抗CD28和/或抗B7H3组合物的制作方法

背景技术：

1、针对肿瘤的天然免疫反应派遣免疫效应细胞(如自然杀伤(nk)细胞和t细胞)来攻击和破坏肿瘤细胞。肿瘤浸润淋巴细胞(til)通常表达多种免疫检查点受体(例如，pd-1、ctla-4)和共刺激受体(例如，icos、4-1bb、ox40、gitr和cd28)。随着时间的推移，由于抑制性免疫检查点的上调，til失去其细胞毒性能力。虽然检查点阻断已经证明相对于其它治疗方案增加了临床反应率，但是许多患者仍然不能实现对检查点阻断的反应。til上的共刺激受体的接合可以提供能够克服免疫检查点的负信号的正信号。激动性共刺激受体抗体的临床前和临床研究确实证明了共刺激受体的激动作用可以产生令人印象深刻的抗肿瘤反应，从而活化t细胞以攻击肿瘤细胞。

2、通过特异性破坏肿瘤细胞同时最小化外周毒性来增强抗肿瘤活性对于癌症治疗也是重要的。在这种情形中，至关重要的是，只有存在靶肿瘤细胞的t细胞才被提供共刺激信号。然而，对于til、外周t细胞和导致自身免疫毒性的自身抗原反应性t细胞，单一特异性全长抗体对共刺激受体的激动作用可能是非歧视性的。例如，乌瑞芦单抗(urelumab)(一种单特异性、非歧视性的泛4-1bb激动剂抗体)在早期临床试验中表现出显著的肝毒性(segal等人，2016)。因此，仍然需要用于治疗癌症的新型免疫反应增强组合物。

技术实现思路

1、本文提供了新的抗cd28组合物，包含抗cd28 x抗taa(例如，αcd28 x αb7h3)抗体，以及使用此类抗体治疗癌症的方法。主题抗cd28 x抗taa抗体能够激动性地结合t细胞上的cd28共刺激分子和肿瘤细胞上的肿瘤相关抗原(例如，b7h3)。因此，此类抗体选择性地增强肿瘤部位处的抗肿瘤活性，同时最小化外周毒性。本文提供的主题抗体特别适用于与其它抗癌疗法组合，包括例如检查点抑制剂。本文还提供了新的αcd28和αb7h3结合结构域。

2、在第一方面，本文提供一种异源二聚抗体，所述异源二聚抗体包含：a)第一单体，所述第一单体从n末端到c末端包含vh1-ch1-接头-vh1-ch1-铰链-ch2-ch3，其中vh1各自是第一可变重结构域，并且ch2-ch3是第一fc结构域；b)第二单体，所述第二单体从n末端到c末端包含vh2-ch1-铰链-ch2-ch3，其中vh2是第二可变重结构域，并且ch2-ch3是第二fc结构域；和c)共同轻链，所述共同轻链从n末端到c末端包含vl-cl，其中vl是可变轻结构域，并且cl是恒定轻结构域，其中所述共同轻链分别与所述第一单体中的每个vh1-ch1和所述第二单体中的vh2-ch1配对，其中所述vh1和所述vl一起形成第一抗原结合结构域(abd)，并且所述vh2和所述vl一起形成第二abd，其中所述第一abd和所述第二abd中的一个结合人cd28，并且所述第一abd和所述第二abd中的另一个结合人b7h3。

3、在一些实施方案中，所述第一abd结合人cd28，并且所述第二结合人b7h3。在某些实施方案中，所述第一abd结合人b7h3，并且所述第二结合人cd28。

4、在一些实施方案中，所述vh1结构域的氨基酸序列选自由以下组成的组：seq idno：518、seq id no：928、seq id no：497、seq id no：498、seq id no：499、seq id no：500、seq id no：501、seq id no：502、seq id no：503、seq id no：504、seq id no：505、seq idno：506、seq id no：507、seq id no：508、seq id no：509、seq id no：510、seq id no：511、seq id no：512、seq id no：513、seq id no：514、seq id no：515、seq id no：516、seq idno：517、seq id no：519、seq id no：520、seq id no：521、seq id no：522、seq id no：523、seq id no：524、seq id no：525、seq id no：526、seq id no：527、seq id no：528、seq idno：529、seq id no：530、seq id no：531、seq id no：532、seq id no：533、seq id no：534、seq id no：535、seq id no：536、seq id no：537、seq id no：538、seq id no：539、seq idno：540、seq id no：541、seq id no：542、seq id no：543、seq id no：544、seq id no：545、seq id no：546、seq id no：547、seq id no：548、seq id no：549、seq id no：550、seq idno：551、seq id no：552、seq id no：553、seq id no：554、seq id no：555、seq id no：556、seq id no：557、seq id no：558、seq id no：559、seq id no：560、seq id no：561、seq idno：562、seq id no：563、seq id no：564、seq id no：565、seq id no：566、seq id no：567、seq id no：568、seq id no：569、seq id no：570、seq id no：571、seq id no：572、seq idno：573、seq id no：574、seq id no：575、seq id no：576、seq id no：577、seq id no：578、seq id no：579、seq id no：580、seq id no：581、seq id no：582、seq id no：583和seq idno：584；并且其中所述vl结构域的氨基酸序列是seq id no：874。

5、在一些实施方案中，所述vh2结构域的氨基酸序列选自由以下组成的组：seq idno：585、seq id no：870、seq id no：586、seq id no：587、seq id no：588、seq id no：589、seq id no：590、seq id no：591、seq id no：592、seq id no：593、seq id no：594、seq idno：595、seq id no：596、seq id no：597、seq id no：598、seq id no：599、seq id no：600、seq id no：601、seq id no：602、seq id no：603、seq id no：604、seq id no：605、seq idno：606、seq id no：607、seq id no：608、seq id no：609、seq id no：610、seq id no：611、seq id no：612、seq id no：613、seq id no：614、seq id no：615、seq id no：616、seq idno：617、seq id no：618、seq id no：619、seq id no：620、seq id no：621、seq id no：622、seq id no：623、seq id no：624、seq id no：1198、seq id no：1199、seq id no：625、seqid no：626、seq id no：627、seq id no：628、seq id no：629、seq id no：630、seq id no：631、seq id no：632、seq id no：633、seq id no：634、seq id no：635、seq id no：636、seqid no：637、seq id no：638、seq id no：639、seq id no：640、seq id no：641、seq id no：642、seq id no：643、seq id no：644、seq id no：645、seq id no：646、seq id no：647、seqid no：648、seq id no：649、seq id no：650和seq id no：651。

6、在某些实施方案中，所述第一fc结构域和所述第二fc结构域各自是变体fc结构域。

7、在异源二聚抗体的一些实施方案中，所述第一fc结构域和所述第二fc结构域包含选自以下异源二聚化变体的一组异源二聚化偏斜变体：s364k/e357q：l368d/k370s；s364k：l368d/k370s；s364k：l368e/k370s；d401k：t411e/k360e/q362e；和t366w：t366s/l368a/y407v，其中编号是根据eu编号进行的。在示例性实施方案中，所述第一fc结构域和所述第二fc结构域包含异源二聚化偏斜变体s364k/e357q：l368d/k370s。

8、在一些实施方案中，所述第一fc结构域和所述第二fc结构域各自包含一种或多种消融变体。在一些实施方案中，所述一种或多种消融变体是e233p/l234v/l235a/g236del/s267k，其中编号是根据eu编号进行的。

9、在一些实施方案中，所述第一单体或所述第二单体中的一者进一步包含pi变体。在一些实施方案中，所述第二单体的ch1-铰链-ch2-ch3包含pi变体n208d/q295e/n384d/q418e/n421d，其中编号是根据eu编号进行的。

10、在一些实施方案中，所述第二单体的ch1-铰链-ch2-ch3包含氨基酸变体l368d/k370s/n208d/q295e/n384d/q418e/n421d/e233p/l234v/l235a/g236del/s267k，并且所述第一fc结构域包含氨基酸变体s364k/e357q/e233p/l234v/l235a/g236del/s267k，其中编号是根据eu编号进行的。

11、在示例性实施方案中，所述第一变体fc结构域和所述第二变体fc结构域各自包含氨基酸变体428l/434s。

12、在一些实施方案中，所述第二单体包含seq id no：1019的氨基酸序列，所述第一单体包含seq id no：1020的氨基酸序列，并且所述轻链具有seq id no：1021的氨基酸序列。

13、另一方面，本文提供一种异源二聚抗体，所述异源二聚抗体包含：a)第一单体，所述第一单体从n末端到c末端包含vh1-ch1-铰链-ch2-ch3，其中vh1是第一可变重结构域，并且ch2-ch3是第一fc结构域；b)第二单体，所述第二单体从n末端到c末端包含vh2-ch1-铰链-ch2-ch3，其中vh2是第二可变重结构域，并且ch2-ch3是第二fc结构域；和c)共同轻链，所述共同轻链从n末端到c末端包含vl-cl，其中vl是可变轻结构域，并且cl是恒定轻结构域，其中所述第一vh结构域和所述vl结构域一起形成第一abd，并且所述第二vh结构域和所述vl结构域一起形成第二abd，并且其中所述第一abd和所述第二abd中的一个结合人cd28，并且所述第一abd和所述第二abd中的另一个结合人b7h3。

14、在某些实施方案中，所述vh1结构域的氨基酸序列选自由以下组成的组：seq idno：518、seq id no：928、seq id no：497、seq id no：498、seq id no：499、seq id no：500、seq id no：501、seq id no：502、seq id no：503、seq id no：504、seq id no：505、seq idno：506、seq id no：507、seq id no：508、seq id no：509、seq id no：510、seq id no：511、seq id no：512、seq id no：513、seq id no：514、seq id no：515、seq id no：516、seq idno：517、seq id no：519、seq id no：520、seq id no：521、seq id no：522、seq id no：523、seq id no：524、seq id no：525、seq id no：526、seq id no：527、seq id no：528、seq idno：529、seq id no：530、seq id no：531、seq id no：532、seq id no：533、seq id no：534、seq id no：535、seq id no：536、seq id no：537、seq id no：538、seq id no：539、seq idno：540、seq id no：541、seq id no：542、seq id no：543、seq id no：544、seq id no：545、seq id no：546、seq id no：547、seq id no：548、seq id no：549、seq id no：550、seq idno：551、seq id no：552、seq id no：553、seq id no：554、seq id no：555、seq id no：556、seq id no：557、seq id no：558、seq id no：559、seq id no：560、seq id no：561、seq idno：562、seq id no：563、seq id no：564、seq id no：565、seq id no：566、seq id no：567、seq id no：568、seq id no：569、seq id no：570、seq id no：571、seq id no：572、seq idno：573、seq id no：574、seq id no：575、seq id no：576、seq id no：577、seq id no：578、seq id no：579、seq id no：580、seq id no：581、seq id no：582、seq id no：583和seq idno：584；并且其中所述vl结构域的氨基酸序列是seq id no：874。

15、在一些实施方案中，所述vh2结构域的氨基酸序列选自由以下组成的组：seq idno：585、seq id no：870、seq id no：586、seq id no：587、seq id no：588、seq id no：589、seq id no：590、seq id no：591、seq id no：592、seq id no：593、seq id no：594、seq idno：595、seq id no：596、seq id no：597、seq id no：598、seq id no：599、seq id no：600、seq id no：601、seq id no：602、seq id no：603、seq id no：604、seq id no：605、seq idno：606、seq id no：607、seq id no：608、seq id no：609、seq id no：610、seq id no：611、seq id no：612、seq id no：613、seq id no：614、seq id no：615、seq id no：616、seq idno：617、seq id no：618、seq id no：619、seq id no：620、seq id no：621、seq id no：622、seq id no：623、seq id no：624、seq id no：1198、seq id no：1199、seq id no：625、seqid no：626、seq id no：627、seq id no：628、seq id no：629、seq id no：630、seq id no：631、seq id no：632、seq id no：633、seq id no：634、seq id no：635、seq id no：636、seqid no：637、seq id no：638、seq id no：639、seq id no：640、seq id no：641、seq id no：642、seq id no：643、seq id no：644、seq id no：645、seq id no：646、seq id no：647、seqid no：648、seq id no：649、seq id no：650和seq id no：651。

16、在某些实施方案中，所述第一fc结构域和所述第二fc结构域各自是变体fc结构域。

17、在一些实施方案中，所述第一fc结构域和所述第二fc结构域包含选自以下异源二聚化变体的一组异源二聚化偏斜变体：s364k/e357q：l368d/k370s；s364k：l368d/k370s；s364k：l368e/k370s；d401k：t411e/k360e/q362e；和t366w：t366s/l368a/y407v，其中编号是根据eu编号进行的。在某些实施方案中，所述第一fc结构域和所述第二fc结构域包含异源二聚化偏斜变体s364k/e357q：l368d/k370s。

18、在一些实施方案中，所述第一fc结构域和所述第二fc结构域各自包含一种或多种消融变体。在某些实施方案中，所述一种或多种消融变体是e233p/l234v/l235a/g236del/s267k，其中编号是根据eu编号进行的。

19、在某些实施方案中，所述第一单体或所述第二单体中的一者进一步包含pi变体。在示例性实施方案中，所述第一单体的ch1-铰链-ch2-ch3包含pi变体n208d/q295e/n384d/q418e/n421d，其中编号是根据eu编号进行的。

20、在一些实施方案中，所述第一单体的ch1-铰链-ch2-ch3包含氨基酸变体l368d/k370s/n208d/q295e/n384d/q418e/n421d/e233p/l234v/l235a/g236del/s267k，并且所述第二fc结构域包含氨基酸变体s364k/e357q/e233p/l234v/l235a/g236del/s267k，其中编号是根据eu编号进行的。

21、在一些实施方案中，所述第一变体fc结构域和所述第二变体fc结构域各自包含氨基酸变体428l/434s。

22、在另一方面，本文提供一种异源二聚抗体，所述异源二聚抗体包含：a)第一单体，所述第一单体从n末端到c末端包含vh1-ch1-第一结构域接头-scfv-第二结构域接头-ch2-ch3，其中vh1是第一可变重结构域，scfv是抗cd28scfv，并且ch2-ch3是第一fc结构域；b)第二单体，所述第二单体从n末端到c末端包含vh1-ch1-铰链-ch2-ch3，其中ch2-ch3是第二fc结构域；和c)轻链，所述轻链从n末端到c末端包含vl1-cl，其中vl1是可变轻结构域，并且cl是恒定轻结构域，其中所述vh1结构域和所述第一vl1结构域中的每一个一起形成第一抗原结合结构域(abd)，并且scfv包含第二vh结构域(vh2)、scfv接头和第二vl结构域(vl2)，并且所述vh2和所述vl2形成第二abd，其中所述第一abd和所述第二abd中的一个结合人cd28，并且所述第一abd和所述第二abd中的另一个结合肿瘤靶抗原(tta)。

23、在某些实施方案中，所述第一abd结合人cd28，并且所述第二abd结合tta。在一些实施方案中，所述第一abd结合tta，并且所述第二abd结合人cd28。

24、在一些实施方案中，所述scfv从n末端到c末端包含vl2-scfv接头-vh2。在一些实施方案中，所述scfv从n末端到c末端包含vh2-scfv接头-vl2。

25、在一些实施方案中，所述vh2的氨基酸序列选自由以下组成的组：seq id no：870、seq id no：585、seq id no：586、seq id no：587、seq id no：588、seq id no：589、seq idno：590、seq id no：591、seq id no：592、seq id no：593、seq id no：594、seq id no：595、seq id no：596、seq id no：597、seq id no：598、seq id no：599、seq id no：600、seq idno：601、seq id no：602、seq id no：603、seq id no：604、seq id no：605、seq id no：606、seq id no：607、seq id no：608、seq id no：609、seq id no：610、seq id no：611、seq idno：612、seq id no：613、seq id no：614、seq id no：615、seq id no：616、seq id no：617、seq id no：618、seq id no：619、seq id no：620、seq id no：621、seq id no：622、seq idno：623、seq id no：624、seq id no：1198、seq id no：1199、seq id no：625、seq id no：626、seq id no：627、seq id no：628、seq id no：629、seq id no：630、seq id no：631、seqid no：632、seq id no：633、seq id no：634、seq id no：635、seq id no：636、seq id no：637、seq id no：638、seq id no：639、seq id no：640、seq id no：641、seq id no：642、seqid no：643、seq id no：644、seq id no：645、seq id no：646、seq id no：647、seq id no：648、seq id no：649、seq id no：650和seq id no：651；并且其中所述vl2的氨基酸序列选自由以下组成的组：seq id no：874、seq id no：652、seq id no：653、seq id no：654、seqid no：655、seq id no：656、seq id no：657、seq id no：658、seq id no：659、seq id no：660、seq id no：661、seq id no：662、seq id no：663、seq id no：664、seq id no：665、seqid no：666、seq id no：667、seq id no：668、seq id no：669、seq id no：670、seq id no：671、seq id no：672、seq id no：673、seq id no：674、seq id no：675、seq id no：676、seqid no：677、seq id no：678、seq id no：679、seq id no：680、seq id no：681、seq id no：682、seq id no：683、seq id no：684、seq id no：685、seq id no：686、seq id no：687、seqid no：688、seq id no：689、seq id no：690、seq id no：691、seq id no：692、seq id no：693、seq id no：694、seq id no：695、seq id no：696、seq id no：697、seq id no：698、seqid no：699、seq id no：700、seq id no：701、seq id no：702、seq id no：703、seq id no：704、seq id no：705、seq id no：706、seq id no：707、seq id no：708、seq id no：709、seqid no：710、seq id no：711、seq id no：712、seq id no：713、seq id no：714、seq id no：715、seq id no：716、seq id no：717、seq id no：718、seq id no：719、seq id no：720、seqid no：721、seq id no：722、seq id no：723、seq id no：724、seq id no：725、seq id no：726、seq id no：727、seq id no：728、seq id no：729、seq id no：730、seq id no：731、seqid no：732、seq id no：733、seq id no：734、seq id no：735、seq id no：736、seq id no：737、seq id no：738、seq id no：739、seq id no：740、seq id no：741、seq id no：742、seqid no：743、seq id no：744、seq id no：745、seq id no：746、seq id no：747、seq id no：748、seq id no：749、seq id no：750、seq id no：751、seq id no：752、seq id no：753、seqid no：754、seq id no：755、seq id no：1200和seq id no：756。

26、在某些实施方案中，tta是人b7h3。

27、在一些实施方案中，所述第一fc结构域和所述第二fc结构域各自是变体fc结构域。

28、在示例性实施方案中，所述第一fc结构域和所述第二fc结构域包含选自以下异源二聚化变体的一组异源二聚化偏斜变体：s364k/e357q：l368d/k370s；s364k：l368d/k370s；s364k：l368e/k370s；d401k：t411e/k360e/q362e；和t366w：t366s/l368a/y407v，其中编号是根据eu编号进行的。在一些实施方案中，所述第一fc结构域和所述第二fc结构域包含异源二聚化偏斜变体s364k/e357q：l368d/k370s。

29、在一些实施方案中，所述第一fc结构域和所述第二fc结构域各自包含一种或多种消融变体。在某些实施方案中，所述一种或多种消融变体是e233p/l234v/l235a/g236del/s267k，其中编号是根据eu编号进行的。

30、在一些实施方案中，所述第一单体或所述第二单体中的一者进一步包含pi变体。在示例性实施方案中，所述第二单体的ch1-铰链-ch2-ch3包含pi变体n208d/q295e/n384d/q418e/n421d，其中编号是根据eu编号进行的。

31、在示例性实施方案中，所述第二单体的ch1-铰链-ch2-ch3包含氨基酸变体l368d/k370s/n208d/q295e/n384d/q418e/n421d/e233p/l234v/l235a/g236del/s267k，并且所述第一fc结构域包含氨基酸变体s364k/e357q/e233p/l234v/l235a/g236del/s267k，其中编号是根据eu编号进行的。

32、在某些实施方案中，所述第一变体fc结构域和所述第二变体fc结构域各自包含氨基酸变体428l/434s。

33、在一方面，本文提供一种异源二聚抗体，所述异源二聚抗体包含：a)第一单体，所述第一单体包含：i)scfv，所述scfv包含第一可变重结构域、scfv接头和第一可变轻结构域；和ii)第一fc结构域，其中使用结构域接头将scfv共价附接至第一fc结构域的n末端；b)第二单体，所述第二单体从n末端到c末端包含vh1-ch1-铰链-ch2-ch3，其中vh是第一可变重结构域，并且ch2-ch3是第二fc结构域；和c)轻链，所述轻链从n末端到c末端包含vl1-cl，其中vl1是可变轻结构域，并且cl是恒定轻结构域，其中所述vh1和所述vl1一起形成第一abd，并且其中所述scfv包含第二vh结构域(vh2)、scfv接头和第二vl结构域(vl2)，其中所述vh2和所述vl2一起形成第二abd，并且其中所述第一abd和所述第二abd中的一个结合cd28，并且所述第一abd和所述第二abd中的另一个结合tta。

34、在一些实施方案中，所述scfv从n末端到c末端包含vl2-scfv接头-vh2。在某些实施方案中，所述scfv从n末端到c末端包含vh2-scfv接头-vl2。

35、在某些实施方案中，所述第二abd结合人cd28，其中所述vh2的氨基酸序列选自由以下组成的组：seq id no：870、seq id no：585、seq id no：586、seq id no：587、seq idno：588、seq id no：589、seq id no：590、seq id no：591、seq id no：592、seq id no：593、seq id no：594、seq id no：595、seq id no：596、seq id no：597、seq id no：598、seq idno：599、seq id no：600、seq id no：601、seq id no：602、seq id no：603、seq id no：604、seq id no：605、seq id no：606、seq id no：607、seq id no：608、seq id no：609、seq idno：610、seq id no：611、seq id no：612、seq id no：613、seq id no：614、seq id no：615、seq id no：616、seq id no：617、seq id no：618、seq id no：619、seq id no：620、seq idno：621、seq id no：622、seq id no：623、seq id no：624、seq id no：1198、seq id no：1199、seq id no：625、seq id no：626、seq id no：627、seq id no：628、seq id no：629、seq id no：630、seq id no：631、seq id no：632、seq id no：633、seq id no：634、seq idno：635、seq id no：636、seq id no：637、seq id no：638、seq id no：639、seq id no：640、seq id no：641、seq id no：642、seq id no：643、seq id no：644、seq id no：645、seq idno：646、seq id no：647、seq id no：648、seq id no：649、seq id no：650和seq id no：651；并且其中所述vl2的氨基酸序列选自由以下组成的组：seq id no：874、seq id no：652、seq id no：653、seq id no：654、seq id no：655、seq id no：656、seq id no：657、seqid no：658、seq id no：659、seq id no：660、seq id no：661、seq id no：662、seq id no：663、seq id no：664、seq id no：665、seq id no：666、seq id no：667、seq id no：668、seqid no：669、seq id no：670、seq id no：671、seq id no：672、seq id no：673、seq id no：674、seq id no：675、seq id no：676、seq id no：677、seq id no：678、seq id no：679、seqid no：680、seq id no：681、seq id no：682、seq id no：683、seq id no：684、seq id no：685、seq id no：686、seq id no：687、seq id no：688、seq id no：689、seq id no：690、seqid no：691、seq id no：692、seq id no：693、seq id no：694、seq id no：695、seq id no：696、seq id no：697、seq id no：698、seq id no：699、seq id no：700、seq id no：701、seqid no：702、seq id no：703、seq id no：704、seq id no：705、seq id no：706、seq id no：707、seq id no：708、seq id no：709、seq id no：710、seq id no：711、seq id no：712、seqid no：713、seq id no：714、seq id no：715、seq id no：716、seq id no：717、seq id no：718、seq id no：719、seq id no：720、seq id no：721、seq id no：722、seq id no：723、seqid no：724、seq id no：725、seq id no：726、seq id no：727、seq id no：728、seq id no：729、seq id no：730、seq id no：731、seq id no：732、seq id no：733、seq id no：734、seqid no：735、seq id no：736、seq id no：737、seq id no：738、seq id no：739、seq id no：740、seq id no：741、seq id no：742、seq id no：743、seq id no：744、seq id no：745、seqid no：746、seq id no：747、seq id no：748、seq id no：749、seq id no：750、seq id no：751、seq id no：752、seq id no：753、seq id no：754、seq id no：755、seq id no：1200和seq id no：756。

36、在一些实施方案中，所述第一fc结构域和所述第二fc结构域各自是变体fc结构域。

37、在某些实施方案中，所述第一fc结构域和所述第二fc结构域包含选自以下异源二聚化变体的一组异源二聚化偏斜变体：s364k/e357q：l368d/k370s；s364k：l368d/k370s；s364k：l368e/k370s；d401k：t411e/k360e/q362e；和t366w：t366s/l368a/y407v，其中编号是根据eu编号进行的。在示例性实施方案中，所述第一fc结构域和所述第二fc结构域包含异源二聚化偏斜变体s364k/e357q：l368d/k370s。

38、在某些实施方案中，所述第一fc结构域和所述第二fc结构域各自包含一种或多种消融变体。在一些实施方案中，所述一种或多种消融变体是e233p/l234v/l235a/g236del/s267k，其中编号是根据eu编号进行的。

39、在某些实施方案中，所述第一单体或所述第二单体中的一者进一步包含pi变体。在示例性实施方案中，所述第二单体的ch1-铰链-ch2-ch3包含pi变体n208d/q295e/n384d/q418e/n421d，其中编号是根据eu编号进行的。

40、在示例性实施方案中，所述第二单体的ch1-铰链-ch2-ch3包含氨基酸变体l368d/k370s/n208d/q295e/n384d/q418e/n421d/e233p/l234v/l235a/g236del/s267k，并且所述第一fc结构域包含氨基酸变体s364k/e357q/e233p/l234v/l235a/g236del/s267k，其中编号是根据eu编号进行的。

41、在一些实施方案中，所述第一变体fc结构域和所述第二变体fc结构域各自包含氨基酸变体428l/434s。

42、在另一方面，本文提供一种异源二聚抗体，所述异源二聚抗体包含：a)第一单体，所述第一单体从n末端到c末端包含vh1-ch1-铰链-ch2-ch3-结构域接头-scfv，其中vh1是第一可变重结构域，scfv是抗cd28 scfv，并且ch2-ch3是第一fc结构域；b)第二单体，所述第二单体从n末端到c末端包含vh1-ch1-铰链-ch2-ch3，其中ch2-ch3是第二fc结构域；和c)轻链，所述轻链从n末端到c末端包含vl1-cl，其中vl1是可变轻结构域，并且cl是恒定轻结构域，其中所述vh1结构域和所述第一vl1结构域中的每一个一起形成第一抗原结合结构域(abd)，并且scfv包含第二vh结构域(vh2)、scfv接头和第二vl结构域(vl2)，并且所述vh2和所述vl2一起形成第二abd，其中所述第一abd和所述第二abd中的一个结合人cd28，并且所述第一abd和所述第二abd中的另一个结合肿瘤靶抗原(tta)。

43、在某些实施方案中，所述第一abd结合人cd28，并且所述第二abd结合tta。在一些实施方案中，所述第一abd结合tta，并且所述第二abd结合人cd28。

44、在某些实施方案中，所述scfv从n末端到c末端包含vl2-scfv接头-vh2。在一些实施方案中，所述scfv从n末端到c末端包含vh2-scfv接头-vl2。

45、在某些实施方案中，所述vh2的氨基酸序列选自由以下组成的组：seq id no：870、seq id no：585、seq id no：586、seq id no：587、seq id no：588、seq id no：589、seq idno：590、seq id no：591、seq id no：592、seq id no：593、seq id no：594、seq id no：595、seq id no：596、seq id no：597、seq id no：598、seq id no：599、seq id no：600、seq idno：601、seq id no：602、seq id no：603、seq id no：604、seq id no：605、seq id no：606、seq id no：607、seq id no：608、seq id no：609、seq id no：610、seq id no：611、seq idno：612、seq id no：613、seq id no：614、seq id no：615、seq id no：616、seq id no：617、seq id no：618、seq id no：619、seq id no：620、seq id no：621、seq id no：622、seq idno：623、seq id no：624、seq id no：1198、seq id no：1199、seq id no：625、seq id no：626、seq id no：627、seq id no：628、seq id no：629、seq id no：630、seq id no：631、seqid no：632、seq id no：633、seq id no：634、seq id no：635、seq id no：636、seq id no：637、seq id no：638、seq id no：639、seq id no：640、seq id no：641、seq id no：642、seqid no：643、seq id no：644、seq id no：645、seq id no：646、seq id no：647、seq id no：648、seq id no：649、seq id no：650和seq id no：651；并且其中所述vl2的氨基酸序列选自由以下组成的组：seq id no：874、seq id no：652、seq id no：653、seq id no：654、seqid no：655、seq id no：656、seq id no：657、seq id no：658、seq id no：659、seq id no：660、seq id no：661、seq id no：662、seq id no：663、seq id no：664、seq id no：665、seqid no：666、seq id no：667、seq id no：668、seq id no：669、seq id no：670、seq id no：671、seq id no：672、seq id n0：673、seq id no：674、seq id no：675、seq id no：676、seqid no：677、seq id no：678、seq id no：679、seq id no：680、seq id no：681、seq id no：682、seq id no：683、seq id no：684、seq id no：685、seq id no：686、seq id no：687、seqid no：688、seq id no：689、seq id no：690、seq id no：691、seq id no：692、seq id no：693、seq id no：694、seq id no：695、seq id no：696、seq id no：697、seq id no：698、seqid no：699、seq id no：700、seq id no：701、seq id no：702、seq id no：703、seq id no：704、seq id no：705、seq id no：706、seq id no：707、seq id no：708、seq id no：709、seqid no：710、seq id no：711、seq id no：712、seq id no：713、seq id no：714、seq id no：715、seq id no：716、seq id no：717、seq id no：718、seq id no：719、seq id no：720、seqid no：721、seq id no：722、seq id no：723、seq id no：724、seq id no：725、seq id no：726、seq id no：727、seq id no：728、seq id no：729、seq id no：730、seq id no：731、seqid no：732、seq id no：733、seq id no：734、seq id no：735、seq id no：736、seq id no：737、seq id no：738、seq id no：739、seq id no：740、seq id no：741、seq id no：742、seqid no：743、seq id no：744、seq id no：745、seq id no：746、seq id no：747、seq id no：748、seq id no：749、seq id no：750、seq id no：751、seq id no：752、seq id no：753、seqid no：754、seq id no：755、seq id no：1200和seq id no：756。

46、在一些实施方案中，所述tta是人b7h3。

47、在一些实施方案中，所述第一fc结构域和所述第二fc结构域各自是变体fc结构域。在一些实施方案中，所述第一fc结构域和所述第二fc结构域包含选自以下异源二聚化变体的一组异源二聚化偏斜变体：s364k/e357q：l368d/k370s；s364k：l368d/k370s；s364k：l368e/k370s；d401k：t411e/k360e/q362e；和t366w：t366s/l368a/y407v，其中编号是根据eu编号进行的。在某些实施方案中，所述第一fc结构域和所述第二fc结构域包含异源二聚化偏斜变体s364k/e357q：l368d/k370s。

48、在一些实施方案中，所述第一fc结构域和所述第二fc结构域各自包含一种或多种消融变体。在某些实施方案中，所述一种或多种消融变体是e233p/l234v/l235a/g236del/s267k，其中编号是根据eu编号进行的。

49、在一些实施方案中，所述第一单体或所述第二单体中的一者进一步包含pi变体。在示例性实施方案中，所述第二单体的ch1-铰链-ch2-ch3包含pi变体n208d/q295e/n384d/q418e/n421d，其中编号是根据eu编号进行的。

50、在一些实施方案中，所述第二单体的ch1-铰链-ch2-ch3包含氨基酸变体l368d/k370s/n208d/q295e/n384d/q418e/n421d/e233p/l234v/l235a/g236del/s267k，并且所述第一fc结构域包含氨基酸变体s364k/e357q/e233p/l234v/l235a/g236del/s267k，其中编号是根据eu编号进行的。

51、在示例性实施方案中，所述第一变体fc结构域和所述第二变体fc结构域各自包含氨基酸变体428l/434s。

52、在另一方面，本文提供一种核酸组合物，所述核酸组合物分别包含：a)第一核酸，所述第一核酸编码本文所述的异源二聚抗体中的任一种的第一单体；b)第二核酸，所述第二核酸编码异源二聚抗体的第二单体；和c)第三核酸，所述第三核酸编码异源二聚抗体的轻链。本文还提供包含含有一种或多种第一核酸、第二核酸和第三核酸的表达载体的表达载体组合物；包含此类表达载体组合物的宿主细胞；以及制备本文所述的异源二聚抗体的方法。

53、在另一方面，本文提供一种治疗有需要的患者的癌症的方法，所述方法包括向所述患者施用本文提供的异源二聚抗体。

54、在另一方面，本文提供一种治疗有需要的患者的癌症的方法，所述方法包括向所述患者施用：a)本文所述的异源二聚抗体，其中tta是人b7h3；和b)结合cd3和b7h3的双特异性抗体。

55、在另一方面，本文提供一种治疗有需要的患者的癌症的方法，所述方法包括向所述患者施用：a)本文所述的异源二聚抗体，其中tta是人b7h3；和b)选自由抗pd-1抗体和抗pd-l1抗体组成的组的检查点抑制剂。

56、在另一方面，本文提供一种组合物，所述组合物包含抗cd28 abd，所述抗cd28 abd包含：a)可变重结构域，所述可变重结构域具有选自由以下组成的组的氨基酸序列：seq idno：870、seq id no：585、seq id no：586、seq id no：587、seq id no：588、seq id no：589、seq id no：590、seq id no：591、seq id no：592、seq id no：593、seq id no：594、seq idno：595、seq id no：596、seq id no：597、seq id no：598、seq id no：599、seq id no：600、seq id no：601、seq id no：602、seq id no：603、seq id no：604、seq id no：605、seq idno：606、seq id no：607、seq id no：608、seq id no：609、seq id no：610、seq id no：611、seq id no：612、seq id no：613、seq id no：614、seq id no：615、seq id no：616、seq idno：617、seq id no：618、seq id no：619、seq id no：620、seq id no：621、seq id no：622、seq id no：623、seq id no：624、seq id no：1198、seq id no：1199、seq id no：625、seqid no：626、seq id no：627、seq id no：628、seq id no：629、seq id no：630、seq id no：631、seq id no：632、seq id no：633、seq id no：634、seq id no：635、seq id no：636、seqid no：637、seq id no：638、seq id no：639、seq id no：640、seq id no：641、seq id no：642、seq id no：643、seq id no：644、seq id no：645、seq id no：646、seq id no：647、seqid no：648、seq id no：649、seq id no：650、seq id no：651、seq id no：652、seq id no：653、seq id no：654、seq id no：655、seq id no：656、seq id no：657、seq id no：658、seqid no：659、seq id no：670、seq id no：671和seq id no：672；和b)可变轻结构域，所述可变轻结构域具有选自由以下组成的组的氨基酸序列：seq id no：874、seq id no：652、seqid no：653、seq id no：654、seq id no：655、seq id no：656、seq id no：657、seq id no：658、seq id no：659、seq id no：660、seq id no：661、seq id no：662、seq id no：663、seqid no：664、seq id no：665、seq id no：666、seq id no：667、seq id no：668、seq id no：669、seq id no：670、seq id no：671、seq id no：672、seq id no：673、seq id no：674、seqid no：675、seq id no：676、seq id no：677、seq id no：678、seq id no：679、seq id no：680、seq id no：681、seq id no：682、seq id no：683、seq id no：684、seq id no：685、seqid no：686、seq id no：687、seq id no：688、seq id no：689、seq id no：690、seq id no：691、seq id no：692、seq id no：693、seq id no：694、seq id no：695、seq id no：696、seqid no：697、seq id no：698、seq id no：699、seq id no：700、seq id no：701、seq id no：702、seq id no：703、seq id no：704、seq id no：705、seq id no：706、seq id no：707、seqid no：708、seq id no：709、seq id no：710、seq id no：711、seq id no：712、seq id no：713、seq id no：714、seq id no：715、seq id no：716、seq id no：717、seq id no：718、seqid no：719、seq id no：720、seq id no：721、seq id no：722、seq id no：723、seq id no：724、seq id no：725、seq id no：726、seq id no：727、seq id no：728、seq id no：729、seqid no：730、seq id no：731、seq id no：732、seq id no：733、seq id no：734、seq id no：735、seq id no：736、seq id no：737、seq id no：738、seq id no：739、seq id no：740、seqid no：741、seq id no：742、seq id no：743、seq id no：744、seq id no：745、seq id no：746、seq id no：747、seq id no：748、seq id no：749、seq id no：750、seq id no：751、seqid no：752、seq id no：753、seq id no：754、seq id no：755、seq id no：1200和seq idno：756。在一些实施方案中，所述组合物是抗体，所述抗体包含：a)包含vh-ch1-铰链-ch2-ch3的重链；和b)包含vl-cl的轻链。

57、在另一方面，本文提供一种组合物，所述组合物包含抗b7h3 abd，所述b7h3 abd包含：a)可变重结构域，所述可变重结构域具有选自由以下组成的组的氨基酸序列：seq idno：518、seq id no：928、seq id no：497、seq id no：498、seq id no：499、seq id no：500、seq id no：501、seq id no：502、seq id no：503、seq id no：504、seq id no：505、seq idno：506、seq id no：507、seq id no：508、seq id no：509、seq id no：510、seq id no：511、seq id no：512、seq id no：513、seq id no：514、seq id no：515、seq id no：516、seq idno：517、seq id no：519、seq id no：520、seq id no：521、seq id no：522、seq id no：523、seq id no：524、seq id no：525、seq id no：526、seq id no：527、seq id no：528、seq idno：529、seq id no：530、seq id no：531、seq id no：532、seq id no：533、seq id no：534、seq id no：535、seq id no：536、seq id no：537、seq id no：538、seq id no：539、seq idno：540、seq id no：541、seq id no：542、seq id no：543、seq id no：544、seq id no：545、seq id no：546、seq id no：547、seq id no：548、seq id no：549、seq id no：550、seq idno：551、seq id no：552、seq id no：553、seq id no：554、seq id no：555、seq id no：556、seq id no：557、seq id no：558、seq id no：559、seq id no：560、seq id no：561、seq idno：562、seq id no：563、seq id no：564、seq id no：565、seq id no：566、seq id no：567、seq id no：568、seq id no：569、seq id no：570、seq id no：571、seq id no：572、seq idno：573、seq id no：574、seq id no：575、seq id no：576、seq id no：577、seq id no：578、seq id no：579、seq id no：580、seq id no：581、seq id no：582、seq id no：583和seq idno：584；和b)可变轻结构域，所述可变轻结构域具有选自由以下组成的组的氨基酸序列：seq id no：874和seq id no：932。

58、在一方面，本文提供包含抗b7h3 abd的组合物，所述抗b7h3 abd包含：a)具有seqid no：946的氨基酸序列的可变重结构域；和b)具有seq id no：950的氨基酸序列的可变轻结构域。

59、在另一方面，本文提供包含抗b7h3 abd的组合物，所述抗b7h3 abd包含：a)具有seq id no：956的氨基酸序列的可变重结构域；和b)具有seq id no：960的氨基酸序列的可变轻结构域。

60、在一方面，本文提供一种包含抗b7h3 abd的组合物，所述抗b7h3 abd包含：a)具有seq id no：964的氨基酸序列的可变重结构域；和b)具有seq id no：968的氨基酸序列的可变轻结构域。

61、在另一方面，本文提供包含抗b7h3 abd的组合物，所述抗b7h3 abd包含：a)具有seq id no：972的氨基酸序列的可变重结构域；和b)具有seq id no：976的氨基酸序列的可变轻结构域。

62、在一些实施方案中，所述组合物是抗体，所述抗体包含：a)包含连接至-ch1-铰链-ch2-ch3的vh的重链；和b)包含连接至-cl的vl的轻链。

63、在另一方面，本文提供一种核酸组合物，所述核酸组合物分别包含：a)第一核酸，所述第一核酸编码本文所述的抗cd28 abd或抗b7h3 abd中的任一个的vh；和b)第二核酸，所述第二核酸编码抗cd28或抗b7h3 abd的vl。本文还提供包含含有一种或多种第一核酸和第二核酸的表达载体的表达载体组合物；包含此类核酸组合物或表达载体组合物的宿主细胞；以及制备本文所述的抗cd28 abd或抗b7h3 abd组合物的方法。

64、在一方面，本文提供一种包含cd28抗原结合结构域(abd)的组合物。cd28 abd包含以下cd28结合结构域中的任一个的可变重互补决定区1-3(vhcdr1-3)和可变轻互补决定区(v1cdr1-3)：1a7[cd28]_h1l1、1a7[cd28]_h1.14l1、1a7[cd28]_h1_l1.71、1a7[cd28]_h1.1_l1.71、1a7[cd28]_h1.14_l1.71、cd28.3[cd28]_h0l0、hcd28.3[cd28]_h1l1、5.11a1[cd28]_h0l0、tgn1412_h1l1、341vl34[cd28]_h1l1、341vl36[cd28]_h1l1、281vl4[cd28]_h1l1、hutn228[cd28]_h1l1、pv1[cd28]_h0l0、m9.3[cd28]_h0l0、hu9.3[cd28]_h1l1。

65、在一些实施方案中，cd28 abd包含以下cd28结合结构域中的任一个的可变重结构域和可变轻结构域：1a7[cd28]_h1l1、1a7[cd28]_h1.14l1、1a7[cd28]_h1_l1.71、1a7[cd28]_h1.1_l1.71、1a7[cd28]_h1.14_l1.71、cd28.3[cd28]_h0l0、hcd28.3[cd28]_h1l1、5.11a1[cd28]_h0l0、tgn1412_h1l1、341vl34[cd28]_h1l1、341vl36[cd28]_h1l1、281vl4[cd28]_h1l1、hutn228[cd28]_h1l1、pv1[cd28]_h0l0、m9.3[cd28]_h0l0、hu9.3[cd28]_h1l1。在示例性实施方案中，cd28抗原结合结构域选自以下cd28抗原结合结构域：cd28结合结构域：1a7[cd28]_h1l1、1a7[cd28]_h1.14l1、1a7[cd28]_h1_l1.71、1a7[cd28]_h1.1_l1.71、1a7[cd28]_h1.14_l1.71、cd28.3[cd28]_h0l0、hcd28.3[cd28]_h1l1、5.11a1[cd28]_h0l0、tgn1412_h1l1、341vl34[cd28]_h1l1、341vl36[cd28]_h1l1、281vl4[cd28]_h1l1、hutn228[cd28]_h1l1、pv1[cd28]_h0l0、m9.3[cd28]_h0l0、hu9.3[cd28]_h1l1。

66、在另一方面，本文提供包含cd28抗原结合结构域(abd)的抗cd28抗体。cd28抗原结合结构域包含以下cd28结合结构域中的任一个的可变重互补决定区1-3(vhcdr1-3)和可变轻互补决定区(vlcdr1-3)：1a7[cd28]_h1l1、1a7[cd28]_h1.14l1、1a7[cd28]_h1_l1.71、1a7[cd28]_h1.1_l1.71、1a7[cd28]_h1.14_l1.71、cd28.3[cd28]_h0l0、hcd28.3[cd28]_h1l1、5.11a1[cd28]_h0l0、tgn1412_h1l1、341vl34[cd28]_h1l1、341vl36[cd28]_h1l1、281vl4[cd28]_h1l1、hutn228[cd28]_h1l1、pv1[cd28]_h0l0、m9.3[cd28]_h0l0、hu9.3[cd28]_h1l1。在一些实施方案中，cd28 abd包含以下cd28结合结构域中的任一个的可变重结构域和可变轻结构域：1a7[cd28]_h1l1、1a7[cd28]_h1.14l1、1a7[cd28]_h1_l1.71、1a7[cd28]_h1.1_l1.71、1a7[cd28]_h1.14_l1.71、cd28.3[cd28]_h0l0、hcd28.3[cd28]_h1l1、5.11a1[cd28]_h0l0、tgn1412_h1l1、341vl34[cd28]_h1l1、341vl36[cd28]_h1l1、281vl4[cd28]_h1l1、hutn228[cd28]_h1l1、pv1[cd28]_h0l0、m9.3[cd28]_h0l0、hu9.3[cd28]_h1l1。在示例性实施方案中，cd28抗原结合结构域选自以下cd28抗原结合结构域：cd28结合结构域：1a7[cd28]_h1l1、1a7[cd28]_h1.14l1、1a7[cd28]_h1_l1.71、1a7[cd28]_h1._l1.71、1a7[cd28]_h1.14_l1.71、cd28.3[cd28]_h0l0、hcd28.3[cd28]_h1l1、5.11a1[cd28]_h0l0、tgn1412_hil1、341vl34[cd28]_h1l1、341vl36[cd28]_h1l1、281vl4[cd28]_h1l1、hutn228[cd28]_h1l1、pv1[cd28]_h0l0、m9.3[cd28]_h0l0、hu9.3[cd28]_h1l1。

67、在一些实施方案中，所述抗cd28抗体包含：a)第一单体，所述第一单体包含第一抗原结合结构域和第一恒定结构域；以及b)第二单体，所述第二单体包含第二抗原结合结构域和第二恒定结构域，其中所述第一抗原结合结构域或所述第二抗原结合结构域中的任一个是cd28抗原结合结构域。

68、在一些实施方案中，所述第一抗原结合结构域和所述第二抗原结合结构域结合不同的抗原。

69、在某些实施方案中，所述cd28抗原结合结构域是抗cd28单链片段(scfv)。在示例性实施方案中，所述scfv包含带电荷的scfv接头。

70、在一些实施方案中，所述第一恒定结构域和所述第二恒定结构域各自包含ch2-ch3。在示例性实施方案中，所述第一恒定结构域和所述第二恒定结构域各自是变体恒定结构域。在某些实施方案中，所述第一恒定结构域和所述第二恒定结构域包含选自由以下组成的组的一组异源二聚化变体：s364k/e357q：l368d/k370s；s364k：l368d/k370s；s364k：l368e/k370s；d401k：t411e/k360e/q362e；和t366w：t366s/l368a/y407v。在某些实施方案中，所述第一单体和所述第二单体各自还包含一种或多种消融变体。在示例性实施方案中，所述消融变体是e233p/l234v/l235a/g236del/s267k。在一些实施方案中，所述第一单体或所述第二单体中的至少一种进一步包含一种或多种pi变体。在特定实施方案中，所述pi变体是n208d/q295e/n3 84d/q418e/n421d。

71、在另一方面，本文提供一种包含b7h3抗原结合结构域(abd)的组合物。b7h3结合结构域包括以下b7h3结合结构域中的任一个的可变重互补决定区1-3(vhcdr1-3)和可变轻互补决定区(vlcdr1-3)：2e4a3.189[b7h3]_h1l1、2e4a3.189[b7h3]_h1/1a7[cd28]_l1、2e4a3.189[b7h3]_h1.22l1、2e4a3.189[b7h3]_h1.22/1a7[cd28]_l1、6a1[b7h3]_h1l1、奥博妥单抗(omburtamab)、依诺妥珠单抗(enoblituzumab)、brca84d、brca69d、prca 157、huprca157、mab-d、humab-d、m30、m30-h1-ia、sp265、s10-h50l58、8h9、m852、m857、m8524、1-1、1-2、1-4、1-5、1-7、2-5、2-8、chab2、chab3、chab4、chab18、chab13、chab12、chab14、chab6、chab11、chab16、chab10、chab7、chab8、chab17、chab5、huab3v2.5、huab3v2.6、huab13v1、tpp-5706、tpp-6642、tpp-6850、tpp-3803、trl4542、h1702、h1703、hua3、hua9和m1704。

72、在一些实施方案中，b7h3 abd包括以下b7h3结合结构域中的任一个的可变重结构域和可变轻结构域：2e4a3.189[b7h3]_h1l1、2e4a3.189[b7h3]_h1/1a7[cd28]_l1、2e4a3.189[b7h3]_h1.22l1、2e4a3.189[b7h3]_h1.22/1a7[cd28]_l1、6a1[b7h3]_h1l1、奥博妥单抗、依诺妥珠单抗、brca84d、brca69d、prca157、huprca157、mab-d、humab-d、m30、m30-h1-l4、sp265、s10-h50l58、8h9、m852、m857、m8524、1-1、1-2、1-4、1-5、1-7、2-5、2-8、chab2、chab3、chab4、chab18、chab13、chab12、chab14、chab6、chab11、chab16、chab10、chab7、chab8、chab17、chab5、huab3v2.5、huab3v2.6、huab13v1、tpp-5706、tpp-6642、tpp-6850、tpp-3803、trl4542、h1702、h1703、hua3、hua9和m1704。

73、在示例性实施方案中，b7h3 abd选自以下b7h3抗原结合结构域：2e4a3.189[b7h3]_h1l1、2e4a3.189[b7h3]_h1/1a7[cd28]_l1、2e4a3.189[b7h3]_h1.22l1、2e4a3.189[b7h3]_h1.22/1a7[cd28]_l1、6a1[b7h3]_h1l1、奥博妥单抗、依诺妥珠单抗、brca84d、brca69d、prca157、huprca157、mab-d、humab-d、m30、m30-h1-l4、sp265、s10-h50l58、8h9、m852、m857、m8524、1-1、1-2、1-4、1-5、1-7、2-5、2-8、chab2、chab3、chab4、chab18、chab13、chab12、chab14、chab6、chab11、chab16、chab10、chab7、chab8、chab17、chab5、huab3v2.5、huab3v2.6、huab13v1、tpp-5706、tpp-6642、tpp-6850、tpp-3803、trl4542、h1702、h1703、hua3、hua9和m1704。

74、在又一方面，本文提供了包含b7h3抗原结合结构域的抗b7h3抗体，b7h3抗原结合结构域包含以下b7h3抗原结合结构域中的任一个的可变重互补决定区1-3(vhcdr1-3)和可变轻互补决定区(vlcdr1-3)：2e4a3.189[b7h3]_h1l1、2e4a3.189[b7h3]_h1/1a7[cd28]_l1、2e4a3.189[b7h3]_h1.22l1、2e4a3.189[b7h3]_h1.22/1a7[cd28]_l1、6a1[b7h3]_h1l1、奥博妥单抗、依诺妥珠单抗、brca84d、brca69d、prca157、huprca157、mab-d、humab-d、m30、m30-h1-l4、sp265、s10-h50l58、8h9、m852、m857、m8524、1-1、1-2、1-4、1-5、1-7、2-5、2-8、chab2、chab3、chab4、chab18、chab13、chab12、chab14、chab6、chab11、chab16、chab10、chab7、chab8、chab17、chab5、huab3v2.5、huab3v2.6、huab13v1、tpp-5706、tpp-6642、tpp-6850、tpp-3803、trl4542、h1702、h1703、hua3、hua9和m1704。

75、在一些实施方案中，所述抗b7h3抗体包含b7h3抗原结合结构域。b7h3抗原结合结构域包括以下b7h3抗原结合结构域中的任一个的可变重结构域和可变轻结构域：2e4a3.189[b7h3]_h1l1、2e4a3.189[b7h3]_h1/1a7[cd28]_l1、2e4a3.189[b7h3]_h1.22l1、2e4a3.189[b7h3]_h1.22/1a7[cd28]_l1、6a1[b7h3]_h1l1、奥博妥单抗、依诺妥珠单抗、brca84d、brca69d、prca157、huprca157、mab-d、humab-d、m30、m30-h1-14、sp265、s10-h50l58、8h9、m852、m857、m8524、1-1、1-2、1-4、1-5、1-7、2-5、2-8、chab2、chab3、chab4、chab18、chab13、chab12、chab14、chab6、chab11、chab16、chab10、chab7、chab8、chab17、chab5、huab3v2.5、huab3v2.6、huab13v1、tpp-5706、tpp-6642、tpp-6850、tpp-3803、trl4542、h1702、h1703、hua3、hua9和m1704。在示例性实施方案中，b7h3抗原结合结构域选自以下b7h3抗原结合结构域中的任一个：2e4a3.189[b7h3]_h1l1、2e4a3.189[b7h3]_h1/1a7[cd28]_l1、2e4a3.189[b7h3]_h1.22l1、2e4a3.189[b7h3]_h1.22/1a7[cd28]_l1、6a1[b7h3]_h1l1、奥博妥单抗、依诺妥珠单抗、brca84d、brca69d、prca157、huprca157、mab-d、humab-d、m30、m30-h1-l4、sp265、s10-h50l58、8h9、m852、m857、m8524、1-1、1-2、1-4、1-5、1-7、2-5、2-8、chab2、chab3、chab4、chab18、chab13、chab12、chab14、chab6、chab11、chab16、chab10、chab7、chab8、chab17、chab5、huab3v2.5、huab3v2.6、huab13v1、tpp-5706、tpp-6642、tpp-6850、tpp-3803、trl4542、h1702、h1703、hua3、hua9和m1704。

76、在一些实施方案中，所述抗体包含：a)第一单体，所述第一单体包含第一抗原结合结构域和第一恒定结构域；以及b)第二单体，所述第二单体包含第二抗原结合结构域和第二恒定结构域，其中所述第一抗原结合结构域或第二抗原结合结构域中的任一个是b7h3抗原结合结构域。在某些实施方案中，所述第一抗原结合结构域和所述第二抗原结合结构域结合不同的抗原。

77、在示例性实施方案中，所述第一抗原结合结构域是b7h3抗原结合结构域，并且所述第二抗原结合结构域是cd28结合结构域。在一些实施方案中，cd28结合结构域包括以下cd28结合结构域中的任一个的vhcdr1-3和vlcdr1-3：1a7[cd28]_h1l1、1a7[cd28]_h1.14l1、1a7[cd28]_h1_l1.71、1a7[cd28]_h1.1_l1.71、1a7[cd28]_h1.14_l1.71、cd28.3[cd28]_h0l0、hcd28.3[cd28]_h1l1、5.11a1[cd28]_h0l0、tgn1412_h1l1、341vl34[cd28]_h1l1、341vl36[cd28]_h1l1、281vl4[cd28]_h1l1、hutn228[cd28]_h1l1、pv1[cd28]_h0l0、m9.3[cd28]_h0l0和hu9.3[cd28]_h1l1。在一些实施方案中，cd28结合结构域包括以下cd28结合结构域中的任一个的可变重结构域和可变轻结构域：1a7[cd28]_h1l1、1a7[cd28]_h1.14l1、1a7[cd28]_h1_l1.71、1a7[cd28]_h1.1_l1.71、1a7[cd28]_h1.14_l1.71、cd28.3[cd28]_h0l0、hcd28.3[cd28]_h1l1、5.11a1[cd28]_h0l0、tgn1412_h1l1、341vl34[cd28]_h1l1、341vl36[cd28]_h1l1、281vl4[cd28]_h1l1、hutn228[cd28]_h1l1、pv1[cd28]_h0l0、m9.3[cd28]_h0l0和hu9.3[cd28]_h1l1。在某些实施方案中，所述cd28结合结构域是抗cd28scfv。在示例性实施方案中，所述scfv包含带电荷的scfv接头。

78、在一些实施方案中，所述第一恒定结构域和所述第二恒定结构域各自包含ch2-ch3。在示例性实施方案中，所述第一恒定结构域和所述第二恒定结构域各自是变体恒定结构域。

79、在特定实施方案中，所述第一结构域和所述第二恒定结构域包含选自由以下的一组异源二聚化变体：s364k/e357q：l368d/k370s；s364k：l368d/k370s；s364k：l368e/k370s；d401k：t411e/k360e/q362e；和t366w：t366s/l368a/y407v。在某些实施方案中，所述第一单体和所述第二单体各自包含一种或多种消融变体。在某些实施方案中，所述消融变体是e233p/l234v/l235a/g236del/s267k。在一些实施方案中，所述第一单体或所述第二单体中的至少一种进一步包含一种或多种pi变体。在特定实施方案中，所述pi变体是n208d/q295e/n3 84d/q418e/n421d。

80、在另一方面，本文提供抗cd28 x抗taa 1+1fab-scfv-fc异源二聚抗体。在一个实施方案中，所述异源二聚抗体包含：a)第一单体，所述第一单体包括：i)抗cd28 scfv，其包含第一可变重结构域、scfv接头和第一可变轻结构域；和ii)第一fc结构域，其中使用结构域接头将scfv共价附接至第一fc结构域的n末端；b)第二单体，所述第二单体从n末端到c末端包含vh2-ch1-铰链-ch2-ch3，其中vh2是第二可变重结构域，并且ch2-ch3是第二fc结构域；和c)第三单体，所述第三单体包含第二可变轻结构域，其中所述第二可变重结构域和所述第二可变轻结构域形成肿瘤相关抗原(taa)结合结构域。

81、在一些实施方案中，所述抗cd28 scfv包含以下cd28抗原结合结构域中的任一个的vhcdr1-3和vlcdr1-3：1a7[cd28]_h1l1、1a7[cd28]_h1.14l1、1a7[cd28]_h1_l1.71、1a7[cd28]_h1.1_l1.71、1a7[cd28]_h1.14_l1.71、cd28.3[cd28]_h0l0、hcd28.3[cd28]_h1l1、5.11a1[cd28]_h0l0、tgn1412_h1l1、341vl34[cd28]_h1l1、341vl36[cd28]_h1l1、281vl4[cd28]_h1l1、hutn228[cd28]_h1l1、pv1[cd28]_h0l0、m9.3[cd28]_h0l0和hu9.3[cd28]_h1l1。

82、在某些实施方案中，所述抗cd28 scfv的第一可变重结构域和第一可变轻结构域分别是以下cd28抗原结合结构域中的任一个的可变重结构域和可变轻结构域：1a7[cd28]_h1l1、1a7[cd28]_h1.14l1、1a7[cd28]_h1_l1.71、1a7[cd28]_h1.1_l1.71、1a7[cd28]_h1.14_l1.71、cd28.3[cd28]_h0l0、hcd28.3[cd28]_h1l1、5.11a1[cd28]_h0l0、tgn1412_h1l1、341vl34[cd28]_h1l1、341vl36[cd28]_h1l1、281vl4[cd28]_h1l1、hutn228[cd28]_h1l1、pv1[cd28]_h0l0、m9.3[cd28]_h0l0和hu9.3[cd28]_h1l1。

83、在特定实施方案中，所述taa结合结构域是b7h3结合结构域。在一些实施方案中，所述b7h3结合结构域包含以下b7h3抗原结合结构域中的任一个的vhcdr1-3和v1cdr1-3：2e4a3.189[b7h3]_h1l1、2f4a3.189[b7h3]_h1/1a7[cd28]_l1、2e4a3.189[b7h3]_h1.22l1、2e4a3.189[b7h3]_h1.22/1a7[cd28]_l1、6a1[b7h3]_h1l1、奥博妥单抗、依诺妥珠单抗、brca84d、brca69d、prca157、huprca157、mab-d、humab-d、m30、m30-h1-l4、sp265、s10-h50l58、8h9、m852、m857、m8524、1-1、1-2、1-4、1-5、1-7、2-5、2-8、chab2、chab3、chab4、chab18、chab13、chab12、chab14、chab6、chab11、chab16、chab10、chab7、chab8、chab17、chab5、huab3v2.5、huab3v2.6、huab13v1、tpp-5706、tpp-6642、tpp-6850、tpp-3803、trl4542、h1702、h1703、hua3、hua9和m1704。

84、在示例性实施方案中，所述第二可变重结构域和所述第二可变轻结构域分别是以下b7h3抗原结合结构域中的任一个的可变重结构域和可变轻结构域：2e4a3.189[b7h3]_h1l1、2e4a3.189[b7h3]_h1/1a7[cd28]_l1、2e4a3.189[b7h3]_h1.22l1、2e4a3.189[b7h3]_h1.22/1a7[cd28]_l1、6a1[b7h3]_h1l1、奥博妥单抗、依诺妥珠单抗、brca84d、brca69d、prca157、huprca157、mab-d、humab-d、m30、m30-h1-l4、sp265、s10-h50l58、8h9、m852、m857、m8524、1-1、1-2、1-4、1-5、1-7、2-5、2-8、chab2、chab3、chab4、chab18、chab13、chab12、chab14、chab6、chab11、chab16、chab10、chab7、chab8、chab17、chab5、huab3v2.5、huab3v2.6、huab13v1、tpp-5706、tpp-6642、tpp-6850、tpp-3803、trl4542、h1702、h1703、hua3、hua9和m1704。

85、在示例性实施方案中，所述抗cd28 scfv从n末端到c末端取向为第一可变轻结构域-scfv接头-第一可变重结构域。在其它实施方案中，所述抗cd28 scfv从n末端到c末端取向为第一可变重结构域-scfv接头-第一可变轻结构域。在许多实施方案中，所述scfv接头是带电荷的scfv接头。

86、在某些实施方案中，所述第一fc结构域和所述第二fc结构域是变体fc结构域。在一些实施方案中，所述第一fc结构域和所述第二fc结构域包含选自以下组成的组的一组异源二聚化偏斜变体：s364k/e357q：l368d/k370s；s364k：l368d/k370s；s364k：l368e/k370s；d401k：t411e/k360e/q362e；和t366w：t366s/l368a/y407v，其中编号是根据eu编号进行的。在示例性实施方案中，所述第一fc结构域和所述第二fc结构域包含异源二聚化偏斜变体s364k/e357q：l368d/k370s。

87、在某些实施方案中，第一fc结构域和第二fc结构域各自包含一种或多种消融变体。在示例性实施方案中，所述一种或多种消融变体是e233p/l234v/l235a/g236del/s267k，其中编号是根据eu编号进行的。

88、在一些实施方案中，所述第一单体或所述第二单体中的一者包含一种或多种pi变体。在示例性实施方案中，所述第二单体的ch1-铰链-ch2-ch3包含pi变体n208d/q295e/n384d/q418e/n421d，其中编号是根据eu编号进行的。

89、在示例性实施方案中，所述第一fc结构域包含氨基酸变体s364k/e357q/e233p/l234v/l235a/g236del/s267k；所述第二单体的ch1-铰链-ch2-ch3包含氨基酸变体l368d/k370s/n208d/q295e/n384d/q418e/n421d/e233p/l234v/l235a/g236del/s267k，并且其中编号是根据eu编号进行的。

90、在某些实施方案中，所述scfv接头是具有氨基酸序列(gkpgs)4的带电荷的scfv接头。

91、在特定实施方案中，所述第一fc结构域和所述第二fc结构域各自进一步包含氨基酸变体428/434s。

92、在一些实施方案中，抗cd28 x抗taa 1+1fab-scfv-fc异源二聚抗体包含：a)第一单体，所述第一单体从n末端到c末端包含抗cd28 scfv-接头-ch2-ch3，其中ch2-ch3是第一fc结构域；b)第二单体，所述第二单体从n末端到c末端包含vh-ch1-铰链-ch2-ch3，其中ch2-ch3是第二变体fc结构域；和c)第三单体，所述第三单体包含vl-cl；其中第一变体fc结构域包含氨基酸变体s364k/e357q，其中第二变体fc结构域包含氨基酸变体l368d/k370s，其中第一变体fc结构域和第二变体fc结构域各自包含氨基酸变体e233p/l234v/l235a/g236del/s267k，其中第二单体的ch1-铰链-ch2-ch3包含氨基酸变体n208d/q295e/n384d/q418e/n421d，其中vh和vl形成肿瘤相关抗原(taa)结合结构域，并且其中抗cd28 scfv包含以下cd28抗原结合结构域中的一个的可变重结构域和可变轻结构域：1a7[cd28]_h1l1、1a7[cd28]_h1.14l1、1a7[cd28]_h1_l1.71、1a7[cd28]_h1.1_l1.71、1a7[cd28]_h1.14_l1.71、cd28.3[cd28]_h0l0、hcd28.3[cd28]_h1l1、5.11a1[cd28]_h0l0、tgn1412_h1l1、341vl34[cd28]_h1l1、341vl36[cd28]_h1l1、281vl4[cd28]_h1l1、hutn228[cd28]_h1l1、pv1[cd28]_h0l0、m9.3[cd28]_h0l0和hu9.3[cd28]_h1l1，并且其中编号是根据eu编号进行的。

93、在某些实施方案中，所述taa结合结构域是b7h3结合结构域。在一些实施方案中，vh和vl分别是以下b7h3抗原结合结构域中的任一个的可变重结构域和可变轻结构域：2e4a3.189[b7h3]_h1l1、2e4a3.189[b7h3]_h1/1a7[cd28]_l1、2e4a3.189[b7h3]_h1.22l1、2e4a3.189[b7h3]_h1.22/1a7[cd28]_l1、6a1[b7h3]_h1l1、奥博妥单抗、依诺妥珠单抗、brca84d、brca69d、prca157、huprca157、mab-d、humab-d、m30、m30-h1-l4、sp265、s10-h50l58、8h9、m852、m857、m8524、1-1、1-2、1-4、1-5、1-7、2-5、2-8、chab2、chab3、chab4、chab18、chab13、chab12、chab14、chab6、chab11、chab16、chab10、chab7、chab8、chab17、chab5、huab3v2.5、huab3v2.6、huab13v1、tpp-5706、tpp-6642、tpp-6850、tpp-3803、trl4542、h1702、h1703、hua3、hua9和m1704。

94、在示例性实施方案中，所述scfv包含具有氨基酸序列(gkpgs)4的带电荷的scfv接头。在一些实施方案中，所述第一变体fc结构域和所述第二变体fc结构域各自进一步包含氨基酸变体428/434s，其中编号是根据eu编号进行的。

95、在另一方面，本文提供了抗cd28 x抗taa 2+1 fab2-scfv-fc抗体，其包含：a)第一单体，所述第一单体从n末端到c末端包含vh1-ch1-接头1-抗cd28 scfv-接头2-ch2-ch3，其中vh1是第一可变重结构域，接头1和接头2分别是第一结构域接头和第二结构域接头，并且ch2-ch3是第一fc结构域；b)第二单体，所述第二单体从n末端到c末端包含vh2-ch1-铰链-ch2-ch3，其中vh2是第二可变重结构域，并且ch2-ch3是第二fc结构域；和c)共同轻链，所述共同轻链包含可变轻结构域；其中第一可变重结构域和可变轻结构域形成第一肿瘤相关抗原(taa)结合结构域，并且第二可变重结构域和可变轻结构域形成第二taa结合结构域。

96、在示例性实施方案中，所述第一taa结合结构域和所述第二taa结合结构域各自是b7h3结合结构域。在示例性实施方案中，所述第一b7h3结合结构域和所述第二b7h3结合结构域各自包含以下b7h3抗原结合结构域中的任一个的vhcdr1-3和v1cdr1-3：2e4a3.189[b7h3]_h1l1、2e4a3.189[b7h3]_h1/1a7[cd28]_l1、2e4a3.189[b7h3]_h1.22l1、2e4a3.189[b7h3]_h1.22/1a7[cd28]_l1、6a1[b7h3]_h1l1、奥博妥单抗、依诺妥珠单抗、brca84d、brca69d、prca157、huprca157、mab-d、humab-d、m30、m30-h1-l4、sp265、s10-h50l58、8h9、m852、m857、m8524、1-1、1-2、1-4、1-5、1-7、2-5、2-8、chab2、chab3、chab4、chab18、chab13、chab12、chab14、chab6、chab11、chab16、chab10、chab7、chab8、chab17、chab5、huab3v2.5、huab3v2.6、huab13v1、tpp-5706、tpp-6642、tpp-6850、tpp-3803、trl4542、h1702、h1703、hua3、hua9和m1704。在一些实施方案中，所述第一可变重结构域和所述第二可变重结构域各自包含b7h3结合结构域的可变重结构域，并且所述可变轻结构域包含b7h3结合结构域的可变轻结构域，其中所述b7h3结合结构域是以下b7h3抗原结合结构域中的任一个：2e4a3.189[b7h3]_h1l1、2e4a3.189[b7h3]_h1/1a7[cd28]_l1、2e4a3.189[b7h3]_h1.22l1、2e4a3.189[b7h3]_h1.22/1a7[cd28]_l1、6a1[b7h3]_h1l1、奥博妥单抗、依诺妥珠单抗、brca84d、brca69d、prca157、huprca157、mab-d、humab-d、m30、m30-h1-14、sp265、s10-h50l58、8h9、m852、m857、m8524、1-1、1-2、1-4、1-5、1-7、2-5、2-8、chab2、chab3、chab4、chab18、chab13、chab12、chab14、chab6、chab11、chab16、chab10、chab7、chab8、chab17、chab5、huab3v2.5、huab3v2.6、huab13v1、tpp-5706、tpp-6642、tpp-6850、tpp-3803、trl4542、h1702、h1703、hua3、hua9和m1704。

97、在抗cd28 x抗taa 2+1fab2-scfv-fc抗体的几个实施方案中，所述抗cd28scfv包含scfv可变重结构域、scfv可变轻结构域以及连接scfv可变重结构域和scfv可变轻结构域的scfv接头。在某些实施方案中，所述抗cd28 scfv包含以下cd28抗原结合结构域中的任一个的vhcdr1-3和vlcdr1-3：1a7[cd28]_h1l1、1a7[cd28]_h1.14l1、1a7[cd28]_h1_l1.71、1a7[cd28]_h1.1_l1.71、1a7[cd28]_h1.14_l1.71、cd28.3[cd28]_h0l0、hcd28.3[cd28]_h1l1、5.11a1[cd28]_h0l0、tgn1412_h1l1、341vl34[cd28]_h1l1、341vl36[cd28]_h1l1、281vl4[cd28]_h1l1、hutn228[cd28]_h1l1、pv1[cd28]_h0l0、m9.3[cd28]_h0l0和hu9.3[cd28]_h1l1。在某些实施方案中，所述抗cd28 scfv的scfv可变重结构域和scfv可变轻结构域分别包含以下cd28抗原结合结构域中的任一个的可变重结构域和可变轻结构域：1a7[cd28]_h1l1、1a7[cd28]_h1.14l1、1a7[cd28]_h1_l1.71、1a7[cd28]_h1.1_l1.71、1a7[cd28]_h1.14_l1.71、cd28.3[cd28]_h0l0、hcd28.3[cd28]_h1l1、5.1ia1[cd28]_h0l0、tgn1412_h1l1、341vl34[cd28]_h1l1、341vl36[cd28]_h1l1、281vl4[cd28]_h1l1、hutn228[cd28]_h1l1、pv1[cd28]_h0l0、m9.3[cd28]_h0l0和hu9.3[cd28]_h1l1。

98、在一些实施方案中，所述scfv可变重结构域使用所述第一结构域接头附接至所述第一单体的所述ch1的c末端，并且所述scfv可变轻结构域使用所述第二结构域接头共价附接至所述第一fc结构域的n末端。在其它实施方案中，所述scfv可变轻结构域使用所述第一结构域接头附接至所述第一单体的所述ch1的c末端，并且所述scfv可变重结构域使用所述第二结构域接头共价附接至所述第一fc结构域的n末端。在一些实施方案中，所述scfv接头是带电荷的scfv接头。

99、在某些实施方案中，所述第一fc结构域和所述第二fc结构域是变体恒定结构域。所述第一fc结构域和所述第二fc结构域中包含选自以下异源二聚化偏斜变体的一组异源二聚化变体：s364k/e357q：l368d/k370s；s364k：l368d/k370s；s364k：l368e/k370s；d401k：t411e/k360e/q362e；和t366w：t366s/l368a/y407v，其中编号是根据eu编号进行的。在一些实施方案中，所述第一fc结构域和所述第二fc结构域包含异源二聚化偏斜变体s364k/e357q：l368d/k370s。

100、在一些实施方案中，所述第一fc结构域和所述第二fc结构域各自包含一种或多种消融变体。在示例性实施方案中，所述一种或多种消融变体是e233p/l234v/l235a/g236del/s267k，其中编号是根据eu编号进行的。

101、在一些实施方案中，所述第一单体或所述第二单体中的一者包含一种或多种pi变体。在特定实施方案中，所述第二单体的ch1-铰链-ch2-ch3包含pi变体n208d/q295e/n384d/q418e/n421d，其中编号是根据eu编号进行的。

102、在示例性实施方案中，所述第一单体的第一fc结构域包含氨基酸变体s364k/e357q/e233p/l234v/l235a/g236del/s267k，所述第二单体的ch1-铰链-ch2-ch3包含氨基酸变体n208d/e233p/l234v/l235a/g236del/s267k/q295e/l368d/k370s/n384d/q418e/n421d，并且其中编号是根据eu编号进行的。

103、在一些实施方案中，所述抗cd28 scfv包含具有氨基酸序列(gkpgs)4的带电荷的scfv接头。在某些实施方案中，所述第一变体fc结构域和所述第二变体fc结构域各自进一步包含氨基酸变体428/434s，其中编号是根据eu编号进行的。

104、在一些实施方案中，抗cd28 x抗taa 2+1fab2-scfv-fc抗体包含：a)第一单体，所述第一单体从n末端到c末端包含vh1-ch1-接头1-抗cd28 scfv-接头2-ch2-ch3，其中ch2-ch3是第一变体fc结构域；b)第二单体，所述第二单体从n末端到c末端包含vh1-ch1-铰链-ch2-ch3，其中ch2-ch3是第二变体fc结构域；和c)共同轻链，所述共同轻链包含vl-cl；其中所述第一变体fc结构域包含氨基酸变体s364k/e357q，其中所述第二变体fc结构域包含氨基酸变体l368d/k370s，其中所述第一变体fc结构域和所述第二变体fc结构域各自包含氨基酸变体e233p/l234v/l235a/g236del/s267k，其中所述第二单体的ch1-铰链-ch2-ch3包含氨基酸变体n208d/q295e/n384d/q418e/n421d，其中vh1和vl各自形成肿瘤相关抗原(taa)结合结构域，其中所述抗cd28 scfv包含以下cd28抗原结合结构域中的任一个的可变重结构域和可变轻结构域：1a7[cd28]_h1l1、1a7[cd28]_h1.14l1、1a7[cd28]_h1_l1.71、1a7[cd28]_h1.1_l1.71、1a7[cd28]_h1.14_l1.71、cd28.3[cd28]_h0l0、hcd28.3[cd28]_h1l1、5.11a1[cd28]_h0l0、tgn1412_h1l1、341vl34[cd28]_h1l1、341vl36[cd28]_h1l1、281vl4[cd28]_h1l1、hutn228[cd28]_h1l1、pv1[cd28]_h0l0、m9.3[cd28]_h0l0和hu9.3[cd28]_h1l1，并且其中编号是根据eu编号进行的。

105、在一些实施方案中，vh1和vl形成b7h3结合结构域。在示例性实施方案中，vh1和vl是以下b7h3抗原结合结构域中的任一个的可变重结构域和可变轻结构域：2e4a3.189[b7h3]_h1l1、2e4a3.189[b7h3]_h1/1a7[cd28]_l1、2e4a3.189[b7h3]_h1.22l1、2e4a3.189[b7h3]_h1.22/1a7[cd28]_l1、6a1[b7h3]_h1l1、奥博妥单抗、依诺妥珠单抗、brca84d、brca69d、prca157、huprca157、mab-d、humab-d、m30、m30-h1-l4、sp265、s10-h50l58、8h9、m852、m857、m8524、1-1、1-2、1-4、1-5、1-7、2-5、2-8、chab2、chab3、chab4、chab18、chab13、chab12、chab14、chab6、chab11、chab16、chab10、chab7、chab8、chab17、chab5、huab3v2.5、huab3v2.6、huab13v1、tpp-5706、tpp-6642、tpp-6850、tpp-3803、trl4542、h1702、h1703、hua3、hua9和m1704。

106、在一些实施方案中，所述scfv包含具有氨基酸序列(gkpgs)4的带电荷的scfv接头。在某些实施方案中，所述第一变体fc结构域和所述第二变体fc结构域各自进一步包含氨基酸变体428/434s。

107、在另一方面，本文提供抗cd28 x抗taa 1+1clc异源二聚抗体，其包含：a)第一单体，所述第一单体从n末端到c末端包含vh1-ch1-铰链-ch2-ch3，其中vh1是第一可变重结构域，并且ch2-ch3是第一fc结构域；b)第二单体，所述第二单体从n末端到c末端包含vh2-ch1-铰链-ch2-ch3，其中vh2是第二可变重结构域，并且ch2-c3是第二fc结构域；和c)共同轻链，所述共同轻链从n末端到c末端包含vl-cl，其中vl是可变轻结构域，并且cl是恒定轻结构域，其中第一可变重结构域和可变轻结构域形成第一抗原结合结构域，并且第二可变重结构域和可变轻结构域形成第二抗原结合结构域。

108、在一些实施方案中，所述第一fc结构域和所述第二fc结构域各自是变体fc结构域。在某些实施方案中，所述第一fc结构域和所述第二fc结构域包含选自以下异源二聚化变体的一组异源二聚化偏斜变体：s364k/e357q：l368d/k370s；s364k：l368d/k370s；s364k：l368e/k370s；d401k：t411e/k360e/q362e；和t366w：t366s/l368a/y407v，其中编号是根据eu编号进行的。在示例性实施方案中，所述第一fc结构域和所述第二fc结构域包含异源二聚化偏斜变体s364k/e357q：l368d/k370s。

109、在某些实施方案中，所述第一fc结构域和所述第二fc结构域各自包含一种或多种消融变体。在示例性实施方案中，所述一种或多种消融变体是e233p/l234v/l235a/g236del/s267k，其中编号是根据eu编号进行的。

110、在一些实施方案中，所述第一单体或所述第二单体中的一者进一步包含pi变体。在特定实施方案中，所述第一单体的chi-铰链-ch2-ch3包含pi变体n208d/q295e/n384d/q418e/n421d，其中编号是根据eu编号进行的。

111、在某些实施方案中，所述第一单体的ch1-铰链-ch2-ch3包含氨基酸变体l368d/k370s/n208d/q295e/n384d/q418e/n421d/e233p/l234v/l235a/g236del/s267k，并且第二fc结构域包含氨基酸变体s364k/e357q/e233p/l234v/l235a/g236del/s267k，并且其中编号是根据eu编号进行的。

112、在一些实施方案中，所述第一变体fc结构域和所述第二变体fc结构域各自包含氨基酸变体428/434s。

113、在某些实施方案中，所述第一抗原结合结构域或所述第二抗原结合结构域结合cd28，并且另一抗原结合结构域结合肿瘤相关抗原(taa)。

114、在某些实施方案中，所述第二抗原结合结构域结合cd28和vh2，并且vl分别包含以下cd28结合结构域中的任一个的可变重结构域和可变轻结构域：1a7[cd28]_h1l1、1a7[cd28]_h1.14l1、1a7[cd28]_h1_l1.71、1a7[cd28]_h1.1_l1.71、1a7[cd28]_h1.14_l1.71、cd28.3[cd28]_h0l0、hcd28.3[cd28]_h1l1、5.11a1[cd28]_h0l0、tgn1412_h1l1、341vl34[cd28]_h1l1、341vl36[cd28]_h1l1、281vl4[cd28]_h1l1、hutn228[cd28]_h1l1、pv1[cd28]_h0l0、m9.3[cd28]_h0l0和hu9.3[cd28]_h1l1。

115、在一些实施方案中，所述第一抗原结合结构域结合tta。在示例性实施方案中，taa是b7h3。在示例性实施方案中，vh1和vl分别包含以下b7h3结合结构域中的任一个的可变重结构域和可变轻结构域：2e4a3.189[b7h3]_h1l1、2e4a3.189[b7h3]_h1/1a7[cd28]_l1、2e4a3.189[b7h3]_h1.22l1、2e4a3.189[b7h3]_h1.22/1a7[cd28]_l1、6a1[b7h3]_h1l1、奥博妥单抗、依诺妥珠单抗、brca84d、brca69d、prca157、huprca157、mab-d、humab-d、m30、m30-h1-l4、sp265、s10-h50l58、8h9、m852、m857、m8524、1-1、1-2、1-4、1-5、1-7、2-5、2-8、chab2、chab3、chab4、chab18、chab13、chab12、chab14、chab6、chab11、chab16、chab10、chab7、chab8、chab17、chab5、huab3v2.5、huab3v2.6、huab13v1、tpp-5706、tpp-6642、tpp-6850、tpp-3803、trl4542、h1702、h1703、hua3、hua9和m1704。

116、在示例性实施方案中，所述第一抗原结合结构域结合b7h3，并且所述第二抗原结合结构域结合cd28，vh1是可变重结构域2e4a3.189[b7h3]_h1.22，vh2是可变重结构域1a7[cd28]_h1.14，并且vl是可变轻结构域1a7[cd28]_l1。

117、在一方面，本文提供抗cd28 x抗taa 2+1clc异源二聚抗体，其包含：a)第一单体，所述第一单体从n末端到c末端包含vh1-ch1-接头-vh1-ch1-铰链-ch2-ch3，其中vh1各自是第一可变重结构域，并且ch2-ch3是第一fc结构域；b)第二单体，所述第二单体从n末端到c末端包含vh2-ch1-铰链-ch2-ch3，其中vh2是第二可变重结构域，并且ch2-c3是第二fc结构域；和c)共同轻链，所述共同轻链从n末端到c末端包含vl-cl，其中vl是可变轻结构域，并且cl是恒定轻结构域，其中第一可变重结构域和可变轻结构域各自形成第一抗原结合结构域，并且第二可变重结构域和可变轻结构域形成第二抗原结合结构域。

118、在一些实施方案中，所述第一fc结构域和所述第二fc结构域各自是变体fc结构域。在一些实施方案中，所述第一fc结构域和所述第二fc结构域包含选自以下异源二聚化变体的一组异源二聚化偏斜变体：s364k/e357q：l368d/k370s；s364k：l368d/k370s；s364k：l368e/k370s；d401k：t411e/k360e/q362e；和t366w：t366s/l368a/y407v，其中编号是根据eu编号进行的。在某些实施方案中，所述第一fc结构域和所述第二fc结构域包含异源二聚化偏斜变体s364k/e357q：l368d/k370s。

119、在几个实施方案中，所述第一fc结构域和所述第二fc结构域各自包含一种或多种消融变体。在示例性实施方案中，所述一种或多种消融变体是e233p/l234v/l235a/g236del/s267k，其中编号是根据eu编号进行的。

120、在特定实施方案中，所述第一单体或所述第二单体中的一者进一步包含pi变体。在示例性实施方案中，所述第一单体的ch1-铰链-ch2-ch3包含pi变体n208d/q295e/n384d/q418e/n421d，其中编号是根据eu编号进行的。

121、在抗cd28 x抗taa 2+1clc异源二聚抗体的一些实施方案中，所述第一单体的ch1-铰链-ch2-ch3包含氨基酸变体l368d/k370s/n208d/q295e/n384d/q418e/n421d/e233p/l234v/l235a/g236del/s267k，所述第二fc结构域包含氨基酸变体s364k/e357q/e233p/l234v/l235a/g236del/s267k，并且其中编号是根据eu编号进行的。

122、在一些实施方案中，所述第一变体fc结构域和所述第二变体fc结构域各自包含氨基酸变体428/434s。

123、在某些实施方案中，所述第一抗原结合结构域结合cd28，并且所述第二抗原结合结构域结合肿瘤相关抗原(taa)。在示例性实施方案中，vh1和vl分别包含以下cd28结合结构域中的任一个的可变重结构域和可变轻结构域：1a7[cd28]_h1l1、1a7[cd28]_h1.14l1、1a7[cd28]_h1_l1.71、1a7[cd28]_h1.1_l1.71、1a7[cd28]_h1.14_l1.71、cd28.3[cd28]_h0l0、hcd28.3[cd28]_h1l1、5.11a1[cd28]_h0l0、tgn1412_h1l1、341vl34[cd28]_h1l1、341vl36[cd28]_h1l1、281vl4[cd28]_h1l1、hutn228[cd28]_h1l1、pv1[cd28]_h0l0、m9.3[cd28]_h0l0和hu9.3[cd28]_h1l1。

124、在一些实施方案中，taa是b7h3。在示例性实施方案中，vh2和vl分别包含以下b7h3结合结构域中的任一个的可变重结构域和可变轻结构域：2e4a3.189[b7h3]_h1l1、2e4a3.189[b7h3]_h1/1a7[cd28]_l1、2e4a3.189[b7h3]_h1.22l1、2e4a3.189[b7h3]_h1.22/1a7[cd28]_l1、6a1[b7h3]_h1l1、奥博妥单抗、依诺妥珠单抗、brca84d、brca69d、prca157、huprca157、mab-d、humab-d、m30、m30-h1-l4、sp265、s10-h50l58、8h9、m852、m857、m8524、1-1、1-2、1-4、1-5、1-7、2-5、2-8、chab2、chab3、chab4、chab18、chab13、chab12、chab14、chab6、chab11、chab16、chab10、chab7、chab8、chab17、chab5、huab3v2.5、huab3v2.6、huab13v1、tpp-5706、tpp-6642、tpp-6850、tpp-3803、trl4542、h1702、h1703、hua3、hua9和m1704。

125、在一些实施方案中，vh1是可变重结构域1a7[cd28]_h1.14，vh2是可变重结构域2e4a3.189[b7h3]_h1.22，并且vl是可变轻结构域1a7[cd28]_l1。

126、在另一方面，本文提供选自以下异源二聚抗体的异源二聚抗体：xenp34730、xenp34389、xenp34728、xenp34717和xenp34339。

127、本文还提供编码本文提供的组合物和抗体的核酸组合物、包含此类核酸的表达载体和包含表达载体的宿主细胞。

128、在另一方面，本文提供治疗癌症的方法，所述方法包括向有此需要的患者施用本文提供的抗体(例如，抗cd28 x抗taa抗体)。在一些实施方案中，还向患者施用癌症治疗剂。在特定实施方案中，所述治疗剂是检查点抑制剂(例如，抗pd1抗体)或抗cd3 x抗taa双特异性抗体。