氯-8-(二氟甲氧基)-8',8'-二氟-6-(三氟甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉]富马酸盐(形式a)的结晶形式，该结晶形式特征在于当在20℃至30℃范围内的温度、用具有0.15406nm的波长的cu-kα
1,2
辐射测量时，具有与本发明的图5所示基本上相同的xrpd。
[2029]
dsc实施例的示例：
[2030]
在一个实施例中，本发明涉及(s)-1'-氯-8-(二氟甲氧基)-8',8'-二氟-6-(三氟甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉](形式a)的结晶形式，该结晶形式特征在于当以10k/min的加热速率测量时，具有包含起始温度为约162.5℃的吸热峰(优选地，单吸热峰)的如图2所示的dsc曲线。
[2031]
在另外的实施例中，本发明涉及(s)-1'-氯-8-(二氟甲氧基)-8',8'-二氟-6-(三氟甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉]富马酸盐(形式a)的结晶形式，该结晶形式特征在于当以10k/min的加热速率测量时，具有峰最高温度为约172.2℃的吸热峰(优选地，单吸热峰)的如图6所示的dsc曲线。
[2032]
在又另一个实施例中，本发明涉及(s)-1'-氯-8-(二氟甲氧基)-8',8'-二氟-6-(三氟甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉](形式a)的结晶形式，该结晶形式特征在于当以10k/min的加热速率用dsc测量时，具有(163.9
±
x)℃的熔点起始温度。
[2033]
在又另一个实施例中，本发明涉及(s)-1'-氯-8-(二氟甲氧基)-8',8'-二氟-6-(三氟甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉]富马酸盐(形式a)的结晶形式，该结晶形式特征在于当以10k/min的加热速率用dsc测量时，具有约173.5℃的熔点峰最高温度。
[2034]
tga实施例的示例：
[2035]
在一个实施例中，本发明涉及(s)-1'-氯-8-(二氟甲氧基)-8',8'-二氟-6-(三氟
甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉](形式a)的结晶形式，该结晶形式特征在于当以10k/min的速率从10℃加热到250℃时，具有如图3所示的tga，其显示出基于该结晶形式的重量不超过0.4w-％的质量损失。
[2036]
在另一个实施例中，本发明涉及(s)-1'-氯-8-(二氟甲氧基)-8',8'-二氟-6-(三氟甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉]富马酸盐(形式a)的结晶形式，该结晶形式特征在于当以10k/min的速率从10℃加热到250℃时，具有如图7所示的tga曲线，其显示出基于该结晶形式的重量不超过0.2w-％的质量损失。
[2037]
dvs实施例的示例：
[2038]
在一个实施例中，本发明涉及(s)-1'-氯-8-(二氟甲氧基)-8',8'-二氟-6-(三氟甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉](形式a)的结晶形式，该结晶形式特征在于当用如图4所示的dvs在从0至95％的范围内的相对湿度下并且在约25℃的温度下测量时，显示出基于该结晶形式的重量不超过0.05w-％的质量变化。
[2039]
在另一个实施例中，本发明涉及(s)-1'-氯-8-(二氟甲氧基)-8',8'-二氟-6-(三氟甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉]富马酸盐](形式a)的结晶形式，该结晶形式特征在于当用如图8所示的dvs在从0至95％的范围内的相对湿度下并且在约25℃的温度下测量时，显示出基于该结晶形式的重量不超过0.1w-％的质量变化。
[2040]
另外的实施例的示例：
[2041]
下列非限制性实例用来进一步阐述本披露，但不用于限制本发明的范围。
[2042]
实例120：(s)-1'-氯-8-(二氟甲氧基)-8',8'-二氟-6-(三氟甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉]的富马酸盐
[2043]
将约1107mg的(s)-1'-氯-8-(二氟甲氧基)-8',8'-二氟-6-(三氟甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉]和435mg的富马酸添加至8.5ml的乙醇中，加热至50c，伴随磁力搅拌过夜；冷却至r.t.并保持搅拌3小时；然后将悬浮液过滤。在50℃下在真空下加热后，获得约1.2g的白色粉末。
[2044]
x射线衍射：
[2045]
使用cukα辐射(波长0.15406nm)在bruker d8 advance衍射计上记录本文所述的x射线粉末衍射(xrpd)图。在2
°
与40
°
(2-θ)之间记录xrpd图。
[2046]
本领域普通技术人员将理解，可以获得具有取决于所采用的测量条件的测量误差的xrpd图。特别地，通常已知xrpd图中的强度可以取决于所采用的测量条件而波动。应进一步理解，相对强度还可以取决于实验条件和使用的x射线辐射的波长而变化。对于相同的晶体形式，样品与参考之间的2-θ衍射角的一致性在0.2
°
以内，并且应考虑与上述衍射角有关的这种测量误差程度。因此，应理解本发明的晶型不限于提供与本文披露的附图中描绘的xrpd图完全相同的x射线衍射图的晶型。任何能够提供与附图中所披露的那些xrpd图基本上一致的xrpd图的晶型均包含在本发明的范围内。确定xrpd图基本相同的能力在本领域普通技术人员的能力范围内。
[2047]
本文图1中显示了(s)-1'-氯-8-(二氟甲氧基)-8',8'-二氟-6-(三氟甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉]的结晶形式a的代表性衍射图。下表1提供了相应的反射列表。
[2048][2049]
表1：在从2至30
°
2-θ的范围内，(s)-1'-氯-8-(二氟甲氧基)-8',8'-二氟-6-(三氟甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉]的结晶形式a的xrpd反射位置和相应的相对强度；2-θ值的典型精度在
±
0.2
°
2-θ，优选地
±
0.1
°
2-θ的范围内。
[2050]
差示扫描量热法(dsc)：
[2051]
用于测试结晶形式的dsc仪器是ta discovery。将仪器编程为在50ml/min的氮气流量下、在30℃与300℃范围内的温度、以每分钟10℃的速度加热。
[2052]
图2中显示了(s)-1'-氯-8-(二氟甲氧基)-8',8'-二氟-6-(三氟甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉]的结晶形式a的代表性dsc曲线，并且显示出单吸热(起始温度为约162.5℃并且峰值温度为约163.9℃)。
[2053]
热重量分析方法：
[2054]
用于测试结晶形式的tga仪器是ta discovery。在30℃与约300℃的温度范围内，以每分钟10℃的加热速率分析2至10毫克的样品。
[2055]
图3中显示了(s)-1'-氯-8-(二氟甲氧基)-8',8'-二氟-6-(三氟甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉]的结晶形式a的代表性tga曲线，并且显示出从约48℃至190℃的步骤和基于该结晶形式的重量不超过0.4w-％的质量损失。
[2056]
动态蒸汽吸附(dvs)数据：
[2057]
使用sms advantage系统进行动态蒸汽吸附。使约10mg的样品在25℃下经历0％rh和95％rh之间的不同湿度。使用系统软件进行评估。
[2058]
图4显示了在从0％至40％rh的吸附循环(用三角形标记)期间，以及在从40％至0％rh(x轴上)的解吸附循环(用正方形标记)期间，(s)-1'-氯-8-(二氟甲氧基)-8',8'-二氟-6-(三氟甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉]的结晶形式a的平衡质量变化(y轴上δm,单位为重量％)。在0和95％rh之间的质量差小于0.05重量％，并且在吸附曲线和解吸曲线之间没有观察到明显的滞后现象。因此，本发明的(s)-1'-氯-8-(二氟甲氧基)-8',8'-二氟-6-(三氟甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉]的结晶形式a可以被指定为非吸湿的。
[2059]
(s)-1'-氯-8-(二氟甲氧基)-8',8'-二氟-6-(三氟甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺
[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉]的形式a的表征
[2060]
x射线衍射：
[2061]
使用cukα辐射(波长0.15406nm)在bruker d8 advance衍射计上记录本文所述的x射线粉末衍射(xrpd)图。在2
°
与40
°
(2-θ)之间记录xrpd图。
[2062]
本文图5中显示了(s)-1'-氯-8-(二氟甲氧基)-8',8'-二氟-6-(三氟甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉]富马酸盐的结晶形式a的代表性衍射图。下表2提供了相应的反射列表。
[2063][2064]
表2：在从2至30
°
2-θ的范围内，(s)-1'-氯-8-(二氟甲氧基)-8',8'-二氟-6-(三氟甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉]富马酸盐的结晶形式a的xrpd反射位置和相应的相对强度；2-θ值的典型精度在
±
0.2
°
2-θ，优选地
±
0.1
°
2-θ的范围内。
[2065]
差示扫描量热法(dsc)：
[2066]
用于测试结晶形式的dsc仪器是ta discovery。将仪器编程为在50ml/min的氮气流量下、在30℃与300℃范围内的温度、以每分钟10℃的速度加热。
[2067]
图6中显示了(s)-1'-氯-8-(二氟甲氧基)-8',8'-二氟-6-(三氟甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉]富马酸盐的结晶形式a的代表性dsc曲线，并且显示出单吸热(起始温度为约172.2℃并且峰值温度为约173.5℃)。
[2068]
热重量分析方法：
[2069]
用于测试结晶形式的tga仪器是ta discovery。在30℃与约300℃的温度范围内，以每分钟10℃的加热速率分析2至10毫克的样品。
[2070]
图7中显示了(s)-1'-氯-8-(二氟甲氧基)-8',8'-二氟-6-(三氟甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉]富马酸盐的结晶形式a的代表性tga曲线，并且显示出从约23℃至173℃的步骤和基于该结晶形式的重量不超过0.2w-％的质量损失。
[2071]
动态蒸汽吸附(dvs)数据：
[2072]
使用sms advantage系统进行动态蒸汽吸附。使约10mg的样品在25℃下经历0％rh和95％rh之间的不同湿度。使用系统软件进行评估。
[2073]
图8显示了在从0％至40％rh的吸附循环(用三角形标记)期间，以及在从40％至0％rh(x轴上)的解吸附循环(用正方形标记)期间，(s)-1'-氯-8-(二氟甲氧基)-8',8'-二氟-6-(三氟甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉]富马酸盐的结晶形式a的平衡质量变化(y轴上δm,单位为重量％)。在0和95％rh之间的质量差小于0.1重量％，并且在吸附曲线和解吸曲线之间没有观察到明显的滞后现象。因此，本发明的(s)-1'-氯-8-(二氟甲氧基)-8',8'-二氟-6-(三氟甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉]的结晶形式a可以被指定为非吸湿的。
[2074]
具有hif2αpas-b结构域的体外spa
[2075]
闪烁邻近测定法(spa)基于放射性配体n-(3-氯-5-氟苯基-4-t)-4-硝基苯并[c][1,2,5]噁二唑-7-t-5-胺(1.8tbq/mmol，非标记配体的亲和力，ic
50
＝82
±
18nm，n＝3)的竞争结合测定。使用384孔板(781207/葛莱娜公司(greiner))进行测定，其中一个柱指定为高信号对照，并且包含dmso，不含化合物，另一个柱指定为低信号对照，并且不含蛋白质。在添加放射性配体之前，将化合物(使用14点剂量反应和3倍化合物稀释液从100μm到60pm进行测试)与hif2αpas-b结构域(236-350，n端生物素化)预孵育30min。测定体积为60μl的最终浓度为5nm hif2α和25nm放射性配体。测定缓冲液含有50mm tris-hcl ph7(西格玛公司(sigma))、20mm nacl(弗鲁克公司(fluka))、0.02％bsa(西格玛公司)、0.005％triton x-100(皮尔斯公司(pierce))和1mm dtt(弗鲁克公司)。孵育30min后，添加5μl链霉亲和素pvt spa微珠(珀金埃尔默公司(perkin elmer))(浓度为1.2mg/ml，在缓冲液中稀释)。孵育60min后，将板离心，并在topcount nxt 384(普克公司(packard))上读数。使用2个不同的板制作重复品，并使用helios系统基于以下方程式确定平均ic
50
值：％抑制＝[(高对照-样品)/(高对照-低对照)]x 100。列表中hif2α活性的ic
50
值是1到10个独立实验的平均值。
[2076]
在n-末端生物素化的hif2αpas-b结构域236-350的纯化
[2077]
在质粒pbira(生物素连接酶的共表达)存在下，在大肠杆菌tuner(de3)中在用抗生素、200μm生物素、8mg/ml l-阿拉伯糖和0.1mm异丙基β-d-1-硫代半乳糖吡喃糖苷代替的极品液体培养基(terrific broth)(tb)培养基，在20℃下从质粒plaf727(内部产生的)表达人hif2α(uniprot q99814)氨基酸d236-n350 18小时。通过离心收获细胞，并速冻直至进一步处理。将细胞融化并重悬浮于缓冲液a(50mm nah2po
4 ph 8.0，300mm nacl，20mm咪唑，25u/ml(诺维根公司(novagen)))，并在4℃下孵育20min。添加4-(2-氨基乙基)苯磺酰氟(最终0.5mm)后，将细胞用avestin均质器在约20000psi(5巴氮气)下裂解，并通过离心除去不溶性碎片。使用histrap hp 5ml柱(ge)使用缓冲液a进行固定的金属亲和色谱，并用梯度洗脱超过10个柱体积的缓冲液a(经300mm咪唑取代)。通过novex nupage 4％-12％page分析洗脱的蛋白质级分，并在4℃下在孵育18小时中通过hrv3c蛋白酶切割(内部产生的)除去亲和标签蛋白。在最终的精制步骤中，将蛋白质负载到用sec-缓冲液(50mm tris-ph 7.4，150mm nacl，1mm 3,3’,3
”‑
膦三基三丙酸(tcep)，10％甘油)预先平衡的hiload superdex 75 26/60尺寸排阻柱上。通过page(novex nupage 4％-12％bistris)分析确定阳性级分。通过rplc-ms确定正确的质量，并表明蛋白质已完全生物素化。
[2078]
n-(3-氯-5-氟苯基-4-t)-4-硝基苯并[c][1,2,5]噁二唑-7-t-5-胺
[2079][2080]
步骤1：7-溴-n-(4-溴-3-氯-5-氟苯基)-4-硝基苯并[c][1,2,5]噁二唑-5-胺
[2081]
将5,7-二溴-4-硝基苯并[c][1,2,5]噁二唑(如j.med.chem.[药物化学杂志]1974,17,203-206.中所述制备，420mg，1.2mmol)、4-溴-3-氯-5-氟苯胺(如wo 2012/143599中所述制备，302mg，1.3mmol)和dmf(620μl)在rt下组合，并且在氩气气氛下在90℃下加热4小时。将meoh(15ml)添加至冷却的rm中，并且将混合物在rt下搅拌15min，过滤，用meoh洗涤，以给出橙色结晶固体。然后将固体悬浮于meoh(6ml)中并且伴随搅拌回流2小时，冷却至rt，过滤，用meoh洗涤，干燥后以给出呈橙色固体的标题化合物。
[2082]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ11.52(s,1h),7.85(s,1h),7.65-7.62(m,1h),7.58-7.54(m,1h)。
[2083]
步骤2：n-(3-氯-5-氟苯基-4-t)-4-硝基苯并[c][1,2,5]噁二唑-7-t-5-胺
[2084]
将7-溴-n-(4-溴-3-氯-5-氟苯基)-4-硝基苯并[c][1,2,5]噁二唑-5-胺(步骤1，6.86mg，14.70μmol)和lindlar催化剂(20.63mg)悬浮于dmf(0.7ml)中，并且添加(ipr)2net 11.8μl(8.74mg；67.6μmol)。将深红色悬浮液在高真空歧管中脱气三次，并且在氚气气氛(9.0ci)下在rt下搅拌2小时。将溶剂在真空中除去，并通过添加乙醇(1ml)，搅拌溶液并在真空下再次除去溶剂来交换不稳定的氚。将该过程重复三次。最后，将干燥良好的固体用5ml乙醇萃取，并将悬浮液通过0.2μm尼龙膜过滤，获得澄清深红色溶液。粗产物的活性为281mci。测定放射化学纯度为23％(hplc 22)。通过hplc(rp-hplc 6)进行250mci(9.25gbq)的纯化。将含有级分的产物用nahco3水溶液(5％)处理，并且使用旋转蒸发器将体积部分减少。将产物用phenomenex stratax筒(3ml，100mg)捕获，然后用10ml乙醇洗脱。萃取物含有标题化合物，其活性为41.6mci，放射化学纯度》99％。确定的特定活性为38.9ci/mmol。
[2085]
用于细胞测定的化合物溶液的制备
[2086]
以dmso中10mm的浓度制备化合物的原液并在4℃下储存。在需要得到完整的剂量反应曲线时，将原液在dmso中预先稀释至所需降低的起始浓度的1’000倍。细胞接种后当天，使用hp 300d非接触式数字分配器(digital dispenser)(tecan)或ats100声分发器(edc生物系统公司(edc biosystems))，将每种化合物的十一种2倍系列稀释液直接分配到细胞测定板中。
[2087]
hif2α的细胞iscript测定
[2088]
采用定量rt-pcr方法，在786-o细胞(rrid cvcl_1051)中评估内源性靶基因hegln3(omim:606426)和作为管家对照的β-肌动蛋白(omim:102630)的hif2α调节表达的化合物介导调节。简而言之，将786-o细胞维持在由dmem(gibco#11995-065)、2mm l-谷氨酰胺(生物概念公司(bioconcept)#5-10k50-h)、1x青霉素/链霉素(生物概念公司#4-01f00-h)、10％胎牛血清(gibco#a31608-01)、1mm丙酮酸钠(生物概念公司#5-60f00-h)构成的生长培养基中。将细胞以1’000个细胞/20μl/孔接种到白壁的透明底部384孔板(葛莱娜公司#781098)中，并在37℃下孵育过夜，然后添加上述系列化合物稀释液。在37℃下孵育48小时后，将培养基上清液弃去并且将印迹的板通过在组织上翻转干燥。用20μl磷酸盐缓冲液洗
涤一次后，重复相同的程序。使用16-通道matrix移液器添加25μl/孔iscript样品制备试剂(伯乐公司(biorad)#170-8899)，然后将板在室温下孵育2min。然后将20μl裂解物上清液除去并转移至新384孔板(科斯塔尔公司(costar)#3656)中，并且使用bravo液体处理器(安捷伦公司)，通过将5μl的裂解物添加至10μl h20中稀释1:3。将2μl的稀释的裂解物添加至8μl的预混液中，该预混液含有5μl itaq通用探针一步试剂盒(伯乐公司#172-5141)、0.25μl iscript reverse transcription supermix(伯乐公司#1708840)、0.25μl 40x hex-zen-标记的β-肌动蛋白taqman探针(idt#hs.pt.39a.22214847：探针5'hex-tca tcc atg/zen/gtg agc tgg cgg-3'iowa black fq，引物1：aca gag cct cgc ctt tg；引物2：cct tgc aca tgc cgg ag)、0.25μl 40x fam-zen-标价的hegln3 taqman探针(idt#hs.pt.58.189348：探针5'6-fam-ttt ggc ttc/zen/tgc cct ttc ttc agc-3'iowa black fq，引物1：cac ggt cag tct tca gtg ag；引物2：cgc aac cag ata tgc tat gac t)、2.25μl无rna酶水，使用16-通道matrix移液器添加在384孔板(abi#4309849)中。将板用pcr兼容性光学薄膜(microamp，abi#4360954)密封，并且离心(1500rpm，5min，+4℃)以收集孔底部的全部试剂，并且除去气泡。使用以下条件，将板内容物在7900ht热循环仪(abi)上扩增：步骤1：50℃持续10min，步骤2：95℃持续3min，步骤3(40x)：95℃持续15s，60℃持续1min。将rox(反应体积10μl)用作被动参考。通过手动调整ct阈值(β-肌动蛋白：0.046，hegln3：0.06)收集数据，并使用2^(-δδct)方法进行分析。因此，对于每个样品，计算出以下值：β-肌动蛋白为2^(-ct)a，egln3为2^(-ct)e，并且2^(-δct)计算为(2^(-ct)e/2^(-ct)a)。计算每个样品的平均2^(-δct)以及相应的标准偏差。以dmso处理的样品为参考，每个样品的2^(-δδct)计算如下：2^(-δδct)＝2^(-δct)样品/(2^(-δct)dmso)。在将每个样品的差异表达计算为2^(-δδct)后，将其表示为百分比(x100)，以获得以dmso对照的％表示的剂量反应曲线，并使用四参数拟合模型计算ic50。
[2089]
hif1α和hif2α的体外细胞缺氧反应元件(hre)报告基因测定(rga)
[2090]
分别在786-o-hre-luc和rcc4-hre-luc细胞中评估了化合物抑制hif2α和hif1α依赖性转录的能力。分别在786-o-ub6-luc和rcc4-ub6-luc细胞中评估了萤火虫荧光素酶活性或表达的推定的非选择性抑制。报告系如下产生：786-o(rrid：cvcl_1051)和rcc4(rrid：cvcl_0498)透明细胞肾癌细胞系分别从atcc和celeste simon(宾夕法尼亚大学(university of pennsylvania))获得。将任一细胞系均用慢病毒载体转导，其中pest不稳定版本的萤火虫荧光素酶的表达处于与最小缺氧反应元件(hre)序列的四个拷贝偶联的最小启动子(plenti 4xhre luc pest)的控制下，或来自管家ubc基因的启动子(plenti ub6luc pest)的控制下。简而言之，为了构建plenti 4xhre luc pest载体，合成了4xhre dna寡核苷酸，退火并克隆到用nhei和hindiii限制酶预先消化的pgl4.27质粒载体(普洛麦格公司(promega))中。两个dna寡核苷酸的序列如下：nhei 4xhre hindiii fwd：ctagcctgcacgtactgcacgtactgcacgtactgcacgtacgctcgcttcgaa；nhei 4xhre hindiii rev agctttcgaagcgagcgtacgtgcagtacgtgcagtacgtgcagt acgtgcagg。然后将4xhre luc pest片段从该质粒在两端带有限制性酶切位点nhei和xhoi地进行pcr，并且将其插入用nhei和xhoi限制性酶预先消化的plenti6/block it dest(赛默飞世尔科技公司(thermo fisher scientific))中。对于plenti ub6 luc pest载体的构建，使用在两端的ecorv和xhoi限制性酶，将luc pest序列从pgl4.27(普洛麦格公司)进行pcr，并且将其插入用同样的酶预先
消化的plenti6/ubc/v5/dest(赛默飞世尔科技公司)中。在10μg/ml聚凝胺的存在下，用以1.5ml optimem(赛默飞世尔科技公司#31985062)的混合物(含有3μg的所需质粒和9μl的viralpower packaging混合物(赛默飞世尔科技公司#k497500))、以及含有36μl lipofectamine 2000(赛默飞世尔科技公司#11668019)的1.5ml optimem转染hek293-ft(赛默飞世尔科技公司#r70007)细胞(100cm2培养皿中80％融合的)两天后收获的慢病毒感染786-o和rcc4细胞(6孔板的300’000/孔)。使用杀稻瘟菌素(gibco#a11139-03)以5μg/ml的终浓度选择成功感染的细胞。将所得的稳定细胞系命名为786-o plenti 4xhre luc pest(简称：786-o-hre-luc)、786-o plenti ub6 luc pest(简称：786-o-ub6-luc)、rcc4 plenti 4xhre luc pest(简称：rcc4-hre-luc)和rcc4 plenti ub6 luc pest(简称：rcc4-ub6-luc)。在37℃下在湿润的5％co2培养箱中，将全部4个细胞系维持在由dmem(gibco#11995-065)、2mm l-谷氨酰胺(生物概念公司#5-10k50-h)、10％胎牛血清(gibco#a31608-01)、1x青霉素/链霉素(生物概念公司#4-01f00-h)、1mm丙酮酸钠(生物概念公司#5-60f00-h)和5μg/ml杀稻瘟菌素(gibco#a11139-03)构成的生长培养基中。
[2091]
对于报告基因测定，将单个细胞系以2’500个细胞/20μl/孔接种到白壁的透明底部384孔板(葛莱娜公司#781098)中，并在37℃下孵育过夜，然后添加上述系列化合物稀释液。在37℃下孵育24小时后，在添加20μl brightglo(普洛麦格公司，cat#e2620)5分钟后，通过测量m1000多模平板读取器(tecan)上的发光强度(积分时间为100ms)，对报告的基因活性的化合物介导的调节定量。对于数据分析，从所有数据点中减去在含有培养基但是不含细胞的孔中测定的试验背景值。将剂量依赖性化合物作用表示为媒介物处理的对照(仅接受dmso的细胞产生的发光信号)的百分比，并使用四参数拟合模型计算ic50。在所有孔中，将dmso的浓度归一化为0.1％。
[2092]
绘示了体外hif2α活性
[2093]
[2094]
[2095]
[2096]
[2097]
[2098][2099]
n.d.＝未确定的
[2100]
体内hif2α786-o和skrc-01肿瘤生长模型
[2101]
动物和维持条件：
[2102]-小鼠：
[2103]
实验在雌性裸crl：nu(ncr)-foxn1nu-纯合小鼠(查尔斯河(charles river)，德国)中进行。在施用化合物时，动物为6-9周龄。在优化的卫生条件下，将动物圈养在makrolon iii型笼中(每笼最多5只动物)，可以自由获取食物和水。在实验开始之前，允许让它们适应至少6天。
[2104]-大鼠：
[2105]
实验在雌性裸rowett大鼠hsd：rh-fox1rnu(哈兰(harlan)，荷兰)中进行。在施用化合物时，动物为6-9周龄。在优化的卫生条件下，将动物圈养在makrolon iii型笼中(每笼最多2只动物)，可以自由获取食物和水。在实验开始之前，允许让它们适应至少6天。
[2106]
基于针对每种化合物确定的药代动力学谱，选择用于肿瘤生长模型的啮齿动物物种。
[2107]
细胞系和细胞培养物：使skrc-01细胞在500ml rpmi1640培养基+5ml l-谷氨酰胺+50ml fcs+5ml丙酮酸钠+5ml hepes中生长，并在37℃下在5％co2湿润的气氛下孵育。将细胞用胰蛋白酶-edta收获，重悬于培养基(含添加剂)中，并用系统计数。最后，将细胞离心并悬浮于冰冷的汉克平衡盐溶液(hanks'balanced salt solution)(hbss)中。细胞培养试剂购自生物概念公司(艾勒史威尔(allschwil)，瑞士)。
[2108]
体内肿瘤异种移植的建立：通过将150μl hbss(西格玛公司#h8264):基质胶(50％:50％)中的5x106细胞皮下注射到裸小鼠或大鼠的右胁建立skrc-01肿瘤。对于功效实验，当小鼠的平均肿瘤体积约为300mm3(肿瘤细胞注射后21天)和大鼠的平均肿瘤体积约为350mm3(肿瘤细胞注射后21天)时开始治疗。
[2109]
化合物配制和动物治疗：制备化合物a用于以在10％乙醇+30％peg400+60％水(含有0.5％mc+0.5％吐温80)中的均质悬浮液给药。每7天一次制备新鲜的悬浮液，并保存在4℃下。以10ml/kg的体积口服施用化合物a或媒介物。
[2110]
抗肿瘤活性评价：用卡尺测量肿瘤体积，并根据公式(长度x直径2xπ/6)确定体积。除了呈现肿瘤体积随着治疗进程发生的变化，抗肿瘤活性表示为t/c％(治疗的动物肿瘤体积变化的平均值/对照动物肿瘤体积变化的平均值)x 100。根据公式((治疗结束时的平均肿瘤体积-治疗开始时的平均肿瘤体积)/治疗开始时的平均肿瘤体积)x 100计算回归(％)。一周两到三次记录体重和肿瘤体积。
[2111]
统计分析：将原发性肿瘤生长和体重的绝对值用于各组之间的统计比较(对正态分布数据进行单因素方差分析，随后进行dunnett或tukey检验；对于非正态分布数据，进行等级anova；随后对相同组的大小进行dunnett检验；或对不同组的大小进行dunn检验)。显
著水平设定为p《0.05。使用sigmastat进行所有的统计计算。
[2112]
pd活性的评估：对于每个肿瘤样品，根据制造商的说明(克瓦斯公司(covaris)，沃本，马萨诸塞州，美国)，使用cryoprep将冷冻的组织粉碎来制备肿瘤粉末。将10mg肿瘤粉末的等分试样在干冰上转移至预冷的eppendorf管中，并在rneasy微量试剂盒(凯杰公司(qiagen)，#74104或#74106)中提供的700μl的rlt缓冲液中裂解。
[2113]
首先使用注射器和20g或21g针手动将裂解物匀浆，然后使用qiashredder和rneasy微量方案进行rna提取(分别为凯杰公司，试剂盒#79656和kit#74104或#74106)。使用nanodrop分光光度计(拜尔泰克公司(biotek)，nd2000)测量rna浓度。使用高容量cdna逆转录试剂盒(生命技术公司(life technologies)，试剂盒#4368813)对1微克rna进行逆转录，并且使用fast advanced预混液将14ng所得cdna用于单重taqman分析，每个反应的最终体积为10μl。所有反应在abi 7900ht循环器上在用相应的光学膜(生命技术公司，#4311971)密封的microamp光学384孔反应板(生命技术公司，#4309849)中进行，使用默认循环参数和rox作为被动参考。
[2114]
测试了目的基因的引物，人ccnd1(整合的dna技术，#hs.pt.56a.3857509，探针5'-/56-fam/tgccaggag/zen/cagatcgaagcc/3iabkfq/-3’，引物1：5
’‑
ccagagtgatcaagtgtgacc-3’；引物2：5
’‑
cgcaggcttgactccag-3’)和归一化基因人β-肌动蛋白的引物(abi，试剂盒#4326315e)的线性范围和等效的pcr效率，因此验证了2^(-δδct)计算方法的用途。
[2115]
通过手动调整ct阈值收集数据，并使用2^(-δδct)方法进行分析。
[2116][2117]
针对每组一式三份，计算平均值和标准差。
[2118]
计算每个样品的δct(δct)，作为目的基因(ccnd1)和参考基因(β-肌动蛋白)的ct之差。该差的标准差等于各个平均值ct的平方标准差之和的平方根。
[2119]
δδct(δct)是目的样品(例如：处理样品)的δct与参考样品(媒介物处理组)的δct之间的差值。与之前相同，该差的标准差等于各个δct的平方标准差之和的平方根。每个样品的差异表达以2^(-δδct)进行计算。
[2120]
将2^(-δδct)的误差计算为范围，其取决于δδct项的标准差(2^(x)是严格的正增长函数，但是非线性的)。
[2121]
对于每个目的基因，然后将结果归一化，平均媒介物值设置为1.0。
[2122]
实例121
[2123]
在786-o小鼠模型中证实了实施例31的抗肿瘤活性(图9a和9b)。将携带786-o皮下异种移植的雌性裸小鼠用实例31以30mg/kg p.o.qd或媒介物对照处理。治疗在肿瘤接种后
34天开始并持续21天。提供的值为平均值
±
sem(样品量为n＝6只小鼠/组)。第0天的初始肿瘤体积约为260mm3。
[2124]
材料与方法
[2125]
动物和维持条件：
[2126]-小鼠：
[2127]
实验在雌性裸crl:nu(ncr)-foxn1nu-纯合小鼠(查尔斯河(charles river)，德国)中进行。在施用化合物时，动物为6-9周龄。在优化的卫生条件下，将动物圈养在makrolon iii型笼中(每笼最多5只动物)，可以自由获取食物和水。在实验开始之前，允许让它们适应至少6天。
[2128]
细胞系和细胞培养物：使786-o和skrc-01细胞在500ml rpmi1640培养基+5ml l-谷氨酰胺+50ml fcs+5ml丙酮酸钠+5ml hepes中生长，并在37℃下在5％co2湿润的气氛下孵育。将细胞用胰蛋白酶-edta收获，重悬于培养基(含添加剂)中，并用系统计数。最后，将细胞离心并悬浮于冰冷的汉克平衡盐溶液(hanks'balanced salt solution)(hbss)中。细胞培养试剂购自生物概念公司(艾勒史威尔(allschwil)，瑞士)。
[2129]
体内肿瘤异种移植的建立：通过将150μl hbss(西格玛公司#h8264):基质胶(50％:50％)中的5x106细胞皮下注射到裸小鼠或大鼠的右胁建立786-o和skrc-01肿瘤。对于功效实验，当平均肿瘤体积约为300mm3(肿瘤细胞注射后34至45天)时开始治疗。
[2130]
患者源性ccrcc癌症肿瘤体内异种移植的建立：将来自手术切除的患者肿瘤样品直接皮下植入裸小鼠，无需进行任何体外操作。在小鼠体内连续传代至少三次后，视为建立模型。肿瘤异种移植(hkix1169、hkix1569、hkix2207、hkix2347、hkix2597、hkix2967、hkix3629、hkix3717、hkix5510、hkix5739、28797-hx、28799-hx、28800-hx、28805-hx、28806-hx、28807-hx、28809-hx、28814-hx、28817-hx、28836-hx、28837-hx和29158-hx)通过来自供体小鼠的基质胶包埋肿瘤片段的右胁s.c.植入，在裸小鼠中皮下生长。对于功效实验，总是在每组平均肿瘤体积达到200-400mm3(细胞接种后约20至85天)时开始治疗。
[2131]
化合物配制和动物治疗：制备(s)-1'-氯-8-(二氟甲氧基)-8',8'-二氟-6-(三氟甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉](化合物a)用于以10％乙醇+30％peg400+60％水(含有0.5％mc+0.5％吐温80)中的均质悬浮液给药。将依维莫司(rad001(化合物c))制备为水溶液。每7天一次制备新鲜的悬浮液或溶液，并保存在4℃下。以10ml/kg的体积口服施用(s)-1'-氯-8-(二氟甲氧基)-8',8'-二氟-6-(三氟甲基)-7',8'-二氢-3h,6'h-螺[咪唑并[1,2-a]吡啶-2,5'-异喹啉](化合物a)和依维莫司(rad001(化合物c))或媒介物。hkix2207和hkix2967的实验结果如图12-14所示。
[2132]
抗肿瘤活性评价：用卡尺测量肿瘤体积，并根据公式(长度x直径2xπ/6)确定体积。除了呈现肿瘤体积随着治疗进程发生的变化，抗肿瘤活性表示为t/c％(治疗的动物肿瘤体积变化的平均值/对照动物肿瘤体积变化的平均值)x 100。根据公式((治疗结束时的平均肿瘤体积-治疗开始时的平均肿瘤体积)/治疗开始时的平均肿瘤体积)x 100计算回归(％)。一周两到三次记录体重和肿瘤体积。
[2133]
统计分析：将原发性肿瘤生长的绝对值用于各组之间的统计比较(对正态分布数据进行单因素方差分析，随后进行dunnett或tukey检验；对于非正态分布数据，进行等级anova；随后对相同组的大小进行dunnett检验；或对不同组的大小进行dunn检验)。显著水
平设定为p《0.05。使用graphpad prism8进行所有的统计计算。