囊性纤维化跨膜传导调控因子的调节剂的制作方法

囊性纤维化跨膜传导调控因子的调节剂
1.本技术要求于2020年10月7日提交的美国临时申请第63/088,935号的优先权的权益，所述美国临时申请的内容通过引用以其整体并入。
2.本公开涉及囊性纤维化跨膜传导调控因子(cftr)的调节剂；含有所述调节剂的药物组合物；使用此类调节剂和药物组合物治疗包含囊性纤维化的cftr介导的疾病的方法；使用此类调节剂的组合疗法和组合药物组合物；以及用于制备此类调节剂的方法和中间体。
3.囊性纤维化(cf)是一种隐性遗传疾病，在全球范围内有约70,000名儿童及成人受到影响。尽管cf的治疗取得一定进展，但仍无法治愈。
4.在cf患者中，呼吸道上皮中内源性表达的cftr突变导致顶端阴离子分泌减少，使得离子和液体转运失衡。由此引起的阴离子转运减少导致肺中粘液累积增加，并且伴随微生物感染，最终导致cf患者死亡。除呼吸系统疾病之外，cf患者通常患有胃肠道问题和胰腺功能不全，如果不治疗，则会导致死亡。另外，大多数患有囊性纤维化的男性不育，并且患有囊性纤维化的女性的生育力降低。
5.关于cftr基因的序列分析已揭露出多种引起疾病的突变(cutting,g.r.等人(1990)nature 346:366-369；dean,m.等人(1990)cell 61:863:870；以及kerem,b-s.等人(1989)science 245:1073-1080；kerem,b-s等人(1990)proc.natl.acad.sci.usa 87:8447-8451)。迄今为止，已识别出cf基因中超过2000个突变；目前，cftr2数据库仅包含关于这些已识别突变中的432个的信息，有足够的证据将352个突变定义为致病性的。最普遍的致病突变是cftr氨基酸序列508位的苯丙氨酸缺失，并且通常称为f508del突变。该突变出现在许多囊性纤维化病例中，并且与严重疾病相关。
6.cftr中残基508的缺失阻止新生蛋白质正确地折叠。这导致突变蛋白无法离开内质网(er)并运输至质膜。因此，存在于膜中的用于阴离子转运的cftr通道的数目远低于在表达野生型cftr，即不含突变的cftr的细胞中观察到的数目。除了运输受损之外，突变导致缺陷性通道门控。膜中通道数目的减少和门控缺陷一起导致阴离子和流体跨上皮转运减少。(quinton,p.m.(1990),faseb j.4:2709-2727)。由于f508del突变而存在缺陷的通道仍是功能性的，尽管其功能小于野生型cftr通道。(dalemans等人(1991),nature lond.354:526-528；pasyk和foskett(1995),j.cell.biochem.270:12347-50)。除f508del之外，cftr中导致缺陷性运输、合成和/或通道门控的其他致病突变可以上调或下调以改变阴离子分泌并改变疾病进展和/或严重程度。
7.cftr是在包括吸收性和分泌性上皮细胞的各种细胞类型中表达的camp/atp介导的阴离子通道，其中它调控跨膜阴离子通量以及其他离子通道和蛋白质的活性。在上皮细胞中，cftr的正常功能对于维持电解质在全身(包括呼吸和消化组织)的转运至关重要。cftr由编码蛋白质的1480个氨基酸构成，所述蛋白质由跨膜结构域的串联重复序列组成，每个跨膜结构域含有六个跨膜螺旋和一个核苷酸结合结构域。两个跨膜结构域通过大的极性调控(r)结构域与多个磷酸化位点连接，从而调控通道活性和细胞运输。
8.氯离子转运通过存在于顶端膜上的enac和cftr以及细胞基底外侧表面上表达的
na
+-k
+-atp酶泵和cl-通道的协调活性进行。氯离子从内腔侧的次级主动转运导致细胞内氯离子积累，接着其可经由cl-通道被动地离开细胞，从而导致媒介物转运。na
+
/2cl-/k
+
共转运蛋白、na
+-k
+-atp酶泵和基底外侧表面上的基底外侧膜k
+
通道以及在内腔侧上cftr的布置经由内腔侧上cftr协调氯离子分泌。由于水自身可能无法主动转运，因此其跨上皮的流动取决于由钠和氯离子大量流动产生的微小跨上皮渗透梯度。
9.最近已鉴定出多种cftr调节性化合物。然而，仍然需要能够治疗或减轻囊性纤维化和其它cftr介导的疾病，并且尤其是这些疾病的更严重形式的化合物。
10.本公开的一方面提供了新颖化合物，所述新颖化合物包含式i的化合物、式ia、iia、iib、iii、iv、v和vi的化合物、化合物1-508、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物。
11.式i涵盖在以下结构范围内的化合物：
[0012][0013]
并且包括那些化合物的互变异构体、所述化合物和互变异构体中任一者的氘化衍生物，以及前述任一者的药学上可接受的盐，其中：
[0014]
环a选自：
[0015]
■c6-c
10
芳基，
[0016]
■c3-c
10
环烷基，
[0017]
■
3至10元杂环基，以及
[0018]
■
5至10元杂芳基；
[0019]
环b选自：
[0020]
■c6-c
10
芳基，
[0021]
■c3-c
10
环烷基，
[0022]
■
3至10元杂环基，以及
[0023]
■
5至10元杂芳基；
[0024]
v选自o和nh；
[0025]
w1选自n和ch；
[0026]
w2选自n和ch，条件是w1和w2中的至少一个是n；
[0027]
z选自o、nr
zn
和c(r
zc
)2，条件是当l2不存在时，z是c(r
zc
)2；
[0028]
每个l1独立地选自c(r
l1
)2和
[0029]
每个l2独立地选自c(r
l2
)2；
[0030]
环c选自任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的c
6-c
10
芳基：
[0031]
■
卤素，
[0032]
■c1-c6烷基，以及
[0033]
■
n(rn)2；
[0034]
每个r3独立地选自：
[0035]
■
卤素，
[0036]
■c1-c6烷基，
[0037]
■c1-c6烷氧基，
[0038]
■c3-c
10
环烷基，
[0039]
■
任选地被1-3个独立地选自c
1-c6烷基的基团取代的c
6-c
10
芳基，以及
[0040]
■
3至10元杂环基；
[0041]
r4选自氢和c
1-c6烷基；
[0042]
每个r5独立地选自：
[0043]
■
氢，
[0044]
■
卤素，
[0045]
■
羟基，
[0046]
■
n(rn)2，
[0047]
■‑
so-me，
[0048]
■‑
ch＝c(r
lc
)2，其中两个r
lc
一起形成c
3-c
10
环烷基，
[0049]
■
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的c
1-c6烷基：
[0050]
○
羟基，
[0051]
○
任选地被1-3个独立地选自c
1-c6烷氧基和c
6-c
10
芳基的基团取代的c
1-c6烷氧基，
[0052]
○c3-c
10
环烷基，
[0053]
○
任选地被1-3个独立地选自c
1-c6烷基和c
1-c6烷氧基的基团取代的-(o)
0-1-(c
6-c
10
芳基)，
[0054]
○
3至10元杂环基，以及
[0055]
○
n(rn)2，
[0056]
■
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的c
1-c6烷氧基：
[0057]
○
卤素，
[0058]
○c6-c
10
芳基，以及
[0059]
○
任选地被1-3个独立地选自c
1-c6氟烷基的基团取代的c
3-c
10
环烷基，
[0060]
■c1-c6氟烷基，
[0061]
■c3-c
10
环烷基，
[0062]
■c6-c
10
芳基，以及
[0063]
■
3至10元杂环基；
[0064]ryn
选自：
[0065]
■
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的c
3-c
10
环烷基：
[0066]
○
羟基，
[0067]
○
氧代，
[0068]
○
卤素，
[0069]
○
氰基，
[0070]
○
n(rn)2，
[0071]
○
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的c
1-c6烷基：
[0072]
◆
羟基，
[0073]
◆
氧代，
[0074]
◆
n(rn)2，
[0075]
◆c1-c6烷氧基，以及
[0076]
◆c6-c
10
芳基，
[0077]
○
任选地被1-3个独立地选自卤素、氧代、c
6-c
10
芳基和n(rn)2的基团取代的c
1-c6烷氧基，
[0078]
○
卤素，
[0079]
○c3-c
10
环烷基，
[0080]
○
任选地被1-3个独立地选自c
1-c6烷基的基团取代的3至10元杂环基，以及
[0081]
○
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的5至10元杂芳基：
[0082]
◆
羟基，
[0083]
◆
氰基，
[0084]
◆
氧代，
[0085]
◆
卤素，
[0086]
◆
n(rn)2，
[0087]
◆
任选地被1-3个独立地选自羟基、氧代、c
1-c6烷氧基和n(rn)2的基团取代的c
1-c6烷基，
[0088]
◆
任选地被1-3个独立地选自羟基、c
1-c6烷氧基、n(rn)2和c
3-c
10
环烷基的基团取代的c
1-c6烷氧基，
[0089]
◆c1-c6氟烷基，
[0090]
◆
任选地被1-3个独立地选自c
1-c6烷基的基团取代的-(o)
0-1-(c
3-c
10
环烷基)，
[0091]
◆c6-c
10
芳基，以及
[0092]
◆
任选地被1-3个独立地选自c
1-c6烷基的基团取代的3至10元杂环基，
[0093]
■c6-c
10
芳基，
[0094]
■
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的3至10元杂环基：
[0095]
○
氧代，
[0096]
○
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的c
1-c6烷基：
[0097]
◆
氧代，
[0098]
◆
羟基，
[0099]
◆
n(rn)2，以及
[0100]
◆
任选地被1-3个独立地选自卤素和c
6-c
10
芳基的基团取代的c
1-c6烷氧基，以及-(o)
0-1-(c
3-c
10
环烷基)，
[0101]
○c1-c6氟烷基，
[0102]
○
任选地被1-3个独立地选自卤素的基团取代的c
3-c
10
环烷基，以及
[0103]
○
3至10元杂环基，以及
[0104]
■
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的5至10元杂芳基：
[0105]
○
卤素，
[0106]
○
任选地被1-3个独立地选自氧代、c
1-c6烷氧基和n(rn)2的基团取代的c
1-c6烷基，以及
[0107]
○
任选地被1-3个独立地选自c
1-c6烷基(任选地被1-3个选自氧代、c
1-c6烷氧基和c
6-c
10
芳基的基团取代)的基团取代的3至10元杂环基；
[0108]rzn
选自：
[0109]
■
氢，
[0110]
■
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的c
1-c9烷基：
[0111]
○
羟基，
[0112]
○
氧代，
[0113]
○
氰基，
[0114]
○
任选地被1-3个独立地选自卤素和c
1-c6烷氧基的基团取代的c
1-c6烷氧基，
[0115]
○
n(rn)2，
[0116]
○
so2me，
[0117]
○
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的c
3-c
10
环烷基：
[0118]
◆
羟基，
[0119]
◆
任选地被1-3个独立地选自羟基、氧代、c
1-c6烷氧基、c
6-c
10
芳基和n(rn)2的基团取代的c
1-c6烷基，
[0120]
◆c1-c6氟烷基，
[0121]
◆c1-c6烷氧基，
[0122]
◆
cooh，
[0123]
◆
n(rn)2，
[0124]
◆c6-c
10
芳基，以及
[0125]
◆
任选地被1-3个独立地选自氧代和c
1-c6烷基的基团取代的3至10元杂环基，
[0126]
○
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的c
6-c
10
芳基：
[0127]
◆
卤素，
[0128]
◆
羟基，
[0129]
◆
氰基，
[0130]
◆
sime3，
[0131]
◆
so2me，
[0132]
◆
sf5，
[0133]
◆
n(rn)2，
[0134]
◆
p(o)me2，
[0135]
◆
任选地被1-3个独立地选自c
1-c6氟烷基的基团取代的-(o)
0-1-(c
3-c
10
环烷基)，
[0136]
◆
任选地被1-3个独立地选自羟基、氧代、c
1-c6烷氧基、5至10元杂芳基、so2me和n(rn)2的基团取代的c
1-c6烷基，
[0137]
◆
任选地被1-3个独立地选自羟基、氧代、n(rn)2和c
6-c
10
芳基的基团取代的c
1-c6烷氧基，
[0138]
◆c1-c6氟烷基，
[0139]
◆
任选地被1-3个独立地选自c
1-c6烷基的基团取代的3至10元杂环基，
[0140]
◆‑
(o)
0-1-(c
6-c
10
芳基)，以及
[0141]
◆
任选地被羟基、氧代、n(rn)2、c
1-c6烷基、c
1-c6烷氧基、c
1-c6氟烷基和c
3-c
10
环烷基取代的-(o)
0-1-(5至10杂芳基)，
[0142]
○
任选地被1-4个独立地选自以下的基团取代的3至10元杂环基：
[0143]
◆
羟基，
[0144]
◆
氧代，
[0145]
◆
n(rn)2，
[0146]
◆
任选地被1-3个独立地选自氧代和c
1-c6烷氧基的基团取代的c
1-c6烷基，
[0147]
◆c1-c6烷氧基，
[0148]
◆c1-c6氟烷基，
[0149]
◆
任选地被1-3个独立地选自卤素的基团取代的c
6-c
10
芳基，以及
[0150]
◆
5至10元杂芳基，以及
[0151]
○
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的5至10元杂芳基：
[0152]
◆
羟基，
[0153]
◆
氰基，
[0154]
◆
氧代，
[0155]
◆
卤素，
[0156]
◆
b(oh)2，
[0157]
◆
n(rn)2，
[0158]
◆
任选地被1-3个独立地选自羟基、氧代、c
1-c6烷氧基(任选地被1-3个-sime3取代)和n(rn)2的基团取代的c
1-c6烷基，
[0159]
◆
任选地被1-3个独立地选自羟基、氧代、c
1-c6烷氧基、n(rn)2和c
3-c
10
环烷基的基团取代的c
1-c6烷氧基，
[0160]
◆c1-c6氟烷基，
[0161]
◆
任选地被1-3个独立地选自c
1-c6烷基的基团取代的-(o)
0-1-(c
3-c
10
环烷基)，
[0162]
◆‑
(o)
0-1-(c
6-c
10
芳基)，
[0163]
◆
任选地被1-4个独立地选自羟基、氧代、卤素、氰基、n(rn)2、c
1-c6烷基(任选地被1-3个独立地选自羟基、氧代、n(rn)2和c
1-c6烷氧基的基团取代)、c
1-c6烷氧基、c
1-c6氟烷基和3至10元杂环基(任选地被1-3个独立地选自c
1-c6氟烷基的基团取代)的基团取代的-(o)
0-1-(3至10元杂环基)，以及
[0164]
◆
任选地被1-4个独立地选自c
1-c6烷基和c
3-c
10
环烷基的基团取代的5至10元杂芳基，
[0165]
■c1-c6氟烷基，
[0166]
■
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的c
3-c
10
环烷基：
[0167]
○
羟基，
[0168]
○
氧代，
[0169]
○
卤素，
[0170]
○
氰基，
[0171]
○
n(rn)2，
[0172]
○
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的c
1-c6烷基：
[0173]
◆
羟基，
[0174]
◆
氧代，
[0175]
◆
n(rn)2，
[0176]
◆c1-c6烷氧基，以及
[0177]
◆c6-c
10
芳基，
[0178]
○
任选地被1-3个独立地选自卤素、氧代、c
6-c
10
芳基和n(rn)2的基团取代的c
1-c6烷氧基，
[0179]
○
卤素，
[0180]
○c3-c
10
环烷基，
[0181]
○
任选地被1-3个独立地选自c
1-c6烷基的基团取代的3至10元杂环基，以及
[0182]
○
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的5至10元杂芳基：
[0183]
◆
羟基，
[0184]
◆
氰基，
[0185]
◆
氧代，
[0186]
◆
卤素，
[0187]
◆
n(rn)2，
[0188]
◆
任选地被1-3个独立地选自羟基、氧代、c
1-c6烷氧基和n(rn)2的基团取代的c
1-c6烷基，
[0189]
◆
任选地被1-3个独立地选自羟基、c
1-c6烷氧基、n(rn)2和c
3-c
10
环烷基的基团取代的c
1-c6烷氧基，
[0190]
◆c1-c6氟烷基，
[0191]
◆
任选地被1-3个独立地选自c
1-c6烷基的基团取代的-(o)
0-1-(c
3-c
10
环烷基)，
[0192]
◆c6-c
10
芳基，以及
[0193]
◆
任选地被1-3个独立地选自c
1-c6烷基的基团取代的3至10元杂环基，
[0194]
■c6-c
10
芳基，
[0195]
■
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的3至10元杂环基：
[0196]
○
氧代，
[0197]
○
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的c
1-c6烷基：
[0198]
◆
氧代，
[0199]
◆
羟基，
[0200]
◆
n(rn)2，
[0201]
◆
任选地被1-3个独立地选自卤素和c
6-c
10
芳基的基团取代的c
1-c6烷氧基，以及
[0202]
◆‑
(o)
0-1-(c
3-c
10
环烷基)，
[0203]
○c1-c6氟烷基，
[0204]
○
任选地被1-3个独立地选自卤素的基团取代的c
3-c
10
环烷基，以及
[0205]
○
3至10元杂环基，
[0206]
■
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的5至10元杂芳基：
[0207]
○
卤素，
[0208]
○
任选地被1-3个独立地选自氧代、c
1-c6烷氧基和n(rn)2的基团取代的c
1-c6烷基，以及
[0209]
○
任选地被1-3个独立地选自c
1-c6烷基(任选地被1-3个选自氧代、c
1-c6烷氧基和c
6-c
10
芳基的基团取代)的基团取代的3至10元杂环基，以及
[0210]
■
rf；
[0211]
每个r
zc
独立地选自：
[0212]
■
氢，
[0213]
■
任选地被1-3个独立地选自c
6-c
10
芳基(任选地被1-3个独立地选自c
1-c6烷基的基团取代)的基团取代的c
1-c6烷基，
[0214]
■
任选地被1-3个独立地选自c
1-c6烷基的基团取代的c
6-c
10
芳基，以及
[0215]
■
rf；
[0216]
或者两个r
zc
一起形成氧代基团；
[0217]
每个r
l1
独立地选自：
[0218]
■
氢，
[0219]
■
n(rn)2，条件是两个n(rn)2不与同一碳结合，
[0220]
■
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的c
1-c9烷基：
[0221]
○
卤素，
[0222]
○
羟基，
[0223]
○
氧代，
[0224]
○
n(rn)2，
[0225]
○
任选地被1-3个独立地选自c
6-c
10
芳基的基团取代的c
1-c6烷氧基，
[0226]
○
任选地被1-3个独立地选自卤素和c
1-c6氟烷基的基团取代的c
3-c
10
环烷基，
[0227]
○
任选地被1-3个独立地选自c
1-c6烷基的基团取代的c
6-c
10
芳基，以及
[0228]
○
任选地被1-3个独立地选自c
1-c6烷基(任选地被1-3个独立地选自羟基和氧代的基团取代)的基团取代的3至10元杂环基，
[0229]
■c3-c
10
环烷基，
[0230]
■
任选地被1-4个独立地选自以下的基团取代的c
6-c
10
芳基：
[0231]
○
卤素，
[0232]
○
氰基，
[0233]
○
sime3，
[0234]
○
pome2，
[0235]
○
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的c
1-c7烷基：
[0236]
◆
羟基，
[0237]
◆
氧代，
[0238]
◆
氰基，
[0239]
◆
sime3，
[0240]
◆
n(rn)2，以及
[0241]
◆
任选地被1-3个独立地选自c
1-c6氟烷基的基团取代的c
3-c
10
环烷基，
[0242]
○
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的c
1-c6烷氧基：
[0243]
◆
任选地被1-3个独立地选自c
1-c6氟烷基的基团取代的c
3-c
10
环烷基，以及
[0244]
◆c1-c6烷氧基，
[0245]
○c1-c6氟烷基，
[0246]
○
任选地被1-3个独立地选自c
1-c6烷基和c
1-c6氟烷基的基团取代的c
3-c
10
环烷基，
[0247]
○c6-c
10
芳基，
[0248]
○
任选地被1-3个独立地选自c
1-c6烷基的基团取代的3至10元杂环基，以及
[0249]
○
5至10元杂芳基，
[0250]
■
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的3至10元杂环基：
[0251]
○
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的c
1-c6烷基：
[0252]
◆
氧代，以及
[0253]
◆c1-c6烷氧基，
[0254]
■
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的5至10元杂芳基：
[0255]
○
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的c
1-c6烷基：
[0256]
◆
任选地被1-3个独立地选自c
1-c6氟烷基的基团取代的c
3-c
10
环烷基，以及
[0257]
○
任选地被1-3个独立地选自c
1-c6烷基的基团取代的c
6-c
10
芳基，以及
[0258]
■
rf；
[0259]
或者同一碳原子上的两个r
l1
一起形成氧代基团；
[0260]
每个r
l2
独立地选自氢和rf；
[0261]
或者同一碳原子上的两个r
l2
一起形成氧代基团；
[0262]
每个rn独立地选自：
[0263]
■
氢，
[0264]
■
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的c
1-c8烷基：
[0265]
○
氧代，
[0266]
○
卤素，
[0267]
○
羟基，
[0268]
○
nh2，
[0269]
○
nhme，
[0270]
○
nme2，
[0271]
○
nhcome，
[0272]
○
任选地被1-3个独立地选自c
6-c
10
芳基的基团取代的c
1-c6烷氧基，
[0273]
○‑
(o)
0-1-(c
3-c
10
环烷基)，
[0274]
○
任选地被1-3个独立地选自卤素和c
1-c6烷基的基团取代的c
6-c
10
芳基，
[0275]
○
任选地被1-4个独立地选自氧代和c
1-c6烷基的基团取代的3至14元杂环基，以及
[0276]
○
任选地被1-4个独立地选自氧代和c
1-c6烷基的基团取代的5至14元杂芳基，
[0277]
■
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的c
3-c
10
环烷基：
[0278]
○
羟基，
[0279]
○
nh2，
[0280]
○
nhme，以及
[0281]
○
任选地被1-3个独立地选自羟基的基团取代的c
1-c6烷基，以及
[0282]
■c6-c
10
芳基，以及
[0283]
■
3至10元杂环基；
[0284]
或者同一氮原子上的两个rn与其所结合的氮一起形成任选地被1-3个选自以下的基团取代的3至10元杂环基：
[0285]
■
羟基，
[0286]
■
氧代，
[0287]
■
氰基，
[0288]
■
任选地被1-3个独立地选自氧代、羟基、c
1-c6烷氧基和n(r
n2
)2的基团取代的c
1-c6烷基，其中每个r
n2
独立地选自氢和c
1-c6烷基，
[0289]
■c1-c6烷氧基，以及
[0290]
■c1-c6氟烷基；
[0291]
或者一个r4和一个r
l1
一起形成c
6-c8亚烷基；
[0292]
当rf存在时，两个rf与其所结合的原子一起形成选自以下的基团：
[0293]
■
任选地被1-3个独立地选自c
1-c6烷基的基团取代的c
3-c
10
环烷基，
[0294]
■
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的c
6-c
10
芳基：
[0295]
○
卤素，
[0296]
○c1-c6烷基，
[0297]
○
n(rn)2，以及
[0298]
○
任选地被1-3个独立地选自羟基的基团取代的3至10元杂环基，
[0299]
■
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的3至11元杂环基：
[0300]
○
氧代，
[0301]
○
n(rn)2，
[0302]
○
任选地被1-4个独立地选自以下的基团取代的c
1-c9烷基：
[0303]
◆
氧代，
[0304]
◆
卤素，
[0305]
◆
羟基，
[0306]
◆
n(rn)2，
[0307]
◆‑
so
2-(c
1-c6烷基)，
[0308]
◆
任选地被1-3个独立地选自卤素、c
6-c
10
芳基的基团取代的c
1-c6烷氧基，
[0309]
◆
任选地被1-3个独立地选自羟基、卤素、氰基、c
1-c6烷基(任选地被1-3个独立地选自氧代和c
1-c6烷氧基的基团取代)、c
1-c6烷氧基(任选地被1-3个独立地选自c
6-c
10
芳基的基团取代)、-(o)
0-1-(c
1-c6氟烷基)和c
6-c
10
芳基(任选地被1-3个独立地选自c
1-c6烷氧基的基团取代)的基团取代的c
6-c
10
芳基，
[0310]
◆
任选地被1-4个独立地选自羟基、卤素、n(rn)2、c
1-c6烷基(任选地被1-3个独立
地选自氧代、羟基和c
1-c6烷氧基的基团取代)、c
1-c6氟烷基和c
6-c
10
芳基的基团取代的-(o)
0-1-(c
3-c
10
环烷基)，
[0311]
◆
任选地被1-3个独立地选自氧代、c
1-c6烷基(任选地被1-3个独立地选自c
6-c
10
芳基(任选地被1-3个独立地选自卤素的基团取代)的基团取代)、c
1-c6烷氧基、c
3-c
10
环烷基和rn的基团取代的3至10元杂环基，
[0312]
◆
任选地被1-3个独立地选自c
6-c
10
芳基(任选地被1-3个独立地选自卤素的基团取代)和c
1-c6烷基的基团取代的-o-(5至12元杂芳基)，以及
[0313]
◆
任选地被1-3个独立地选自羟基、氧代、n(rn)2、c
1-c6烷基(任选地被1-3个独立地选自氰基的基团取代)、c
1-c6烷氧基、-(o)
0-1-(c
1-c6氟烷基)、-o-(c
6-c
10
芳基)和c
3-c
10
环烷基的基团取代的5至10元杂芳基，
[0314]
○
任选地被1-4个独立地选自卤素、c
1-c6烷基和c
1-c6氟烷基的基团取代的c
3-c
12
环烷基，
[0315]
○c6-c
10
芳基，
[0316]
○
3至10元杂环基，以及
[0317]
○
任选地被1-3个独立地选自c
1-c6烷氧基和c
1-c6氟烷基的基团取代的5至10元杂芳基，以及
[0318]
■
任选地被1-3个独立地选自c
1-c6烷基和c
1-c6氟烷基的基团取代的5至12元杂芳基；
[0319]
条件是所述化合物不选自：
[0320]
(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2-甲基丙基)-12-{螺[2.3]己-5-基}-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮，
[0321]
(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2-甲基丙基)-12-[(1,1,2,2-四氘)螺[2.3]己-5-基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮，
[0322]
(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-12-(4,4,5,6,6-五氘螺[2.3]己-5-基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-酮，
[0323]
(11r)-12-(5-氘螺[2.3]己-5-基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-酮，以及
[0324]
(11r)-6-[2,6-二(三氘)甲基苯基]-11-(2-甲基丙基)-12-{螺[2.3]己-5-基}-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮。
[0325]
式i还包含式ia化合物：
[0326][0327]
那些化合物的互变异构体、所述化合物和互变异构体中任一者的氘化衍生物，以及前述任一者的药学上可接受的盐，其中环a、环b、w1、w2、z、l1、l2、r3、r4、r5和r
yn
如式i所定义，条件是所述化合物不选自：
[0328]
(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2-甲基丙基)-12-{螺[2.3]己-5-基}-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮，
[0329]
(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2-甲基丙基)-12-[(1,1,2,2-四氘)螺[2.3]己-5-基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮，
[0330]
(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-12-(4,4,5,6,6-五氘螺[2.3]己-5-基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-酮，
[0331]
(11r)-12-(5-氘螺[2.3]己-5-基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-酮，以及
[0332]
(11r)-6-[2,6-二(三氘)甲基苯基]-11-(2-甲基丙基)-12-{螺[2.3]己-5-基}-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮。
[0333]
式i还包含式iia化合物：
[0334][0335]
那些化合物的互变异构体、所述化合物和互变异构体中任一者的氘化衍生物，以及前述任一者的药学上可接受的盐，其中环b、w1、w2、z、l1、l2、r3、r4、r5和r
yn
如式i所定义，条件是所述化合物不选自：
[0336]
(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2-甲基丙基)-12-{螺[2.3]己-5-基}-9-氧杂-2
氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮。
[0349]
式i还包含式iii化合物：
[0350][0351]
那些化合物的互变异构体、所述化合物和互变异构体中任一者的氘化衍生物，以及前述任一者的药学上可接受的盐，其中w1、w2、z、l1、l2、r4、r5和r
yn
如式i所定义，条件是所述化合物不选自：
[0352]
(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2-甲基丙基)-12-{螺[2.3]己-5-基}-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮，
[0353]
(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2-甲基丙基)-12-[(1,1,2,2-四氘)螺[2.3]己-5-基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮，
[0354]
(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-12-(4,4,5,6,6-五氘螺[2.3]己-5-基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-酮，
[0355]
(11r)-12-(5-氘螺[2.3]己-5-基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-酮，以及
[0356]
(11r)-6-[2,6-二(三氘)甲基苯基]-11-(2-甲基丙基)-12-{螺[2.3]己-5-基}-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮。
[0357]
式i还包含式iv化合物：
[0358][0359]
那些化合物的互变异构体、所述化合物和互变异构体中任一者的氘化衍生物，以及前述任一者的药学上可接受的盐，其中z、l1、l2、r1、r4、r5和r
yn
如式i所定义，条件是所述
化合物不选自：
[0360]
(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2-甲基丙基)-12-{螺[2.3]己-5-基}-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮，
[0361]
(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2-甲基丙基)-12-[(1,1,2,2-四氘)螺[2.3]己-5-基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮，
[0362]
(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-12-(4,4,5,6,6-五氘螺[2.3]己-5-基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-酮，
[0363]
(11r)-12-(5-氘螺[2.3]己-5-基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-酮，以及
[0364]
(11r)-6-[2,6-二(三氘)甲基苯基]-11-(2-甲基丙基)-12-{螺[2.3]己-5-基}-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮。
[0365]
式i还包含式v化合物：
[0366][0367]
那些化合物的互变异构体、所述化合物和互变异构体中任一者的氘化衍生物，以及前述任一者的药学上可接受的盐，其中z、l1、l2、r4、r5和r
yn
如式i所定义，条件是所述化合物不选自：
[0368]
(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2-甲基丙基)-12-{螺[2.3]己-5-基}-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮，
[0369]
(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2-甲基丙基)-12-[(1,1,2,2-四氘)螺[2.3]己-5-基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮，
[0370]
(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-12-(4,4,5,6,6-五氘螺[2.3]己-5-基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-酮，
[0371]
(11r)-12-(5-氘螺[2.3]己-5-基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-酮，以及
[0372]
(11r)-6-[2,6-二(三氘)甲基苯基]-11-(2-甲基丙基)-12-{螺[2.3]己-5-基}-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮。
[0373]
式i还包含式vi化合物：
[0374][0375]
那些化合物的互变异构体、所述化合物和互变异构体中任一者的氘化衍生物，以及前述任一者的药学上可接受的盐，其中l1、r4、r5和r
yn
如式i所定义，条件是所述化合物不选自：
[0376]
(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2-甲基丙基)-12-{螺[2.3]己-5-基}-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮，
[0377]
(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2-甲基丙基)-12-[(1,1,2,2-四氘)螺[2.3]己-5-基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮，
[0378]
(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-12-(4,4,5,6,6-五氘螺[2.3]己-5-基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-酮，
[0379]
(11r)-12-(5-氘螺[2.3]己-5-基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-酮，以及
[0380]
(11r)-6-[2,6-二(三氘)甲基苯基]-11-(2-甲基丙基)-12-{螺[2.3]己-5-基}-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮。
[0381]
本公开的另一方面提供了药物组合物，所述药物组合物包括选自本文所公开的新颖化合物的至少一种化合物、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐以及至少一种药学上可接受的载体。这些组合物可还包含至少一种额外活性药物成分。在本文所公开的药物组合物的一些实施例中，所述至少一种另外的活性药物成分是至少一种其它cftr调节剂。在一些实施例中，所述至少一种其它cftr调节剂选自cftr增效剂和cftr调节剂。
[0382]
因此，本公开的另一方面提供了治疗cftr介导的疾病囊性纤维化的方法，所述方法包括施用选自本文所公开的新颖化合物的化合物、其药学上可接受的盐和前述任一者的氘化衍生物以及至少一种药学上可接受的载体中的至少一种。在一些实施例中，所述方法包括施用本文所公开的药物组合物，其中所述药物组合物包括至少一种另外的活性药物成分。在一些实施例中，所述至少一种另外的活性成分是至少一种其它cftr调节剂。在一些实施例中，所述至少一种其它cftr调节剂选自cftr增效剂和cftr调节剂。
[0383]
在某些实施例中，本公开的药物组合物包括选自式i的化合物、式ia、iia、iib、iii、iv、v和vi的化合物、化合物1-508、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物。在一些实施例中，包括选自式i的化合物、式ia、iia、iib、iii、iv、v和vi的化合物、化合物1-508、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物的组合物可以任选地进一步包括：(a)选自(r)-1-(2,2-二氟苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯-5-基)-n-(1-(2,3-二羟基丙基)-6-氟-2-(1-羟基-2-甲基丙烷-2-基)-1h-吲哚-5-基)环丙烷甲酰胺(替扎卡托(tezacaftor))、3-(6-(1-(2,2-二氟苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯-5-基)环丙烷甲酰胺基)-3-甲基吡啶-2-基)苯甲酸(鲁玛卡托(lumacaftor))和替扎卡托和鲁玛卡托的氘化衍生物以及药学上可接受的盐的至少一种化合物；和/或(b)选自n-[2,4-双(1,1-二甲基乙基)-5-羟基苯基]-1,4-二氢-4-氧代喹啉-3-甲酰胺(依伐卡托(ivacaftor))、n-(2-(叔丁基)-5-羟基-4-(2-(甲基-d3)丙烷-2-基-1,1,1,3,3,3-d6)苯基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-甲酰胺(氘替卡托(deutivacaftor))、(6r,12r)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇、依伐卡托、氘替卡托的氘化衍生物和(6r,12r)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇以及前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物。
[0384]
本公开的另一方面提供了治疗cftr介导的疾病囊性纤维化的方法，所述方法包括向有需要的患者施用选自本文所公开的新颖化合物、其药学上可接受的盐以及前述任一项的氘化衍生物的至少一种化合物，并且任选地进一步施用选自替扎卡托、依伐卡托、氘替卡托、(6r,12r)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇和鲁玛卡托的一种或多种另外的cftr调节剂。
[0385]
在另外的方面，本公开的化合物(例如，式i的化合物、式ia、iia、iib、iii、iv、v和vi中的任一个的化合物、化合物1-508、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐)和包括这些化合物，并且任选地进一步包括一种或多种cftr调节剂的药物组合物用于治疗或药物制造。在一些实施例中，所述一种或多种另外的cftr调节剂选自cftr增效剂。在一些实施例中，所述一种或多种另外的cftr调节剂选自cftr校正剂。在一些实施例中，所述一种或多种另外的cftr调节剂选自替扎卡托、鲁玛卡托、依伐卡托、氘替卡托、(6r,12r)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇和前述任一项的氘化衍生物和药学上可接受的盐。
[0386]
本公开的另外的方面提供了用于制备本文所公开的化合物和组合物的中间体和方法。
[0387]
定义
[0388]
如本文所使用的“替扎卡托”是指(r)-1-(2,2-二氟苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯-5-基)-n-(1-(2,3-二羟基丙基)-6-氟-2-(1-羟基-2-甲基丙烷-2-基)-1h-吲哚-5-基)环丙烷甲酰胺，其可用以下结构描绘：
[0389][0390]
替扎卡托可以呈氘化衍生物、药学上可接受的盐或氘化衍生物的药学上可接受的盐的形式。在wo 2010/053471、wo 2011/119984、wo 2011/133751、wo 2011/133951、wo 2015/160787和us 2009/0131492中公开了替扎卡托以及制备和使用替扎卡托的方法，所述文献中的每一个通过引用并入本文。
[0391]
如本公开全文中使用的“依伐卡托”是n-[2,4-双(1,1-二甲基乙基)-5-羟基苯基]-1,4-二氢-4-氧代喹啉-3-甲酰胺，其由以下结构描绘：
[0392][0393]
依伐卡托也可以呈氘化衍生物、药学上可接受的盐或氘化衍生物的药学上可接受的盐的形式。在wo 2006/002421、wo 2007/079139、wo 2010/108162和wo 2010/019239中公开了依伐卡托以及制备和使用依伐卡托的方法，所述文献中的每一个通过引用并入本文。
[0394]
在一些实施例中，在本文所公开的组合物和方法中使用依伐卡托的氘化衍生物(氘替卡托)。氘替卡托的化学名称为n-(2-(叔丁基)-5-羟基-4-(2-(甲基-d3)丙烷-2-基-1,1,1,3,3,3-d6)苯基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-甲酰胺，如以下结构所描绘：
[0395][0396]
氘替卡托可以呈另外的氘化衍生物、药学上可接受的盐或氘化衍生物的药学上可接受的盐的形式。在wo 2012/158885、wo 2014/078842和美国专利第8,865,902号中公开了氘替卡托以及制备和使用氘替卡托的方法，所述文献中的每一个通过引用并入本文。
[0397]
如本文所使用，“鲁玛卡托”是指3-(6-(1-(2,2-二氟苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯-5-基)环丙烷甲酰胺基)-3-甲基吡啶-2-基)苯甲酸，其化学结构描绘如下：
[0398][0399]
鲁玛卡托可以呈氘化衍生物、药学上可接受的盐或氘化衍生物的药学上可接受的
盐的形式。在wo 2007/056341、wo 2009/073757和wo 2009/076142中公开了鲁玛卡托以及制备和使用鲁玛卡托的方法，所述文献中的每一个通过引用并入本文。
[0400]
如本文所使用的，术语“烷基”是指含有碳原子(例如，1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20个碳原子)的饱和或部分饱和、支链或无支链的脂肪烃，其中相邻碳原子之间的一个或多个键可以是双键(烯基)或三键(炔基)。烷基可以是被取代或未被取代的。
[0401]
如本文所使用的，术语“卤代烷基”是指被一个或多个卤素原子取代的烷基，例如氟烷基，是指被一个或多个氟原子取代的烷基。
[0402]
如本文所使用的，术语“烷氧基”是指与氧原子共价结合的烷基或环烷基。烷氧基可以是被取代或未被取代的。
[0403]
如本文所用，术语“卤代烷氧基”是指被一或多个卤素原子取代的烷氧基。
[0404]
如本文所使用的，“环烷基”是指具有3至12个碳(例如3-10个碳)的环状、双环、三环或多环非芳香族烃基团并且可以包含一个或多个不饱和键。“环烷基”涵盖单环、双环、三环、桥连环、稠合环和螺环，包括单螺环和二螺环。环烷基的非限制性实例是环丙基、环丁基、环戊基、环己基、金刚烷基、降冰片基、二螺[2.0.2.1]庚烷和螺[2,3]己烷。环烷基可以是被取代或未被取代的。
[0405]
如本文所使用的术语“芳基”是源自芳香族环的官能团或取代基并且涵盖单环芳香族环和双环、三环和稠合的环体系，其中所述体系中的至少一个环是芳香族的。芳基的非限制性实例包含苯基、萘基和1,2,3,4-四氢萘基。
[0406]
如本文所使用的术语“杂芳基环”是指包括至少一个环原子的芳香族环，所述环原子是如o、n或s等杂原子。杂芳基涵盖单环和双环、三环、桥连环、稠合环和螺环体系(包含单螺环和双螺环)，其中所述体系中的至少一个环是芳香族的。杂芳基环的非限制性实例包含吡啶、喹啉、吲哚和二氢吲哚。
[0407]
如本文所使用的，术语“杂环基环”是指在环中含有3至12个原子(例如，3-10个原子)的非芳香族烃，所述环包括至少一个环原子，所述环原子是如o、n或s等杂原子，并且可以包含一个或多个不饱和键。“杂环基”环涵盖单环、双环、三环、多环、桥连环、稠合环和螺环，包括单螺环和二螺环。
[0408]“被取代的”，无论前面是否带有术语“任选地”，均指示“被取代的”基团中的至少一个氢被取代基置换。除非另外指示，否则“任选地被取代”的基团可在该基团的每个可取代位置处具有合适的取代基，并且当任何给定结构中的多于一个位置可以被选自指定基团的多于一个取代基取代时，在每个位置处的取代基可以相同或不同。
[0409]
氮的保护基团的非限制性实例包含，例如，氨基甲酸叔丁酯(boc)、苄基(bn)、对甲氧基苄基(pmb)、四氢吡喃基(thp)、9-芴基氨基甲酸甲酯(fmoc)、氨基甲酸苄酯(cbz)、氨基甲酸甲酯、氨基甲酸乙酯、2,2,2-三氯乙基氨基甲酸酯(troc)、2-三甲基甲硅烷基乙基氨基甲酸酯(teoc)、氨基甲酸烯丙酯(aloc或alloc)、甲酰胺、乙酰胺、苯甲酰胺、烯丙胺、三氟乙酰胺、三苯基甲胺、亚苄基胺和对甲苯磺酰胺。氮保护基的完整列表可见于wuts,p.g.m.“greene's protective groups in organic synthesis:fifth edition,”2014,john wiley and sons。
[0410]
如本文所使用，“一或多种氘化衍生物”是指具有与参考化合物相同的化学结构并
且一个或多个氢原子被氘原子置换的化合物。在一些实施例中，被氘替代的所述一个或多个氢是烷基的一部分。在一些实施例中，被氘替代的所述一个或多个氢是甲基的一部分。
[0411]
在提及一种或多种特定化合物时，短语“和氘化衍生物及其药学上可接受的盐”可与“和氘化衍生物及其前述任一者的药学上可接受的盐”互换使用。如本文所使用的，这些术语旨在包含所述一种或多种特定化合物的氘化衍生物和所述一种或多种特定化合物的药学上可接受的盐，以及所述一种或多种特定化合物的氘化衍生物的药学上可接受的盐。
[0412]
如本文所用，“cftr”是指囊性纤维化跨膜传导调控因子。
[0413]
如本文所用，术语“cftr调节剂”是指增加cftr活性的化合物。由cftr调节剂引起的活性增加包括但不限于对cftr进行校正、增强、稳定化和/或扩增的化合物。
[0414]
如本文中可互换使用的，术语“cftr校正剂”或“校正剂”是指促进cftr的加工和运输以增加细胞表面的cftr量的化合物。本文公开的新颖化合物是cftr校正剂。如本文所提及的替扎卡托、鲁玛卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐也是cftr校正剂。
[0415]
如本文中可互换使用的，术语“cftr增效剂”和“增效剂”是指增加位于细胞表面的cftr蛋白的通道活性，从而增强离子转运的化合物。依伐卡托、氘替卡托、(6r,12r)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇和其氘化衍生物以及药学上可接受的盐是cftr增效剂。应当理解，当描述选自式i的化合物、式ia、iia、iib、iii、iv、v和vi的化合物、化合物1-508、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的化合物的组合时，所述组合将通常但不一定包含cftr增效剂，例如依伐卡托、氘替卡托、(6r,12r)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇或前述任一项的氘化衍生物或药学上可接受的盐。另外，组合将通常但不一定仅包含单个增效剂，但可以包含多于单个校正剂。因此，在一些实施例中，选自式i的化合物、式ia、iia、iib、iii、iv、v和vi中的任一个的化合物、化合物1-508、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物的组合将包含选自依伐卡托、氘替卡托、(6r,12r)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的增效剂，并且还可以包含另一种cftr校正剂，例如选自替扎卡托、鲁玛卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的校正剂化合物。
[0416]
如本文所使用的，术语“选自
…
的至少一种化合物”是指从特定组中选择化合物中的一种或多种。
[0417]
在本公开中提及“化合物1-508”意在表示单独提及化合物1至508中的每一种或者提及化合物组，例如化合物1-474、化合物475-506以及化合物507和508。
[0418]
如本文所使用的，术语“活性药物成分”或“治疗剂”(“api”)是指生物活性化合物。
[0419]
术语“患者”和“受试者”可互换使用并且指包括人的动物。
[0420]
术语“有效剂量”和“有效量”在本文中可互换使用，并且指产生施用化合物所期望的效果(例如，cf或cf的症状改善，或cf或cf症状的严重程度减轻)的化合物的量。有效剂量的确切量将取决于治疗目的，并且将由本领域技术人员使用已知技术确定(参见例如lloyd(1999)the art,science and technology of pharmaceutical compounding)。
[0421]
如本文所使用，术语“治疗(treatment/treating)”等通常意指改善受试者的cf的一种或多种症状，或减轻cf或cf的一种或多种症状的严重程度。如本文所使用，“治疗”包括但不限于以下：受试者的生长增加、体重增益增加、肺粘液减少、胰腺和/或肝功能改善、胸部感染减轻和/或咳嗽或呼吸急促减轻。可以根据本领域已知的标准方法和技术容易地评估这些症状中任一者的改善或其严重程度的减轻。
[0422]
如本文所用，当提及两种或更多种化合物、药剂或另外的活性药物成分时，术语“与
……
组合”意指在彼此之前、与其同时或在其之后向患者施用两种或更多种化合物、药剂或药物活性成分。
[0423]
应当理解，本文提及的使用本公开的一种或多种化合物任选地与一种或多种另外的cftr调节剂(例如，选自式i的化合物、式ia、iia、iib、iii、iv、v和vi中的任一个的化合物、化合物1-508、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的组合物，任选地与一种或多种另外的cftr调节剂组合)组合的治疗方法(例如，治疗cftr介导的疾病的方法或治疗囊性纤维化的方法)也应该被解释为提及：
[0424]-一种或多种化合物(例如，选自式i的化合物、式ia、iia、iib、iii、iv、v和vi中的任一个的化合物、化合物1-508、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的组合物，任选地与一种或多种另外的cftr调节剂组合)用于治疗例如囊性纤维化的方法，任选地与一种或多种另外的cftr调节剂组合；和/或
[0425]-一种或多种化合物(例如，选自式i的化合物、式ia、iia、iib、iii、iv、v和vi中的任一个的化合物、化合物1-508、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的组合物，任选地与一种或多种另外的cftr调节剂组合)在制备用于治疗例如囊性纤维化的药物中的用途。
[0426]
还应当理解，本文所提及的使用本公开的药物组合物(例如，包括选自式i的化合物、式ia、iia、iib、iii、iv、v和vi中的任一个的化合物、化合物1-508、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物，并且任选地进一步包括一种或多种另外的cftr调节剂的药物组合物)的治疗方法(例如，治疗cftr介导的疾病的方法或治疗囊性纤维化的方法)也应该被解释为提及：
[0427]-药物组合物(例如，包括选自式i的化合物、式ia、iia、iib、iii、iv、v和vi中的任一个的化合物、化合物1-508、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物，并且任选地进一步包括一种或多种另外的cftr调节剂的药物组合物)用于治疗例如囊性纤维化的方法；和/或
[0428]-药物组合物(例如，包括选自式i的化合物、式ia、iia、iib、iii、iv、v和vi中的任一个的化合物、化合物1-508、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物，并且任选地进一步包括一种或多种另外的cftr调节剂的药物组合物)在制备用于治疗例如囊性纤维化的药物中的用途。
[0429]
术语“约”和“大约”可以指由本领域技术人员确定的特定值的可接受误差，其部分取决于如何测量或确定所述值。在一些实施例中，术语“约”和“大约”意指给定值或范围的20％、15％、10％、5％、4％、3％、2％、1％或0.5％以内。
[0430]
如本文所使用，术语“溶剂”是指可至少部分溶解产物(产物溶解度》1g/l)的任何液体。
[0431]
如本文所用，术语“室温”或“环境温度”意指15℃至30℃。
[0432]
应当理解，本公开的某些化合物可以作为单独的立体异构体或对映异构体和/或这些立体异构体或对映异构体的混合物存在。
[0433]
本文公开的某些化合物可以互变异构体形式存在，并且两种互变异构形式都是预期的，即使仅描绘单一互变异构结构。例如，对化合物x的描述应被理解为包含其互变异构体化合物y并且反之亦然，以及其混合物：
[0434][0435]
如本文所用，“最低功能(mf)突变”是指与最低cftr功能相关的cftr基因突变(极低至无功能cftr蛋白)，并且包括例如与cftr通道打开和关闭能力的严重缺乏相关的突变，称为缺陷型通道门控或“门控突变”；与cftr细胞加工及其向细胞表面的递送的严重缺乏相关的突变；与没有(或最少)cftr合成相关的突变；以及与通道传导的严重缺陷相关的突变。
[0436]
如本文所使用的，术语“药学上可接受的盐”是指本公开的化合物的盐形式，其中所述盐是无毒的。本公开的化合物的药学上可接受的盐包括衍生自合适的无机和有机酸和碱的那些盐。例如，化合物的“游离碱”形式不含离子键结的盐。
[0437]
在提及本公开的一种或多种化合物或式时，短语“和氘化衍生物及其药学上可接受的盐”可与“和氘化衍生物及其前述任一者的药学上可接受的盐”互换使用。这些短语旨在涵盖所提及的化合物中任一者的药学上可接受的盐、所提及的化合物中任一者的氘化衍生物和那些氘化衍生物的药学上可接受的盐。
[0438]
本领域的普通技术人员将认识到，当公开“化合物或其药学上可接受的盐”的量时，化合物的药学上可接受的盐形式的量是等于化合物的游离碱的浓度的量。应注意，本文所公开的化合物或其药学上可接受的盐的量是以其游离碱形式计。
[0439]
合适的药学上可接受的盐是例如s.m.berge等人j.pharmaceutical sciences,1977,66,1-19中所公开的那些盐。例如，该文章的表1提供以下药学上可接受的盐：
[0440]
表1：
[0441][0442][0443]
药学上可接受的酸加成盐的非限制性实例包含：与如盐酸、氢溴酸、磷酸、硫酸或高氯酸等无机酸形成的盐；与如乙酸、草酸、马来酸、酒石酸、柠檬酸、琥珀酸或丙二酸等有机酸形成的盐；以及通过使用本领域中使用的其它方法(如离子交换)形成的盐。药学上可接受的盐的非限制性实例包括己二酸盐、褐藻酸盐、抗坏血酸、天冬氨酸盐、苯磺酸盐、苯甲酸盐、硫酸氢盐、硼酸盐、丁酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、柠檬酸盐、环戊烷丙酸盐、二葡萄糖酸盐、十二烷基硫酸、乙烷磺酸盐、甲酸盐、富马酸盐、葡庚糖酸盐、甘油磷酸盐、葡糖酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、氢碘酸盐、2-羟基-乙烷磺酸盐、乳糖醛酸盐、乳酸盐、月桂酸盐、月桂基硫酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、丙二酸盐、甲烷磺酸盐、2-萘磺酸盐、烟酸盐、硝酸盐、油酸盐、草酸盐、棕榈酸盐、双羟萘酸盐、果胶酸盐、过硫酸盐、3-苯基丙酸盐、磷酸盐、苦味酸盐、特戊酸盐、丙酸盐、硬脂酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐、酒石酸盐、硫氰酸盐、对甲苯磺酸盐、十一烷酸盐和戊酸盐。衍生自适当碱的药学上可接受的盐包括碱金属、碱土金属、铵和n
+
(c
1-4
烷基)4盐。本公开还设想本文公开的化合物的任何碱性含氮基团的季铵化。碱金属和碱土金属盐的合适非限制性实例包括钠、锂、钾、钙和镁。药学上可接受的盐的其它非限制性实例包括铵、季铵以及使用抗衡离子诸如卤离子、氢氧根、羧酸根、硫酸根、磷酸根、硝酸根、低碳数烷基磺酸根和芳基磺酸根形成的胺阳离子。药学上可接受的盐的其它合适的非限制性实例包括苯磺酸盐和葡糖胺盐。
[0444]
术语“选自(selected from)”和“选自(chosen from)”在本文中可互换使用。
[0445]
治疗方法
[0446]
本文所公开的任何新颖化合物，例如式i的化合物、式ia、iia、iib、iii、iv、v和vi的化合物、化合物1-508、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐，可以作为cftr调节剂，即，其调节体内的cftr活性。编码cftr的基因中发生突变的个体可以受益于接受cftr调节剂。cftr突变可能影响cftr的数量，即细胞表面处cftr通道的数量，或者其可以影响cftr功能，即每个通道打开和转运离子的功能。影响cftr数量的突变包括导致合成缺陷(i类缺陷)的突变、导致加工和运输缺陷(ii类缺陷)的突变、导致cftr合成减少(v类缺陷)的突变以及降低cftr的表面稳定性(vi类缺陷)的突变。影响cftr功能的突变包括导致门控缺陷(iii类缺陷)的突变和导致传导缺陷(iv类缺陷)的突变。一些cftr突变表现出多种类别的特征。cftr基因中的某些突变导致囊性纤维化。
[0447]
因此，在一些实施例中，本公开提供了治疗、减轻患者的囊性纤维化的严重程度或症状性治疗患者的囊性纤维化的方法，所述方法包括向患者施用有效量的本文所公开的任何新颖化合物，例如式i的化合物、式ia、iia、iib、iii、iv、v和vi的化合物、化合物1-508、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐单独或与如一种或多种cftr调节剂等另一种活性成分组合。在一些实施例中，所述一种或多种cftr调节剂选自依伐卡托、氘替卡托、鲁玛卡托和替扎卡托。在一些实施例中，患者具有f508del/最小功能(mf)基因型、f508del/f508del基因型(针对f508del突变为同型接合的)、f508del/门控基因型，或f508del/残余功能(rf)基因型。在一些实施例中，患者是异型接合的并且具有一个f508del突变。在一些实施例中，患者针对n1303k突变是同型接合的。
[0448]
在一些实施例中，5mg至500mg的本文所公开的化合物、其互变异构体、所述化合物或互变异构体的氘化衍生物或前述任一者的药学上可接受的盐每日施用。
[0449]
在一些实施例中，所述患者具有cftr基因中的至少一个f508del突变。在一些实施例中，基于体外数据，患者具有对本公开的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐作出应答的cftr基因突变。在一些实施例中，患者是异型接合的，并且在选自表2的一个等位基因上具有f508del突变并且在另一个等位基因上具有突变：
[0450]
表2：cftr突变
[0451]
[0452]
[0453][0454]
在一些实施例中，本公开还涉及使用前述化合物的同位素标记的化合物或其药学上可接受的盐的治疗方法，其中此类化合物和盐的化学式和变量各自独立地如上文或上述任何其他实施例所描述，前提条件是，其中一个或多个原子被原子质量或质量数不同于通常天然存在的原子的原子质量或质量数的原子置换(被同位素标记)。可商购并且适用于本公开的同位素的实例包括氢、碳、氮、氧、磷、氟和氯的同位素，分别例如2h、3h、
13
c、
14
c、
15
n、
18
o、
17
o、
31
p、
32
p、
35
s、
18
f和
36
cl。
[0455]
同位素标记的化合物和盐可以多种有益的方式使用。它们可适用于药物和/或各种类型的测定，诸如底物组织分布测定。例如，氚(3h)和/或碳-14(
14
c)标记的化合物因制备相对简单和可侦测性优良而特别适用于各种类型的测定，诸如底物组织分布测定。例如，氘(2h)标记的化合物在治疗上可用并且相较于非2h标记的化合物具有潜在的治疗优点。一般来说，相较于非同位素标记的化合物和盐，氘(2h)标记的化合物和盐可以由于以下所述的动力学同位素效应而具有较高的代谢稳定性。更高的代谢稳定性直接转化为增加的体内半衰期或较低的剂量，这可为所期望的。同位素标记的化合物和盐通常可以通过进行本文的合成方案和相关描述中、实例部分和制备部分中所公开的程序，用容易获得的同位素标记的反应物置换非同位素标记的反应物来制备。
[0456]
在一些实施例中，同位素标记的化合物和盐是氘(2h)标记的化合物和盐。在一些实施例中，同位素标记的化合物和盐被氘(2h)标记，其中一个或多个氢原子已被氘置换。在化学结构中，氘表示为“d”。
[0457]
并入本公开的同位素标记的化合物和盐中的同位素(例如，氘)的浓度可以由同位素富集因子限定。如本文所用，术语“同位素富集因子”意指指定同位素的同位素丰度与天然丰度之间的比率。在一些实施例中，如果本公开的化合物中的取代基表示为氘，则此类化合物对于每个指定氘原子具有的同位素富集因子为至少3500(在每个指定氘原子处的52.5％氘并入量)、至少4000(60％氘并入量)、至少4500(67.5％氘并入量)、至少5000(75％氘并入量)、至少5500(82.5％氘并入量)、至少6000(90％氘并入量)、至少6333.3(95％氘并入量)、至少6466.7(97％氘并入量)、至少6600(99％氘并入量)或至少6633.3(99.5％氘并入量)。
[0458]
组合疗法
[0459]
本文所公开的一方面提供了使用本文所公开的任何新颖化合物，例如式i的化合物、式ia、iia、iib、iii、iv、v和vi的化合物、化合物1-508、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐与至少一种另外的活性药物成分组合治疗囊性纤维化和其它cftr介导的疾病的方法。
[0460]
在一些实施例中，至少一种另外的活性药物成分选自粘液溶解剂、支气管扩张剂、抗生素、抗感染剂和抗炎剂。
[0461]
在一些实施例中，另外的治疗剂是抗生素。可用于本文中的示例性抗生素包括妥布霉素(tobramycin)，包括妥布霉素吸入粉(tip)；阿奇霉素(azithromycin)；氨曲南(aztreonam)，包括氨曲南的气雾化形式；阿米卡星(amikacin)，包括其脂质体调配物；环丙沙星(ciprofloxacin)，包括其适用于通过吸入施用的调配物；左氧氟沙星(levoflaxacin)，包括其气雾化调配物；以及两种抗生素的组合，例如磷霉素(fosfomycin)和妥布霉素。
[0462]
在一些实施例中，另外的药剂是粘液溶解剂。可用于本文的示例性粘液溶解剂包括
[0463]
在一些实施例中，另外的药剂是支气管扩张剂。示例性支气管扩张剂包括沙丁胺醇(albuterol)、硫酸异丙喘宁(metaprotenerol sulfate)、乙酸吡布特罗(pirbuterol acetate)、沙美特罗(salmeterol)或硫酸特曲布尔(tetrabuline sulfate)。
[0464]
在一些实施例中，另外的药剂是抗炎剂，即可以减轻肺部炎症的药剂。可用于本文的示例性此类药剂包括布洛芬(ibuprofen)、二十二碳六烯酸(dha)、西地那非(sildenafil)、吸入型谷胱甘肽、吡格列酮(pioglitazone)、羟氯喹(羟基chloroquine)或辛伐他汀(simavastatin)。
[0465]
在一些实施例中，另外的药剂是营养剂。示例性营养剂包含胰脂肪酶(胰酶替代物)，包含或或(先前的)、或谷胱甘肽吸入。在一些实施例中，另外的营养剂是胰脂肪酶。
[0466]
在一些实施例中，至少一种另外的活性药物成分选自cftr调节剂。在一些实施例中，所述至少一种另外的活性药物成分选自cftr增效剂。在一些实施例中，所述增效剂选自依伐卡托、氘替卡托、(6r,12r)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇和前述任一项的氘化衍生物和药学上可接受的盐。在一些实施例中，所述至少一种另外的活性药物成分选自cftr校正剂。在一些实施例中，校正剂选自鲁玛卡托、替扎卡托和前述任一项的氘化衍生物和药学上可接受的盐。
[0467]
在一些实施例中，所述至少一种另外的活性药物成分选自：(a)替扎卡托、鲁玛卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的化合物；和/或(b)依伐卡托、氘替卡托、(6r,12r)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇和前述任一项的氘化衍生物和药学上可接受的盐。
[0468]
因此，在一些实施例中，本文所提供的组合疗法包括：(a)选自式i的化合物、式ia、iia、iib、iii、iv、v和vi的化合物、化合物1-508、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的化合物；以及(b)选自替扎卡托、鲁玛卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物；或(c)选自依伐卡托、氘替卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物。在其它实施例中，本文所提供的组合疗法包括：(a)选自式i的化合物、式ia、iia、iib、iii、iv、v和vi的化合物、化合物1-508、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受
的盐的至少一种化合物；(b)选自替扎卡托、鲁玛卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物；以及(c)选自依伐卡托、氘替卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物。在仍其它实施例中，本文所提供的组合疗法包括：(a)选自式i的化合物、式ia、iia、iib、iii、iv、v和vi的化合物、化合物1-508、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物；(b)选自替扎卡托、鲁玛卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物；和/或(c)选自(6r,12r)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物。
[0469]
在一些实施例中，将选自式i的化合物、式ia、iia、iib、iii、iv、v和vi的化合物、化合物1-508、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物与选自替扎卡托和其药学上可接受的盐的至少一种化合物组合施用。在一些实施例中，将选自式i的化合物、式ia、iia、iib、iii、iv、v和vi的化合物、化合物1-508、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物与选自鲁玛卡托和其药学上可接受的盐的至少一种化合物组合施用。在一些实施例中，将选自式i的化合物、式ia、iia、iib、iii、iv、v和vi的化合物、化合物1-508、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物与选自依伐卡托和其药学上可接受的盐的至少一种化合物组合施用。在一些实施例中，将选自式i的化合物、式ia、iia、iib、iii、iv、v和vi的化合物、化合物1-508、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物与选自氘替卡托和其药学上可接受的盐的至少一种化合物组合施用。在一些实施例中，将选自式i的化合物、式ia、iia、iib、iii、iv、v和vi的化合物、化合物1-508、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物与选自(6r,12r)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇和其药学上可接受的盐的至少一种化合物组合施用。
[0470]
在一些实施例中，将选自式i的化合物、式ia、iia、iib、iii、iv、v和vi的化合物、化合物1-508、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物与选自替扎卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物以及选自依伐卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物组合施用。在一些实施例中，将选自式i的化合物、式ia、iia、iib、iii、iv、v和vi的化合物、化合物1-508、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物与选自替扎卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物以及选自氘替卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物组合施用。在一些实施例中，将选自式i的化合物、式ia、iia、iib、iii、iv、v和vi的化合物、化合物1-508、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物与选自替扎卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物以及选自(6r,12r)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇和氘化衍生
物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物组合施用。
[0471]
在一些实施例中，将选自式i的化合物、式ia、iia、iib、iii、iv、v和vi的化合物、化合物1-508、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物与选自鲁玛卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物以及选自依伐卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物组合施用。在一些实施例中，将选自式i的化合物、式ia、iia、iib、iii、iv、v和vi的化合物、化合物1-508、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物与选自鲁玛卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物以及选自氘替卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物组合施用。在一些实施例中，将选自式i的化合物、式ia、iia、iib、iii、iv、v和vi的化合物、化合物1-508、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物与选自鲁玛卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物以及选自(6r,12r)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物组合施用。
[0472]
式i的化合物、式ia、iia、iib、iii、iv、v和vi的化合物、化合物1-508、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐中的每一种可以独立地每天施用一次、每天施用两次或每天施用三次。
[0473]
在一些实施例中，选自式i的化合物、式ia、iia、iib、iii、iv、v和vi的化合物、化合物1-508、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物每天施用一次。在一些实施例中，选自式i的化合物、式ia、iia、iib、iii、iv、v和vi的化合物、化合物1-508、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物每天施用两次。
[0474]
在一些实施例中，选自式i的化合物、式ia、iia、iib、iii、iv、v和vi的化合物、化合物1-508、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物和选自替扎卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物每天施用一次。在一些实施例中，选自式i的化合物、式ia、iia、iib、iii、iv、v和vi的化合物、化合物1-508、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物和选自替扎卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物每天施用两次。
[0475]
在一些实施例中，选自式i的化合物、式ia、iia、iib、iii、iv、v和vi的化合物、化合物1-508、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物和选自鲁玛卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物每天施用一次。在一些实施例中，选自式i的化合物、式ia、iia、iib、iii、iv、v和vi的化合物、化合物1-508、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物和选自鲁玛卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物每天施用两次。
[0476]
在一些实施例中，选自式i的化合物、式ia、iia、iib、iii、iv、v和vi的化合物、化合
物1-508、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物和选自依伐卡托、氘替卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物每天施用一次。在一些实施例中，选自式i的化合物、式ia、iia、iib、iii、iv、v和vi的化合物、化合物1-508、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物和选自依伐卡托、氘替卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物每天施用两次。
[0477]
在一些实施例中，选自式i的化合物、式ia、iia、iib、iii、iv、v和vi的化合物、化合物1-508、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物和选自(6r,12r)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物每天施用一次。在一些实施例中，选自式i的化合物、式ia、iia、iib、iii、iv、v和vi的化合物、化合物1-508、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物和选自(6r,12r)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物每天施用两次。
[0478]
在一些实施例中，选自式i的化合物、式ia、iia、iib、iii、iv、v和vi的化合物、化合物1-508、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物，选自替扎卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物以及选自依伐卡托、氘替卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物每天施用一次。在一些实施例中，选自式i的化合物、式ia、iia、iib、iii、iv、v和vi的化合物、化合物1-508、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物，选自替扎卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物以及选自依伐卡托、氘替卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物每天施用两次。
[0479]
式i的化合物、式ia、iia、iib、iii、iv、v和vi的化合物、化合物1-508、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐，选自依伐卡托、氘替卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物以及选自鲁玛卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物每天施用一次。在一些实施例中，选自式i的化合物、式ia、iia、iib、iii、iv、v和vi的化合物、化合物1-508、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物和选自依伐卡托、氘替卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物以及选自鲁玛卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物每天施用两次。
[0480]
在一些实施例中，选自式i的化合物、式ia、iia、iib、iii、iv、v和vi的化合物、化合物1-508、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物，选自替扎卡托、鲁玛卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物以及选自(6r,12r)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物每天施用一次。在一些实施例中，选自式i的化
合物、式ia、iia、iib、iii、iv、v和vi的化合物、化合物1-508、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物，选自替扎卡托、鲁玛卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物以及选自(6r,12r)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物每天施用两次。
[0481]
在一些实施例中，选自式i的化合物、式ia、iia、iib、iii、iv、v和vi的化合物、化合物1-508、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物和选自替扎卡托和其药学上可接受的盐的至少一种化合物每天施用一次，并且选自依伐卡托和其药学上可接受的盐的至少一种化合物每天施用两次。在一些实施例中，选自式i的化合物、式ia、iia、iib、iii、iv、v和vi的化合物、化合物1-508、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物和选自鲁玛卡托和其药学上可接受的盐的至少一种化合物每天施用一次，并且选自依伐卡托和其药学上可接受的盐的至少一种化合物每天施用两次。
[0482]
式i的化合物、式ia、iia、iib、iii、iv、v和vi的化合物、化合物1-508、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐、替扎卡托、依伐卡托和氘替卡托及其药学上可接受的盐和氘化衍生物可以在单一药物组合物或单独的药物组合物中施用。此类药物组合物可以每天一次或每天多次，诸如每天两次施用。如本文所使用的，短语给定量的api(例如，替扎卡托、鲁玛卡托、依伐卡托、氘替卡托、(6r,12r)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇或氘化衍生物或其药学上可接受的盐)每天施用一次或两次或每天施用意味着所述给定量每次给药每天施用一次或两次。
[0483]
在一些实施例中，选自式i的化合物、式ia、iia、iib、iii、iv、v和vi的化合物、化合物1-508、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物在第一药物组合物中施用；选自替扎卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物在第二药物组合物中施用；并且选自依伐卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物在第三药物组合物中施用。
[0484]
在一些实施例中，选自式i的化合物、式ia、iia、iib、iii、iv、v和vi的化合物、化合物1-508、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物在第一药物组合物中施用；选自替扎卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物在第二药物组合物中施用；选自氘替卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物在第三药物组合物中施用。
[0485]
在一些实施例中，选自式i的化合物、式ia、iia、iib、iii、iv、v和vi的化合物、化合物1-508、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物在第一药物组合物中施用；选自依伐卡托、氘替卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物在第二药物组合物中施用；选自鲁玛卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物在第三药物组合物中施用。
[0486]
在一些实施例中，选自式i的化合物、式ia、iia、iib、iii、iv、v和vi的化合物、化合物1-508、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可
接受的盐的至少一种化合物在第一药物组合物中施用；选自替扎卡托、鲁玛卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物在第二药物组合物中施用；选自(6r,12r)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物在第三药物组合物中施用。
[0487]
在一些实施例中，选自式i的化合物、式ia、iia、iib、iii、iv、v和vi的化合物、化合物1-508、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物在第一药物组合物中施用；并且选自替扎卡托和氘化及其药学上可接受的盐的至少一种化合物和选自依伐卡托、氘替卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物在第二药物组合物中施用。在一些实施例中，第二药物组合物包括日剂量的一半的依伐卡托，并且日剂量的另一半的依伐卡托在第三药物组合物中施用。
[0488]
在一些实施例中，选自式i的化合物、式ia、iia、iib、iii、iv、v和vi的化合物、化合物1-508、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物在第一药物组合物中施用；并且选自鲁玛卡托和氘化及其药学上可接受的盐的至少一种化合物和选自依伐卡托、氘替卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物在第二药物组合物中施用。在一些实施例中，第二药物组合物包括日剂量的一半的依伐卡托，并且另一半剂量的依伐卡托在第三药物组合物中施用。
[0489]
在一些实施例中，选自式i的化合物、式ia、iia、iib、iii、iv、v和vi的化合物、化合物1-508、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物在第一药物组合物中施用；并且选自替扎卡托、鲁玛卡托和氘化及其药学上可接受的盐的至少一种化合物和选自(6r,12r)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇和氘化及其药学上可接受的盐的至少一种化合物在第二药物组合物中施用。
[0490]
在一些实施例中，选自式i的化合物、式ia、iia、iib、iii、iv、v和vi的化合物、化合物1-508、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物；选自替扎卡托和其药学上可接受的盐的至少一种化合物和选自依伐卡托、氘替卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物在第一药物组合物中施用。在一些实施例中，选自式i的化合物、式ia、iia、iib、iii、iv、v和vi的化合物、化合物1-508、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物；选自鲁玛卡托和其药学上可接受的盐的至少一种化合物和选自依伐卡托、氘替卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物在第一药物组合物中施用。在一些实施例中，选自式i的化合物、式ia、iia、iib、iii、iv、v和vi的化合物、化合物1-508、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物；选自替扎卡托、鲁玛卡托和其药学上可接受的盐的至少一种化合物和选自(6r,12r)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物在第一药物组合物中施用。在一些实施方案中，第一药物组合物每天向患者施用两次。在一些实施例中，第一药物组合物每天施用一次。在一些实施例中，第一药物组合物每天施用一次，并且当第一药物组合物包括依伐卡托
时，仅包括依伐卡托的第二组合物每天施用一次。
[0491]
任何合适的药物组合物可以用于式i的化合物、式ia、iia、iib、iii、iv、v和vi的化合物、化合物1-508、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐。用于替扎卡托和其药学上可接受的盐的一些示例性药物组合物可见于wo 2011/119984和wo 2014/014841中，其以引用的方式并入本文。用于依伐卡托和其药学上可接受的盐的一些示例性药物组合物可以在wo 2007/134279、wo 2010/019239、wo 2011/019413、wo 2012/027731和wo 2013/130669中找到，并且氘替卡托和其药学上可接受的盐的一些示例性药物组合物可以在us 8,865,902、us 9,181,192、us 9,512,079、wo 2017/053455和wo 2018/080591中找到，所有所述文献都通过引用并入本文。用于鲁玛卡托和其药学上可接受的盐的一些示例性药物组合物可见于wo 2010/037066、wo 2011/127421和wo 2014/071122中，其以引用的方式并入本文。
[0492]
药物组合物
[0493]
本公开的另一方面提供了一种药物组合物，所述药物组合物包括选自式i的化合物、式ia、iia、iib、iii、iv、v和vi的化合物、化合物1-508、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物，以及至少一种药学上可接受的载体。
[0494]
在一些实施例中，本公开提供了一种药物组合物，所述药物组合物包括选自式i的化合物、式ia、iia、iib、iii、iv、v和vi的化合物、化合物1-508、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物，与至少一种另外的活性药物成分组合。在一些实施例中，至少一种另外的活性药物成分是cftr调节剂。在一些实施例中，至少一种另外的活性药物成分是cftr校正剂。在一些实施例中，至少一种另外的活性药物成分是cftr增效剂。在一些实施例中，药物组合物包括选自式i的化合物、式ia、iia、iib、iii、iv、v和vi的化合物、化合物1-508、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物，以及至少两种另外的活性药物成分，其中一种是cftr校正剂并且其中另一种是cftr增效剂。
[0495]
在一些实施例中，本公开提供了一种药物组合物，所述药物组合物包括：(a)选自式i的化合物、式ia、iia、iib、iii、iv、v和vi的化合物、化合物1-508、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物；(b)选自替扎卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物；以及(c)至少一种药学上可接受的载体。
[0496]
在一些实施例中，本公开提供了一种药物组合物，所述药物组合物包括：(a)选自式i的化合物、式ia、iia、iib、iii、iv、v和vi的化合物、化合物1-508、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物；(b)选自依伐卡托、氘替卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物；以及(c)至少一种药学上可接受的载体。
[0497]
在一些实施例中，本公开提供了一种药物组合物，所述药物组合物包括：(a)选自式i的化合物、式ia、iia、iib、iii、iv、v和vi的化合物、化合物1-508、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物；(b)选自鲁玛卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物；以及(c)至少一
种药学上可接受的载体。
[0498]
在一些实施例中，本公开提供了一种药物组合物，所述药物组合物包括：(a)选自式i的化合物、式ia、iia、iib、iii、iv、v和vi的化合物、化合物1-508、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物；(b)选自(6r,12r)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物；以及(c)至少一种药学上可接受的载体。
[0499]
在一些实施例中，本公开提供了一种药物组合物，所述药物组合物包括：(a)选自式i的化合物、式ia、iia、iib、iii、iv、v和vi的化合物、化合物1-508、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物；(b)选自替扎卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物；(c)选自依伐卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物；以及(d)至少一种药学上可接受的载体。
[0500]
在一些实施例中，本公开提供了一种药物组合物，所述药物组合物包括：(a)选自式i的化合物、式ia、iia、iib、iii、iv、v和vi的化合物、化合物1-508、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物；(b)选自替扎卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物；(c)选自氘替卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物；以及(d)至少一种药学上可接受的载体。
[0501]
在一些实施例中，本公开提供了一种药物组合物，所述药物组合物包括：(a)选自式i的化合物、式ia、iia、iib、iii、iv、v和vi的化合物、化合物1-508、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物；(b)选自依伐卡托、氘替卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物；(c)选自鲁玛卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物；以及(d)至少一种药学上可接受的载体。
[0502]
在一些实施例中，本公开提供了一种药物组合物，所述药物组合物包括：(a)选自式i的化合物、式ia、iia、iib、iii、iv、v和vi的化合物、化合物1-508、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物；(b)选自替扎卡托、鲁玛卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物；(c)选自(6r,12r)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物；以及(d)至少一种药学上可接受的载体。
[0503]
本文公开的任何药物组合物可以包含至少一种药学上可接受的载体。在一些实施方案中，至少一种药学上可接受的载体选自药学上可接受的媒介物和药学上可接受的佐剂。在一些实施方案中，至少一种药学上可接受的选自药学上可接受的填充剂、崩解剂、表面活性剂、粘合剂和润滑剂。
[0504]
本文所述的药物组合物可用于治疗囊性纤维化和其他cftr介导的疾病。
[0505]
如上所述，本文公开的药物组合物可以任选地还包含至少一种药学上可接受的载体。至少一种药学上可接受的载体可选自佐剂和媒介物。如本文所使用，至少一种药学上可
接受的载体包括适合于所需的特定剂型的任何和所有溶剂、稀释剂、其它液体媒介物、分散助剂、悬浮助剂、表面活性剂、等渗剂、增稠剂、乳化剂、防腐剂、固体粘合剂和润滑剂。remington:the science and practice of pharmacy,第21版,2005,d.b.troy编辑,lippincott williams&wilkins,philadelphia和encyclopedia of pharmaceutical technology,j.swarbrick和j.c.boylan编辑,1988-1999,纽约的马塞尔德克尔公司(marcel dekker,new york)公开用于配制药物组合物的各种载体和用于制备其的已知技术。除非任何常规载体与本公开的化合物不相容，诸如通过产生任何不合需要的生物作用或另外以有害方式与药物组合物的任何其他组分相互作用，否则预期其使用在本公开的范围内。合适的药学上可接受的载体的非限制性实例包括但不限于离子交换剂、氧化铝、硬脂酸铝、卵磷脂、血清蛋白(例如人血清白蛋白)、缓冲物质(例如磷酸盐、甘氨酸、山梨酸和山梨酸钾)、饱和植物脂肪酸偏甘油酯混合物、水盐和电解质(诸如硫酸鱼精蛋白、磷酸氢二钠、磷酸氢钾、氯化钠和锌盐)、胶体二氧化硅、三硅酸镁、聚乙烯吡咯烷酮、聚丙烯酸酯、蜡、聚乙烯-聚氧丙烯嵌段聚合物、羊毛脂、糖(诸如乳糖、葡萄糖和蔗糖)、淀粉(诸如玉米淀粉和马铃薯淀粉)、纤维素和其衍生物(诸如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素和乙酸纤维素)、粉状黄蓍胶、麦芽、明胶、滑石、赋形剂(诸如可可脂和栓剂蜡)、油类(诸如花生油、棉籽油、红花油、芝麻油、橄榄油、玉米油和大豆油)、二醇类(诸如丙二醇和聚乙二醇)、酯类(诸如油酸乙酯和月桂酸乙酯)、琼脂、缓冲剂(诸如氢氧化镁和氢氧化铝)、海藻酸、无热原质水、等渗盐水、林格氏溶液(ringer's solution)、乙醇、磷酸盐缓冲液、无毒相容润滑剂(诸如月桂基硫酸钠和硬脂酸镁)、着色剂、脱模剂、包覆剂、甜味剂、调味剂、芳香剂、防腐剂和抗氧化剂。
[0506]
示例性实施例
[0507]
下面提供了示例性实施例的非限制性列表：
[0508]
1.一种式i化合物：
[0509][0510]
其互变异构体、所述化合物或所述互变异构体的氘化衍生物、或前述任一者的药学上可接受的盐，其中：
[0511]
环a选自：
[0512]
■c6-c
10
芳基，
[0513]
■c3-c
10
环烷基，
[0514]
■
3至10元杂环基，以及
[0515]
■
5至10元杂芳基；
[0516]
环b选自：
[0517]
■c6-c
10
芳基，
[0518]
■c3-c
10
环烷基，
[0519]
■
3至10元杂环基，以及
[0520]
■
5至10元杂芳基；
[0521]
v选自o和nh；
[0522]
w1选自n和ch；
[0523]
w2选自n和ch，条件是w1和w2中的至少一个是n；
[0524]
z选自o、nr
zn
和c(r
zc
)2，条件是当l2不存在时，z是c(r
zc
)2；
[0525]
每个l1独立地选自c(r
l1
)2和
[0526]
每个l2独立地选自c(r
l2
)2；
[0527]
环c选自任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的c
6-c
10
芳基：
[0528]
■
卤素，
[0529]
■c1-c6烷基，以及
[0530]
■
n(rn)2；
[0531]
每个r3独立地选自：
[0532]
■
卤素，
[0533]
■c1-c6烷基，
[0534]
■c1-c6烷氧基，
[0535]
■c3-c
10
环烷基，
[0536]
■
任选地被1-3个独立地选自c
1-c6烷基的基团取代的c
6-c
10
芳基，以及
[0537]
■
3至10元杂环基；
[0538]
r4选自氢和c
1-c6烷基；
[0539]
每个r5独立地选自：
[0540]
■
氢，
[0541]
■
卤素，
[0542]
■
羟基，
[0543]
■
n(rn)2，
[0544]
■‑
so-me，
[0545]
■‑
ch＝c(r
lc
)2，其中两个r
lc
一起形成c
3-c
10
环烷基，
[0546]
■
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的c
1-c6烷基：
[0547]
○
羟基，
[0548]
○
任选地被1-3个独立地选自c
1-c6烷氧基和c
6-c
10
芳基的基团取代的c
1-c6烷氧基，
[0549]
○c3-c
10
环烷基，
[0550]
○
任选地被1-3个独立地选自c
1-c6烷基和c
1-c6烷氧基的基团取代的-(o)
0-1-(c
6-c
10
芳基)，
[0551]
○
3至10元杂环基，以及
[0552]
○
n(rn)2，
[0553]
■
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的c
1-c6烷氧基：
[0554]
○
卤素，
[0555]
○c6-c
10
芳基，以及
[0556]
○
任选地被1-3个独立地选自c
1-c6氟烷基的基团取代的c
3-c
10
环烷基，
[0557]
■c1-c6氟烷基，
[0558]
■c3-c
10
环烷基，
[0559]
■c6-c
10
芳基，以及
[0560]
■
3至10元杂环基；
[0561]ryn
选自：
[0562]
■
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的c
3-c
10
环烷基：
[0563]
○
羟基，
[0564]
○
氧代，
[0565]
○
卤素，
[0566]
○
氰基，
[0567]
○
n(rn)2，
[0568]
○
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的c
1-c6烷基：
[0569]
◆
羟基，
[0570]
◆
氧代，
[0571]
◆
n(rn)2，
[0572]
◆c1-c6烷氧基，以及
[0573]
◆c6-c
10
芳基，
[0574]
○
任选地被1-3个独立地选自卤素、氧代、c
6-c
10
芳基和n(rn)2的基团取代的c
1-c6烷氧基，
[0575]
○
卤素，
[0576]
○c3-c
10
环烷基，
[0577]
○
任选地被1-3个独立地选自c
1-c6烷基的基团取代的3至10元杂环基，以及
[0578]
○
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的5至10元杂芳基：
[0579]
◆
羟基，
[0580]
◆
氰基，
[0581]
◆
氧代，
[0582]
◆
卤素，
[0583]
◆
n(rn)2，
[0584]
◆
任选地被1-3个独立地选自羟基、氧代、c
1-c6烷氧基和n(rn)2的基团取代的c
1-c6烷基，
[0585]
◆
任选地被1-3个独立地选自羟基、c
1-c6烷氧基、n(rn)2和c
3-c
10
环烷基的基团取代的c
1-c6烷氧基，
[0586]
◆c1-c6氟烷基，
[0587]
◆
任选地被1-3个独立地选自c
1-c6烷基的基团取代的-(o)
0-1-(c
3-c
10
环烷基)，
[0588]
◆c6-c
10
芳基，以及
[0589]
◆
任选地被1-3个独立地选自c
1-c6烷基的基团取代的3至10元杂环基，
[0590]
■c6-c
10
芳基，
[0591]
■
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的3至10元杂环基：
[0592]
○
氧代，
[0593]
○
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的c
1-c6烷基：
[0594]
◆
氧代，
[0595]
◆
羟基，
[0596]
◆
n(rn)2，
[0597]
◆
任选地被1-3个独立地选自卤素和c
6-c
10
芳基的基团取代的c
1-c6烷氧基，以及
[0598]
◆‑
(o)
0-1-(c
3-c
10
环烷基)，
[0599]
○c1-c6氟烷基，
[0600]
○
任选地被1-3个独立地选自卤素的基团取代的c
3-c
10
环烷基，以及
[0601]
○
3至10元杂环基，以及
[0602]
■
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的5至10元杂芳基：
[0603]
○
卤素，
[0604]
○
任选地被1-3个独立地选自氧代、c
1-c6烷氧基和n(rn)2的基团取代的c
1-c6烷基，以及
[0605]
○
任选地被1-3个独立地选自c
1-c6烷基(任选地被1-3个选自氧代、c
1-c6烷氧基和c
6-c
10
芳基的基团取代)的基团取代的3至10元杂环基；
[0606]rzn
选自：
[0607]
■
氢，
[0608]
■
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的c
1-c9烷基：
[0609]
○
羟基，
[0610]
○
氧代，
[0611]
○
氰基，
[0612]
○
任选地被1-3个独立地选自卤素和c
1-c6烷氧基的基团取代的c
1-c6烷氧基，
[0613]
○
n(rn)2，
[0614]
○
so2me，
[0615]
○
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的c
3-c
10
环烷基：
[0616]
◆
羟基，
[0617]
◆
任选地被1-3个独立地选自羟基、氧代、c
1-c6烷氧基、c
6-c
10
芳基和n(rn)2的基团取代的c
1-c6烷基，
[0618]
◆c1-c6氟烷基，
[0619]
◆c1-c6烷氧基，
[0620]
◆
cooh，
[0621]
◆
n(rn)2，
[0622]
◆c6-c
10
芳基，以及
[0623]
◆
任选地被1-3个独立地选自氧代和c
1-c6烷基的基团取代的3至10元杂环基，
[0624]
○
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的c
6-c
10
芳基：
[0625]
◆
卤素，
[0626]
◆
羟基，
[0627]
◆
氰基，
[0628]
◆
sime3，
[0629]
◆
so2me，
[0630]
◆
sf5，
[0631]
◆
n(rn)2，
[0632]
◆
p(o)me2，
[0633]
◆
任选地被1-3个独立地选自c
1-c6氟烷基的基团取代的-(o)
0-1-(c
3-c
10
环烷基)，
[0634]
◆
任选地被1-3个独立地选自羟基、氧代、c
1-c6烷氧基、5至10元杂芳基、so2me和n(rn)2的基团取代的c
1-c6烷基，
[0635]
◆
任选地被1-3个独立地选自羟基、氧代、n(rn)2和c
6-c
10
芳基的基团取代的c
1-c6烷氧基，
[0636]
◆c1-c6氟烷基，
[0637]
◆
任选地被1-3个独立地选自c
1-c6烷基的基团取代的3至10元杂环基，
[0638]
◆‑
(o)
0-1-(c
6-c
10
芳基)，以及
[0639]
◆
任选地被羟基、氧代、n(rn)2、c
1-c6烷基、c
1-c6烷氧基、c
1-c6氟烷基和c
3-c
10
环烷基取代的-(o)
0-1-(5至10杂芳基)，
[0640]
○
任选地被1-4个独立地选自以下的基团取代的3至10元杂环基：
[0641]
◆
羟基，
[0642]
◆
氧代，
[0643]
◆
n(rn)2，
[0644]
◆
任选地被1-3个独立地选自氧代和c
1-c6烷氧基的基团取代的c
1-c6烷基，
[0645]
◆c1-c6烷氧基，
[0646]
◆c1-c6氟烷基，
[0647]
◆
任选地被1-3个独立地选自卤素的基团取代的c
6-c
10
芳基，以及
[0648]
◆
5至10元杂芳基，以及
[0649]
○
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的5至10元杂芳基：
[0650]
◆
羟基，
[0651]
◆
氰基，
[0652]
◆
氧代，
[0653]
◆
卤素，
[0654]
◆
b(oh)2，
[0655]
◆
n(rn)2，
[0656]
◆
任选地被1-3个独立地选自羟基、氧代、c
1-c6烷氧基(任选地被1-3个-sime3取代)和n(rn)2的基团取代的c
1-c6烷基，
[0657]
◆
任选地被1-3个独立地选自羟基、氧代、c
1-c6烷氧基、n(rn)2和c
3-c
10
环烷基的基团取代的c
1-c6烷氧基，
[0658]
◆c1-c6氟烷基，
[0659]
◆
任选地被1-3个独立地选自c
1-c6烷基的基团取代的-(o)
0-1-(c
3-c
10
环烷基)，
[0660]
◆‑
(o)
0-1-(c
6-c
10
芳基)，
[0661]
◆
任选地被1-4个独立地选自羟基、氧代、卤素、氰基、n(rn)2、c
1-c6烷基(任选地被1-3个独立地选自羟基、氧代、n(rn)2和c
1-c6烷氧基的基团取代)、c
1-c6烷氧基、c
1-c6氟烷基和3至10元杂环基(任选地被1-3个独立地选自c
1-c6氟烷基的基团取代)的基团取代的-(o)
0-1-(3至10元杂环基)，以及
[0662]
◆
任选地被1-4个独立地选自c
1-c6烷基和c
3-c
10
环烷基的基团取代的5至10元杂芳基，
[0663]
■c1-c6氟烷基，
[0664]
■
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的c
3-c
10
环烷基：
[0665]
○
羟基，
[0666]
○
氧代，
[0667]
○
卤素，
[0668]
○
氰基，
[0669]
○
n(rn)2，
[0670]
○
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的c
1-c6烷基：
[0671]
◆
羟基，
[0672]
◆
氧代，
[0673]
◆
n(rn)2，
[0674]
◆c1-c6烷氧基，以及
[0675]
◆c6-c
10
芳基，
[0676]
○
任选地被1-3个独立地选自卤素、氧代、c
6-c
10
芳基和n(rn)2的基团取代的c
1-c6烷氧基，
[0677]
○
卤素，
[0678]
○c3-c
10
环烷基，
[0679]
○
任选地被1-3个独立地选自c
1-c6烷基的基团取代的3至10元杂环基，以及
[0680]
○
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的5至10元杂芳基：
[0681]
◆
羟基，
[0682]
◆
氰基，
[0683]
◆
氧代，
[0684]
◆
卤素，
[0685]
◆
n(rn)2，
[0686]
◆
任选地被1-3个独立地选自羟基、氧代、c
1-c6烷氧基和n(rn)2的基团取代的c
1-c6烷基，
[0687]
◆
任选地被1-3个独立地选自羟基、c
1-c6烷氧基、n(rn)2和c
3-c
10
环烷基的基团取代的c
1-c6烷氧基，
[0688]
◆c1-c6氟烷基，
[0689]
◆
任选地被1-3个独立地选自c
1-c6烷基的基团取代的-(o)
0-1-(c
3-c
10
环烷基)，
[0690]
◆c6-c
10
芳基，以及
[0691]
◆
任选地被1-3个独立地选自c
1-c6烷基的基团取代的3至10元杂环基，
[0692]
■c6-c
10
芳基，
[0693]
■
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的3至10元杂环基：
[0694]
○
氧代，
[0695]
○
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的c
1-c6烷基：
[0696]
◆
氧代，
[0697]
◆
羟基，
[0698]
◆
n(rn)2，
[0699]
◆
任选地被1-3个独立地选自卤素和c
6-c
10
芳基的基团取代的c
1-c6烷氧基，以及
[0700]
◆‑
(o)
0-1-(c
3-c
10
环烷基)，
[0701]
○c1-c6氟烷基，
[0702]
○
任选地被1-3个独立地选自卤素的基团取代的c
3-c
10
环烷基，以及
[0703]
○
3至10元杂环基，
[0704]
■
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的5至10元杂芳基：
[0705]
○
卤素，
[0706]
○
任选地被1-3个独立地选自氧代、c
1-c6烷氧基和n(rn)2的基团取代的c
1-c6烷基，以及
[0707]
○
任选地被1-3个独立地选自c
1-c6烷基(任选地被1-3个选自氧代、c
1-c6烷氧基和c
6-c
10
芳基的基团取代)的基团取代的3至10元杂环基，以及
[0708]
■
rf；
[0709]
每个r
zc
独立地选自：
[0710]
■
氢，
[0711]
■
任选地被1-3个独立地选自c
6-c
10
芳基(任选地被1-3个独立地选自c
1-c6烷基的基团取代)的基团取代的c
1-c6烷基，
[0712]
■
任选地被1-3个独立地选自c
1-c6烷基的基团取代的c
6-c
10
芳基，以及
[0713]
■
rf；
[0714]
或者两个r
zc
一起形成氧代基团；
[0715]
每个r
l1
独立地选自：
[0716]
■
氢，
[0717]
■
n(rn)2，条件是两个n(rn)2不与同一碳结合，
[0718]
■
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的c
1-c9烷基：
[0719]
○
卤素，
[0720]
○
羟基，
[0721]
○
氧代，
[0722]
○
n(rn)2，
[0723]
○
任选地被1-3个独立地选自c
6-c
10
芳基的基团取代的c
1-c6烷氧基，
[0724]
○
任选地被1-3个独立地选自卤素和c
1-c6氟烷基的基团取代的c
3-c
10
环烷基，
[0725]
○
任选地被1-3个独立地选自c
1-c6烷基的基团取代的c
6-c
10
芳基，以及
[0726]
○
任选地被1-3个独立地选自c
1-c6烷基(任选地被1-3个独立地选自羟基和氧代的基团取代)的基团取代的3至10元杂环基，
[0727]
■c3-c
10
环烷基，
[0728]
■
任选地被1-4个独立地选自以下的基团取代的c
6-c
10
芳基：
[0729]
○
卤素，
[0730]
○
氰基，
[0731]
○
sime3，
[0732]
○
pome2，
[0733]
○
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的c
1-c7烷基：
[0734]
◆
羟基，
[0735]
◆
氧代，
[0736]
◆
氰基，
[0737]
◆
sime3，
[0738]
◆
n(rn)2，以及
[0739]
◆
任选地被1-3个独立地选自c
1-c6氟烷基的基团取代的c
3-c
10
环烷基，
[0740]
○
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的c
1-c6烷氧基：
[0741]
◆
任选地被1-3个独立地选自c
1-c6氟烷基的基团取代的c
3-c
10
环烷基，以及
[0742]
◆c1-c6烷氧基，
[0743]
○c1-c6氟烷基，
[0744]
○
任选地被1-3个独立地选自c
1-c6烷基和c
1-c6氟烷基的基团取代的c
3-c
10
环烷基，
[0745]
○c6-c
10
芳基，
[0746]
○
任选地被1-3个独立地选自c
1-c6烷基的基团取代的3至10元杂环基，以及
[0747]
○
5至10元杂芳基，
[0748]
■
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的3至10元杂环基：
[0749]
○
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的c
1-c6烷基：
[0750]
◆
氧代，以及
[0751]
◆c1-c6烷氧基，
[0752]
■
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的5至10元杂芳基：
[0753]
○
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的c
1-c6烷基：
[0754]
◆
任选地被1-3个独立地选自c
1-c6氟烷基的基团取代的c
3-c
10
环烷基，以及
[0755]
○
任选地被1-3个独立地选自c
1-c6烷基的基团取代的c
6-c
10
芳基，以及
[0756]
■
rf；
[0757]
或者同一碳原子上的两个r
l1
一起形成氧代基团；
[0758]
每个r
l2
独立地选自氢和rf；
[0759]
或者同一碳原子上的两个r
l2
一起形成氧代基团；
[0760]
每个rn独立地选自：
[0761]
■
氢，
[0762]
■
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的c
1-c8烷基：
[0763]
○
氧代，
[0764]
○
卤素，
[0765]
○
羟基，
[0766]
○
nh2，
[0767]
○
nhme，
[0768]
○
nme2，
[0769]
○
nhcome，
[0770]
○
任选地被1-3个独立地选自c
6-c
10
芳基的基团取代的c
1-c6烷氧基，
[0771]
○‑
(o)
0-1-(c
3-c
10
环烷基)，
[0772]
○
任选地被1-3个独立地选自卤素和c
1-c6烷基的基团取代的c
6-c
10
芳基，
[0773]
○
任选地被1-4个独立地选自氧代和c
1-c6烷基的基团取代的3至14元杂环基，以及
[0774]
○
任选地被1-4个独立地选自氧代和c
1-c6烷基的基团取代的5至14元杂芳基，
[0775]
■
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的c
3-c
10
环烷基：
[0776]
○
羟基，
[0777]
○
nh2，
[0778]
○
nhme，以及
[0779]
○
任选地被1-3个独立地选自羟基的基团取代的c
1-c6烷基，
[0780]
■c6-c
10
芳基，以及
[0781]
■
3至10元杂环基；
[0782]
或者同一氮原子上的两个rn与其所结合的氮一起形成任选地被1-3个选自以下的基团取代的3至10元杂环基：
[0783]
■
羟基，
[0784]
■
氧代，
[0785]
■
氰基，
[0786]
■
任选地被1-3个独立地选自氧代、羟基、c
1-c6烷氧基和n(r
n2
)2的基团取代的c
1-c6烷基，其中每个r
n2
独立地选自氢和c
1-c6烷基，
[0787]
■c1-c6烷氧基，以及
[0788]
■c1-c6氟烷基；
[0789]
或者一个r4和一个r
l1
一起形成c
6-c8亚烷基；
[0790]
当rf存在时，两个rf与其所结合的原子一起形成选自以下的基团：
[0791]
■
任选地被1-3个独立地选自c
1-c6烷基的基团取代的c
3-c
10
环烷基，
[0792]
■
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的c
6-c
10
芳基：
[0793]
○
卤素，
[0794]
○c1-c6烷基，
[0795]
○
n(rn)2，以及
[0796]
○
任选地被1-3个独立地选自羟基的基团取代的3至10元杂环基，
[0797]
■
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的3至11元杂环基：
[0798]
○
氧代，
[0799]
○
n(rn)2，
[0800]
○
任选地被1-4个独立地选自以下的基团取代的c
1-c9烷基：
[0801]
◆
氧代，
[0802]
◆
卤素，
[0803]
◆
羟基，
[0804]
◆
n(rn)2，
[0805]
◆‑
so
2-(c
1-c6烷基)，
[0806]
◆
任选地被1-3个独立地选自卤素和c
6-c
10
芳基的基团取代的c
1-c6烷氧基，
[0807]
◆
任选地被1-3个独立地选自羟基、卤素、氰基、c
1-c6烷基(任选地被1-3个独立地选自氧代和c
1-c6烷氧基的基团取代)、c
1-c6烷氧基(任选地被1-3个独立地选自c
6-c
10
芳基的基团取代)、-(o)
0-1-(c
1-c6氟烷基)和c
6-c
10
芳基(任选地被1-3个独立地选自c
1-c6烷氧基的基团取代)的基团取代的c
6-c
10
芳基，
[0808]
◆
任选地被1-4个独立地选自羟基、卤素、n(rn)2、c
1-c6烷基(任选地被1-3个独立地选自氧代、羟基和c
1-c6烷氧基的基团取代)、c
1-c6氟烷基和c
6-c
10
芳基的基团取代的-(o)
0-1-(c
3-c
10
环烷基)，
[0809]
◆
任选地被1-3个独立地选自氧代、c
1-c6烷基(任选地被1-3个独立地选自c
6-c
10
芳基(任选地被1-3个独立地选自卤素的基团取代)的基团取代)、c
1-c6烷氧基、c
3-c
10
环烷基和rn的基团取代的3至10元杂环基，
[0810]
◆
任选地被1-3个独立地选自c
6-c
10
芳基(任选地被1-3个独立地选自卤素的基团取代)和c
1-c6烷基的基团取代的-o-(5至12元杂芳基)，以及
[0811]
◆
任选地被1-3个独立地选自羟基、氧代、n(rn)2、c
1-c6烷基(任选地被1-3个独立地选自氰基的基团取代)、c
1-c6烷氧基、-(o)
0-1-(c
1-c6氟烷基)、-o-(c
6-c
10
芳基)和c
3-c
10
环烷基的基团取代的5至10元杂芳基，
[0812]
○
任选地被1-4个独立地选自卤素、c
1-c6烷基和c
1-c6氟烷基的基团取代的c
3-c
12
环烷基，
[0813]
○c6-c
10
芳基，
[0814]
○
3至10元杂环基，以及
[0815]
○
任选地被1-3个独立地选自c
1-c6烷氧基和c
1-c6氟烷基的基团取代的5至10元杂芳基，以及
[0816]
■
任选地被1-3个独立地选自c
1-c6烷基和c
1-c6氟烷基的基团取代的5至12元杂芳基；
[0817]
条件是所述化合物不选自：
[0818]
(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2-甲基丙基)-12-{螺[2.3]己-5-基}-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮，
[0819]
(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2-甲基丙基)-12-[(1,1,2,2-四氘)螺[2.3]己-5-基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮，
[0820]
(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-12-(4,4,5,6,6-五氘螺[2.3]己-5-基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),
4,6,8(19),14,16-六烯-13-酮，
[0821]
(11r)-12-(5-氘螺[2.3]己-5-基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-酮，以及
[0822]
(11r)-6-[2,6-二(三氘)甲基苯基]-11-(2-甲基丙基)-12-{螺[2.3]己-5-基}-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮。
[0823]
2.根据实施例1所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中环a选自c
6-c
10
芳基和5至10元杂芳基。
[0824]
3.根据实施例1或2所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中环a选自苯基、吡啶基、吡嗪基和吡唑基。
[0825]
4.根据实施例1至3中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中环a是苯基。
[0826]
5.根据实施例1至4中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中环b选自c
6-c
10
芳基和c
3-c
10
环烷基。
[0827]
6.根据实施例1至5中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中环b选自苯基和环己基。
[0828]
7.根据实施例1至6中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中环b是苯基。
[0829]
8.根据实施例1至7中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中v是o。
[0830]
9.根据实施例1至8中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中w1是n并且w2是n。
[0831]
10.根据实施例1至8中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中w1是ch并且w2是n。
[0832]
11.根据实施例1至10中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中z是c(r
zc
)2。
[0833]
12.根据实施例1至11中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中两个r
zc
一起形成氧代基团。
[0834]
13.根据实施例1至12中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中每个r3独立地选自c
1-c6烷基。
[0835]
14.根据实施例1至13中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中每个r3是甲基。
[0836]
15.根据实施例1至12中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中r3不存在。
[0837]
16.根据实施例1至15中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中r4选自氢和甲基。
[0838]
17.根据实施例1至16中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中r4是甲基。
[0839]
18.根据实施例1至17中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中每个r5独立地选自氢、卤素、c
1-c6烷基、c
1-c6氟烷基和c
6-c
10
芳基。
[0840]
19.根据实施例1至18中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中r
yn
选自：
[0841]
■
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的c
3-c
10
环烷基：
[0842]
○
羟基，
[0843]
○
氰基，
[0844]
○
n(rn)2，
[0845]
○
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的c
1-c6烷基：
[0846]
◆
羟基，
[0847]
◆
氧代，
[0848]
◆
n(rn)2，以及
[0849]
◆c6-c
10
芳基，
[0850]
○
任选地被1-3个独立地选自卤素、氧代、c
6-c
10
芳基和n(rn)2的基团取代的c
1-c6烷氧基，
[0851]
○c3-c
10
环烷基，以及
[0852]
○
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的5至10元杂芳基：
[0853]
◆
羟基，
[0854]
◆
氧代，
[0855]
◆
n(rn)2，
[0856]
◆
任选地被1-3个独立地选自c
1-c6烷氧基的基团取代的c
1-c6烷基，以及
[0857]
◆
任选地被1-3个独立地选自c
3-c
10
环烷基的基团取代的c
1-c6烷氧基，
[0858]
■
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的3至10元杂环基：
[0859]
○
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的c
1-c6烷基：
[0860]
◆
氧代，
[0861]
◆
羟基，
[0862]
◆
n(rn)2，
[0863]
◆
任选地被1-3个独立地选自c
6-c
10
芳基的基团取代的c
1-c6烷氧基，以及
[0864]
◆‑
(o)
0-1-(c
3-c
10
环烷基)，
[0865]
○c1-c6氟烷基，
[0866]
○
任选地被1-3个独立地选自卤素的基团取代的c
3-c
10
环烷基，以及
[0867]
○
3至10元杂环基，以及
[0868]
■
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的5至10元杂芳基：
[0869]
○
卤素，
[0870]
○
任选地被1-3个独立地选自氧代、c
1-c6烷氧基和n(rn)2的基团取代的c
1-c6烷基，以及
[0871]
○
任选地被1-3个独立地选自c
1-c6烷基的基团取代的(任选地被1-3个选自氧代、c
1-c6烷氧基和c
6-c
10
芳基的基团取代的)3至10元杂环基。
[0872]
20.根据实施例1至19中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上
可接受的盐，其中每个r
l1
独立地选自：
[0873]
■
氢，
[0874]
■
n(rn)2，条件是两个n(rn)2不与同一碳结合，
[0875]
■
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的c
1-c9烷基：
[0876]
○
卤素，
[0877]
○
羟基，以及
[0878]
○
任选地被1-3个独立地选自卤素和c
1-c6氟烷基的基团取代的c
3-c
10
环烷基，以及
[0879]
■c3-c
10
环烷基。
[0880]
21.根据实施例1至20中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中每个rn独立地选自：
[0881]
■
氢，
[0882]
■
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的c
1-c8烷基：
[0883]
○
nh2，
[0884]
○
nhcome，
[0885]
○c1-c6烷氧基，
[0886]
○‑
(o)
0-1-(c
3-c
10
环烷基)，
[0887]
○c6-c
10
芳基，以及
[0888]
○
任选地被1-4个独立地选自c
1-c6烷基的基团取代的3至14元杂环基，以及
[0889]
■c6-c
10
芳基，以及
[0890]
或者同一氮原子上的两个rn与其所结合的氮一起形成任选地被1-3个选自以下的基团取代的3至10元杂环基：
[0891]
■
氰基，
[0892]
■c1-c6烷基，以及
[0893]
■c1-c6烷氧基。
[0894]
22.一种式ia化合物：
[0895][0896]
其互变异构体、所述化合物或所述互变异构体的氘化衍生物、或前述任一者的药学上可接受的盐，其中环a、环b、w1、w2、z、l1、l2、r3、r4、r5和r
yn
如根据实施例1所述的那样定义，条件是所述化合物不选自：
[0897]
(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2-甲基丙基)-12-{螺[2.3]己-5-基}-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮，
[0898]
(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2-甲基丙基)-12-[(1,1,2,2-四氘)螺[2.3]己-5-基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮，
[0899]
(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-12-(4,4,5,6,6-五氘螺[2.3]己-5-基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-酮，
[0900]
(11r)-12-(5-氘螺[2.3]己-5-基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-酮，以及
[0901]
(11r)-6-[2,6-二(三氘)甲基苯基]-11-(2-甲基丙基)-12-{螺[2.3]己-5-基}-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮。
[0902]
23.根据实施例22所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中环a选自c
6-c
10
芳基和5至10元杂芳基。
[0903]
24.根据实施例22或23所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中环a选自苯基、吡啶基、吡嗪基和吡唑基。
[0904]
25.根据实施例22至24中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中环a是苯基。
[0905]
26.根据实施例22至25中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中环b选自c
6-c
10
芳基和c
3-c
10
环烷基。
[0906]
27.根据实施例22至26中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中环b选自苯基和环己基。
[0907]
28.根据实施例22至27中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中环b是苯基。
[0908]
29.根据实施例22至28中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中w1是n并且w2是n。
[0909]
30.根据实施例22至29中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中w1是ch并且w2是n。
[0910]
31.根据实施例22至30中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中z是c(r
zc
)2。
[0911]
32.根据实施例22至31中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中两个r
zc
一起形成氧代基团。
[0912]
33.根据实施例22至32中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中每个r3独立地选自c
1-c6烷基。
[0913]
34.根据实施例22至33中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中每个r3是甲基。
[0914]
35.根据实施例22至32中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中r3不存在。
[0915]
36.根据实施例22至35中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上
可接受的盐，其中r4选自氢和甲基。
[0916]
37.根据实施例22至36中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中r4是甲基。
[0917]
38.根据实施例22至37中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中每个r5独立地选自氢、卤素、c
1-c6烷基、c
1-c6氟烷基和c
6-c
10
芳基。
[0918]
39.根据实施例22至38中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中r
yn
选自：
[0919]
■
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的c
3-c
10
环烷基：
[0920]
○
羟基，
[0921]
○
氰基，
[0922]
○
n(rn)2，
[0923]
○
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的c
1-c6烷基：
[0924]
◆
羟基，
[0925]
◆
氧代，
[0926]
◆
n(rn)2，以及
[0927]
◆c6-c
10
芳基，
[0928]
○
任选地被1-3个独立地选自卤素、氧代、c
6-c
10
芳基和n(rn)2的基团取代的c
1-c6烷氧基，
[0929]
○c3-c
10
环烷基，以及
[0930]
○
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的5至10元杂芳基：
[0931]
◆
羟基，
[0932]
◆
氧代，
[0933]
◆
n(rn)2，
[0934]
◆
任选地被1-3个独立地选自c
1-c6烷氧基的基团取代的c
1-c6烷基，以及
[0935]
◆
任选地被1-3个独立地选自c
3-c
10
环烷基的基团取代的c
1-c6烷氧基，
[0936]
■
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的3至10元杂环基：
[0937]
○
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的c
1-c6烷基：
[0938]
◆
氧代，
[0939]
◆
羟基，
[0940]
◆
n(rn)2，
[0941]
◆
任选地被1-3个独立地选自c
6-c
10
芳基的基团取代的c
1-c6烷氧基，以及
[0942]
◆‑
(o)
0-1-(c
3-c
10
环烷基)，
[0943]
○c1-c6氟烷基，
[0944]
○
任选地被1-3个独立地选自卤素的基团取代的c
3-c
10
环烷基，以及
[0945]
○
3至10元杂环基，以及
[0946]
■
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的5至10元杂芳基：
[0947]
○
卤素，
[0948]
○
任选地被1-3个独立地选自氧代、c
1-c6烷氧基和n(rn)2的基团取代的c
1-c6烷基，以及
[0949]
○
任选地被1-3个独立地选自c
1-c6烷基的基团取代的(任选地被1-3个选自氧代、c
1-c6烷氧基和c
6-c
10
芳基的基团取代的)3至10元杂环基。
[0950]
40.根据实施例22至39中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中每个r
l1
独立地选自：
[0951]
■
氢，
[0952]
■
n(rn)2，条件是两个n(rn)2不与同一碳结合，
[0953]
■
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的c
1-c9烷基：
[0954]
○
卤素，
[0955]
○
羟基，以及
[0956]
○
任选地被1-3个独立地选自卤素和c
1-c6氟烷基的基团取代的c
3-c
10
环烷基，以及
[0957]
■c3-c
10
环烷基。
[0958]
41.根据实施例22至40中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中每个rn独立地选自：
[0959]
■
氢，
[0960]
■
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的c
1-c8烷基：
[0961]
○
nh2，
[0962]
○
nhcome，
[0963]
○c1-c6烷氧基，
[0964]
○‑
(o)
0-1-(c
3-c
10
环烷基)，
[0965]
○c6-c
10
芳基，以及
[0966]
○
任选地被1-4个独立地选自c
1-c6烷基的基团取代的3至14元杂环基，以及
[0967]
■c6-c
10
芳基，以及
[0968]
或者同一氮原子上的两个rn与其所结合的氮一起形成任选地被1-3个选自以下的基团取代的3至10元杂环基：
[0969]
■
氰基，
[0970]
■c1-c6烷基，以及
[0971]
■c1-c6烷氧基。
[0972]
42.一种式iia化合物：
[0973][0974]
其互变异构体、所述化合物或所述互变异构体的氘化衍生物、或前述任一者的药学上可接受的盐，其中环b、w1、w2、z、l1、l2、r3、r4、r5和r
yn
如根据实施例1所述的那样定义，条件是所述化合物不选自：
[0975]
(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2-甲基丙基)-12-{螺[2.3]己-5-基}-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮，
[0976]
(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2-甲基丙基)-12-[(1,1,2,2-四氘)螺[2.3]己-5-基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮，
[0977]
(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-12-(4,4,5,6,6-五氘螺[2.3]己-5-基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-酮，
[0978]
(11r)-12-(5-氘螺[2.3]己-5-基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-酮，以及
[0979]
(11r)-6-[2,6-二(三氘)甲基苯基]-11-(2-甲基丙基)-12-{螺[2.3]己-5-基}-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮。
[0980]
43.根据实施例42所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中环b选自c
6-c
10
芳基和c
3-c
10
环烷基。
[0981]
44.根据实施例42或43所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中环b选自苯基和环己基。
[0982]
45.根据实施例42至44中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中环b是苯基。
[0983]
46.根据实施例42至45中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中w1是n并且w2是n。
[0984]
47.根据实施例42至46中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中w1是ch并且w2是n。
[0985]
48.根据实施例42至47中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中z是c(r
zc
)2。
[0986]
49.根据实施例42至48中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中两个r
zc
一起形成氧代基团。
[0987]
50.根据实施例42至49中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中每个r3独立地选自c
1-c6烷基。
[0988]
51.根据实施例42至50中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中每个r3是甲基。
[0989]
52.根据实施例42至49中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中r3不存在。
[0990]
53.根据实施例42至52中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中r4选自氢和甲基。
[0991]
54.根据实施例42至53中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中r4是甲基。
[0992]
55.根据实施例42至54中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中每个r5独立地选自氢、卤素、c
1-c6烷基、c
1-c6氟烷基和c
6-c
10
芳基。
[0993]
56.根据实施例42至55中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中r
yn
选自：
[0994]
■
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的c
3-c
10
环烷基：
[0995]
○
羟基，
[0996]
○
氰基，
[0997]
○
n(rn)2，
[0998]
○
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的c
1-c6烷基：
[0999]
◆
羟基，
[1000]
◆
氧代，
[1001]
◆
n(rn)2，以及
[1002]
◆c6-c
10
芳基，
[1003]
○
任选地被1-3个独立地选自卤素、氧代、c
6-c
10
芳基和n(rn)2的基团取代的c
1-c6烷氧基，
[1004]
○c3-c
10
环烷基，以及
[1005]
○
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的5至10元杂芳基：
[1006]
◆
羟基，
[1007]
◆
氧代，
[1008]
◆
n(rn)2，
[1009]
◆
任选地被1-3个独立地选自c
1-c6烷氧基的基团取代的c
1-c6烷基，以及
[1010]
◆
任选地被1-3个独立地选自c
3-c
10
环烷基的基团取代的c
1-c6烷氧基，
[1011]
■
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的3至10元杂环基：
[1012]
○
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的c
1-c6烷基：
[1013]
◆
氧代，
[1014]
◆
羟基，
[1015]
◆
n(rn)2，
[1016]
◆
任选地被1-3个独立地选自c
6-c
10
芳基的基团取代的c
1-c6烷氧基，以及
[1017]
◆‑
(o)
0-1-(c
3-c
10
环烷基)，
[1018]
○c1-c6氟烷基，
[1019]
○
任选地被1-3个独立地选自卤素的基团取代的c
3-c
10
环烷基，以及
[1020]
○
3至10元杂环基，以及
[1021]
■
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的5至10元杂芳基：
[1022]
○
卤素，
[1023]
○
任选地被1-3个独立地选自氧代、c
1-c6烷氧基和n(rn)2的基团取代的c
1-c6烷基，以及
[1024]
○
任选地被1-3个独立地选自c
1-c6烷基的基团取代的(任选地被1-3个选自氧代、c
1-c6烷氧基和c
6-c
10
芳基的基团取代的)3至10元杂环基。
[1025]
57.根据实施例42至56中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上
可接受的盐，其中每个r
l1
独立地选自：
[1026]
■
氢，
[1027]
■
n(rn)2，条件是两个n(rn)2不与同一碳结合，
[1028]
■
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的c
1-c9烷基：
[1029]
○
卤素，
[1030]
○
羟基，以及
[1031]
○
任选地被1-3个独立地选自卤素和c
1-c6氟烷基的基团取代的c
3-c
10
环烷基，以及
[1032]
■c3-c
10
环烷基。
[1033]
58.根据实施例42至57中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中每个rn独立地选自：
[1034]
■
氢，
[1035]
■
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的c
1-c8烷基：
[1036]
○
nh2，
[1037]
○
nhcome，
[1038]
○c1-c6烷氧基，
[1039]
○‑
(o)
0-1-(c
3-c
10
环烷基)，
[1040]
○c6-c
10
芳基，以及
[1041]
○
任选地被1-4个独立地选自c
1-c6烷基的基团取代的3至14元杂环基，以及
[1042]
■c6-c
10
芳基，
[1043]
或者同一氮原子上的两个rn与其所结合的氮一起形成任选地被1-3个选自以下的基团取代的3至10元杂环基：
[1044]
■
氰基，
[1045]
■c1-c6烷基，以及
[1046]
■c1-c6烷氧基。
[1047]
59.一种式iib化合物：
[1048][1049]
其互变异构体、所述化合物或所述互变异构体的氘化衍生物、或前述任一者的药学上可接受的盐，其中环a、w1、w2、z、l1、l2、r3、r4、r5和r
yn
如根据实施例1所述的那样定义，条件是所述化合物不选自：
[1050]
(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2-甲基丙基)-12-{螺[2.3]己-5-基}-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮，
[1051]
(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2-甲基丙基)-12-[(1,1,2,2-四氘)螺[2.3]己-5-基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮，
[1052]
(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-12-(4,4,5,6,6-五氘螺[2.3]己-5-基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-酮，
[1053]
(11r)-12-(5-氘螺[2.3]己-5-基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-酮，以及
[1054]
(11r)-6-[2,6-二(三氘)甲基苯基]-11-(2-甲基丙基)-12-{螺[2.3]己-5-基}-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮。
[1055]
60.根据实施例59所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中环a选自c
6-c
10
芳基和5至10元杂芳基。
[1056]
61.根据实施例59或60所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中环a选自苯基、吡啶基、吡嗪基和吡唑基。
[1057]
62.根据实施例59至61中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中环a是苯基。
[1058]
63.根据实施例59至62中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中w1是n并且w2是n。
[1059]
64.根据实施例59至63中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中w1是ch并且w2是n。
[1060]
65.根据实施例59至64中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中z是c(r
zc
)2。
[1061]
66.根据实施例59至65中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中两个r
zc
一起形成氧代基团。
[1062]
67.根据实施例59至66中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中每个r3独立地选自c
1-c6烷基。
[1063]
68.根据实施例59至67中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中每个r3是甲基。
[1064]
69.根据实施例59至66中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中r3不存在。
[1065]
70.根据实施例59至69中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中r4选自氢和甲基。
[1066]
71.根据实施例59至70中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中r4是甲基。
[1067]
72.根据实施例59至71中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中每个r5独立地选自氢、卤素、c
1-c6烷基、c
1-c6氟烷基和c
6-c
10
芳基。
[1068]
73.根据实施例59至72中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上
可接受的盐，其中r
yn
选自：
[1069]
■
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的c
3-c
10
环烷基：
[1070]
○
羟基，
[1071]
○
氰基，
[1072]
○
n(rn)2，
[1073]
○
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的c
1-c6烷基：
[1074]
◆
羟基，
[1075]
◆
氧代，
[1076]
◆
n(rn)2，以及
[1077]
◆c6-c
10
芳基，
[1078]
○
任选地被1-3个独立地选自卤素、氧代、c
6-c
10
芳基和n(rn)2的基团取代的c
1-c6烷氧基，
[1079]
○c3-c
10
环烷基，以及
[1080]
○
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的5至10元杂芳基：
[1081]
◆
羟基，
[1082]
◆
氧代，
[1083]
◆
n(rn)2，
[1084]
◆
任选地被1-3个独立地选自c
1-c6烷氧基的基团取代的c
1-c6烷基，以及
[1085]
◆
任选地被1-3个独立地选自c
3-c
10
环烷基的基团取代的c
1-c6烷氧基，
[1086]
■
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的3至10元杂环基：
[1087]
○
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的c
1-c6烷基：
[1088]
◆
氧代，
[1089]
◆
羟基，
[1090]
◆
n(rn)2，
[1091]
◆
任选地被1-3个独立地选自c
6-c
10
芳基的基团取代的c
1-c6烷氧基，以及
[1092]
◆‑
(o)
0-1-(c
3-c
10
环烷基)，
[1093]
○c1-c6氟烷基，
[1094]
○
任选地被1-3个独立地选自卤素的基团取代的c
3-c
10
环烷基，以及
[1095]
○
3至10元杂环基，以及
[1096]
■
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的5至10元杂芳基：
[1097]
○
卤素，
[1098]
○
任选地被1-3个独立地选自氧代、c
1-c6烷氧基和n(rn)2的基团取代的c
1-c6烷基，以及
[1099]
○
任选地被1-3个独立地选自c
1-c6烷基的基团取代的(任选地被1-3个选自氧代、c
1-c6烷氧基和c
6-c
10
芳基的基团取代的)3至10元杂环基。
[1100]
74.根据实施例59至73中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中每个r
l1
独立地选自：
[1101]
■
氢，
[1102]
■
n(rn)2，条件是两个n(rn)2不与同一碳结合，
[1103]
■
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的c
1-c9烷基：
[1104]
○
卤素，
[1105]
○
羟基，以及
[1106]
○
任选地被1-3个独立地选自卤素和c
1-c6氟烷基的基团取代的c
3-c
10
环烷基，以及
[1107]
■c3-c
10
环烷基。
[1108]
75.根据实施例59至74中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中每个rn独立地选自：
[1109]
■
氢，
[1110]
■
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的c
1-c8烷基：
[1111]
○
nh2，
[1112]
○
nhcome，
[1113]
○c1-c6烷氧基，
[1114]
○‑
(o)
0-1-(c
3-c
10
环烷基)，
[1115]
○c6-c
10
芳基，以及
[1116]
○
任选地被1-4个独立地选自c
1-c6烷基的基团取代的3至14元杂环基，
[1117]
■c6-c
10
芳基，以及
[1118]
或者同一氮原子上的两个rn与其所结合的氮一起形成任选地被1-3个选自以下的基团取代的3至10元杂环基：
[1119]
■
氰基，
[1120]
■c1-c6烷基，以及
[1121]
■c1-c6烷氧基。
[1122]
76.一种式iii化合物：
[1123][1124]
其互变异构体、所述化合物或所述互变异构体的氘化衍生物、或前述任一者的药学上可接受的盐，其中w1、w2、z、l1、l2、r4、r5和r
yn
如根据实施例1所述的那样定义，条件是所述化合物不选自：
[1125]
(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2-甲基丙基)-12-{螺[2.3]己-5-基}-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮，
[1126]
(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2-甲基丙基)-12-[(1,1,2,2-四氘)螺[2.3]己-5-基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮，
[1127]
(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-12-(4,4,5,6,6-五氘螺
[2.3]己-5-基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-酮，
[1128]
(11r)-12-(5-氘螺[2.3]己-5-基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-酮，以及
[1129]
(11r)-6-[2,6-二(三氘)甲基苯基]-11-(2-甲基丙基)-12-{螺[2.3]己-5-基}-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮。
[1130]
77.根据实施例76所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中w1是n并且w2是n。
[1131]
78.根据实施例76或77所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中w1是ch并且w2是n。
[1132]
79.根据实施例76至78中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中z是c(r
zc
)2。
[1133]
80.根据实施例76至79中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中两个r
zc
一起形成氧代基团。
[1134]
81.根据实施例76至80中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中r4选自氢和甲基。
[1135]
82.根据实施例76至81中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中r4是甲基。
[1136]
83.根据实施例76至82中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中每个r5独立地选自氢、卤素、c
1-c6烷基、c
1-c6氟烷基和c
6-c
10
芳基。
[1137]
84.根据实施例76至83中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中r
yn
选自：
[1138]
■
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的c
3-c
10
环烷基：
[1139]
○
羟基，
[1140]
○
氰基，
[1141]
○
n(rn)2，
[1142]
○
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的c
1-c6烷基：
[1143]
◆
羟基，
[1144]
◆
氧代，
[1145]
◆
n(rn)2，以及
[1146]
◆c6-c
10
芳基，
[1147]
○
任选地被1-3个独立地选自卤素、氧代、c
6-c
10
芳基和n(rn)2的基团取代的c
1-c6烷氧基，
[1148]
○c3-c
10
环烷基，以及
[1149]
○
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的5至10元杂芳基：
[1150]
◆
羟基，
[1151]
◆
氧代，
[1152]
◆
n(rn)2，
[1153]
◆
任选地被1-3个独立地选自c
1-c6烷氧基的基团取代的c
1-c6烷基，以及
[1154]
◆
任选地被1-3个独立地选自c
3-c
10
环烷基的基团取代的c
1-c6烷氧基，
[1155]
■
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的3至10元杂环基：
[1156]
○
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的c
1-c6烷基：
[1157]
◆
氧代，
[1158]
◆
羟基，
[1159]
◆
n(rn)2，
[1160]
◆
任选地被1-3个独立地选自c
6-c
10
芳基的基团取代的c
1-c6烷氧基，以及
[1161]
◆‑
(o)
0-1-(c
3-c
10
环烷基)，
[1162]
○c1-c6氟烷基，
[1163]
○
任选地被1-3个独立地选自卤素的基团取代的c
3-c
10
环烷基，以及
[1164]
○
3至10元杂环基，以及
[1165]
■
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的5至10元杂芳基：
[1166]
○
卤素，
[1167]
○
任选地被1-3个独立地选自氧代、c
1-c6烷氧基和n(rn)2的基团取代的c
1-c6烷基，以及
[1168]
○
任选地被1-3个独立地选自c
1-c6烷基的基团取代的(任选地被1-3个选自氧代、c
1-c6烷氧基和c
6-c
10
芳基的基团取代的)3至10元杂环基。
[1169]
85.根据实施例76至84中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中每个r
l1
独立地选自：
[1170]
■
氢，
[1171]
■
n(rn)2，条件是两个n(rn)2不与同一碳结合，
[1172]
■
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的c
1-c9烷基：
[1173]
○
卤素，
[1174]
○
羟基，以及
[1175]
○
任选地被1-3个独立地选自卤素和c
1-c6氟烷基的基团取代的c
3-c
10
环烷基，以及
[1176]
■c3-c
10
环烷基。
[1177]
86.根据实施例76至85中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中每个rn独立地选自：
[1178]
■
氢，
[1179]
■
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的c
1-c8烷基：
[1180]
○
nh2，
[1181]
○
nhcome，
[1182]
○c1-c6烷氧基，
[1183]
○‑
(o)
0-1-(c
3-c
10
环烷基)，
[1184]
○c6-c
10
芳基，以及
[1185]
○
任选地被1-4个独立地选自c
1-c6烷基的基团取代的3至14元杂环基，以及
[1186]
■c6-c
10
芳基，以及
[1187]
或者同一氮原子上的两个rn与其所结合的氮一起形成任选地被1-3个选自以下的基团取代的3至10元杂环基：
[1188]
■
氰基，
[1189]
■c1-c6烷基，以及
[1190]
■c1-c6烷氧基。
[1191]
87.一种式iv化合物：
[1192][1193]
其互变异构体、所述化合物或所述互变异构体的氘化衍生物、或前述任一者的药学上可接受的盐，其中z、l1、l2、r4、r5和r
yn
如根据实施例1所述的那样定义，条件是所述化合物不选自：
[1194]
(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2-甲基丙基)-12-{螺[2.3]己-5-基}-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮，
[1195]
(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2-甲基丙基)-12-[(1,1,2,2-四氘)螺[2.3]己-5-基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮，
[1196]
(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-12-(4,4,5,6,6-五氘螺[2.3]己-5-基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-酮，
[1197]
(11r)-12-(5-氘螺[2.3]己-5-基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-酮，以及
[1198]
(11r)-6-[2,6-二(三氘)甲基苯基]-11-(2-甲基丙基)-12-{螺[2.3]己-5-基}-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮。
[1199]
88.根据实施例87所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中z是c(r
zc
)2。
[1200]
89.根据实施例87或88所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中两个r
zc
一起形成氧代基团。
[1201]
90.根据实施例87至89中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中r4选自氢和甲基。
[1202]
91.根据实施例87至90中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中r4是甲基。
[1203]
92.根据实施例87至91中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中每个r5独立地选自氢、卤素、c
1-c6烷基、c
1-c6氟烷基和c
6-c
10
芳基。
[1204]
93.根据实施例87至92中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中r
yn
选自：
[1205]
■
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的c
3-c
10
环烷基：
[1206]
○
羟基，
[1207]
○
氰基，
[1208]
○
n(rn)2，
[1209]
○
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的c
1-c6烷基：
[1210]
◆
羟基，
[1211]
◆
氧代，
[1212]
◆
n(rn)2，以及
[1213]
◆c6-c
10
芳基，
[1214]
○
任选地被1-3个独立地选自卤素、氧代、c
6-c
10
芳基和n(rn)2的基团取代的c
1-c6烷氧基，
[1215]
○c3-c
10
环烷基，以及
[1216]
○
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的5至10元杂芳基：
[1217]
◆
羟基，
[1218]
◆
氧代，
[1219]
◆
n(rn)2，
[1220]
◆
任选地被1-3个独立地选自c
1-c6烷氧基的基团取代的c
1-c6烷基，以及
[1221]
◆
任选地被1-3个独立地选自c
3-c
10
环烷基的基团取代的c
1-c6烷氧基，
[1222]
■
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的3至10元杂环基：
[1223]
○
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的c
1-c6烷基：
[1224]
◆
氧代，
[1225]
◆
羟基，
[1226]
◆
n(rn)2，
[1227]
◆
任选地被1-3个独立地选自c
6-c
10
芳基的基团取代的c
1-c6烷氧基，以及
[1228]
◆‑
(o)
0-1-(c
3-c
10
环烷基)，
[1229]
○c1-c6氟烷基，
[1230]
○
任选地被1-3个独立地选自卤素的基团取代的c
3-c
10
环烷基，以及
[1231]
○
3至10元杂环基，以及
[1232]
■
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的5至10元杂芳基：
[1233]
○
卤素，
[1234]
○
任选地被1-3个独立地选自氧代、c
1-c6烷氧基和n(rn)2的基团取代的c
1-c6烷基，以及
[1235]
○
任选地被1-3个独立地选自c
1-c6烷基的基团取代的(任选地被1-3个选自氧代、c
1-c6烷氧基和c
6-c
10
芳基的基团取代的)3至10元杂环基。
[1236]
94.根据实施例87至93中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上
5-基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮，
[1263]
(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-12-(4,4,5,6,6-五氘螺[2.3]己-5-基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-酮，
[1264]
(11r)-12-(5-氘螺[2.3]己-5-基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-酮，以及
[1265]
(11r)-6-[2,6-二(三氘)甲基苯基]-11-(2-甲基丙基)-12-{螺[2.3]己-5-基}-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮。
[1266]
97.根据实施例96所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中z是c(r
zc
)2。
[1267]
98.根据实施例96或97所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中两个r
zc
一起形成氧代基团。
[1268]
99.根据实施例96至98中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中r4选自氢和甲基。
[1269]
100.根据实施例96至99中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中r4是甲基。
[1270]
101.根据实施例96至100中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中每个r5独立地选自氢、卤素、c
1-c6烷基、c
1-c6氟烷基和c
6-c
10
芳基。
[1271]
102.根据实施例96至101中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中r
yn
选自：
[1272]
■
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的c
3-c
10
环烷基：
[1273]
○
羟基，
[1274]
○
氰基，
[1275]
○
n(rn)2，
[1276]
○
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的c
1-c6烷基：
[1277]
◆
羟基，
[1278]
◆
氧代，
[1279]
◆
n(rn)2，以及
[1280]
◆c6-c
10
芳基，
[1281]
○
任选地被1-3个独立地选自卤素、氧代、c
6-c
10
芳基和n(rn)2的基团取代的c
1-c6烷氧基，
[1282]
○c3-c
10
环烷基，
[1283]
○
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的5至10元杂芳基：
[1284]
◆
羟基，
[1285]
◆
氧代，
[1286]
◆
n(rn)2，
[1287]
◆
任选地被1-3个独立地选自c
1-c6烷氧基的基团取代的c
1-c6烷基，以及
[1288]
◆
任选地被1-3个独立地选自c
3-c
10
环烷基的基团取代的c
1-c6烷氧基，
[1289]
■
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的3至10元杂环基：
[1290]
○
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的c
1-c6烷基：
[1291]
◆
氧代，
[1292]
◆
羟基，
[1293]
◆
n(rn)2，
[1294]
◆
任选地被1-3个独立地选自c
6-c
10
芳基的基团取代的c
1-c6烷氧基，以及
[1295]
◆‑
(o)
0-1-(c
3-c
10
环烷基)，
[1296]
○c1-c6氟烷基，
[1297]
○
任选地被1-3个独立地选自卤素的基团取代的c
3-c
10
环烷基，以及
[1298]
○
3至10元杂环基，以及
[1299]
■
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的5至10元杂芳基：
[1300]
○
卤素，
[1301]
○
任选地被1-3个独立地选自氧代、c
1-c6烷氧基和n(rn)2的基团取代的c
1-c6烷基，以及
[1302]
○
任选地被1-3个独立地选自c
1-c6烷基的基团取代的(任选地被1-3个选自氧代、c
1-c6烷氧基和c
6-c
10
芳基的基团取代的)3至10元杂环基。
[1303]
103.根据实施例96至102中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中每个r
l1
独立地选自：
[1304]
■
氢，
[1305]
■
n(rn)2，条件是两个n(rn)2不与同一碳结合，
[1306]
■
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的c
1-c9烷基：
[1307]
○
卤素，
[1308]
○
羟基，以及
[1309]
○
任选地被1-3个独立地选自卤素和c
1-c6氟烷基的基团取代的c
3-c
10
环烷基，以及
[1310]
■c3-c
10
环烷基。
[1311]
104.根据实施例96至103中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中每个rn独立地选自：
[1312]
■
氢，
[1313]
■
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的c
1-c8烷基：
[1314]
○
nh2，
[1315]
○
nhcome，
[1316]
○c1-c6烷氧基，
[1317]
○‑
(o)
0-1-(c
3-c
10
环烷基)，
[1318]
○c6-c
10
芳基，以及
[1319]
○
任选地被1-4个独立地选自c
1-c6烷基的基团取代的3至14元杂环基，以及
[1320]
■c6-c
10
芳基，
[1321]
或者同一氮原子上的两个rn与其所结合的氮一起形成任选地被1-3个选自以下的
基团取代的3至10元杂环基：
[1322]
■
氰基，
[1323]
■c1-c6烷基，以及
[1324]
■c1-c6烷氧基。
[1325]
105.一种式vi化合物：
[1326][1327]
其互变异构体、所述化合物或所述互变异构体的氘化衍生物、或前述任一者的药学上可接受的盐，其中l1、r4、r5和r
yn
如根据实施例1所述的那样定义，条件是所述化合物不选自：
[1328]
(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2-甲基丙基)-12-{螺[2.3]己-5-基}-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮，
[1329]
(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2-甲基丙基)-12-[(1,1,2,2-四氘)螺[2.3]己-5-基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮，
[1330]
(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-12-(4,4,5,6,6-五氘螺[2.3]己-5-基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-酮，
[1331]
(11r)-12-(5-氘螺[2.3]己-5-基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-酮，以及
[1332]
(11r)-6-[2,6-二(三氘)甲基苯基]-11-(2-甲基丙基)-12-{螺[2.3]己-5-基}-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮。
[1333]
106.根据实施例105所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中r4选自氢和甲基。
[1334]
107.根据实施例105或106所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中r4是甲基。
[1335]
108.根据实施例105至107中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中每个r5独立地选自氢、卤素、c
1-c6烷基、c
1-c6氟烷基和c
6-c
10
芳基。
[1336]
109.根据实施例105至108中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中r
yn
选自：
[1337]
■
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的c
3-c
10
环烷基：
[1338]
○
羟基，
[1339]
○
氰基，
[1340]
○
n(rn)2，
[1341]
○
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的c
1-c6烷基：
[1342]
◆
羟基，
[1343]
◆
氧代，
[1344]
◆
n(rn)2，以及
[1345]
◆c6-c
10
芳基，
[1346]
○
任选地被1-3个独立地选自卤素、氧代、c
6-c
10
芳基和n(rn)2的基团取代的c
1-c6烷氧基，
[1347]
○c3-c
10
环烷基，
[1348]
○
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的5至10元杂芳基：
[1349]
◆
羟基，
[1350]
◆
氧代，
[1351]
◆
n(rn)2，
[1352]
◆
任选地被1-3个独立地选自c
1-c6烷氧基的基团取代的c
1-c6烷基，以及
[1353]
◆
任选地被1-3个独立地选自c
3-c
10
环烷基的基团取代的c
1-c6烷氧基，
[1354]
■
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的3至10元杂环基：
[1355]
○
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的c
1-c6烷基：
[1356]
◆
氧代，
[1357]
◆
羟基，
[1358]
◆
n(rn)2，
[1359]
◆
任选地被1-3个独立地选自c
6-c
10
芳基的基团取代的c
1-c6烷氧基，以及
[1360]
◆‑
(o)
0-1-(c
3-c
10
环烷基)，
[1361]
○c1-c6氟烷基，
[1362]
○
任选地被1-3个独立地选自卤素的基团取代的c
3-c
10
环烷基，以及
[1363]
○
3至10元杂环基，以及
[1364]
■
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的5至10元杂芳基：
[1365]
○
卤素，
[1366]
○
任选地被1-3个独立地选自氧代、c
1-c6烷氧基和n(rn)2的基团取代的c
1-c6烷基，以及
[1367]
○
任选地被1-3个独立地选自c
1-c6烷基的基团取代的(任选地被1-3个选自氧代、c
1-c6烷氧基和c
6-c
10
芳基的基团取代的)3至10元杂环基。
[1368]
110.根据实施例105至109中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中每个r
l1
独立地选自：
[1369]
■
氢，
[1370]
■
n(rn)2，条件是两个n(rn)2不与同一碳结合，
[1371]
■
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的c
1-c9烷基：
[1372]
○
卤素，
[1373]
○
羟基，以及
[1374]
○
任选地被1-3个独立地选自卤素和c
1-c6氟烷基的基团取代的c
3-c
10
环烷基，以及
[1375]
■c3-c
10
环烷基。
[1376]
111.根据实施例105至110中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其中每个rn独立地选自：
[1377]
■
氢，
[1378]
■
任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的c
1-c8烷基：
[1379]
○
nh2，
[1380]
○
nhcome，
[1381]
○c1-c6烷氧基，
[1382]
○‑
(o)
0-1-(c
3-c
10
环烷基)，
[1383]
○c6-c
10
芳基，以及
[1384]
○
任选地被1-4个独立地选自c
1-c6烷基的基团取代的3至14元杂环基，以及
[1385]
■c6-c
10
芳基，
[1386]
或者同一氮原子上的两个rn与其所结合的氮一起形成任选地被1-3个选自以下的基团取代的3至10元杂环基：
[1387]
■
氰基，
[1388]
■c1-c6烷基，以及
[1389]
■c1-c6烷氧基。
[1390]
112.根据实施例1至111中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其选自式i、ia、iia、iib、iii、iv、v和vi的化合物、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐。
[1391]
113.根据实施例1至112中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其选自化合物1-474(表8、9、10、11)、化合物475-506(表7)、化合物507和508(表12)、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐。
[1392]
114.一种药物组合物，其包括根据实施例1至113中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐和药学上可接受的载体。
[1393]
115.根据实施例114所述的药物组合物，其进一步包括一种或多种另外的治疗剂。
[1394]
116.根据实施例115所述的药物组合物，其中所述一种或多种另外的治疗剂选自粘液溶解剂、支气管扩张剂、抗生素、抗感染剂和抗炎剂。
[1395]
117.根据实施例115所述的药物组合物，其中所述一种或多种另外的治疗剂是选自妥布霉素的抗生素，包含妥布霉素吸入粉末(tip)、阿奇霉素、氨曲南，包含雾化形式的氨曲南、阿米卡星，包含其脂质体调配物、环丙沙星，包含其适于吸入施用的调配物、左氧氟沙星，包含其雾化调配物，以及两种抗生素的组合，例如磷霉素和妥布霉素。
[1396]
118.根据实施例115所述的药物组合物，其中所述一种或多种另外的治疗剂是一种或多种cftr调节剂。
[1397]
119.根据实施例118所述的药物组合物，其中所述一种或多种cftr调节剂选自cftr增效剂。
[1398]
120.根据实施例118所述的药物组合物，其中所述一种或多种cftr调节剂选自cftr校正剂。
[1399]
121.根据实施例118所述的药物组合物，其中所述一种或多种cftr调节剂包括至少一种cftr增效剂和至少一种cftr校正剂。
[1400]
122.根据实施例118至121中任一项所述的药物组合物，其中所述一种或多种cftr调节剂选自：(a)替扎卡托、鲁玛卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐；以及(b)依伐卡托、氘替卡托和前述任一项的氘化衍生物和药学上可接受的盐。
[1401]
123.根据实施例118至121中任一项所述的药物组合物，其中所述一种或多种cftr调节剂选自：(a)替扎卡托、鲁玛卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐；或(b)(6r,12r)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇和氘化衍生物及其药学上可接受的盐。
[1402]
124.根据实施例118至121中任一项所述的药物组合物，其中所述组合物包括替扎卡托和依伐卡托。
[1403]
125.根据实施例118至121中任一项所述的药物组合物，其中所述组合物包括替扎卡托和氘替卡托。
[1404]
126.根据实施例118至121中任一项所述的药物组合物，其中所述组合物包括替扎卡托和(6r,12r)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇。
[1405]
127.根据实施例118至121中任一项所述的药物组合物，其中所述组合物包括鲁玛卡托和依伐卡托。
[1406]
128.根据实施例118至121中任一项所述的药物组合物，其中所述组合物包括鲁玛卡托和氘替卡托。
[1407]
129.根据实施例118至121中任一项所述的药物组合物，其中所述组合物包括鲁玛卡托和(6r,12r)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇。
[1408]
130.一种治疗囊性纤维化的方法，所述方法包括向有需要的患者施用根据实施例1至113中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐或根据实施例114至129中任一项所述的药物组合物。
[1409]
131.根据实施例130所述的方法，其进一步包括在施用根据实施例1至113中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐或根据实施例114所述的药物组合物之前、同时或之后向所述患者施用一种或多种另外的治疗剂。
[1410]
132.根据实施例131所述的方法，其中所述一种或多种另外的治疗剂选自cftr调节剂。
[1411]
133.根据实施例132所述的方法，其中所述一种或多种cftr调节剂选自cftr增效剂。
[1412]
134.根据实施例132所述的方法，其中所述一种或多种cftr调节剂选自cftr校正剂。
[1413]
135.根据实施例132所述的方法，其中所述一种或多种cftr调节剂包括cftr增效剂和另外的cftr校正剂两者。
[1414]
136.根据实施例133和135所述的方法，其中所述cftr增效剂选自依伐卡托、氘替
卡托、(6r,12r)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇和前述任一项的氘化衍生物和药学上可接受的盐。
[1415]
137.根据实施例134或实施例135所述的方法，其中所述cftr校正剂选自替扎卡托、鲁玛卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐。
[1416]
138.根据实施例131所述的方法，其中所述一种或多种另外的治疗剂是选自替扎卡托、依伐卡托、氘替卡托、鲁玛卡托和其药学上可接受的盐的化合物。
[1417]
139.根据实施例131所述的方法，其中所述一种或多种另外的治疗剂是选自(6r,12r)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的化合物。
[1418]
140.根据实施例131所述的方法，其中所述一种或多种另外的治疗剂是替扎卡托和依伐卡托。
[1419]
141.根据实施例131所述的方法，其中所述一种或多种另外的治疗剂是替扎卡托和氘替卡托。
[1420]
142.根据实施例131所述的方法，其中所述一种或多种另外的治疗剂是替扎卡托和(6r,12r)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇。
[1421]
143.根据实施例131所述的方法，其中所述一种或多种另外的治疗剂是鲁玛卡托和依伐卡托。
[1422]
144.根据实施例131所述的方法，其中所述一种或多种另外的治疗剂是鲁玛卡托和氘替卡托。
[1423]
145.根据实施例131所述的方法，其中所述一种或多种另外的治疗剂是鲁玛卡托和(6r,12r)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇。
[1424]
146.根据实施例1至113中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐或根据实施例114至129中任一项所述的药物组合物，其用于治疗囊性纤维化。
[1425]
147.根据实施例1至113中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐或根据实施例114至129中任一项所述的药物组合物，其用于制造用于治疗囊性纤维化的药物。
[1426]
148.一种选自化合物1-508的化合物、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐。
[1427]
149.一种选自化合物1-508的化合物的氘化衍生物。
[1428]
150.一种选自化合物1-508的化合物的药学上可接受的盐。
[1429]
151.一种选自化合物1-508的化合物。
[1430]
152.一种药物组合物，其包括选自化合物1-508的化合物、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐以及药学上可接受的载体。
[1431]
153.一种药物组合物，其包括选自化合物1-508的化合物的氘化衍生物和药学上可接受的载体。
[1432]
154.一种药物组合物，其包括选自化合物1-508的化合物的药学上可接受的盐和药学上可接受的载体。
[1433]
155.一种药物组合物，其包括选自化合物1-508的化合物和药学上可接受的载体。
[1434]
156.一种药物组合物，其包括：(a)选自化合物1-508的化合物、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐；(b)cftr增效剂；以及(c)药学上可接受的载体。
[1435]
157.一种药物组合物组合物，其包括：(a)选自化合物1-508的化合物的氘化衍生物；(b)cftr增效剂；以及(c)药学上可接受的载体。
[1436]
158.一种药物，其包括：(a)选自化合物1-508的化合物的药学上可接受的盐；(b)cftr增效剂；以及(c)药学上可接受的载体。
[1437]
159.一种药物组合物，其包括：(a)选自化合物1-508的化合物；(b)cftr增效剂；以及(c)药学上可接受的载体。
[1438]
160.一种药物组合物，其包括：(a)选自化合物1-508的化合物、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐；(b)另外的cftr校正剂；以及(c)药学上可接受的载体。
[1439]
161.一种药物组合物，其包括：(a)选自化合物1-508的化合物的氘化衍生物；(b)另外的cftr校正剂；以及(c)药学上可接受的载体。
[1440]
162.一种药物组合物，其包括：(a)选自化合物1-508的化合物的药学上可接受的盐；(b)另外的cftr校正剂；以及(c)药学上可接受的载体。
[1441]
163.一种药物组合物，其包括：(a)选自化合物1-508的化合物；(b)另外的cftr校正剂；以及(c)药学上可接受的载体。
[1442]
164.一种药物组合物，其包括：(a)选自化合物1-508的化合物、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐；(b)另外的cftr校正剂；(c)crtr增效剂；以及(d)药学上可接受的载体。
[1443]
165.一种药物组合物，其包括：(a)选自化合物1-508的化合物的氘化衍生物；(b)另外的cftr校正剂；(c)crtr增效剂；以及(d)药学上可接受的载体。
[1444]
166.一种药物组合物，其包括：(a)选自化合物1-508的化合物的药学上可接受的盐；(b)另外的cftr校正剂；(c)crtr增效剂；以及(d)药学上可接受的载体。
[1445]
167.一种药物组合物，其包括：(a)选自化合物1-508的化合物；(b)另外的cftr校正剂；(c)crtr增效剂；以及(d)药学上可接受的载体。
[1446]
168.一种选自化合物1-508的化合物、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐用于治疗囊性纤维化的方法。
[1447]
169.一种选自化合物1-508的化合物的氘化衍生物用于治疗囊性纤维化的方法。
[1448]
170.一种选自化合物1-508的化合物的药学上可接受的盐用于治疗囊性纤维化的方法。
[1449]
171.一种选自化合物1-508的化合物用于治疗囊性纤维化的方法。
[1450]
172.一种包括选自化合物1-508的化合物、其互变异构体、这些化合物和互变异构
体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐以及药学上可接受的载体的药物组合物用于治疗囊性纤维化的方法。
[1451]
173.一种包括选自化合物1-508的化合物的氘化衍生物和药学上可接受的载体的药物组合物用于治疗囊性纤维化的方法。
[1452]
174.一种包括选自化合物1-508的化合物的药学上可接受的盐和药学上可接受的载体的药物组合物用于治疗囊性纤维化的方法。
[1453]
175.一种包括选自化合物1-508的化合物和药学上可接受的载体的药物组合物用于治疗囊性纤维化的方法。
[1454]
176.一种包括：(a)选自化合物1-508的化合物、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐；(b)cftr增效剂；以及(c)药学上可接受的载体的药物组合物用于治疗囊性纤维化的方法。
[1455]
177.一种包括：(a)选自化合物1-508的化合物的氘化衍生物；(b)cftr增效剂；以及(c)药学上可接受的载体的药物用于治疗囊性纤维化的方法。
[1456]
178.一种包括：(a)选自化合物1-508的化合物的药学上可接受的盐；(b)cftr增效剂；以及(c)药学上可接受的载体的药物组合物用于治疗囊性纤维化的方法。
[1457]
179.一种药物组合物，其包括：(a)选自化合物1-508的化合物；(b)cftr增效剂；以及(c)药学上可接受的载体。
[1458]
180.一种包括：(a)选自化合物1-508的化合物、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐；(b)另外的cftr校正剂；以及(c)药学上可接受的载体的药物组合物用于治疗囊性纤维化的方法。
[1459]
181.一种包括：(a)选自化合物1-508的化合物的氘化衍生物；(b)另外的cftr校正剂；以及(c)药学上可接受的载体的药物组合物用于治疗囊性纤维化的方法。
[1460]
182.一种包括：(a)选自化合物1-508的化合物的药学上可接受的盐；(b)另外的cftr校正剂；以及(c)药学上可接受的载体的药物组合物用于治疗囊性纤维化的方法。
[1461]
183.一种包括：(a)选自化合物1-508的化合物；(b)另外的cftr校正剂；以及(c)药学上可接受的载体的药物组合物用于治疗囊性纤维化的方法。
[1462]
184.一种包括：(a)选自化合物1-508的化合物、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐；(b)另外的cftr校正剂；(c)crtr增效剂；以及(d)药学上可接受的载体的药物组合物用于治疗囊性纤维化的方法。
[1463]
185.一种包括：(a)选自化合物1-508的化合物的氘化衍生物；(b)另外的cftr校正剂；(c)crtr增效剂；以及(d)药学上可接受的载体的药物组合物用于治疗囊性纤维化的方法。
[1464]
186.一种包括：(a)选自化合物1-508的化合物的药学上可接受的盐；(b)另外的cftr校正剂；(c)crtr增效剂；以及(d)药学上可接受的载体的药物组合物用于治疗囊性纤维化的方法。
[1465]
187.一种包括：(a)选自化合物1-508的化合物；(b)另外的cftr校正剂；(c)crtr增效剂；以及(d)药学上可接受的载体的药物组合物用于治疗囊性纤维化的方法。
[1466]
实例
[1467]
i.缩写列表
[1468]
acn：乙腈
[1469]
boc酸酐((boc)2o)：二碳酸二叔丁酯
[1470]
cdcl3：氯仿-d
[1471]
cdi：碳基二咪唑
[1472]
cdmt：2-氯-4,6-二甲氧基-1,3,5-三嗪
[1473]
ch2cl2：二氯甲烷
[1474]
ch3cn：乙腈
[1475]
comu：(1-氰基-2-乙氧基-2-氧代亚乙基氨基氧基)二甲基氨基-吗啉基-碳鎓六氟磷酸盐
[1476]
cmpd：化合物
[1477]
dabco：1,4-二氮杂双环[2.2.2]辛烷
[1478]
dbu：1,8-二氮杂双环(5.4.0)十一碳-7-烯
[1479]
dce：1,2-二氯乙烷
[1480]
dcm：二氯甲烷
[1481]
di：去离子
[1482]
diad：偶氮二甲酸二异丙酯
[1483]
diea：(dipea、dipea)：n,n-二异丙基乙胺
[1484]
dma：n,n-二甲基乙酰胺
[1485]
dmap：4-二甲基氨基吡啶
[1486]
dmf：n,n-二甲基甲酰胺
[1487]
dmso：二甲亚砜
[1488]
dmp：戴斯-马丁过碘烷
[1489]
ea：乙酸乙酯
[1490]
edc：1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳化二亚胺
[1491]
elsd：蒸发光散射检测器
[1492]
二乙醚：乙醚
[1493]
esi-ms：电喷雾电离质谱法
[1494]
etoac：乙酸乙酯
[1495]
etoh：乙醇
[1496]
gc：气相色谱法
[1497]
grubbs第1代催化剂：二氯(亚苄基)双(三环己基膦)钌(ii)
[1498]
grubbs第2代催化剂：[1,3-双(2,4,6-三甲基苯基)咪唑烷-2-亚基]-二氯-[(2-异丙氧基苯基)亚甲基]钌
[1499]
hatu：1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1h-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶3-六氟磷酸氧化物
[1500]
hplc：高效液相色谱法
[1501]
hoveyda-grubbs第2代催化剂：(1,3-双-(2,4,6-三甲基苯基)-2-咪唑烷基亚基)二氯(邻异丙氧基苯基亚甲基)钌，二氯[1,3-双(2,4,6-三甲基苯基)-2-咪唑烷基亚基](2-异丙氧基苯基亚甲基)钌(ii)
[1502]
ipa：异丙醇
[1503]
khso4：硫酸氢钾
[1504]
lc：液相色谱法
[1505]
lcms：液相色谱法质谱法
[1506]
lcms met.：lcms方法
[1507]
lcms rt：lcms保留时间
[1508]
lda：二异丙基氨基锂
[1509]
lioh：氢氧化锂
[1510]
mecn：乙腈
[1511]
meoh：甲醇
[1512]
mtbe：甲基叔丁基醚
[1513]
methf或2-methf：2-甲基四氢呋喃
[1514]
mgso4：硫酸镁
[1515]
nahco3：碳酸氢钠
[1516]
naoh：氢氧化钠
[1517]
nmp：n-甲基-2-吡咯烷酮
[1518]
nmm：n-甲基吗啉
[1519]
pd2(dba)3：三(二亚苄基丙酮)二钯(0)
[1520]
pd/c：钯/炭
[1521]
pd(dppf)cl2：[1,1
′‑
双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(ii)
[1522]
pd(oac)2：乙酸钯(ii)
[1523]
ptfe：聚四氟乙烯
[1524]
rt、rt：室温
[1525]
ruphos：2-二环己基膦基-2
′
,6
′‑
二异丙氧基联苯
[1526]
sfc：超临界流体色谱法
[1527]
tbai：四丁基碘化铵
[1528]
tea：三乙胺
[1529]
tfa：三氟乙酸
[1530]
thf：四氢呋喃
[1531]
tlc：薄层色谱法
[1532]
tms：三甲基甲硅烷基
[1533]
tmscl：三甲基氯硅烷
[1534]
t3p：丙烷膦酸酐
[1535]
uplc：超高效液相色谱法
[1536]
xantphos：4,5-双(二苯基膦基)-9,9-二甲基氧杂蒽
[1537]
xphos：2-二环己基膦基-2
′
,4
′
,6
′‑
三异丙基联苯
[1538]
ii.一般方法
[1539]
除非另有说明，否则通过商业来源获得试剂和起始材料，并且在不纯化的情况下使用。
cf3co2h)。流动相b＝ch3cn(0.035％cf3co2h)。流速＝1.2ml/min，进样体积＝1.5μl，并且柱温＝60℃。
[1550]
lc方法j：使用waters制造的acquity uplc beh c
18
柱(50
×
2.1mm，1.7μm颗粒)(pn：186002350)和在2.9分钟内从1％-99％流动相b运行的双梯度的反相uplc。流动相a＝h2o(0.05％ nh4hco2)。流动相b＝ch3cn。流速＝1.2ml/min，进样体积＝1.5μl，并且柱温＝60℃。
[1551]
lc方法k：kinetex polar c
18
3.0
×
50mm 2.6μm，3分钟，5％-95％acn/h2o(0.1％甲酸)1.2毫升/分钟。
[1552]
lc方法q：使用waters制造的acquity uplc beh c
18
柱(50
×
2.1mm，1.7μm颗粒)(pn：186002350)和在2.9分钟内从30％-99％流动相b运行的双梯度的反相uplc。流动相a＝h2o(0.05％ cf3co2h)。流动相b＝ch3cn(0.035％ cf3co2h)。流速＝1.2ml/min，进样体积＝1.5μl，并且柱温＝60℃。
[1553]
lc方法s：merckmillipore chromolith speedrod c
18
柱(50x 4.6mm)和在12分钟内从5-100％流动相b运行的双梯度。流动相a＝水(0.1％cf3co2h)。流动相b＝乙腈(0.1％ cf3co2h)。
[1554]
lc方法t：merckmillipore chromolith speedrod c
18
柱(50x 4.6mm)和在6分钟内从5-100％流动相b运行的双梯度。流动相a＝水(0.1％ cf3co2h)。流动相b＝乙腈(0.1％ cf3co2h)。
[1555]
lc方法u：kinetex polar c
18
3.0
×
50mm 2.6μm，6分钟，5％-95％acn/h2o(0.1％甲酸)1.2毫升/分钟。
[1556]
lc方法v：由waters制造的acquity uplc beh c
18
柱(50
×
2.1mm，1.7μm颗粒)(pn：186002350)和在2.9分钟内从1-30％流动相b运行的双梯度。流动相a＝h20(0.05％ cf3co2h)。流动相b＝ch3cn(0.035％ cf3co2h)。流速＝1.2ml/min，进样体积＝1.5μl，并且柱温＝60℃。
[1557]
lc方法w：水皮质2.7μc
18
(3.0mm
×
50mm)，温度：55℃；流速：1.2毫升/分钟；流动相：含0.1％三氟乙酸(tfa)酸的100％水，然后含0.1％tfa酸的100％乙腈，梯度：4分钟内5％至100％ b，在100％ b停留0.5分钟，1.5分钟内平衡到5％ b。
[1558]
lc方法x：uplc luna c
18
(2)50
×
3mm 3μm。运行：2.5分钟。流动相：初始95％ h2o 0.1％ fa/5％ mecn 0.1％ fa，1.3分钟内线性梯度至95％mecn 0.1％ fa，保持1.2分钟95％ ch3cn 0.1％ fa，t：45c，流速：1.5毫升/分钟
[1559]
lc方法y：uplc sunfire c
18 75
×
4.6mm 3.5μm，运行：6分钟。流动相条件：初始95％ h2o+0.1％ fa/5％ ch3cn+0.1％ fa，线性梯度至95％ch3cn持续4分钟，在95％ ch3cn下保持2分钟。t：45℃，流速：1.5毫升/分钟
[1560]
lc方法1a：使用waters制造的viridis beh 2-乙基吡啶柱(150
×
2.1mm，3.5μm颗粒)(pn：186006655)和在4.5分钟内从5％-80％流动相b运行的双梯度的反相upc2。流动相a＝co2。流动相b＝meoh(20mm nh3)。可变流速＝1.30-0.40毫升/分钟以维持恒定压力，进样体积＝2.0μl，并且柱温＝55℃。
[1561]
iv.常见中间体的合成
[1562]
实例a：3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸的制备
[1563][1564]
步骤1：n-叔丁氧羰基-n-(4,6-二氯嘧啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯
[1565][1566]
向4,6-二氯嘧啶-2-胺(300g，1.829mol)于dcm(2.1l)中的溶液中添加(boc)2o(838g，3.840mol)，然后添加dmap(5.6g，45.84mmol)。将混合物在环境温度下搅拌6小时。添加另外的dmap(5.6g，45.84mmol)，并且将反应在环境温度下继续搅拌24小时。将混合物用水(2.1l)稀释并将有机相分离。将有机相用水(2.1l)、2.1l的盐水洗涤，经硫酸镁干燥，经硅藻土过滤并在真空中浓缩，得到在浆液中有淤泥的浅橙色油。将混合物用约500ml的庚烷稀释并使用m过滤器过滤。将沉淀(sm)用250ml的庚烷洗涤。将滤液在真空中浓缩，得到稠密的橙色油，将所述稠密的橙色油用先前实验的固体接种并静置结晶，得到浅橙色硬固体。n-叔丁氧羰基-n-(4,6-二氯嘧啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯(645g，97％)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.07(s,1h),1.44(s,18h)。esi-ms m/z计算值363.07526，实验值364.1(m+1)
+
；保留时间：2.12分钟(lc方法a)。
[1567]
步骤2：n-叔丁氧羰基-n-[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨基甲酸叔丁酯。
[1568][1569]
将所有溶剂在使用之前进行脱气。向n-叔丁氧基羰基-n-(4,6-二氯嘧啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯(88g，241.6mmol)、(2,6-二甲基苯基)硼酸(大约36.24g，241.6mmol)和cs2co3(大约196.8g，604.0mmol)于dme(704ml)和水(176ml)的浆液中添加pd(dppf)cl2(大约8.839g，12.08mmol)并且将混合物在氮气下在80℃下(回流)剧烈搅拌1小时(没有sm剩余)。
将反应冷却至环境温度并用水(704ml)稀释。将水相分离并用etoac(704ml)萃取。将有机相用700ml的盐水洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并在真空中浓缩。将粗产物在1500g硅胶柱上进行色谱分析，用0-30％ etoac/己烷洗脱。将产物级分(在15％ etoac洗脱)合并，并在真空下浓缩，得到呈澄清油的产物，所述产物在静置后结晶。n-叔丁氧羰基-n-[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨基甲酸叔丁酯(81.3g，78％)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ7.88(s,1h),7.30(dd,j＝8.2,7.0hz,1h),7.21-7.16(m,2h),2.03(s,6h),1.38(s,18h)。esi-ms m/z计算值433.17682,实验值434.1(m+1)
+
；保留时间：2.32分钟(lc方法a)。
[1570]
步骤3：4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-胺(盐酸盐)
[1571][1572]
将n-叔丁氧羰基-n-[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨基甲酸叔丁酯(514.8g，915.9mmol)溶解于二氯甲烷(4l)中。添加对二氧六环(1l，4mol)中的氯化氢，并且将混合物在室温下搅拌过夜。将所得沉淀通过真空过滤收集并在真空下干燥，得到呈白色固体的4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-胺盐酸盐(213.5g，82％).1h nmr(250mhz,dmso-d6)δ7.45-6.91(m,3h),6.73(s,1h),2.08(s,6h)。esi-ms m/z计算值233.072，实验值234.1(m+1)
+
；保留时间：2.1分钟(lc方法c)。
[1573]
步骤4：4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-胺
[1574][1575]
将4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-胺(盐酸盐)(166g，614.5mmol)和4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-胺(盐酸盐)(30g，111.0mmol)悬浮于dcm(2.5l)中，用naoh(1m的725ml，725.0mmol)处理并在室温下搅拌1小时。将混合物转移到分液漏斗中并放置过夜。将dcm相分离并将含有不溶性物质的水相用dcm(2
×
500ml)萃取两次以上。将合并的棕色dcm相经硫酸镁和木炭搅拌1小时，过滤并将黄色溶液浓缩至约500ml的体积。将溶液用庚烷(750ml)稀释并将dcm在60℃下在减压下去除，得到奶油悬浮液。将所述奶油悬浮液在室温下搅拌1小时，过滤，用冷庚烷洗涤并干燥，得到呈奶油固体的4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-胺(157g，91％)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ7.28-7.14(m,3h),7.10(d,j＝7.5hz,2h),6.63(s,1h),2.06(s,6h)。esi-ms m/z计算值233.07198，实验值234.0(m+1)
+
；保留时间：1.45分钟(lc方法a)。
[1576]
步骤5：3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸
[1577][1578]
在搅拌和氮气下将4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-胺(235g，985.5mmol)溶解
于methf(2.3l)中并在冰浴中冷却。向冷溶液中一次性添加3-氯磺酰基苯甲酸甲酯(347g，1.479mol)(似乎轻微吸热)，并在1.25小时内向冷的浅黄色溶液中滴加2-甲基-丁烷-2-醇(锂盐)(3.1m的875ml，2.712mol)(于庚烷中)的溶液(放热，内部温度为0至10℃)。将冰浴去除并且将绿色溶液在室温下搅拌4小时。向绿色溶液中添加冷hcl(1.5m的2l，3.000mol)，将相分离并且将有机相用水(1l)洗涤一次并且用盐水(500ml)洗涤一次。将水相用methf(350ml)反萃取一次并将有机相合并。将3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸甲酯的该黄色methf溶液(esi-ms m/z计算值431.07065，实验值432.0(m+1)
+
；保留时间：1.81分钟)用naoh(2m的2.3l，4.600mol)处理并在室温下搅拌1小时。将相分离并将naoh相用methf(2
×
500ml)洗涤两次并且将合并的有机相用2m naoh(1
×
250ml)萃取一次。将合并的naoh相合并，在冰浴中搅拌并通过添加hcl(36％w/w的416ml，4.929mol)缓慢酸化，同时保持内部温度在10与20℃之间。在添加结束时(ph为约5-6)，通过添加固体柠檬酸将最终ph调节至2-3。将形成的黄色粘性悬浮液在室温下搅拌过夜，得到奶油酥悬浮液。将固体通过过滤收集，用大量水洗涤并吸干3小时。在45-50℃的氮气泄漏条件下，将固体在减压下干燥120小时。分离出呈类白色固体的3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(395g，96％)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ13.44(s,1h),12.46(s,1h),8.48-8.39(m,1h),8.25-8.15(m,1h),8.15-8.08(m,1h),7.68(t,j＝7.8hz,1h),7.31(s,1h),7.28-7.18(m,1h),7.10(d,j＝7.6hz,2h),1.84(s,6h)。esi-ms m/z计算值417.055，实验值418.0(m+1)
+
；保留时间：1.56分钟。(lc方法a)。
[1579]
实例b：3-[[4-[(2r)-2-(叔丁氧羰基氨基)-4-甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸的制备
[1580][1581]
步骤1：3-[[4-[(2r)-2-(叔丁氧羰基氨基)-4-甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸
[1582][1583]
在室温和氮气下向(2r)-2-氨基-4-甲基-戊烷-1-醇(12.419g，105.97mmol)于无
水thf(200ml)的搅拌的溶液中添加叔丁醇钠(15.276g，158.95mmol)。将反应混合物搅拌10分钟，并且添加3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(22.14g，52.983mmol)。将反应混合物放置在预热至60℃的水浴上并搅拌20分钟。在冷却至室温之后，添加二碳酸二叔丁酯(69.381g，317.90mmol)并将反应混合物搅拌3小时。将反应用饱和氯化铵水溶液(150ml)淬灭。将挥发物在真空下去除并将水层用10％柠檬酸水溶液酸化至ph为约3。将产物用乙酸乙酯(3x 200ml)萃取。将合并的有机层用盐水(80ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并浓缩至约250ml的残余体积。将产物沉淀到过量的己烷(750ml)中并通过真空过滤收集。将获得的白色固体通过硅胶色谱法使用己烷(0.15％乙酸缓冲液)中的0-40％丙酮(0.15％乙酸缓冲液)梯度再纯化，得到呈白色固体的3-[[4-[(2r)-2-(叔丁氧羰基氨基)-4-甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(20.73g，61％)。esi-ms m/z计算值598.2461，实验值599.4(m+1)
+
；保留时间：5.85分钟(lc方法s)。
[1584]
步骤2：3-[[4-[(2r)-2-氨基-4-甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)。
[1585][1586]
在室温下向3-[[4-[(2r)-2-(叔丁氧羰基氨基)-4-甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(20.73g，34.624mmol)于dcm(200ml)中的搅拌的溶液中添加hcl(87ml的1,4-二噁烷中的4m溶液，346.24mmol)。将反应混合物搅拌2小时。将挥发物在真空下去除并将所获得的固体用乙醚(150ml)研磨。在去除挥发物之后，将产物在真空下干燥，得到呈白色固体的3-[[4-[(2r)-2-氨基-4-甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(19.68g，100％)。1h nmr(250mhz,dmso-d6)δ8.56-8.27(m,4h),8.14(t,j＝6.8hz,2h),7.70(t,j＝7.8hz,1h),7.34-7.18(m,1h),7.17-7.02(m,2h),6.31(s,1h),4.42-4.23(m,1h),4.23-4.06(m,1h),3.5-3.4(m,1h,与水重叠)，2.01(s,6h),1.82-1.31(m,3h),1.02-0.78(m,6h)。esi-ms m/z计算值498.1937，实验值499.3(m+1)
+
；保留时间：1.63分钟(lc方法t)。
[1587]
实例c：3-[[4-[(2r)-2-氨基-4,4-二甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸的制备
[1588][1589]
步骤1：(2r)-2-氨基-4,4-二甲基-戊烷-1-醇
[1590][1591]
在0℃下向(2r)-2-氨基-4,4-二甲基-戊酸(15g，103.3mmol)于thf(150ml)中的溶液中滴加硼烷-thf(1m的260ml，260.0mmol)，保持反应温度《10℃。添加时间为大约30分钟。使混合物温热至环境温度并搅拌22小时。将反应通过缓慢添加甲醇(80ml，1.975mol)淬灭并且将溶剂在真空中去除。将残余物与甲醇(200ml，4.937mol)共蒸发3次。将粗残余物用hcl(1m的200ml，200.0mmol)稀释并用200ml的mtbe洗涤。将水相蒸发以去除残余的有机溶剂。将水在真空中进一步去除，得到类白色固体。将固体使用乙腈共沸物进一步干燥。将固体在200ml的acn中制成浆液并将沉淀用m玻璃料收集。将固体风干1小时，然后在45℃下在真空中干燥20小时，得到(2r)-2-氨基-4,4-二甲基-戊烷-1-醇(盐酸盐)(14.73g，85％).1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ7.80(s,3h),5.36(t,j＝5.1hz,1h),3.59(dt,j＝11.7,4.1hz,1h),3.42-3.34(m,1h),3.10(dq,j＝7.7,3.8hz,1h),1.46(dd,j＝14.5,7.1hz,1h),1.33(dd,j＝14.5,3.5hz,1h),0.91(s,9h)。esi-ms m/z计算值131.13101，实验值132.1(m+1)
+
；保留时间：0.51分钟(lc方法a)。
[1592]
步骤2：3-[[4-[(2r)-2-氨基-4,4-二甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸
[1593][1594]
将3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(20g，47.862mmol)悬浮于2-甲基四氢呋喃(80ml)和dmf(20ml)的混合物中并将溶液冷却至-5℃。然后将叔丁醇钠(23g，239.33mmol)溶解于2-甲基四氢呋喃(100ml)中，冷却至5℃并在10分钟内添加，随后添加(2r)-2-氨基-4,4-二甲基-戊烷-1-醇(盐酸盐)(8.02g，47.830mmol)。
然后将反应温热至10℃并搅拌4小时。然后将所述反应冷却至0℃并通过在10分钟内添加盐酸水溶液(2m，200ml)淬灭。将相分离，并将水相用2-甲基四氢呋喃(200ml)萃取。将有机相合并，并用氯化钠水溶液(15％w/w，2
×
200ml)洗涤，经硫酸钠(60g)干燥，过滤并蒸发至干燥。然后将固体使用乙酸乙酯(200ml)研磨16小时，过滤，用乙酸乙酯洗涤并在50℃下的真空烘箱中干燥20小时，得到3-[[4-[(2r)-2-氨基-4,4-二甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(22.29g，80％)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ13.26(br.s.,2h),8.45(t,j＝1.6hz,1h),8.28-8.06(m,5h),7.69(t,j＝7.8hz,1h),7.31-7.21(m,1h),7.13(d,j＝7.6hz,2h),6.29(br.s.,1h),4.30(dd,j＝11.7,2.7hz,1h),4.10(dd,j＝11.5,7.1hz,1h),3.56(br.s.,1h),2.13-1.90(s,6h),1.62-1.47(m,2h),0.94(s,9h)。esi-ms m/z计算值512.20935，实验值513.0(m+1)
+
；保留时间：2.334分钟；lc方法u。
[1595]
实例d：3-[[4-[(2r)-2-氨基-5,5,5-三氟-4,4-二甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸的制备
[1596][1597]
步骤1：4,4,4-三氟-3,3-二甲基-丁醛
[1598][1599]
向1l三颈烧瓶中装入4,4,4-三氟-3,3-二甲基-丁烷-1-醇(8.987g，57.555mmol)、dcm(63ml)、水(63ml)、nabr(544mg，5.2870mmol)、碳酸氢钠(12.32g，146.66mmol)和tempo(92mg，0.5888mmol)。将混合物用冰水浴冷却。在2.5-4.4℃下，在2小时内滴加naocl水溶液(1.31m的47ml，61.570mmol)。在添加之后，将混合物搅拌10分钟。将两个层分离。将水相用dcm(2
×
15ml)萃取。将合并的有机层用硫酸钠干燥并过滤，得到113.7g(约80ml)在dcm中的粗产物，所述粗产物直接用于下一步骤。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ9.82-9.78(m,1h),2.54(d,j＝2.6hz,2h),1.28(s,6h)。
19
f nmr(282mhz,cdcl3)δ-79.11(s,3f)。
[1600]
步骤2：(2r)-5,5,5-三氟-4,4-二甲基-2-[[(1r)-1-苯基乙基]氨基]戊腈和(2s)-5,5,5-三氟-4,4-二甲基-2-[[(1r)-1-苯乙基]氨基]戊腈
[1601][1602]
向4,4,4-三氟-3,3-二甲基-丁醛(113.7g，57.540mmol)(纯度为约7.8％)的dcm(80ml)溶液中添加meoh(110ml)。将混合物用冰水浴冷却。添加(1r)-1-苯基乙胺(8.46g，69.814mmol)，然后添加乙酸(4.41g，73.436mmol)。将混合物在0℃下搅拌10分钟，然后添加nacn(3.56g，72.642mmol)。使混合物缓慢地温热至室温并搅拌过夜。将反应混合物冷却至0℃并滴加碳酸钾(4g)于水(20ml)中的溶液，然后添加盐水(40ml)。将混合物用dcm(2
×
100ml)萃取。将有机层用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将残余物通过快速色谱法(120g硅胶，庚烷/etoac 0-30％)纯化，得到呈无色油的(2r)-5,5,5-三氟-4,4-二甲基-2-[[(1r)-1-苯基乙基]氨基]戊腈和(2s)-5,5,5-三氟-4,4-二甲基-2-[[(1r)-1-苯乙基]氨基]戊腈的4:1混合物(14.87g，91％)。esi-ms m/z计算值284.15002，实验值285.2(m+1)
+
；保留时间：3.38分钟；lc方法u。
[1603]
步骤3：(2r)-5,5,5-三氟-4,4-二甲基-2-[[(1r)-1-苯基乙基]氨基]戊酰胺和(2s)-5,5,5-三氟-4,4-二甲基-2-[[(1r)-1-苯乙基]氨基]戊酰胺
[1604][1605]
向(2r)-5,5,5-三氟-4,4-二甲基-2-[[(1r)-1-苯基乙基]氨基]戊腈和(2s)-5,5,5-三氟-4,4-二甲基-2-[[(1r)-1-苯乙基]氨基]戊腈(14.87g，52.300mmol)的4:1混合物于dcm(105ml)中的溶液中添加硫酸(56.3g，551.06mmol)。将混合物在室温下搅拌过夜，倒入粗冰(200g)中并用水(100ml)中的28％ nh3中和至ph 9。将混合物用dcm(500ml)萃取。将有机层用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将残余物通过快速色谱法(330g硅胶，庚烷/etoac20-50％)纯化，得到呈白色固体的(2r)-5,5,5-三氟-4,4-二甲基-2-[[(1r)-1-苯基乙基]氨基]戊酰胺(10.77g，68％)。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ7.39-7.22(m,5h),6.35(br.s.,1h),5.55(br.s.,1h),3.65(q,j＝6.5hz,1h),2.93(dd,j＝7.6,3.8hz,1h),1.87(dd,j＝15.0,
3.8hz,1h),1.65-1.56(m,2h),1.35(d,j＝6.5hz,3h),1.04(s,3h),1.00(s,3h)。
19
f nmr(282mhz,cdcl3)δ-78.77(s,3f)。通过19f nmr测得：99.4％de。
[1606]
步骤4：(2r)-5,5,5-三氟-4,4-二甲基-2-[[(1r)-1-苯乙基]氨基]戊酸
[1607][1608]
向(2r)-5,5,5-三氟-4,4-二甲基-2-[[(1r)-1-苯基乙基]氨基]戊酰胺(11.35g，37.541mmol)于hoac(50ml)中的溶液中添加浓hcl(11.8m的65ml，767.00mmol)，然后添加水(50ml)。出现白色沉淀。将混合物在100℃下加热66小时。添加更多浓hcl(11.8m的40ml，472.00mmol)和hoac(10ml)。将混合物在100℃下搅拌过夜。添加更多hcl水溶液(6m的20ml，120.00mmol)。在100℃下7小时之后，添加更多hcl水溶液(6m的20ml，120.00mmol)。将混合物在100℃下搅拌过夜。所述混合物变成澄清溶液。添加更多hcl水溶液(6m的20ml，120.00mmol)。将混合物在100℃下搅拌7小时，添加更多hcl水溶液(6m的20ml，120.00mmol)。将混合物在100℃下搅拌过夜。将混合物浓缩并用水(50ml)共蒸发。将残余物(17g)与水(25ml)在50℃下混合20分钟，用冰水浴冷却20分钟并过滤。将粗产物与1,4-二噁烷(60ml)混合。将混合物浓缩并真空干燥过夜，得到呈类白色固体的(2r)-5,5,5-三氟-4,4-二甲基-2-[[(1r)-1-苯乙基]氨基]戊酸(盐酸盐)(13.04g，97％)。1h nmr(300mhz,dmso-d6)δ10.09(br.s.,1h),7.54-7.31(m,5h),7.29-7.05(m,1h),4.07(q,j＝5.9hz,1h),3.16-2.98(m,1h),2.08-1.83(m,2h),1.49(d,j＝6.5hz,3h),0.99(s,3h),0.92(s,3h)。
19
f nmr(282mhz,dmso-d6)δ-78.28(s,3f)。esi-ms m/z计算值303.14462，实验值304.2(m+1)
+
；保留时间：1.98分钟；lc方法u。
[1609]
步骤5：(2r)-5,5,5-三氟-4,4-二甲基-2-[[(1r)-1-苯乙基]氨基]戊烷-1-醇
[1610][1611]
在35℃下，向(2r)-5,5,5-三氟-4,4-二甲基-2-[[(1r)-1-苯乙基]氨基]戊酸(盐酸盐)(13.04g，36.267mmol)于thf(200ml)中的悬浮液中滴加thf中的lah(1m的100ml，100.00mmol)。将混合物在40℃下搅拌2小时，用冰水浴冷却至10℃并用thf(200ml)稀释。滴加水(3.8g)和thf(50ml)的混合物，然后添加25％ naoh水溶液(3.8g)和水(10g)。将所得混合物在室温下搅拌30分钟并在50℃下搅拌1小时，过滤并用温thf洗涤。将滤液浓缩，得到呈无色油的12.02g的产物(游离胺).1h nmr(300mhz,cdcl3)δ7.37-7.24(m,5h),3.82(q,j＝6.5hz,1h),3.72-3.67(m,1h),3.21(dd,j＝10.6,4.7hz,1h),2.67(quin,j＝4.6hz,1h),1.66(dd,j＝14.7,5.9hz,1h),1.54-1.45(m,1h),1.36(d,j＝6.5hz,3h),1.03(s,3h),0.97(s,3h)。
19
f nmr(282mhz,cdcl3)δ-78.83(s,3f。将上述粗产物(12.02g)溶解于乙醚(20ml)中并且用庚烷(80ml)稀释并在冰水浴中冷却。滴加1,4-二噁烷中的hcl(4m的10.5ml，42.000mmol)。将混合物在室温下搅拌30分钟并过滤，得到呈白色固体的(2r)-5,5,5-三氟-4,4-二甲基-2-[[(1r)-1-苯乙基]氨基]戊烷-1-醇(盐酸盐)(11.56g，98％)。1h nmr(300mhz,dmso-d6)δ9.57(br.s.,1h),9.25(t,j＝9.8hz,1h),7.80-7.59(m,2h),7.53-7.32
(m,3h),5.63(br.s.,1h),4.58(t,j＝6.3hz,1h),3.81-3.65(m,1h),3.64-3.51(m,1h),2.91-2.74(m,1h),1.98-1.85(m,1h),1.85-1.74(m,1h),1.63(d,j＝6.8hz,3h),0.91(s,3h),0.88(s,3h)。
19
f nmr(282mhz,dmso-d6)δ-77.71(s,3f)。esi-ms m/z计算值289.16534，实验值290.2(m+1)
+
；保留时间：2.08分钟；lc方法u。
[1612]
步骤6：(2r)-2-氨基-5,5,5-三氟-4,4-二甲基-戊烷-1-醇
[1613][1614]
向(2r)-5,5,5-三氟-4,4-二甲基-2-[[(1r)-1-苯乙基]氨基]戊烷-1-醇(盐酸盐)(11.56g，35.482mmol)于etoh(200ml)中的溶液中添加10％钯/炭，50％湿(5g，2.3492mmol)。将混合物在帕尔振荡器(parr shaker)氢化设备中在40psi氢气下在室温下氢化9小时。添加更多10％钯/炭，50％湿(1g，0.4698mmol)。将混合物在40psi下振荡7小时。将混合物通过硅藻土过滤并用etoh洗涤。浓缩滤液。将残余物(7.9g)用2-甲基四氢呋喃(28ml)和庚烷(200ml)的混合物研磨并搅拌过夜。将混合物过滤，并将白色固体在真空下干燥，得到呈白色固体的(2r)-2-氨基-5,5,5-三氟-4,4-二甲基-戊烷-1-醇(盐酸盐)(7.66g，93％)。1h nmr(300mhz,dmso-d6)δ8.08(br.s.,3h),5.46(t,j＝5.0hz,1h),3.67-3.52(m,1h),3.43(dt,j＝11.7,5.8hz,1h),3.29-3.16(m,1h),1.88-1.73(m,1h),1.72-1.58(m,1h),1.15(s,3h),1.10(s,3h)。
19
f nmr(282mhz,dmso-d6)δ-78.07(s,3f)。esi-ms m/z计算值185.10275,实验值186.2(m+1)
+
；保留时间：0.64分钟；lc方法u。
[1615]
步骤7：3-[[4-[(2r)-2-氨基-5,5,5-三氟-4,4-二甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸
[1616][1617]
将3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(6.12g，14.65mmol)和(2r)-2-氨基-5,5,5-三氟-4,4-二甲基-戊烷-1-醇(盐酸盐)(3.27g，14.75mmol)在thf(30ml)中合并，并将所得悬浮液在水-冰浴中冷却。添加叔丁醇钠(5.63g，58.58mmol)，诱导固体的快速部分溶解。在5分钟之后，将冷却浴去除并且将反应在室温下搅拌1小时(90％转化)。添加更多(2r)-2-氨基-5,5,5-三氟-4,4-二甲基-戊烷-1-醇(盐酸盐)(363mg，1.638mmol)，并将混合物搅拌一小时(无变化)。添加更多叔丁醇钠(744mg，7.742mmol)并将混合物搅拌40分钟(96％转化)。添加乙酸乙酯(100ml)、hcl(1m的90ml，90.00mmol)和盐水(50ml)并将所得两个相分离。将有机相用盐水(50ml)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。将残余物在etoac/meoh/己烷中研磨并将溶剂蒸发，得到呈奶油固体的3-[[4-[(2r)-2-氨基-5,5,5-三氟-4,4-二甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(8.88g，93％)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ13.15(very broad s,1h),
8.61-8.30(m,4h),8.14(dd,j＝7.9,1.9hz,2h),7.69(t,j＝7.8hz,1h),7.31-7.20(m,1h),7.12(d,j＝7.6hz,2h),6.33(s,1h),4.43(dd,j＝11.9,3.3hz,1h),4.29-4.15(m,1h),3.74(s,1h),2.06-1.94(宽m,6h),1.94-1.85(m,2h),1.22(s,3h),1.16(s,3h)。esi-ms m/z计算值566.1811，实验值567.62(m+1)
+
；保留时间：1.13分钟(lc方法a)。
[1618]
实例e：3-[[4-[(2r)-2-氨基-3-[1-(三氟甲基)环丙基]丙氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸的制备
[1619][1620]
步骤1：2-[1-(三氟甲基)环丙基]乙醇
[1621][1622]
在氮气下将lah(49.868g，1.3139mol)添加到thf(1700ml)中并将混合物搅拌30分钟，然后冷却至0℃。滴加thf(500ml)中的2-[1-(三氟甲基)环丙基]乙酸(190.91g，1.0107mol)，同时控制温度《5℃。使混合物温热至室温并搅拌24小时。将所得悬浮液冷却至0℃，非常缓慢地添加水(50ml)，然后添加15％w/w氢氧化钠(50ml)和水(150ml)。将混合物在0℃下搅拌30分钟，并且通过硅藻土垫过滤，将滤饼用thf(2
×
500ml)洗涤。将合并的滤液在真空中蒸发，得到呈琥珀色油的含有约5％w/w的thf的2-[1-(三氟甲基)环丙基]乙醇(160.27g，98％)(通过nmr)。1h nmr(250mhz,dmso-d6)δ4.57(t,j＝5.2hz,1h),3.55-3.39(m,2h),1.74(t,j＝7.3hz,2h),1.00-0.58(m,4h)。
[1623]
步骤2：2-[1-(三氟甲基)环丙基]乙醛
[1624][1625]
将2-[1-(三氟甲基)环丙基]乙醇(80g，467.1mmol)于二氯甲烷(1.1l)中的溶液在室温下搅拌并用戴斯-马丁过碘烷(250g，589.4mmol)逐份处理(放热！在冰浴中冷却并保持t《15℃)。向混合物中添加水(12ml，666.1mmol)，在0.5小时内缓慢添加(在添加过程中放热至33℃，通过用冷水冷却保持在20与33℃之间)，得到稠密的悬浮液。在添加之后，将浅黄色精细悬浮液在室温下搅拌18小时。将黄色悬浮液用乙醚(500ml)(黄色悬浮液)稀释并搅拌30分钟。将浆液经硅藻土过滤并将沉淀用100ml的乙醚洗涤。乙醚。将有机相用饱和碳酸钠水溶液(500ml，强气体释放，最终ph为约10)小心处理。将三相混合物在室温下搅拌1小时，并且将固体通过过滤(大玻璃料)去除。将相(黄色浑浊的乙醚相，无色水相)分离并将有机相用碳酸钠饱和水溶液(250ml)洗涤一次，用1m硫代硫酸钠(250ml)洗涤一次并用盐水(250ml)洗涤一次。将水相用乙醚(150ml)反萃取一次，并且将合并的有机相干燥、过滤并蒸发，得到呈黄色液体的2-[1-(三氟甲基)环丙基]乙醛(40g，56％)。
[1626]
步骤3：2-[[(1r)-1-苯乙基]氨基]-3-[1-(三氟甲基)环丙基]丙腈
[1627][1628]
将meoh(700ml)中的2-[1-(三氟甲基)环丙基]乙醛(102g，670.5mmol)用(1r)-1-苯基乙胺(86ml，667.1mmol)处理并在冰浴中冷却。将溶液用乙酸(38ml，668.2mmol)处理，在冰浴中搅拌20分钟，然后一次性添加固体nacn(注意，33g，673.4mmol)并将悬浮液在熔融冰浴中搅拌14小时。将溶液在减压下浓缩(注意，hcn！，来自泵的废气通过漂白剂阱)并且将残余物用mtbe(1000ml)和饱和碳酸钠/水1:1(1000ml)萃取并用盐水(350ml)洗涤。将水相用mtbe(250ml)反萃取一次，并且将合并的有机相干燥、过滤并蒸发，得到呈非对映异构体的3:1混合物的2-[[(1r)-1-苯乙基]氨基]-3-[1-(三氟甲基)环丙基]丙腈(180.8g，96％)。esi-ms m/z计算值282.13437，实验值283.0(m+1)
+
；保留时间：1.69分钟(主要异构体)和1.62分钟(次要异构体)，lc方法a。
[1629]
步骤4：(2r)-2-[[(1r)-1-苯乙基]氨基]-3-[1-(三氟甲基)环丙基]丙烯酰胺
[1630][1631]
在配备有机械搅拌和温度探针的2l烧瓶中，添加硫酸(18m的285ml，5.130mol)，将其在冰浴中冷却。在5℃的内部温度下，在20分钟内滴加2-[[(1r)-1-苯乙基]氨基]-3-[1-(三氟甲基)环丙基]丙腈(180.8g，640.4mmol，非对映异构体的3:1混合物)于dcm(900ml)中的溶液。将冰浴去除，并且将深橙色乳液在室温下搅拌18小时并在30-40℃下搅拌2小时。在机械搅拌下将深橙色乳液小心地添加到冰和水的混合物(2.2l)中，得到黄色的三相混合物，在冰冷却下通过缓慢添加氢氧化铵(30％w/w的1.33l，10.25mol)将所述黄色的三相混
合物碱化(非常放热，通过添加冰使内部温度保持在10与25℃之间)。将黄色乳液在室温(ph为约10)下搅拌10分钟，用dcm(500ml)稀释并将相分离。将水相用dcm(400和200ml)洗涤两次以上并将合并的有机相用水/盐水1:1(500ml)洗涤一次。将dcm相干燥、过滤并蒸发，得到呈黄橙色油的粗2-[[(1r)-1-苯乙基]氨基]-3-[1-(三氟甲基)环丙基]丙酰胺(189.5g，99％)。esi-ms m/z计算值300.14496，实验值301.0(m+1)
+
；保留时间：1.40分钟(主要异构体)和1.50分钟(次要异构体)(非对映异构体的3:1混合物)。将产物溶解于乙醇(1.5l)中并将其用hcl(4m的240ml，960.0mmol)(二噁烷中的4m)快速处理并且将所得稠密的悬浮液在室温下机械搅拌过夜。将固体通过过滤收集，用冷乙醇洗涤并在40-45℃下在真空下用氮气放气干燥，得到(2r)-2-[[(1r)-1-苯乙基]氨基]-3-[1-(三氟甲基)环丙基]丙酰胺(盐酸盐)(147g，68％)。1h nmr(499mhz,dmso-d6)δ9.74(d,j＝67.9hz,2h),8.16-7.94(m,1h),7.86(s,1h),7.64-7.51(m,2h),7.51-7.34(m,3h),4.22(s,1h),3.46-3.37(m,1h),2.45(d,j＝15.9hz,1h),1.85(dd,j＝15.1,10.4hz,1h),1.58(d,j＝6.7hz,3h),0.89(pd,j＝9.6,9.2,4.3hz,2h),0.84-0.66(m,2h)。esi-ms m/z计算值300.14496，实验值301.0(m+1)
+
；保留时间：1.40分钟(主要异构体)和1.40分钟(次要异构体)，非对映异构体的97:3混合物(lc方法v)。
[1632]
步骤5：(2r)-2-[[(1r)-1-苯乙基]氨基]-3-[1-(三氟甲基)环丙基]丙酸
[1633][1634]
在配备有机械搅拌的5l烧瓶中，在搅拌下将(2r)-2-[[(1r)-1-苯乙基]氨基]-3-[1-(三氟甲基)环丙基]丙酰胺(盐酸盐)(147g，436.5mmol)添加到乙酸(735ml)中并且将稠密的无色悬浮液用hcl(12m的1.3l，15.60mol)处理。将无色悬浮液小心加热至60-65℃(强烈起泡，添加乙酸(145ml))并将悬浮液在60-65℃下搅拌16小时。然后将悬浮液缓慢加热至100℃(4小时内，强烈起泡)并将所得溶液在100℃下再搅拌20小时。将浅黄色溶液在65℃下在减压下浓缩成半固体物质并将其用水(1.5l)处理。将稠密的悬浮液加热至70-80℃并在搅拌下冷却至室温2小时。将固体通过过滤收集，用水洗涤并吸干过夜。将湿固体在50-60℃下在减压下进一步干燥4小时，得到呈类白色固体的(2r)-2-[[(1r)-1-苯乙基]氨基]-3-[1-(三氟甲基)环丙基]丙酸(盐酸盐)(135g，92％)。esi-ms m/z计算值301.12897，实验值302.0(m+1)
+
；保留时间：1.82分钟；(lc方法v)。
[1635]
步骤6：(2r)-2-[[(1r)-1-苯乙基]氨基]-3-[1-(三氟甲基)环丙基]丙烷-1-醇
[1636][1637]
在配备有机械搅拌的5l烧瓶中，在干燥氮气气氛下，将(2r)-2-[[(1r)-1-苯乙基]氨基]-3-[1-(三氟甲基)环丙基]丙酸(盐酸盐)(135g，399.7mmol)悬浮于thf(2l)(稠密的悬浮液)中。将其加热至35-40℃并在1小时内缓慢添加lah(47.3g，1.214mol)(粒料)，同时通过外部冷却将内部温度保持在30与40℃之间。将混合物在30-40℃下搅拌1小时(几乎不再有氢气释放，灰色悬浮液，大部分起始材料在溶液中)并将其在50-55℃下加热1小时。将
灰色悬浮液在冷却加热罩中搅拌过夜。将灰色悬浮液在冰浴中冷却并通过小心添加水(44ml，2.442mol)、naoh(6m的41ml，246.0mmol)和水(44ml，2.442mol)淬灭(第一次添加水时放热高，通过冷却保持在5℃与30℃之间)。将灰色悬浮液加热至50-55℃1小时，此时获得无色悬浮液。将温热的悬浮液经覆盖有硫酸镁的硅藻土垫过滤。将固体用热thf洗涤并蒸发，得到呈油的粗(2r)-2-[[(1r)-1-苯乙基]氨基]-3-[1-(三氟甲基)环丙基]丙烷-1-醇(121g，105％)。将粗产物溶解于乙醚(1l，澄清溶液)中并在冷却下用hcl(4m的101ml，404.0mmol)(二噁烷中的4m)缓慢处理。将所得稠密的悬浮液在室温下搅拌1小时，将固体通过过滤收集，用乙醚洗涤并在40-45℃下在减压下用氮气排放干燥，得到呈类白色固体的(2r)-2-[[(1r)-1-苯乙基]氨基]-3-[1-(三氟甲基)环丙基]丙烷-1-醇(盐酸盐)(126.6g，98％)。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ9.34(s,2h),7.66(d,j＝7.4hz,2h),7.43(dt,j＝25.1,7.4hz,3h),5.59(s,1h),4.58(q,j＝6.6hz,1h),3.83(d,j＝12.6hz,1h),3.62-3.54(m,1h),2.89(s,1h),2.33-2.24(m,1h),1.67-1.51(m,4h),0.97-0.81(m,3h),0.71(s,1h)。esi-ms m/z计算值287.1497，实验值288.0(m+1)
+
；保留时间：0.99分钟(lc方法a)。
[1638]
步骤7：(2r)-2-氨基-3-[1-(三氟甲基)环丙基]丙烷-1-醇
[1639][1640]
在1l加氢反应器中，将(2r)-2-[[(1r)-1-苯乙基]氨基]-3-[1-(三氟甲基)环丙基]丙烷-1-醇(盐酸盐)(63.3g，195.5mmol)溶解于etoh(630ml)中(在温热下)，并且将其用pd/c(10％w/w的6.3g，5.920mmol)(50％水湿的12.5g)处理并将反应在2bar的氢气下在40℃下搅拌24小时。将反应混合物通过硅藻土过滤。将垫用乙醇洗涤并将无色滤液蒸发成固体物质，将所述固体物质用乙醚研磨。将悬浮液在室温下搅拌1小时。将固体过滤，用大量乙醚洗涤并干燥，得到呈类白色固体的(2r)-2-氨基-3-[1-(三氟甲基)环丙基]丙烷-1-醇(盐酸盐)(41.8g，97％)。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ8.18(s,3h),5.45(t,j＝4.9hz,1h),3.71(dt,j＝11.6,3.9hz,1h),3.55(dt,j＝11.2,5.4hz,1h),3.24(h,j＝4.7hz,1h),2.08(dd,j＝15.1,5.4hz,1h),1.69(dd,j＝15.1,9.4hz,1h),0.97(h,j＝6.5,5.9hz,2h),0.86(s,2h)。esi-ms m/z计算值183.0871，实验值184.0(m+1)
+
；保留时间：0.65分钟；lc方法a。
[1641]
步骤8：3-[[4-[(2r)-2-氨基-3-[1-(三氟甲基)环丙基]丙氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸
[1642][1643]
将3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(19.09g，45.68mmol)和(2r)-2-氨基-3-[1-(三氟甲基)环丙基]丙烷-1-醇(盐酸盐)(10.18g，46.35mmol)溶解于thf(100ml)中并在冰水浴中冷却。添加叔丁醇钠(18.14g，188.8mmol)并
使反应温热至室温。将反应搅拌1小时，然后在乙酸乙酯(500ml)与hcl水溶液(1m的275ml，275.0mmol)之间分配。将有机物分离，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并蒸发，得到3-[[4-[(2r)-2-氨基-3-[1-(三氟甲基)环丙基]丙氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(26.74g，94％)。esi-ms m/z计算值564.1654，实验值565.1(m+1)
+
；保留时间：0.48分钟；lc方法d。
[1644]
实例f：(2r)-4-甲基-2-(螺[2.3]己-5-基氨基)戊烷-1-醇的制备
[1645]
步骤1：(2r)-4-甲基-2-(螺[2.3]己-5-基氨基)戊烷-1-醇
[1646][1647]
将螺[2.3]己-5-酮(100g，1.040mol)和(2r)-2-氨基-4-甲基-戊烷-1-醇(123.5g，1.054mol)于dce(1.5l)中的混合物在环境温度下搅拌1小时。向混合物中分批添加三乙酰氧基硼氢化钠(228g，1.076mol)。将混合物在环境温度下搅拌18小时。将反应混合物用hcl(2m的1.1l，2.200mol)稀释，直到ph为约1为止。将水相分离并且将有机相用hcl(2m的600ml，1.200mol)萃取。将有机相(dce)分离并将水层用naoh(50％w/w的550g，6.875mol)碱化，得到ph为约12的溶液。将混合物用etoac(1l)萃取2次，并将合并的有机相用盐水(150ml)洗涤，经mgso4干燥，过滤并在真空中浓缩，得到澄清油。无需进一步纯化即可使用。(2r)-4-甲基-2-(螺[2.3]己-5-基氨基)戊烷-1-醇(160.7g，78％)。esi-ms m/z计算值197.17796，实验值198.2(m+1)
+
；保留时间：0.54分钟(lc方法a)
[1648]
步骤2：(2r)-4-甲基-2-(螺[2.3]己-5-基氨基)戊烷-1-醇(盐酸盐)
[1649][1650]
在20分钟内，将hcl(4m的354ml，1.416mol)(二噁烷中的4m)添加到(2r)-4-甲基-2-(螺[2.3]己-5-基氨基)戊烷-1-醇(254g，1.287mol)于冰/冰水浴中的乙醚(2.286l)中的搅拌的(机械)溶液中，保持内部温度在10℃与22℃之间。在添加完成之后，将溶液在室温下搅拌1.5小时。将产物滤出并用2000ml乙醚漂洗。以完全相同的规模再次重复完全相同的过程(总共使用508g的氨基醇sm)。将产物在35℃下真空干燥过夜，得到562.3g。(2r)-4-甲基-2-(螺[2.3]己-5-基氨基)戊烷-1-醇(盐酸盐)(562.3g，93％).1hnmr(500mhz,dmso-d6)δ9.17-8.84(m,2h),5.38(s,1h),3.99(p,j＝7.2hz,1h),3.70-3.60(m,1h),3.55-3.45(m,1h),3.03-2.91(m,1h),2.63-2.54(m,2h),2.20-2.05(m,2h),1.73-1.60(m,1h),1.60-1.48(m,1h),1.43-1.30(m,1h),0.93-0.83(m,6h),0.55-0.45(m,2h),0.45-0.36(m,2h)。
[1651]
实例g：3-[1-(三氟甲基)环丙基]丙烷-1-醇的制备
[1652]
步骤1：2-[1-(三氟甲基)环丙基]甲基磺酸乙酯
[1653]
[1654]
1000ml 3颈圆底烧瓶上装配有机械搅拌器、冷却浴、j-kem温度探针和加料漏斗和氮气入口/出口。在氮气气氛下，向容器中装入2-[1-(三氟甲基)环丙基]乙醇(125g，811.0mmol)和2-甲基四氢呋喃(625ml)，得到澄清无色溶液。开始搅拌并记录釜温为19℃。然后向容器中一次性添加纯的三乙胺(124.3ml，891.8mmol)。然后向冷却浴中装入碎冰/水并将釜温降至0℃。向加料漏斗中装入甲磺酰氯(62.77ml，811.0mmol)于2-甲基四氢呋喃(125ml，2ml/g)中的溶液，随后在90分钟内滴加所述溶液，得到白色悬浮液并放热至1℃。使混合物缓慢温热至室温并在室温下继续搅拌1小时，此时将混合物倒入冰冷的水(250ml)中并且然后转移到分液漏斗中。将有机物去除并用20wt％碳酸氢钾溶液(250ml)洗涤，经硫酸钠(200g)干燥并且然后通过玻璃料布氏漏斗过滤。将澄清滤液在减压下浓缩以提供呈澄清淡黄色油的2-[1-(三氟甲基)环丙基]丙酸(185g，98％)。1h nmr(400mhz，氯仿-d)δ4.36(ddt,j＝7.1,6.4,0.7hz,2h),3.02(s,3h),2.03(t,j＝7.1hz,2h),1.11-0.98(m,2h),0.81-0.66(m,2h)。
[1655]
步骤2：3-[1-(三氟甲基)环丙基]丙腈
[1656][1657]
1000ml 3颈圆底烧瓶上装配有机械搅拌器、加热罩、j-kem温度探针/控制器、水冷回流冷凝器和氮气入口/出口。在氮气气氛下，向容器中装入2-[1-(三氟甲基)环丙基]甲基磺酸乙酯(50g，215.3mmol)和二甲亚砜(250ml)，得到澄清的浅黄色溶液。开始搅拌并记录釜温为19℃。向容器中装入氰化钠(13.19g，269.1mmol)，以固体形式一次性添加。将混合物加热至70℃的釜温并维持条件24小时。在加热时，所有的氰化钠溶解并且反应混合物变成浅琥珀色悬浮液。在冷却至室温之后，将反应混合物倒入水(500ml)中并且然后转移至分液漏斗中并用甲基叔丁基醚(500ml)分配。将有机相去除并将残余的水相用甲基叔丁基醚(3
×
250ml)萃取。将合并的有机层用水(2
×
250ml)洗涤，经硫酸钠(200g)干燥并且然后通过玻璃料布氏漏斗过滤。将澄清滤液在减压下浓缩以提供呈澄清琥珀色油的3-[1-(三氟甲基)环丙基]丙腈(30g，85％)。1h nmr(400mhz，氯仿-d)δ2.55(t,j＝7.6hz,2h),1.93(t,j＝7.7hz,2h),1.11-1.04(m,2h),0.78-0.70(m,2h)。
[1658]
步骤3：3-[1-(三氟甲基)环丙基]丙酸
[1659][1660]
1000ml 3颈圆底烧瓶上装配有机械搅拌器、加热罩、j-kem温度探针/控制器、水冷回流冷凝器和氮气入口/出口。在氮气气氛下，随后向容器中装入3-[1-(三氟甲基)环丙基]丙腈(25g，153.2mmol)和乙醇(375ml)，得到澄清琥珀色溶液。开始搅拌并记录釜温为19℃。然后向容器中装入氢氧化钠(6m的102.1ml，612.6mmol)，一次性添加。将所得澄清琥珀色溶液加热至70℃的釜温并维持条件24小时。在冷却至室温之后，将反应混合物浓缩以去除乙醇。将残余的水溶液用水(150ml)稀释并且然后转移到分液漏斗中并用甲基叔丁基醚(50ml)分配。将水相去除并将ph用6m盐酸溶液调节至ph为约1。将所得水溶液转移到分液漏斗中并用甲基叔丁基醚(250ml)分配。将有机相去除并将残余的水相用甲基叔丁基醚(2
×
150ml)萃取。将合并的有机物经硫酸钠(150g)干燥并且然后通过玻璃料布氏漏斗过滤。将
澄清滤液在减压下浓缩以提供呈澄清琥珀色油的3-[1-(三氟甲基)环丙基]丙酸(26g，93％)。1h nmr(400mhz，氯仿-d)δ2.63-2.50(m,2h),1.96-1.84(m,2h),1.03-0.95(m,2h),0.66-0.58(m,j＝1.7hz,2h)。
[1661]
步骤4：3-[1-(三氟甲基)环丙基]丙烷-1-醇
[1662][1663]
1000ml 3颈圆底烧瓶上装配有机械搅拌器、冷却浴、加料漏斗、j-kem温度探针和氮气入口/出口。在氮气气氛下向容器中装入氢化铝锂粒料(6.775g，178.5mmol)。然后在氮气气氛下向容器中装入四氢呋喃(250ml)。开始搅拌并记录釜温为20℃。使混合物在室温下搅拌0.5小时以使粒料溶解。记录所得灰色悬浮液的釜温为24℃。然后向冷却浴中装入碎冰/水并将釜温降至0℃。向加料漏斗中装入3-[1-(三氟甲基)环丙基]丙酸(25g，137.3mmol)于四氢呋喃(75ml，3ml/g)中的溶液并在1小时内滴加澄清的浅黄色溶液。在添加完成之后，记录所得灰棕色悬浮液的釜温为5℃。使混合物缓慢温热至室温并在室温下继续搅拌24小时。将悬浮液用碎冰/水冷却浴冷却至0℃并且然后通过非常缓慢地滴加水(6.775ml)，随后添加15wt％氢氧化钠溶液(6.775ml)并且最后用水(20.32ml)淬灭。记录所得白色悬浮液的釜温为5℃。将悬浮液在约5℃下持续搅拌30分钟并且然后通过具有20mm硅藻土层的玻璃料布氏漏斗过滤。将滤饼用四氢呋喃(2
×
150ml)置换洗涤并且然后在真空下干燥15分钟。将滤液用硫酸钠(250g)干燥并且然后通过玻璃料布氏漏斗过滤。将滤液在减压下浓缩，得到澄清的浅琥珀色油，即期望的产物3-[1-(三氟甲基)环丙基]丙烷-1-醇(21.2g，92％)。1h nmr(400mhz，氯仿-d)δ3.65(t,j＝6.0hz,2h),1.78-1.59(m,4h),0.99-0.91(m,2h),0.59(dp,j＝4.7,1.7hz,2h)。
[1664]
实例h：6-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]吡啶-2-羧酸的制备
[1665]
步骤1：6-苄基硫基吡啶-2-甲酸甲酯
[1666][1667]
在0℃下向苯基甲硫醇(28.408g，26.800ml，228.72mmol)于thf(600ml)中的溶液中分几部分添加nah(11.200g，60％w/w，280.03mmol)。将浆液温热至室温并搅拌30分钟，然后以单一部分添加6-溴吡啶-2-羧酸甲酯(50g，231.45mmol)。在3小时之后，将反应用乙醚(800ml)稀释并用水(400ml)和饱和碳酸氢钠(50ml)淬灭。将层分离，并且将有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，并在减压下浓缩，得到呈黄色油的6-苄基硫基吡啶-2-甲酸甲酯(56.35g，89％)。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ7.84
–
7.77(m,1h),7.77
–
7.73(m,1h),7.52(m,1h),7.48(d,j＝7.8hz,2h),7.28(t,j＝7.2,7.2hz,2h),7.24
–
7.18(m,1h),4.44(s,2h),3.90(d,j＝1.2hz,3h)。esi-ms m/z计算值259.0667，实验值260.1(m+1)
+
；保留时间：3.2分钟；lc方法t。
[1668]
步骤2：6-氯磺酰基吡啶-2-羧酸甲酯
[1669][1670]
在-1-0℃冰浴中冷却6-苄基硫基吡啶-2-甲酸甲酯(121.62g，431.47mmol)于dcm(950ml)和di水(300ml)中的溶液，并在剧烈搅拌下滴加磺酰氯(228.14g，140ml，1.6396mol)，同时维持温度低于5℃。在添加之后，将有机相分离，用di水(2
×
500ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并在真空下浓缩。将残余物溶解于dcm(500ml)中。添加己烷(1000ml)并且将dcm缓慢蒸发掉。将白色沉淀通过真空过滤并且将固体用己烷(2
×
500ml)洗涤。收集过滤出的固体。将滤液中的残余固体过滤并溶解于dcm(500ml)中。将dcm溶液转移到1l圆底烧瓶中并在真空下浓缩。将残余物溶解于dcm(200ml)中。添加己烷(600ml)并且将dcm缓慢蒸发掉。将白色沉淀通过真空过滤并将固体用己烷(2
×
500ml)洗涤。在干燥之后，分离出6-氯磺酰基吡啶-2-羧酸甲酯(56.898g，55％)。1h nmr(500mhz,chloroform-d)δ8.48(dd,j＝7.8,1.1hz,1h),8.31(dd,j＝7.9,1.1hz,1h),8.25(t,j＝7.8hz,1h),4.08(s,3h)。esi-ms m/z计算值234.97061，实验值236.1(m+1)
+
；保留时间：1.74分钟；lc方法t。
[1671]
步骤3：6-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]吡啶-2-羧酸甲酯
[1672][1673]
将溶解于无水thf(680ml)中的4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-胺(16.63g，71.161mmol)和6-氯磺酰基吡啶-2-羧酸甲酯(16.8g，71.294mmol)的溶液冷却至-78℃。然后滴加双(三甲基甲硅烷基)氨基锂(1m的143ml，143.00mmol)于thf中的溶液。使混合物缓慢温热至0℃并且然后添加1mhcl水溶液(146ml)，随后添加di水(680ml)。将thf蒸发并且用氯仿(3
×
250ml)萃取水相。将合并的有机层用饱和nacl水溶液(300ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并在真空下浓缩。将粗在10％丙酮/己烷(500ml)中重结晶。将白色沉淀过滤并用丙酮(2
×
100ml)漂洗，得到6-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]吡啶-2-羧酸甲酯(15.79g，50％)。esi-ms m/z计算值432.06592，实验值433.3(m+1)
+
；保留时间：5.5分钟；lc方法s。
[1674]
步骤4：6-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]吡啶-2-羧酸
[1675][1676]
向6-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]吡啶-2-羧酸甲酯(15.79g，36.477mmol)于thf(180ml)中的溶液中添加氢氧化钠水溶液(1m的182ml，182.00mmol)。将反应在室温下搅拌1小时。将thf蒸发并且将水层用乙醚(2
×
200ml)洗涤。将水层用1m hcl水溶液(250ml)酸化至ph 2。将沉淀过滤并且将白色固体用di水(2
×
250ml)漂洗。将固体在真空下干燥，得到6-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]吡啶-2-羧酸(14.3444g，93％)。1h nmr(250mhz,dmso-d6)δ8.14-7.99(m,3h),7.21-7.11(m,1h),7.03(d,j＝7.7hz,2h),6.92(s,1h),1.78(s,6h)。esi-ms m/z计算值418.05026，实验值419.1(m+1)
+
；保留时间：2.61分钟；lc方法t。
[1677]
实例i：3-[[4-[(2r)-2-氨基-4-甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)-2-吡啶基]氨磺酰基]苯甲酸的制备
[1678]
步骤1：4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)吡啶-2-胺
[1679][1680]
向(2,6-二甲基苯基)硼酸(11.515g，76.775mmol)和4,6-二氯吡啶-2-胺(12.513g，76.765mmol)于甲苯(425ml)和etoh(213ml)中的搅拌的溶液中添加碳酸钠水溶液(2m的115ml，230.00mmol)，并将反应混合物用氮气脱气45分钟。然后添加pd(dppf)cl2(6.271g，7.6791mmol)，再继续脱气15分钟。然后将反应小瓶密封，并且将混合物加热至100℃并在该温度下搅拌24小时。在此之后，将挥发物在减压下去除，并且将残余物用乙酸乙酯(3
×
200ml)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在减压下浓缩。将粗产物通过硅胶柱色谱法(0-25％ etoac/己烷)纯化，并用己烷研磨，得到呈类白色固体的4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)吡啶-2-胺(6.469g，34％)。esi-ms m/z计算值232.07672，实验值233.1(m+1)
+
；保留时间：2.31分钟；(lc方法t)。
[1681]
步骤2：3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)-2-吡啶基]氨磺酰基]苯甲酸甲酯
[1682][1683]
在-78℃和氮气下，向4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)吡啶-2-胺(4.9g，20.635mmol)和3-氯磺酰基苯甲酸甲酯(4.9g，20.046mmol)于thf(200ml)中的溶液中滴加双(三甲基甲硅烷基)氨基锂(1m的45ml，45.000mmol)。将反应混合物在-78℃下搅拌30分钟；然后温热至0℃并在0℃下搅拌2小时。将反应用冷1.0m盐酸(50ml)淬灭并用水(200ml)稀释。将混合物用乙酸乙酯(2
×
400ml)萃取。将有机层合并，用盐水(500ml)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将残余物通过色谱法使用0-20％乙酸乙酯/己烷纯化，得到呈白色固体的3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)-2-吡啶基]氨磺酰基]苯甲酸甲酯(6.2g，68％)。esi-ms m/z计算值430.0754，实验值431.5(m+1)
+
；保留时间：3.65分钟；(lc方法t)。
[1684]
步骤3：3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)-2-吡啶基]氨磺酰基]苯甲酸
[1685][1686]
在室温下，向3-[4-氯-6-(2,6-二甲基-苯基)-吡啶-2-基氨磺酰基]-苯甲酸甲酯
(5.3g，12.3mmol)于四氢呋喃(80ml)和水(80ml)的混合物中的搅拌的溶液中添加氢氧化锂一水合物(1.55g，36.9mmol)并将反应混合物在45c下搅拌2小时。将四氢呋喃在真空下去除，并且将残余物用水(100ml)稀释。将水层用乙醚(2
×
50ml)、己烷(50ml)洗涤并用1.0m盐酸酸化至ph＝2-3。将沉淀的产物通过过滤收集并在75℃下的真空烘箱中干燥至恒重，得到呈白色固体的3-[4-氯-6-(2,6-二甲基-苯基)-吡啶-2-基氨磺酰基]-苯甲酸(4.8g，93％)。1h nmr(250mhz,dmso-d6)δ(ppm):8.32(d,j＝1.9hz,1h),8.14(d,j＝7.7hz,1h),8.03(d,j＝8.0hz,1h),7.63(t,j＝7.8hz,1h),7.28-6.96(m,5h),1.77(s,6h)。esi-ms m/z计算值416.8，实验值417.0(m1)。保留时间：5.11分钟。
[1687]
步骤4：3-[[4-[(2r)-2-氨基-4-甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)-2-吡啶基]氨磺酰基]苯甲酸
[1688][1689]
按该顺序向20ml小瓶中装入3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)-2-吡啶基]氨磺酰基]苯甲酸(300mg，0.7196mmol)、(2r)-2-氨基-4-甲基-戊烷-1-醇(110mg，0.9387mmol)和无水四氢呋喃(12ml)。然后将小瓶用氮气吹扫30秒，并且在氮气下加盖添加固体叔丁醇钾(350mg，3.119mmol)。在105℃下搅拌14小时(过夜)之后，使反应冷却至环境温度。然后添加冰乙酸(200μl，3.517mmol)，并且将挥发物在减压下去除。向残余物中添加dmso(5ml)并微过滤。通过反相色谱法(c
18
柱，15分钟内1-99％乙腈/水)纯化，得到呈淡黄色固体的3-[[4-[(2r)-2-氨基-4-甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)-2-吡啶基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(278mg，72％)。esi-ms m/z计算值497.19846，实验值498.2(m+1)
+
；保留时间：0.43分钟(lc方法d)。
[1690]
实例j：3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]-(甲氧基甲基)氨磺酰基]苯甲酸甲酯的制备
[1691]
步骤1：3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]-(甲氧基甲基)氨磺酰基]苯甲酸甲酯
[1692][1693]
向3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸甲酯(35.04g，81.131mmol)于乙腈(525ml)和1,2-二氯乙烷(525ml)中的溶液中添加碳酸钾(16.8g，121.56mmol)，随后添加氯甲基甲醚(7.5260g，7.1ml，93.475mmol)。将反应混合物在室温下搅拌过夜。将溶剂蒸发，并且将所得物质在水(300ml)与etoac(300ml)之间分配。将水层用etoac(2
×
200ml)萃取。将合并的有机层用水(300ml)和盐水(300ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法使用0至40％etoac/己烷纯化，得到呈透明凝胶的3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]-(甲氧基甲基)氨磺酰基]苯甲酸甲酯
基]氨磺酰基]苯甲酸
[1703][1704]
将3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(75mg，0.1795mmol)于thf(0.7ml)中的溶液添加到n-[(1r)-2-羟基-1-甲基-乙基]氨基甲酸叔丁酯(大约47.17mg，0.2692mmol)中。之后添加固体叔丁醇钠(大约86.25mg，0.8975mmol)。使反应混合物在室温下搅拌。添加乙酸(大约64.68mg，61.25μl，1.077mmol)。将反应混合物用dcm稀释，并且用hcl(1m，1
×
7ml)和盐水(2
×
75ml)洗涤。有机层经硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。将粗产物在12克硅胶柱上进行色谱分析，用etoac/己烷梯度洗脱。获得3-[[4-[(2r)-2-(叔丁氧羰基氨基)丙氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(1.65g，2.964mmol)(65mg，65％)。esi-ms m/z计算值556.19916，实验值557.3(m+1)
+
；保留时间：1.63分钟；lc方法a。
[1705]
步骤2：3-[[4-[(2r)-2-氨基丙氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸
[1706][1707]
将3-[[4-[(2r)-2-(叔丁氧羰基氨基)丙氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(1.65g，2.964mmol)于hcl(4m的8ml，32.00mmol)(于二噁烷中)中的溶液搅拌两小时，并将溶剂在真空下去除。将固体用乙醚研磨并在真空下干燥，得到呈无色固体的3-[[4-[(2r)-2-氨基丙氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(1.55g，106％)。esi-ms m/z计算值456.14673，实验值457.2(m+1)
+
；保留时间：0.37分钟，lc方法d。
[1708]
实例m：3-[[4-[(2r)-2-氨基-5-羟基-5-甲基-己氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸的制备
[1709]
步骤1：(4r)-4-(叔丁氧羰基氨基)-5-羟基-戊酸苄酯
[1710][1711]
将(2r)-5-苄氧基-2-(叔丁氧基羰基氨基)-5-氧代-戊酸(10g，29.641mmol)溶解于二甲氧基乙烷(30ml)中并将溶液冷却至-15℃。添加n-甲基吗啉(3.0360g，3.3ml，
30.016mmol)，随后缓慢添加氯甲酸异丁酯(4.1067g，3.9ml，30.069mmol)，使得反应温度保持在-10℃以下。将混合物搅拌30分钟。将固体快速过滤并用二甲氧基乙烷(30ml)洗涤。将滤液冷却至-40℃并缓慢添加硼氢化钠(1.45g，38.327mmol)于水(15ml)中的溶液，使得反应温度维护在-30℃与-15℃之间。将混合物搅拌15分钟。然后在-15℃下滴加水(180ml)并将温度缓慢升至5℃，同时控制气体释放。将悬浮液过滤并用水(300ml)洗涤。将固体溶解于二氯甲烷(100ml)中并转移到分液漏斗中。将相分离，将有机相经硫酸钠干燥，过滤并蒸发至干燥，得到呈白色固体的(4r)-4-(叔丁氧羰基氨基)-5-羟基-戊酸苄酯(7.98g，83％)。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.42-7.30(m,5h),5.13(s,2h),4.81(br.s.,1h),3.65(br.s.,2h),3.60-3.51(m,1h),2.57-2.36(m,3h),1.98-1.87(m,1h),1.86-1.73(m,1h),1.44(s,9h)。esi-ms m/z计算值323.1733，实验值224.4(m-99)+；保留时间：1.696分钟，lc方法x。
[1712]
步骤2：3-[(4r)-2-氧代噁唑烷-4-基]丙酸苄酯
[1713][1714]
向(4r)-4-(叔丁氧羰基氨基)-5-羟基-戊酸苄酯(7.98g，24.652mmol)于二氯乙烷(80ml)中的溶液中添加吡啶(48.900g，50ml，618.21mmol)。然后添加对甲苯磺酸酐(8.65g，25.972mmol)并且将混合物在室温下搅拌1小时并且然后加热至90℃2小时。将混合物冷却，用二氯甲烷(150ml)稀释并用1n hcl(3
×
100ml)洗涤。将合并的有机层用盐水洗涤，用硫酸钠干燥并在真空中去除溶剂。将残余物通过硅胶柱色谱法在80g柱上纯化，用20％至80％的etoac/庚烷洗脱，得到随时间缓慢结晶的呈浅棕色油的3-[(4r)-2-氧代噁唑烷-4-基]丙酸苄酯(4.85g，77％)。1h nmr(400mhz,cdcl3)δ7.43-7.30(m,5h),6.15(br.s.,1h),5.13(s,2h),4.48(t,j＝8.4hz,1h),4.02(dd,j＝8.6,6.1hz,1h),3.97-3.88(m,1h),2.45(t,j＝7.3hz,2h),2.00-1.85(m,2h)。esi-ms m/z计算值249.1001，实验值250.2(m+1)
+
；保留时间：1.511分钟，lc方法x。
[1715]
步骤3：(4r)-4-(3-羟基-3-甲基-丁基)噁唑烷-2-酮
[1716][1717]
在-20℃下，将乙醚中的甲基溴化镁(3m的26ml，78.000mmol)添加到甲苯(42ml)和四氢呋喃(42ml)的混合物中(甲醇+水+干冰)。然后滴加3-[(4r)-2-氧代噁唑烷-4-基]丙酸苄酯(4.85g，19.457mmol)的温热四氢呋喃(22ml)溶液，维持温度低于-10℃。将混合物温热至室温并搅拌2小时。将反应混合物冷却至0℃，用10％乙酸水溶液(50ml)淬灭并且将所得混合物在室温下搅拌1小时。分离各层。将水层用甲基-thf(3
×
100ml)萃取，并且然后用二
氯甲烷(2
×
100ml)萃取。将有机相合并，用无水硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法在50g和120g柱上纯化，用0至15％的异丙醇/二氯甲烷洗脱，得到呈白色固体的(4r)-4-(3-羟基-3-甲基-丁基)噁唑烷-2-酮(1.73g，51％)。1h nmr(400mhz,cdcl3)δ6.05(br.s.,1h),4.50(t,j＝8.4hz,1h),4.03(dd,j＝8.4,6.2hz,1h),3.95-3.81(m,1h),1.76-1.64(m,2h),1.59-1.44(m,3h),1.25(s,6h)。esi-ms m/z计算值173.1052，实验值174.2(m+1)
+
；保留时间：0.95分钟，lc方法x。
[1718]
步骤4：(2r)-2-氨基-5-甲基-己烷-1,5-二醇
[1719][1720]
将(4r)-4-(3-羟基-3-甲基-丁基)噁唑烷-2-酮(307mg，1.7724mmol)、八水氢氧化钡(1.69g，5.3572mmol)、乙醇(12ml)和水(12ml)的混合物在95℃下加热回流2小时。将反应混合物冷却至室温，然后缓慢添加干冰(约1.8g)并将混合物剧烈搅拌2天。将悬浮液通过硅藻土垫过滤并用乙醇(约15ml)漂洗。将滤液用甲苯稀释，共蒸发三次并在减压下浓缩。在烧瓶壁上观察到钡盐。添加最少量的乙醇，并且将溶液经硅藻土垫再次过滤。将滤液在压力下浓缩，得到呈黄色油的(2r)-2-氨基-5-甲基-己烷-1,5-二醇(338.4mg，130％)。将粗在不经纯化的情况下用于下一步骤。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ3.40-3.28(m,1h),3.25-3.11(m,1h),2.64(br.s,1h),1.81(s,2h),1.51-1.37(m,2h),1.37-1.29(m,1h),1.29-1.18(m,1h),1.06(d,j＝1.0hz,6h)。esi-ms m/z计算值147.1259，实验值148.4(m+1)
+
；保留时间：0.22分钟，lc方法x。
[1721]
步骤5：3-[[4-[(2r)-2-氨基-5-羟基-5-甲基-己氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸
[1722][1723]
向冷却至0℃的3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(371mg，0.8878mmol)和(2r)-2-氨基-5-甲基-己烷-1,5-二醇(261mg，1.7729mmol)于thf中的溶液中缓慢添加叔丁醇钠(375mg，3.9020mmol)。在2小时之后，将叔丁醇钠(76mg，0.7908mmol)缓慢添加到反应中并在室温下搅拌。在添加后2小时之后，缓慢添加thf中的叔丁醇钠(2m的200μl，0.4000mmol)，并将反应在室温下搅拌过夜。将反应在乙酸乙酯(6ml)与盐酸1n(6ml)之间分配。将水相用乙酸乙酯(2
×
6ml)和2-甲基四氢呋喃(3
×
6ml)萃取。将有机相合并，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩至干燥。将固体用乙酸乙酯(10ml)研磨并且将沉淀过滤，然后用乙酸乙酯(2
×
10ml)洗涤，得到呈浅黄色固体的3-[[4-[(2r)-2-氨基-5-羟基-5-甲基-己氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(653.4mg，139％，较高的
质量回收率可能是由于盐污染)。将粗在不经纯化的情况下用于下一步骤。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ13.24(br.s,1h),8.43(s,1h),8.19-8.06(m,3h),7.70(t,j＝7.6hz,1h),7.32-7.19(m,1h),7.18-7.05(m,2h),6.30(s,1h),4.46-4.32(m,1h),4.30-4.18(m,1h),3.53(s,1h),1.99(s,6h),1.78-1.61(m,2h),1.57-1.37(m,2h),1.11(d,j＝7.8hz,6h)。esi-ms m/z计算值528.2043，实验值529.2(m+1)
+
；保留时间：1.3分钟，lc方法x。
[1724]
实例n：3-[[4-[(2r)-2-氨基-4-甲基-戊氧基]-6-[2-(苄氧基甲基)-6-甲基-苯基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸的制备
[1725]
步骤1：(2-溴-3-甲基-苯基)甲醇
[1726][1727]
在0℃下的搅拌下，向2-溴-3-甲基苯甲酸甲酯(10.0281g，42.902mmol)于无水thf(100ml)中的溶液中添加硼氢化锂(4.9305g，215.02mmol)。然后将反应混合物加热至50℃并在50℃下搅拌4小时。将反应用di水(30ml)稀释并用etoac(3
×
50ml)萃取。将合并的etoac层用饱和nacl水溶液(100ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并在真空下浓缩。获得呈浅橙色固体的粗产物(8.637g)。(2-溴-3-甲基-苯基)甲醇(8.637g，100％)。1hnmr(500mhz,dmso-d6)δ7.37(d,j＝7.5hz,1h),7.28(t,j＝7.5,7.5hz,1h),7.23(d,j＝7.3hz,1h),5.39(t,j＝5.6,5.6hz,1h),4.51(d,j＝5.7hz,2h),2.35(s,3h)。
[1728]
步骤2：1-(苄氧甲基)-2-溴-3-甲基-苯
[1729][1730]
向在冰浴中冷却至0℃的于dmso(38ml)中的(2-溴-3-甲基-苯基)甲醇(1.87g，9.301mmol)中添加nah(60％w/w的1.227g，30.68mmol)并将反应搅拌15分钟。然后添加溴甲苯(1.75ml，14.71mmol)并且将混合物温热至室温并搅拌16小时。将混合物在etoac与水之间分配。将有机层用盐水洗涤，干燥(硫酸钠)，过滤并浓缩成固体，将所述固体通过硅胶色谱法(80克柱)使用从100％己烷至40％ etoac的浅梯度纯化(化合物在18％乙酸乙酯中洗脱)，得到1-(苄氧基甲基)-2-溴-3-甲基-苯(2.69g，99％)。esi-ms m/z计算值290.03064，实验值291.2(m+1)
+
；保留时间：2.06分钟；lc方法a。
[1731]
步骤3：2-[2-(苄氧基甲基)-6-甲基-苯基]-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷
[1732]
[1733]
在350ml密封容器中，将1-(苄氧基甲基)-2-溴-3-甲基-苯(5.4g，18.55mmol)溶解于二噁烷(55ml)中并向其中添加koac(3.85g，39.23mmol)并且将混合物用氮气脱气几分钟。然后添加双(频哪醇)二硼(7.25g，28.55mmol)，随后添加pd(dppf)cl2(1.41g，1.932mmol)，并且将反应再次通过n
2吹扫
，密封并加热至100℃16小时。在将反应冷却至室温之后，添加饱和氯化铵，并且将反应用乙酸乙酯萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将所得棕色油通过硅胶柱色谱法(220克柱)使用100％己烷至30％乙酸乙酯/己烷的梯度纯化(化合物在10％乙酸乙酯下洗脱)，获得呈白色固体的期望的化合物2-[2-(苄氧基甲基)-6-甲基-苯基]-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(4.63g，74％)。esi-ms m/z计算值338.20532，实验值339.4(m+1)
+
；保留时间：2.23分钟；lc方法a。1h nmr(499mhz，氯仿-d)δ7.37-7.32(m,4h),7.32-7.27(m,1h),7.25-7.20(m,1h),7.10(dd,j＝23.3,7.5hz,2h),4.62(s,2h),4.46(s,2h),2.45(s,3h),1.34(s,12h)。
[1734]
步骤4：n-[4-[2-(苄氧基甲基)-6-甲基-苯基]-6-氯-嘧啶-2-基]-n-叔丁氧基羰基-氨基甲酸叔丁酯
[1735][1736]
将n-叔丁氧羰基-n-(4,6-二氯嘧啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯(1.5g，4.118mmol)和2-[2-(苄氧基甲基)-6-甲基-苯基]-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(1.4g，4.139mmol)在二甲氧基乙烷(36ml)和水(6ml)中合并。向混合物中添加[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(ii)(315mg，0.4305mmol)和碳酸钾(1.5g，10.85mmol)，并且将氮气鼓泡通过悬浮液1分钟。将反应加盖并加热至80℃2小时。将混合物冷却至环境温度并且添加饱和氯化铵并将其用乙酸乙酯萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法(80克柱)使用100％己烷至50％乙酸乙酯/己烷的梯度纯化(化合物在30％ etoac中洗脱)，得到呈浅黄色油的n-[4-[2-(苄氧基甲基)-6-甲基-苯基]-6-氯-嘧啶-2-基]-n-叔丁氧基羰基-氨基甲酸叔丁酯(1.73g，78％)。esi-ms m/z计算值539.2187，实验值540.2(m+1)
+
；保留时间：1.87分钟；lc方法q。1h nmr(499mhz，氯仿-d)δ7.39-7.35(m,2h),7.35-7.30(m,3h),7.29-7.23(m,4h),4.40(s,2h),4.30(s,2h),2.13(s,3h),1.44(s,18h)。
[1737]
步骤5：4-[2-(苄氧基甲基)-6-甲基-苯基]-6-氯-嘧啶-2-胺
[1738][1739]
将n-[4-[2-(苄氧基甲基)-6-甲基-苯基]-6-氯-嘧啶-2-基]-n-叔丁氧基羰基-氨
基甲酸叔丁酯(1.7g，3.148mmol)溶解于dcm(35ml)中，并且向混合物中添加hcl(二噁烷中的4m)(4m的21ml，84.00mmol)并将反应在室温下搅拌。在6小时之后，将混合物蒸发至干燥，然后用乙醚(50ml
×
2)稀释，然后用己烷:二氯甲烷(1:1混合物，50ml)稀释并浓缩。然后将该物质放置在高真空泵上16小时，得到呈浅黄色胶的产物4-[2-(苄氧基甲基)-6-甲基-苯基]-6-氯-嘧啶-2-胺(1.07g，100％)。esi-ms m/z计算值339.11383，实验值340.2(m+1)
+
；保留时间：1.67分钟；lc方法a。1h nmr(499mhz,dmso-d6)δ7.35-7.30(m,4h),7.29-7.24(m,2h),7.24-7.15(m,4h),6.65(s,1h),4.37(s,2h),4.33(s,2h),2.10(s,3h)。
[1740]
步骤6：3-[[4-[2-(苄氧基甲基)-6-甲基-苯基]-6-氯-嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸甲酯
[1741][1742]
将4-[2-(苄氧基甲基)-6-甲基-苯基]-6-氯-嘧啶-2-胺(2.74g，8.063mmol)溶解于thf(50ml)中并在冰浴中冷却至0℃。一次性添加3-氯磺酰基苯甲酸甲酯(2.85g，12.15mmol)。滴加叔醇锂(40％w/w的7.25ml，22.50mmol)并使反应缓慢温热至室温。将反应搅拌6小时。将混合物在高真空下抽吸过夜，然后在thf(25ml)中再次稀释。在冰浴中冷却之后，添加3-氯磺酰基苯甲酸甲酯(1.0g)，随后滴加叔醇锂(40％w/w的3ml)并使反应在室温下温热4小时。添加1hcl将混合物酸化。将反应混合物用乙酸乙酯萃取。将有机物用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并蒸发。将粗物质利用硅胶柱色谱法(120克柱)使用100％己烷至80％乙酸乙酯/己烷的梯度纯化(化合物在50％ etoac下洗脱)，得到浅黄色油，其在高真空下固化，产生3-[[4-[2-(苄氧基甲基)-6-甲基-苯基]-6-氯-嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸甲酯(2.06g，47％)。esi-ms m/z计算值537.11255，实验值538.2(m+1)
+
；保留时间：1.97分钟；lc方法a。
[1743]
步骤7：3-[[4-[2-(苄氧基甲基)-6-甲基-苯基]-6-氯-嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸
[1744][1745]
将3-[[4-[2-(苄氧基甲基)-6-甲基-苯基]-6-氯-嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸甲酯(2.06g，3.829mmol)和naoh(1m的30ml，30.00mmol)在thf(25ml)中合并，并在室温下搅拌2小时。将反应通过添加1m hcl呈酸性并用乙酸乙酯萃取。将有机物用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并蒸发。将物质放置在高真空下过夜，得到3-[[4-[2-(苄氧基甲基)-6-甲基-苯基]-6-氯-嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(1.95g，97％)。esi-ms m/z计算值523.09686，实验值524.1(m+1)
+
；保留时间：1.72分钟；lc方法a。
[1746]
步骤8：3-[[4-[(2r)-2-氨基-4-甲基-戊氧基]-6-[2-(苄氧基甲基)-6-甲基-苯
基]氨磺酰基]吡啶-2-羧酸
[1755][1756]
将6-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]吡啶-2-羧酸(5.03g，12.01mmol)和(2r)-2-氨基-4,4-二甲基-戊烷-1-醇(盐酸盐)(2.05g，12.23mmol)在thf(35ml)中合并。向所得悬浮液(难以搅拌)中，分3等份添加叔丁醇钠(4.62g，48.07mmol)，导致固体部分溶解和轻微放热反应。将混合物在室温下搅拌5小时(浑浊悬浮液)。添加更多(2r)-2-氨基-4,4-二甲基-戊烷-1-醇(盐酸盐)(338mg，2.016mmol)和叔丁醇钠(钠盐)(610mg，6.347mmol)并将混合物再搅拌1.5小时。将反应用乙酸乙酯(80ml)、hcl(1m的75ml，75.00mmol)和盐水(50ml)稀释并将所得两个相分离。将水相用etoac(3
×
20ml)进一步萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥并浓缩。将残余物在1:3etoac:己烷混合物中研磨并在该溶剂混合物中搅拌整个周末。将固体过滤并干燥，得到呈白色固体的6-[[4-[(2r)-2-氨基-4,4-二甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]吡啶-2-羧酸(盐酸盐)(6.397g，97％)。esi-ms m/z计算值513.2046，实验值514.6(m+1)
+
；保留时间：1.05分钟；lc方法a.1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ13.36(broad s,1h),8.43-7.87(m,6h),7.28(t,j＝7.6hz,1h),7.14(d,j＝7.6hz,2h),6.31(s,1h),4.20(dd,j＝12.3,2.9hz,1h),4.09-3.91(m,1h),3.61(s,1h),2.03(s,6h),1.57(dd,j＝14.7,7.3hz,1h),1.46(dd,j＝14.6,3.7hz,1h),0.93(s,9h)。
[1757]
v.新化合物的合成
[1758]
实例1：化合物1的制备
[1759]
步骤1：n-[(1r)-1-(环己基甲基)-2-[甲氧基(甲基)氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯
[1760][1761]
向(2r)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-环己基-丙酸(10.36g，38.18mmol)和1-羟基苯并三唑(5.5g，40.70mmol)于在dmf(120ml)中的溶液中添加dipea(20ml，114.8mmol)，随后添加edci hcl(7.9g，41.21mmol)，然后添加n-甲氧基甲胺(盐酸盐)(4.9g，50.23mmol)和dipea(10ml，57.41mmol)，并将反应混合物在室温下搅拌16小时。将反应混合物倒入0.1n hcl(500ml)中，将ph用1n hcl调节至4并且然后用etoac(3x)萃取。将有机物合并，用0.1n hcl、水、饱和碳酸氢钠水溶液(2x)、盐水洗涤，经硫酸钠干燥并蒸发至干燥。通过柱色谱法(220g二氧化硅；0-30％etoac/己烷)纯化，得到澄清油，n-[(1r)-1-(环己基甲基)-2-[甲氧基(甲基)氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯(11.1g，93％)；1h nmr(400mhz,氯仿-d)δ5.03(d,j＝9.6hz,1h),4.75(s,1h),3.78(s,3h),3.20(s,3h),1.91(d,j＝12.9hz,1h),1.76-1.59(m,4h),1.57-1.32(m,12h),1.32-1.08(m,3h),1.02-0.82(m,2h)。esi-ms m/z计
算值314.22055，实验值315.3(m+1)
+
；保留时间：0.69分钟；lc方法d。
[1762]
步骤2：(1r,2r)-2-氨基-3-环己基-1-环丙基-丙烷-1-醇
[1763][1764]
阶段1：将n-[(1r)-1-(环己基甲基)-2-[甲氧基(甲基)氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯(2.18g，6.933mmol)的thf(12ml)溶液使用冰水浴冷却至0℃并用lah于thf中的溶液(1m的7ml，7.00mmol)逐滴处理。将反应搅拌30分钟并且然后小心地用柠檬酸(1m的15ml，15.00mmol)淬灭。将混合物用乙酸乙酯(3
×
50ml)萃取。将合并的有机萃取物用水(100ml)和饱和氯化钠水溶液(100ml)洗涤，然后经硫酸钠干燥，过滤，并在真空中蒸发，得到浅黄色油。将醛产物在不经进一步纯化的情况下用于下一步骤。
[1765]
阶段2：将上述阶段1产物溶于thf(12ml)中，冷却至0℃并用溴(环丙基)镁于methf中的溶液(1m的15ml，15.00mmol)处理并且将反应温热至室温并搅拌2小时。然后，将其用hcl水溶液(1m的20ml，20.00mmol)淬灭，并用乙酸乙酯(15ml)稀释。将有机相分离并用水(10ml)洗涤，然后用盐水(10ml)洗涤。将有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并在真空中浓缩。粗产物无需进一步纯化即可用于下一步骤。
[1766]
阶段3：将上述阶段2产物用于二噁烷中的hcl(大约4m的1.733ml，6.933mmol)处理，在室温下搅拌90分钟并且然后在真空下浓缩。将残余物溶于meoh(3ml)中，通过反相制备型hplc(c
18
)纯化，得到(1r,2r)-2-氨基-3-环己基-1-环丙基-丙烷-1-醇(盐酸盐)(170.8mg，11％)；1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ7.76(s,2h),3.15
–
2.97(m,1h),2.87(dd,j＝7.8,5.4hz,1h),1.71
–
1.57(m,5h),1.56
–
1.47(m,1h),1.46
–
1.33(m,2h),1.27
–
1.05(m,4h),0.96
–
0.73(m,3h),0.52
–
0.38(m,2h),0.34
–
0.28(m,1h),0.28
–
0.16(m,1h)。esi-ms m/z计算值197.17796，实验值198.2(m+1)
+
；保留时间：1.01分钟；lc方法a。
[1767]
步骤3：(1r,2r)-3-环己基-1-环丙基-2-(螺[2.3]己-5-基氨基)丙烷-1-醇
[1768][1769]
向螺[2.3]己-5-酮(13.2mg，0.1373mmol)于dcm(0.5ml)中的溶液中添加(1r,2r)-2-氨基-3-环己基-1-环丙基-丙烷-1-醇(盐酸盐)(33.7mg，0.1442mmol)，然后添加三乙酰氧基硼氢化钠(51.2mg，0.2416mmol)并将混合物搅拌3小时。将挥发物在真空中去除，然后将残余物过滤并用反相制备型hplc(c
18
；hcl改性剂对于防止异构化生成(1r,2r)-3-环己基-1-环丙基-2-(螺[2.3]己-5-基氨基)丙烷-1-醇(30.2mg，75％)至关重要)esi-ms m/z计算值277.24057，实验值278.3(m+1)
+
；保留时间：0.55分钟；lc方法d。
[1770]
步骤4：3-[[4-[(1r,2r)-3-环己基-1-环丙基-2-(螺[2.3]己-5-基氨基)丙氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸
[1771][1772]
将(1r,2r)-3-环己基-1-环丙基-2-(螺[2.3]己-5-基氨基)丙烷-1-醇(36.2mg，0.1305mmol)、3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(66.5mg，0.1591mmol)和叔丁醇钠(62.6mg，0.6514mmol)的thf(2ml)混合物在室温下搅拌2小时。将溶液过滤，并且将滤液用0.8ml meoh稀释并用反相制备型hplc(c
18
)纯化，得到3-[[4-[(1r,2r)-3-环己基-1-环丙基-2-(螺[2.3]己-5-基氨基)丙氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(23.9mg，26％)esi-ms m/z计算值658.3189，实验值659.6(m+1)
+
；保留时间：2.05分钟；lc方法a。
[1773]
步骤5：(10r,11r)-11-(环己基甲基)-10-环丙基-6-(2,6-二甲基苯基)-2,2-二氧代-12-螺并[2.3]己-5-基-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(化合物1)
[1774][1775]
将3-[[4-[(1r,2r)-3-环己基-1-环丙基-2-(螺[2.3]己-5-基氨基)丙氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(13.5mg，0.01942mmol)、comu(13.2mg，0.03082mmol)和三乙胺(20μl，0.1435mmol)的dmf(1.8ml)溶液在室温下搅拌1小时。将溶液过滤并将滤液通过反相制备型hplc(c
18
)纯化，得到(10r,11r)-11-(环己基甲基)-10-环丙基-6-(2,6-二甲基苯基)-2,2-二氧代-12-螺并[2.3]己-5-基-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(3.8mg，31％)esi-ms m/z计算值640.30835，实验值641.7(m+1)
+
；保留时间：2.39分钟；lc方法a。
[1776]
实例2：化合物2的制备
[1777]
步骤1：3-甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯甲醛
[1778]
[1779]
制备2-溴-3-甲基-苯甲醛(22.5g，113.04mmol)、双(频哪醇)二硼(43.1g，169.73mmol)和koac(22.2g，226.20mmol)于1,4-二噁烷(500ml)中的溶液。将所得浆液用氮气流喷射五分钟，然后添加pd(dppf)cl2(8.3g，11.343mmol)并且将混合物在氮气下回流二十小时，然后冷却至室温并用1m盐酸淬灭，直到ph为大约3-4为止。然后将相分离：弃去水相并且将有机相在真空中浓缩，与来自另一反应的2.5g粗产物合并，并通过硅胶色谱法使用0-10％乙酸乙酯/己烷纯化，获得呈浅黄色油的3-甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯甲醛(22.5g，81％)。1h nmr(500mhz,氯仿-d)δ9.98(s,1h),7.63(dd,j＝6.6,2.1hz,1h),7.43(d,j＝6.6hz,2h),2.49(s,3h),1.49(s,12h)。产物仍然含有约25摩尔％的双(频哪醇基)二硼。esi-ms m/z计算值246.14273，实验值247.2(m+1)
+
；保留时间：0.66分钟；lc方法s。
[1780]
步骤2：2-[(11r)-11-异丁基-3-(甲氧基甲基)-2,2,13-三氧代-12-螺[2.3]己-5-基-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-6-基]-3-甲基-苯甲醛
[1781][1782]
将(11r)-6-氯-11-异丁基-3-(甲氧基甲基)-2,2-二氧代-12-螺[2.3]己-5-基-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-酮(90mg，0.1682mmol)、3-甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯甲醛(78mg，0.3169mmol)、碳酸钾(77mg，0.5571mmol)和pd(dppf)cl2(26mg，0.0318mmol)于dma(2ml)中的不均匀溶液在加热块中加热至100℃0.5小时，用少量1m盐酸淬灭，然后用dcm(10ml)稀释。将相分离并将有机相在真空中浓缩。在硅胶色谱法(0-60％乙醚/己烷)之前，将粗产物与类似规模的反应中的其它批次合并，获得2-[(11r)-11-异丁基-3-(甲氧基甲基)-2,2,13-三氧代-12-螺[2.3]己-5-基-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-6-基]-3-甲基-苯甲醛(65mg，62％)esi-ms m/z计算值618.2512，实验值619.7(m+1)
+
；保留时间：7.46分钟；lc方法s。
[1783]
步骤3：(11r)-6-[2-(羟甲基)-6-甲基-苯基]-11-异丁基-2,2-二氧代-12-螺[2.3]己-5-基-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(化合物2)
[1784][1785]
将2-[(11r)-11-异丁基-3-(甲氧基甲基)-2,2,13-三氧代-12-螺[2.3]己-5-基-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-6-基]-3-甲基-苯甲醛(93mg，0.1618mmol)和硼氢化钠(31mg，0.0328ml，0.8194mmol)于乙醇(10ml)中的溶液在室温下搅拌1.5小时。将反应混合物用少量盐酸淬灭并且然后在真空中浓缩，得到呈黄色固体的(11r)-6-[2-(羟甲基)-6-甲基-苯基]-11-异丁基-2,2-二氧代-12-螺[2.3]己-5-基-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(93mg，70％)(mom保护和未保护物质的混合物)。将用于乙醇(5ml)中的hcl(12m的1ml，12.000mmol)处理的该物质在室温下搅拌2.5小时，然后在真空中浓缩并通过hplc(5-100％乙腈/水w/0.1％ hcl缓冲液)纯化，得到(11r)-6-[2-(羟甲基)-6-甲基-苯基]-11-异丁基-2,2-二氧代-12-螺[2.3]己-5-基-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(28mg，30％)。1h nmr(500mhz，氯仿-d)δ8.68(s,1h),8.00(d,j＝7.9hz,1h),7.90(d,j＝7.6hz,1h),7.64(t,j＝7.7hz,1h),7.48(d,j＝7.6hz,1h),7.39(t,j＝7.6hz,1h),7.26(d,j＝7.6hz,1h),6.36(s,1h),5.38(dd,j＝10.8,4.1hz,1h),4.48(d,j＝12.0hz,1h),4.31(d,j＝12.1hz,1h),4.20
–
4.06(m,2h),3.86(td,j＝9.6,7.8,5.7hz,1h),3.27(dt,j＝25.9,9.5hz,2h),2.26
–
2.21(m,1h),2.19(s,3h),2.18
–
2.12(m,1h),1.70(ddd,j＝14.2,11.0,2.8hz,1h),1.46(tt,j＝6.5,3.1hz,1h),1.28(ddd,j＝13.9,10.6,2.9hz,1h),0.83(d,j＝6.6hz,3h),0.56(d,j＝3.4hz,4h),0.35(d,j＝6.4hz,3h)。esi-ms m/z计算值576.24066，实验值577.6(m+1)
+
；保留时间：2.56分钟；lc方法w。
[1786]
实例3：化合物3的制备
[1787]
步骤1：(2r)-2-氨基-5-甲基-己-1-醇(盐酸盐)
[1788][1789]
阶段1：将(2r)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-己酸(1.8g，7.337mmol)溶解于thf(15ml)中，在冰浴中冷却，并且滴加bh3(1m的22.5ml，22.50mmol)。在添加完成之后，将冰浴去除，并且将反应混合物在室温下搅拌2小时。然后将反应再次冷却至0℃，并且滴加甲醇(剧烈起泡)。使反应在一小时内缓慢温热至室温，然后在减压下浓缩。添加10ml的甲醇，并且将反应混合物再次浓缩(两次)。将该过程用10ml thf重复三次并在减压下浓缩，得到
无色油n-[(1r)-1-(羟甲基)-4-甲基-戊基]氨基甲酸叔丁酯(1.691g，100％)esi-ms m/z计算值231.18344，实验值232.3(m+1)
+
；保留时间：0.57分钟(lc方法d)。
[1790]
阶段2：将产物溶解于二氯甲烷(15ml)中并添加于二噁烷中的hcl(4m的22ml，88.00mmol)。将反应混合物在室温下搅拌30分钟，然后浓度。添加己烷和二氯甲烷，并且将反应混合物再次浓缩，得到具有一些残余的溶剂的boc保护的物质，所述物质不经进一步纯化即可用于下一步骤。(2r)-2-氨基-5-甲基-己-1-醇(盐酸盐)(1.21g，98％)。1h nmr(400mhz,dmso)δ7.89(s,2h),3.58(dd,j＝11.5,3.8hz,1h),3.47(ddt,j＝28.1,11.5,5.7hz,1h),3.40-3.30(m,1h),3.00(dq,j＝11.2,6.1hz,1h),1.50(qd,j＝6.7,3.9hz,3h),1.28-1.15(m,2h),0.87(dt,j＝6.5,1.7hz,6h)。
[1791]
步骤2：3-[[4-[(2r)-2-氨基-5-甲基-羟基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸
[1792][1793]
阶段1：将3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(1.495g，3.578mmol)、(2r)-2-氨基-5-甲基-己-1-醇(盐酸盐)(1.2g，7.157mmol)和叔丁醇钠(1.725g，17.95mmol)在无水thf(8.418ml)中合并，并温热至60℃15(列表1)至30(列表2)分钟。然后将反应混合物冷却至室温，并且添加boc酸酐(1.565g，7.171mmol)。在室温下搅拌2小时之后，添加另外的boc酸酐(700mg，3.207mmol)和叔丁醇钠(600mg，6.243mmol)并继续搅拌另外2小时。将反应混合物倒入含有0.2m hcl和乙酸乙酯的分液漏斗中。将层分离，并且将水溶液用乙酸乙酯再萃取4次，并且将合并的有机物用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。将所得粗物质通过硅胶柱色谱法纯化，用0-100％乙酸乙酯/己烷洗脱。将含有产物的级分合并并浓缩。
[1794]
阶段2：将所得粗物质溶解于二氯甲烷(10ml)中，添加hcl(4m的18ml，72.00mmol)(二噁烷中)并将反应在室温下搅拌30分钟，然后在减压下浓缩，悬浮于二氯甲烷和己烷中并再次浓缩，然后在高真空下干燥过夜，得到呈白色固体的3-[[4-[(2r)-2-氨基-5-甲基-羟基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(750mg，38％)。esi-ms m/z计算值512.20935，实验值513.4(m+1)
+
；保留时间：0.44分钟；lc方法d.1h nmr(400mhz,dmso)δ8.46(q,j＝1.8hz,1h),8.21(s,2h),8.18-8.10(m,2h),7.70(t,j＝7.8hz,1h),7.26(t,j＝7.7hz,1h),7.13(d,j＝7.6hz,2h),6.33(d,j＝17.4hz,1h),4.41-4.33(m,1h),4.23(dd,j＝11.9,6.5hz,1h),3.74-3.70(m,1h),3.52-3.44(m,3h),2.01(s,6h),1.60(ddt,j＝10.4,7.8,3.8hz,2h),1.55-1.48(m,1h),1.31-1.17(m,2h),0.87(dt,j＝6.8,2.4hz,6h)。
[1795]
步骤3：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异戊基-2,2-二氧代-12-螺[2.3]己-5-基-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(化合物3)
羧酸甲酯(64mg，0.3805mmol)在无水dcm(0.6ml)中合并，并在室温下搅拌5分钟。添加三乙酰氧基硼氢化钠(150mg，0.7077mmol)并将混合物在室温下搅拌3.5小时。将反应混合物在1m hcl、盐水与乙酸乙酯之间分配。将层分离，并且将水溶液用乙酸乙酯再萃取三次。将合并的有机物用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。将残余物溶解于dmso(2ml)中。将溶液通过注射器过滤盘微过滤并通过反相制备型hplc(c
18
)使用乙腈/水的梯度(15分钟内1至99％)和hcl作为改性剂纯化。蒸发得到呈白色固体的3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(2r)-2-[(6-甲氧羰基螺环[3.3]庚烷-2-基)氨基]-5-甲基-己氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(77mg，51％)。esi-ms m/z计算值664.2931，实验值665.35(m+1)
+
；保留时间：1.32分钟(lc方法a)。
[1803]
在氮气下向20ml小瓶中装入[二甲基氨基(三唑并[4,5-b]吡啶-3-基氧基)亚甲基]-二甲基铵(六氟化磷离子)(193mg，0.5076mmol)(hatu)、无水dmf(5ml)和diea(0.19ml，1.091mmol)。通过注射器滴加上述中间体于dmf(1ml)中的溶液。将混合物在室温下搅拌21小时。将混合物在减压下浓缩，然后在1m hcl、盐水与乙酸乙酯之间分配。将层分离，并且将水溶液用乙酸乙酯再萃取2次。将合并的有机物用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。将所得粗物质溶解于dcm/meoh中并通过硅胶快速色谱法(12g柱)使用乙酸乙酯/己烷的梯度(20分钟内0至100％)纯化。溶剂的蒸发得到呈白色固体(异构体的1:1混合物)的6-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(3-甲基丁基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-12-基]螺[3.3]庚烷-2-羧酸甲酯(27.7mg，20％)。esi-ms m/z计算值646.28253，实验值647.35(m+1)
+
；保留时间：2.0分钟；第二种异构体，保留时间2.02分钟(lc方法a)。
[1804]
步骤2：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-12-[6-(2-羟基丙烷-2-基)螺[3.3]庚烷-2-基]-11-(3-甲基丁基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮，更多极性异构体峰1(化合物4)，以及(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-12-[6-(2-羟基丙烷-2-基)螺[3.3]庚烷-2-基]-11-(3-甲基丁基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮，更少极性异构体峰2(化合物5)
[1805][1806]
在氮气下向4ml小瓶中装入6-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(3-甲基丁基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-12-基]螺[3.3]庚烷-2-羧酸甲酯(27mg，0.04174mmol)(异构体比率1:1)、无水thf(300μl)，并且将溶液在冰浴中冷却。滴加甲基溴化镁(3m的0.050ml，0.1500mmol)(乙醚中的3m溶液)。将反应混合物在冰浴中搅拌5分钟，然后将其在室温下搅拌4小时。将混合物在冰中冷却并通过添加氯化铵(5滴)和dmso(1ml)的饱和水溶液淬灭。将
溶液通过注射器过滤盘微过滤并通过反相制备型hplc(c
18
)使用乙腈/水的梯度(20分钟内0-60％然后5分钟内60-100％)和hcl作为改性剂纯化，在蒸发之后分离出两个分离的异构体：更多极性异构体峰1(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-12-[6-(2-羟基丙烷-2-基)螺[3.3]庚烷-2-基]-11-(3-甲基丁基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮(10mg，74％)。esi-ms m/z计算值646.3189，实验值647.35(m+1)
+
；保留时间：1.96分钟(lc方法a)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ13.19-11.69(宽m,1h),8.36(s,1h),7.88(s,1h),7.64(s,2h),7.24(d,j＝7.8hz,1h),7.12(d,j＝7.5hz,2h),6.36(s,1h),5.10(dd,j＝11.0,3.9hz,1h),4.34(t,j＝11.2hz,1h),3.98(s,1h),3.82(p,j＝8.6hz,1h),3.69-3.55(m,1h),2.90(t,j＝9.6hz,1h),2.82(t,j＝9.8hz,1h),2.32-2.25(m,1h),2.19-1.88(m,11h),1.80(t,j＝9.5hz,1h),1.68-1.53(m,1h),1.53-1.37(m,1h),1.18-0.88(m,8h),0.83-0.71(m,1h),0.68(d,j＝6.4hz,3h),0.60(d,j＝6.4hz,3h)；以及更少极性异构体峰2(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-12-[6-(2-羟基丙烷-2-基)螺[3.3]庚烷-2-基]-11-(3-甲基丁基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮(10.3mg,74％)。esi-ms m/z计算值646.3189，实验值647.35(m+1)
+
；保留时间：2.0分钟(lc方法a)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ13.45-11.43(宽m,1h),8.36(s,1h),7.88(s,1h),7.65(s,2h),7.32-7.19(m,1h),7.12(d,j＝7.7hz,2h),6.36(s,1h),5.09(dd,j＝10.8,3.8hz,1h),4.32(t,j＝11.2hz,1h),3.99(s,1h),3.82(p,j＝8.6hz,1h),3.59(d,j＝12.0hz,1h),2.92(t,j＝9.5hz,1h),2.80(t,j＝9.8hz,1h),2.32-2.26(m,1h),2.20-1.88(m,11h),1.85-1.74(m,1h),1.70-1.53(m,1h),1.53-1.39(m,1h),1.14-0.90(m,8h),0.86-0.73(m,1h),0.68(d,j＝6.3hz,3h),0.61(d,j＝6.3hz,3h)。
[1807]
实例5：化合物6的制备
[1808]
步骤1：碘-1-(2-甲氧基乙基)吡唑
[1809][1810]
将4-碘-1h-吡唑(2g，10.31mmol)与碳酸铯(5.1g，15.65mmol)在无水乙腈(15ml)中合并。添加1-溴-2-甲氧基-乙烷(1.15ml，12.24mmol)并且将反应混合物在室温下剧烈搅拌18小时。然后将反应混合物通过硅藻土过滤，用乙腈洗脱。将滤液浓缩，然后溶解于乙醚中并通过硅藻土再次过滤。将滤液再次浓缩，得到呈浅黄色油的4-碘-1-(2-甲氧基乙基)吡唑(2.2g，85％)esi-ms m/z计算值251.97595，实验值253.3(m+1)
+
；保留时间：0.41分钟(lc方法d)。1h nmr(400mhz,氯仿-d)δ7.53(s,1h),7.51(s,1h),4.29(t,j＝5.1hz,2h),3.71(t,j＝5.1hz,2h),3.33(s,3h)。
[1811]
步骤2：(2r)-2-[[1-(2-甲氧基乙基)吡唑-4-基]氨基]-5-甲基-己-1-醇
[1812][1813]
将4-碘-1-(2-甲氧基乙基)吡唑(大约150.3mg，0.5965mmol)与(2r)-2-氨基-5-甲基-己-1-醇(盐酸盐)(100mg，0.5964mmol)、cui(大约11.36mg，0.05965mmol)和naoh(大约95.43mg，2.386mmol)(用研钵和研杵研磨)在螺旋盖小瓶中合并，然后用氮气吹扫。添加dmso(0.3ml)和水(0.15ml)并将反应混合物在90℃下搅拌16小时。在冷却至室温之后，将反应混合物用甲醇过滤并稀释。将滤液通过旋转蒸发浓缩并且将所得残余物溶解于1:1dmso/甲醇中，再次过滤并通过反相hplc(1-50％ acn/水，hcl改性剂，15分钟运行)纯化，在干燥之后得到指定的(2r)-2-[[1-(2-甲氧基乙基)吡唑-4-基]氨基]-5-甲基-己-1-醇(盐酸盐)(115mg，66％)。esi-ms m/z计算值255.19467，实验值256.6(m+1)
+
；保留时间：0.32分钟；lc方法d。
[1814]
步骤3：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异戊基-12-[1-(2-甲氧基乙基)吡唑-4-基]-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(化合物6)
[1815][1816]
将(2r)-2-[[1-(2-甲氧基乙基)吡唑-4-基]氨基]-5-甲基-己-1-醇(盐酸盐)(115mg，0.3941mmol)与3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(大约126.7mg，0.3032mmol)在thf(0.75ml)中合并，并搅拌直到固体大部分溶解/变成悬浮液为止。添加叔丁醇钠(大约174.9mg，1.820mmol)并且反应短暂变得稍微温热。在没有外部加热的情况下继续搅拌15分钟。然后将反应混合物在1m hcl与乙酸乙酯之间分配。将层分离，并且将水溶液用乙酸乙酯再萃取4次。将合并的有机物用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。将所得粗物质溶解于1:1dmso/甲醇中，过滤并通过反相hplc(1-60acn/水，hcl改性剂，15分钟运行)纯化，得到snar产物。将产物溶解于dmf(8ml)中并添加nmm(大约122.7mg，133.4μl，1.213mmol)。将反应混合物冷却至0℃并添加cdmt(大约79.87mg，0.4549mmol)。在冰融化时使反应温热至室温并搅拌48小时。将反应混合物用几滴水淬灭，部分浓缩，用1:1dmso/甲醇稀释，过滤并通过反相hplc(1-70％ acn/水，hcl改性剂，30分钟运行)纯化，得到(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异戊基-12-[1-(2-甲氧基乙基)吡唑-4-基]-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(30mg，16％)。esi-ms m/z计算值618.26245，实验值619.5(m+1)
+
；保留时间：1.65分钟；lc方法a。
[1817]
实例6：化合物7的制备
[1818]
步骤1：(2r)-5-甲基-2-[(1-甲基吡唑-4-基)氨基]己-1-醇
[1819][1820]
将4-碘-1-甲基-吡唑(大约124.1mg，0.5965mmol)与(2r)-2-氨基-5-甲基-己-1-醇(盐酸盐)(100mg，0.5964mmol)、cui(大约11.36mg，0.05965mmol)和naoh(大约95.43mg，2.386mmol)(用研钵和研杵研磨)在螺旋盖小瓶中合并，然后用氮气吹扫。添加dmso(0.3ml)和水(0.15ml)并将反应混合物在90℃下搅拌16小时。在冷却至室温之后，将反应混合物用甲醇过滤并稀释。将滤液通过旋转蒸发浓缩并且将所得残余物溶解于1:1dmso/甲醇中，再次过滤并通过反相hplc(1-50％ acn/水，hcl改性剂，15分钟运行)纯化，在干燥之后得到指定的(2r)-5-甲基-2-[(1-甲基吡唑-4-基)氨基]己-1-醇(盐酸盐)(86mg，58％)。esi-ms m/z计算值211.16846，实验值212.6(m+1)
+
；保留时间：0.29分钟；lc方法d。
[1821]
步骤2：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异戊基-12-(1-甲基吡唑-4-基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(化合物7)
[1822][1823]
将(2r)-5-甲基-2-[(1-甲基吡唑-4-基)氨基]己-1-醇(盐酸盐)(86mg，0.3471mmol)与3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(大约111.6mg，0.2670mmol)在thf(0.75ml)中合并，并搅拌直到固体大部分溶解为止。添加叔丁醇钠(大约154.0mg，1.602mmol)并且反应短暂变得稍微温热。在没有外部加热的情况下继续搅拌15分钟。然后将反应混合物在1m hcl与乙酸乙酯之间分配。将层分离，并且将水溶液用乙酸乙酯再萃取4次。将合并的有机物用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。将所得粗物质溶解于1:1dmso/甲醇中，过滤并通过反相hplc(1-60acn/水，hcl改性剂，15分钟运行)纯化，得到snar产物。将产物溶解于dmf(8ml)中并添加nmm(大约162.0mg，176.1μl，1.602mmol)。将反应混合物冷却至0℃并添加cdmt(大约70.32mg，0.4005mmol)。在冰融化时使反应温热至室温并搅拌48小时。将反应混合物用几滴水淬灭，部分浓缩，用1:1dmso/甲醇稀释，过滤并通过反相hplc(1-70％ acn/水，hcl改性剂，30分钟运行)纯化，得到(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异戊基-12-(1-甲基吡唑-4-基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(29.0mg，19％)。esi-ms m/z计算值574.2362，实验值575.5(m+1)
+
；保留时间：1.61分钟；lc方法a。
[1824]
实例7：化合物8和化合物9的制备
[1825]
步骤1：2-(叔丁氧羰基氨基)-5,5-二甲基-己-2-烯酸甲酯
[1826][1827]
向2-(叔丁氧基羰基氨基)-2-二甲氧基磷酰基-乙酸甲酯(2.86g，9.6218mmol)和dbu(1.4252g，1.4ml，9.3617mmol)于dcm(20ml)中的搅拌的溶液中添加3,3-二甲基丁醛(997.50mg，1.25ml，8.7358mmol)。将反应混合物在室温下搅拌16小时。添加hcl水溶液(1n)(25ml)并将相分离。将水层用dcm(2
×
20ml)洗涤。将合并的有机层经硫酸镁干燥，过滤并在减压下浓缩。将粗残余物通过40g硅胶筒色谱法使用0-30％ etoac/庚烷的梯度纯化，得到结晶为白色固体的呈澄清油的2-(叔丁氧羰基氨基)-5,5-二甲基-己-2-烯酸甲酯(2.305g，97％)。esi-ms m/z计算值271.1784，实验值216.4(m-55)
+
；保留时间：1.91分钟lc方法x。1h nmr(400mhz,cdcl3)δ6.67(t,j＝7.6hz,1h),5.86(br.s.,1h),3.79(s,3h),2.12(d,j＝7.6hz,2h),1.47(s,9h),0.96(s,9h)。
[1828]
步骤2：(2r)-2-(叔丁氧羰基氨基)-5,5-二甲基-己酸甲酯
[1829][1830]
向(e)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-4,5,5-三甲基-己-2-烯酸甲酯(2g，7.0082mmol)于乙醇(27ml)和1,4-二噁烷(9ml)中的溶液中鼓入氮气5分钟。然后，在氮气下添加1,2-双[(2r,5r)-2,5-二乙基膦酰基]苯(1,5-环辛二烯)三氟甲磺酸铑(i)(51mg，0.0706mmol)，并将混合物置于超声波浴中5分钟。将反应混合物在50psi(3.5巴)的氢气压力和室温下氢化16小时。向反应混合物中添加硅胶并将其蒸发至干燥。将产物通过40g硅胶筒色谱法使用0-30％ etoac/庚烷的梯度纯化，得到(2r)-2-(叔丁氧羰基氨基)-5,5-二甲基-己酸甲酯(1.91g，100％)。esi-ms m/z计算值273.194，实验值218.4(m-55)
+
；保留时间：1.96分钟，lc方法x。1h nmr(400mhz,cdcl3)δ5.08-4.88(m,1h),4.36-4.21(m,1h),3.75(s,3h),1.85-1.74(m,1h),1.67-1.59(m,1h),1.45(s,9h),1.26-1.16(m,2h),0.87(s,9h)。
[1831]
步骤3：n-[(1r)-1-(羟甲基)-4,4-二甲基-戊基]氨基甲酸叔丁酯
[1832][1833]
向(2r)-2-(叔丁氧羰基氨基)-5,5-二甲基-己酸甲酯(1.9g，6.9503mmol)于thf(20ml)中的溶液中添加libh4(thf中的2m溶液)(2m的8.8ml，17.600mmol)。将反应混合物在室温下搅拌2.5小时。然后将反应混合物缓慢倒入0℃的饱和氯化铵水溶液(50ml)中(有大量气体释放，但没有放热)。将产物用etoac(3
×
50ml)萃取。将合并的有机层用盐水(50ml)洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并在减压下浓缩，得到呈澄清油的粗产物n-[(1r)-1-(羟甲基)-4,4-二甲基-戊基]氨基甲酸叔丁酯(1.725g，101％)。1h nmr.esi-ms m/z计算值245.1991，实验值190.2(m-55)
+
；保留时间：1.81分钟。1h nmr(400mhz,cdcl3)δ4.65-4.51(m,1h),
3.74-3.65(m,1h),3.62-3.51(m,2h),2.35(br.s.,1h),1.46(s,9h),1.42-1.17(m,4h),0.89(s,9h)。lc方法x。
[1834]
步骤4：(2r)-2-氨基-5,5-二甲基-己-1-醇
[1835][1836]
向n-[(1r)-1-(羟甲基)-4,4-二甲基-戊基]氨基甲酸叔丁酯(1.72g，7.0102mmol)于1,4-二噁烷(9ml)中的溶液中添加氯化氢(1,4-二噁烷中的4n)(4m的9ml，36.000mmol)。将反应混合物在室温下搅拌16小时。将混合物蒸发，得到呈白色固体的(2r)-2-氨基-5,5-二甲基-己-1-醇(盐酸盐)(1.19g，93％)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ7.81(br.s.,3h),5.26(t,j＝4.9hz,1h),3.58(dt,j＝11.5,4.0hz,1h),3.47-3.37(m,1h),2.98(br.s.,1h),1.53-1.41(m,2h),1.26-1.14(m,2h),0.87(s,9h)。esi-ms m/z计算值145.14667，实验值146.4(m+1)
+
；保留时间：1.05分钟；lc方法x。
[1837]
步骤5：3-[[4-[(2r)-2-氨基-5,5-二甲基-己氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸
[1838][1839]
向3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(2.71g，5.9649mmol)和(2r)-2-氨基-5,5-二甲基-己-1-醇(盐酸盐)(1.19g，6.5491mmol)于dmf(15ml)中的用水浴维持在15℃的溶液中添加叔丁醇钠(2.87g，29.864mmol)，并将混合物在室温下搅拌1小时。添加2-methf(50ml)，然后添加1n hcl水溶液(50ml)。将相分离，并将水相用2-methf(4
×
50ml)洗涤。将合并的有机层用15％盐水(2
×
50ml)洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并在减压下浓缩。将粗泡沫(4g，119％)在搅拌下在etoac(50ml)中研磨16小时。在搅拌16小时之后，将固体部分溶解。将溶剂蒸发至干燥，并且然后将残余物在1:1庚烷/etoac(50ml)中研磨1小时。将固体在布氏漏斗上过滤并用1:1庚烷/etoac(50ml)漂洗。将固体在真空中干燥，得到呈类白色固体的产物(3.3g，99％)。将产物通过120g c
18
筒反相色谱法使用10-100％ meoh/水(含0.1％ hcl)的梯度进一步纯化，在水(15ml)和mecn(10ml)中冷冻干燥之后得到呈淡粉色固体的3-[[4-[(2r)-2-氨基-5,5-二甲基-己氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(2.37g，70％)。esi-ms m/z计算值526.225，实验值527.2(m+1)
+
；保留时间：2.5分钟。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ14.11-12.43(m,2h),8.45(s,1h),8.40-8.07(m,5h),7.69(t,j＝7.8hz,1h),7.31-7.21(m,1h),7.13(d,j＝7.8hz,2h),6.31(br.s.,1h),4.43-4.35(m,1h),4.34-4.25(m,1h),3.53-3.42(m,1h),2.00(br.s.,6h),1.67-1.50(m,2h),1.37-1.25(m,1h),1.24-1.12(m,1h),0.86(s,9h)。lc方法y。
[1840]
步骤6：3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(2r)-2-[(6-甲氧羰基螺[3.3]庚烷-2-基)氨基]-5,5-二甲基-己氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸
[1841][1842]
在20ml小瓶中，在氮气下将3-[[4-[(2r)-2-氨基-5,5-二甲基-羟基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(298mg，0.4970mmol)与2-氧代螺[3.3]庚烷-6-羧酸甲酯(135mg，0.8027mmol)在无水dcm(1.5ml)中合并，并在室温下搅拌5分钟。添加三乙酰氧基硼氢化钠(347mg，1.637mmol)并将混合物在室温下搅拌4小时。将反应混合物在1m hcl、盐水与乙酸乙酯之间分配。将层分离，并且将水溶液用乙酸乙酯再萃取三次。将合并的有机物经硫酸钠干燥并浓缩。将残余物在乙醚中研磨，并且将所得固体过滤并干燥，得到呈白色固体的粗3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(2r)-2-[(6-甲氧羰基螺环[3.3]庚烷-2-基)氨基]-5,5-二甲基-己氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(243mg，68％)。将产物在不经任何进一步纯化的情况下用于下一步骤。esi-ms m/z计算值678.3087，实验值679.34(m+1)
+
；保留时间：1.38分钟。lc方法a。
[1843]
步骤7：2-[(11r)-11-(3,3-二甲基丁基)-6-(2,6-二甲基苯基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]螺[3.3]庚烷-6-羧酸甲酯
[1844][1845]
将3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(2r)-2-[(6-甲氧羰基螺环[3.3]庚烷-2-基)氨基]-5,5-二甲基-己氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(243mg，0.3397mmol)溶解于dmf(2.4ml)中。添加n-甲基吗啉(57μl,0.5185mmol)，并将溶液冷却至0℃，然后添加2-氯-4,6-二甲氧基-1,3,5-三嗪(78mg，0.4443mmol)。使反应混合物温热至室温，搅拌3小时并在4℃冰箱中储存过夜。然后将反应混合物用etoac(50ml)稀释并用hcl水溶液(1
×
50ml)洗涤。将水层用etoac(2
×
50ml)进一步萃取。将所有有机层合并，经硫酸钠干燥，过滤并在
减压下浓缩。将粗产物在用0-50％ etoac/己烷梯度洗脱40分钟的12克硅胶柱上通过色谱法纯化，得到呈白色固体获得的2-[(11r)-11-(3,3-二甲基丁基)-6-(2,6-二甲基苯基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]螺[3.3]庚烷-6-羧酸甲酯(183mg，82％)。esi-ms m/z计算值660.29816，实验值661.3(m+1)
+
；保留时间：2.11分钟；第二种非对映异构体的保留时间为2.13分钟。lc方法a。
[1846]
步骤8：(11r)-11-(3,3-二甲基丁基)-6-(2,6-二甲基苯基)-12-[6-(1-羟基-1-甲基-乙基)螺[3.3]庚烷-2-基]-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮，更少极性异构体(化合物8)，以及(11r)-11-(3,3-二甲基丁基)-6-(2,6-二甲基苯基)-12-[6-(1-羟基-1-甲基-乙基)螺[3.3]庚烷-2-基]-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮，更多极性异构体(化合物9)
[1847][1848]
将2-[(11r)-11-(3,3-二甲基丁基)-6-(2,6-二甲基苯基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]螺[3.3]庚烷-6-羧酸甲酯(187mg，0.2830mmol)溶解于thf(2.00ml)中。在0℃下在氮气下，缓慢添加于乙醚中的溴(甲基)镁(3m的340μl，1.020mmol)。将反应混合物在0℃下搅拌5分钟，使其温热至室温并且然后搅拌2小时。将反应混合物用甲醇(1ml)和dmso(3ml)稀释并通过uv触发的反相hplc纯化，用含有5mm hcl酸性改性剂的35-50％乙腈/水梯度洗脱30分钟。获得呈白色固体的更少极性异构体，(11r)-11-(3,3-二甲基丁基)-6-(2,6-二甲基苯基)-12-[6-(1-羟基-1-甲基-乙基)螺[3.3]庚烷-2-基]-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(63.3mg，68％)。esi-ms m/z计算值660.33453，实验值661.3(m+1)
+
；保留时间：2.99分钟(lc方法i)；获得呈白色固体的更多极性异构体，(11r)-11-(3,3-二甲基丁基)-6-(2,6-二甲基苯基)-12-[6-(1-羟基-1-甲基-乙基)螺[3.3]庚烷-2-基]-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(27.3mg，29％)。esi-ms m/z计算值660.33453，实验值661.3(m+1)
+
；保留时间：2.93分钟，lc方法i。
[1849]
实例8：化合物10的制备
[1850]
步骤1：(4-氟-2,6-二甲基苯基)硼酸
[1851][1852]
在-78℃下，向2-溴-5-氟-1,3-二甲基-苯(30g，147.75mmol)于thf(300.00ml)中的溶液中滴加n-buli(2.5m的74ml，185.00mmol)。将溶液在-78℃下搅拌2小时，然后滴加硼酸三甲酯(35.319g，38.6ml，339.89mmol)。将溶液在室温下搅拌过夜，然后用1m hcl(300ml)和水(200ml)淬灭。将该反应搅拌1小时，然后用乙醚(200ml)稀释并用水(200ml)洗涤。然后将有机层分离，经硫酸钠干燥并浓缩。然后然固体用己烷(2
×
100ml)研磨，得到呈白色固体的(4-氟-2,6-二甲基-苯基)硼酸(11.154g，38％)。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ8.18(s,1h),6.76(d,j＝10.4hz,2h),2.28(s,6h)。
[1853]
步骤2：n-叔丁氧羰基-n-[4-氯-6-(4-氟-2,6-二甲基-苯基)嘧啶-2-基]氨基甲酸叔丁酯
[1854][1855]
在室温下，向溶解于dme(87ml)和水(12ml)中的n-叔丁氧羰基-n-(4,6-二氯嘧啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯(12.43g，34.127mmol)的溶液中添加(4-氟-2,6-二甲基-苯基)硼酸(7.45g，44.352mmol)和碳酸铯(28.9g，88.700mmol)。将溶液搅拌10分钟，同时用氮气流鼓泡。然后pd(dppf)cl2(2.5g，3.4167mmol)添加到溶液中并加热至80℃2小时。将溶液冷却至室温，然后用水(100ml)稀释并用乙酸乙酯(2
×
100ml)萃取。将合并的有机层用盐水(200ml)洗涤并经硫酸钠干燥，然后在真空中浓缩。有机残余物通过硅胶色谱法纯化，用0-20％乙酸乙酯-己烷洗脱，得到n-叔丁氧羰基-n-[4-氯-6-(4-氟-2,6-二甲基-苯基)嘧啶-2-基]氨基甲酸叔丁酯(9.05g，59％)。esi-ms m/z计算值451.1674，实验值452.1(m+1)
+
；保留时间：4.11分钟，lc方法t。
[1856]
步骤3：4-氯-6-(4-氟-2,6-二甲基-苯基)嘧啶-2-胺
[1857][1858]
向n-叔丁氧羰基-n-[4-氯-6-(4-氟-2,6-二甲基-苯基)嘧啶-2-基]氨基甲酸叔丁酯(9.05g，20.026mmol)于dcm(100ml)中的溶液中添加tfa(29.600g，20ml，259.60mmol)并将反应在室温下搅拌2小时。将挥发物在真空下去除并且将残余物溶于碳酸氢钠(100ml)中并用乙酸乙酯(3
×
100ml)萃取并用盐水(100ml)洗涤。将有机层经硫酸钠干燥并浓缩，得到呈白色泡沫固体的4-氯-6-(4-氟-2,6-二甲基-苯基)嘧啶-2-胺(5.59g，111％)。esi-ms m/z计算值251.0626，实验值252.3(m+1)
+
；保留时间：2.29分钟。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ7.24(s,2h),6.98(d,j＝9.8hz,2h),6.65(s,1h),2.08(s,6h)。lc方法t。
[1859]
步骤4：3-[[4-氯-6-(4-氟-2,6-二甲基-苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸甲酯
[1860][1861]
在0℃下向4-氯-6-(4-氟-2,6-二甲基-苯基)嘧啶-2-胺(2.78g，11.045mmol)于thf(40ml)中的溶液中添加3-氯磺酰基苯甲酸甲酯(4.32g，18.410mmol)。然后将叔醇锂(6.1320g，40％w/w的21ml，26.071mmol)滴加到溶液中，保持温度低于5℃。使溶液温热至室温，同时搅拌过夜。将溶液用2m hcl(50ml)酸化并用乙酸乙酯(100ml)萃取。将有机层用盐水(200ml)洗涤并经硫酸钠干燥。然后将有机层在真空中浓缩并使用洗脱0-40％己烷-乙酸乙酯的硅胶色谱法纯化，得到3-[[4-氯-6-(4-氟-2,6-二甲基-苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸甲酯(792mg，16％)。esi-ms m/z计算值449.0612，实验值450.0(m+1)
+
；保留时间：3.49分钟，lc方法t。
[1862]
步骤5：3-[[4-氯-6-(4-氟-2,6-二甲基-苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸
[1863][1864]
向3-[[4-氯-6-(4-氟-2,6-二甲基-苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸甲酯(792mg，1.7605mmol)于thf(50ml)中的溶液中添加naoh的水溶液(1m的10ml，10.000mmol)并在室温下搅拌1小时。将溶液用乙醚(2
×
100ml)洗涤，然后使用1m hcl(50ml)酸化，并用乙酸乙酯(2
×
200ml)萃取，然后用盐水(200ml)洗涤。将有机层经硫酸钠干燥并在真空中浓缩，然后使用tfa作为缓冲液通过制备型hplc纯化。将纯级分合并，并用乙酸乙酯(3
×
150ml)萃取并且然后用盐水(150ml)洗涤。然后将有机层经硫酸钠干燥并在真空中浓缩，得到3-[[4-氯-6-(4-氟-2,6-二甲基-苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(424.4mg，54％)。esi-ms m/z计算值435.0456，实验值436.0(m+1)
+
；保留时间：2.41分钟，lc方法t.1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ13.44(s,1h),12.45(s,1h),8.44(t,j＝1.8hz,1h),8.18(dt,j＝7.8,1.4hz,1h),8.12(ddd,j＝7.9,2.0,1.2hz,1h),7.69(t,j＝7.8hz,1h),7.32(s,1h),6.98(d,j＝9.7hz,2h),1.86(s,6h)。
[1865]
步骤6：3-[[4-(4-氟-2,6-二甲基-苯基)-6-[(2r)-4-甲基-2-(螺[2.3]己-5-基氨基)戊氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸
[1866][1867]
将3-[[4-氯-6-(4-氟-2,6-二甲基-苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(76.2mg，0.1748mmol)、(2r)-4-甲基-2-(螺[2.3]己-5-基氨基)戊烷-1-醇(盐酸盐)(41.2mg，
0.1762mmol)和叔丁醇钠(85.2mg，0.8865mmol)在thf(1ml)中合并，并在室温下搅拌1.5小时。将反应混合物在乙酸乙酯与1m hcl溶液之间分配。将有机物分离，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并蒸发，得到3-[[4-(4-氟-2,6-二甲基-苯基)-6-[(2r)-4-甲基-2-(螺[2.3]己-5-基氨基)戊氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(102mg，92％)esi-ms m/z计算值596.2469，实验值597.4(m+1)
+
；保留时间：0.53分钟，lc方法d。
[1868]
步骤7：(11r)-6-(4-氟-2,6-二甲基-苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-12-螺[2.3]己-5-基-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(化合物10)
[1869][1870]
将3-[[4-(4-氟-2,6-二甲基-苯基)-6-[(2r)-4-甲基-2-(螺[2.3]己-5-基氨基)戊氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(102mg，0.1611mmol)、hatu(70.5mg，0.1854mmol)和三乙胺(90μl，0.6457mmol)在dmf(3ml)中合并，并在室温下搅拌4小时。将反应混合物过滤并通过利用于5mm hcl水溶液中的1-99％乙腈的梯度的反相hplc纯化，得到(11r)-6-(4-氟-2,6-二甲基-苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-12-螺[2.3]己-5-基-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(45.1mg，48％)esi-ms m/z计算值578.2363，实验值579.2(m+1)
+
；保留时间：2.1分钟，lc方法a。
[1871]
实例9：化合物11和化合物12的制备
[1872]
步骤1：2-[[(1r)-1-(羟甲基)-3-甲基-丁基]氨基]-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁酯
[1873][1874]
在氮气下将(2r)-2-氨基-4-甲基-戊烷-1-醇(63ml，522.0mmol)添加到2-氧代-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁酯(100g，417.9mmol)于无水dce(715ml)中的溶液中并在室温下搅拌15分钟。将三乙酰氧基硼氢化钠(266g，1.255mol)分成3份单独的部分并添加，同时保持温度低于27℃，然后在室温下搅拌18小时。将混合物冷却至4℃，然后非常缓慢地添加hcl(4m的420ml，1.680mol)，保持温度在4℃与12℃之间(大量延迟放热，气体释放，并在hcl添加开始时发泡)。添加碳酸钾(694g，5.022mol)于水(650ml)中的溶液，同时保持温度低于10℃，然后添加另一部分水(600ml)，随后添加mtbe(715ml)。将有机层分离，用碳酸钾(58g，419.7mmol)于水(100ml)中的溶液洗涤，经硫酸镁干燥，然后浓缩，得到2-[[(1r)-1-(羟甲基)-3-甲基-丁基]氨基]-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁酯(148.29g，100％)esi-ms m/z计算值340.27258，实验值341.3(m+1)
+
；保留时间：1.15分钟，lc方法a。
7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁酯(化合物12)
[1882][1883]
将2-[(11r)-6-氯-11-异丁基-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-12-基]-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁酯(53.2mg，0.08389mmol)、(2-异丙基苯基)硼酸(28.0mg，0.1707mmol)、peppsi-ipr(6.2mg，0.009111mmol)和2m碳酸钾水溶液(2m的210μl，0.4200mmol)在异丙醇(530μl)中合并并在100℃下加热16小时。将反应混合物过滤并通过lc/ms利用5mm hcl水溶液中的1-99％乙腈的梯度纯化，得到2-[(11r)-11-异丁基-6-(2-异丙基苯基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-12-基]-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁酯(13.4mg，22％)esi-ms m/z计算值717.356，实验值718.4(m+1)
+
；保留时间：0.84分钟，lc方法d。
[1884]
步骤5：(11r)-12-(7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)-11-异丁基-6-(2-异丙基苯基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-酮
[1885][1886]
将2-[(11r)-11-异丁基-6-(2-异丙基苯基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-12-基]-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁酯(11mg，0.01532mmol)溶解于二噁烷中的4m hcl(4m的0.2ml，0.8000mmol)中并在室温下搅拌。在20分钟之后，将反应蒸发，得到(11r)-12-(7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)-11-异丁基-6-(2-异丙基苯基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)(10mg，100％)esi-ms m/z计算值617.3036，实验值618.5(m+1)
+
；保留时间：0.54分钟，lc方法d。
[1887]
步骤6：(11r)-11-异丁基-6-(2-异丙基苯基)-12-(7-甲基-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1
(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-酮(化合物11)
[1888][1889]
将(11r)-12-(7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)-11-异丁基-6-(2-异丙基苯基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)(10mg，0.01528mmol)溶解于甲醛(200μl，7.260mmol):甲酸(200μl)中并在螺旋盖小瓶中在90℃下加热20小时。将反应用甲醇(0.6ml)稀释并通过lc/ms利用5mm hcl水溶液中的1-99％乙腈的梯度纯化，得到(11r)-11-异丁基-6-(2-异丙基苯基)-12-(7-甲基-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)(4.2mg，41％)esi-ms m/z计算值631.3192，实验值632.6(m+1)
+
；保留时间：1.36分钟，lc方法d。
[1890]
实例10：化合物13和化合物14的制备
[1891]
步骤1：2-[[(1r)-1-(羟甲基)-3-甲基-丁基]氨基]-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁酯
[1892][1893]
在氮气下将(2r)-2-氨基-4-甲基-戊烷-1-醇(4.0ml，31.30mmol)添加到2-氧代-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁酯(5.00g，20.89mmol)于无水dce(30ml)中的溶液中并在室温下搅拌30分钟。添加三乙酰氧基硼氢化钠(6.64g，31.33mmol)并将反应在室温下搅拌1小时45分钟，然后添加另一部分三乙酰氧基硼氢化钠(3.33g，15.71mmol)并将反应搅拌2小时。添加第三部分三乙酰氧基硼氢化钠(3.33g，15.71mmol)并将反应混合物搅拌2小时。添加hcl(1m的84ml，84.00mmol)并搅拌10分钟，然后添加碳酸钾(12.13g，87.77mmol)于水(20ml)中的溶液。将有机层分离，并且将水层用dcm(30ml)萃取。将有机层合并，并经硫酸镁干燥，然后浓缩，得到2-[[(1r)-1-(羟甲基)-3-甲基-丁基]氨基]-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁酯(8.79g，108％)esi-ms m/z计算值340.27258，实验值341.3(m+1)
+
；保留时间：1.19分钟；lc方法a。
[1894]
步骤2：3-[[4-[(2r)-2-[(7-叔丁氧基羰基-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)氨基]-4-甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸
戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(52g，68.57mmol)溶解于dmf(1l)中，首先用diea(48ml，275.6mmol)处理，并且然后立即用hatu(39g，102.6mmol)处理。将溶液在室温下搅拌13小时。将深橙色溶液在45-50℃下在减压下蒸发成橙色物质并用柠檬酸(1m的550ml，550.0mmol)处理，得到浅棕色悬浮液，将所述浅棕色悬浮液在室温下搅拌2小时。将固体通过过滤收集并将湿固体溶解于dcm中，用1m柠檬酸和盐水洗涤，并且将水相用dcm反萃取一次。将合并的有机相干燥(硫酸镁)，用木炭处理，经硅藻土过滤并蒸发，得到52.3g的深橙色泡沫。将粗产物的一半(26g)通过硅胶色谱法(330g，液体加载有dcm)用己烷至50％乙酸乙酯的线性梯度纯化，得到呈黄色泡沫的2-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁酯(18.86g，78％)。esi-ms m/z计算值703.34033，实验值704.0(m+1)
+
；保留时间：2.19分钟；lc方法a。
[1900]
步骤4：(11r)-12-(7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(化合物14)
[1901][1902]
向于meoh(300ml)和甲苯(150ml)中的2-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁酯(62g，88.08mmol)添加hcl(4m的70ml，280.0mmol)。将混合物在环境温度下搅拌4小时。在真空中去除溶剂。将半固体从methf(300ml)中蒸发两次，并且将固体在环境温度下在methf(300ml)中搅拌48小时。将沉淀使用m玻璃料收集并用methf洗涤。将固体风干4小时，然后在45℃下在真空中干燥24小时，得到(11r)-12-(7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)(58.24g，103％)。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ8.56(d,j＝25.7hz,2h),8.39(s,1h),7.91(d,j＝7.1hz,1h),7.67(d,j＝8.1hz,2h),7.26(t,j＝7.6hz,1h),7.12(d,j＝7.7hz,2h),6.39(s,1h),5.10(dd,j＝10.6,4.3hz,1h),4.36(t,j＝11.0hz,2h),4.20(s,1h),4.06(p,j＝8.9hz,2h),3.79-3.67(m,2h),3.01(d,j＝33.4hz,4h),2.83(q,j＝10.8hz,2h),2.11-1.81(m,12h),1.63(t,j＝12.6hz,1h),1.38-1.24(m,1h),1.12(d,j＝6.1hz,2h),0.74(d,j＝6.7hz,3h)。esi-ms m/z计算值
603.2879，实验值604.2(m+1)
+
；保留时间：1.79分钟；lc方法i。
[1903]
实例11：化合物15的制备
[1904]
步骤1：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-12-(7-甲基-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(化合物15)
[1905][1906]
将(11r)-12-(7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)(110mg，0.1718mmol)溶解于甲酸(1ml)中并与甲醛水溶液(1.2ml，43.56mmol)合并，并在螺旋盖小瓶中加热至90℃20小时。然后将反应混合物在减压下部分浓缩，用甲醇稀释，过滤然后通过反相hplc(1-70％ acn/水，hcl改性剂，15分钟)分两批纯化。将含有产物的级分合并并浓缩，以在干燥之后得到呈白色粉末的(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-12-(7-甲基-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)(39mg，34％)，esi-ms m/z计算值617.3036，实验值618.6(m+1)
+
；保留时间：1.24分钟；lc方法a。1hnmr(400mhz,dmso)δ9.68(s,1h),8.39(d,j＝2.5hz,1h),7.91(d,j＝6.9hz,1h),7.68(s,2h),7.26(t,j＝7.5hz,1h),7.13(d,j＝7.7hz,2h),6.40(s,1h),5.10(d,j＝10.5hz,1h),4.35(td,j＝10.9,7.1hz,1h),4.14-4.00(m,1h),3.73(s,1h),3.39-3.25(m,2h),2.89(tt,j＝24.2,12.6hz,3h),2.79-2.70(m,3h),2.06(ddd,j＝35.5,23.2,9.2hz,9h),1.84-1.69(m,2h),1.61(t,j＝11.9hz,1h),1.27(dd,j＝17.4,6.5hz,2h),1.19-1.08(m,1h),0.91-0.82(m,1h),0.74(dd,j＝11.6,6.6hz,3h),0.20(t,j＝5.7hz,3h)。
[1907]
实例12：化合物16的制备
[1908]
步骤1：(11r)-12-(7-乙酰基-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(化合物16)
[1909][1910]
将(11r)-12-(7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,
7,14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)(100mg，0.1562mmol)与乙酸酐(40μl，0.4239mmol)和三乙胺(110μl，0.7892mmol)在二氯甲烷(1ml)中合并。将反应混合物在室温下搅拌15分钟，然后用乙酸乙酯稀释并用1mhcl水溶液洗涤。将水层用乙酸乙酯再萃取两次，并且将合并的有机物用盐水洗涤，然后经硫酸钠干燥并浓缩。将所得粗物质通过硅胶色谱法使用0-10％甲醇/二氯甲烷的梯度纯化(洗脱约5％甲醇)。将含有产物的级分合并并浓缩，得到呈白色粉末的(11r)-12-(7-乙酰基-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(32mg，32％)1h nmr(400mhz,dmso)δ13.28-12.53(m,1h),8.38(s,1h),7.90(s,1h),7.68(s,2h),7.25(d,j＝8.1hz,1h),7.12(d,j＝7.5hz,2h),6.38(s,1h),5.23-4.99(m,1h),4.37(t,j＝10.9hz,1h),4.13-4.00(m,1h),3.72(s,1h),3.40(d,j＝20.7hz,2h),2.82(dt,j＝19.1,9.3hz,2h),2.15-2.03(m,3h),2.02-1.87(m,7h),1.69(dd,j＝11.7,5.5hz,2h),1.60(t,j＝8.2hz,3h),1.33-1.22(m,2h),1.17-1.09(m,1h),0.91-0.77(m,2h),0.73(d,j＝6.6hz,3h),0.20(d,j＝6.0hz,3h)。esi-ms m/z计算值645.29846，实验值646.5(m+1)
+
；保留时间：1.66分钟；lc方法a。
[1911]
实例13：化合物17的制备
[1912]
步骤1：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-12-(7-异丙基-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(化合物17)
[1913][1914]
将(11r)-12-(7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)(100mg，0.1562mmol)与丙酮(500μl，6.810mmol)在二氯乙烷(500μl)中合并，并在室温下搅拌。在5分钟后之后，添加三乙酰氧基硼氢化钠(150mg，0.7077mmol)并将反应温度升至50℃。在90分钟之后，添加另外部分三乙酰氧基硼氢化钠(150mg，0.7077mmol)并在50℃下继续搅拌另外90分钟。然后将反应混合物浓缩，用1.5ml 1:1dmso/甲醇和0.2ml乙酸稀释，过滤，然后通过反相hplc(1-99％ acn/水，hcl改性剂，15分钟运行)纯化，得到呈白色固体的(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-12-(7-异丙基-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)(38mg，35％)esi-ms m/z计算值645.3349，实验值646.6(m+1)
+
；保留时间：1.32分钟(lc方法a)。1hnmr(400mhz,dmso)δ9.86(d,j＝28.1hz,1h),8.39(d,j＝6.3hz,1h),7.98-7.83(m,1h),7.68(dd,j＝7.5,4.7hz,2h),7.26(t,j＝7.6hz,1h),7.13(d,j＝7.5hz,2h),6.40(s,1h),5.10(dt,j＝10.1,3.8hz,1h),4.37(t,j＝11.0hz,1h),4.09(h,j＝9.2,8.3hz,1h),3.71(dd,j＝7.4,3.5hz,1h),3.41(d,j＝5.1hz,1h),3.37-3.21(m,3h),2.96-2.70(m,4h),2.24-2.05(m,
5h),2.04-1.85(m,7h),1.63(t,j＝12.3hz,1h),1.28(d,j＝6.4hz,7h),1.21-1.06(m,1h),0.74(t,j＝6.3hz,3h),0.20(d,j＝6.2hz,3h)。
[1915]
实例14：化合物18的制备
[1916]
步骤1：7-(2,2,2-三氟乙基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-酮
[1917][1918]
将2-氧代-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁酯(250mg，1.045mmol)在二氯甲烷(2.5ml)中与hcl(4m的2.5ml，10.00mmol)合并，并在室温下搅拌30分钟。然后将反应混合物浓缩，得到浅黄色无定形固体。将该物质在乙醚中研磨，然后通过过滤收集呈类白色固体，7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-酮(盐酸盐)(180mg，98％)esi-ms m/z计算值139.09972，实验值140.0(m+1)
+
；保留时间：0.09分钟(lc方法d)。
[1919]
将产物用无水丙酮(4ml)、2,2,2-三氟乙基三氟甲磺酸酯(188μl,1.305mmol)和三乙胺(750μl，5.381mmol)溶解于螺旋盖小瓶中并加热至55℃5小时。然后将反应混合物冷却至室温并浓缩。将所得残余物溶解于15ml二氯甲烷中并用15ml碳酸氢钠水溶液洗涤。将水层用另外的2
×
15ml二氯甲烷萃取，并且将合并的有机物用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到红色油7-(2,2,2-三氟乙基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-酮(215mg，93％)，其无需进一步纯化即可用于下一步骤。esi-ms m/z计算值221.10275，实验值222.1(m+1)
+
；保留时间：0.21分钟(lc方法d)。
[1920]
步骤2：(11r)6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-12-[7-(2,2,2-三氟乙基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(化合物18)
[1921][1922]
将3-[[4-[(2r)-2-氨基-4-甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(50mg，0.09345mmol)和7-(2,2,2-三氟乙基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-酮(大约41.35mg，0.1869mmol)在dcm(0.5ml)中合并，并添加三乙酰氧基硼氢化钠(大约39.61mg，0.1869mmol)。在一小时之后，添加另外部分三乙酰氧基硼氢化钠(大约39.61mg，0.1869mmol)，然后添加另外部分7-(2,2,2-三氟乙基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-酮(大约41.35mg，0.1869mmol)。在另外的五小时之后，将反应混合物倒入含有20ml 0.5m hcl和20ml乙酸乙酯的分液漏斗中。将层分离，并且将水溶液用15ml乙酸乙酯再萃取三次。向水层中添加20ml盐水并将其用15ml乙酸乙酯进一步萃取10次。将合并的有机物经硫酸钠干燥并浓缩。将所得粗与hatu(大约53.31mg，0.1402mmol)在dmf(3.5ml)中合并，并且添加dipea(大约72.47mg，97.67μl，0.5607mmol)。在室温下搅拌两小时之后，将反应混合物过滤并通
过反相hplc(1-70％ acn，hcl改性剂，15分钟)分两批纯化，得到对应的(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-12-[7-(2,2,2-三氟乙基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)(12mg，17％)。esi-ms m/z计算值685.29095，实验值686.5(m+1)
+
；保留时间：1.5分钟；lc方法a。
[1923]
实例15：化合物19的制备
[1924]
步骤1：2-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸甲酯(化合物19)
[1925][1926]
在氮气下将氯甲酸甲酯(0.25m的224ml，56.00mmol)(dcm中的0.25m)添加到(11r)-12-(7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)(37.3g，56.51mmol)和三乙胺(26.0ml，186.5mmol)于dcm(1000ml)中的溶液中，同时维持温度在-18℃与-10℃之间，并将混合物在-10℃下搅拌35分钟。添加柠檬酸(43.5g，226.4mmol)于水(200ml)中的溶液，搅拌45分钟，然后将有机层分离，经硫酸镁干燥并浓缩。将产物通过运行两个连续的二氧化硅柱，使用于dcm中的0％至3％ meoh的梯度洗脱剂纯化，获得2-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸甲酯(26.52g，71％)。esi-ms m/z计算值661.2934，实验值662.2(m+1)
+
；保留时间：1.92分钟；lc方法a。1h nmr(499mhz，二甲亚砜-d6)δ13.57-11.47(bs,1h),8.38(s,1h),7.90(d,j＝7.2hz,1h),7.77-7.55(m,2h),7.25(t,j＝7.5hz,1h),7.12(d,j＝7.0hz,2h),6.37(s,1h),5.09(dd,j＝10.7,4.3hz,1h),4.36(t,j＝11.1hz,1h),4.05(p,j＝8.9hz,1h),3.72(td,j＝11.0,10.5,5.4hz,1h),3.58(s,3h),3.36(t,j＝5.5hz,2h),3.29(t,j＝5.6hz,2h),2.80(dt,j＝16.2,9.7hz,2h),2.09-1.93(m,8h),1.70-1.56(m,5h),1.38-1.24(m,1h),1.20-1.06(m,1h),0.73(d,j＝6.6hz,3h),0.20(d,j＝6.3hz,3h)。
[1927]
实例16：化合物20的制备
[1928]
步骤1：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-12-[7-(3,3,3-三氟丙基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(化合物20)
[1929][1930]
将(11r)-12-(7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)(20mg，0.03124mmol)与3,3,3-三氟丙醛(7mg，0.06247mmol)在dcm(0.5ml)中合并，并添加三乙酰氧基硼氢化钠(26mg，0.1227mmol)。将反应在室温下搅拌1小时，然后部分浓缩，用1:1dmso和甲醇稀释，过滤并通过反相hplc(1-99％ acn/水，hcl改性剂)纯化，得到(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-12-[7-(3,3,3-三氟丙基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)。esi-ms m/z计算值699.30664，实验值700.6(m+1)
+
；保留时间：1.36分钟；lc方法a。
[1931]
实例17：化合物21的制备
[1932]
步骤1：2-[(11r)-6-(2,6-二异丙基苯基)-11-异丁基-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸异丙酯(化合物21)
[1933][1934]
将(11r)-12-(7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)(52.5mg，0.08200mmol)、氯甲酸异丙酯(2m的85μl，0.1700mmol)和三乙胺(48μl，0.3444mmol)在dmf(1ml)中合并，并在室温下搅拌15分钟。将反应混合物过滤并通过lc/ms利用1-99％乙腈/5mm hcl水溶液的梯度纯化，得到2-[(11r)-6-(2,6-二异丙基苯基)-11-异丁基-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸异丙酯(32.1mg，57％)esi-ms m/z计算值689.3247，实验值690.3(m+1)
+
；保留时间：2.11分钟(lc方法a)。
[1935]
实例18：化合物22的制备
[1936]
步骤1：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-12-[7-(2-甲氧基乙基)-7-氮杂
螺[3.5]壬烷-2-基]-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(化合物22)
[1937][1938]
将(11r)-12-(7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)(25mg，0.03905mmol)与三乙胺(35μl,0.2511mmol)在螺旋盖小瓶中的乙腈(0.5ml)中合并，并添加1-溴-2-甲氧基-乙烷(4.5μl,0.04788mmol)。将反应混合物加热至55℃20小时。将反应混合物冷却至室温，用甲醇稀释，过滤然后通过反相hplc(15-75acn/水，hcl改性剂，15分钟运行)纯化。主要级分之一与起始材料重叠并通过反相hplc(1-50％ acn/水，hcl改性剂)再纯化。将来自两次运行的纯级分合并并干燥，得到(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-12-[7-(2-甲氧基乙基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基]-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)(8.3mg，30％)；esi-ms m/z计算值661.3298，实验值662.7(m+1)
+
；保留时间：1.38分钟；lc方法a。
[1939]
实例19：化合物23的制备
[1940]
步骤1：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-12-[7-(3-甲氧基丙基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基]-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(化合物23)
[1941][1942]
将(11r)-12-(7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)(40mg，0.06248mmol)与3-甲氧基丙醛(33mg，0.3746mmol)在dcm(0.3ml)中合并，并在室温下搅拌15分钟。然后，添加三乙酰氧基硼氢化钠(100mg，
0.4718mmol)并将反应混合物再搅拌15分钟。然后将反应混合物用几滴1m hcl淬灭，用甲醇稍微稀释并搅拌5分钟。将反应部分浓缩，用1:1甲醇/dmso稀释，过滤并通过反相hplc 1-70％ acn/水、hcl改性剂纯化，得到(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-12-[7-(3-甲氧基丙基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基]-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)(29.4mg，65％).1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ13.08(s,1h),9.64(s,1h),8.39(s,1h),7.91(s,1h),7.68(s,2h),7.26(t,j＝7.6hz,1h),7.12(d,j＝7.6hz,2h),6.39(s,1h),5.10(d,j＝10.4hz,1h),4.35(td,j＝11.2,6.0hz,1h),4.18-4.03(m,1h),3.73(s,1h),3.42(s,1h),3.41(s,3h),3.25(s,3h),3.07(s,2h),2.97-2.73(m,4h),2.23-1.71(m,13h),1.63(q,j＝11.4,10.9hz,1h),1.29(s,1h),1.14(dd,j＝15.1,9.1hz,1h),0.74(dd,j＝10.4,6.6hz,3h),0.20(t,j＝5.3hz,3h)。esi-ms m/z计算值675.34546，实验值676.7(m+1)
+
；保留时间：1.32分钟；lc方法a。
[1943]
实例20：化合物24的制备
[1944]
步骤1：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-12-[7-(氧杂环丁烷-3-基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基]-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(化合物24)
[1945][1946]
将(11r)-12-(7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)(20mg，0.03124mmol)与氧杂环丁烷-3-酮(10mg，0.1388mmol)在dcm(0.3ml)中合并，并添加三乙酰氧基硼氢化钠(大约39.72mg，0.1874mmol)。将反应在室温下搅拌一小时，然后部分浓缩，溶解于1:1甲醇/dmso中，过滤并通过反相hplc(1-70％acn/水hcl改性剂，15分钟运行)纯化，得到指定的(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-12-[7-(氧杂环丁烷-3-基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基]-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)(5.9mg，27％)。esi-ms m/z计算值659.31415，实验值660.7(m+1)
+
；保留时间：1.27分钟；lc方法a。
[1947]
实例21：化合物25的制备
[1948]
步骤1：(11r)-12-{7-[2-(苄氧基)乙酰基]-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基}-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2-甲基丙基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮
[1949][1950]
将(11r)-12-(7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)(25mg，0.03905mmol)、2-苄氧基乙酸(大约6.489mg，5.584μl，0.03905mmol)、hatu(大约14.85mg，0.03905mmol)和三乙胺(大约15.81mg，21.78μl，0.1562mmol)在dmf(1ml)中合并，并在室温下搅拌15分钟。将反应混合物过滤并通过lc/ms利用1-99％乙腈/5mm hcl水溶液的梯度纯化，得到(11r)-12-{7-[2-(苄氧基)乙酰基]-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基}-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2-甲基丙基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮(16.4mg，56％)。esi-ms m/z计算值751.34033，实验值752.3(m+1)
+
；保留时间：2.01分钟；lc方法a。
[1951]
步骤2：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-12-[7-(2-羟基乙酰基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基]-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(化合物25)
[1952][1953]
在氢气气球下将(11r)-12-[7-(2-苄氧基乙酰基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基]-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(16.4mg，0.02181mmol)与钯/炭(5％w/w的10mg，0.004698mmol)在甲醇(2ml)中合并。将反应搅拌1小时，过滤并通过lc/ms利用5mm hcl水溶液中的1-99％乙腈的梯度纯化，得到(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-12-[7-(2-羟基乙酰基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基]-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(9.1mg，63％)esi-ms m/z计算值661.2934，实验值662.3(m+1)
+
；保留时间：1.63分钟(lc方法a)。
[1954]
实例22：化合物26的制备
[1955]
步骤1：2-[(11r)-6-(2,6-二异丙基苯基)-11-异丁基-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2
λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]-n,n-二甲基-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酰胺(化合物26)
[1956][1957]
将(11r)-12-(7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)(20mg，0.03124mmol)与n,n-二甲基氨基甲酰氯(12μl，0.1308mmol)和三乙胺(40μl，0.2870mmol)在dcm(0.3ml)中合并，并在室温下搅拌15分钟。在此之后，将反应混合物用几滴1m hcl淬灭并部分浓缩。将所得残余物溶解于1:1甲醇/dmso中，过滤并通过反相hplc(1-99acn/水，hcl改性剂，15分钟运行)纯化，得到2-[(11r)-6-(2,6-二异丙基苯基)-11-异丁基-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]-n,n-二甲基-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酰胺(14mg，66％)esi-ms m/z计算值674.325，实验值675.7(m+1)
+
；保留时间：1.81分钟；lc方法a。
[1958]
实例23：化合物27的制备
[1959]
步骤1：3-[[4-[(2r)-2-(环丁基氨基)-4-甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸
[1960][1961]
向环丁酮(大约7.030mg，0.1003mmol)中添加3-[[4-[(2r)-2-氨基-4-甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(50mg，0.1003mmol)于nmp(0.2ml)和二氯甲烷(0.4ml)中的溶液。在室温下搅拌10分钟之后，添加三乙酰氧基硼氢化钠(大约106.3mg，0.5015mmol)。在室温下搅拌30分钟之后，将反应混合物过滤并通过uv触发的反相hplc纯化：样品使用反相hplc方法使用由phenomenex销售的luna c
18
(2)柱(50
×
21.2mm，5μm粒径)(pn：00b-4252-p0-ax)和15.0分钟内从10-99％流动相b运行的双梯度纯化。流动相a＝水(5mm酸性改性剂)。流动相b＝乙腈。流速＝35毫升/分钟，进样体积＝950μl，并且柱温＝25℃。254nm处的uv迹线用于收集级分。获得3-[[4-[(2r)-2-(环丁基氨基)-4-甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸。
[1962]
步骤2：(11r)-12-环丁基-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2l 6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(化合物27)
[1963][1964]
将3-[[4-[(2r)-2-(环丁基氨基)-4-甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸溶解于dmf中。添加hatu。在室温下搅拌5分钟之后，添加三乙胺。在搅拌5分钟之后，将产物通过uv触发的反相hplc分离：gilson：样品使用反相hplc方法使用由phenomenex销售的luna c
18
(2)柱(50
×
21.2mm，5μm粒径)(pn：00b-4252-p0-ax)和15.0分钟内从10-99％流动相b运行的双梯度纯化。流动相a＝水(5mm酸性改性剂)。流动相b＝乙腈。流速＝35毫升/分钟，进样体积＝950μl，并且柱温＝25℃。254nm处的uv迹线用于收集级分。获得(11r)-12-环丁基-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮。esi-ms m/z计算值534.2301，实验值535.2(m+1)
+
；保留时间：1.91分钟；lc方法a。
[1965]
实例24：化合物28的制备
[1966]
步骤1：3-[[4-[(2r)-2-[(3,3-二甲基环丁基)氨基]-4-甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)
[1967][1968]
将3-[[4-[(2r)-2-氨基-4-甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(40mg，0.07476mmol)和3,3-二甲基环丁酮(大约22.01mg，0.2243mmol)与乙酸(大约35.92mg，34.02μl，0.5981mmol)在dce(0.4ml)中合并，并在室温下搅拌20分钟，此时添加氰基硼氢化钠(大约18.79mg，0.2990mmol)。将反应在室温下搅拌2小时，并且添加另外部分3,3-二甲基环丁酮(大约22.01mg，0.2243mmol)，然后添加氰基硼氢化钠(大约18.79mg，0.2990mmol)，并将反应再搅拌1-6小时。此时，将反应用2滴1m hcl淬灭，浓缩，然后溶解于1:1dmso/甲醇中，过滤并通过反相hplc(1-70％ acn，hcl改性剂)纯化，得到对应的3-[[4-[(2r)-2-[(3,3-二甲基环丁基)氨基]-4-甲基-戊氧基]-6-(2,6-二
甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(12mg，28％)。esi-ms m/z计算值580.2719，实验值581.5(m+1)
+
；保留时间：0.5分钟；lc方法d。
[1969]
步骤2：(11r)-12-(3,3-二甲基环丁基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(化合物28)
[1970][1971]
将3-[[4-[(2r)-2-[(3,3-二甲基环丁基)氨基]-4-甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(11mg，0.01894mmol)与hatu(大约9.361mg，0.02462mmol)在dmf(1ml)中合并，并添加dipea(大约12.24mg，16.50μl，0.09470mmol)。将反应在室温下搅拌1-2小时，然后过滤并通过反相hplc(1-99％ acn/水，hcl改性剂)纯化，在干燥之后得到(11r)-12-(3,3-二甲基环丁基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(6.4mg，60％)产物。esi-ms m/z计算值562.26135，实验值563.5(m+1)
+
；保留时间：2.11分钟；lc方法a。
[1972]
实例25：化合物29的制备
[1973]
步骤1：3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(2r)-4-甲基-2-(2-氧杂螺[3.3]庚烷-6-基氨基)戊氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸
[1974][1975]
将3-[[4-[(2r)-2-氨基-4-甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(50mg，0.09345mmol)和2-氧杂螺[3.3]庚烷-6-酮(大约31.44mg，0.2804mmol)化合物在dce(0.4ml)中与乙酸(大约33.67mg，31.88μl，0.5607mmol)合并，并在室温下搅拌。在30分钟之后，添加氰基硼氢化钠(大约23.49mg，0.3738mmol)和4更多当量的酮，并且在室温下继续搅拌4小时。添加另外4当量的两种试剂，并将反应搅拌4小时。此时，将反应混合物用1滴1m hcl淬灭，浓缩，然后用dmso/甲醇(1:1)稀释并通过反相hplc(1-99％ acn/水(无改性剂))纯化，得到3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(2r)-4-甲基-2-(2-氧
杂螺[3.3]庚烷-6-基氨基)戊氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(13.1mg，24％)产物。esi-ms m/z计算值594.2512，实验值595.5(m+1)
+
；保留时间：0.43分钟；lc方法d。
[1976]
步骤2：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-12-(2-氧杂螺[3.3]庚烷-6-基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(化合物29)
[1977][1978]
将3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(2r)-4-甲基-2-(2-氧杂螺[3.3]庚烷-6-基氨基)戊氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(15mg，0.02522mmol)与hatu(大约11.51mg，0.03026mmol)在dmf(1ml)中合并，并添加dipea(大约16.30mg，21.97μl，0.1261mmol)。将反应在室温下搅拌30分钟，然后过滤并通过反相hplc(1-99％ acn/水，无改性剂，15分钟运行)纯化。将化合物通过硅胶柱进一步纯化，用50-100％乙酸乙酯/己烷洗脱，得到(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-12-(2-氧杂螺[3.3]庚烷-6-基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮。esi-ms m/z计算值576.24066，实验值577.5(m+1)
+
；保留时间：1.64分钟；lc方法a。
[1979]
实例26：化合物30的制备
[1980]
步骤1：3-[[4-[(2r)-2-(环戊基氨基)-4-甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸
[1981][1982]
将3-[[4-[(2r)-2-氨基-4-甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(50mg，0.09345mmol)和环戊酮(大约31.44mg，33.06μl，0.3738mmol)化合物在dce(0.4ml)中与乙酸(大约33.67mg，31.88μl，0.5607mmol)合并，并在室温下搅拌。在30分钟之后，添加氰基硼氢化钠(大约23.49mg，0.3738mmol)，并且在室温下继续搅拌1小时。添加另外4当量的酮并且将反应搅拌1小时。此时，将反应混合物用1滴1m hcl淬灭，浓缩，然后用dmso/甲醇(1:1)稀释并通过反相hplc(1-70％ acn/水hcl改性剂[除非另有说明])纯化，得到3-[[4-[(2r)-2-(环戊基氨基)-4-甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧
啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(38.6mg，73％)产物。esi-ms m/z计算值566.2563，实验值567.5(m+1)
+
；保留时间：0.47分钟；lc方法d。
[1983]
步骤2：(11r)-12-环戊基-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(化合物30)
[1984][1985]
将3-[[4-[(2r)-2-(环戊基氨基)-4-甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(10mg，0.01765mmol)与hatu(25mg，0.06575mmol)在dmso(1ml)中合并，并添加dipea(30μl，0.1722mmol)。将反应在室温下搅拌18小时，然后过滤并通过反相hplc(带有hcl改性剂的1-99％ acn，15分钟运行)纯化，得到对应的(11r)-12-环戊基-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮。esi-ms m/z计算值548.2457，实验值549.5(m+1)
+
；保留时间：1.98分钟；lc方法a。
[1986]
实例27：化合物31的制备
[1987]
步骤1：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-12-(7-氧杂螺[3.5]壬烷-2-基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(化合物31)
[1988][1989]
将3-[[4-[(2r)-2-氨基-4-甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(50mg，0.09345mmol)与7-氧杂螺[3.5]壬烷-2-酮(大约26.20mg，0.1869mmol)在二氯甲烷中合并。添加三乙酰氧基硼氢化钠(大约59.43mg，0.2804mmol)并将反应在室温下搅拌一小时，此时，如果反应没有完全转化为还原胺化产物，则添加另外部分三乙酰氧基硼氢化钠(大约59.43mg，0.2804mmol)，然后在室温下再搅拌一小时。然后将反应混合物添加到含有50ml 0.5m hcl和50ml乙酸乙酯的分液漏斗中。将层分离，并且将水溶液用30ml乙酸乙酯再萃取3次。将合并的有机物用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。
[1990]
将粗产物与hatu(大约56.84mg，0.1495mmol)在dmf中合并，并添加dipea(大约60.38mg，81.37μl，0.4672mmol)。在室温下搅拌2小时之后，将反应混合物用75ml乙酸乙酯
和100ml 0.5m hcl稀释。将层分离，并且将水溶液用另外的50ml乙酸乙酯萃取。将合并的有机物用25ml水洗涤4次，然后用盐水洗涤，然后经硫酸钠干燥并浓缩。将所得粗物质溶解于1:1dmso/甲醇中，过滤并通过反相hplc(1-99％ acn/水，hcl改性剂，15分钟运行)纯化，在干燥之后得到呈白色粉末的(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-12-(7-氧杂螺[3.5]壬烷-2-基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(16mg，28％)。esi-ms m/z计算值604.2719，实验值605.5(m+1)
+
；保留时间：1.81分钟；lc方法a。1h nmr(400mhz,dmso)δ13.15(bs,1h),8.38(s,1h),7.89(s,1h),7.67(s,2h),7.25(s,1h),7.12(s,2h),6.38(s,1h),5.08(d,j＝10.7hz,1h),4.37(s,1h),4.04(t,j＝8.8hz,1h),3.72(s,1h),13.43-12.85(m,1h),3.55(t,j＝5.2hz,2h),3.48(t,j＝5.2hz,2h),3.31-3.30(m,2h),2.91-2.72(m,2h),2.22-1.88(m,7h),1.76-1.57(m,4h),1.30(s,1h),1.13(t,j＝11.9hz,1h),0.74(d,j＝6.6hz,3h),0.20(s,3h)。
[1991]
实例28：化合物32的制备
[1992]
步骤1：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-12-螺[3.3]庚烷-2-基-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(化合物32)
[1993][1994]
将3-[[4-[(2r)-2-氨基-4-甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(80mg，0.1495mmol)与螺[3.3]庚烷-2-酮(大约32.94mg，0.2990mmol)在二氯甲烷中合并。添加三乙酰氧基硼氢化钠(大约63.37mg，0.2990mmol)并将反应在室温下搅拌一小时，此时，如果反应没有完全转化为还原胺化产物，则添加另外部分三乙酰氧基硼氢化钠(大约63.37mg，0.2990mmol)，然后在室温下再搅拌一小时。然后将反应混合物添加到含有50ml 0.5m hcl和50ml乙酸乙酯的分液漏斗中。将层分离，并且将水溶液用30ml乙酸乙酯再萃取3次。将合并的有机物用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。
[1995]
将粗产物与hatu(大约113.7mg，0.2990mmol)在dmf中合并，并添加dipea(大约96.61mg，130.2μl，0.7475mmol)。在室温下搅拌2小时之后，将反应混合物用75ml乙酸乙酯和100ml 0.5m hcl稀释。将层分离，并且将水溶液用另外的50ml乙酸乙酯萃取。将合并的有机物用25ml水洗涤4次，然后用盐水洗涤，然后经硫酸钠干燥并浓缩。将所得粗物质溶解于1:1dmso/甲醇中，过滤并通过反相hplc(1-99％ acn/水，hcl改性剂，15分钟运行)纯化，在干燥之后得到呈白色粉末的(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-12-螺[3.3]庚烷-2-基-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(39mg，44％)。esi-ms m/z计算值574.26135，实验值575.5(m+1)
+
；保留时间：2.15分钟；lc方法a。1h nmr(400mhz,dmso)δ13.06(s,1h),8.38(s,1h),7.90(s,1h),7.67(s,2h),7.26(t,j＝7.8hz,1h),7.12(d,j＝7.9hz,2h),6.38(s,1h),5.10(dd,
j＝11.3,4.3hz,1h),4.34(t,j＝10.9hz,1h),3.84(p,j＝9.5hz,1h),3.70(d,j＝11.6hz,1h),2.93(t,j＝9.8hz,2h),2.23(q,j＝7.9hz,2h),2.16-1.89(m,10h),1.81(p,j＝7.9hz,2h),1.63(t,j＝12.0hz,1h),1.29(s,1h),1.14(dd,j＝14.0,10.0hz,1h),0.74(d,j＝6.7hz,3h),0.21(d,j＝6.2hz,3h)。
[1996]
实例29：化合物33和化合物34的制备
[1997]
步骤1：2-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-羧酸叔丁酯
[1998][1999]
将3-[[4-[(2r)-2-氨基-4-甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(150mg，0.2803mmol)和2-氧代-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-羧酸叔丁酯(大约126.3mg，0.5606mmol)在dcm(0.5ml)中合并，并添加三乙酰氧基硼氢化钠(大约118.8mg，0.5606mmol)(2当量)。在室温下搅拌30分钟之后，添加另外部分三乙酰氧基硼氢化钠(大约59.41mg，0.2803mmol)(1当量)，然后在另外30分钟之后添加最后部分三乙酰氧基硼氢化钠(大约59.41mg，0.2803mmol)(1当量)。最后一次添加之后，使反应在室温下搅拌30分钟，然后添加到含有20ml的0.5m hcl和20ml乙酸乙酯的分液漏斗中。将层分离，并且将水溶液用10ml乙酸乙酯再萃取2次。将有机物合并，用盐水洗涤并经硫酸钠干燥。将反应混合物浓缩并将粗产物与hatu(大约159.8mg，0.4204mmol)在dmf(20ml)中合并，并添加dipea(大约181.2mg，244.2μl，1.402mmol)。将反应混合物在室温下搅拌3小时，然后倒入含有60ml 0.5m hcl和60ml乙酸乙酯的分液漏斗中。将层分离，并且将水溶液用40ml乙酸乙酯再萃取2次。将有机物合并，用水、盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将所得粗物质通过硅胶色谱法纯化，用0-10％甲醇/二氯甲烷的梯度洗脱，得到2-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-羧酸叔丁酯(130mg，67％)。esi-ms m/z计算值689.3247，实验值690.5(m+1)
+
；保留时间：0.81分钟；lc方法d。
[2000]
步骤2：(11r)-12-(6-氮杂螺[3.4]辛烷-2-基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮
[2001][2002]
将2-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-羧酸叔丁酯(130mg，0.1884mmol)溶解于二氯甲烷(0.5ml)中并添加于二噁烷中的hcl(4m的0.5ml，2.000mmol)。将反应混合物在室温下搅拌一小时。将反应混合物浓缩，然后添加0.5ml己烷和0.5ml二氯甲烷，并且将反应混合物再次浓缩并在高真空下干燥，得到对应的(11r)-12-(6-氮杂螺[3.4]辛烷-2-基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)(110mg，93％)(作为顺式和反式环丁酮的混合物)。esi-ms m/z计算值589.27，实验值590.5(m+1)
+
；保留时间：0.52分钟；lc方法a。
[2003]
步骤3：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-12-(6-异丙基-6-氮杂螺[3.4]辛烷-2-基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮，(盐酸盐)，非对映异构体1(化合物33)，以及(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-12-(6-异丙基-6-氮杂螺[3.4]辛烷-2-基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)，非对映异构体2(化合物34)
[2004][2005]
将11r)-12-(6-氮杂螺[3.4]辛烷-2-基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)(19mg，0.03034mmol)与丙酮(9μl，0.1226mmol)在二氯甲烷(0.5ml)中合并。添加三乙酰氧基硼氢化钠(40mg，0.1887mmol)，并且将反应在室温下搅拌3小时。然后将反应混合物部分浓缩并且重新溶解于1:1dmso/甲醇中并过滤。反相hplc运行(1-99acn/水，hcl改性剂，30分钟)仅部分分离顺式/反式异构体。将含有部分分离的顺式/反式异构体的级分通过反相hplc(15-65acn/水，hcl改性剂)进一步单独纯化，分别得到峰1，(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-12-(6-异丙基-6-氮杂螺[3.4]辛烷-2-基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),
5,7,14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)，非对映异构体1(2.4mg，12％)；esi-ms m/z计算值631.3192，实验值632.6(m+1)
+
；保留时间：1.37分钟以及峰2，(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-12-(6-异丙基-6-氮杂螺[3.4]辛烷-2-基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)非对映异构体2(2.8mg，13％)esi-ms m/z计算值631.3192，实验值632.5(m+1)
+
；保留时间：1.4分钟。(lc方法a)。
[2006]
实例30：化合物35的制备
[2007]
步骤1：3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]环丁烷羧酸叔丁酯
[2008][2009]
将3-[[4-[(2r)-2-氨基-4-甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(200mg，0.3738mmol)与3-氧代环丁烷羧酸叔丁酯(大约127.2mg，0.7476mmol)在dcm(0.5ml)中合并。添加三乙酰氧基硼氢化钠(大约237.6mg，1.121mmol)，并且将反应在室温下搅拌1小时。添加另外的三乙酰氧基硼氢化钠(大约158.4mg，0.7476mmol)并将反应混合物再搅拌2小时。然后将反应混合物倒入含有0.5m hcl和乙酸乙酯的分液漏斗中。将层分离，并且将水溶液用乙酸乙酯再萃取三次。将有机物合并，并用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并浓度。将所得粗物质与hatu(大约284.3mg，0.7476mmol)在dmf(15ml)中合并，并添加diea(大约241.6mg，325.6μl，1.869mmol)。将反应混合物搅拌16小时，然后倒入含有乙酸乙酯和1m hcl的分液漏斗中。将层分离，并且将水溶液用乙酸乙酯再萃取3次。将合并的有机物用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。然后将化合物溶解于1:1dmso/甲醇中，过滤并通过反相hplc(水中的mecn 1-99％ hcl改性剂)纯化，得到对应的3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]环丁烷羧酸叔丁酯(188mg，79％)。esi-ms m/z计算值634.28253，实验值635.5(m+1)
+
；保留时间：0.79分钟；lc方法d。
[2010]
步骤2：3-[(11r)-6-(2,6-二异丙基苯基)-11-异丁基-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]环丁烷羧酸，70:30％，未知绝对构型，顺式/反式混合物(化合物35)
[2011][2012]
将3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]环丁烷羧酸叔丁酯(188mg，0.2962mmol)溶解于hcl(4m的1.5ml，6.000mmol)中并在室温下搅拌1小时。然后将反应混合物用二氯甲烷稀释并浓缩。添加己烷并且将反应混合物再次浓缩，得到呈浅黄色固体的3-[(11r)-6-(2,6-二异丙基苯基)-11-异丁基-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]环丁烷羧酸(170mg，99％)esi-ms m/z计算值578.2199，实验值579.3(m+1)
+
；保留时间：0.62分钟(顺式和反式取代的环丁烷的混合物)，lc方法d。将8mg部分的该材料通过反相hplc(1-99％ acn/水，hcl改性剂，15分钟运行)进一步纯化，得到3-[(11r)-6-(2,6-二异丙基苯基)-11-异丁基-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]环丁烷羧酸非对映异构体1(4mg，2％)esi-ms m/z计算值578.2199，实验值579.3(m+1)
+
；保留时间：1.57分钟(lc方法a)。
[2013]
实例31：化合物36的制备
[2014]
步骤1：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-12-[3-(4-甲基哌嗪-1-羰基)环丁基]-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(化合物36)
[2015][2016]
将3-[(11r)-6-(2,6-二异丙基苯基)-11-异丁基-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]环丁烷羧酸(15mg，0.02592mmol)与1-甲基哌嗪(大约5.192mg，0.05184mmol)和hatu(大约19.71mg，0.05184mmol)在dmf中合并，并添加dipea(大约16.75mg，22.57μl，0.1296mmol)。将反应在室温下搅拌2小时，然后过滤并通过反相hplc(1-99％ acn/水，hcl改性剂，15分钟运行)纯化，得到(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-12-[3-(4-甲基哌嗪-1-羰基)环丁基]-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)(2.4mg，13％)。esi-ms m/z计算值660.3094，
实验值661.6(m+1)
+
；保留时间：1.119分钟；lc方法a。
[2017]
实例32：化合物37的制备
[2018]
步骤1：3-[[4-[(2r)-2-[[(3ar,6as)-5-甲氧基-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氢戊烯-2-基]氨基]-4-甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸
[2019][2020]
在4ml小瓶中，向3-[[4-[(2r)-2-氨基-4-甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(245mg，0.4579mmol)和(3as,6ar)-5-甲氧基-3,3a,4,5,6,6a-六氢-1h-并环戊二烯-2-酮(75mg，0.4864mmol)于无水二氯甲烷(1ml)中的搅拌的混合物中添加三乙酰氧基硼氢化钠(310mg，1.463mmol)。将小瓶用氮气短暂吹扫，并且将混合物在环境温度下搅拌20小时(过夜)。然后按该顺序添加甲醇(0.2ml)和水(0.2ml)，并将混合物在减压下浓缩。将残余物溶于dmso(3ml)中，微过滤并通过反相hplc(c
18
柱，15分钟内1-99％乙腈/水，hcl作为改性剂)纯化，得到呈白色固体的3-[[4-[(2r)-2-[[(3ar,6as)-5-甲氧基-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氢戊烯-2-基]氨基]-4-甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(141mg，46％)。esi-ms m/z计算值636.29816，实验值637.2(m+1)
+
；保留时间：1.29分钟；lc方法a。
[2021]
步骤2：(11r)-12-[(3ar,6as)-5-甲氧基-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氢戊烯-2-基]-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(化合物37)
[2022][2023]
在4ml小瓶中，按该顺序向3-[[4-[(2r)-2-[[(3ar,6as)-5-甲氧基-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氢戊烯-2-基]氨基]-4-甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(50mg，0.07427mmol)于无水dmf(2.5ml)中的搅拌的溶液中添加4-(6-氰基-2-甲基-7-氧代-4,8-二氧杂-2,5-二氮杂-5-烯-3-亚基)吗啉-4-六氟磷酸盐(v)
(42mg，0.09807mmol(comu)和diea(50μl，0.2871mmol)，将氮气吹扫20秒并加盖。将反应在环境温度下搅拌14小时(过夜)。将反应混合物倒入搅拌的水(150ml)和hcl(1m的35ml，35.00mmol)溶液中。将混合物用dmso(0.8ml)稀释，微过滤并通过反相hplc(c
18
柱，15分钟内1-99％乙腈/水，hcl作为改性剂)纯化，得到呈白色固体的(11r)-12-[(3ar,6as)-5-甲氧基-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氢戊烯-2-基]-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(14mg，30％)。esi-ms m/z计算值618.2876，实验值619.1(m+1)
+
；保留时间：2.03分钟；lcms方法a。
[2024]
实例33：化合物38和化合物39的制备
[2025]
步骤1：3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯
[2026][2027]
将3-[[4-[(2r)-2-氨基-4-甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(300mg，0.5607mmol)与3-氧代吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(大约155.8mg，0.8411mmol)在dcm(10μl)中合并，并在室温下搅拌一小时。然后添加第二部分三乙酰氧基硼氢化钠(大约356.5mg，1.682mmol)并将反应再搅拌两小时。然后将反应混合物在0.5m hcl与乙酸乙酯之间分配。将层分离，并且将水溶液用乙酸乙酯再萃取三次。将合并的有机物用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。将所得物质溶解于5ml dmf中并滴加到comu(大约480.1mg，1.121mmol)和dipea(大约434.8mg，586.0μl，3.364mmol)于足量dmf中的搅拌的溶液中，得到最终浓度为0.01m。然后将反应混合物在室温下搅拌16小时。在此之后，将反应混合物在1mhcl与乙酸乙酯之间分配。将层分离，并且将水溶液用乙酸乙酯再萃取3次。将合并的有机物用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。将化合物通过硅胶色谱法(0-100乙酸乙酯/己烷)纯化，得到3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(101mg，28％)。esi-ms m/z计算值649.2934，实验值650.5(m+1)
+
；保留时间：0.76分钟；lc方法d。
[2028]
步骤2：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-12-吡咯烷-3-基-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮，非对映异构体1，以及(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-12-吡咯烷-3-基-9-氧-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)，非对映异构体2
[2029][2030]
将3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(153mg，0.2355mmol)溶解于二氯甲烷(1ml)中并添加hcl(4m的600μl，2.400mmol)。将反应混合物在室温下搅拌20分钟，然后将反应混合物蒸发。将所得物质通过反相(1-99％ meoh/水，hcl改性剂，以浅初始梯度30分钟运行)纯化，分别得到两个非对映异构体(绝对构型未知)，(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-12-吡咯烷-3-基-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)，非对映异构体1(30mg，22％)；esi-ms m/z计算值549.24097，实验值550.5(m+1)
+
；保留时间：0.47分钟，lcms方法a；以及(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-12-吡咯烷-3-基-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)非对映异构体2(13mg，9％)；esi-ms m/z计算值549.24097，实验值550.5(m+1)
+
；保留时间：0.49分钟(lc方法a)。
[2031]
步骤3：3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2-甲基丙基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-12-基]吡咯烷-1-羧酸丙烷-2-基酯，非对映异构体1(化合物38)，以及3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2-甲基丙基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-12-基]吡咯烷-1-羧酸丙烷-2-基酯，非对映异构体2(化合物39)
[2032]
[2033]
每个先前分离的非对映异构体1和2在单独的小瓶中反应，得到吡咯烷环上未知构型的对应的纯非对映异构产物。将(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-12-吡咯烷-3-基-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)(10mg，0.01706mmol)与氯甲酸异丙酯(大约2m的17.06μl，0.03412mmol)(在甲苯中)在dcm(0.5ml)中合并。添加dipea(大约11.02mg，14.85μl，0.08530mmol)并将反应混合物在室温下搅拌30分钟。然后将反应混合物用几滴1mhcl淬灭，部分浓缩，然后用1:1dmso/甲醇稀释并过滤。在通过反相hplc(1-99％ acn/水，hcl改性剂，15分钟运行)纯化之后，在干燥之后获得呈白色固体的产物：非对映异构体1，3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2-甲基丙基)-2,2,13-三氧基-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-12-基]吡咯烷-1-羧酸丙烷-2-基酯(8mg，74％)；esi-ms m/z计算值635.2778，实验值636.5(m+1)
+
；保留时间：1.83分钟；(lc方法a)，以及非对映异构体2，3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2-甲基丙基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-12-基]吡咯烷-1-羧酸丙烷-2-基酯(4.5mg，63.82％)；esi-ms m/z计算值635.2778，实验值636.5(m+1)
+
；保留时间：1.87分钟；lc方法a。
[2034]
实例34：化合物40的制备
[2035]
步骤1：3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(2r)-2-[[3-(羟甲基)环丁基]氨基]-4-甲基-戊氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸
[2036][2037]
将3-[[4-[(2r)-2-氨基-4-甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(40mg，0.08023mmol)和3-(羟甲基)环丁酮(大约24.10mg，0.2407mmol)在dce中与乙酸(大约38.54mg，36.50μl，0.6418mmol)合并，并在室温下搅拌20分钟。添加氰基硼氢化钠(大约20.17mg，0.3209mmol)，并且将反应在室温下搅拌1小时。添加另外部分3-(羟甲基)环丁酮(大约24.10mg，0.2407mmol)，并且将反应在室温下再搅拌3小时。将反应混合物用几滴水淬灭并部分浓缩。然后将反应混合物重新溶解于1ml 1:1dmso/甲醇中，然后过滤并通过反相hplc(1-70％ acn/水，hcl改性剂)纯化15分钟。将含有产物的级分浓缩，得到呈白色固体的3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(2r)-2-[[3-(羟甲基)环丁基]氨基]-4-甲基-戊氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(20.3mg，41％)；esi-ms m/z计算值582.2512，实验值583.5(m+1)
+
；保留时间：0.43分钟；lc方法d。
[2038]
步骤2：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-12-[3-(羟甲基)环丁基]-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(化合物40)
[2039][2040]
将3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(2r)-2-[[3-(羟甲基)环丁基]氨基]-4-甲基-戊氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(20mg，0.03230mmol)与hatu(大约15.97mg，0.04199mmol)在dmf(1ml)中合并，并添加dipea(大约20.87mg，28.13μl，0.1615mmol)。然后将反应混合物在室温下搅拌1小时。将反应过滤并通过反相hplc(1-99％ acn/水，hcl改性剂，15分钟运行)纯化，得到(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-12-[3-(羟甲基)环丁基]-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(未知环丁烷构型的单一异构体，2mg，11％)。esi-ms m/z计算值564.24066，实验值565.5(m+1)
+
；保留时间：1.51分钟；lc方法a。
[2041]
实例35：化合物41的制备
[2042]
步骤1：3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]-(甲氧基甲基)氨磺酰基]苯甲酸甲酯
[2043][2044]
在0℃下向3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸甲酯(68.5g，158.60mmol)于dmf(400ml)中的溶液中添加碳酸钾(44g，318.37mmol)和氯(甲氧基)甲烷(13.992g，13.2ml，173.78mmol)。将反应在室温下搅拌1小时。添加水(800ml)，并且将产物用dcm(3
×
150ml)萃取。将合并的有机层用水和盐水(4
×
200ml)的1:1混合物洗涤，并且然后用盐水(1
×
150ml)洗涤。将所得合并的有机层经过硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩。得到呈棕色油的3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]-(甲氧基甲基)氨磺酰基]苯甲酸甲酯(80.4g，90％)。esi-ms m/z计算值475.09686，实验值476.2(m+1)
+
；保留时间：2.06分钟；lc方法x。
[2045]
步骤2：3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]-(甲氧基甲基)氨磺酰基]苯甲酸
[2046]
[2047]
将3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]-(甲氧基甲基)氨磺酰基]苯甲酸甲酯(47.89g，80.698mmol)于thf(475ml)和水(475ml)中的混合物用氢氧化锂水合物(5.07g，120.82mmol)处理并将其在室温下搅拌4小时。将大部分thf在减压下去除，并且将剩余的水层使用1n hcl水溶液(250ml)酸化至ph为约2-3。将产物用乙酸乙酯(3
×
450ml)萃取。将合并的有机层用盐水(100ml)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩。将所得粘性固体在乙酸乙酯(100ml和75ml)中研磨两次，得到呈白色固体的3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]-(甲氧基甲基)氨磺酰基]苯甲酸(26.045g，65％)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ13.37(br.s.,1h),8.48(s,1h),8.20-8.10(m,2h),7.61(t,j＝7.8hz,1h),7.44(s,1h),7.28-7.20(m,1h),7.10(d,j＝7.6hz,2h),5.61(s,2h),3.30(s,3h),1.84(s,6h)。esi-ms m/z计算值461.0812，实验值462.1(m+1)
+
；保留时间：4.32分钟；lc方法y。
[2048]
步骤3：3-[[4-[(2r)-2-氨基-4-甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]-(甲氧基甲基)氨磺酰基]苯甲酸
[2049][2050]
在反应小瓶中，将3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]-(甲氧基甲基)氨磺酰基]苯甲酸(2.6g，5.629mmol)，(2r)-2-氨基-4-甲基-戊烷-1-醇(725μl，5.673mmol)和叔丁醇钠(1.75g，18.21mmol)在thf(7ml)中合并，并在室温下搅拌2小时。将反应用乙酸乙酯稀释并用1m hcl溶液洗涤。将有机物用盐水进一步洗涤，经硫酸钠干燥并蒸发。将粗物质从乙酸乙酯中重结晶，得到呈白色固体的产物3-[[4-[(2r)-2-氨基-4-甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]-(甲氧基甲基)氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(1.95g，60％)esi-ms m/z计算值542.2199，实验值543.3(m+1)
+
；保留时间：1.4分钟(lc方法a)。
[2051]
步骤4：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-3-(甲氧基甲基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮
[2052][2053]
将3-[[4-[(2r)-2-氨基-4-甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]-(甲氧基甲基)氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(797mg，1.376mmol)溶解于dmf(6ml)中并添加到hatu(640.2mg，1.684mmol)和三乙胺(766μl，5.496mmol)于dmf(7ml)中的溶液中。将反应在室温下搅拌20分钟。将反应混合物倒入水(20ml)中，并且通过过滤收集所得固体。将固体溶解于
乙酸乙酯中并用1m hcl溶液洗涤，然后用盐水洗涤。将有机物经硫酸钠干燥并蒸发，得到(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-3-(甲氧基甲基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(720mg，100％)；esi-ms m/z计算值524.20935，实验值525.3(m+1)
+
；保留时间：0.77分钟；lc方法d。
[2054]
步骤5：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-12-(1,1-氧硫杂环丁烷-3-基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(化合物41)
[2055][2056]
将(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-3-(甲氧基甲基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(10mg，0.01906mmol)与2h-硫杂环丁烯1,1-二氧化物(3mg，0.02881mmol)和碳酸钾(4mg，0.02894mmol)在dmf(0.5ml)中合并，并在室温下搅拌两小时。添加更多氢化钠(1.3mg，0.03250mmol)。在一分钟之后，将反应混合物在1m hcl中淬灭，然后将其用乙酸乙酯萃取3次。将合并的有机物用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将所得产物溶解于dcm(0.3ml)中并添加tfa(0.3ml，3.894mmol)。将反应在室温下搅拌15分钟。将反应混合物在减压下浓缩，并且将所得粗物质溶解于1:1dmso/甲醇中，过滤并通过反相hplc(1-99％ acn/水，hcl改性剂，15分钟运行)纯化，得到(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-12-(1,1-氧硫杂环丁烷-3-基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮。esi-ms m/z计算值584.17633，实验值585.4(m+1)
+
；保留时间：1.5分钟；lc方法a。
[2057]
实例36：化合物42的制备
[2058]
步骤1：(2r)-2-[(3-苄氧基环丁基)氨基]-4-甲基-戊烷-1-醇
[2059][2060]
向(2r)-2-氨基-4-甲基-戊烷-1-醇(2.0g，17.066mmol)于无水dce(25ml)的溶液中添加3-苄氧基环丁酮(2.389g，13.558mmol)。将反应在室温下搅拌30分钟。将三乙酰氧基硼氢化钠(6.32g，29.820mmol)添加到反应中，并且然后在室温下搅拌过夜。将反应倒入2n碳酸钠(30ml)中。将反应用dcm(3
×
30ml)萃取。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法使用0至10％甲醇/dcm(用0.2％氢氧化铵缓冲)纯化，
得到呈澄清油的(2r)-2-[(3-苄氧基环丁基)氨基]-4-甲基-戊烷-1-醇(3.379g，69％)。esi-ms m/z计算值277.2042，实验值278.3(m+1)
+
；保留时间：3.68分钟；lc方法s。
[2061]
步骤2：3-[[4-[(2r)-2-[(3-苄氧基环丁基)氨基]-4-甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸
[2062][2063]
在250ml烧瓶中，向3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(5.61g，13.43mmol)于无水四氢呋喃(100ml)中的搅拌的溶液中添加(2r)-2-[(3-苄氧基环丁基)氨基]-4-甲基-戊烷-1-醇(盐酸盐)(4.25g，13.54mmol)于无水四氢呋喃(10ml)中的溶液。将不均匀混合物搅拌5分钟，同时通过其吹扫氮气，形成均匀的乳状乳液。向乳液中立即添加叔丁醇钠(6.46g，67.22mmol)。将反应在室温下搅拌1小时。将反应混合物在乙酸乙酯(150ml)与冰冷的盐酸(1m的82ml，82.00mmol)(ph为约2)之间分配。将水层用乙酸乙酯(2
×
50ml)再萃取。将合并的有机物用盐水(50ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩，得到呈白色固体的粗产物3-[[4-[(2r)-2-[(3-苄氧基环丁基)氨基]-4-甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(9.401g，101％)。esi-ms m/z计算值658.28253，实验值659.1(m+1)
+
；保留时间：1.36分钟；lc方法a。
[2064]
步骤3：(11r)-12-(3-苄氧基环丁基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(化合物42)
[2065][2066]
在500ml烧瓶中，按该顺序在0-5℃(冰水浴)下在氮气下向3-[[4-[(2r)-2-[(3-苄氧基环丁基)氨基]-4-甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(9.40g，13.52mmol)于无水dmf(175ml)中的搅拌的溶液中添加[二甲基氨基(三唑并[4,5-b]吡啶-3-基氧基)亚甲基]-二甲基铵(六氟化磷离子)(5.71g，15.02mmol)(hatu)和diea(12.0ml，68.89mmol)。将反应在该温度下搅拌30分钟，然后将浴去除，并且使反应升温至室温。在将反应搅拌过夜(总时间15小时)之后，将dmf在减压下去除。将浓缩的反应混合物倒入搅拌的冰水(150ml)和盐酸(1.0m的80ml，80.00mmol)溶液中。将混合物搅拌20分
钟并通过真空过滤收集所得粉红色固体。将固体溶解于乙酸乙酯(100ml)中并用1m hcl(100ml)、盐水(100ml)洗涤，然后经硫酸钠干燥并蒸发。将粗物质通过硅胶(330g柱)色谱法纯化，用0-5％甲醇/二氯甲烷洗脱30分钟，得到呈粉色固体的(11r)-12-(3-苄氧基环丁基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-酮(7.36g，85％)。未知顺式/反式构型的单一异构体.1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ13.00(s,1h),8.42(s,1h),7.91(d,j＝7.3hz,1h),7.68(dtt,j＝7.4,5.1,2.4hz,2h),7.36(d,j＝4.2hz,4h),7.30(dd,j＝5.0,3.7hz,1h),7.25(d,j＝7.7hz,1h),7.12(d,j＝7.7hz,2h),6.38(s,1h),5.15(dd,j＝10.7,4.2hz,1h),4.44(s,2h),4.31(t,j＝11.1hz,1h),3.81(dd,j＝13.5,6.5hz,1h),3.75-3.66(m,1h),3.63-3.51(m,1h),2.96(q,j＝11.1hz,2h),2.46(dd,j＝7.2,3.7hz,1h),2.04-1.91(m,6h),1.70-1.60(m,1h),1.29(ddd,j＝9.3,6.6,3.2hz,1h),1.18-1.13(m,1h),0.89(dq,j＝11.5,6.1,5.3hz,1h),0.74(d,j＝6.6hz,3h),0.22(d,j＝6.4hz,3h)。esi-ms m/z计算值640.2719，实验值641.1(m+1)
+
；保留时间：2.08分钟lc方法a。
[2067]
实例37：化合物43和化合物44的制备
[2068]
步骤1：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-12-(3-羟基环丁基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮，非对映异构体1(化合物43)，以及(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-12-(3-羟基环丁基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮，非对映异构体2(化合物44)
[2069][2070]
将(11r)-12-(3-苄氧基环丁基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(5mg，0.007803mmol)溶于甲醇(1ml)中，添加二羟基钯(2mg，0.002848mmol)并将反应容器用氮气吹扫。将氢气从气球中鼓泡通过反应混合物1小时。然后将反应混合物用氮气吹扫，过滤并通过反相hplc(带有hcl改性剂的1-99％ acn，30分钟运行)纯化，分别得到环丁烷的两个推测的相对异构体(顺式和反式未知)，(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-12-(3-羟基环丁基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(1.2mg，28％)非对映异构体1esi-ms m/z计算值550.225，实验值551.5(m+1)
+
；保留时间：1.44分钟(峰1)，lc方法a；以及(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-12-(3-羟基环丁基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(2.2mg，51％)非对映异构体2，esi-ms m/z计算值550.225，实验值551.4(m+1)
+
；保留时间：1.51分钟(峰2)；lc方法a。
[2071]
实例38：化合物45、化合物46和化合物47的制备
[2072]
步骤1：3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(2r)-2-[(3-异丙氧基环丁基)氨基]-4-甲基-戊氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸
[2073][2074]
将3-[[4-[(2r)-2-氨基-4-甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(98.6mg，0.1843mmol)、3-异丙氧基环丁酮(31.5mg，0.2458mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(104.5mg，0.5531mmol)在dcm(0.3ml)中合并，并在室温下搅拌5小时。将反应用甲醇(0.7ml)和dmso(2ml)稀释，过滤并通过lc/ms利用1-99％乙腈/5mm hcl水溶液的梯度纯化，得到3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(2r)-2-[(3-异丙氧基环丁基)氨基]-4-甲基-戊氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(38.3mg，32％)esi-ms m/z计算值610.28253，实验值611.4(m+1)
+
；保留时间：0.51分钟(lc方法a)。
[2075]
步骤2：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-12-(3-异丙氧基环丁基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(化合物47)
[2076][2077]
将3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(2r)-2-[(3-异丙氧基环丁基)氨基]-4-甲基-戊氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(38.3mg，0.05918mmol)、hatu(27mg，0.07101mmol)和三乙胺(29.68μl，0.2129mmol)在dmf(1ml)中合并，并在室温下搅拌2小时。将反应过滤并通过lc/ms利用5mm hcl水溶液中的1-99％乙腈的梯度纯化，得到(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-12-(3-异丙氧基环丁基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(22.2mg，53％)esi-ms m/z计算值592.2719，实验值593.2(m+1)
+
；保留时间：1.98分钟(lc方法a)。
[2078]
步骤3：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-12-(3-异丙氧基环丁基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮，非对映异构体1(化合物45)，以及(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-12-(3-异丙氧基环丁基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮，非对映异构体2(化合物46)
[2079][2080]
使用手性pak as-h(250
×
21.2mm)，在40℃下的5μm柱，流动相：14％ meoh(无改性剂)，86％ co2，流速70毫升/分钟，浓度24mg/ml，进样体积500μl，158bar，210nm对(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-12-(3-异丙氧基环丁基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(20mg，0.03374mmol)进行sfc分离。将两个异构体分离：峰1，非对映异构体1，(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-12-(3-异丙氧基环丁基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(2.9mg，15％)esi-ms m/z计算值592.2719，实验值593.3(m+1)
+
；保留时间：2.07分钟(lc方法a)，以及峰2，非对映异构体2，(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-12-(3-异丙氧基环丁基)-2,2-基-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(14.8mg，74％)esi-ms m/z计算值592.2719，实验值593.3(m+1)
+
；保留时间：2.06分钟(lc方法a)。
[2081]
实例39：化合物48的制备
[2082]
步骤1：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-12-(3-羟基环丁基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-酮
[2083][2084]
在250ml 3颈烧瓶中，将(11r)-12-(3-苄氧基环丁基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-酮(7.0g，10.92mmol)于无水甲醇(100ml)中的搅拌的溶液用氮气吹扫10分钟。小心地添加氢氧化钯(20％w/w的1.50g，2.136mmol)并且将反应容器抽空并再次充入氮气(两次)。然后将充满氢气的气球连接并在环境温度下继续搅拌5小时。在氮气下添加更多氢氧化钯(20％w/w的1.50g，2.136mmol)并重复上述吹扫。在8小时之后，添加更多氢氧化钯(20％w/w的1.50g，2.136mmol)并继续搅拌过夜(总共24小时)。然烧瓶抽空并补充氮气，并且添加水(5ml)并将反应搅拌10分钟，并且将深色反应混合物经硅藻土垫过滤并并滤饼用甲醇进一步洗涤。将滤液在减压下浓缩，得到类白色(11r)-6-(2,6-二甲基
苯基)-12-(3-羟基环丁基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-酮(5.87g，98％)。esi-ms m/z计算值550.225，实验值551.0(m+1)
+
；保留时间：1.53分钟lc方法a。
[2085]
步骤2：[3-[(11r)-6-(2,6-二异丙基苯基)-11-异丁基-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]环丁基]n,n-二甲基氨基甲酸酯(化合物48)
[2086][2087]
将(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-12-(3-羟基环丁基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-酮(10mg，0.01816mmol)与nah(6mg，0.1500mmol)在dmf(0.5ml)中合并，并添加n,n-二甲氨基甲酰(8mg,0.07439mmol)中合并，并将反应在室温下搅拌2小时。然后将反应混合物用几滴1m hcl淬灭，用甲醇稀释，过滤并通过反相hplc(1-99％ acn/水，hcl改性剂，15分钟运行)纯化。将少量的次要环丁基立体异构体重叠，并且将产物通过反相hplc(1-70％ acn/水，hcl改性剂，15分钟运行)再纯化，得到呈白色粉末的[3-[(11r)-6-(2,6-二异丙基苯基)-11-异丁基-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]环丁基]n,n-二甲基氨基甲酸酯(4.2mg，37％)esi-ms m/z计算值621.2621，实验值622.7(m+1)
+
；保留时间：1.73分钟(lc方法a)。
[2088]
实例40：化合物49和化合物50的制备
[2089]
步骤1：3-苄氧基-1-甲基-环丁醇
[2090][2091]
将3-苄氧基环丁酮(503mg，2.8545mmol)溶解于二乙醚(1.4ml)中，然后在室温下滴加二乙醚中的甲基溴化镁3m(3m的1.40ml，4.2000mmol)。将反应搅拌一小时，然后冷却至0℃并用氯化铵(5ml)淬灭。将混合物用etoac(5ml)稀释并将层分离。将水层用etoac萃取2次以上(2
×
5ml)，经硫酸钠干燥并浓缩。将残余物干燥加载到硅胶上并通过快速柱色谱法使用0-30％ etoac/己烷纯化，得到呈无色油和异构体的1:1混合物的3-苄氧基-1-甲基-环丁醇(283mg，46％)。1h nmr(250mhz,dmso-d6)δ7.40-7.24(m,5h),4.40-4.29(m,2h),2.33-2.12(m,2h),2.02-1.84(m,2h),1.15和1.28(两个s,3h总共)。
[2092]
步骤2：[3-甲基-3-(三氟甲氧基)环丁氧基]甲苯
[2093][2094]
将3-苄氧基-1-甲基-环丁醇(9.23g，48.009mmol)溶解于乙酸乙酯(325ml)中，然后添加三氟甲磺酸银(37.05g，144.20mmol)、selectfluor(25.61g，72.292mmol)和氟化钾(11.02g，189.68mmol)。将容器用氮气冲洗并添加2-氟吡啶(14.100g，12.5ml，145.23mmol)和三氟甲基三甲基硅烷(20.683g，21.5ml，145.46mmol)。使混合物在氮气气氛下在室温下搅拌3天。将混合物通过硅藻土垫过滤，并且干燥加载到硅胶上并通过快速柱色谱法使用0-30％乙酸乙酯/己烷纯化。收集适当的级分，得到呈无色油的[3-甲基-3-(三氟甲氧基)环丁氧基]甲苯(2.58g，19％)。1h nmr(250mhz,cdcl3)δ7.47-7.16(m,5h),4.43(s,2h),3.77(p,j＝6.9hz,1h),2.49(d,j＝6.3hz,4h),1.50(s,3h)。注意：5.30处的峰是dcm
[2095]
步骤3：3-甲基-3-(三氟甲氧基)环丁醇
[2096][2097]
将[3-甲基-3-(三氟甲氧基)环丁氧基]甲苯(635mg，2.4399mmol)溶解于乙酸甲酯(15.875ml)中并添加pd/c(683mg，10％w/w，0.6418mmol)。将反应置于氢气气氛(气球)下并搅拌48小时。添加硅藻土并将固体滤出并用乙醚冲洗。将滤液浓缩，得到呈无色油的3-甲基-3-(三氟甲氧基)环丁醇(364.5mg，79％)。1h nmr(250mhz,cdcl3)δ4.04(p,j＝7.0hz,1h),2.67-2.49(m,2h),2.49-2.32(m,2h),1.87(bs,1h),1.55-1.42(m,3h)。
[2098]
步骤4：(2r)-4-甲基-2-[[3-甲基-3-(三氟甲氧基)环丁基]氨基]戊烷-1-醇
[2099][2100]
在0℃下向3-甲基-3-(三氟甲氧基)环丁醇(100mg，0.5878mmol)和吡啶(119mg，1.5044mmol)于无水dcm(1ml)中的溶液中添加三氟甲基磺酰基三氟甲磺酸酯(270mg，0.9570mmol)。将反应在25℃下搅拌2小时。将反应用己烷(5ml)稀释，并且将溶液用10％ hcl(2ml)、饱和碳酸氢钠(2ml)和盐水(2ml)洗涤。将溶液经无水硫酸钠干燥并在室温下在真空下浓缩，得到粗三氟甲磺酸盐。将该产物和(2r)-2-氨基-4-甲基-戊烷-1-醇(93mg，0.7936mmol)溶解于mecn(1ml)中。向反应混合物中添加分子筛(50mg)和碳酸钾
(398mg，2.8798mmol)。将反应在室温下搅拌16小时。将反应加热至80℃1小时并且然后通过硅藻土垫过滤出分子筛。将滤液在真空下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法使用乙酸乙酯纯化，得到呈浅黄色固体的(2r)-4-甲基-2-[[3-甲基-3-(三氟甲氧基)环丁基]氨基]戊烷-1-醇(113.5mg，65％)(非对映异构体的混合物)，esi-ms m/z计算值269.1603，实验值270.5(m+1)
+
；保留时间：2.19分钟；lc方法t。
[2101]
步骤5：3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(2r)-4-甲基-2-[[3-甲基-3-(三氟甲氧基)环丁基]氨基]戊氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸
[2102][2103]
将(2r)-4-甲基-2-[[3-甲基-3-(三氟甲氧基)环丁基]氨基]戊烷-1-醇(171mg，0.6699mmol)和3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(313mg，0.7490mmol)溶解于thf(9ml)中，然后添加叔丁醇钠(654mg，6.8052mmol)并将反应在室温下搅拌1小时。将反应用2m hcl(12ml)淬灭，然后用chcl3萃取三次(3
×
10ml)。将有机层用盐水(12ml)洗涤，然后经硫酸钠干燥并浓缩。将粗残余物与来自另一反应的粗合并，并用0-10％ meoh/dcm纯化，得到呈白色固体的3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(2r)-4-甲基-2-[[3-甲基-3-(三氟甲氧基)环丁基]氨基]戊氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(337.8mg，66％校正产率)。esi-ms m/z计算值650.2386，实验值651.6(m+1)
+
；保留时间：2.77分钟；lc方法t。
[2104]
步骤6：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-12-[3-甲基-3-(三氟甲氧基)环丁基]-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮，主要异构体(化合物49)，以及(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-12-[3-甲基-3-(三氟甲氧基)环丁基]-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮，次要异构体(化合物50)
[2105][2106]
将3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(2r)-4-甲基-2-[[3-甲基-3-(三氟甲氧基)环丁基]氨基]戊氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(417.8mg，0.6421mmol)溶解于dmf(7ml)中，并添加dipea(408.10mg，0.55ml，3.1576mmol)。然后在室温下滴加hatu(349mg，0.9179mmol)于dmf(7ml)中的溶液。将反应在室温下搅拌过夜，并且然后通过添加盐水(60ml)淬灭。将水层用etoac(3
×
20ml)萃取三次。将有机层用盐水(4
×
10ml)洗涤4次，经硫酸钠干燥并浓缩。将粗残余物干燥加载到硅胶上，并通过使用dcm中的0-10％ meoh的快速柱色谱法纯化。将合适的级分收集并通过反相hplc使用0至100％乙腈/水(用0.1％ tfa缓冲)进行纯化，得到得到(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-12-[3-甲基-3-(三氟甲氧基)环丁基]-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(160mg，37％)的两个非对映异构体和呈棕黄色固体的(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-12-[3-甲基-3-(三氟甲氧基)环丁基]-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮。
[2107]
次要异构体(11.4mg，3％)：esi-ms m/z计算值632.228，实验值633.5(m+1)
+
；保留时间：3.02分钟；lc方法w。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ8.45(s,1h),7.92(d,j＝7.6hz,1h),7.80
–
7.60(m,2h),7.27(t,j＝7.6hz,1h),7.13(d,j＝7.6hz,2h),6.40(s,1h),5.15(dd,j＝10.7,4.3hz,1h),4.41(t,j＝11.1hz,1h),3.92
–
3.64(m,3h),3.64
–
3.53(m,2h),2.43
–
2.26(m,2h),1.98(s,6h),1.66(s,3h),1.32
–
1.21(m,1h),1.16(t,j＝13.5hz,1h),0.78
–
0.68(m,3h),0.21(d,j＝6.3hz,3h)
[2108]
主要异构体(160mg，37％)：esi-ms m/z计算值632.228，实验值633.5(m+1)
+
；保留时间：3.16分钟；lc方法w。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ8.44(s,1h),7.92(d,j＝7.6hz,1h),7.78
–
7.61(m,2h),7.27(t,j＝7.6hz,1h),7.13(d,j＝7.6hz,2h),6.40(s,1h),5.14(dd,j＝10.7,4.3hz,1h),4.40(t,j＝11.1hz,1h),4.25(p,j＝8.9hz,1h),3.74(td,j＝11.1,9.4,5.5hz,2h),3.20(ddd,j＝11.7,8.5,2.6hz,2h),2.65(dddd,j＝42.7,13.0,9.0,4.1hz,2h),1.99(s,6h),1.74(d,j＝1.8hz,3h),1.60(ddd,j＝13.8,10.7,2.7hz,1h),1.32
–
1.12(m,2h),0.73(d,j＝6.5hz,3h),0.21(d,j＝6.3hz,3h)。
[2109]
实例41：化合物51的制备
[2110]
步骤1：2-[(4r)-2-氧代噁唑烷-4-基]乙酸苄酯
[2111][2112]
向(3r)-3-(叔丁氧基羰基氨基)-4-羟基丁酸苄酯(27.8g，89.864mmol)(3r)-3-(叔丁氧基羰基氨基)-4-羟基丁酸苄酯(27.8g，89.864mmol)于1,2-二氯乙烷(250ml)中的溶液中添加吡啶(65.526g，67ml，828.40mmol)并将混合物冷却至0-5℃。添加对甲苯磺酸酐(32.263g，98.850mmol)并且将混合物温热至室温并搅拌2小时，并且然后加热至90℃2小时。将混合物冷却，用二氯甲烷(500ml)稀释并用1n hcl(3
×
200ml)洗涤。将合并的水层用二氯甲烷(2
×
150ml)反萃取。将合并的有机层用硫酸钠干燥，过滤并浓缩至干燥。将粗物质通过快速色谱法(330g)使用20％至100％乙酸乙酯/庚烷的梯度纯化，得到呈白色固体的对映体纯的2-[(4r)-2-氧代噁唑烷-4-基]乙酸苄酯(18.11g，86％)。1h nmr(400mhz,cdcl3)δ7.44-7.31(m,5h),5.58(br.s.,1h),5.16(s,2h),4.56(t,j＝8.6hz,1h),4.25(qd,j＝7.0,5.9hz,1h),4.06(dd,j＝8.9,5.7hz,1h),2.76-2.63(m,2h)。esi-ms m/z计算值235.0845，实验值236.2(m+1)
+
，471.2(2m+h)+；保留时间：1.49分钟；lc方法x。
[2113]
步骤2：(4r)-4-(2-羟基-2-甲基-丙基)噁唑烷-2-酮
[2114][2115]
在-20℃下，将乙醚中的溴(甲基)镁(3m的105ml，315.00mmol)添加到甲苯(150ml)和thf(150ml)的混合物中。然后滴加2-[(4r)-2-氧代噁唑烷-4-基]乙酸苄酯(18.1g，76.944mmol)的温热thf(80ml)溶液，维持温度低于-10℃。将混合物温热至室温并搅拌18小时。在0℃下，通过套管将混合物添加到乙酸(85ml)于水(440ml)的溶液中。将所得混合物在室温下搅拌1小时。分离各层。将水层用盐水(200ml)饱和并且用2-甲基四氢呋喃(3
×
250ml)和乙醇/氯仿(1/2，3
×
330ml)进一步萃取。将合并的有机萃取物经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将残余物与庚烷(4
×
100ml)共蒸发。将粗物质通过快速色谱法(330g)分两等批纯化(用6％异丙醇/二氯甲烷洗脱)，得到呈类白色固体的(4r)-4-(2-羟基-2-甲基-丙基)噁唑烷-2-酮(8.88g，69％)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ7.36(s,1h),4.45-4.38(m,1h),4.36(s,1h),4.00-3.91(m,2h),1.68-1.54(m,2h),1.10(s,6h)。esi-ms m/z计算值159.0895，实验值160.2(m+1)
+
；保留时间：0.77分钟，lc方法x。
[2116]
步骤3：(2r)-2-氨基-4-甲基-戊烷-1,4-二醇
[2117][2118]
将(4r)-4-(2-羟基-2-甲基-丙基)噁唑烷-2-酮(904mg，4.2592mmol)和八水氢氧化钡(4.03g，12.775mmol)于乙醇(20ml)和水(20ml)中的混合物在90-95℃下搅拌4小时。在冷却至室温之后，添加干冰(约7g)并将混合物剧烈搅拌2天。将悬浮液通过硅藻土垫过滤并
用乙醇(20ml)漂洗。将滤液用甲苯稀释并在减压下浓缩，得到(2r)-2-氨基-4-甲基-戊烷-1,4-二醇(780mg)，其无需进一步纯化即可用于下一步骤。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ5.12(br.s.,2h),3.30-3.16(m,2h),2.94(dd,j＝9.0,3.4hz,1h),1.83(s,2h),1.49-1.40(m,1h),1.33-1.21(m,1h),1.11(d,j＝11.0hz,6h)。esi-ms m/z计算值133.1103，实验值134.4(m+1)
+
；保留时间：0.21分钟，lc方法x。
[2119]
步骤4：3-[[4-[(2r)-2-氨基-4-羟基-4-甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸
[2120][2121]
向(2r)-2-氨基-4-甲基-戊烷-1,4-二醇(567mg，4.2571mmol)和3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(1.5g，3.5897mmol)于四氢呋喃(6ml)中的溶液中缓慢添加四氢呋喃中的叔丁醇钠(2m的7.2ml，14.400mmol)并将混合物在室温下搅拌一小时。将反应在乙酸乙酯(30ml)与1n盐酸(30ml)之间分配。将水相用乙酸乙酯(2
×
20ml)和2-甲基四氢呋喃(4
×
30ml)萃取。将合并的有机层经硫酸钠干燥，过滤并浓缩至干燥。将残余物用乙酸乙酯(20ml)研磨，将沉淀过滤并用乙酸乙酯(2
×
10ml)洗涤。将产物在真空下进一步干燥，得到呈浅黄色固体的3-[[4-[(2r)-2-氨基-4-羟基-4-甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(1.62g，80％)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ13.07(br.s.,2h),8.43(s,1h),8.14(d,j＝7.8hz,2h),8.10-8.01(m,3h),7.70(t,j＝7.7hz,1h),7.32-7.22(m,1h),7.13(d,j＝7.6hz,2h),6.29(br.s.,1h),5.13(br.s.,1h),4.36(dd,j＝11.5,2.9hz,1h),4.18(dd,j＝11.4,7.7hz,1h),3.83-3.70(m,1h),2.02(s,6h),1.71(d,j＝6.4hz,2h),1.24(m,6h)。esi-ms m/z计算值514.1886，实验值515.2(m+1)
+
；保留时间：1.3分钟，lc方法x。
[2122]
步骤5：3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(2r)-4-羟基-4-甲基-2-(螺[2.3]己-5-基氨基)戊氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸
[2123][2124]
将3-[[4-[(2r)-2-氨基-4-羟基-4-甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(50mg，0.0972mmol)、螺[2.3]己-5-酮(16mg，0.1664mmol)和乙酸(2mg，0.0019ml，0.0333mmol)在乙腈(1ml)和甲醇(0.7ml，以溶解起始材料)中搅拌30分钟，然后向溶液中添加氰基硼氢化钠(22mg，0.3501mmol)，然后将所述溶液在室温下搅拌过夜。
添加更多螺[2.3]己-5-酮(10mg，0.1040mmol)，搅拌1小时并且然后添加氰基硼氢化钠(22mg，0.3501mmol)并将反应混合物搅拌2小时。添加更多螺[2.3]己-5-酮(10mg，0.1040mmol)并且然后搅拌1小时，然后添加氰基硼氢化钠(110mg，1.7504mmol)并将反应混合物在室温下搅拌过夜。将反应混合物在乙酸乙酯(50ml)与饱和氯化铵水溶液(20ml)之间分配。将水相分离并用乙酸乙酯(20ml)洗涤。将有机相合并，用盐水(10ml)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩，得到呈澄清油的3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(2r)-4-羟基-4-甲基-2-(螺[2.3]己-5-基氨基)戊氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(66mg，114％)esi-ms m/z计算值594.2512，实验值595.3(m+1)
+
；保留时间：1.41分钟，所述产物在不经进一步纯化的情况下用于下一步骤。lc方法x。
[2125]
步骤6：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2-羟基-2-甲基-丙基)-2,2-二氧代-12-螺[2.3]己-5-基-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(化合物51)
[2126][2127]
向在0℃下搅拌的3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(2r)-4-羟基-4-甲基-2-(螺[2.3]己-5-基氨基)戊氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(110mg，0.1850mmol)和三乙胺(72.600mg，0.1ml，0.7175mmol)于dmf(1.5ml)和乙酸乙酯(5.5ml)中的溶液中滴加t3p(乙酸乙酯中的50％)(106.90mg，200μl，0.1680mmol)并将反应混合物温热至室温1小时。添加更多三乙胺(145.20mg，0.2ml，1.4349mmol)并且然后添加t3p(乙酸乙酯中的50％)(267.25mg，0.5ml，0.4200mmol)并将反应混合物在室温下搅拌3小时。将反应混合物在减压下浓缩并将所得粗在高真空泵上放置1小时，然后直接注射到柱上并通过反相色谱法使用0.5至100％乙腈/水纯化。将纯级分合并，并在冷冻干燥机上浓缩，得到呈白色蓬松固体的(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2-羟基-2-甲基-丙基)-2,2-二氧代-12-螺[2.3]己-5-基-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(18mg，17％)1h nmr(在80℃下进行)(400mhz,dmso-d6,80℃)δ8.44(s,1h),7.95-7.82(m,1h),7.73-7.56(m,2h),7.29-7.17(m,1h),7.10(d,j＝7.6hz,2h),6.25(s,1h),5.13(dd,j＝10.6,4.5hz,1h),4.34-4.15(m,2h),3.95-3.82(m,1h),3.75(br.s.,1h),3.27(t,j＝9.3hz,1h),3.21-3.13(m,1h),2.24-2.12(m,2h),2.01(s,6h),1.83(dd,j＝14.9,8.3hz,1h),1.58(d,j＝13.9hz,1h),0.77(s,3h),0.68(s,3h),0.56-0.44(m,4h)。esi-ms m/z计算值576.2406，实验值577.3(m+1)
+
；保留时间：4.02分钟(lc方法y)。
[2128]
实例42：化合物52的制备
[2129]
步骤1：3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(2r)-5-羟基-5-甲基-2-(螺[2.3]己-5-基氨基)己氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸
[2130][2131]
将3-[[4-[(2r)-2-氨基-5-羟基-5-甲基-己氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(50mg，0.0875mmol)、螺[2.3]己-5-酮(44mg，0.4577mmol)和乙酸(4.0128mg，3.8μl，0.0668mmol)在室温下在乙腈(1ml)和甲醇(0.6ml)中搅拌1小时。添加氰基硼氢化钠(27.8mg，0.4424mmol)并将反应混合物搅拌2小时。将反应混合物在乙酸乙酯(50ml)与饱和氯化铵(20ml)之间分配。将水相分离并用乙酸乙酯(2
×
20ml)萃取。将合并的有机相用盐水(10ml)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并在真空下浓缩。将产物通过正相色谱法(硅胶12g)使用0-18％ meoh/dcm的梯度纯化，得到呈白色固体的3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(2r)-5-羟基-5-甲基-2-(螺[2.3]己-5-基氨基)己氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(45.8mg，86％).1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.40(br.s.,1h),7.98(d,j＝7.3hz,1h),7.89(d,j＝7.6hz,1h),7.66-7.55(m,1h),7.54-7.44(m,1h),7.18-7.07(m,1h),7.02-6.95(m,2h),6.20-6.05(m,1h),4.15-4.08(m,2h),2.21-2.07(m,2h),2.05-1.98(m,2h),1.89(br.s.,6h),1.54-1.40(m,2h),1.32(br.s.,3h),1.23-1.16(m,2h),0.97(s,6h),0.77-0.70(m,2h),0.39-0.30(m,2h),0.30-0.19(m,2h)。esi-ms m/z计算值608.2669，实验值609.4(m+1)
+
；保留时间：1.41分钟，lc方法x。
[2132]
步骤2：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(3-羟基-3-甲基-丁基)-2,2-二氧代-12-螺[2.3]己-5-基-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(化合物52)
[2133][2134]
向3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(2r)-5-羟基-5-甲基-2-(螺[2.3]己-5-基氨基)己氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(100mg，0.1643mmol)于dmf(1.5000ml)和etoac(5.5000ml)中的溶液中添加tea(108.90mg，0.15ml，1.0762mmol)。将溶液冷却至0℃并缓慢添加丙基膦酸酐(乙酸乙酯中的50％溶液)(213.80mg，0.4ml，0.3360mmol)。将反应在室温下搅拌过夜并且然后在真空下去除乙酸乙酯。将dmf中的产物直接注射到反相柱上并通过反相色谱法(50g c18)使用5％至60％乙腈/水的梯度纯化，在冷冻干燥之后得到呈白色蓬松固体的(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(3-羟基-3-甲基-丁基)-2,2-二氧代-12-螺[2.3]己-5-基-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(50.1mg，51％)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ13.01(br.s.,1h),8.38(br.s.,1h),7.88(br.s.,1h),7.67(br.s.,2h),7.34-7.19(m,1h),7.19-7.06(m,2h),
6.37(br.s.,1h),5.11(dd,j＝11.1,3.8hz,1h),4.38(t,j＝11.1hz,1h),4.22(quin,j＝8.4hz,1h),4.04(s,1h),3.69-3.58(m,1h),3.31-3.17(m,2h),2.25-1.86(m,8h),1.75-1.49(m,2h),1.33-1.17(m,1h),0.90(s,6h),0.84-0.73(m,1h),0.56-0.40(m,4h)。esi-ms m/z计算值590.2563，实验值591.3(m+1)
+
；保留时间：3.97分钟，lc方法y。
[2135]
实例43：化合物53、化合物54、化合物55、化合物56、化合物57和化合物58的制备
[2136]
步骤1：3-[[4-[(2r)-2-[[3-(叔丁氧基羰基氨基)环丁基]氨基]-3-[1-(三氟甲基)环丙基]丙氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸
[2137][2138]
在200ml烧瓶中，向n-(3-氧代环丁基)氨基甲酸叔丁酯(1.25g，6.749mmol)于无水二氯甲烷(25ml)中的搅拌的溶液中添加3-[[4-[(2r)-2-氨基-3-[1-(三氟甲基)环丙基]丙氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(3.25g，5.407mmol)并在氮气下在环境温度下搅拌30分钟。然后添加三乙酰氧基硼氢化钠(3.65g，17.22mmol)并且将不均匀混合物在环境温度下搅拌4小时。将反应内容物在冰冷的盐酸(1.0m的20ml，20.00mmol)与乙酸乙酯(50ml)之间分配。将水层用乙酸乙酯(2
×
50ml)萃取。将合并的有机物用盐水(20ml)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩，得到呈棕黄色固体的粗3-[[4-[(2r)-2-[[3-(叔丁氧基羰基氨基)环丁基]氨基]-3-[1-(三氟甲基)环丙基]丙氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(4.20g，101％)。所述产物无需进一步纯化即可用于后续反应。esi-ms m/z计算值733.2757，实验值734.1(m+1)
+
；保留时间：1.34分钟，lc方法a。
[2139]
步骤2：n-[3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-2,2,13-三氧代-11-[[1-(三氟甲基)环丙基]甲基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]环丁基]氨基甲酸叔丁酯
[2140][2141]
在500ml烧瓶中，按该顺序在氮气下在环境温度下向3-[[4-[(2r)-2-[[3-(叔丁氧基羰基氨基)环丁基]氨基]-3-[1-(三氟甲基)环丙基]丙氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(4.19g，5.440mmol)于无水dmf(190ml)中的搅拌的溶液中添加[二甲基氨基(三唑并[4,5-b]吡啶-3-基氧基)亚甲基]-二甲基铵(六氟化磷离子)
(3.11g，8.179mmol)(hatu)和dipea(5.0ml，28.71mmol)。在使反应在环境温度下搅拌16小时(过夜)之后，将茶色反应在35℃(水浴温度)下在减压下浓缩并将残余物倒入冰冷的柠檬酸水溶液(10％w/v的65ml，33.83mmol)中。将产物用乙酸乙酯(3
×
100ml)萃取。将合并的有机物用盐水(30ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩。将所得褐色粗物质通过快速色谱法(330g硅胶，30分钟内0-10％甲醇/二氯甲烷)纯化，得到n-[3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-2,2,13-三氧代-11-[[1-(三氟甲基)环丙基]甲基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]环丁基]氨基甲酸叔丁酯(异构体的3:1混合物，2.78g，61％)，棕黄色固体。esi-ms m/z计算值715.26514，实验值716.1(m+1)
+
；保留时间：1.86分钟，lc方法a。
[2142]
步骤3：n-[3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-2,2,13-三氧代-11-[[1-(三氟甲基)环丙基]甲基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-12-基]环丁基]氨基甲酸叔丁酯，主要非对映异构体1(化合物54)，以及n-[3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-2,2,13-三氧代-11-[[1-(三氟甲基)环丙基]甲基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-12-基]环丁基]氨基甲酸叔丁酯，次要非对映异构体2(化合物55)
[2143][2144]
将n-[3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-2,2,13-三氧代-11-[[1-(三氟甲基)环丙基]甲基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]环丁基]氨基甲酸叔丁酯(异构体的混合物，970mg，1.152mmol)溶于dmso(12ml)中并且将溶液通过注射器过滤盘微过滤并通过制备型反相hplc(
18
)(30分钟内5-99％乙腈/水，hcl作为改性剂)纯化，提供两个异构体：主要非对映异构体1，n-[3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-2,2,13-三氧代-11-[[1-(三氟甲基)环丙基]甲基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-12-基]环丁基]氨基甲酸叔丁酯(326mg，39％)1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.33(d,j＝1.8hz,1h),7.77(d,j＝6.8hz,1h),7.47(s,2h),7.27(d,j＝7.5hz,1h),7.12(t,j＝7.6hz,1h),7.02(d,j＝7.5hz,2h),5.79(s,1h),5.02(dd,j＝10.6,4.4hz,1h),4.21-4.00(m,3h),4.00-3.86(m,1h),3.24(q,j＝9.3hz,1h),3.12(q,j＝9.4hz,1h),2.18-2.03(m,3h),2.02-1.80(m,6h),1.62-1.51(m,1h),1.40(s,9h),0.82-0.71(m,1h),0.70-0.61(m,1h),0.60-0.50(m,1h),0.41-0.24(m,1h)。esi-ms m/z计算值715.26514，实验值716.1(m+1)
+
；保留时间：1.86分钟(lc方法a)，以及次要非对映异构体2，n-[3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-2,2,13-三氧代-11-[[1-(三氟甲基)环丙基]甲基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-12-基]环丁基]氨基甲酸叔丁酯
(150mg，18％)。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ13.05(s,1h)，8.37(s,1h),7.89(s,1h),7.67(s,2h),7.25(t,j＝7.9hz,1h),7.11(d,j＝8.0hz,3h),6.37(s,1h),5.09(dd,j＝10.8,4.4hz,1h),4.35(t,j＝11.3hz,1h),4.15-3.99(m,1h),3.76-3.48(m,2h),2.76-2.57(m,2h),2.49-2.39(m,1h),2.32-1.61(m,8h),1.55(dd,j＝16.5,9.5hz,1h),1.38(s,9h),0.88-0.70(m,2h),0.71-0.49(m,2h)。esi-ms m/z计算值715.26514，实验值716.1(m+1)
+
；保留时间：1.89分钟(lc方法a)。
[2145]
步骤4：(11r)-12-(3-氨基环丁基)-6-(2,6-二甲基苯基)-2,2-二氧代-11-[[1-(三氟甲基)环丙基]甲基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-酮，主要非对映异构体1(化合物56)
[2146][2147]
在环境温度下在氮气下向n-[3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-2,2,13-三氧代-11-[[1-(三氟甲基)环丙基]甲基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-12-基]环丁基]氨基甲酸叔丁酯(主要非对映异构体1，280mg，0.3912mmol)于无水二氯甲烷(4ml)中的搅拌的溶液中添加于二噁烷中的氯化氢(4.0m的1.2ml，4.800mmol)。将浅黄色溶液在环境温度下搅拌3小时，然后在减压下浓缩。将粗物质溶于dmso(3ml)中，并且将溶液通过注射器过滤盘微过滤并通过制备型反相hplc(c
18
)(10-99％乙腈/水，30分钟，hcl作为改性剂)纯化，得到呈白色固体的(11r)-12-(3-氨基环丁基)-6-(2,6-二甲基苯基)-2,2-二氧代-11-[[1-(三氟甲基)环丙基]甲基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)(255mg，99％)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ13.03(s,1h),8.52(s,3h),8.41(s,1h),7.91(d,j＝7.4hz,1h),7.67(dt,j＝15.0,7.7hz,2h),7.26(t,j＝7.6hz,1h),7.12(d,j＝7.7hz,2h),6.41(s,1h),5.10(dd,j＝10.9,4.4hz,1h),4.74(t,j＝8.8hz,1h),4.27(t,j＝11.3hz,1h),4.14-4.00(m,1h),3.71-3.67(m,1h),3.50-3.47(m,1h),3.30(dt,j＝11.9,8.4hz,1h),3.21(dt,j＝12.3,8.4hz,1h),2.40-2.24(m,2h),2.17-1.88(m,6h),1.56(dd,j＝16.5,9.2hz,1h),0.84(dt,j＝10.9,5.4hz,1h),0.76(dd,j＝10.4,5.4hz,1h),0.67-0.54(m,1h),0.53-0.38(m,1h)。esi-ms m/z计算值615.2127,实验值616.2(m+1)
+
；保留时间：1.15分钟(lc方法a)。
[2148]
步骤5：n-[3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-2,2,13-三氧代-11-[[1-(三氟甲基)环丙基]甲基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]环丁基]氨基甲酸甲酯，主要非对映异构体1(化合物53)
[2149][2150]
在环境温度下按该顺序向(11r)-12-(3-氨基环丁基)-6-(2,6-二甲基苯基)-2,2-二氧代-11-[[1-(三氟甲基)环丙基]甲基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)(主要非对映异构体1，50mg，0.07667mmol)于无水二氯甲烷(0.8ml)中的搅拌的溶液中添加氯甲酸甲酯(10mg，0.1058mmol)于二氯甲烷(0.1ml)和diea(70μl，0.4019mmol)中的溶液。将小瓶用氮气短暂吹扫，并且将加盖的小瓶在环境温度下搅拌2小时。添加3滴甲醇，并且在减压下去除挥发物。将残余物溶于dmso(1ml)中，并且将溶液通过注射器过滤盘微过滤并通过制备型反相hplc(c
18
)使用1-99％乙腈/水(hcl作为改性剂)15分钟纯化，得到呈白色固体的n-[3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-2,2,13-三氧代-11-[[1-(三氟甲基)环丙基]甲基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]环丁基]氨基甲酸甲酯(9.7mg，19％)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ13.04(s,1h),8.37(s,1h),7.89(s,1h),7.79-7.53(m,2h),7.25(t,j＝7.8hz,1h),7.12(d,j＝7.6hz,2h),6.38(s,1h),6.26(d,j＝6.9hz,1h),5.09(dd,j＝10.9,4.4hz,1h),4.34-3.99(m,4h),3.14(q,j＝20.1,9.4hz,2h),2.27-1.82(m,9h),1.47(dd,j＝16.5,9.1hz,1h),0.89-0.71(m,2h),0.71-0.59(m,1h),0.57-0.44(m,1h)。(ome峰可能位于宽水峰下方)。esi-ms m/z计算值673.2182，实验值674.1(m+1)
+
；保留时间：1.59分钟，lc方法a。
[2151]
步骤6：(11r)-12-(3-氨基环丁基)-6-(2,6-二甲基苯基)-2,2-二氧代-11-[[1-(三氟甲基)环丙基]甲基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-酮，次要非对映异构体2(化合物57)
[2152][2153]
在环境温度下在氮气下向n-[3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-2,2,13-三氧代-11-[[1-(三氟甲基)环丙基]甲基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-12-基]环丁基]氨基甲酸叔丁酯(130mg，
0.1816mmol)于无水二氯甲烷(2ml)中的搅拌的溶液中添加于二噁烷中的氯化氢(4.0m的600μl，2.400mmol)。将溶液在环境温度下搅拌3小时，然后在减压下浓缩。将粗物质溶于dmso(2.5ml)中，并且将溶液通过注射器过滤盘微过滤并通过制备型反相hplc(c
18
)(10-99％乙腈/水，30分钟，hcl作为改性剂，大柱50
×
100mm，一次注射)纯化，得到呈白色固体的(11r)-12-(3-氨基环丁基)-6-(2,6-二甲基苯基)-2,2-二氧代-11-[[1-(三氟甲基)环丙基]甲基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)(118mg，97％)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ13.04(s,1h),8.85-8.08(m,4h),7.91(d,j＝7.5hz,1h),7.84-7.55(m,2h),7.26(t,j＝7.6hz,1h),7.12(d,j＝7.6hz,2h),6.37(s,1h),5.13(dd,j＝10.9,4.4hz,1h),4.30(t,j＝11.3hz,1h),4.15-3.99(m,1h),3.78(t,j＝8.4hz,1h),3.07-2.86(m,2h),2.58(d,j＝9.0hz,2h),2.32-1.67(m,7h),1.56(dd,j＝16.6,9.3hz,1h),0.93-0.69(m,2h),0.69-0.45(m,2h)。(可能位于宽水峰下方的脂肪族质子之一)esi-ms m/z计算值615.2127，实验值616.1(m+1)
+
；保留时间：1.18分钟(lc方法a)。
[2154]
步骤7：n-[3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-2,2,13-三氧代-11-[[1-(三氟甲基)环丙基]甲基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]环丁基]氨基甲酸甲酯，次要非对映异构体2(化合物58)
[2155][2156]
在环境温度下按该顺序向(11r)-12-(3-氨基环丁基)-6-(2,6-二甲基苯基)-2,2-二氧代-11-[[1-(三氟甲基)环丙基]甲基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)(6mg，0.009201mmol)于无水二氯甲烷(0.5ml)中的搅拌的溶液中添加氯甲酸甲酯(1mg，0.01058mmol)于二氯甲烷(0.1ml)和吡啶(5μl，0.06182mmol)中的溶液。将小瓶用氮气短暂吹扫，并且将加盖的小瓶在环境温度下搅拌1小时。添加3滴甲醇并且在减压下去除挥发物。将残余物溶于dmso(1ml)中并且将溶液通过whatman 0.45um ptfe注射器过滤盘微过滤并通过制备型反相hplc(c
18
)使用1-99％乙腈/水(hcl作为改性剂)纯化15分钟。将期望的级分在genevac中干燥以提供呈白色固体的n-[3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-2,2,13-三氧代-11-[[1-(三氟甲基)环丙基]甲基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]环丁基]氨基甲酸甲酯(2.7mg，43％)。esi-ms m/z计算值673.2182，实验值674.1(m+1)
+
；保留时间：1.63分钟(lc方法a)。
[2157]
实例44：化合物59的制备
[2158]
步骤6：n-[3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-2,2,13-三氧代-11-[[1-(三氟甲基)环丙基]甲基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]环丁基]氨基甲酸异丙酯(化合物59)
[2159][2160]
在环境温度下按该顺序向(11r)-12-(3-氨基环丁基)-6-(2,6-二甲基苯基)-2,2-二氧代-11-[[1-(三氟甲基)环丙基]甲基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)(主要非对映异构体1，60mg，0.09201mmol)于无水二氯甲烷(0.8ml)中的搅拌的溶液中添加氯甲酸异丙酯(30％w/w的50mg，0.1224mmol)于二氯甲烷(0.1ml)和diea(100μl，0.5741mmol)中的溶液。将小瓶用氮气短暂吹扫，并且将加盖的小瓶在环境温度下搅拌2小时。添加3滴甲醇，并且在减压下去除挥发物。将残余物溶于dmso(1ml)中，并且将溶液通过注射器过滤盘微过滤并通过制备型反相hplc(c
18
)使用乙腈/水的梯度(1至99％15分钟hcl作为改性剂)纯化，得到呈白色固体的n-[3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-2,2,13-三氧代-11-[[1-(三氟甲基)环丙基]甲基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]环丁基]氨基甲酸异丙酯(18mg，28％)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ13.02(s,1h),8.36(s,1h),7.89(s,1h),7.78-7.56(m,2h),7.42(d,j＝7.1hz,1h),7.25(d,j＝8.7hz,1h),7.12(s,2h),6.38(s,1h),5.07(d,j＝10.4hz,1h),4.76(hept,j＝6.2hz,1h),4.25-4.05(m,4h),3.78-3.65(m,2h),3.66-3.58(m,1h),3.23-3.05(m,2h),2.21-2.05(m,5h),2.02-1.87(m,3h),1.46(dd,j＝16.5,9.1hz,1h),1.18(d,j＝6.2hz,4h),0.87-0.70(m,2h),0.69-0.57(m,1h),0.56-0.43(m,1h)。esi-ms m/z计算值701.2495，实验值702.1(m+1)
+
；保留时间：1.76分钟(lc方法a)。
[2161]
实例45：化合物60的制备
[2162]
步骤3：n-[3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-2,2,13-三氧代-11-[[1-(三氟甲基)环丙基]甲基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]环丁基]氨基甲酸异丙酯，次要非对映异构体2(化合物60)
[2163][2164]
在环境温度下按该顺序向(11r)-12-(3-氨基环丁基)-6-(2,6-二甲基苯基)-2,2-二氧代-11-[[1-(三氟甲基)环丙基]甲基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)(次要非对映异构体2，12mg，0.01840mmol)于无水二氯甲烷(0.5ml)中的搅拌的溶液中添加氯甲酸异丙酯(30％w/w的11mg，0.02693mmol)于二氯甲烷(0.1ml)和diea(20μl，0.1148mmol)中的溶液。将小瓶用氮气短暂吹扫并将加盖的小瓶在环境温度下搅拌40分钟。然后添加3滴甲醇并将挥发物在减压下去除。将残余物溶于dmso(1ml)中，并且将溶液通过注射器过滤盘微过滤并通过制备型反相hplc(c
18
)使用乙腈/水的梯度(1至99％15分钟hcl作为改性剂)纯化，得到呈白色固体的n-[3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-2,2,13-三氧代-11-[[1-(三氟甲基)环丙基]甲基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]环丁基]氨基甲酸酯(4.4mg，34％)。esi-ms m/z计算值701.2495，实验值702.1(m+1)
+
；保留时间：1.8分钟(lc方法a)。
[2165]
实例46：化合物61的制备
[2166]
步骤1：(11r)-12-[3-(二甲基氨基)环丁基]-6-(2,6-二甲基苯基)-2,2-二氧代-11-[[1-(三氟甲基)环丙基]甲基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-酮，主要非对映异构体1(化合物61)
[2167][2168]
在4ml小瓶中，在环境温度下按该顺序向固体(11r)-12-(3-氨基环丁基)-6-(2,6-二甲基苯基)-2,2-二氧代-11-[[1-(三氟甲基)环丙基]甲基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)(主要非对映异构体1，10mg，0.01518mmol)中添加甲醛(0.25ml，9.075mmol)和甲酸(0.20ml，5.301mmol)。在氮气下将螺旋盖小瓶加盖并在95℃下搅拌16小时(过夜)。使反应混合物冷却至室温，并用甲醇(0.2ml)和dmso(0.5ml)稀释，微过滤并通过制备型反相hplc(c
18
柱，1-70％乙腈/水，hcl改性剂，15分钟运行)纯化，得到呈白色固体的(11r)-12-[3-(二甲基氨
基)环丁基]-6-(2,6-二甲基苯基)-2,2-二氧代-11-[[1-(三氟甲基)环丙基]甲基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)(6mg，58％).1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ13.0(s,1h),8.41(s,1h),7.95-7.84(m,1h),7.76-7.59(m,2h),7.24(d,j＝7.7hz,1h),7.12(d,j＝7.6hz,2h),6.36(s,1h),5.08(d,j＝9.2hz,1h),4.32-4.13(m,2h),4.12-4.01(m,1h),3.30(s,3h),3.03(s,3h),2.21-2.06(m,4h),2.05-1.77(m,6h),1.48(dd,j＝16.3,8.7hz,2h),0.87-0.80(m,2h),0.78-0.72(m,1h),0.67-0.57(m,1h),0.57-0.45(m,1h)。esi-ms m/z计算值643.244，实验值644.2(m+1)
+
；保留时间：1.18分钟(lc方法a)。
[2169]
实例47：化合物62的制备
[2170]
步骤1：6-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]吡嗪-2-羧酸甲酯
[2171][2172]
将4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-胺(4.15g，17.758mmol)溶解于methf(25ml)中并在冰浴中冷却。在0℃下添加于methf(25ml)中的6-氯磺酰基吡嗪-2-羧酸甲酯(13.64g，57.642mmol)。向冷溶液中滴加叔丁醇锂(3.1m的17ml，52.700mmol)(于庚烷中)。将冰浴去除，并且将混合物在室温下搅拌3小时。添加1n盐酸水溶液(50ml)并将相分离。将水相用methf(50ml)萃取，并且将有机相合并，用盐水(50ml)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将残余物通过330g柱上的硅胶柱色谱法纯化，用0％至30％的乙酸乙酯/庚烷洗脱，得到呈类白色固体的6-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]吡嗪-2-羧酸甲酯(4.85g，18％)。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ9.58(s,1h),9.44(s,1h),7.23-7.17(m,1h),7.06(d,j＝7.9hz,2h),6.91(s,1h),4.03(s,3h),1.95(s,6h)。esi-ms m/z计算值433.06116，实验值434.1(m+1)
+
；保留时间：1.98分钟；lc方法k。
[2173]
步骤2：6-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]吡嗪-2-羧酸
[2174][2175]
将6-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]吡嗪-2-羧酸甲酯(4.85g，10.136mmol)于thf(125ml)和水(125ml)中的混合物用氢氧化锂一水合物(1.3g，30.979mmol)处理并在室温下剧烈搅拌3小时。添加1n氢氧化钠水溶液(125ml)并用乙醚(125ml)和2-methf(125ml)萃取。将水相用3n盐酸水溶液酸化至ph《3并且用乙酸乙酯(3
×
125ml)萃取。将合并的有机层用盐水(125ml)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩，得到呈黄色固体的6-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]吡嗪-2-羧酸(4.4g，87％).1h nmr(300mhz,dmso-d6)δ13.55-12.73(m,2h),9.34(s,1h),9.32(s,1h),7.30(s,1h),7.26-7.16(m,1h),7.07(d,j＝7.6hz,2h),1.82(s,6h)。esi-ms m/z计算值419.0455，实验值420.1(m+1)
+
；保留时间：2.59分钟；lc方法u。
[2176]
步骤3：6-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(2r)-4-甲基-2-(螺[2.3]己-5-基氨基)戊
氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]吡嗪-2-羧酸
[2177][2178]
在100ml烧瓶中，在氮气下将6-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]吡嗪-2-羧酸(272mg，0.6479mmol)和(2r)-4-甲基-2-(螺[2.3]己-5-基氨基)戊烷-1-醇(盐酸盐)(153mg，0.6545mmol)与无水thf(2ml)(悬浮液)一起装入。添加叔丁醇钠(272mg，2.830mmol)(轻微放热)。反应变成稠密的凝胶。添加更多thf(2ml)并且将悬浮液在室温下搅拌5.5小时。将混合物在乙酸乙酯(30ml)与1m hcl水溶液(30ml)和盐水(20ml)之间分配。在分离之后，将水相用etoac(2
×
30ml)进一步萃取。将合并的萃取物经硫酸钠干燥，并且将溶剂蒸发，得到粗物质。将物质溶解于dmso(3ml)中。将溶液通过注射器过滤盘微过滤并通过反相制备型hplc(c
18
)使用乙腈/水的梯度(15分钟内1至99％)和hcl作为改性剂纯化。蒸发得到呈类白色固体的6-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(2r)-4-甲基-2-(螺[2.3]己-5-基氨基)戊氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]吡嗪-2-羧酸(盐酸盐)(141mg，35％)。esi-ms m/z计算值580.24677，实验值581.77(m+1)
+
；保留时间：1.26分钟(lc方法a)。
[2179]
步骤4：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-12-螺[2.3]己-5-基-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,16,18,19-六氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(化合物62)
[2180][2181]
在氮气下向20ml烧瓶中装入hatu(199mg，0.5234mmol)、无水dmf(9ml)和diea(0.22ml，1.263mmol)。通过注射器在4分钟的时间段内滴加6-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(2r)-4-甲基-2-(螺[2.3]己-5-基氨基)戊氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]吡嗪-2-羧酸(盐酸盐)(141mg，0.2285mmol)于无水dmf(6ml)中的溶液。将混合物在室温下搅拌12小时。将混合物浓缩并用dmso(2ml)稀释。将溶液通过注射器过滤盘微过滤并通过反相制备型hplc(c
18
)使用乙腈/水的梯度(15分钟内1至99％)和hcl作为改性剂纯化。蒸发得到在dcm/己烷中研磨的残余物。溶剂的蒸发得到呈类白色固体的(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-12-螺[2.3]己-5-基-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,16,18,19-六氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(85mg，65％)。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ13.26(宽s,1h),9.23(s,1h),9.09(s,1h),7.29(t,j＝7.6hz,1h),7.15(d,j＝7.7hz,2h),6.41(s,1h),5.55(dd,j＝9.7,4.7hz,1h),4.33(p,j＝8.6hz,1h),4.26
(t,j＝10.6hz,1h),3.51(tt,j＝11.1,4.1hz,1h),3.33-3.30(m,1h与水重叠),2.31-1.88(m,8h),1.72(ddd,j＝14.2,10.7,3.2hz,1h),1.45-1.33(m,1h),1.30-1.15(m,2h),0.75(d,j＝6.6hz,3h),0.57-0.50(m,2h),0.50-0.42(m,2h),0.33(d,j＝6.4hz,3h)。esi-ms m/z计算值562.2362，实验值563.33(m+1)
+
；保留时间：1.96分钟(lc方法a)。
[2182]
实例48：化合物63的制备
[2183]
步骤1：(11r)-12-(3-氨基环丁基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮，立体异构体1和2
[2184][2185]
将3-[[4-[(2r)-2-氨基-4-甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(300mg，0.5607mmol)与n-(3-氧代环丁基)氨基甲酸叔丁酯(155mg，0.8368mmol)在二氯甲烷(1ml)中合并，并在室温下搅拌10分钟，此时起始材料几乎完全溶解。添加三乙酰氧基硼氢化钠(350mg，1.651mmol)，并且将反应在室温下搅拌1小时。添加另外部分三乙酰氧基硼氢化钠(350mg，1.651mmol)，并且将反应在室温下再搅拌一小时。然后将反应混合物在0.5m hcl与乙酸乙酯之间分配。将水层用乙酸乙酯再萃取三次。将合并的有机物用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到粗3-[[4-[(2r)-2-[[3-(叔丁氧基羰基氨基)环丁基]氨基]-4-甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸，其无需进一步纯化即可用于下一阶段。esi-ms m/z计算值667.30396，实验值668.5(m+1)
+
；保留时间：0.53分钟；lc方法d。
[2186]
将产物与hatu(320mg，0.8416mmol)在dmf(25ml)中合并，并且添加dipea(490μl，2.813mmol)。将反应混合物在室温下搅拌6小时。然后将反应混合物在1m hcl与乙酸乙酯之间分配。将层分离，并且将水层用乙酸乙酯再萃取三次。将合并的有机物用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。将所得粗物质通过反相色谱法(1-99％ acn/水，hcl改性剂，初始浅梯度-在两次运行之间分离)纯化，分别得到环丁烷环的两个异构构象立体异构体1(首次洗脱)，n-[3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]环丁基]氨基甲酸叔丁酯(24mg，7％)，esi-ms m/z计算值649.2934，实验值650.3(m+1)
+
；保留时间：0.76分钟；lc方法a；以及立体异构体2，n-[3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]环丁基]氨基甲酸叔丁酯(21mg，6％)，esi-ms m/z计算值649.2934，实验值650.3(m+1)
+
；保留时间：0.78分钟；lc方法d
[2187]
将上述分别分离的产物分别溶解于二氯甲烷(0.25ml)中并添加hcl(4m的200μl，0.8000mmol)。在室温下搅拌45分钟之后，将反应混合物浓缩，得到白色固体(11r)-12-(3-氨基环丁基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,
19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)(22mg，7％)，立体异构体1，esi-ms m/z计算值549.24097，实验值550.5(m+1)
+
；保留时间：0.5分钟；lc方法d；以及(11r)-12-(3-氨基环丁基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)(11mg，3％)(立体异构体2)，esi-ms m/z计算值549.24097，实验值550.5(m+1)
+
；保留时间：0.48分钟；lc方法d。
[2188]
步骤2：n-{3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2-甲基丙基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-12-基]环丁基}氨基甲酸丙烷-2-基酯(化合物63)
[2189][2190]
将(11r)-12-(3-氨基环丁基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)(11mg，0.01877mmol)(立体异构体1)溶解于dcm(0.5ml)中，并且依次添加dipea(大约12.13mg，16.35μl，0.09385mmol)和氯甲酸异丙酯(大约2m的18.77μl，0.03754mmol)。将反应混合物在室温下搅拌15分钟，然后用两滴1m hcl淬灭并部分浓缩。将所得粗溶解于1:1甲醇/dmso中，过滤并通过反相hplc(1-99％acn/水，hcl改性剂，15分钟运行)纯化，得到指定的n-{3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2-甲基丙基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-12-基]环丁基}氨基甲酸丙烷-2-基酯(7.5mg，63％)。esi-ms m/z计算值635.2778，实验值636.4(m+1)
+
；保留时间：1.79分钟；lc方法a。
[2191]
实例49：化合物64的制备
[2192]
步骤1：n-{3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2-甲基丙基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-12-基]环丁基}氨基甲酸丙烷-2-基酯(立体异构体化合物64和65)
[2193][2194]
将(11r)-12-(3-氨基环丁基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)(5mg，0.008530mmol)(立体异构体2)溶解于dcm(0.5ml)中，并且依次
添加dipea(大约5.512mg，7.429μl，0.04265mmol)和氯甲酸异丙酯(大约2m的8.530μl，0.01706mmol)。将反应混合物在室温下搅拌15分钟，然后用两滴1m hcl淬灭并部分浓缩。将所得粗溶解于1:1甲醇/dmso中，过滤并通过反相hplc(1-99％acn/水，hcl改性剂，15分钟运行)纯化，得到指定的n-{3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2-甲基丙基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-己烯-12-基]环丁基}氨基甲酸丙烷-2-基酯(1.6mg，29％)。esi-ms m/z计算值635.2778，实验值636.4(m+1)
+
；保留时间：1.83分钟；lc方法a。
[2195]
实例50：化合物65和66的制备
[2196]
步骤1：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-12-(3-氧代环丁基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮
[2197][2198]
在0-5℃(冰水浴)下在氮气下向(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-12-(3-羟基环丁基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-酮(1.56g，2.833mmol)于无水二氯甲烷(20ml)中的搅拌的溶液中添加(1,1-二乙酰氧基-3-氧代-1λ5,2-苯碘酰-1-基)乙酸酯(1.445g，3.407mmol)(戴斯-马丁过碘烷)。在30分钟之后，使反应温热至环境温度，并继续搅拌14小时(过夜)。将反应用乙醚(100ml)稀释并且非常缓慢地添加饱和碳酸氢钠水溶液(30ml)(以减少co2气体释放)。然后添加10％硫代硫酸钠(25ml)并在环境温度下搅拌20分钟。将层分离，并且将水层用乙醚(2
×
30ml)萃取。将合并的有机物用盐水(30ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩，获得粗物质，将所述粗物质通过硅胶色谱法(120g硅胶柱，30分钟内5-60％ etoac/己烷)纯化，获得呈类白色固体的(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-12-(3-氧代环丁基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(1.51g，97％)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ13.0(宽s,1h),8.47(s,1h),7.86(s,1h),7.59(s,2h),7.19(s,1h),7.07(d,j＝7.7hz,2h),6.13(s,1h),5.23-5.10(m,1h),4.42-4.29(m,1h),4.28-4.10(m,1h),3.99-3.84(m,1h),3.73-3.57(m,2h),3.36(d,j＝3.5hz,1h),1.99(s,6h),1.66(t,j＝12.3hz,1h),1.35-1.20(m,2h),0.97-0.78(m,1h),0.70(d,j＝6.4hz,3h),0.18(d,j＝6.2hz,3h)。esi-ms m/z计算值548.20935，实验值549.0(m+1)
+
；保留时间：1.59分钟(lc方法a)。
[2199]
步骤2：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-12-[3-(3-甲基氮杂环丁烷-1-基)环丁基]-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(化合物65)
[2200][2201]
在4ml小瓶中，按该顺序向3-甲氧基氮杂环丁烷(盐酸盐)(10mg，0.08092mmol)于无水二氯甲烷(0.4ml)中的搅拌的混合物中添加(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-12-(3-氧代环丁基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(30mg，0.05468mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(50mg，0.2359mmol)。将小瓶用氮气短暂吹扫，并且将加盖的不均匀混合物在环境温度下搅拌5小时。然后向反应中添加水(0.1ml)和甲醇(0.3ml)并用dmso(1ml)稀释，微过滤并通过反相hplc(c
18
柱，5-70％乙腈/水，hcl改性剂，15分钟运行)纯化，得到呈白色固体的期望的(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-12-[3-(3-甲氧基氮杂环丁烷-1-基)环丁基]-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)(15mg，32％)。esi-ms m/z计算值619.28284，实验值620.2(m+1)
+
；保留时间：1.28分钟；lc方法a。
[2202]
步骤3：(11r)-12-[3-[3-(二甲基氨基)氮杂环丁烷-1-基]环丁基]-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(化合物66)
[2203][2204]
在4ml小瓶中，按该顺序向n,n-二甲基氮杂环丁烷-3-胺(二盐酸盐)(13mg，0.07511mmol)于无水二氯甲烷(0.4ml)中的搅拌的混合物中添加(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-12-(3-氧代环丁基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(30mg，0.05468mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(50mg，0.2359mmol)。将小瓶用氮气短暂吹扫，并且将加盖的不均匀混合物在环境温度下搅拌5小时。然后向反应中添加水(0.1ml)和甲醇(0.3ml)并且用dmso(1ml)稀释，微过滤并通过制备型反相hplc(c
18
柱，5-70％乙腈/水，hcl改性剂，15分钟运行)纯化，得到呈白色固体的(11r)-12-[3-[3-(二甲基氨基)氮杂环丁烷-1-基]环丁基]-6-(2,6-二
甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(二盐酸盐)(19mg，46％)。esi-ms m/z计算值632.31445，实验值633.2(m+1)
+
；保留时间：1.06分钟(lc方法a)。
[2205]
实例51：化合物67的制备
[2206]
步骤1：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-12-[3-[3-羟丙基(甲基)氨基]环丁基]-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(化合物67)
[2207][2208]
在4ml小瓶中，按该顺序向3-(甲氨基)丙烷-1-醇(8mg，0.08975mmol)于无水二氯甲烷(0.4ml)中的搅拌的溶液中添加(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-12-(3-氧代环丁基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(30mg，0.05468mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(50mg，0.2359mmol)。将小瓶用氮气短暂吹扫，并且将加盖的不均匀混合物在环境温度下搅拌3小时。然后向反应中添加水(0.1ml)和甲醇(0.3ml)并用dmso(1ml)稀释，微过滤并通过反相hplc(c
18
柱，5-70％乙腈/水，hcl改性剂，15分钟运行)纯化，得到呈白色固体的(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-12-[3-[3-羟丙基(甲基)氨基]环丁基]-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)(17mg，46％)。esi-ms m/z计算值621.29846，实验值622.2(m+1)
+
；保留时间：1.21分钟(lc方法a)。
[2209]
实例52：化合物68的制备
[2210]
步骤1：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-12-[3-[甲基-[(1r)-2,2,2-三氟-1-甲基-乙基]氨基]环丁基]-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(化合物68)
[2211][2212]
在4ml小瓶中，按该顺序向(2r)-1,1,1-三氟-n-甲基-丙烷-2-胺(盐酸盐)(12mg，0.07336mmol)于无水二氯甲烷(0.5ml)中的搅拌的溶液中添加(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-12-(3-氧代环丁基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三
环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(25mg，0.04557mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(40mg，0.1887mmol)。将小瓶用氮气短暂吹扫，并且将加盖的不均匀混合物在环境温度下搅拌3小时。然后向反应中添加水(0.1ml)和甲醇(0.3ml)并用dmso(1ml)稀释，微过滤并通过制备型反相hplc(c
18
柱，5-70％乙腈/水，hcl改性剂，15分钟运行)纯化，得到呈白色固体获得的(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-12-[3-[甲基-[(1r)-2,2,2-三氟-1-甲基-乙基]氨基]环丁基]-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)(6mg，19％)。esi-ms m/z计算值659.2753，实验值660.2(m+1)
+
；保留时间：1.63分钟(lc方法a)。
[2213]
实例53：化合物69的制备
[2214]
步骤1：(11r)-12-[3-[3,3-二甲基丁基(甲基)氨基]环丁基]-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(化合物69)
[2215][2216]
在4ml小瓶中，按该顺序向n,3,3-三甲基丁-1-胺(二盐酸盐)(12mg，0.07912mmol)于无水二氯甲烷(0.5ml)中的搅拌的溶液中添加(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-12-(3-氧代环丁基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(25mg，0.04557mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(40mg，0.1887mmol)。将小瓶用氮气短暂吹扫，并且将加盖的不均匀混合物在环境温度下搅拌3小时。然后向反应中添加水(0.1ml)和甲醇(0.3ml)并且用dmso(1ml)稀释，微过滤并通过制备型反相hplc(c
18
柱，5-70％乙腈/水，hcl改性剂，15分钟运行)纯化，得到呈白色固体的(11r)-12-[3-[3,3-二甲基丁基(甲基)氨基]环丁基]-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)(4mg，13％)。esi-ms m/z计算值647.3505，实验值648.3(m+1)
+
；保留时间：1.52分钟(lc方法a)。
[2217]
实例54：化合物70的制备
[2218]
步骤1：(11r)-12-[3-[(4,4-二甲基环己基)氨基]环丁基]-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(化合物70)
[2219][2220]
在4ml小瓶中，按该顺序向4,4-二甲基环己胺(9mg，0.07074mmol)于无水二氯甲烷(0.5ml)中的搅拌的溶液中添加(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-12-(3-氧代环丁基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(25mg，0.04557mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(40mg，0.1887mmol)。将小瓶用氮气短暂吹扫，并且将加盖的不均匀混合物在环境温度下搅拌3小时。然后向反应中添加水(0.1ml)和甲醇(0.3ml)并且用dmso(1ml)稀释，微过滤并通过制备型反相hplc(c
18
柱，5-70％乙腈/水，hcl改性剂，15分钟运行)纯化，得到呈白色固体的(11r)-12-[3-[(4,4-二甲基环己基)氨基]环丁基]-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)(6mg，19％)。esi-ms m/z计算值659.3505，实验值660.2(m+1)
+
；保留时间：1.57分钟(lc方法a)。
[2221]
实例55：化合物71的制备
[2222]
步骤1：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-12-[3-(四氢吡喃-4-基氨基)环丁基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(化合物71)
[2223][2224]
在4ml小瓶中，按该顺序向四氢吡喃-4-胺(8mg，0.07909mmol)于无水二氯甲烷(0.5ml)中的搅拌的溶液中添加(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-12-(3-氧代环丁基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(25mg，0.04557mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(40mg，0.1887mmol)。将小瓶用氮气短暂吹扫，并且将加盖的不均匀混合物在环境温度下搅拌3小时。然后向反应中添加水(0.1ml)和甲醇(0.3ml)并用dmso(1ml)稀释，微过滤并通过制备型反相hplc(c
18
柱，5-70％乙腈/水，hcl改性剂，15分钟运行)纯化，得到呈白色固体获得的(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-12-[3-(四氢吡喃-4-基氨基)环丁基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,
14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)(4mg，13％)。esi-ms m/z计算值633.29846，实验值634.2(m+1)
+
；保留时间：1.25分钟(lc方法a)。
[2225]
实例56：化合物72的制备
[2226]
步骤1：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-12-[3-(1,1-二氧代-1,4-噻嗪烷-4-基)环丁基]-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(化合物72)
[2227][2228]
在4ml小瓶中，按该顺序向(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-12-(3-氧代环丁基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(22mg，0.04010mmol)于无水二氯甲烷(0.3ml)中的搅拌的溶液中添加1,4-噻嗪烷1,1-二氧化物(8mg，0.05918mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(35mg，0.1651mmol)。将小瓶用氮气短暂吹扫，并且将加盖的不均匀混合物在环境温度下搅拌3小时。然后向反应中添加水(0.1ml)和甲醇(0.3ml)并用dmso(1ml)稀释，微过滤并通过制备型反相hplc(c
18
柱，5-70％乙腈/水，hcl改性剂，15分钟运行)纯化，得到呈白色固体的(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-12-[3-(1,1-二氧代-1,4-噻嗪烷-4-基)环丁基]-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)(20mg，70％).1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.43(s,1h),7.92(s,1h),7.68(s,2h),7.26(t,j＝7.6hz,1h),7.12(d,j＝7.8hz,2h),6.39(s,1h),5.18(d,j＝10.3hz,1h),4.36(t,j＝11.1hz,1h),3.78-3.66(m,2h),3.06-2.88(m,4h),2.49-2.42(m,4h),2.19-1.79(m,8h),1.66(t,j＝12.5hz,2h),1.40-1.22(m,2h),1.17(t,j＝11.1hz,2h),0.76(d,j＝6.5hz,3h),0.23(d,j＝6.3hz,3h)。esi-ms m/z计算值667.2498，实验值668.2(m+1)
+
；保留时间：1.29分钟(lc方法a)。
[2229]
实例57：化合物73的制备
[2230]
步骤1：(11r)-12-[3-(1-双环[1.1.1]戊氨基)环丁基]-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(化合物73)
[2231]
[2232]
在4ml小瓶中，按该顺序向(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-12-(3-氧代环丁基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(22mg，0.04010mmol)于无水二氯甲烷(0.3ml)中的搅拌的溶液中添加双环[1.1.1]戊烷-1-胺(盐酸盐)(7mg，0.05853mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(35mg，0.1651mmol)。将小瓶用氮气短暂吹扫，并且将加盖的不均匀混合物在环境温度下搅拌3小时。然后向反应中添加水(0.1ml)和甲醇(0.3ml)并且用dmso(1ml)稀释，微过滤并通过制备型反相hplc(c
18
柱，5-70％乙腈/水，hcl改性剂，15分钟运行)纯化，得到呈白色固体获得的(11r)-12-[3-(1-双环[1.1.1]戊氨基)环丁基]-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)(18mg，66％)。esi-ms m/z计算值615.2879，实验值616.2(m+1)
+
；保留时间：1.34分钟；1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ13.07(s,1h),9.76(s,2h),8.47(s,1h),7.93(s,1h),7.70(s,2h),7.27(t,j＝7.7hz,1h),7.13(d,j＝7.6hz,2h),6.39(s,1h),5.20(dd,j＝10.9,4.1hz,1h),4.29(t,j＝11.2hz,1h),3.89(p,j＝8.5hz,1h),3.79-3.67(m,1h),3.43(t,j＝7.8hz,1h),3.10-2.97(m,2h),2.68(s,1h),2.61(t,j＝8.3hz,2h),2.18-2.00(m,9h),1.97(s,3h),1.63(t,j＝12.0hz,1h),1.35-1.13(m,2h),0.75(d,j＝6.4hz,3h),0.25(d,j＝6.1hz,3h)。esi-ms m/z计算值615.2879，实验值616.2(m+1)
+
；保留时间：1.34分钟(lc方法a)。
[2233]
实例58：化合物74的制备
[2234]
步骤1：3-硝基-1h-吡唑-5-羧酸乙酯
[2235][2236]
在室温下向3-硝基-1h-吡唑-5-羧酸(25g，159.15mmol)于etoh(250ml)中的溶液中缓慢添加乙酰氯(37.536g，34ml，478.18mmol)。将混合物在回流下搅拌4小时。将混合物浓缩并与etoh(100ml)和1,4-二噁烷(50ml)共蒸发，得到呈类白色固体的3-硝基-1h-吡唑-5-羧酸乙酯(30g，100％)。esi-ms m/z计算值185.0437，实验值186.1(m+1)
+
；保留时间：1.58分钟。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ7.41(s,1h),4.47(q,j＝7.0hz,2h),1.43(t,j＝7.0hz,3h),1.25(s,1h)，lc方法k。
[2237]
步骤2：2-甲基-5-硝基-吡唑-3-羧酸乙酯
[2238][2239]
在0℃下在15分钟内向3-硝基-1h-吡唑-5-羧酸乙酯(29.6g，154.61mmol)于dmf(200ml)中的溶液中滴加碳酸钾(44.2g，319.81mmol)和碘甲烷(34.200g，15ml，240.95mmol)。将混合物在室温下搅拌过夜。将混合物用冰水浴冷却并且添加冷水(600ml)。将沉淀通过过滤收集并用冷水洗涤。将所得沉淀溶解于etoac(200ml)中，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩至干燥，得到呈浅橙色固体的2-甲基-5-硝基-吡唑-3-羧酸乙酯(24.55g，78％)。1h nmr(400mhz,cdcl3)δ7.41(s,1h),4.42(q,j＝7.3hz,2h),4.29(s,3h),1.42(t,j＝7.2hz,3h)。esi-ms m/z计算值199.0593，实验值200.2(m+1)
+
；保留时间：1.66分钟(lc方法x)。
[2240]
步骤3：5-氨基-2-甲基-吡唑-3-羧酸乙酯
[2241][2242]
将2-甲基-5-硝基-吡唑-3-羧酸乙酯(24.74g，124.22mmol)、10％钯/炭50％湿重(8g，3.7587mmol)和meoh(250ml)的混合物在氢气(气球)下氢化24小时。将混合物通过硅藻土过滤并用etoac洗涤。将滤液浓缩，得到呈白色固体的5-氨基-2-甲基-吡唑-3-羧酸乙酯(20.88g，99％)。esi-ms m/z计算值169.0851，实验值170.1(m+1)
+
；保留时间：1.33分钟。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ6.13(s,1h),4.30(q,j＝7.1hz,2h),3.99(s,3h),3.62(br.s.,2h),1.35(t,j＝7.0hz,3h)。lc方法k。
[2243]
步骤4：5-氯磺酰基-2-甲基-吡唑-3-羧酸乙酯
[2244][2245]
向500ml三颈烧瓶中装入水(200ml)并用冰水浴冷却。在20分钟内滴加亚硫酰氯(66.055g，40.5ml，555.22mmol)。将混合物在室温下搅拌2小时。添加氯化铜(i)(800mg，8.0809mmol)并将混合物冷却至-5℃。向另一个250ml烧瓶中装入盐酸溶液(37wt％)(12m的120ml，1.4400mol)并添加5-氨基-2-甲基-吡唑-3-羧酸乙酯(20.23g，107.38mmol)。将混合物冷却至-5℃并在30分钟内滴加亚硝酸钠(9.26g，134.21mmol)于水(50ml)中的溶液，保持内部温度在-6℃与-3℃之间。将混合物在-5℃下搅拌30分钟，冷却至-10℃并缓慢(约25分钟)制成第一溶液。将所得混合物在0-5℃(冰水浴)下搅拌90分钟。添加更多氯化铜(i)(270mg，2.7273mmol)并将所得混合物在0-5℃(冰水浴)下搅拌1小时。将混合物用乙酸乙酯(2
×
200ml)萃取，将有机层用硫酸钠干燥，过滤并浓缩至干燥。将粗物质通过硅胶快速色谱法(120g硅胶+100g)分两等批纯化，用0％至20％乙酸乙酯/庚烷洗脱，得到呈无色油的5-氯磺酰基-2-甲基-吡唑-3-羧酸乙酯(12.1g，43％)。1h nmr(400mhz,cdcl3)δ7.40(s,1h),4.42(q,j＝7.1hz,2h),4.33(s,3h),1.42(t,j＝7.1hz,3h)。esi-ms m/z计算值251.9972，实验值253.0(m+1)
+
；保留时间：4.03分钟(lc方法y)。
[2246]
步骤5：5-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]-2-甲基-吡唑-3-羧酸乙酯
[2247][2248]
在0℃下，向4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-胺(4.8g，20.539mmol)于thf(140ml)中的溶液中添加5-氯磺酰基-2-甲基-吡唑-3-羧酸乙酯(6.13g，23.217mmol)，随后滴加于甲苯中的叔丁醇钠(40％w/v的13.9ml，50.486mmol)。将混合物在室温下搅拌1.5小时。将混合物缓慢倒入0℃的1n hcl水溶液(50ml)中。将混合物用水100ml稀释并用etoac(3
×
100ml)萃取。将合并的有机层经硫酸钠干燥，过滤并浓缩至干燥。将粗物质通过硅胶快速色谱法(330g)纯化，用5％至30％乙酸乙酯/庚烷和100％乙酸乙酯洗脱，得到呈白色固体的
5-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]-2-甲基-吡唑-3-羧酸乙酯(6.77g，72％)。1h nmr(400mhz,cdcl3)δ7.95(br.s.,1h),7.49(s,1h),7.23(t,j＝8.1hz,1h),7.09(d,j＝7.6hz,2h),6.94(s,1h),4.36(q,j＝7.3hz,2h),4.24(s,3h),2.03(s,6h),1.37(t,j＝7.2hz,3h)。esi-ms m/z计算值449.0925，实验值450.2(m+1)
+
；保留时间：4.42分钟(lc方法(lc方法a))。
[2249]
步骤6：5-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]-2-甲基-吡唑-3-羧酸
[2250][2251]
在0℃下向5-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]-2-甲基-吡唑-3-羧酸乙酯(7.62g，16.598mmol)于thf(220ml)中的溶液中添加naoh(2.7g，67.505mmol)于水(50ml)中的溶液并将混合物搅拌20分钟。将混合物浓缩以去除thf，用水(100ml)稀释并用乙酸乙酯(2
×
100ml)洗涤；将合并的有机层丢弃。将水层冷却至0℃，用1n hcl水溶液酸化至ph 3-4并用乙酸乙酯(3
×
150ml)萃取。将合并的有机层经硫酸钠干燥，过滤并浓缩至干燥，得到呈白色固体的5-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]-2-甲基-吡唑-3-羧酸(7.04g，99％)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ13.83(br.s.,1h),12.48(br.s.,1h),7.33(s,1h),7.24(t,j＝8.1hz,1h),7.13-7.08(m,3h),4.09(s,3h),1.90(s,6h)。esi-ms m/z计算值421.0612，实验值422.1(m+1)
+
；保留时间：4.04分钟(lc方法y)。
[2252]
步骤7：5-[[4-[(2r)-2-氨基-4-甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]-2-甲基-吡唑-3-羧酸
[2253][2254]
将5-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]-2-甲基-吡唑-3-羧酸(250mg，0.5926mmol)和(2r)-2-氨基-4-甲基-戊烷-1-醇(100μl)在thf(1.3ml)中合并，并搅拌直到反应混合物变得均匀为止。添加叔丁醇钠(250mg，2.601mmol)并且反应混合物摸起来变暖并在没有外部加热的情况下搅拌10分钟。然后将反应混合物在1m hcl与乙酸乙酯之间分配。将层分离，并且将水溶液用乙酸乙酯再萃取3次。大量的产物似乎残留在水层中，因此将其用盐水稀释并用乙酸乙酯再萃取5次。将合并的有机物经硫酸钠干燥并浓缩，得到类白色固体，将其不经另外的纯化用于下一步骤。5-[[4-[(2r)-2-氨基-4-甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]-2-甲基-吡唑-3-羧酸(盐酸盐)(317mg，99％)esi-ms m/z计算值502.19983，实验值503.3(m+1)
+
；保留时间：0.43分钟(lc方法d)。
[2255]
步骤8：(10r)-15-(2,6-二甲基苯基)-10-异丁基-6-甲基-3,3-二氧代-9-螺[2.3]己-5-基-12-氧杂-3λ
6-硫杂-2,5,6,9,16,17-六氮杂三环[11.3.1.14,7]十八碳-1(17),4,
7(18),13,15-五烯-8-酮(化合物74)
[2256][2257]
将5-[[4-[(2r)-2-氨基-4-甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]-2-甲基-吡唑-3-羧酸(盐酸盐)(40mg，0.07420mmol)和螺[2.3]己-5-酮(大约10.70mg，0.1113mmol)在dcm(0.3ml)中合并，并添加三乙酰氧基硼氢化钠(大约47.18mg，0.2226mmol)。将反应在室温下搅拌1小时，然后添加另外的三乙酰氧基硼氢化钠(大约47.18mg，0.2226mmol)。在室温下另外的2小时之后，将反应混合物在1m hcl与乙酸乙酯之间分配。将层分离，并且将水溶液用乙酸乙酯再萃取4次。将合并的有机物用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到粗还原胺化产物，将其不经进一步纯化用于下一步骤。将粗产物溶解于dmf(5ml)中并快速滴加到hatu(大约56.43mg，0.1484mmol)和dipea(大约57.54mg，77.55μl，0.4452mmol)于dmf(10ml)中的搅拌的溶液中。将反应混合物在室温下搅拌6小时。然后将反应混合物在1m hcl与乙酸乙酯之间分配。将层分离，并且将水溶液用乙酸乙酯再萃取3次。将合并的有机物用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。将所得粗产物通过反相hplc(1-99％ acn/水，hcl改性剂)纯化，得到(10r)-15-(2,6-二甲基苯基)-10-异丁基-6-甲基-3,3-二氧代-9-螺[2.3]己-5-基-12-氧杂-3λ
6-硫杂-2,5,6,9,16,17-六氮杂三环[11.3.1.14,7]十八碳-1(17),4,7(18),13,15-五烯-8-酮(4.2mg，10％)。esi-ms m/z计算值564.2519，实验值565.6(m+1)
+
；保留时间：1.94分钟；lc方法a。
[2258]
实例59：化合物75的制备
[2259]
步骤1：3-[[4-[(2r)-2-[[2-(叔丁氧基羰基氨基)螺[3.3]庚烷-6-基]氨基]-5,5,5-三氟-4,4-二甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸
[2260][2261]
向20ml小瓶中装入3-[[4-[(2r)-2-氨基-5,5,5-三氟-4,4-二甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(655mg，1.010mmol)、n-(2-氧代螺[3.3]庚烷-6-基)氨基甲酸叔丁酯(280mg，1.243mmol)、无水dcm(2ml)和三乙酰氧基硼氢化钠(钠盐)(710mg，3.350mmol)。将小瓶用氮气短暂吹扫，并且将混合物在室温下搅拌3.5小时。将混合物用dcm(40ml)、1n hcl水溶液和盐水(总共30ml)处理，得到水相和稠厚的凝
胶。将凝胶分离，并且将水相用乙酸乙酯进一步萃取(2
×
20ml-在水相中未检测到产物)。将乙酸乙酯和凝胶混合产生易于分离的两个相。将有机相经硫酸钠干燥并且将溶剂蒸发。将残余物溶解于dmso(6ml)中并通过反相制备型hplc(c
18
)使用乙腈/水的梯度(15分钟内1至99％)和hcl作为改性剂纯化。收集纯级分并将有机溶剂蒸发。向水相中添加少量盐水并将开始沉淀的固体用etoac萃取。在经硫酸钠干燥之后，将有机溶剂蒸发。在etoac/己烷中研磨并将溶剂蒸发，得到呈白色固体的3-[[4-[(2r)-2-[[2-(叔丁氧基羰基氨基)螺[3.3]庚烷-6-基]氨基]-5,5,5-三氟-4,4-二甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(436mg，53％)。esi-ms m/z计算值775.32263，实验值776.86(m+1)
+
；保留时间：1.42分钟(lc方法a)。
[2262]
步骤2：n-{6-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯乙基)-2,2,13-三氧代-11-(3,3,3-三氟-2,2-二甲基丙基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-12-基]螺[3.3]庚烷-2-基}氨基甲酸叔丁酯，非对映异构体1，以及n-{6-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯乙基)-2,2,13-三氧代-11-(3,3,3-三氟-2,2-二甲基丙基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-12-基]螺[3.3]庚烷-2-基}氨基甲酸叔丁酯，非对映异构体2
[2263][2264]
在氮气下向20ml烧瓶中装入hatu(479mg，1.260mmol)、无水dmf(30ml)和diea(0.52ml，2.985mmol)。通过注射器在5分钟的时间段内滴加3-[[4-[(2r)-2-[[2-(叔丁氧基羰基氨基)螺[3.3]庚烷-6-基]氨基]-5,5,5-三氟-4,4-二甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(436mg，0.5367mmol)于无水dmf(15ml)中的溶液。将混合物在室温下搅拌41小时(在24小时时，大约一半环化反应完成)。将混合物浓缩并用dmso(3ml)稀释。将溶液通过注射器过滤盘微过滤并通过反相制备型hplc(c
18
)使用乙腈/水的梯度(15分钟内1至99％)和hcl作为改性剂纯化。收集纯级分，添加盐水和饱和碳酸氢盐。将有机相蒸发并且用etoac(2
×
30ml)萃取白色沉淀。在经硫酸钠干燥之后，在dcm/己烷中蒸发和研磨，分离出呈白色固体的n-{6-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯乙基)-2,2,13-三氧代-11-(3,3,3-三氟-2,2-二甲基丙基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-12-基]螺[3.3]庚烷-2-基}氨基甲酸叔丁酯(151mg，37％)(非对映异构混合物)。esi-ms m/z计算值757.3121，实验值758.68(m+1)
+
；保留时间：2.09分钟(可见峰加倍的迹象)，lc方法a。
[2265]
将两个非对映异构体通过手性sfc使用phenomenex lux-4柱(250
×
21.2mm)，5μm，40℃分离；流动相：34％ meoh(无改性剂)，66％ co2，流速：70毫升/分钟，浓度：甲醇中
16mg/ml(无改性剂)，进样体积500μl，220bar，波长：210mm。对于每个异构体，将溶剂蒸发，并且将残余物在etoac/己烷中研磨。溶剂的蒸发得到呈白色固体的下列化合物：非对映异构体1，sfc峰1：n-{6-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯乙基)-2,2,13-三氧代-11-(3,3,3-三氟-2,2-二甲基丙基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-12-基]螺[3.3]庚烷-2-基}氨基甲酸叔丁酯(46mg，23％)。esi-ms m/z计算值757.3121，实验值758.46(m+1)
+
；保留时间：2.07分钟(lc方法a)；以及非对映异构体2，sfc峰2：n-{6-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯乙基)-2,2,13-三氧代-11-(3,3,3-三氟-2,2-二甲基丙基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-12-基]螺[3.3]庚烷-2-基}氨基甲酸叔丁酯(41mg，20％)。esi-ms m/z计算值757.3121，实验值758.42(m+1)
+
；保留时间：2.06分钟(lc方法a)。
[2266]
步骤3：n-{6-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-2,2,13-三氧代-11-(3,3,3-三氟-2,2-二甲基丙基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-12-基]螺[3.3]庚烷-2-基}氨基甲酸甲酯，非对映异构体1(化合物75)
[2267][2268]
将含有n-{6-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯乙基)-2,2,13-三氧代-11-(3,3,3-三氟-2,2-二甲基丙基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-12-基]螺[3.3]庚烷-2-基}氨基甲酸叔丁酯(46mg，0.06070mmol)(非对映异构体1)的100ml烧瓶在室温下用dcm(0.6ml)和hcl(4m的500μl，2.000mmol)(二噁烷中的4m)处理1小时。去除挥发物。将残余物用dcm/己烷处理并且将溶剂通过蒸发去除。将操作重复若干次，直到获得白色固体为止。将固体用无水dcm(1ml)和diea(53μl，0.3043mmol)处理，得到悬浮液。添加氯甲酸甲酯(15μl，0.1941mmol)导致固体快速溶解。在15分钟之后，将挥发物通过蒸发去除，并且将残余物溶解于dmso(1ml)中。将溶液通过注射器过滤盘微过滤并通过反相制备型hplc(c
18
)使用乙腈/水的梯度(15分钟内1至99％)和hcl作为改性剂纯化。genevac蒸发提供使用etoac转移的固体。etoac/己烷中的研磨和蒸发得到呈白色固体的n-{6-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-2,2,13-三氧代-11-(3,3,3-三氟-2,2-二甲基丙基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-12-基]螺[3.3]庚烷-2-基}氨基甲酸甲酯(25mg，57％)。esi-ms m/z计算值715.26514，实验值716.73(m+1)
+
；保留时间：1.79分钟(lc方法a)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ13.36-11.78(broad m,1h),8.41(s,1h),7.92(s,1h),7.67(s,2h),7.36(d,j＝7.9hz,1h),7.30-7.20(m,1h),7.12(s,2h),6.40(s,1h),5.09(d,j＝
8.6hz,1h),4.34(t,1h),4.07-3.70(m,3h),3.50(s,3h),3.04(m,2h),2.38-2.21(m,3h),2.21-2.04(m,3h),2.04-1.81(m,7h),1.80-1.65(m,1h),0.85(s,3h与己烷信号重叠),0.61(s,3h)。
[2269]
实例60：化合物76的制备
[2270]
步骤1：n-{6-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-2,2,13-三氧代-11-(3,3,3-三氟-2,2-二甲基丙基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-12-基]螺[3.3]庚烷-2-基}氨基甲酸甲酯，非对映异构体2(化合物76)
[2271][2272]
将含有n-{6-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯乙基)-2,2,13-三氧代-11-(3,3,3-三氟-2,2-二甲基丙基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-12-基]螺[3.3]庚烷-2-基}氨基甲酸叔丁酯(41mg，0.05410mmol)(非对映异构体2)的100ml烧瓶在室温下用dcm(0.6ml)和hcl(4m的500μl，2.000mmol)(二噁烷中的4m)处理1小时(60％转化)。添加更多hcl(4m的500μl，2.000mmol)并且将反应搅拌45分钟。去除挥发物。将残余物用dcm/己烷处理并且将溶剂通过蒸发去除。将操作重复若干次，直到获得白色固体为止。将固体用无水dcm(1ml)和diea(53μl，0.3043mmol)处理，得到悬浮液。添加氯甲酸甲酯(15μl，0.1941mmol)导致固体快速溶解。在8分钟之后，将挥发物通过蒸发去除，并且将残余物溶解于dmso(1ml)中。将溶液通过注射器过滤盘微过滤并通过反相制备型hplc(c
18
)使用乙腈/水的梯度(15分钟内1至99％)和hcl作为改性剂纯化。genevac蒸发提供了94％纯度物质(26mg)。将所述物质溶解于dcm中并通过硅胶快速色谱法(4g柱)使用乙酸乙酯/己烷的梯度(15分钟内10至100％)纯化。产物洗脱出约60-70％ ea。溶剂的蒸发产生n-{6-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-2,2,13-三氧代-11-(3,3,3-三氟-2,2-二甲基丙基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-12-基]螺[3.3]庚烷-2-基}氨基甲酸甲酯(22mg，57％)。esi-ms m/z计算值715.26514，实验值716.77(m+1)
+
；保留时间：1.78分钟(lc方法a)。
[2273]
实例61：化合物77和化合物78的制备
[2274]
步骤1：n-[6-[[(1r)-1-(羟甲基)-2-[1-(三氟甲基)环丙基]乙基]氨基]螺[3.3]庚烷-2-基]氨基甲酸叔丁酯
[2275][2276]
向(2r)-2-氨基-3-[1-(三氟甲基)环丙基]丙烷-1-醇(盐酸盐)(96.2g，438.0mmol)于1,2-二氯乙烷(1,000ml)中的浆液中添加diea(80ml，459.3mmol)，并将混合物搅拌5分钟-变得均匀。向混合物中添加n-(2-氧代螺[3.3]庚烷-6-基)氨基甲酸叔丁酯(98.6g，437.7mmol)，然后添加hoac(27ml，474.8mmol)并且将混合物在环境温度下搅拌1小时。向混合物中添加三乙酰氧基硼氢化钠(106.8g，503.9mmol)并且将混合物在环境温度下搅拌(缓慢放热至30℃30分钟，然后冷却至环境温度)。在3小时之后，添加另外的三乙酰氧基硼氢化钠(21.75g，102.6mmol)并且将反应在环境温度下搅拌14小时。将混合物用冰水浴冷却并用水(1000ml)淬灭并搅拌10分钟。向混合物中添加hcl(12m的110ml，1.320mol)部分，然后添加乙酸异丙酯(1,000ml)。将混合物用naoh(50％w/w的350g，4.375mol)碱化并且相分离。将水相用乙酸异丙酯(1,000ml)萃取。将合并的有机相用1l的盐水洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并在真空中浓缩。在浓缩期间，产物开始沉淀出来并使用m玻璃料收集。将固体用50ml的mtbe洗涤两次并且将合并的固体在45℃下在真空中干燥。将固体用mtbe(9l)稀释并且添加tsoh(40g，232.3mmol)。将乳状白色浆液搅拌30分钟。使用m玻璃料收集沉淀。将固体风干16小时。将固体用乙酸异丙酯(700ml)和naoh(2m的500ml，1.000mol)浆化，直至均匀为止。将相分离，并将有机相用500ml的盐水洗涤。将水相用乙酸异丙酯(700ml)萃取并且将合并的有机相经硫酸镁干燥，过滤并在真空中浓缩至约200ml。将浆液过滤并且将第二批从滤液中收集并添加到收集的第一批中。n-[6-[[(1r)-1-(羟甲基)-2-[1-(三氟甲基)环丙基]乙基]氨基]螺[3.3]庚烷-2-基]氨基甲酸叔丁酯(108.7g，63％)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ7.01(d,j＝8.0hz,1h),4.45(q,j＝5.0hz,1h),3.78(h,j＝8.3hz,1h),3.37-3.31(m,1h),3.24(dt,j＝10.8,5.3hz,1h),3.10(p,j＝7.5hz,1h),2.55(q,j＝5.7hz,1h),2.21(dt,j＝13.4,6.0hz,2h),2.04(p,j＝5.6hz,2h),1.83(q,j＝9.8hz,2h),1.68-1.43(m,5h),1.35(s,9h),0.86(s,2h),0.77(d,j＝11.1hz,2h)。esi-ms m/z计算值392.22867，实验值393.2(m+1)
+
；保留时间：1.66分钟(lc方法a)。
[2277]
步骤2：3-[[4-[(2r)-2-[[2-(叔丁氧基羰基氨基)螺[3.3]庚烷-6-基]氨基]-3-[1-(三氟甲基)环丙基]丙氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸
[2278][2279]
向n-[6-[[(1r)-1-(羟甲基)-2-[1-(三氟甲基)环丙基]乙基]氨基]螺[3.3]庚烷-2-基]氨基甲酸叔丁酯(108.7g，277.0mmol)和3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(114g，268.7mmol)于2-methf(1l)中的溶液中按份添加叔丁醇钠(130g，1.353mol)，保持反应温度《40℃。添加是放热的，并且使用碱的添加速率来控制反应温度。将反应在室温下搅拌1小时。将反应通过缓慢添加hcl(2m的800ml，1.600mol)淬灭并将其搅
拌5分钟。将混合物使用2me-thf转移到分液漏斗中。将水相分离，并将有机相用500ml的盐水洗涤。将合并的水相用500ml的2me-thf萃取。将合并的有机相经硫酸镁干燥，经硅藻土过滤并将混浊的溶液在真空中浓缩。将粗泡沫用2-methf(1l)稀释并经硫酸镁再干燥，经硅藻土过滤并在真空中浓缩。3-[[4-[(2r)-2-[[2-(叔丁氧基羰基氨基)螺[3.3]庚烷-6-基]氨基]-3-[1-(三氟甲基)环丙基]丙氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(217g，100％)esi-ms m/z计算值773.307，实验值774.3(m+1)
+
；保留时间：1.21分钟(lc方法a)。
[2280]
步骤3：n-[2-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-2,2,13-三氧代-11-[[1-(三氟甲基)环丙基]甲基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]螺[3.3]庚烷-6-基]氨基甲酸叔丁酯(化合物77)
[2281][2282]
向3-[[4-[(2r)-2-[[2-(叔丁氧基羰基氨基)螺[3.3]庚烷-6-基]氨基]-3-[1-(三氟甲基)环丙基]丙氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(217g，267.8mmol)于dmf(2.7l)中的溶液中添加diea(140ml,803.8mmol)，然后分批添加hatu(150g,394.5mmol)。将混合物在环境温度下搅拌18小时。在30分钟内将混合物缓慢添加到hcl(12m的65ml，780.0mmol)于水(8l)中的冷溶液中，并将奶油色浆液在环境温度下搅拌10分钟。将棕黄色浆料使用m玻璃料过滤(缓慢过滤)。将沉淀用100ml的水洗涤3次并风干1小时。将湿滤饼溶解于iproac(3l)中并将水相分离。将有机相用1l的盐水洗涤。将水相用500ml的iproac萃取。将合并的有机相经硫酸镁干燥，经硅藻土过滤并在真空中浓缩。将粗产物在1.5kg柱上进行色谱分析，用20-70％ etoac/己烷洗脱(产物在60％ etoac洗脱)。将纯级分浓缩。将含有一些杂质的级分合并并浓缩。将不纯的级分在750g柱上进行色谱分析，用30-65％ etoac/己烷洗脱。产物在浓缩期间开始结晶出来并在真空中干燥过夜。将不纯的产物用50ml的etoac稀释，接种并静置过夜。将浆液使用m过滤器漏斗过滤并用1:1etoac/己烷洗涤3次。这得到n-[2-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-2,2,13-三氧代-11-[[1-(三氟甲基)环丙基]甲基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]螺[3.3]庚烷-6-基]氨基甲酸叔丁酯(152g，74％)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ13.03(s,1h),8.33(d,j＝6.0hz,1h),7.88(d,j＝7.5hz,1h),7.74-7.55(m,2h),7.26(t,j＝7.7hz,1h),7.09(dd,j＝23.0,7.8hz,3h),6.37(s,1h),5.04(dt,j＝10.5,4.9hz,1h),4.33(td,j＝11.5,5.5hz,1h),4.06(s,1h),3.79(tt,j＝17.3,8.4hz,2h),3.05-2.86(m,2h),2.37(dt,j＝12.3,6.2hz,1h),2.29-2.02(m,7h),1.93(q,j＝8.1,6.7hz,5h),1.48(ddd,j＝15.7,9.3,6.0hz,1h),1.37(s,9h),0.78(ddq,j＝19.2,9.5,4.7,4.3hz,2h),0.70-0.50(m,2h)。esi-ms m/z计算值755.29645，实验值756.2(m+1)
+
；保留时
7-((1-(三氟甲基)环丙基)甲基)-9-氧杂-3-硫杂-2,6-二氮杂-1(2,4)-嘧啶-4(1,3)-苯并环壬基酚-5-酮3,3-二氧化物
[2289][2290]
向((2s,4s,6s)-6-((r)-1
6-(2,6-二甲基苯基)-3,3-二氧代-5-氧代-7-((1-(三氟甲基)环丙基)甲基)-9-氧杂-3-硫杂-2,6-二氮杂-1(2,4)-嘧啶-4(1,3)-苯甲环壬烷-6-基)螺[3.3]庚烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(73g，96.58mmol)于meoh(400ml)中的溶液中分批添加hcl(4m的100ml，400.0mmol)。将混合物在环境温度下搅拌20小时。将溶剂在真空中去除并且将类白色固体用mtbe制成浆液并浓缩。将固体在高真空下干燥48小时，得到类白色粉末。(r)-6-((2s,4s,6s)-6-氨基螺[3.3]庚烷-2-基)-1
6-(2,6-二甲基苯基)-7-((1-(三氟甲基)环丙基)甲基)-9-氧杂-3-硫杂-2,6-二氮杂-1(2,4)-嘧啶-4(1,3)-苯并环壬基酚-5-酮3,3-二氧化物(盐酸盐)(60.0g，90％)1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.33(s,1h),8.19(d,j＝5.5hz,3h),7.89(d,j＝7.4hz,1h),7.72-7.59(m,2h),7.26(t,j＝7.6hz,1h),7.12(d,j＝7.6hz,2h),6.39(s,1h),5.04(dd,j＝10.8,4.5hz,1h),4.32(t,j＝11.3hz,1h),4.05(td,j＝10.7,4.3hz,1h),3.81(p,j＝8.7hz,1h),3.56(h,j＝7.9,7.0hz,1h),3.04(t,j＝9.6hz,1h),2.95(t,j＝10.0hz,1h),2.45(dt,j＝11.7,5.9hz,1h),2.29(p,j＝6.3,5.4hz,2h),2.26-2.12(m,5h),2.12-1.74(m,6h),1.51(dd,j＝16.5,9.4hz,1h),0.80(dtd,j＝19.9,10.1,5.0hz,2h),0.65(dt,j＝9.3,4.8hz,1h),0.55(dt,j＝10.7,5.0hz,1h)。esi-ms m/z计算值655.244，实验值656.4(m+1)
+
；保留时间：1.73分钟(lc方法i)。
[2291]
步骤6：((2s,4s,6s)-6-((r)-1
6-(2,6-二甲基苯基)-3,3-二氧代-5-氧代-7-((1-(三氟甲基)环丙基)甲基)-9-氧杂-3-硫杂-2,6-二氮杂-1(2,4)-嘧啶-4(1,3)-苯甲环壬烷-6-基)螺[3.3]庚烷-2-基)氨基甲酸异丙酯(化合物78)
[2292][2293]
向(r)-6-((2s,4s,6s)-6-氨基螺[3.3]庚烷-2-基)-1
6-(2,6-二甲基苯基)-7-((1-(三氟甲基)环丙基)甲基)-9-氧杂-3-硫杂-2,6-二氮杂-1(2,4)-嘧啶-4(1,3)-苯并环壬基酚-5-酮3,3-二氧化物(盐酸盐)(23.5g，33.95mmol)于dcm(140ml)中的浆液中添加
diea(12ml，68.89mmol)，得到类白色的沉淀。添加2methf(140ml)并观察到一些溶解度。滴加氯甲酸异丙酯(甲苯中的1m的42ml，42.00mmol)。将浆液在环境温度下搅拌并且在16小时之后仍是浆液-添加另外的diea(6ml，34.45mmol)和氯甲酸异丙酯(甲苯中的1m的12ml，12.00mmol)并将混合物再搅拌1小时(总共17小时)。混合物变得均匀，并且将反应用etoac(300ml)稀释并用hcl(1m的250ml，250.0mmol)洗涤两次，然后用300ml的盐水洗涤。将有机相经硫酸镁干燥，过滤并在真空中浓缩。将类白色泡沫溶解于热etoac(100ml)中并通过硅藻土垫过滤。在快速搅拌下，将溶液缓慢添加到庚烷(250ml)中。将浆料在环境温度下搅拌1小时。将固体使用m玻璃料收集并用50ml的1:2etoac/庚烷洗涤3次。将固体风干1小时，然后在45℃下的真空烘箱中干燥48小时，得到类白色粉末((2s,4s,6s)-6-((r)-1
6-(2,6-二甲基苯基)-3,3-二氧代-5-氧代-7-((1-(三氟甲基)环丙基)甲基)-9-氧杂-3-硫杂-2,6-二氮杂-1(2,4)-嘧啶-4(1,3)-苯甲环壬烷-6-基)螺[3.3]庚烷-2-基)氨基甲酸异丙酯(21.8g，86％)1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ13.03(s,1h),8.32(s,1h),7.87(s,1h),7.65(s,2h),7.26(d,j＝7.9hz,2h),7.12(s,2h),6.37(s,1h),5.02(dd,j＝10.9,4.4hz,1h),4.72(p,j＝6.3hz,1h),4.33(t,j＝11.5hz,1h),4.04(s,1h),3.81(dq,j＝40.0,8.3hz,2h),3.02(t,j＝9.5hz,1h),2.92(t,j＝9.9hz,1h),2.40(d,j＝11.8hz,1h),2.31-2.03(m,6h),1.95(dd,j＝18.6,9.1hz,6h),1.49(dd,j＝16.5,9.4hz,1h),1.15(d,j＝6.2hz,6h),0.91-0.71(m,2h),0.62(d,j＝25.5hz,2h)。esi-ms m/z计算值741.28076，实验值742.1(m+1)
+
；保留时间：2.77分钟(lc方法i)。
[2294]
实例62：化合物79的制备
[2295]
步骤1：((2r,4r,6s)-6-((r)-1
6-(2,6-二甲基苯基)-3,3-二氧代-5-氧代-7-((1-(三氟甲基)环丙基)甲基)-9-氧杂-3-硫杂-2,6-二氮杂-1(2,4)-嘧啶-4(1,3)-苯甲环壬烷-6-基)螺[3.3]庚烷-2-基)氨基甲酸异丙酯(化合物79)
[2296][2297]
将(r)-6-((2r,4r,6r)-6-氨基螺[3.3]庚烷-2-基)-16-(2,6-二甲基苯基)-7-((1-(三氟甲基)环丙基)甲基)-9-氧杂-3-硫杂-2,6-二氮杂-1(2,4)-嘧啶-4(1,3)-苯并环壬基酚-5-酮3,3-二氧化物(盐酸盐)(32mg，0.04623mmol)与氯甲酸异丙酯(大约甲苯中的2m的46.23μl，0.09246mmol)在dcm(0.5ml)中合并，并添加diea(大约29.88mg，40.27μl，0.2312mmol)。将反应在室温下搅拌一小时，然后用几滴1m hcl淬灭。将反应混合物部分浓缩，用甲醇和dmso稀释，过滤并通过反相hplc(1-99％ acn/水，hcl改性剂，15分钟运行)纯化，得到呈白色固体的((2r,4r,6r)-6-((r)-16-(2,6-二甲基苯基)-3,3-二氧代-5-氧代-7-((1-(三氟甲基)环丙基)甲基)-9-氧杂-3-硫杂-2,6-二氮杂-1(2,4)-嘧啶-4(1,3)-苯甲环壬烷-6-基)螺[3.3]庚烷-2-基)氨基甲酸异丙酯(21.8mg，64％)。esi-ms m/z计算值741.28076，实验值742.7(m+1)
+
；保留时间：1.89分钟；lc方法a。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ13.03(s,1h),8.33(s,1h),7.87(s,1h),7.64(s,2h),7.26(d,j＝8.0hz,2h),7.12(s,2h),
6.37(s,1h),5.04(d,j＝9.1hz,1h),4.72(p,j＝6.3hz,1h),4.34(s,1h),4.05(s,1h),3.91-3.73(m,2h),2.95(dt,j＝25.5,9.7hz,2h),2.32-2.03(m,7h),2.01-1.84(m,6h),1.48(dd,j＝16.7,9.5hz,1h),1.15(d,j＝6.2hz,6h),0.77(d,j＝12.0hz,2h),0.60(d,j＝20.3hz,2h)。
[2298]
实例63：化合物80的制备
[2299]
步骤1：(r)-6-((2s,4s,6s)-6-氨基螺[3.3]庚烷-2-基)-1
6-(2,6-二甲基苯基)-7-((1-(三氟甲基)环丙基)甲基)-9-氧杂-3-硫杂-2,6-二氮杂-1(2,4)-嘧啶-4(1,3)-苯并环壬基酚-5-酮3,3-二氧化物(化合物80)
[2300][2301]
将(r)-6-((2s,4s,6s)-6-氨基螺[3.3]庚烷-2-基)-1
6-(2,6-二甲基苯基)-7-((1-(三氟甲基)环丙基)甲基)-9-氧杂-3-硫杂-2,6-二氮杂-1(2,4)-嘧啶-4(1,3)-苯并环壬基酚-5-酮3,3-二氧化物(盐酸盐)(30mg，0.04334mmol)溶解于1:1甲醇/dmso中，过滤并通过反相hplc(1-70％ acn/水，hcl改性剂15分钟运行)纯化，得到(r)-6-((2s,4s,6s)-6-氨基螺[3.3]庚烷-2-基)-16-(2,6-二甲基苯基)-7-((1-(三氟甲基)环丙基)甲基)-9-氧杂-3-硫杂-2,6-二氮杂-1(2,4)-嘧啶-4(1,3)-苯并环壬基酚-5-酮3,3-二氧化物(盐酸盐)(23.1mg，76％)。esi-ms m/z计算值655.244，实验值656.6(m+1)
+
；保留时间：1.25分钟；lc方法a。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ13.07(s,1h),8.33(s,1h),7.98(s,2h),7.88(s,1h),7.65(s,2h),7.25(d,j＝8.0hz,1h),7.12(s,2h),6.37(s,1h),5.04(dd,j＝10.9,4.4hz,1h),4.31(t,j＝11.2hz,1h),4.04(s,1h),3.86-3.75(m,1h),3.57(t,j＝8.0hz,1h),3.29(bs,1h),3.05(t,j＝9.6hz,1h),2.96(t,j＝10.0hz,1h),2.43(d,j＝10.8hz,1h),2.30(s,2h),2.16(d,j＝16.8hz,4h),1.91(s,5h),1.51(dd,j＝16.5,9.4hz,1h),0.80(dt,j＝14.0,5.6hz,2h),0.64(s,1h),0.53(s,1h)。
[2302]
实例64：化合物81的制备
[2303]
步骤1：(r)-6-((2r,4r,6r)-6-氨基螺[3.3]庚烷-2-基)-1
6-(2,6-二甲基苯基)-7-((1-(三氟甲基)环丙基)甲基)-9-氧杂-3-硫杂-2,6-二氮杂-1(2,4)-嘧啶-4(1,3)-苯并环壬基酚-5-酮3,3-二氧化物(化合物81)
[2304][2305]
将(r)-6-((2r,4r,6r)-6-氨基螺[3.3]庚烷-2-基)-1
6-(2,6-二甲基苯基)-7-((1-(三氟甲基)环丙基)甲基)-9-氧杂-3-硫杂-2,6-二氮杂-1(2,4)-嘧啶-4(1,3)-苯并环
壬基酚-5-酮3,3-二氧化物(盐酸盐)(30mg，0.04334mmol)溶解于1:1甲醇/dmso中，过滤并通过反相hplc(1-70％ acn/水，hcl改性剂15分钟运行)纯化，得到(r)-6-((2r,4r,6r)-6-氨基螺[3.3]庚烷-2-基)-16-(2,6-二甲基苯基)-7-((1-(三氟甲基)环丙基)甲基)-9-氧杂-3-硫杂-2,6-二氮杂-1(2,4)-嘧啶-4(1,3)-苯并环壬基酚-5-酮3,3-二氧化物(盐酸盐)(26.4mg，87％)。esi-ms m/z计算值655.244，实验值656.6(m+1)
+
；保留时间：1.25分钟；lc方法a.1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ13.05(s,1h),8.34(s,1h),8.02(s,2h),7.88(s,1h),7.65(s,2h),7.25(d,j＝8.2hz,1h),7.12(s,2h),6.38(s,1h),5.05(dd,j＝10.9,4.4hz,1h),4.32(t,j＝11.3hz,1h),4.05(s,1h),3.81(p,j＝8.6hz,1h),3.58(t,j＝8.0hz,1h),3.29(bs,1h),3.04(t,j＝9.8hz,1h),2.95(t,j＝9.8hz,1h),2.45(t,j＝6.0hz,1h),2.31(d,j＝9.1hz,2h),2.23-2.12(m,4h),1.92(s,5h),1.49(dd,j＝16.5,9.4hz,1h),0.79(q,j＝10.8,8.4hz,2h),0.58(d,j＝28.4hz,2h)。
[2306]
实例65：化合物82的制备
[2307]
步骤1：(r)-6-((2s,4s,6s)-6-(苄氨基)螺[3.3]庚烷-2-基)-16-(2,6-二甲基苯基)-7-((1-(三氟甲基)环丙基)甲基)-9-氧杂-3-硫杂-2,6-二氮杂-1(2,4)-嘧啶-4(1,3)-苯并环壬基酚-5-酮3,3-二氧化物
[2308][2309]
将(r)-6-((2s,4s,6s)-6-氨基螺[3.3]庚烷-2-基)-1
6-(2,6-二甲基苯基)-7-((1-(三氟甲基)环丙基)甲基)-9-氧杂-3-硫杂-2,6-二氮杂-1(2,4)-嘧啶-4(1,3)-苯并环壬基酚-5-酮3,3-二氧化物(盐酸盐)(500mg，0.7223mmol)与苯甲醛(70μl，0.6886mmol)在二氯甲烷(2.4ml)中合并，并在室温下搅拌20分钟。然后添加三乙酰氧基硼氢化钠(630mg，2.973mmol)(在10分钟内分两部分添加)，并且使反应在室温下再搅拌2小时。然后将反应混合物在1m hcl与乙酸乙酯之间分配。将层分离，并且将水溶液用乙酸乙酯再萃取5次。将合并的有机物用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到呈白色固体的(具有一些双苄基化)(r)-6-((2s,4s,6s)-6-(苄氨基)螺[3.3]庚烷-2-基)-16-(2,6-二甲基苯基)-7-((1-(三氟甲基)环丙基)甲基)-9-氧杂-3-硫杂-2,6-二氮杂-1(2,4)-嘧啶-4(1,3)-苯并环壬基酚-5-酮3,3-二氧化物(436mg，81％)esi-ms m/z计算值745.29095，实验值746.3(m+1)
+
；保留时间：0.6分钟，lc方法d。
[2310]
步骤2：(r)-1
6-(2,6-二甲基苯基)-6-((2s,4s,6s)-6-(甲氨基)螺[3.3]庚烷-2-基)-7-((1-(三氟甲基)环丙基)甲基)-9-氧杂-3-硫杂-2,6-二氮杂-1(2,4)-嘧啶-4(1,3)-苯并环壬基酚-5-酮3,3-二氧化物
[2311][2312]
将(r)-6-((2s,4s,6s)-6-(苄氨基)螺[3.3]庚烷-2-基)-16-(2,6-二甲基苯基)-7-((1-(三氟甲基)环丙基)甲基)-9-氧杂-3-硫杂-2,6-二氮杂-1(2,4)-嘧啶-4(1,3)-苯并环壬基酚-5-酮3,3-二氧化物与甲醛水溶液(4ml，37％w/w，145.2mmol)和甲酸(3ml，79.52mmol)在螺旋盖小瓶中合并，并加热至95℃16小时。然后将反应混合物冷却至室温，并在减压下部分浓缩。添加甲醇和乙腈并且将反应混合物再次浓缩，然后通过反相hplc(1-99乙腈/水，hcl改性剂)纯化并浓缩，得到呈白色固体的n-甲基化化合物，(r)-6-((2s,4s,6s)-6-(苄基(甲基)氨基)螺[3.3]庚烷-2-基)-16-(2,6-二甲基苯基)-7-((1-(三氟甲基)环丙基)甲基)-9-氧杂-3-硫杂-2,6-二氮杂-1(2,4)-嘧啶-4(1,3)-苯并环壬基酚-5-酮3,3-二氧化物。在氮气吹扫的烧瓶中，将产物与湿二羟基钯(70mg，10％w/w，0.4985mmol)合并，并添加甲醇(10ml)。将氢气从气球中鼓泡通过反应混合物30分钟，并使反应在室温下再搅拌2小时，同时将氢气气球放在适当的位置。此后，将反应容器用氮气吹扫。然后将反应混合物用甲醇稀释并通过硅藻土过滤(用另外的甲醇洗脱)，在干燥后得到呈白色固体的(r)-1
6-(2,6-二甲基苯基)-6-((2s,4s,6s)-6-(甲氨基)螺[3.3]庚烷-2-基)-7-((1-(三氟甲基)环丙基)甲基)-9-氧杂-3-硫杂-2,6-二氮杂-1(2,4)-嘧啶-4(1,3)-苯并环壬基酚-5-酮3,3-二氧化物(盐酸盐)(195mg，58％)。esi-ms m/z计算值669.25964，实验值670.8(m+1)
+
；保留时间：0.52分钟，lc方法d。
[2313]
步骤3：(r)-1
6-(2,6-二甲基苯基)-6-((2s,4s,6s)-6-((2-甲氧基乙基)(甲基)氨基)螺[3.3]庚烷-2-基)-7-((1-(三氟甲基)环丙基)甲基)-9-氧杂-3-硫杂-2,6-二氮杂-1(2,4)-嘧啶-4(1,3)-苯并环壬基酚-5-酮3,3-二氧化物(化合物82)
[2314][2315]
将(r)-1
6-(2,6-二甲基苯基)-6-((2s,4s,6s)-6-(甲氨基)螺[3.3]庚烷-2-基)-7-((1-(三氟甲基)环丙基)甲基)-9-氧杂-3-硫杂-2,6-二氮杂-1(2,4)-嘧啶-4(1,3)-苯并环壬基酚-5-酮3,3-二氧化物(盐酸盐)(54mg，0.08063mmol)与1-溴-2-甲氧基-乙烷(大约33.62mg，22.73μl，0.2419mmol)在乙腈中合并，并添加三乙胺(大约40.80mg，56.20μl，0.4032mmol)。然后将反应混合物加热至60℃16小时，并且加热至70℃另外6小时。将反应冷却至室温，用甲醇稀释，过滤并通过反相hplc(1-70％ acn/水，hcl改性剂，15分钟运行)纯
化，得到(r)-1
6-(2,6-二甲基苯基)-6-((2s,4s,6s)-6-((2-甲氧基乙基)(甲基)氨基)螺[3.3]庚烷-2-基)-7-((1-(三氟甲基)环丙基)甲基)-9-氧杂-3-硫杂-2,6-二氮杂-1(2,4)-嘧啶-4(1,3)-苯并环壬基酚-5-酮3,3-二氧化物(盐酸盐)(39.5mg，63％)。esi-ms m/z计算值727.3015，实验值728.7(m+1)
+
；保留时间：1.33分钟；lc方法a。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ13.04(s,1h),9.79(s,1h),8.34(s,1h),7.89(s,1h),7.66(s,2h),7.26(t,j＝7.7hz,1h),7.12(d,j＝7.6hz,2h),6.39(s,1h),5.05(dd,j＝10.8,4.5hz,1h),4.31(t,j＝11.3hz,1h),4.06(d,j＝11.4hz,1h),3.85(p,j＝8.6hz,1h),3.71-3.56(m,3h),3.28-3.17(m,1h),3.05(t,j＝9.6hz,2h),2.97(t,j＝10.0hz,1h),2.71-2.60(m,3h),2.53(d,j＝6.8hz,1h),2.48(s,8h),2.12-1.72(m,5h),1.59-1.45(m,1h),1.27-1.22(m,1h),0.85-0.72(m,2h),0.67-0.58(m,1h),0.52(s,1h)。
[2316]
实例66：化合物83的制备
[2317]
步骤1：(r)-6-((2r,4r,6r)-6-(苄氨基)螺[3.3]庚烷-2-基)-16-(2,6-二甲基苯基)-7-((1-(三氟甲基)环丙基)甲基)-9-氧杂-3-硫杂-2,6-二氮杂-1(2,4)-嘧啶-4(1,3)-苯并环壬基酚-5-酮3,3-二氧化物
[2318][2319]
将((r)-6-((2r,4r,6r)-6-氨基螺[3.3]庚烷-2-基)-1
6-(2,6-二甲基苯基)-7-((1-(三氟甲基)环丙基)甲基)-9-氧杂-3-硫杂-2,6-二氮杂-1(2,4)-嘧啶-4(1,3)-苯并环壬基酚-5-酮3,3-二氧化物(盐酸盐)(500mg，0.7223mmol)与苯甲醛(70μl，0.6886mmol)在二氯甲烷(2.4ml)中合并，并在室温下搅拌30分钟。然后添加三乙酰氧基硼氢化钠(630mg，2.973mmol)，并且使反应在室温下搅拌两小时。然后将反应混合物在1m hcl与乙酸乙酯之间分配。将层分离，并且将水溶液用乙酸乙酯再萃取4次。将合并的有机物用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到白色固体(具有少量的双苄基化)(r)-6-((2r,4r,6r)-6-(苄氨基)螺[3.3]庚烷-2-基)-16-(2,6-二甲基苯基)-7-((1-(三氟甲基)环丙基)甲基)-9-氧杂-3-硫杂-2,6-二氮杂-1(2,4)-嘧啶-4(1,3)-苯并环壬基酚-5-酮3,3-二氧化物(466mg，87％)esi-ms m/z计算值745.29095，实验值746.5(m+1)
+
；保留时间：0.56分钟，lc方法d。
[2320]
步骤2：(r)-1
6-(2,6-二甲基苯基)-6-((2r,4r,6r)-6-(甲氨基)螺[3.3]庚烷-2-基)-7-((1-(三氟甲基)环丙基)甲基)-9-氧杂-3-硫杂-2,6-二氮杂-1(2,4)-嘧啶-4(1,3)-苯并环壬基酚-5-酮3,3-二氧化物(盐酸盐)
[2321][2322]
将(r)-6-((2r,4r,6r)-6-(苄氨基)螺[3.3]庚烷-2-基)-16-(2,6-二甲基苯基)-7-((1-(三氟甲基)环丙基)甲基)-9-氧杂-3-硫杂-2,6-二氮杂-1(2,4)-嘧啶-4(1,3)-苯并环壬基酚-5-酮3,3-二氧化物与甲醛水溶液(4ml，37％w/w，145.2mmol)和甲酸(3ml，79.52mmol)在螺旋盖小瓶中合并，并加热至95℃16小时。然后将反应混合物冷却至室温，并在减压下部分浓缩。添加甲醇和乙腈并且将反应混合物再次浓缩，然后通过反相hplc(1-99乙腈/水，hcl改性剂-洗脱约55％甲醇)纯化并浓缩，得到呈白色固体的n-甲基化化合物，(r)-6-((2r,4r,6r)-6-(苄基(甲基)氨基)螺[3.3]庚烷-2-基)-16-(2,6-二甲基苯基)-7-((1-(三氟甲基)环丙基)甲基)-9-氧杂-3-硫杂-2,6-二氮杂-1(2,4)-嘧啶-4(1,3)-苯并环壬基酚-5-酮3,3-二氧化物。在氮气吹扫的烧瓶中，将产物与湿二羟基钯(70mg，10％w/w，0.4985mmol)合并，并添加甲醇(10ml)。将氢气从气球中鼓泡通过反应混合物30分钟，并使反应在室温下再搅拌2小时，同时将氢气气球放在适当的位置。此后，将反应容器用氮气吹扫。然后将反应混合物用甲醇稀释并通过硅藻土过滤(用另外的甲醇洗脱)，在干燥后得到呈白色固体的(r)-1
6-(2,6-二甲基苯基)-6-((2r,4r,6r)-6-(甲氨基)螺[3.3]庚烷-2-基)-7-((1-(三氟甲基)环丙基)甲基)-9-氧杂-3-硫杂-2,6-二氮杂-1(2,4)-嘧啶-4(1,3)-苯并环壬基酚-5-酮3,3-二氧化物(盐酸盐)(230mg，66％)。esi-ms m/z计算值669.25964，实验值670.8(m+1)
+
；保留时间：0.52分钟，lc方法d。
[2323]
步骤3：(r)-16-(2,6-二甲基苯基)-6-((2r,4r,6r)-6-((2-甲氧基乙基)(甲基)氨基)螺[3.3]庚烷-2-基)-7-((1-(三氟甲基)环丙基)甲基)-9-氧杂-3-硫杂-2,6-二氮杂-1(2,4)-嘧啶-4(1,3)-苯并环壬基酚-5-酮3,3-二氧化物(化合物83)
[2324][2325]
将(r)-1
6-(2,6-二甲基苯基)-6-((2r,4r,6r)-6-(甲氨基)螺[3.3]庚烷-2-基)-7-((1-(三氟甲基)环丙基)甲基)-9-氧杂-3-硫杂-2,6-二氮杂-1(2,4)-嘧啶-4(1,3)-苯并环壬基酚-5-酮3,3-二氧化物(盐酸盐)(50mg，0.07465mmol)与1-溴-2-甲氧基-乙烷(大约31.12mg，21.04μl，0.2239mmol)在乙腈中合并，并添加三乙胺(大约37.76mg，52.01μl，0.3732mmol)。然后将反应混合物加热至60℃16小时。在指定的时间之后，将反应冷却至室温，用甲醇稀释，过滤并通过反相hplc(1-70％ acn/水，hcl改性剂，15分钟运行)纯化，得到
(r)-1
6-(2,6-二甲基苯基)-6-((2r,4r,6r)-6-((2-甲氧基乙基)(甲基)氨基)螺[3.3]庚烷-2-基)-7-((1-(三氟甲基)环丙基)甲基)-9-氧杂-3-硫杂-2,6-二氮杂-1(2,4)-嘧啶-4(1,3)-苯并环壬基酚-5-酮3,3-二氧化物(盐酸盐)(40.6mg，70％)。esi-ms m/z计算值727.3015，实验值728.8(m+1)
+
；保留时间：1.32分钟；lc方法a。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ13.04(s,1h),9.93(s,1h),8.34(s,1h),7.89(d,j＝7.2hz,1h),7.66(s,2h),7.26(t,j＝7.6hz,1h),7.12(d,j＝7.6hz,2h),6.39(s,1h),5.05(dd,j＝10.8,4.5hz,1h),4.33(t,j＝11.3hz,1h),4.05(t,j＝9.6hz,1h),3.86(p,j＝8.6hz,1h),3.72-3.57(m,3h),3.32(s,3h),3.26-3.14(m,1h),3.07(dd,j＝12.1,7.8hz,2h),2.97(t,j＝9.7hz,1h),2.64(d,j＝4.7hz,3h),2.39-2.28(m,3h),2.20-2.10(m,3h),2.11-1.79(m,5h),1.49(dd,j＝16.5,9.3hz,1h),1.31-1.19(m,1h),0.85-0.71(m,2h),0.67-0.46(m,2h)。
[2326]
实例67：化合物84的制备
[2327]
步骤1：n-((2s,4s,6s)-6-((r)-16-(2,6-二甲基苯基)-3,3-二氧代-5-氧代-7-((1-(三氟甲基)环丙基)甲基)-9-氧杂-3-硫杂-2,6-二氮杂-1(2,4)-嘧啶-4(1,3)-苯甲环壬烷-6-基)螺[3.3]庚烷-2-基)乙酰胺(化合物84)
[2328][2329]
将(r)-6-((2s,4s,6s)-6-氨基螺[3.3]庚烷-2-基)-1
6-(2,6-二甲基苯基)-7-((1-(三氟甲基)环丙基)甲基)-9-氧杂-3-硫杂-2,6-二氮杂-1(2,4)-嘧啶-4(1,3)-苯并环壬基酚-5-酮3,3-二氧化物(盐酸盐)(35mg，0.05056mmol)与乙酸酐(大约10.32mg，9.538μl，0.1011mmol)在dcm(0.5ml)中合并，并添加三乙胺(大约25.58mg，35.23μl，0.2528mmol)。将反应在室温下搅拌2小时，然后部分浓缩，用1:1甲醇/dmso稀释，过滤并通过反相hplc(1-99％acn/水，hcl改性剂)纯化，得到n-((2s,4s,6s)-6-((r)-16-(2,6-二甲基苯基)-3,3-二氧代-5-氧代-7-((1-(三氟甲基)环丙基)甲基)-9-氧杂-3-硫杂-2,6-二氮杂-1(2,4)-嘧啶-4(1,3)-苯甲环壬烷-6-基)螺[3.3]庚烷-2-基)乙酰胺(27.0mg，77％)。esi-ms m/z计算值697.2546，实验值698.5(m+1)
+
；保留时间：1.55分钟；lc方法a.1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ13.02(s,1h),8.31(s,1h),8.03(d,j＝7.7hz,1h),7.87(s,1h),7.65(s,2h),7.25(s,1h),7.12(s,2h),6.37(s,1h),5.02(d,j＝8.8hz,1h),4.33(s,1h),4.07(q,j＝8.0hz,2h),3.78(t,j＝8.6hz,1h),3.29(bs,2h),3.04(t,j＝9.4hz,1h),2.95(t,j＝9.9hz,1h),2.40(m,1h),2.25(dt,j＝12.0,7.0hz,2h),2.20-1.98(m,4h),2.00-1.84(m,4h),1.75(s,3h),1.49(dd,j＝16.5,9.4hz,1h),0.78(d,j＝12.6hz,2h),0.62(d,j＝29.2hz,2h)。
[2330]
实例68：化合物85的制备
[2331]
步骤1：n-((2r,4r,6r)-6-((r)-1
6-(2,6-二甲基苯基)-3,3-二氧代-5-氧代-7-((1-(三氟甲基)环丙基)甲基)-9-氧杂-3-硫杂-2,6-二氮杂-1(2,4)-嘧啶-4(1,3)-苯甲环壬烷-6-基)螺[3.3]庚烷-2-基)乙酰胺(化合物85)
[2332][2333]
将(r)-6-((2r,4r,6r)-6-氨基螺[3.3]庚烷-2-基)-1
6-(2,6-二甲基苯基)-7-((1-(三氟甲基)环丙基)甲基)-9-氧杂-3-硫杂-2,6-二氮杂-1(2,4)-嘧啶-4(1,3)-苯并环壬基酚-5-酮3,3-二氧化物(盐酸盐)(35mg，0.05056mmol)与乙酸酐(大约10.32mg，9.538μl，0.1011mmol)在dcm(0.5ml)中合并，并添加三乙胺(大约25.58mg，35.23μl，0.2528mmol)。将反应在室温下搅拌2小时，然后部分浓缩，用1:1甲醇/dmso稀释，过滤并通过反相hplc(1-99％acn/水，hcl改性剂)纯化，得到n-((2r,4r,6r)-6-((r)-16-(2,6-二甲基苯基)-3,3-二氧代-5-氧代-7-((1-(三氟甲基)环丙基)甲基)-9-氧杂-3-硫杂-2,6-二氮杂-1(2,4)-嘧啶-4(1,3)-苯甲环壬烷-6-基)螺[3.3]庚烷-2-基)乙酰胺(25.5mg，72％)。esi-ms m/z计算值697.2546，实验值698.6(m+1)
+
；保留时间：1.56分钟；lc方法a。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ13.03(s,1h),8.33(s,1h),8.02(d,j＝7.6hz,1h),7.87(s,1h),7.64(s,2h),7.25(s,1h),7.12(s,2h),6.37(s,1h),5.04(d,j＝8.0hz,1h),4.34(s,1h),4.07(q,j＝7.9hz,2h),3.78(t,j＝8.5hz,1h),3.29(s,1h),2.97(dd,j＝29.8,9.8hz,2h),2.46-2.38(m,1h),2.32-2.20(m,2h),2.20-1.79(m,9h),1.75(s,3h),1.48(dd,j＝16.3,9.4hz,1h),0.78(d,j＝13.3hz,2h),0.60(d,j＝21.3hz,2h)。
[2334]
实例69：化合物86和化合物87的制备
[2335]
步骤1：7,10-二氧二螺[3.1.46.14]十一烷-2-羧酸甲酯
[2336][2337]
在室温下在环境条件下，向2-氧代螺[3.3]庚烷-6-羧酸甲酯(19.663g，116.91mmol)和乙二醇(15.582g，14ml，251.05mmol)于甲苯(190ml)中的搅拌的溶液中添加对甲苯磺酸水合物(1.141g，5.9984mmol)。将反应混合物用迪安-斯塔克设备(dean-stark apparatus)加热至回流(140℃)24小时。在冷却至室温之后，将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液(350ml)淬灭。将两个层分离，并将水层用乙酸乙酯(2
×
300ml)萃取。将合并的有机层用盐水(150ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥并浓缩，得到呈浅黄色油的7,10-二氧二螺[3.1.46.14]十一烷-2-羧酸甲酯(27.67g，100％)。产物不经进一步纯化即用于下一步。1h nmr(250mhz,cdcl3)δ4.34-4.13(m,2h),3.91-3.79(m,5h),3.15-2.93(m,1h),2.49-2.37(m,4h),2.35
–
2.26(m,4h)。
[2338]
步骤2：7,10-二氧二螺[3.1.46.14]十一烷-2-基(二苯基)甲醇
[2339][2340]
在0℃下在氮气下，向7,10-二氧二螺[3.1.46.14]十一烷-2-羧酸甲酯(27.67g，117.33mmol)于无水乙醚(250ml)中的搅拌的溶液中滴加溴(苯基)镁(3m的135ml，405.00mmol)于乙醚中的溶液。在该添加期间，形成了大量的沉淀。在添加完成之后，将反应混合物在该温度下搅拌10分钟。将冰水浴去除，并且将反应混合物加热至回流(42℃)2小时。将反应混合物冷却至0℃，并且用饱和氯化铵水溶液(500ml)缓慢淬灭。使反应混合物温热至室温并搅拌，直到所有固体溶解为止。将两个层分离，并将水层用乙醚(2
×
300ml)萃取。将合并的有机层用盐水(150ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥并浓缩。将粗通过硅胶色谱法使用己烷中的0-40％乙醚梯度纯化，得到呈白色固体的7,10-二氧二螺[3.1.46.14]十一烷-2-基(二苯基)甲醇(28.07g，64％)。esi-ms m/z计算值336.1725，实验值319.3(m-水+h)+；保留时间：5.77分钟.1h nmr(250mhz,cdcl3)δ7.47-7.10(m,10h),3.85(s,4h),3.23(p,j＝8.7,8.7,8.6,8.6hz,1h),2.40(s,2h),2.25-2.10(m,5h),2.04-1.89(m,2h)。lc方法s。
[2341]
步骤3：2-二苯亚甲基-7,10-二氧二螺[3.1.46.14]十一烷
[2342][2343]
在室温下在环境条件下，向7,10-二氧二螺[3.1.46.14]十一烷-2-基(二苯基)甲醇(28.07g，83.436mmol)于甲苯(400ml)中的搅拌的溶液中添加对甲苯磺酸水合物(1.664g，8.7479mmol)。将反应混合物用迪安-斯塔克设备加热至回流(140℃)24小时。在冷却至室温之后，将挥发物在真空下去除。将所获得的残余物溶解于乙酸乙酯(350ml)中并且用饱和碳酸氢钠水溶液(400ml)洗涤。将两个层分离，并将水层用乙酸乙酯(2
×
200ml)萃取。将合并的有机层用盐水(150ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥并浓缩，得到呈黄色固体的2-二苯亚甲基-7,10-二氧二螺[3.1.46.14]十一烷(26.645g，90％)。产物不经进一步纯化即用于下一步。esi-ms m/z计算值318.162，实验值319.0(m+1)
+
；保留时间：7.17分钟1h nmr(250mhz,cdcl3)δ7.43-7.04(m,10h),3.88(s,4h),3.03(s,4h),2.43(s,4h)。lc方法s。
[2344]
步骤4：7,10-二氧二螺[3.1.46.14]十一烷-2-酮
[2345]
[2346]
在室温下在环境条件下，向2-二苯亚甲基-7,10-二氧二螺[3.1.46.14]十一烷(26.645g，83.682mmol)于乙腈(350ml)和四氯化碳(350ml)的混合物中的搅拌的溶液中添加水(550ml)。向反应混合物中添加氯化钌(iii)水合物(1.902g，8.4367mmol)，随后分批添加高碘酸钠(90.18g，421.61mmol)。在添加完成之后，将反应混合物在该温度下搅拌5分钟。将反应混合物加热至回流(82℃)1小时。使反应混合物冷却至室温，并通过硅藻土垫过滤。将滤饼用氯仿(3
×
200ml)洗涤。将合并的滤液在真空下浓缩以去除挥发物。将残余水层用盐水(200ml)稀释，并且将产物用氯仿(3
×
400ml)萃取。将合并的有机层用盐水(200ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥并浓缩。将粗通过硅胶色谱法使用己烷中的0-20％丙酮梯度纯化，得到呈黄色油的7,10-二氧二螺[3.1.46.14]十一烷-2-酮(8.745g，59％)。1h nmr(250mhz,cdcl3)δ3.91(s,4h),3.18(s,4h),2.59(s,4h)。
[2347]
步骤5：3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(2r)-2-(7,10-二氧二螺[3.1.46.14]十一烷-2-基氨基)-4,4-二甲基-戊氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸
[2348][2349]
在室温下在环境条件下，向3-[[4-[(2r)-2-氨基-4,4-二甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(8.656g，15.765mmol)和7,10-二氧二螺[3.1.46.14]十一烷-2-酮(3.195g，18.996mmol)于1,2-二氯乙烷(120ml)中的搅拌的悬浮液中分批添加三乙酰氧基硼氢化钠(10.26g，48.410mmol)。在添加完成之后，在15分钟内反应混合物变成均匀溶液。将反应混合物在该温度下搅拌18小时。将反应混合物冷却至0℃，并且用饱和氯化铵水溶液(400ml)缓慢淬灭。将氯仿(150ml)添加到冷混合物中，并且将反应混合物温热至室温。将两个层分离，并将水层用氯仿(2
×
200ml)萃取。将合并的有机层用盐水(100ml)洗涤并经无水硫酸钠干燥。将粗在真空下浓缩至约60ml的残余体积，直接加载到硅胶柱上并使用二氯甲烷中的0-10％甲醇梯度纯化，得到呈白色固体的3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(2r)-2-(7,10-二氧二螺[3.1.46.14]十一烷-2-基氨基)-4,4-二甲基-戊氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(6.67g，59％)。esi-ms m/z计算值664.2931，实验值665.5(m+1)
+
；保留时间：4.2分钟。lc方法s。
[2350]
步骤6：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-12-(7,10-二氧二螺[3.1.46.14]十一烷-2-基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮
[2351][2352]
在0℃下，向3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(2r)-2-(7,10-二氧二螺[3.1.46.14]十一烷-2-基氨基)-4,4-二甲基-戊氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(8.57g，12.246mmol)于无水dmf(171ml)中的溶液中添加comu(8g，18.306mmol)。将diea(4.7488g，6.4ml，36.743mmol)滴加到反应混合物中。将反应在室温下搅拌过夜。将反应用10％柠檬酸(100ml)和水(100ml)的混合物淬灭，并且然后用乙酸乙酯(3
×
200ml)萃取。将合并的有机层用盐水(3
×
100ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法使用10至40％丙酮/己烷纯化，得到呈红色泡沫状固体的(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-12-(7,10-二氧二螺[3.1.46.14]十一烷-2-基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(6.7g，76％)。esi-ms m/z计算值646.2825，实验值647.4(m+1)
+
；保留时间：3.32分钟。lc方法t。
[2353]
步骤7：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2-二氧代-12-(2-氧代螺[3.3]庚烷-6-基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮
[2354][2355]
向(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-12-(7,10-二氧二螺[3.1.46.14]十一烷-2-基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(6.7g，9.3229mmol)于丙酮(100ml)中的溶液中添加ptsa水合物(176mg，0.9253mmol)。将反应在60℃下在油浴中搅拌20小时。添加另一部分ptsa水合物(176mg，0.1645ml，0.9253mmol)。将反应在60℃下再搅拌3小时。将反应冷却至室温，并且然后将其在真空下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法使用10至40％丙酮/己烷纯化，得到呈浅黄色固体的(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2-二氧代-12-(2-氧代螺[3.3]庚烷-6-基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(4.5593g，77％)。esi-ms m/z计算值602.2563，实验值603.8(m+1)
+
；保留时间：2.65分钟。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ13.05(s,1h),8.45(s,1h),7.94(d,j＝12.1hz,1h),7.68(s,2h),7.25(d,j＝7.9hz,1h),
7.12(s,2h),6.41(s,1h),5.10(dd,j＝10.7,4.4hz,1h),4.32(t,j＝10.5,10.5hz,1h),4.13
–
3.95(m,1h),3.79
–
3.63(m,1h),3.32
–
3.29(m,1h),3.25(t,j＝9.8,9.8hz,1h),3.21(s,2h),3.15(s,2h),2.48
–
2.41(m,2h),2.25
–
1.77(m,6h),1.62(dd,j＝15.2,8.4hz,1h),1.39(d,j＝14.9hz,1h),0.50(s,9h)。lc方法w。
[2356]
步骤8：(11r)-12-[6-[(2s,6r)-2,6-二甲基吗啉-4-基]螺[3.3]庚烷-2-基]-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-酮，非对映异构体1(化合物87)，以及(11r)-12-[6-[(2s,6r)-2,6-二甲基吗啉-4-基]螺[3.3]庚烷-2-基]-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-酮，非对映异构体2(化合物86)
[2357][2358]
将(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-12-{6-氧代螺[3.3]庚烷-2-基}-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮(50mg，0.08295mmol)和(2s,6r)-2,6-二甲基吗啉(20mg，0.1737mmol)合并，并溶解于二氯甲烷(0.50ml)中。将混合物在室温下搅拌15分钟，添加三乙酰氧基硼氢化钠(53mg，0.2501mmol)，并将反应混合物在室温下搅拌30分钟。将反应混合物过滤并且将产物通过uv触发的反相hplc分离，用10-99％乙腈/水梯度在水相中用0.5mm hcl酸改性剂洗脱15分钟，得到两个异构体：非对映异构体1，峰1：(11r)-12-[6-[(2s,6r)-2,6-二甲基吗啉-4-基]螺[3.3]庚烷-2-基]-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-酮(15.9mg，55％)，esi-ms m/z计算值701.3611，实验值702.7(m+1)
+
；保留时间：1.41分钟，lc方法a；以及非对映异构体2，峰2：(11r)-12-[6-[(2s,6r)-2,6-二甲基吗啉-4-基]螺[3.3]庚烷-2-基]-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-酮(9.3mg，32％)。esi-ms m/z计算值701.3611，实验值702.7(m+1)
+
；保留时间：1.44分钟，lc方法a。
[2359]
实例70：化合物88、化合物89和化合物90的制备
[2360]
步骤1：n-[6-[[(1r)-1-(羟甲基)-3,3-二甲基-丁基]氨基]螺[3.3]庚烷-2-基]氨基甲酸叔丁酯
[2361][2362]
向(2r)-2-氨基-4,4-二甲基-戊烷-1-醇(盐酸盐)(55g，328.0mmol)于1,2-二氯乙烷(600ml)中的混合物中添加diea(60ml，344.5mmol)并将混合物在环境温度下搅拌5分钟。向混合物中添加n-(2-氧代螺[3.3]庚烷-6-基)氨基甲酸叔丁酯(73.7g，327.1mmol)，然后添加hoac(20ml，351.7mmol)并且将均匀混合物搅拌2小时。向混合物中分批添加三乙酰氧基硼氢化钠(83.6g，394.4mmol)，并将混合物在环境温度下搅拌2小时。将混合物用冰水浴冷却并用水(600ml)淬灭并搅拌10分钟。向混合物中分批添加hcl(12m的60ml，720.0mmol)部分，直到混合物的ph为约1，然后添加乙酸异丙酯(600ml)。将混合物用naoh(50％w/w的160g，2.000mol)碱化，产生乳液。在添加nacl、调节ph降低并添加iproac之后，将有机相部分分离并将溶剂在真空中去除至约250ml。使水相穿过硅藻土塞。将水相用1l的iproac萃取。将有机相合并，并通过硅藻土塞过滤。将少量的水分离，并且将有机相经硫酸镁干燥，经硅藻土过滤并在真空中浓缩，得到浅黄色糖蜜。将所述浅黄色糖蜜用mtbe(1,000ml)稀释并且添加tsoh(42g，243.9mmol)。将混合物在环境温度下搅拌4小时。将类白色浆料使用m玻璃料过滤，得到固体糊剂。将沉淀风干20小时。然后将仍然潮湿的固体用mtbe(1000ml)稀释并将沉淀残余物用meoh(100ml)转移。向乳状溶液中添加naoh(2m的350ml，700.0mmol)，将混合物搅拌直到观察不到固体为止。将有机相分离，并且将水相用mtbe(1000ml)萃取。将合并的有机相用300ml的盐水洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并在真空中浓缩，得到浅黄色油状泡沫的n-[6-[[(1r)-1-(羟甲基)-3,3-二甲基-丁基]氨基]螺[3.3]庚烷-2-基]氨基甲酸叔丁酯(88.5g，79％)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ7.00(d,j＝8.0hz,1h),4.42(s,1h),4.09(q,j＝5.4hz,0h),3.78(q,j＝8.1hz,1h),3.26(dd,j＝10.7,4.5hz,1h),3.21-3.10(m,2h),2.42(q,j＝5.5,5.0hz,1h),2.23(dp,j＝18.3,6.7,6.2hz,2h),2.05(dt,j＝11.6,5.4hz,2h),1.82(q,j＝9.8,9.3hz,2h),1.71-1.42(m,3h),1.35(s,10h),0.87(s,10h)。esi-ms m/z计算值340.27258，实验值341.3(m+1)
+
；保留时间：0.9分钟(lc方法a)。
[2363]
步骤2：3-[[4-[(2r)-2-[[2-(叔丁氧基羰基氨基)螺[3.3]庚烷-6-基]氨基]-4,4-二甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸
[2364][2365]
将n-[6-[[(1r)-1-(羟甲基)-3,3-二甲基-丁基]氨基]螺[3.3]庚烷-2-基]氨基甲酸叔丁酯(70.7g，207.6mmol)和3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(93.0g，202.2mmol)于methf(800ml)中的溶液在环境温度下搅拌10分钟。使用水浴冷却并保持反应温度《40℃，向混合物中缓慢添加叔丁醇钠(100g，1.041mol)。在添加之后，反应混合物变成浅橙色浆液并在环境温度下搅拌45分钟。将反应温热至40℃并搅拌45分钟。添加叔丁醇钠(19.6g，203.9mmol)并将反应在30℃下搅拌。将反应逐渐冷却至环境
温度并变成浅橙色浆液。将反应用冰浴冷却并且将反应通过缓慢添加hcl(2m的800ml，1.600mol)淬灭并搅拌5分钟。将混合物使用etoac转移到分液漏斗中。将有机相分离，并且将水相用etoac(400ml)萃取。将合并的有机相用500ml的盐水洗涤，经硫酸镁干燥，经硅藻土过滤并在真空中浓缩，得到橙色泡沫。使用粗产物，无需进一步纯化。3-[[4-[(2r)-2-[[2-(叔丁氧基羰基氨基)螺[3.3]庚烷-6-基]氨基]-4,4-二甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(157g，100％)esi-ms m/z计算值721.3509，实验值722.2(m+1)
+
；保留时间：1.23分钟(lc方法a)。
[2366]
步骤3：((2s,4s,6s)-6-((r)-1
6-(2,6-二甲基苯基)-7-新戊基-3,3-二氧代-5-氧代-9-氧杂-3-硫杂-2,6-二氮杂-1(2,4)-嘧啶-4(1,3)-苯甲环壬烷-6-基)螺[3.3]庚烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(化合物89)，以及((2r,4r,6r)-6-((r)-1
6-(2,6-二甲基苯基)-7-新戊基-3,3-二氧代-5-氧代-9-氧杂-3-硫杂-2,6-二氮杂-1(2,4)-嘧啶-4(1,3)-苯甲环壬烷-6-基)螺[3.3]庚烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(化合物90)
[2367][2368]
在0℃下向3-[[4-[(2r)-2-[[2-(叔丁氧基羰基氨基)螺[3.3]庚烷-6-基]氨基]-4,4-二甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(24.5g，32.31mmol)于dmf(300ml)中的溶液中添加diea(18ml，103.3mmol)，然后分批添加hatu(18.4g，48.39mmol)。将冷却浴去除，并且将混合物在环境温度下搅拌24小时。将混合物缓慢倒入hcl(12m的8.0ml，96.00mmol)于水(900ml)的溶液中，并在环境温度下搅拌10分钟。将棕黄色浆料使用m玻璃料过滤。将沉淀用50ml的水洗涤3次并风干18小时。将滤饼溶解于etoac(500ml)中并将水相分离。将水相用300ml的etoac萃取并且将合并的有机相在真空中浓缩。将粗产物在750g柱上进行色谱分析，用10-100％ etoac/己烷洗脱(产物在70％ etoac洗脱)。将从先前反应中获得的不纯的产物合并，并在750g柱上进行色谱分析，用10-100％ etoac/己烷洗脱(产物在70％ etoac洗脱)。将不纯的级分合并，并在450g反相柱上进行色谱分析，用50-100％ acn/水洗脱，得到n-{6-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯乙基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]螺[3.3]庚烷-2-基}氨基甲酸叔丁酯(14.3g，63％)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ13.02(s,1h),8.41(s,1h),7.91(s,1h),7.66(s,2h),7.25(t,j＝7.6hz,1h),7.09(dd,j＝21.9,7.8hz,3h),6.39(s,1h),5.14-4.97(m,1h),4.29(d,j＝6.4hz,1h),3.87(dt,j＝19.3,8.9hz,2h),3.66(s,1h),3.18-2.90(m,2h),2.38(d,j＝8.5hz,1h),2.27(d,j＝38.2hz,2h),2.17-1.99(m,5h),1.86(d,j＝30.6hz,5h),1.58(dt,j＝16.5,8.6hz,1h),1.37(s,9h),0.49(d,j＝3.9hz,9h)。esi-ms m/z计算值703.34033，实验值704.4(m+1)
+
；保留时间：2.96分钟(lc方法a)。
[2369]
将该产物与来自先前实验的物质合并，总共得到62g，使用lux-cel-4柱(2
×
25cm)以60毫升/分钟用35％甲醇/co2的流动相对其进行手性sfc分离。甲醇中的样品浓度为
2.34(m,2h),2.34-2.15(m,4h),1.99(s,6h),1.59(dd,j＝15.2,8.4hz,1h),1.36(d,j＝14.9hz,1h),0.49(s,9h)。esi-ms m/z计算值603.2879，实验值604.5(m+1)
+
；保留时间：1.32分钟(lc方法a)。
[2373]
步骤5：((2s,4s,6s)-6-((r)-1
6-(2,6-二甲基苯基)-7-新戊基-3,3-二氧代-5-氧代-9-氧杂-3-硫杂-2,6-二氮杂-1(2,4)-嘧啶-4(1,3)-苯甲环壬烷-6-基)螺[3.3]庚烷-2-基)氨基甲酸甲酯(化合物88)
[2374][2375]
在反应小瓶中，将(r)-6-((2s,4s,6s)-6-氨基螺[3.3]庚烷-2-基)-1
6-(2,6-二甲基苯基)7-新戊基-9-氧杂-3-硫杂-2,6-二氮杂-1(2,4)-嘧啶-4(1,3)-苯并环壬基酚-5-酮3,3-二氧化物(盐酸盐)(3.5g，5.467mmol)与二异丙基乙胺(3.14ml，18.03mmol)在二氯甲烷(70ml)中混合。将反应使用冰盐浴冷却至-10℃，然后添加氯甲酸甲酯(465μl，6.018mmol)。使反应混合物在-10℃下搅拌15分钟，并使其温热至室温。在室温下搅拌1小时之后，将反应混合物蒸发至干燥，然后用乙酸乙酯稀释，然后用1n hcl(3x)和饱和nacl溶液洗涤。将有机层分离，经无水硫酸钠干燥，过滤并蒸发至干燥。将粗物质通过硅胶柱色谱法使用50-100％ etoac/己烷梯度纯化。将分离的固体用己烷洗涤，然后在40℃下在高真空下干燥过夜。分离出呈白色粉末的产物。((2s,4s,6s)-6-((r)-1
6-(2,6-二甲基苯基)-7-新戊基-3,3-二氧代-5-氧代-9-氧杂-3-硫杂-2,6-二氮杂-1(2,4)-嘧啶-4(1,3)-苯甲环壬烷-6-基)螺[3.3]庚烷-2-基)氨基甲酸甲酯(2.753g，76％).1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.40(s,1h),7.91(s,1h),7.66(s,2h),7.36(d,j＝7.9hz,1h),7.26(t,j＝7.7hz,1h),7.11(d,j＝7.7hz,2h),6.40(s,1h),5.06(dd,j＝10.7,4.3hz,1h),4.28(t,j＝11.2hz,1h),3.88(hept,j＝10.5,9.7hz,3h),3.67(d,j＝7.7hz,1h),3.32(s,2h),3.06(t,j＝9.7hz,1h),2.98(t,j＝10.0hz,1h),2.42(d,j＝6.1hz,1h),2.35(d,j＝10.0hz,1h),2.26(p,j＝6.3hz,2h),2.17-2.07(m,3h),1.98(q,j＝9.3,7.8hz,4h),1.93-1.88(m,2h),1.60(dd,j＝15.2,8.3hz,1h),1.36(d,j＝15.0hz,1h),0.49(s，9h)。esi-ms m/z计算值661.2934，实验值662.4(m+1)
+
；保留时间：2.64分钟(lc方法i)。
[2376]
实例71：化合物91的制备
[2377]
步骤1：n-[2-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]螺[3.3]庚烷-6-基]氨基甲酸叔丁酯
[2378][2379]
在0℃下向3-[[4-[(2r)-2-[[2-(叔丁氧基羰基氨基)螺[3.3]庚烷-6-基]氨基]-4,4-二甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(45.77g，60.35mmol)于dmf(500ml)中的溶液中添加diea(32ml，183.7mmol)，然后分批添加hatu(34.4g，90.47mmol)。将冷却浴去除，并且将混合物在环境温度下搅拌36小时。将混合物缓慢倒入hcl(12m的15ml，180.0mmol)于水(1.5l)中的溶液中，并在环境温度下搅拌10分钟。将棕黄色浆料使用m玻璃料过滤。将沉淀用50ml的水洗涤3次并风干12小时。将滤饼溶解于etoac(500ml)中并将水相分离。将水相用300ml的etoac萃取并且将合并的有机相在真空中浓缩，得到暗琥珀色油。将粗产物在750g柱上进行色谱分析，用10-100％ etoac/己烷洗脱(产物在70％ etoac洗脱)。将产物与来自几个较小批次的物质合并，得到n-[2-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]螺[3.3]庚烷-6-基]氨基甲酸叔丁酯(34g，80％)esi-ms m/z计算值703.34033，实验值704.2(m+1)
+
；保留时间：3.05分钟(lc方法i)。
[2380]
步骤2：(11r)-12-(6-氨基螺[3.3]庚烷-2-基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮
[2381][2382]
在反应小瓶中，将n-[2-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]螺[3.3]庚烷-6-基]氨基甲酸叔丁酯(500mg，0.7103mmol)与hcl(4m的1.776ml，7.104mmol)(二噁烷中的4m)一起溶解于二氯甲烷(2ml)中。将反应混合物在室温下搅拌1.5小时，然后蒸发至干燥。将固体物质在50％乙酸乙酯/己烷的混合物中制成浆液并过滤。回收呈白色固体的产物(hcl盐)。(11r)-12-(6-氨基螺[3.3]庚烷-2-基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)
(434.7mg，96％)esi-ms m/z计算值603.2879，实验值604.6(m+1)
+
；保留时间：1.3分钟(lc方法a)。
[2383]
步骤3：((2r,4r,6r)-6-((r)-1
6-(2,6-二甲基苯基)-7-新戊基-3,3-二氧代-5-氧代-9-氧杂-3-硫杂-2,6-二氮杂-1(2,4)-嘧啶-4(1,3)-苯甲环壬烷-6-基)螺[3.3]庚烷-2-基)氨基甲酸甲酯(化合物91)
[2384][2385]
在反应小瓶中，将(11r)-12-(6-氨基螺[3.3]庚烷-2-基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)(102.4mg，0.1599mmol)与二异丙基乙胺(68.2mg，0.5277mmol)在二氯甲烷(2ml)中混合。将反应使用冰盐浴冷却至-10℃，然后添加氯甲酸甲酯(15.87mg，0.1679mmol)。使反应混合物在-10℃下搅拌15分钟，温热至室温，浓缩至体积的约一半。将反应混合物用乙酸乙酯稀释，然后用1n hcl(3x)和饱和nacl溶液洗涤。将有机层分离，经无水硫酸钠干燥，过滤并蒸发至干燥。将粗物质使用正相sfc-ms方法使用由phenomenex销售的lux-3柱(250
×
21.2mm，5μm粒径)(pn：00g-4493-p0-ax)和14.5分钟内从10-40％流动相b运行的双梯度(包含40-80％流动相冲洗液)纯化。流动相a＝co2。流动相b＝meoh(20mm nh3)。流速＝10-40％ meoh[20mm nh3]60毫升/分钟，40-80％ meoh[20mm nh3]60毫升/分钟。进样体积＝可变，并且柱温＝40℃，得到两个异构体，峰1和峰2。峰2是((2r,4r,6r)-6-((r)-16-(2,6-二甲基苯基)-7-新戊基-3,3-二氧代-5-氧代-9-氧杂-3-硫杂-2,6-二氮杂-1(2,4)-嘧啶-4(1,3)-苯甲环壬烷-6-基)螺[3.3]庚烷-2-基)氨基甲酸甲酯(30.1mg，53％)1hnmr(400mhz，甲醇-d4)δ8.49(s,1h),7.96-7.89(m,1h),7.50(d,j＝6.0hz,2h),7.05(t,j＝7.6hz,1h),6.94(d,j＝7.7hz,2h),5.91(s,1h),5.18(dd,j＝10.8,4.4hz,1h),3.97(t,j＝11.1hz,1h),3.90-3.78(m,3h),3.51(s,3h),3.03(dt,j＝18.8,9.8hz,2h),2.44(t,j＝8.7hz,1h),2.31(q,j＝8.0,4.5hz,2h),2.20-2.06(m,2h),1.93(q,j＝10.1hz,4h),1.83(s,1h),1.52(dd,j＝15.0,7.9hz,2h),1.44(d,j＝15.0hz,1h),1.19(s,2h),0.79(d,j＝7.2hz,1h),0.45(s,8h)。esi-ms m/z计算值661.2934，实验值662.3(m+1)
+
；保留时间：1.58分钟(lc方法1a)。
[2386]
实例72：化合物92的制备
[2387]
步骤1：((2s,4s,6s)-6-((r)-1
6-(2,6-二甲基苯基)-7-新戊基-3,3-二氧代-5-氧代-9-氧杂-3-硫杂-2,6-二氮杂-1(2,4)-嘧啶-4(1,3)-苯甲环壬烷-6-基)螺[3.3]庚烷-2-基)氨基甲酸异丙酯(化合物92)
硫杂-2,6-二氮杂-1(2,4)-嘧啶-4(1,3)-苯甲环壬烷-6-基)螺[3.3]庚烷-2-基)(甲基)氨基甲酸甲酯(17.4mg，28％)。1h nmr(400mhz，甲醇-d4)δ8.46(s,1h),7.92(d,j＝7.5hz,1h),7.61(t,j＝6.8hz,1h),7.57(d,j＝7.6hz,1h),7.17(t,j＝7.6hz,1h),7.03(d,j＝7.6hz,2h),6.17(s,1h),5.18(dd,j＝10.8,4.3hz,1h),4.13(t,j＝11.2hz,1h),3.89(p,j＝8.7hz,1h),3.72(ddd,j＝12.2,8.3,4.4hz,1h),3.57(s,3h),3.11(t,j＝9.7hz,1h),2.99(t,j＝10.0hz,1h),2.75(s,3h),2.45-2.32(m,1h),2.35-2.24(m,1h),2.22-2.11(m,5h),2.08-1.78(m,6h),1.60(dd,j＝15.3,8.2hz,1h),1.41(d,j＝15.1hz,1h),1.23-1.10(m,1h),0.49(s,9h)。esi-ms m/z计算值675.3091，实验值676.5(m+1)
+
；保留时间：2.0分钟(lc方法a)。
[2398]
实例75：化合物95的制备
[2399]
步骤1：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)3-(甲氧基甲基)-2,2-二氧代-12-(2-氧代螺[3.3]庚烷-6-基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-酮
[2400][2401]
在反应小瓶中，将(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2-二氧代-12-(2-氧代螺[3.3]庚烷-6-基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-酮(265mg，0.4309mmol)与碳酸钾(95.3mg，0.6896mmol)一起溶解于乙腈(2.2ml)中。向反应混合物中滴加氯(甲氧基)甲烷(36μl，0.4740mmol)并将反应在室温下搅拌过夜。将反应蒸发至干燥并在乙酸乙酯/水之间分配。将有机层分离，经无水硫酸钠干燥，过滤并蒸发至干燥。将粗物质通过硅胶柱色谱法使用30-100％etoac/己烷梯度纯化，得到(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)3-(甲氧基甲基)-2,2-二氧代-12-(2-氧代螺[3.3]庚烷-6-基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-酮(83.3mg，30％)。esi-ms m/z计算值646.28253，实验值647.4(m+1)
+
；保留时间：1.93分钟；lc方法a。
[2402]
步骤2：n-[6-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-3-(甲氧基甲基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-12-基]螺[3.3]庚烷-2-亚基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺
[2403][2404]
在反应小瓶中，将(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-3-(甲氧基甲基)-2,2-二氧代-12-(2-氧代螺[3.3]庚烷-6-基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-酮(111mg，0.1716mmol)与2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(23mg，0.1898mmol)(外消旋)一起溶解于四氢呋喃(0.5ml)中。向反应中添加四乙醇钛(iv)(73μl，0.3482mmol)并将反应在55℃下加热过夜。将反应冷却至室温并用饱和氯化铵溶液淬灭。将反应混合物过滤并将固体用thf洗涤。将滤液收集并蒸发至干燥。将粗产物通过硅胶柱色谱法使用30-100％ etoac/dcm梯度纯化，得到n-[6-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-3-(甲氧基甲基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-12-基]螺[3.3]庚烷-2-亚基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(异构体的1:1混合物，100.4mg，78％)esi-ms m/z计算值749.32806，实验值750.5(m+1)
+
；保留时间：2.05和2.37分钟(lc方法a)。
[2405]
步骤3：(11r)-12-(2-氨基-2-氨基-螺[3.3]庚烷-6-基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-酮，非对映异构体1，以及(11r)-12-(2-氨基-2-氨基-螺[3.3]庚烷-6-基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-酮，非对映异构体2
[2406][2407]
在反应小瓶中，将n-[6-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-3-(甲氧基甲基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-12-基]螺[3.3]庚烷-2-亚基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(100mg，0.1333mmol)溶解于甲苯(2.86ml)中并冷却至-78℃。向反应中缓慢添加三甲基铝(2m的147.6μl，0.2952mmol)。将反应在-78℃下搅拌20分钟之后，缓慢添加甲基锂
(1.6m的365.9μl，0.5854mmol)并在-78℃下继续搅拌1小时。使反应缓慢温热至室温并在该温度下搅拌15分钟，然后用水(100μl)淬灭。然后将反应混合物蒸发至干燥并将残余物与hcl(4m的99.98μl，0.3999mmol)一起溶解于甲醇(7.2ml)中。将反应混合物在室温下搅拌过夜，然后通过制备型hplc使用20-100％ acn/水梯度纯化。将单个异构体分离为两个独立的峰：非对映异构体1(11r)-12-(2-氨基-2-氨基-螺[3.3]庚烷-6-基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-酮(2.3mg，5％)，esi-ms m/z计算值617.3036，实验值618.6(m+1)
+
；保留时间：1.33分钟(lc方法a)；以及非对映异构体2(11r)-12-(2-氨基-2-氨基-螺[3.3]庚烷-6-基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-酮(2mg，5％)，esi-ms m/z计算值617.3036，实验值618.7(m+1)
+
；保留时间：1.41分钟(lc方法a)。
[2408]
步骤4：n-[6-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-12-基]-2-甲基-螺[3.3]庚烷-2-基]氨基甲酸甲酯(化合物95)
[2409][2410]
在反应小瓶中，将(11r)-12-(2-氨基-2-氨基-螺[3.3]庚烷-6-基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-酮(2.3mg，0.003574mmol)(非对映异构体1)与diea(2.1μl，0.01206mmol)一起溶解于dcm(250μl)中。将反应混合物冷却至0℃，然后添加氯甲酸甲酯(0.31μl，0.004012mmol)。在0℃下继续搅拌1小时，然后在室温下搅拌1小时。将反应混合物用乙酸乙酯稀释并用1n hcl(3x)洗涤，然后通过饱和nacl溶液洗涤。将有机层分离，经无水硫酸钠干燥，过滤并蒸发至干燥。将残余物通过制备型tlc使用5％ meoh/dcm作为洗脱剂纯化。在溶剂的蒸发之后收集产物，得到n-[6-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-12-基]-2-甲基-螺[3.3]庚烷-2-基]氨基甲酸甲酯(0.9mg，34％)，esi-ms m/z计算值675.3091，实验值676.5(m+1)
+
；保留时间：1.92分钟(lc方法a)。
[2411]
实例76：化合物96的制备
[2412]
步骤1：n-[6-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-12-基]-2-甲基-螺[3.3]庚烷-2-基]氨基甲酸甲酯(化合物96)
[2413][2414]
在反应小瓶中，将(11r)-12-(2-氨基-2-氨基-螺[3.3]庚烷-6-基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-酮(2mg，0.003108mmol)(非对映异构体2)与二异丙基乙胺(1.8μl，0.01033mmol)一起溶解于dcm(250μl)中。将反应混合物冷却至0℃，然后添加氯甲酸甲酯(0.27μl，0.003494mmol)。在0℃下继续搅拌1小时，然后在室温下搅拌1小时。将反应混合物用乙酸乙酯稀释并用1n hcl(3x)洗涤，然后通过饱和nacl溶液洗涤。将有机层分离，经无水硫酸钠干燥，过滤并蒸发至干燥。将残余物通过制备型tlc使用5％ meoh/dcm作为洗脱剂纯化。在溶剂的蒸发之后收集产物，得到n-[6-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-12-基]-2-甲基-螺[3.3]庚烷-2-基]氨基甲酸甲酯(0.9mg，39％)，esi-ms m/z计算值675.3091，实验值676.5(m+1)
+
；保留时间：1.97分钟(lc方法a)。
[2415]
实例77：化合物97的制备
[2416]
步骤1：(2r)-4-甲基-2-[(1-甲基吡唑-4-基)氨基]戊烷-1-醇
[2417][2418]
将4-碘-1-甲基-吡唑(100mg，0.4808mmol)与cui(大约9.157mg，0.04808mmol)、(2s)-吡咯烷-2-羧酸(大约11.07mg，0.09616mmol)和碳酸铯(大约469.8mg，1.442mmol)在氮气吹扫的螺旋盖小瓶中的dmso(0.5ml)中合并，并添加(2r)-2-氨基-4-甲基-戊烷-1-醇(大约73.24mg，76.29μl，0.6250mmol)。将反应混合物加热至80℃(对于1-a2为100℃)16小时。然后将反应混合物用甲醇稀释，过滤两次并通过反相hplc(1-30acn/水，hcl改性剂，15分钟运行)纯化，得到(2r)-4-甲基-2-[(1-甲基吡唑-4-基)氨基]戊烷-1-醇(17mg，18％)esi-ms m/z计算值197.15282，实验值198.3(m+1)
+
；保留时间：0.25分钟；lc方法d。
[2419]
步骤2：3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(2r)-4-甲基-2-[(1-甲基吡唑-4-基)氨基]戊氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸
[2420][2421]
将(2r)-4-甲基-2-[(1-甲基吡唑-4-基)氨基]戊烷-1-醇(60mg，0.3041mmol)与3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(100mg，0.2393mmol)在thf(0.5ml)中合并，并搅拌直到固体大部分溶解/变成悬浮液为止。添加叔丁醇钠(140mg，1.457mmol)并且反应短暂变得稍微温热。在没有外部加热的情况下继续搅拌15分钟。然后将反应混合物在1mhcl与乙酸乙酯之间分配。将层分离，并且将水溶液用乙酸乙酯再萃取4次。将合并的有机物用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。将所得粗物质溶解于1:1dmso/甲醇中，过滤并通过反相hplc(1-60acn/水，hcl改性剂，15分钟运行)纯化，得到3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(2r)-4-甲基-2-[(1-甲基吡唑-4-基)氨基]戊氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(62mg，45％)esi-ms m/z计算值578.23114，实验值579.5(m+1)
+
；保留时间：0.48分钟；lc方法d。
[2422]
步骤3：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-12-(1-甲基吡唑-4-基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(化合物97)
[2423][2424]
将3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(2r)-4-甲基-2-[(1-甲基吡唑-4-基)氨基]戊氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(62mg，0.1071mmol)与n-甲基吗啉(大约43.33mg，47.10μl，0.4284mmol)在dmf(8ml)中混合，然后在冰浴中冷却至0℃。一次性添加2-氯-4,6-二甲氧基-1,3,5-三嗪(大约28.21mg，0.1607mmol)并且随着冰的融化，使反应混合物温热至室温，然后在室温下搅拌65小时(整个周末)。将反应浓缩，然后溶解于1:1dmso/甲醇中，过滤并通过反相hplc(1-99％ acn/水，hcl改性剂，15分钟运行)纯化，得到(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-12-(1-甲基吡唑-4-基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(26mg，42％)。esi-ms m/z计算值560.2206，实验值561.4(m+1)
+
；保留时间：1.51分钟；lc方法a。
[2425]
实例78：化合物98的制备
[2426]
步骤1：(2r)-2-[[1-(2-甲氧基乙基)吡唑-4-基]氨基]-4-甲基-戊烷-1-醇
[2427][2428]
将4-碘-1-(2-甲氧基乙基)吡唑(大约215.1mg，0.8532mmol)与(2r)-2-氨基-4-甲基-戊烷-1-醇(100mg，0.8533mmol)、cui(大约16.25mg，0.08532mmol)和naoh(大约136.5mg，3.413mmol)(用研钵和研杵研磨)在螺旋盖小瓶中合并，然后用氮气吹扫。添加dmso(0.3ml)和水(0.15ml)并将反应混合物在90℃下搅拌16小时。在冷却至室温之后，将反应混合物用甲醇过滤并稀释。将滤液通过旋转蒸发浓缩并且将所得残余物溶解于1:1dmso/甲醇中，再次过滤并通过反相hplc(1-50％ acn/水，hcl改性剂，15分钟运行)纯化，在干燥之后得到指定的(2r)-2-[[1-(2-甲氧基乙基)吡唑-4-基]氨基]-4-甲基-戊烷-1-醇(盐酸盐)(151mg，64％)。esi-ms m/z计算值241.17903，实验值242.6(m+1)
+
；保留时间：0.28分钟；lc方法d。
[2429]
步骤2：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-12-[1-(2-甲氧基乙基)吡唑-4-基]-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(化合物98)
[2430][2431]
将(2r)-2-[[1-(2-甲氧基乙基)吡唑-4-基]氨基]-4-甲基-戊烷-1-醇(盐酸盐)(151mg，0.5436mmol)与3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(大约174.8mg，0.4182mmol)在thf(0.75ml)中合并，并搅拌直到固体大部分溶解为止。添加叔丁醇钠(大约241.2mg，2.510mmol)并且反应短暂变得稍微温热。在没有外部加热的情况下继续搅拌15分钟。然后将反应混合物在1m hcl与乙酸乙酯之间分配。将层分离，并且将水溶液用乙酸乙酯再萃取4次。将合并的有机物用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。将所得粗物质溶解于1:1dmso/甲醇中，过滤并通过反相hplc(1-60acn/水，hcl改性剂，15分钟运行)纯化，得到snar产物，随后将所述产物溶解于dmf(8ml)和nmm(大约169.2mg，183.9μl，1.673mmol)中。将反应混合物冷却至0℃并添加cdmt(大约110.2mg，0.6274mmol)。在冰融化时使反应温热至室温并将其搅拌48小时。将反应混合物用几滴水淬灭，部分浓缩，用1:1dmso/甲醇稀释，过滤并通过反相hplc(1-70％ acn/水，hcl改性剂，30分钟运行)纯化，得到(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-12-[1-(2-甲氧基乙基)吡唑-4-基]-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(22mg，9％)。esi-ms m/z计算值604.24677，实验值605.5(m+1)
+
；保留时间：1.56分钟；lc方法a。
[2432]
实例79：化合物99的制备
[2433]
步骤1：(2r)-2-[(1-苄基吡唑-4-基)氨基]-4-甲基-戊烷-1-醇
[2434][2435]
将naoh(3.4g，85.006mmol)溶解于水(15ml)中并且将该溶液添加到dmso(30ml)中并将氮气鼓入15分钟。添加cui(406mg，2.1318mmol)，然后添加(2r)-2-氨基-4-甲基-戊烷-1-醇(2.5g，21.333mmol)和1-苄基-4-碘-吡唑(6g，21.120mmol)。将反应在90℃下搅拌16小时并冷却至室温。将反应混合物在硅藻土垫上过滤并用meoh(150ml)漂洗。将挥发物在真空下去除。添加饱和氯化铵水溶液(50ml)并且将产物用dcm(4
×
50ml)萃取。将合并的有机层用盐水(50ml)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩。将粗残余物通过80g硅胶筒快速色谱法使用etoac/庚烷(0至100％)的梯度并且然后使用meoh/etoac(0至20％)的梯度纯化。得到呈淡粉色固体的(2r)-2-[(1-苄基吡唑-4-基)氨基]-4-甲基-戊烷-1-醇(2.59g，42％)。esi-ms m/z计算值273.1841，实验值274.2(m+1)
+
；保留时间：1.3分钟(lc方法x)。
[2436]
步骤2：3-[[4-[(2r)-2-[(1-苄基吡唑-4-基)氨基]-4-甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸
[2437][2438]
向3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(3.3g，7.2635mmol)和(2r)-2-[(1-苄基吡唑-4-基)氨基]-4-甲基-戊烷-1-醇(2g，7.3160mmol)于thf(24ml)中的用水浴维持在15℃的溶液中添加叔丁醇钠(3.5g，36.419mmol)，并将混合物在室温下搅拌0.25小时。添加1n hcl水溶液(20ml)，并且将产物用etoac(3
×
20ml)萃取。将合并的有机层用盐水(15ml)洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并在减压下浓缩。得到呈淡粉色固体的粗3-[[4-[(2r)-2-[(1-苄基吡唑-4-基)氨基]-4-甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(5.65g，105％)esi-ms m/z计算值654.2624，实验值655.2(m+1)
+
；保留时间：1.78分钟(lc方法x)。
[2439]
步骤3：(11r)-12-(1-苄基吡唑-4-基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮
[2440][2441]
向n-甲基吗啉(3.4960g，3.8ml，34.564mmol)于dmf(500ml)中的0℃溶液中添加2-氯-4,6-二甲氧基-1,3,5-三嗪(2.2g，12.530mmol)，然后添加3-[[4-[(2r)-2-[(1-苄基吡唑-4-基)氨基]-4-甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(5.8g，8.0383mmol)。在5分钟之后，将反应回到室温并搅拌24小时。将反应混合物倒入水和盐水的1:1v/v混合物(600ml)中并将产物用methf(4
×
150ml)萃取。将合并的有机层用水和盐水(4
×
200ml)的1:1v/v混合物洗涤并且然后用盐水(150ml)洗涤。将所得有机层经硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩。将粗通过快速色谱法使用80g筒纯化，用etoac/dcm的梯度(在15cv中为20至100％)洗脱，然后用meoh/etoac的梯度(0至20％)洗脱。得到呈类白色固体的(11r)-12-(1-苄基吡唑-4-基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(2.4g，42％)。esi-ms m/z计算值636.2519，实验值637.2(m+1)
+
；保留时间：4.28分钟(lc方法y)。l
[2442]
步骤4：(11r)-12-(1-苄基吡唑-4-基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-3-(甲氧基甲基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮
[2443][2444]
在0℃下向(11r)-12-(1-苄基吡唑-4-基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(40mg，0.0561mmol)于dmf(0.5ml)中的溶液中添加碳酸钾(15mg，0.1085mmol)和氯(甲氧基)甲烷(5.3000mg，5μl，0.0658mmol)。将反应在室温下搅拌16小时，并且添加氯(甲氧基)甲烷(5.3000mg，5μl，0.0658mmol)。在2小时之后，将反应粗直接加载到12g c
18
筒上。在20cv中使用60至100％的meoh/酸性水(0.1％v/v甲酸)的梯度进行纯化。在蒸发之后，通过1h nmr得到呈类白色固体的含有油脂和etoac的痕迹的(11r)-12-(1-苄基吡唑-4-基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-3-(甲氧基甲基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(17mg，44％)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.86(s,1h),8.19-8.12(m,1h),8.03(s,1h),7.92-7.86(m,1h),7.84-7.78(m,1h),7.58(s,1h),7.41-7.35(m,2h),7.34-7.30(m,1h),
7.30-7.26(m,2h),7.25-7.19(m,1h),7.11(d,j＝7.8hz,2h),6.67(s,1h),5.71(d,j＝11.0hz,1h),5.57(d,j＝10.8hz,1h),5.43-5.36(m,3h),4.06-3.91(m,2h),3.03(s,3h),1.97(s,6h),1.60-1.45(m,1h),1.37-1.25(m,1h),1.11-1.01(m,1h),0.68(d,j＝6.6hz,3h),0.20(d,j＝6.4hz,3h)。esi-ms m/z计算值680.2781，实验值681.2(m+1)
+
；保留时间：2.13分钟(lc方法x)。
[2445]
步骤5：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-3-(甲氧基甲基)-2,2-二氧代-12-(1h-吡唑-4-基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮
[2446][2447]
向氢氧化钯20％w/w，50％水(113mg，10％w/w，0.0805mmol)中添加密封管的(11r)-12-(1-苄基吡唑-4-基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-3-(甲氧基甲基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(1.1g，1.6141mmol)于meoh(10ml)中的溶液。将氢气鼓入5分钟并且将密封管在60℃下温热26小时。将溶液鼓入氮气中5分钟并且将粗经硅藻土过滤，用meoh(30ml)洗涤。在减压下移除挥发物。将粗残余物通过24g硅胶筒快速色谱法，使用acoet/dcm的梯度(40cv中为5-100％)纯化。得到呈白色固体的作为第一级分起始材料的(11r)-12-(1-苄基吡唑-4-基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-3-(甲氧基甲基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(698mg，63％)。esi-ms m/z计算值680.2781，实验值681.2(m+1)
+
；保留时间：5.02分钟(lc方法s)。得到呈白色固体的作为第二级分的(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-3-(甲氧基甲基)-2,2-二氧代-12-(1h-吡唑-4-基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(220mg，21％)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ13.04(br.s.,1h),8.85(s,1h),8.15(d,j＝8.1hz,1h),7.94(br.s,1h),7.91-7.88(m,1h),7.82(t,j＝7.3hz,1h),7.55(br.s,1h),7.22(t,j＝7.6hz,1h),7.11(d,j＝7.6hz,2h),6.67(s,1h),5.72(d,j＝11.0hz,1h),5.58(d,j＝11.0hz,1h),5.38(dd,j＝10.8,3.9hz,1h),4.08-3.90(m,2h),3.03(s,3h),2.01-1.94(m,6h),1.60-1.48(m,1h),1.36-1.25(m,1h),1.10-0.99(m,1h),0.71(d,j＝6.6hz,3h),0.21(d,j＝6.4hz,3h)。esi-ms m/z计算值590.2311，实验值591.2(m+1)
+
；保留时间：4.44分钟(lc方法s)。
[2448]
步骤6：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-12-(1h-吡唑-4-基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(化合物99)
[2449][2450]
将(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-3-(甲氧基甲基)-2,2-二氧代-12-(1h-吡唑-4-基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(10mg，0.01693mmol)溶解于dcm(0.15ml)中并添加tfa(150μl，1.947mmol)。将反应混合物在室温下搅拌15分钟，然后在减压下浓缩。将所得粗物质溶解于1:1dmso/甲醇中，过滤并通过制备型hplc(1-70acn/水，hcl改性剂，15分钟运行)纯化，在干燥之后得到(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-12-(1h-吡唑-4-基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(6mg，64％)。esi-ms m/z计算值546.2049，实验值547.5(m+1)
+
；保留时间：1.39分钟(lc方法a)。
[2451]
实例80：化合物100的制备
[2452]
步骤1：3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]氮杂环丁烷-1-羧酸苄酯(化合物100)
[2453][2454]
将3-[[4-[(2r)-2-氨基-4-甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(300mg，0.5607mmol)和3-氧代氮杂环丁烷-1-羧酸苄酯(230mg，1.121mmol)在二氯甲烷(1.25ml)中合并，并添加三乙酰氧基硼氢化钠(300mg，1.415mmol)。在室温下，反应混合物在几分钟之后和在一小时之后变得均匀，添加另外的三乙酰氧基硼氢化钠(300mg，1.415mmol)，然后添加另外的3-氧代氮杂环丁烷-1-羧酸苄酯(230mg，1.121mmol)。再过一小时之后，将反应倒入含有0.5m hcl和乙酸乙酯(各自50ml)的分液漏斗中。将层分离，并且将水溶液用25ml乙酸乙酯再萃取2次，并且将合并的有机物用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。所得物质不经纯化用于下一步骤，3-[[4-[(2r)-2-[(1-苄氧基羰基氮杂环丁烷-3-基)氨基]-4-甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)esi-ms m/z计算值687.27264，实验值688.4(m+1)
+
；保留时间：0.54分钟(lc方法d)。将粗产物与hatu(425mg，1.118mmol)在dmf(60ml)中合并，并添加dipea(500μl，2.871mmol)。将反应在室温下再搅拌20小时，然后在减压下部分浓缩。将反应混合物在乙酸乙酯与1m hcl之间分配并且将层分离。将水溶液用乙酸乙酯再萃取2次，并且将合并的有机物用1m hcl、盐水洗涤，并经硫酸钠干燥。在浓缩之后，将粗物质通过硅胶色谱法纯化，用0-100％乙酸乙酯/二氯甲烷洗脱，得到淡黄色固体3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁
9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(11mg，0.02054mmol)与螺[2.3]己-5-酮(大约5.923mg，0.06162mmol)和乙酸(大约2.467mg，2.336μl，0.04108mmol)在dcm(0.35ml)中合并。在室温下搅拌10分钟之后，添加三乙酰氧基硼氢化钠(大约13.06mg，0.06162mmol)，然后在45分钟之后再次添加部分三乙酰氧基硼氢化钠(大约13.06mg，0.06162mmol)。在90分钟反应时间之后，将反应混合物浓缩并溶解于甲醇中，然后过滤并通过反相hplc(1-99％ acn/水，hcl改性剂)纯化。将含有产物的级分用等体积的乙腈稀释并通过旋转蒸发浓缩，得到(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-12-(1-螺[2.3]己-5-基氮杂环丁烷-3-基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)(1.6mg，12％)。esi-ms m/z计算值615.2879，实验值616.4(m+1)
+
；保留时间：1.31分钟；lc方法a。
[2462]
实例82：化合物102的制备
[2463]
步骤1：(11r)-12-(2-氮杂螺[3.3]庚烷-6-基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮
[2464][2465]
将3-[[4-[(2r)-2-氨基-4-甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(150mg，0.2803mmol)与6-氧代-2-氮杂螺[3.3]庚烷-2-羧酸叔丁酯(90mg，0.4260mmol)在dcm(0.5ml)中合并，并在室温下搅拌五分钟之后添加三乙酰氧基硼氢化钠(180mg，0.8493mmol)。在一小时之后，添加另一部分三乙酰氧基硼氢化钠(180mg，0.8493mmol)，并且在两小时之后，添加最后一部分三乙酰氧基硼氢化钠(90mg，0.4246mmol)，然后在室温下搅拌最后一小时。然后将反应混合物在0.5m hcl与乙酸乙酯之间分配。将层分离，并且将水层用乙酸乙酯再萃取三次。将合并的有机物用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。将所得产物溶解于dmf(10ml)中并在两分钟内添加到hatu(160mg，0.4208mmol)和dipea(250μl，1.435mmol)于dmf(10ml)中的搅拌的溶液中。在室温下三小时之后，将反应混合物在1m hcl与乙酸乙酯之间分配。将层分离，并且将水层用乙酸乙酯再萃取两次。将合并的有机物用盐水洗涤并经硫酸钠干燥然后浓缩。将所得粗物质通过硅胶快速色谱法纯化，用1-100％梯度的乙酸乙酯/己烷洗脱。将含有产物的级分合并并浓缩，得到发泡固体(109mg)。将产物溶解于dcm(10ml)中并添加tfa(325μl，4.218mmol)。将反应混合物在室温下搅拌15分钟，然后用二氯甲烷稀释并浓缩。添加1,2-二氯乙烷并且将反应混合物再次浓缩，得到(11r)-12-(2-氮杂螺[3.3]庚烷-6-基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(三氟乙酸盐)(120mg，62％)esi-ms m/z计算值575.25665，实验值576.6(m+1)
+
；保留时间：0.52分钟(lc方法d)。
[2466]
步骤2：6-[(11r)-6-(2,6-二异丙基苯基)-11-异丁基-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2
λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]-2-氮杂螺[3.3]庚烷-2-羧酸异丙酯(化合物102)
[2467][2468]
将(11r)-12-(2-氮杂螺[3.3]庚烷-6-基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(三氟乙酸盐)(20mg，0.02900mmol)大环与dipea(大约22.49mg，30.31μl，0.1740mmol)和氯甲酸异丙酯(大约2m的29.00μl，0.05800mmol)在dcm(0.5ml)中合并，然后在室温下搅拌10分钟。然后将反应混合物用0.5m hcl淬灭，部分浓缩，用甲醇和dmso(1:1)稀释，过滤并通过反相hplc(1-99％ acn/水，hcl改性剂，15分钟运行)纯化，得到呈白色粉末的对应的6-[(11r)-6-(2,6-二异丙基苯基)-11-异丁基-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]-2-氮杂螺[3.3]庚烷-2-羧酸异丙酯(1.7mg，9％)。esi-ms m/z计算值661.2934，实验值662.5(m+1)
+
；保留时间：1.91分钟；lc方法a。
[2469]
实例83：化合物103的制备
[2470]
步骤1：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-12-(2-异丙基-2-氮杂螺[3.3]庚烷-6-基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(化合物103)
[2471][2472]
将(11r)-12-(2-氮杂螺[3.3]庚烷-6-基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(三氟乙酸盐)(32mg，0.04639mmol)与丙酮(25μl，0.3405mmol)在dcm(0.4ml)中合并，并在室温下搅拌5分钟。添加三乙酰氧基硼氢化钠(100mg，0.4718mmol)并将反应混合物在室温下再搅拌10分钟。然后将反应混合物用甲醇和乙酸稀释，过滤并通过反相hplc(1-99％ acn/水，hcl改性剂，15分钟运行)纯化。将含有产物的级分合并并在35℃的浴温下蒸发至干燥(中间体显示出一些hcl敏感性)，得到(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-12-(2-异丙基-2-氮杂螺[3.3]庚烷-6-基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)(4.1mg，13％)esi-ms m/z计算值617.3036，实验值618.8(m+1)
+
；保留时间：1.26分钟(lc方法a)。
[2473]
实例84：化合物104的制备
[2474]
步骤1：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-12-[2-(2-甲氧基乙基)-2-氮杂螺[3.3]庚烷-6-基]-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(化合物104)
[2475][2476]
将(11r)-12-(2-氮杂螺[3.3]庚烷-6-基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(60mg，0.1042mmol)与1-溴-2-甲氧基-乙烷(20μl，0.2128mmol)在乙腈(500μl)中合并，并添加三乙胺(75μl，0.5381mmol)。将反应混合物加热至60℃6小时。然后将反应混合物冷却至室温并过滤，然后通过反相hplc(1-99％ acn/水，hcl改性剂，30分钟运行)纯化。将所得级分干燥，得到呈白色固体的(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-12-[2-(2-甲氧基乙基)-2-氮杂螺[3.3]庚烷-6-基]-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)(16.8mg，23％)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.2(bs,1h),8.41(s,1h),7.93(d,j＝15.3hz,1h),7.67(s,2h),7.26(s,1h),7.12(s,2h),6.52(s,1h),6.37(s,1h),5.16-5.05(m,1h),4.39-4.01(m,5h),4.01-3.93(m,1h),3.71(s,1h),3.50(d,j＝4.9hz,2h),3.30(s,3h),3.05(s,2h),1.93(d,j＝17.1hz,7h),1.55(t,j＝12.8hz,2h),1.24(s,2h),1.13(t,j＝12.1hz,1h),0.73(d,j＝6.5hz,3h),0.19(d,j＝6.2hz,3h)。esi-ms m/z计算值633.29846，实验值634.6(m+1)
+
；保留时间：1.29分钟(lc方法a)。
[2477]
实例85：化合物105的制备
[2478]
步骤1：n-[[3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]环丁基]甲基]氨基甲酸叔丁酯，非对映异构体1，以及n-[[3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]环丁基]甲基]氨基甲酸叔丁酯，非对映异构体2
[2479]
[2480]
将3-[[4-[(2r)-2-氨基-4-甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(250mg，0.4672mmol)与n-[(3-氧代环丁基)甲基]氨基甲酸叔丁酯(120mg，0.6023mmol)在dcm(800μl)中合并，并在室温下搅拌15分钟。添加三乙酰氧基硼氢化钠(300mg，1.415mmol)并将反应混合物再搅拌一小时。添加n-[(3-氧代环丁基)甲基]氨基甲酸叔丁酯(50mg，0.2509mmol)，然后添加另外的三乙酰氧基硼氢化钠(300mg，1.415mmol)并将反应在室温下再搅拌4小时。然后将反应混合物在1m hcl与乙酸乙酯之间分配。将层分离，并且将水溶液用乙酸乙酯再萃取3次。将合并的有机物用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。在2分钟内将溶解于dmf(5ml)中的该物质滴加到hatu(355mg，0.9336mmol)和dipea(400μl，2.296mmol)于dmf(15ml)中的搅拌的溶液中。将反应混合物在室温下搅拌7小时，然后在1m hcl与乙酸乙酯之间分配。将层分离，并且将水溶液用乙酸乙酯再萃取3次。将合并的有机物用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。将所得粗物质通过反相色谱法使用1-99％ meoh/水，hcl改性剂(中间较浅，30分钟运行)的梯度纯化，分别得到环丁烷的两个立体异构体：非对映异构体1，峰1n-[[3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]环丁基]甲基]氨基甲酸叔丁酯(45mg，15％)，esi-ms m/z计算值663.3091，实验值664.6(m+1)
+
；保留时间：0.76分钟(lc方法d)，以及非对映异构体2，峰2n-[[3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]环丁基]甲基]氨基甲酸叔丁酯(60mg，19％)esi-ms m/z计算值663.3091，实验值664.6(m+1)
+
；保留时间：0.77分钟(lc方法d)。
[2481]
步骤2：(11r)-12-[3-(氨甲基)环丁基]-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮，非对映异构体1
[2482][2483]
将n-[[3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]环丁基]甲基]氨基甲酸叔丁酯，非对映异构体1(45mg，0.06779mmol)与hcl(大约4m的254.2μl，1.017mmol)在dcm(0.3ml)中合并，并在室温下搅拌30分钟。然后将反应混合物蒸发，添加己烷，并且将反应再次蒸发，得到白色粉末(11r)-12-[3-(氨甲基)环丁基]-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)(44mg，108％)esi-ms m/z计算值563.25665，实验值564.6(m+1)
+
；保留时间：0.51分钟；lc方法d。
[2484]
步骤3：(11r)-12-[3-[(二甲基氨基)甲基]环丁基]-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异
丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(化合物105)
[2485][2486]
将(11r)-12-[3-(氨甲基)环丁基]-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)非对映异构体1(15mg，0.02499mmol)与甲醛(0.25ml，9.075mmol)(水溶液)和甲酸(0.2ml)在带有无穿刺隔膜的螺旋盖小瓶中合并。将反应混合物加热至95℃18小时。然后将反应混合物冷却至室温，用甲醇稀释并通过反相hplc(1-70％ acn/水，hcl改性剂)纯化，得到呈白色粉末的(11r)-12-[3-[(二甲基氨基)甲基]环丁基]-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)(9mg，57％)。esi-ms m/z计算值591.2879，实验值592.7(m+1)
+
；保留时间：1.22分钟；lc方法a。
[2487]
实例86：化合物106的制备
[2488]
步骤1：(11r)-12-[3-(氨甲基)环丁基]-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮，非对映异构体2
[2489][2490]
将n-[[3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]环丁基]甲基]氨基甲酸叔丁酯，非对映异构体2(45mg，0.06779mmol)与hcl(大约4m的254.2μl，1.017mmol)在dcm(0.3ml)中合并，并在室温下搅拌30分钟。然后将反应混合物蒸发，添加己烷，并且将反应再次蒸发，得到白色粉末(11r)-12-[3-(氨甲基)环丁基]-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)(57mg，105％)esi-ms m/z计算值563.25665，实验值564.7(m+1)
+
；保留时间：0.52分钟；lc方法d。
[2491]
步骤2：(11r)-12-[3-[(二甲基氨基)甲基]环丁基]-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1
(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(化合物106)
[2492][2493]
将(11r)-12-[3-(氨甲基)环丁基]-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)非对映异构体1(15mg，0.02499mmol)与甲醛(0.25ml，9.075mmol)(水溶液)和甲酸(0.2ml)在带有无穿刺隔膜的螺旋盖小瓶中合并。将反应混合物加热至95℃18小时。然后将反应混合物冷却至室温，用甲醇稀释并通过反相hplc(1-70％ acn/水，hcl改性剂)纯化，得到呈白色粉末的(11r)-12-[3-[(二甲基氨基)甲基]环丁基]-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)(7.8mg，49％)。esi-ms m/z计算值591.2879，实验值592.9(m+1)
+
；保留时间：1.24分钟；lc方法a。
[2494]
实例87：化合物107的制备
[2495]
步骤1：n-({3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2-甲基丙基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]环丁基}甲基)氨基甲酸丙烷-2-基酯(化合物107)
[2496][2497]
向(11r)-12-[3-(氨甲基)环丁基]-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)非对映异构体1(10mg，0.01666mmol)于dcm(0.5ml)中的溶液中添加氯甲酸异丙酯(大约甲苯中的2m的16.66μl，0.03332mmol)，然后添加diea(大约10.77mg，0.08330mmol)。将反应混合物在室温下搅拌30分钟，然后用几滴1m hcl淬灭并部分浓缩。将所得粗物质溶解于1:1dmso/甲醇中，过滤并通过反相hplc(1-99％ acn/水，hcl改性剂，15分钟运行)纯化，在干燥之后得到n-({3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2-甲基丙基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]环丁基}甲基)氨基甲酸-2-基酯(6.5mg，59％)。esi-ms m/z计算值649.2934，实验值650.6(m+1)
+
；保留时间：1.85分钟；lc方法a。
[2498]
实例88：化合物108的制备
[2499]
步骤1：n-({3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2-甲基丙基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]环丁基}甲基)氨基甲酸丙烷-2-基酯(化合物108)
[2500][2501]
向(11r)-12-[3-(氨甲基)环丁基]-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)非对映异构体2(10mg，0.01666mmol)于dcm(0.5ml)中的溶液中添加氯甲酸异丙酯(大约2m的16.66μl，0.03332mmol)，然后添加diea(大约10.77mg，0.08330mmol)。将反应混合物在室温下搅拌30分钟，然后用几滴1m hcl淬灭并部分浓缩。将所得粗物质溶解于1:1dmso/甲醇中，过滤并通过反相hplc(1-99％ acn/水，hcl改性剂，15分钟运行)纯化，在干燥之后得到n-({3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2-甲基丙基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]环丁基}甲基)氨基甲酸-2-基酯(6.3mg，59％)。esi-ms m/z计算值649.2934，实验值650.8(m+1)
+
；保留时间：1.90分钟；lc方法a。
[2502]
实例89：(11s)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-12-螺[2.3]己-5-基-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(化合物474)的制备
[2503]
步骤1：(2s)-4-甲基-2-(螺[2.3]己-5-基氨基)戊烷-1-醇
[2504][2505]
在室温下在氮气下，向(2s)-2-氨基-4-甲基-戊烷-1-醇(1.93g，16.469mmol)和螺[2.3]己-5-酮(1.507g，15.677mmol)于无水1,2-二氯乙烷(22ml)中的搅拌的溶液中分批添加三乙酰氧基硼氢化钠(4.99g，23.544mmol)。在添加完成之后，将反应混合物在该温度下搅拌20小时。将反应混合物用dcm(25ml)稀释并且缓慢添加1m hcl水溶液(120ml)(ph约1)。将反应混合物搅拌15分钟。将两个层分离，并且将有机层丢弃。将水层用2mnaoh水溶液(80ml)碱化至ph约12，并且将产物用乙酸乙酯(3
×
100ml)萃取。将合并的有机层用盐水(40ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥并浓缩，得到呈浅黄色油的(2s)-4-甲基-2-(螺[2.3]己-5-基氨基)戊烷-1-醇(2.65g，81％)。产物不经进一步纯化即用于下一步。esi-ms m/z计算值197.178，实验值198.5(m+1)
+
；保留时间：2.48分钟(lc方法s)。1h nmr(250mhz,dmso-d6)δ4.41(s,1h),3.55-3.40(m,1h),3.29-3.12(m,2h),2.49-2.37(m,1h),2.16-1.99(m,2h),1.99-1.83(m,2h),1.78-1.52(m,2h),1.13(t,j＝6.8hz,2h),0.94-0.78(m,6h),0.49-0.22(m,4h)。
[2506]
步骤2：3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(2s)-4-甲基-2-(螺[2.3]己-5-基氨基)戊氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸
[2507][2508]
在室温下在氮气下向(2s)-4-甲基-2-(螺[2.3]己-5-基氨基)戊烷-1-醇(2.65g，13.430mmol)和3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(5.65g，13.521mmol)于无水thf(40ml)中的搅拌的溶液中分批添加叔丁醇钠(5.24g，54.525mmol)。在添加完成之后，将反应混合物在该温度下搅拌2小时。将反应用1m hcl水溶液(80ml)缓慢酸化至ph为约1，并将反应混合物搅拌15分钟。将反应混合物倒入己烷(250ml)中并剧烈搅拌10分钟。将沉淀的产物通过过滤收集，用己烷(2
×
50ml)洗涤并在真空下干燥，得到呈白色固体的3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(2s)-4-甲基-2-(螺[2.3]己-5-基氨基)戊氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(8.258g，85％)。产物不经进一步纯化即用于下一步。esi-ms m/z计算值578.2563，实验值579.6(m+1)
+
；保留时间：4.2分钟(lc方法s)。
[2509]
步骤3：(11s)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-12-螺[2.3]己-5-基-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(化合物474)
[2510][2511]
将3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(2s)-4-甲基-2-(螺[2.3]己-5-基氨基)戊氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(51.3mg，0.08339mmol)、[[(e)-(1-氰基-2-乙氧基-2-氧代-亚乙基)氨基]氧-四氢吡喃-4-基-亚甲基]-二甲基-铵(六氟化磷离子)(57mg，0.1334mmol)和三乙胺(47.8μl，0.3429mmol)于dmf(4.275ml)中的溶液搅拌过夜。将反应浓缩，过滤并使用反相hplc-ms方法使用由phenomenex销售的luna c
18
(2)柱(75
×
30mm，5μm粒径)(pn：00c-4252-u0-ax)和15.0分钟内从1-99％流动相b运行的双梯度纯化(流动相a＝水(5mm hcl)，流动相b＝乙腈，流速＝50毫升/分钟，进样体积＝950μl并且柱温＝25℃)，得到呈白色固体的(11s)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-12-螺[2.3]己-5-基-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(36.9mg，79％)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ13.06(s,1h),8.40(s,1h),7.91(s,1h),7.68(s,2h),7.26(t,j＝7.5hz,1h),7.12(d,j＝7.6hz,2h),6.38(s,1h),5.12(dd,
99％ acn/水hcl改性剂，30分钟运行，初始浅梯度)纯化，得到两个产物：非对映异构体1，峰1，4-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]-2,2-二甲基-吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(16mg，8％)，esi-ms m/z计算值677.3247，实验值678.5(m+1)
+
，保留时间：0.82分钟(lc方法d)；以及非对映异构体2，4-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]-2,2-二甲基-吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(7mg，4％)；esi-ms m/z计算值677.3247，实验值678.5(m+1)
+
，保留时间：0.84分钟(lc方法d)；
[2519]
步骤3：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-12-(5,5-二甲基吡咯烷-3-基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮，非对映异构体1
[2520][2521]
将4-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]-2,2-二甲基-吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(非对映异构体1，16mg，0.02360mmol)与hcl(4m的0.1ml，0.4000mmol)在dcm(0.2ml)中合并，并且在室温下搅拌30分钟。将溶剂蒸发，添加己烷，并且将反应再次蒸发，得到(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-12-(5,5-二甲基吡咯烷-3-基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)(非对映异构体1，14mg，97％)。esi-ms m/z计算值577.2723，实验值578.4(m+1)
+
；保留时间：0.49分钟；lc方法d。
[2522]
步骤4：4-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2-甲基丙基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-12-基]-2,2-二甲基吡咯烷-1-羧酸丙烷-2-基酯(化合物110)
[2523][2524]
将(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-12-(5,5-二甲基吡咯烷-3-基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,
二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)(非对映异构体2，6mg，0.009769mmol)与氯甲酸异丙酯(大约2m的9.770μl，0.01954mmol)在二氯甲烷(0.5ml)中合并，并且添加三乙胺(大约4.943mg，6.809μl，0.04885mmol)。将反应在室温下搅拌30分钟。然后将所述反应用几滴1m hcl淬灭，部分浓缩，用1:1甲醇/dmso稀释，过滤并通过反相hplc(1-99％ acn/水，hcl改性剂，15分钟运行)纯化，得到4-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2-甲基丙基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-12-基]-2,2-二甲基吡咯烷-1-羧酸丙烷-2-基酯(3.9mg，60％)。esi-ms m/z计算值663.3091，实验值664.5(m+1)
+
；保留时间：2.06分钟；lc方法a。
[2532]
实例92：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-12-(3-羟基环丁基)-3,11-双(2-甲基丙基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-2,2,13-三酮的制备
[2533][2534]
在4ml小瓶中，向(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-12-(3-羟基环丁基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-酮(30mg，0.05448mmol)于无水dmf(0.5ml)中的搅拌的溶液中添加碳酸铯(72mg，0.2210mmol)，然后添加1-碘-2-甲基-丙烷(16mg，0.08695mmol)于无水dmf(0.1ml)中的溶液。将小瓶用氮气吹扫30秒，然后将加盖的小瓶在40℃下搅拌14小时。将冰乙酸(50μl，0.8792mmol)缓慢添加并用dmso(1ml)稀释，微过滤并通过反相hplc(c
18
柱，15分钟内1-99％乙腈/水，hcl作为改性剂)纯化，得到呈白色固体的(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-12-(3-羟基环丁基)-3,11-双(2-甲基丙基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-2,2,13-三酮(3.6mg，10％)。esi-ms m/z计算值606.2876，实验值607.1(m+1)
+
；保留时间：1.83分钟(lc方法a)。
[2535]
实例93：化合物113的制备
[2536]
步骤1：2-[[(1s)-1-(羟甲基)-3-甲基-丁基]氨基]-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁酯
[2537][2538]
将2-氧代-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁酯(244mg，1.020mmol)和(2s)-2-氨基-4-甲基-戊烷-1-醇(170μl，1.330mmol)于dce(2ml)中的溶液在室温下搅拌20分钟。将反应混合物在冰浴上冷却并将三乙酰氧基硼氢化钠(640mg，3.020mmol)分两等份间隔20分钟
添加。在冰浴中搅拌10分钟之后，将冰浴去除，并且将反应混合物在室温下搅拌24小时。将反应混合物在冰水浴上冷却至0℃并用hcl(1m的4.1ml，4.100mmol)处理5分钟，然后在该温度下搅拌10分钟。添加水(5ml)，然后在5分钟内分批添加固体碳酸钾(1.46g，10.56mmol)，将冷却浴去除并且将反应混合物倒入水中并用etoac(2x)萃取。将有机物合并，用2m碳酸钾水溶液、盐水洗涤，经硫酸钠干燥并蒸发至干燥，得到呈澄清油的2-[[(1s)-1-(羟甲基)-3-甲基-丁基]氨基]-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁酯(330mg，95％)。esi-ms m/z计算值340.27258，实验值341.3(m+1)
+
；保留时间：0.44分钟(lc方法d)。
[2539]
步骤2：2-[(11s)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁酯
[2540][2541]
在0℃下，向2-[[(1s)-1-(羟甲基)-3-甲基-丁基]氨基]-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁酯(300mg，0.8811mmol)和3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(395mg，0.9453mmol)于thf(6ml)中的溶液中添加naotbu(455mg，4.734mmol)并将反应混合物在室温下搅拌2小时。然后向反应混合物中滴加hatu(700mg，1.841mmol)于dmf(10ml)中的搅拌的溶液。添加dipea(767μl，4.403mmol)，并且将反应混合物在室温下搅拌16小时。将反应混合物倒入水中，将ph用1n hcl调至ph为约5并用etoac(3x)萃取。将有机物合并，用水洗涤并蒸发至干燥。通过柱色谱法的纯化(24g二氧化硅，己烷中的0-50％ etoac)得到呈泡沫的2-[(11s)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁酯(110mg，18％)。esi-ms m/z计算值703.34033，实验值704.6(m+1)
+
；保留时间：0.82分钟(lc方法d)。
[2542]
步骤3：2-[(11s)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸甲酯(化合物113)
[2543][2544]
向2-[(11s)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫
杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁酯(110mg，0.1563mmol)于dcm(2ml)中的溶液中添加hcl(二噁烷中的4m)(4m的400μl，1.600mmol)，并且将反应混合物搅拌2小时。将反应混合物蒸发至干燥，然后溶于dcm(2ml)中。向冷却的溶液(0℃)中添加tea(75μl，0.5381mmol)，然后添加氯甲酸甲酯(11μl，0.1424mmol)，将冷却浴去除并将反应混合物在室温下搅拌2小时。然后将反应混合物蒸发，然后溶于1:1meoh:dmso中，过滤并通过hplc(1-99％ acn/水(hcl改性剂))纯化，得到呈白色固体的2-[(11s)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸甲酯(40.5mg，39％)。esi-ms m/z计算值661.2934，实验值662.4(m+1)
+
；保留时间：1.86分钟(lc方法a)。
[2545]
实例94：化合物114和化合物115的制备
[2546]
步骤1：2-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]螺[3.3]庚烷-6-羧酸甲酯
[2547][2548]
将3-[[4-[(2r)-2-氨基-4,4-二甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(1g，1.821mmol)与2-氧代螺[3.3]庚烷-6-羧酸甲酯(460mg，2.735mmol)在dcm(4ml)中合并，并在室温下搅拌20分钟。添加三乙酰氧基硼氢化钠(1.25g，5.898mmol)并将反应再搅拌一小时。添加另外的三乙酰氧基硼氢化钠(400mg，1.887mmol)，并且在室温下另外90分钟之后，将反应混合物在1m hcl与乙酸乙酯之间分配。将层分离，并且将水溶液用乙酸乙酯再萃取3次。将合并的有机物用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。物质无需进一步纯化即可用于下一步骤。3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(2r)-2-[(6-甲氧羰基螺[3.3]庚烷-2-基)氨基]-4,4-二甲基-戊氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸esi-ms m/z计算值664.2931，实验值665.6(m+1)
+
；保留时间：1.15分钟(lc方法a)。
[2549]
在5分钟内向上述产物于dmf(5ml)中的溶液中滴加comu(1.7g，3.969mmol)和dipea(1.6ml，9.186mmol)于dmf(35ml)中的搅拌的溶液。将反应混合物在室温下搅拌16小时，然后将其在减压下部分浓缩，然后在1m hcl与乙酸乙酯之间分配。将层分离，并且将水溶液用乙酸乙酯再萃取2次。将合并的有机物用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。将所得粗物质通过硅胶色谱法纯化，用0-100％乙酸乙酯/己烷梯度洗脱，得到浅黄色固体2-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]螺[3.3]庚烷-6-羧酸甲酯(597mg，51％)。esi-ms m/z计算值646.28253，实验值647.7(m+1)
+
；保留时间：1.98分钟(lc方法a)。
[2550]
步骤2：6-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-12-基]-n,n-二甲基螺[3.3]庚烷-2-甲酰胺，非对映异构体1(化合物114)，以及6-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-12-基]-n,n-二甲基螺[3.3]庚烷-2-甲酰胺，非对映异构体2(化合物115)
[2551][2552]
向小瓶中装入6-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-12-基]螺[3.3]庚烷-2-羧酸甲酯(27mg，0.04174mmol)、thf(400μl)、lioh(18mg，0.7516mmol)和水(55μl)并且将其在室温下搅拌1.5小时。添加更多lioh(15mg，0.6264mmol)并将混合物再搅拌35分钟。将反应用水和dmso稀释至总体积为2ml。将溶液通过注射器过滤盘微过滤并通过反相制备型hplc(c
18
)使用乙腈/水的梯度(15分钟内1至99％)和hcl作为改性剂纯化，得到呈白色固体的6-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-12-基]螺[3.3]庚烷-2-羧酸(22mg，83％)(非对映异构体的1:1混合物)。esi-ms m/z计算值632.26685，实验值633.25(m+1)
+
；保留时间：1.68分钟，第二异构体实验值633.25(m+1)
+
，保留时间：1.72分钟(比率1:1)，(lc方法a)。
[2553]
将粗酸在室温下用hatu(37mg，0.09731mmol)、n-甲基甲胺(盐酸盐)(36mg，0.4415mmol)、无水dmf(0.5ml)和diea(110μl，0.6315mmol)处理3小时。将反应用dmso(1ml)稀释。将溶液通过注射器过滤盘微过滤并通过反相制备型hplc(c
18
)使用乙腈/水的梯度(15分钟内1至99％)和hcl作为改性剂(异构体分离不良)纯化。在溶剂的蒸发之后，将混合物使用较浅梯度纯化。水/hcl中的20分钟内10-50％、5分钟内50-100％的mecn。将两种不纯的级分使用梯度水/hcl中的10分钟内10-25％、30分钟内25-60％的mecn再次纯化。蒸发提供了两个分离的异构体：更多极性的峰1，非对映异构体1，6-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-12-基]-n,n-二甲基螺[3.3]庚烷-2-甲酰胺(4.1mg，30％)。esi-ms m/z计算值659.31415，实验值660.71(m+1)
+
；保留时间：1.75分钟(lc方法a)；以及更少极性的峰2，非对映异构体2，6-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环
2-基)螺[3.3]庚烷-2-基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮(10mg，53％)。esi-ms m/z计算值646.3189，实验值647.77(m+1)
+
；保留时间：1.97分钟(lc方法a)。
[2558]
实例96：化合物118、化合物119和化合物120的制备
[2559]
步骤1：(11r)-12-{6-氨基螺[3.3]庚烷-2-基}-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-2,2,13-三酮(化合物118)
[2560][2561]
在圆底烧瓶中，将n-[2-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-12-基]螺[3.3]庚烷-6-基]氨基甲酸叔丁酯(非对映异构体1，7.8954g，11.22mmol)与hcl(4m的28.05ml，112.2mmol)(二噁烷中的4m)一起溶解于dcm(35ml)中。将反应混合物在室温下搅拌1小时，然后蒸发至干燥。将固体物质在50％乙酸乙酯/己烷的混合物中制成浆液并过滤。回收呈白色固体的产物(hcl盐)。(11r)-12-{6-氨基螺[3.3]庚烷-2-基}-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-2,2,13-三酮(盐酸盐)(7.383g，103％)。1h nmr(400mhz，甲醇-d4)δ8.57(d,j＝2.2hz,1h),8.09-8.00(m,1h),7.78-7.67(m,2h),7.30(t,j＝7.6hz,1h),7.16(d,j＝7.6hz,2h),6.30(s,1h),5.29(dd,j＝10.8,4.3hz,1h),4.25(t,j＝11.2hz,1h),4.06(h,j＝8.5hz,1h),3.85(ddd,j＝12.0,8.0,4.3hz,1h),3.79-3.66(m,2h),3.28(t,j＝9.7hz,2h),3.15(dd,j＝11.4,8.7hz,1h),2.69-2.49(m,3h),2.43-2.33(m,1h),2.29(ddd,j＝11.6,8.6,2.8hz,2h),2.09(s,1h),1.69(dd,j＝15.3,8.2hz,1h),1.54(d,j＝15.1hz,1h),1.40-1.29(m,2h),0.96-0.85(m,2h),0.61(s,9h)。esi-ms m/z计算值603.2879，实验值604.6(m+1)
+
；保留时间：1.31分钟(lc方法a)。
[2562]
步骤2：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2-二氧代-12-(2-氧代螺[3.3]庚烷-6-基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-酮
[2563][2564]
在反应小瓶中，将(11r)-12-{6-氨基螺[3.3]庚烷-2-基}-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-2,2,13-三酮(盐酸盐)(603.8mg，0.9431mmol)与二异丙基乙胺(191.6μl，1.100mmol)在二氯甲烷(10ml)中混合。向反应中添加(1:1)高锰酸钾(500mg，3.164mmol):五水合硫酸铜(500mg，2.003mmol)的混合物(将等重量的kmno4和cuso4在研钵中研磨直到均匀为止)并将反应在40℃下搅拌过夜。将反应混合物蒸发至干燥并用1n hcl/乙酸乙酯稀释。将混合物通过硅藻土过滤并收集有机层。将水层用另外的乙酸乙酯萃取并将所有的有机层合并。将合并的有机层用饱和nacl溶液洗涤，分离，经无水硫酸钠干燥，过滤并蒸发至干燥。将粗物质通过硅胶柱色谱法使用0-15％ meoh/dcm梯度纯化。分离呈浅黄色固体的产物。(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2-二氧代-12-(2-氧代螺[3.3]庚烷-6-基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-酮(146mg，23％)esi-ms m/z计算值602.2563，实验值603.4(m+1)
+
；保留时间：1.82分钟(lc方法a)。
[2565]
步骤3：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-12-(2-羟基-2-甲基-螺[3.3]庚烷-6-基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-酮，非对映异构体1(化合物119)，以及(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-12-(2-羟基-2-甲基-螺[3.3]庚烷-6-基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-酮，非对映异构体2(化合物120)
[2566][2567]
在反应小瓶中，将(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2-二氧代-12-(2-氧代螺[3.3]庚烷-6-基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-酮(52mg，0.08627mmol)溶解于thf(1ml)中并冷却至0℃。向反应中添加溴(甲基)镁(3m的86.3μl，0.2589mmol)并使反应在
0℃下搅拌1小时。然后添加更多溴(甲基)镁(30μl，0.2591mmol)。在0℃下继续搅拌40分钟，然后将反应用1n hcl淬灭并用乙酸乙酯萃取。将粗物质通过制备型hplc使用带有hcl改性剂的35-70％水/acn梯度纯化。将两个异构体分离：峰1，非对映异构体1，(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-12-(2-羟基-2-甲基-螺[3.3]庚烷-6-基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-酮(6.9mg，23％)esi-ms m/z计算值618.2876，实验值619.3(m+1)
+
；保留时间：1.76分钟(lc方法a)；以及峰2，非对映异构体1，(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-12-(2-羟基-2-甲基-螺[3.3]庚烷-6-基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-酮(6.7mg，23％)esi-ms m/z计算值618.2876，实验值619.6(m+1)
+
；保留时间：1.81分钟(lc方法a)。
[2568]
实例97：化合物121和化合物122的制备
[2569]
步骤1：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-12-(2-羟基螺[3.3]庚烷-6-基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-酮，非对映异构体1(化合物121)，以及(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-12-(2-羟基螺[3.3]庚烷-6-基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-酮，非对映异构体2(化合物122)
[2570][2571]
在氮气下在0-5℃(冰水浴)下向(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-12-{6-氧代螺[3.3]庚烷-2-基}-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮(42mg，0.06062mmol)于无水甲醇(1ml)中的搅拌的溶液缓慢添加硼氢化钠(10mg，0.2643mmol)。在该温度下继续搅拌30分钟，然后将反应用水(1ml)和盐水(1ml)淬灭并用etoac(3
×
10ml)萃取。将合并的有机物在减压下浓缩并且将粗溶于dmso(1.5ml)中，微过滤并通过(反相hplc，18柱，15分钟内1-99％乙腈/水，hcl作为改性剂)纯化。将纯级分在genevac中干燥，得到呈白色固体的(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-12-(2-羟基螺[3.3]庚烷-6-基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-酮(异构体的混合物，24mg，65％)。esi-ms m/z计算值604.2719，实验值605.3(m+1)
+
；保留时间：1.65分钟(lc方法a)。
[2572]
使用手性pak ig(250
×
10mm，在35℃下的5μm柱)和由33％ meoh(无改性剂)和67％co2组成的流动相，流速为10毫升/分钟，meoh浓度为22mg/ml，进样体积为70μl，压力为191bar并且使用210nm波长对异构体的混合物进行手性sfc。将两种产物分离：非对映异构
体1，sfc峰1，(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-12-(2-羟基螺[3.3]庚烷-6-基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-酮(5.8mg，15％)，1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ13.04(s,1h),8.40(s,1h),7.89(s,1h),7.63(s,2h),7.23(s,1h),7.11(s,2h),6.36(s,1h),5.05(dd,j＝10.8,4.3hz,1h),4.89(d,j＝6.2hz,1h),4.26(s,1h),4.05-3.94(m,1h),3.90(t,j＝8.6hz,1h),3.74-3.63(m,1h),3.04(t,j＝9.8hz,1h),2.94(t,j＝9.6hz,1h),2.46-2.41(m,1h),2.30-2.22(m,1h),2.22-2.10(m,3h),2.01-1.79(m,6h),1.56(dd,j＝15.3,8.2hz,1h),1.36(d,j＝14.8hz,1h),0.96-0.77(m,1h),0.48(s,9h),esi-ms m/z计算值604.2719，实验值605.3(m+1)
+
；保留时间：1.66分钟(lc方法a)；以及非对映异构体2，sfc峰2，(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-12-(2-羟基螺[3.3]庚烷-6-基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-酮(2.6mg，7％)esi-ms m/z计算值604.2719，实验值605.2(m+1)
+
；保留时间：1.67分钟(lc方法a)。
[2573]
实例98：化合物123的制备
[2574]
步骤1：n-[6-[[(1r)-1-(羟甲基)-3-甲基-丁基]氨基]螺[3.3]庚烷-2-基]氨基甲酸叔丁酯
[2575][2576]
将n-(2-氧代螺[3.3]庚烷-6-基)氨基甲酸叔丁酯(1.98g，8.789mmol)添加到(2r)-2-氨基-4-甲基-戊烷-1-醇(1.347g，11.49mmol)于无水二氯甲烷(6ml)中的溶液中并在室温下搅拌1小时。添加三乙酰氧基硼氢化钠(5.87g，27.70mmol)并将反应再搅拌48小时。缓慢添加hcl(1m的35ml，35.00mmol)并将反应在室温下再搅拌1小时。将反应用二氯甲烷(5ml)稀释并且添加碳酸钾(15.6g，112.9mmol)于h2o(15ml)中的溶液并将有机物分离。将有机物用碳酸钾(1.22g，8.827mmol)加水(10ml)的溶液洗涤。将有机层分离，用硫酸镁干燥，然后浓缩，得到n-[6-[[(1r)-1-(羟甲基)-3-甲基-丁基]氨基]螺[3.3]庚烷-2-基]氨基甲酸叔丁酯(2.55g，89％)esi-ms m/z计算值326.25696，实验值327.6(m+1)
+
；保留时间：0.46分钟(lc方法a)。
[2577]
步骤2：3-[[4-[(2r)-2-[[2-(叔丁氧基羰基氨基)螺[3.3]庚烷-6-基]氨基]-4-甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸
[2578][2579]
在反应小瓶中，将3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(2.907g，6.957mmol)和n-[6-[[(1r)-1-(羟甲基)-3-甲基-丁基]氨基]螺[3.3]庚烷-2-基]氨基甲酸叔丁酯(2.3g，7.045mmol)溶解于thf(14.9ml)中，然后添加叔丁醇钠(2.75g，28.62mmol)。将反应在室温下搅拌2小时。添加另外量的叔丁醇钠(565.3mg，5.882mmol)并继续搅拌30分钟。然后将反应混合物在乙酸乙酯与1m hcl溶液之间分配。将有机物分离，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并蒸发至干燥。将固体物质在50％乙酸乙酯/己烷中制成浆液，然后过滤，得到呈浅黄色固体的产物(hcl盐)3-[[4-[(2r)-2-[[2-(叔丁氧基羰基氨基)螺[3.3]庚烷-6-基]氨基]-4-甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(4.3053g，81％).1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.47(d,j＝1.9hz,1h),8.15(t,j＝8.7hz,2h),7.71(t,j＝7.8hz,1h),7.26(t,j＝7.6hz,1h),7.13(d,j＝7.6hz,2h),7.10-7.03(m,1h),6.37(s,1h),4.34(d,j＝12.0hz,1h),4.22(d,j＝11.7hz,1h),3.80(p,j＝8.0hz,1h),3.67(s,1h),2.36-2.09(m,6h),2.01(s,4h),1.89(p,j＝9.7,9.1hz,3h),1.59(s,1h),1.57-1.47(m,2h),1.36(s,8h),1.25(d,j＝2.7hz,1h),1.20-1.14(m,1h),0.88(dt,j＝13.3,6.8hz,7h)。esi-ms m/z计算值707.33527，实验值708.4(m+1)
+
；保留时间：1.48分钟(lc方法j)。
[2580]
步骤3：n-[2-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]螺[3.3]庚烷-6-基]氨基甲酸叔丁酯，非对映异构体1和2
[2581][2582]
将3-[[4-[(2r)-2-[[2-(叔丁氧基羰基氨基)螺[3.3]庚烷-6-基]氨基]-4-甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(4.3g，5.777mmol)溶
解于dmf(35ml)中并缓慢添加到hatu(2.639g，6.941mmol)和三乙胺(2.34g，23.12mmol)于dmf(35ml)中的搅拌的溶液中。将反应混合物在室温下搅拌过夜。添加在dmf(12ml)中的另外量的hatu(1.32g，3.472mmol)和三乙胺(1.17g，11.56mmol)。继续搅拌另外4小时，然后将反应在乙酸乙酯与1m hcl溶液之间分配。将有机物分离，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并蒸发至干燥。将粗物质通过硅胶色谱法纯化，用30-100％乙酸乙酯/庚烷洗脱。将产物n-[2-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]螺[3.3]庚烷-6-基]氨基甲酸叔丁酯(2.1742g，44％)esi-ms m/z计算值689.3247，实验值690.3(m+1)
+
；保留时间：1.13分钟使用phenomenex lux-4(250
×
21.2mm)，在40℃下的5μm柱和由24％的meoh(无改性剂)和76％的co2组成的流动相，流速为70毫升/分钟进行sfc分离。将两种产物分离(每种》98％ee)：非对映异构体1，峰1，n-[2-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-12-基]螺[3.3]庚烷-6-基]氨基甲酸叔丁酯(773.3mg，71％)1h nmr(400mhz，甲醇-d4)δ8.41(s,1h),7.90(d,j＝7.6hz,1h),7.61(d,j＝7.6hz,1h),7.56(t,j＝7.6hz,1h),7.17(t,j＝7.6hz,1h),7.04(d,j＝7.6hz,2h),6.15(s,1h),5.20(dd,j＝10.8,4.1hz,1h),4.17(t,j＝11.1hz,1h),3.82(p,j＝8.6hz,2h),3.72(td,j＝10.8,5.3hz,1h),2.99(dt,j＝20.6,9.9hz,2h),2.40(dt,j＝11.7,6.3hz,1h),2.30(h,j＝9.1,8.2hz,2h),2.17-2.07(m,2h),1.99(s,2h),1.90(q,j＝8.6hz,4h),1.61(ddd,j＝13.9,10.7,2.7hz,1h),1.33(s,9h),1.29(s,1h),1.17(ddd,j＝13.4,7.8,2.6hz,2h),0.72(d,j＝6.6hz,3h),0.23(d,j＝6.4hz,3h)。esi-ms m/z计算值689.3247，实验值690.4(m+1)
+
；保留时间：2.05分钟(lc方法a)；以及非对映异构体2，峰2，n-[2-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-12-基]螺[3.3]庚烷-6-基]氨基甲酸叔丁酯(726mg，67％)，1h nmr(400mhz，甲醇-d4)δ8.35(s,1h),7.82(d,j＝7.5hz,1h),7.53(d,j＝7.5hz,1h),7.48(t,j＝7.6hz,1h),7.09(t,j＝7.6hz,1h),6.96(d,j＝7.6hz,2h),6.07(s,1h),5.14(dd,j＝10.8,4.1hz,1h),4.11(t,j＝11.1hz,1h),3.74(p,j＝8.4hz,2h),3.64(t,j＝11.4hz,1h),3.13(s,2h),2.91(d,j＝9.8hz,1h),2.86(d,j＝10.1hz,1h),2.35(dt,j＝11.8,6.1hz,1h),2.27-2.17(m,2h),2.03(d,j＝8.1hz,1h),1.91(s,3h),1.85(d,j＝9.8hz,3h),1.80(d,j＝9.5hz,1h),1.52(t,j＝12.6hz,1h),1.25(s,9h),1.23-1.16(m,1h),1.10(d,j＝11.0hz,2h),0.63(d,j＝6.4hz,3h),0.15(d,j＝6.2hz,3h)。esi-ms m/z计算值689.3247，实验值690.4(m+1)
+
；保留时间：2.04分钟(lc方法a)。
[2583]
步骤4：(11r)-12-{6-氨基螺[3.3]庚烷-2-基}-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2-甲基丙基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-2,2,13-三酮，非对映异构体1
[2584][2585]
将n-[2-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-12-基]螺[3.3]庚烷-6-基]氨基甲酸叔丁酯，非对映异构体1(736mg，1.067mmol)溶解于dcm(4ml)中并且添加hcl(4m的4ml，16.00mmol)。将反应在室温下搅拌1小时，然后将溶剂蒸发。添加己烷并将其蒸发两次，得到类白色固体(11r)-12-{6-氨基螺[3.3]庚烷-2-基}-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2-甲基丙基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-2,2,13-三酮，非对映异构体1(盐酸盐)(764mg，114％)esi-ms m/z计算值589.2723，实验值590.5(m+1)
+
；保留时间：0.52分钟(lc方法d)。
[2586]
步骤5：n-{6-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2-甲基丙基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-12-基]螺[3.3]庚烷-2-基}氨基甲酸丙烷-2-基酯(化合物123)
[2587][2588]
将(11r)-12-{6-氨基螺[3.3]庚烷-2-基}-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2-甲基丙基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-2,2,13-三酮(盐酸盐)(非对映异构体1，10.5mg，0.01677mmol)与氯甲酸异丙酯(大约2m的16.77μl，0.03354mmol)和dipea(大约10.84mg，14.61μl，0.08385mmol)在dcm中合并，并且将反应在室温下搅拌30分钟。在此之后，将反应混合物用几滴1m hcl水溶液淬灭。然后将反应混合物部分浓缩，用1:1dmso和甲醇稀释，过滤并通过制备型hplc(1-99％ acn/水，hcl改性剂，15分钟运行)纯化，在干燥之后得到n-{6-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯
基)-11-(2-甲基丙基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-12-基]螺[3.3]庚烷-2-基}氨基甲酸丙烷-2-基酯(7.5mg，66％)。esi-ms m/z计算值675.3091，实验值676.7(m+1)
+
；保留时间：1.95分钟；(lc方法a)。
[2589]
实例99：化合物124的制备
[2590]
步骤1：n-{6-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2-甲基丙基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-12-基]螺[3.3]庚烷-2-基}氨基甲酸丙烷-2-基酯(化合物124)
[2591][2592]
将以与上文所描述的方式类似的方式制备的(11r)-12-(6-氨基螺[3.3]庚烷-2-基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)，非对映异构体2(10mg，0.01597mmol)与氯甲酸异丙酯(大约2m的15.97μl，0.03194mmol)和dipea(大约10.32mg，13.91μl，0.07985mmol)在dcm中合并，并且将反应在室温下搅拌30分钟。在此之后，将反应混合物用几滴1m hcl水溶液淬灭。然后将反应混合物部分浓缩，用1:1dmso和甲醇稀释，过滤并通过制备型hplc(1-99％ acn/水，hcl改性剂，15分钟运行)纯化，在干燥之后得到n-{6-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2-甲基丙基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-12-基]螺[3.3]庚烷-2-基}氨基甲酸丙烷-2-基酯(7mg，64％)。esi-ms m/z计算值675.3091，实验值676.6(m+1)
+
；保留时间：1.94分钟；(lc方法a)。
[2593]
实例100：化合物109和化合物125的制备
[2594]
步骤1：3-[[4-[2-(叔丁氧基羰基氨基)-4,4,4-三氟-丁氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸
[2595]
[2596]
将3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(0.63g，1.508mmol)、2-氨基-4,4,4-三氟-丁烷-1-醇(盐酸盐)(0.54g，3.007mmol)和叔丁醇钠(0.73g，7.596mmol)于thf(8ml)中的溶液搅拌五分钟，变成亮黄色。将反应放置在预热的60℃浴中并搅拌25分钟。uplcms显示完全转化为氨基中间体。在冷却至室温之后，添加二碳酸二叔丁酯(0.67g，3.070mmol)并将反应搅拌17小时。将反应用1m盐酸淬灭，用水稀释，并用乙酸乙酯萃取。将合并的萃取物用水洗涤，经硫酸钠干燥，并在真空下蒸发。将残余物通过硅胶柱色谱法用0-10％甲醇/二氯甲烷纯化，得到含有产物的混合物。将混合物通过硅胶柱色谱法用0-9％甲醇/二氯甲烷再纯化，得到3-[[4-[2-(叔丁氧基羰基氨基)-4,4,4-三氟-丁氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(0.54g，57％)esi-ms m/z计算值624.1866，实验值625.3(m+1)
+
；保留时间：0.67分钟呈无色固体，lc方法d。
[2597]
步骤2：3-[[4-(2-氨基-4,4,4-三氟-丁氧基)-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸
[2598][2599]
将3-[[4-[2-(叔丁氧基羰基氨基)-4,4,4-三氟-丁氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(83mg，0.1329mmol)和hcl(4m的4ml，16.00mmol)(于二噁烷中)的溶液搅拌一小时。将溶剂在真空下去除，并且将固体用乙醚研磨，得到3-[[4-(2-氨基-4,4,4-三氟-丁氧基)-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(81mg，109％)esi-ms m/z计算值524.13416，实验值525.2(m+1)
+
；保留时间：0.39分钟呈无色固体，lc方法d。
[2600]
步骤3：3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[4,4,4-三氟-2-(螺[2.3]己-5-基氨基)丁氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸
[2601][2602]
将3-[[4-(2-氨基-4,4,4-三氟-丁氧基)-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(0.14g，0.2496mmol)和螺[2.3]己-5-酮(0.12g，1.248mmol)于二氯乙烷(1ml)和乙酸(0.2μl)中的溶液搅拌15分钟，并添加氰基硼氢化钠(48mg，0.7638mmol)。将反应搅拌6小时，添加更多螺[2.3]己-5-酮(0.12ml，1.248mmol)和氰基硼氢化钠(49mg，0.7797mmol)，并将反应搅拌16小时。将反应用1m盐酸淬灭，并且将溶剂蒸发。将残余物通过反相hplc-ms(1％-99％乙腈/水(5mm hcl))纯化，得到3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[4,4,4-三氟-2-(螺[2.3]己-5-基氨基)丁氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(82mg，
51％)esi-ms m/z计算值604.1967，实验值605.3(m+1)
+
；保留时间：0.84分钟呈无色固体，lc方法d。
[2603]
步骤4：6-(2,6-二甲基苯基)-12-{螺[2.3]己-5-基}-11-(2,2,2-三氟乙基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮
[2604][2605]
将3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[4,4,4-三氟-2-(螺[2.3]己-5-基氨基)丁氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(82mg，0.1279mmol)、hatu(74mg，0.1946mmol)和三乙胺(72μl，0.5166mmol)于dmf(7ml)中的溶液搅拌18小时。将反应用1m柠檬酸酸化，用水稀释，并用乙酸乙酯萃取。将合并的萃取物用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，并在真空下蒸发。将残余物通过反相hplc-ms(1％-99％乙腈/水(5mm hcl))纯化，得到6-(2,6-二甲基苯基)-12-{螺[2.3]己-5-基}-11-(2,2,2-三氟乙基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮，(11mg，15％)esi-ms m/z计算值586.18616，实验值587.3(m+1)
+
；保留时间：0.73分钟呈无色固体，lc方法d。
[2606]
步骤5：6-(2,6-二甲基苯基)-2,2-二氧代-12-螺[2.3]己-5-基-11-(2,2,2-三氟乙基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮，对映异构体1，(化合物109)，以及6-(2,6-二甲基苯基)-12-{螺[2.3]己-5-基}-11-(2,2,2-三氟乙基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮，对映异构体2(化合物125)
[2607][2608]
使用由瑞吉斯技术公司(regis technologies)销售的(r,r)-whelk-o柱(150
×
2.1mm，3.5μm粒径)(pn:780230)和在17.5分钟内从5-80％流动相b运行的梯度对6-(2,6-二甲基苯基)-12-{螺[2.3]己-5-基}-11-(2,2,2-三氟乙基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮(16mg，0.02727mmol)进行正相sfc。流动相a＝co2。流动相b＝meoh(20mm nh3)。流速＝40毫升/分钟[20mm nh3]，并且柱温＝55℃。分离出两个对映异构体：对映异构体1，6-(2,6-二甲基苯基)-2,2-二氧代-12-螺[2.3]己-5-基-11-(2,2,2-三氟乙基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,
12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(4.7mg，58％)esi-ms m/z计算值586.18616，实验值587.3(m+1)
+
；保留时间：1.82分钟(lc方法a)；对映异构体2，6-(2,6-二甲基苯基)-12-{螺[2.3]己-5-基}-11-(2,2,2-三氟乙基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮，(3.5mg，43％)esi-ms m/z计算值586.18616，实验值587.3(m+1)
+
；保留时间：1.82分钟(lc方法a)，获得呈无色固体的两者。
[2609]
实例101：化合物126的制备
[2610]
步骤1：3-[[4-[(2r)-2-(叔丁氧羰基氨基)丙氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸
[2611][2612]
将3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(75mg，0.1795mmol)于thf(0.7ml)中的溶液添加到n-[(1r)-2-羟基-1-甲基-乙基]氨基甲酸叔丁酯(大约47.17mg，0.2692mmol)中。之后添加固体叔丁醇钠(大约86.25mg，0.8975mmol)。使反应混合物在室温下搅拌过夜。添加乙酸(大约64.68mg，61.25μl，1.077mmol)。将反应混合物用dcm稀释，并且用hcl(1m，1
×
7ml)和盐水(2
×
75ml)洗涤。有机层经硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。将粗产物在12克硅胶柱上进行色谱分析，用etoac/己烷梯度洗脱。获得3-[[4-[(2r)-2-(叔丁氧羰基氨基)丙氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(1.65g，2.964mmol)(65mg，65％)。esi-ms m/z计算值556.19916，实验值557.3(m+1)
+
；保留时间：1.63分钟；lc方法a。
[2613]
步骤2：3-[[4-[(2r)-2-氨基丙氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸
[2614][2615]
将3-[[4-[(2r)-2-(叔丁氧羰基氨基)丙氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(1.65g，2.964mmol)于hcl(4m的8ml，32.00mmol)(于二噁烷中)中的溶液搅拌两小时，并将溶剂在真空下去除。将固体用乙醚研磨并在真空下干燥，得到呈无色固体的3-[[4-[(2r)-2-氨基丙氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(1.55g，106％)。esi-ms m/z计算值456.14673，实验值457.2(m+1)
+
；保留时间：0.37分钟，lc方法d。
[2616]
步骤3：3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(2r)-2-(螺[2.3]己-5-基氨基)丙氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸
[2617][2618]
将3-[[4-[(2r)-2-氨基丙氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(49.30mg，0.1mmol)和螺[2.3]己-5-酮(大约48.06mg，0.5000mmol)于二氯乙烷(0.5ml)和乙酸(0.1ml)中的混合物搅拌15分钟，并添加氰基硼氢化钠(大约18.85mg，0.3000mmol)。在16小时之后，再次添加更多螺[2.3]己-5-酮(大约48.06mg，0.5000mmol)和氰基硼氢化钠(大约18.85mg，0.3000mmol)。在四小时之后，将反应用甲醇稀释并通过反相hplc-ms(1％-99％乙腈/水(5mm hcl))纯化，得到呈无色固体的3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(2r)-2-(螺[2.3]己-5-基氨基)丙氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(36mg，63％)。esi-ms m/z计算值536.20935，实验值537.3(m+1)
+
；保留时间：0.41分钟；lc方法d。
[2619]
步骤4：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-甲基-12-{螺[2.3]己-5-基}-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮(化合物126)
[2620][2621]
将3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(2r)-2-(螺[2.3]己-5-基氨基)丙氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(36mg，0.06282mmol)、hatu(38mg，0.09994mmol)和三乙胺(36μl，0.2583mmol)于dmf(3ml)中的溶液搅拌四小时。将反应浓缩并通过反相hplc-ms(1％-99％乙腈/水(5mm hcl))纯化，得到呈棕黄色固体的(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-甲基-12-{螺[2.3]己-5-基}-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮(15.5mg，47％)。esi-ms m/z计算值518.1988，实验值519.3(m+1)
+
；保留时间：1.77分钟，lc方法a。
[2622]
实例102：化合物127的制备
[2623]
步骤1：3-[[4-[(2r)-2-[(7-叔丁氧基羰基-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)氨基]-3-[1-(三氟甲基)环丙基]丙氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸
[2624][2625]
将3-[[4-[(2r)-2-氨基-3-[1-(三氟甲基)环丙基]丙氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(400mg，0.5668mmol)溶解于dcm(4ml)中，然后添加2-氧代-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁酯(153mg，0.6393mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(178mg，0.8399mmol)。将反应在室温下搅拌30分钟，然后通过添加2m hcl(4ml)淬灭。将层分离，并将水层用dcm(4ml)萃取三次。有机层经硫酸钠干燥并浓缩。将粗残余物干燥加载到硅胶上，并通过使用dcm中的0-10％甲醇的快速柱色谱法纯化。收集合适的级分，得到呈白色固体的3-[[4-[(2r)-2-[(7-叔丁氧基羰基-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)氨基]-3-[1-(三氟甲基)环丙基]丙氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(406.3mg，70％)。esi-ms m/z计算值787.3227，实验值788.6(m+1)
+
；保留时间：2.9分钟。
[2626]
步骤2：2-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-2,2,13-三氧代-11-[[1-(三氟甲基)环丙基]甲基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁酯(化合物127)
[2627][2628]
将hatu(1.56g，4.1028mmol)和dipea(2.0034g，2.70ml，15.501mmol)溶解于dmf(24ml)中，然后滴加于dmf(24ml)中的3-[[4-[(2r)-2-[(7-叔丁氧基羰基-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)氨基]-3-[1-(三氟甲基)环丙基]丙氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(2.47g，3.1350mmol)。将溶液搅拌过夜。将反应通过添加盐水(200ml)淬灭。将水层用etoac萃取三次(每次40ml)。将有机层用盐水洗涤5次(每次25ml)。然后经硫酸钠干燥并浓缩。将粗残余物干燥加载到硅胶上并通过快速柱色谱法使用0-20％丙酮/dcm纯化，得到呈类白色粉末的2-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-2,2,13-三氧代-11-[[1-(三氟甲基)环丙基]甲基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁酯(1.49g，59％)。
esi-ms m/z计算值769.3121，实验值770.9(m+1)
+
；保留时间：3.85分钟(lc方法t)。
[2629]
实例103：化合物128的制备
[2630]
步骤1：(11r)-12-(7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)-6-(2,6-二甲基苯基)-2,2-二氧代-11-[[1-(三氟甲基)环丙基]甲基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮
[2631][2632]
将2-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-2,2,13-三氧代-11-[[1-(三氟甲基)环丙基]甲基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁酯(21.4mg，0.02682mmol)溶解于二噁烷中的4m hcl(4m的1ml，4.000mmol)中并在室温下搅拌。在1小时之后，将反应蒸发至干燥，得到(11r)-12-(7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)-6-(2,6-二甲基苯基)-2,2-二氧代-11-[[1-(三氟甲基)环丙基]甲基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)(18.9mg，100％)esi-ms m/z计算值669.25964，实验值670.7(m+1)
+
；保留时间：0.5分钟。lc方法d。
[2633]
步骤2：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-12-[7-(2-甲氧基乙基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基]-2,2-二氧代-11-[[1-(三氟甲基)环丙基]甲基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(化合物128)
[2634][2635]
将(11r)-12-(7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)-6-(2,6-二甲基苯基)-2,2-二氧代-11-[[1-(三氟甲基)环丙基]甲基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)(36.9mg，0.05225mmol)和tea(36mg，0.3558mmol)于乙腈(0.4ml)中的混合物加热至55℃并用1-溴-2-甲氧基-乙烷(6μl，0.06385mmol)处理。将反应搅拌16小时。将溶液过滤并将滤液溶解于0.8ml dmso中，并将其通过反相hplc使用水中的1-99％ mecn(hcl改性剂)的15分钟梯度纯化，得到(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-12-[7-(2-甲氧基乙基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基]-2,2-二氧代-11-[[1-(三氟甲基)环丙基]甲基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九
ms m/z计算值676.2542，实验值677.4(m+1)
+
；保留时间：0.53分钟，lc方法a。
[2644]
步骤2：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-12-[3-(丙烷-2-基氧基)环丁基]-11-{[1-(三氟甲基)环丙基]甲基}-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-2,2,13-三酮
[2645][2646]
将3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(2r)-2-[(3-异丙氧基环丁基)氨基]-3-[1-(三氟甲基)环丙基]丙氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(62.8mg，0.08805mmol)、hatu(79mg，0.2078mmol)和三乙胺(74μl，0.5309mmol)溶解于dmf(2ml)中，并在室温下搅拌16小时。将反应混合物过滤并通过lc/ms利用5mm hcl水溶液中的1-99％乙腈的梯度纯化，得到(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-12-[3-(丙烷-2-基氧基)环丁基]-11-{[1-(三氟甲基)环丙基]甲基}-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-2,2,13-三酮(24.2mg，18％)esi-ms m/z计算值658.24365，实验值659.2(m+1)
+
；保留时间：2.79分钟。lcms lc方法i。化合物是顺式/反式异构体的混合物
[2647]
步骤3：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-12-(3-异丙氧基环丁基)-2,2-二氧代-11-[[1-(三氟甲基)环丙基]甲基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮，非对映异构体1(化合物130)，以及(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-12-[3-(丙烷-2-基氧基)环丁基]-11-{[1-(三氟甲基)环丙基]甲基}-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-2,2,13-三酮，非对映异构体2(化合物131)
[2648][2649]
使用手性pak ic(250
×
10mm，5μm)，在35℃下的柱，由48％ meoh(无改性剂)和52％ co2组成的流动相，流速为70毫升/分钟，meoh浓度为22mg/ml(无改性剂)，并且进样体积为70μl，压力为144bar并且利用210nm波长对(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-12-(3-异丙氧基环丁基)-2,2-二氧代-11-[[1-(三氟甲基)环丙基]甲基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(22mg，0.03340mmol)进行sfc分离。将两个异构体分离：非对映异构体1，峰1，(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-12-(3-异丙氧基环丁基)-2,2-二氧代-11-[[1-(三氟甲基)环丙基]甲基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六
烯-13-酮(9.8mg，45％)esi-ms m/z计算值658.24365，实验值659.3(m+1)
+
；保留时间：1.93分钟(lc方法a)；以及非对映异构体2，峰2，(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-12-[3-(丙烷-2-基氧基)环丁基]-11-{[1-(三氟甲基)环丙基]甲基}-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-2,2,13-三酮(3.2mg，15％)esi-ms m/z计算值658.24365，实验值659.2(m+1)
+
；保留时间：2.01分钟(lc方法a)。
[2650]
实例106：化合物132的制备
[2651]
步骤1：3-[[4-[(2r)-2-[(2-叔丁氧基羰基-2-氮杂螺[3.3]庚烷-6-基)氨基]-3-[1-(三氟甲基)环丙基]丙氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸
[2652][2653]
将3-[[4-[(2r)-2-氨基-3-[1-(三氟甲基)环丙基]丙氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(2.639g，4.259mmol)、6-氧代-2-氮杂螺[3.3]庚烷-2-羧酸叔丁酯(1.08g，5.112mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(2.73g，12.88mmol)在dcm(8ml)中合并，并搅拌4小时。在3小时内分两部分添加更多三乙酰氧基硼氢化钠(2.4g，11.32mmol)。将反应混合物再搅拌1小时，然后用甲醇(20ml)淬灭。将反应混合物在乙酸乙酯与1m hcl溶液之间分配。将有机物用1m hcl洗涤两次以上，然后用盐水洗涤。将有机物经硫酸钠干燥并蒸发，得到3-[[4-[(2r)-2-[(2-叔丁氧基羰基-2-氮杂螺[3.3]庚烷-6-基)氨基]-3-[1-(三氟甲基)环丙基]丙氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(3.40g，80％)esi-ms m/z计算值759.2914，实验值760.8(m+1)
+
；保留时间：0.56分钟。lc方法d。
[2654]
步骤2：6-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-2,2,13-三氧代-11-[[1-(三氟甲基)环丙基]甲基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]-2-氮杂螺[3.3]庚烷-2-羧酸叔丁酯
[2655][2656]
将3-[[4-[(2r)-2-[(2-叔丁氧基羰基-2-氮杂螺[3.3]庚烷-6-基)氨基]-3-[1-(三氟甲基)环丙基]丙氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(1.047g，1.052mmol)溶解于dmf(10ml)中并滴加到hatu(576mg，1.515mmol)和三乙胺(750μl，5.381mmol)于dmf(20ml)中的溶液中。将反应混合物在室温下搅拌16小时。仍有一些起始酸，所以添加更多hatu(250mg，0.6575mmol)并将反应再搅拌6小时。将反应混合物蒸发，并
且将所得油在乙酸乙酯与1m hcl溶液之间分配。将有机物用1m hcl、盐水洗涤，经硫酸钠干燥并蒸发。将粗物质通过硅胶色谱法纯化，用10-100％乙酸乙酯/庚烷洗脱，得到6-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-2,2,13-三氧代-11-[[1-(三氟甲基)环丙基]甲基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]-2-氮杂螺[3.3]庚烷-2-羧酸叔丁酯(385mg，49％)esi-ms m/z计算值741.28076，实验值742.7(m+1)
+
；保留时间：0.78分钟，lc方法a。
[2657]
步骤3：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-12-(2-异丙基-2-氮杂螺[3.3]庚烷-6-基)-2,2-二氧代-11-[[1-(三氟甲基)环丙基]甲基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(化合物132)
[2658][2659]
将6-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-2,2,13-三氧代-11-[[1-(三氟甲基)环丙基]甲基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]-2-氮杂螺[3.3]庚烷-2-羧酸叔丁酯(104.1mg，0.1403mmol)与tfa(60μl，0.7788mmol)溶解于dcm(1ml)中并将反应搅拌1小时。将反应蒸发，并且将所得固体溶解于含有丙酮(75μl，1.021mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(154mg，0.7266mmol)的dcm(0.3ml)中。将反应再搅拌2小时。将混合物在乙酸乙酯与1m hcl溶液之间分配。将有机物分离，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并蒸发。将粗物质通过lc/ms利用5mm hcl水溶液中的1-99％乙腈的梯度纯化，得到(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-12-(2-异丙基-2-氮杂螺[3.3]庚烷-6-基)-2,2-二氧代-11-[[1-(三氟甲基)环丙基]甲基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)(7.5mg，7％)esi-ms m/z计算值683.2753，实验值684.7(m+1)
+
；保留时间：1.25分钟，lc方法a。
[2660]
实例107：化合物133的制备
[2661]
步骤1：(11r)-12-(2-氮杂螺[3.3]庚烷-6-基)-6-(2,6-二甲基苯基)-2,2-二氧代-11-[[1-(三氟甲基)环丙基]甲基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮
[2662][2663]
将6-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-2,2,13-三氧代-11-[[1-(三氟甲基)环丙基]
甲基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]-2-氮杂螺[3.3]庚烷-2-羧酸叔丁酯(192mg，0.2588mmol)与tfa(240μl，3.115mmol)溶解于dcm(1.8ml)中并在室温下搅拌6小时。将反应蒸发至干燥，得到(11r)-12-(2-氮杂螺[3.3]庚烷-6-基)-6-(2,6-二甲基苯基)-2,2-二氧代-11-[[1-(三氟甲基)环丙基]甲基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(三氟乙酸盐)(195mg，86％)esi-ms m/z计算值641.22833，实验值642.7(m+1)
+
；保留时间：0.5分钟，lc方法d。
[2664]
步骤2：6-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-2,2,13-三氧代-11-{[1-(三氟甲基)环丙基]甲基}-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4,6,8(19),14(18),15-六烯-12-基]-2-氮杂螺[3.3]庚烷-2-羧酸丙烷-2-基酯(化合物133)
[2665][2666]
将(11r)-12-(2-氮杂螺[3.3]庚烷-6-基)-6-(2,6-二甲基苯基)-2,2-二氧代-11-[[1-(三氟甲基)环丙基]甲基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(三氟乙酸盐)(40mg，0.05293mmol)溶解于dcm(1ml)中并添加氯甲酸异丙酯(大约2m的79.40μl，0.1588mmol)和diea(大约34.20mg，46.09μl，0.2646mmol)并将反应搅拌10分钟。将反应蒸发并将粗产物通过lc/ms利用1-99％乙腈/5mm hcl水溶液的梯度纯化，得到6-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-2,2,13-三氧代-11-{[1-(三氟甲基)环丙基]甲基}-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4,6,8(19),14(18),15-六烯-12-基]-2-氮杂螺[3.3]庚烷-2-羧酸丙烷-2-基酯(20.1mg，52％)。esi-ms m/z计算值727.26514，实验值728.8(m+1)
+
；保留时间：1.87分钟；lc方法a。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ13.04(s,1h),8.35(s,1h),7.88(s,1h),7.65(s,2h),7.30-7.19(m,1h),7.12(s,2h),6.38(s,1h),5.04(dd,j＝10.8,4.4hz,1h),4.72(p,j＝6.3hz,1h),4.29(s,1h),4.09-3.99(m,1h),3.95(s,2h),3.90(s,2h),3.83(t,j＝8.4hz,1h),3.11(t,j＝9.8hz,1h),3.03(dd,j＝11.1,8.7hz,1h),2.47-2.36(m,2h),2.22-1.79(m,7h),1.49(dd,j＝16.7,9.3hz,1h),1.16(d,j＝6.3hz,6h),0.87-0.70(m,2h),0.69-0.59(m,1h),0.58-0.45(m,1h)。
[2667]
实例108：化合物134和化合物135的制备
[2668]
步骤1：2-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-2,2,13-三氧代-11-[[1-(三氟甲基)环丙基]甲基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]螺[3.3]庚烷-6-羧酸甲酯
[2669][2670]
将3-[[4-[(2r)-2-氨基-3-[1-(三氟甲基)环丙基]丙氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(113.3mg，0.1885mmol)、2-氧代螺[3.3]庚烷-6-羧酸甲酯(52mg，0.3092mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(124mg，0.5851mmol)在dcm(300μl)中合并，并在室温下搅拌1小时。将反应混合物在乙酸乙酯与1m hcl溶液之间分配。将有机物分离，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并蒸发。将粗物质溶解于含有hatu(97.8mg，0.2572mmol)和三乙胺(105μl，0.7533mmol)的dmf(2ml)中并将反应在室温下搅拌16小时。将反应过滤并通过lc/ms利用5mm hcl水溶液中的1-99％乙腈的梯度纯化，得到2-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-2,2,13-三氧代-11-[[1-(三氟甲基)环丙基]甲基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]螺[3.3]庚烷-6-羧酸甲酯(42.4mg，32％)esi-ms m/z计算值698.2386，实验值699.19(m+1)
+
；保留时间：0.74分钟，lc方法d。
[2671]
步骤2：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-12-[6-(羟甲基)螺[3.3]庚烷-2-基]-11-{[1-(三氟甲基)环丙基]甲基}-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮，非对映异构体1(化合物134)，以及(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-12-[6-(羟甲基)螺[3.3]庚烷-2-基]-2,2-二氧代-11-[[1-(三氟甲基)环丙基]甲基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-三酮，非对映异构体2(化合物135)
[2672][2673]
将2-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-2,2,13-三氧代-11-[[1-(三氟甲基)环丙基]甲基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]螺[3.3]庚烷-6-羧酸甲酯(42.4mg，0.06068mmol)溶解于thf中的硼氢化锂(2m的1ml，2.000mmol)中并在室温下搅拌1小时。将反应用甲醇淬灭，然后在乙酸乙酯与1m hcl溶液之间分配。将有机物分离，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并蒸发。将粗物质通过lc/ms利用1-99％乙腈/5mm hcl水溶液的梯度纯化。使用手性pak ic(250
×
10mm，5μm)，在35℃下的柱，由36％ meoh(无改性剂)和64％ co2组成的流动相，流速为70毫升/分钟，
meoh浓度为24mg/ml(无改性剂)，并且进样体积为70μl，压力为165bar并且利用210nm波长对34mg的产物进行sfc分离。将两个异构体分离：非对映异构体1，峰1，(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-12-[6-(羟甲基)螺[3.3]庚烷-2-基]-11-{[1-(三氟甲基)环丙基]甲基}-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮(10.9mg，27％)esi-ms m/z计算值670.24365，实验值671.4(m+1)
+
；保留时间：1.67分钟(lc方法a)；以及非对映异构体2，峰2，(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-12-[6-(羟甲基)螺[3.3]庚烷-2-基]-2,2-二氧代-11-[[1-(三氟甲基)环丙基]甲基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-三酮(10.7mg，26％)esi-ms m/z计算值670.24365，实验值671.4(m+1)
+
；保留时间：1.68分钟(lc方法a)。
[2674]
实例109：化合物136和化合物137的制备
[2675]
步骤1：3-[[4-[2-[(7-叔丁氧基羰基-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)氨基]-3-[1-(三氟甲基)环丙基]丙氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸
[2676][2677]
向3-[[4-[2-氨基-3-[1-(三氟甲基)环丙基]丙氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(200mg，0.2662mmol)于dcm(1.6ml)中的溶液中添加2-氧代-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁酯(127.4mg，0.5324mmol)，然后添加三乙酰氧基硼氢化钠(112.8mg，0.5322mmol)并将混合物搅拌3小时30分钟，然后添加三乙酰氧基硼氢化钠(169.3mg，0.7988mmol)并将所得混合物搅拌80分钟，然后添加三乙酰氧基硼氢化钠(112.8mg，0.5322mmol)。在20分钟之后，添加10滴饱和氯化铵水溶液和1ml的meoh进行淬灭。通过旋转蒸发去除挥发物。然后将残余物过滤并使用反相hplc-ms方法使用由phenomenex销售的luna c
18
(2)柱(75
×
30mm，5μm粒径)(pn：00c-4252-u0-ax)和15.0分钟内从1-99％流动相b运行的双梯度纯化(流动相a＝水(5mm hcl)，流动相b＝乙腈，流速＝50毫升/分钟，进样体积＝950μl并且柱温＝25℃)。将含有产物的级分通过旋转蒸发浓缩，去除乙腈，留下泡沫水溶液，向其中添加饱和氯化铵水溶液并且然后用etoac萃取。将有机相干燥(硫酸镁)，过滤并浓缩，得到呈白色固体的3-[[4-[2-[(7-叔丁氧基羰基-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)氨基]-3-[1-(三氟甲基)环丙基]丙氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(133.1mg，61％)。esi-ms m/z计算值787.32263，实验值788.2(m+1)
+
；保留时间：0.57分钟，lc方法d。
[2678]
步骤2：2-[6-(2,6-二甲基苯基)-2,2,13-三氧代-11-[[1-(三氟甲基)环丙基]甲基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,
14,16-六烯-12-基]-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁酯
[2679][2680]
将3-[[4-[2-[(7-叔丁氧基羰基-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)氨基]-3-[1-(三氟甲基)环丙基]丙氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(132mg，0.1601mmol)、[[(e)-(1-氰基-2-乙氧基-2-氧代-亚乙基)氨基]氧-四氢吡喃-4-基-亚甲基]-二甲基-铵(六氟化磷离子)(109.5mg，0.2563mmol)和三乙胺(91.75μl，0.6583mmol)于dmf(11ml)中的溶液搅拌2小时。将反应通过旋转蒸发浓缩，然后用etoac稀释并用饱和氯化铵水溶液/盐水的1:1混合物(2x)洗涤，干燥(硫酸镁)，过滤并浓缩成浅棕色油2-[6-(2,6-二甲基苯基)-2,2,13-三氧代-11-[[1-(三氟甲基)环丙基]甲基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁酯(212.9mg，100％)esi-ms m/z计算值769.3121，实验值770.1(m+1)
+
；保留时间：0.79分钟，lc方法d。
[2681]
步骤3：12-(7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)-6-(2,6-二甲基苯基)-2,2-二氧代-11-[[1-(三氟甲基)环丙基]甲基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮
[2682][2683]
将于二氯甲烷(2.47ml)中的粗2-[6-(2,6-二甲基苯基)-2,2,13-三氧代-11-[[1-(三氟甲基)环丙基]甲基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁酯(212.9mg，0.1604mmol)与hcl(4m的1.129ml，4.516mmol)合并，并在室温下搅拌30分钟。然后在氮气流下将反应混合物浓缩，溶解于1:1dmso/甲醇中，过滤并使用反相hplc-ms方法使用由phenomenex销售的luna c
18
(2)柱(75
×
30mm，5μm粒径)(pn：00c-4252-u0-ax)和15.0分钟内
从1-99％流动相b运行的双梯度纯化(流动相a＝水(5mm hcl)，流动相b＝乙腈，流速＝50毫升/分钟，进样体积＝950μl并且柱温＝25℃)，得到12-(7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)-6-(2,6-二甲基苯基)-2,2-二氧代-11-[[1-(三氟甲基)环丙基]甲基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)(90.3mg，80％)esi-ms m/z计算值669.25964，实验值670.3(m+1)
+
；保留时间：0.5分钟，lc方法d。
[2684]
步骤4：6-(2,6-二甲基苯基)-12-(7-甲基-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)-2,2-二氧代-11-[[1-(三氟甲基)环丙基]甲基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮，对映异构体1(化合物136)，6-(2,6-二甲基苯基)-12-(7-甲基-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)-2,2-二氧代-11-[[1-(三氟甲基)环丙基]甲基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮，对映异构体2(化合物137)
[2685][2686]
将12-(7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)-6-(2,6-二甲基苯基)-2,2-二氧代-11-[[1-(三氟甲基)环丙基]甲基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)(90.3mg，0.1279mmol)溶解于甲酸(820.9μl)中并与甲醛水溶液(2.416ml，87.71mmol)合并，并在螺旋盖小瓶中加热至90℃过夜。将反应混合物冷却至室温，转移至圆底烧瓶中并且然后在减压下部分浓缩，用甲醇和dmso稀释，添加3滴tea并通过玻璃移液管中的棉纸塞过滤，然后通过0.45μm注射器过滤器过滤。将物质使用反相hplc-ms方法使用由phenomenex销售的luna c
18
(2)柱(75
×
30mm，5μm粒径)(pn：00c-4252-u0-ax)和15.0分钟内从1-99％流动相b运行的双梯度纯化(流动相a ＝水(5mm hcl)，流动相b＝乙腈，流速＝50毫升/分钟，进样体积＝950μl并且柱温＝25℃)，得到53.5mg的呈白色固体的外消旋产物，然后将所述外消旋产物通过sfc色谱法使用chiraltek od(250
×
4.6mm柱，5μm粒径)，在co2流动相中梯度为18-28％meoh(20mm nh3添加剂)，14.5分钟内60毫升/分钟(进样体积＝dmso中的25mg/ml溶液的100μl)进行手性分离，得到第一对映异构体以洗脱6-(2,6-二甲基苯基)-12-(7-甲基-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)-2,2-二氧代-11-[[1-(三氟甲基)环丙基]甲基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(22.4mg，51％)1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.32(s,1h),7.80(t,j＝4.9hz,1h),7.54(d,j＝4.8hz,2h),7.18(t,j＝7.6hz,1h),7.06(d,j＝7.6hz,2h),6.03(s,1h),5.04-4.96(m,1h),4.12(t,j＝15.2hz,2h),3.91(t,j＝8.8hz,1h),2.84(s,1h),2.74-2.65(m,2h),2.55(s,1h),2.37-2.28(m,
3h),2.11(d,j＝16.1hz,1h),1.97(s,8h),1.72(s,4h),1.52(dd,j＝16.9,8.6hz,2h),0.88-0.82(m,1h),0.79(dt,j＝10.8,5.1hz,1h),0.70(dt,j＝9.4,4.7hz,1h),0.65(d,j＝8.8hz,1h),0.41(s,1h)。esi-ms m/z计算值683.2753，实验值684.2(m+1)
+
；保留时间：1.28分钟(lc方法a)；以及洗脱6-(2,6-二甲基苯基)-12-(7-甲基-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)-2,2-二氧代-11-[[1-(三氟甲基)环丙基]甲基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮的第二对映异构体(21.9mg，50％)1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.32(s,1h),7.79(t,j＝4.7hz,1h),7.53(d,j＝4.8hz,2h),7.17(t,j＝7.5hz,1h),7.06(d,j＝7.6hz,2h),6.01(s,1h),5.06-4.97(m,1h),4.12(t,j＝12.3hz,2h),3.97-3.83(m,1h),2.84(s,1h),2.76-2.65(m,2h),2.55(s,1h),2.31(d,j＝9.5hz,3h),2.11(d,j＝16.2hz,1h),1.96(dt,j＝24.4,11.0hz,8h),1.72(s,4h),1.51(t,j＝8.8hz,2h),0.85(t,j＝6.6hz,1h),0.78(q,j＝5.2hz,1h),0.69(dt,j＝9.2,4.7hz,1h),0.63(d,j＝6.0hz,1h),0.41(s,1h)。esi-ms m/z计算值683.2753，实验值684.2(m+1)
+
；保留时间：1.28分钟(lc方法a)，两者呈白色固体。
[2687]
实例110：化合物138的制备
[2688]
步骤1：2-[[(1r)-1-(羟甲基)-3,3-二甲基-丁基]氨基]-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁酯
[2689][2690]
在25ml烧瓶中，在环境温度下在氮气下，向(2r)-2-氨基-4,4-二甲基-戊烷-1-醇(盐酸盐)(200mg，1.193mmol)于无水1,2-二氯乙烷(3ml)中的乳状乳液中添加固体2-氧代-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁酯(370mg，1.546mmol)。将混合物搅拌20分钟，然后以2分钟的间隔分3批添加固体三乙酰氧基硼氢化钠(850mg，4.011mmol)。将反应搅拌过夜(14小时)。将悬浮液在冰水浴中冷却并通过缓慢添加盐酸水溶液(1.0m的6.0ml，6.000mmol)将ph调节至约1淬灭。将乳液搅拌20分钟以分解乳液。将所得冷却(冰浴)悬浮液通过缓慢添加固体碳酸钠(1.5g，14.15mmol)碱化(注意！强烈起泡)以调节ph至10。将不均匀相搅拌20分钟。然后添加乙酸乙酯(20ml)并将层分离。将水层用乙酸乙酯(2
×
10ml)反萃取。将合并的有机物用盐水(10ml)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并在减压下蒸发，得到呈无色粘状物质的2-[[(1r)-1-(羟甲基)-3,3-二甲基-丁基]氨基]-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁酯(499mg，98％)。所述产物无需进一步纯化即可用于后续反应。esi-ms m/z计算值354.28824，实验值355.4(m+1)
+
；保留时间：0.99分钟；lc方法a。
[2691]
步骤2：(11r)-12-(7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮
[2692][2693]
在室温下将2-[[(1r)-1-(羟甲基)-3,3-二甲基-丁基]氨基]-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁酯(490mg，1.382mmol)和3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(547.4mg，1.310mmol)于thf(5ml)中的溶液用叔丁醇钠(631.3mg，6.569mmol)处理并搅拌4小时。然后将混合物用1n hcl(10ml)处理并用乙酸乙酯(20ml)稀释。将相分离并将产物用乙酸乙酯(15ml
×
2)从水层中萃取。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并在真空中浓缩，得到3-[[4-[(2r)-2-[(7-叔丁氧基羰基-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)氨基]-4,4-二甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(1000mg，104％)。esi-ms m/z计算值735.3666，实验值736.7(m+1)
+
；保留时间：1.53分钟；lc方法a。
[2694]
将作为dmf(10ml)中的溶液的产物滴加到comu(847.2mg，1.978mmol)和tea(1000μl，7.175mmol)于dmf(50ml)中的搅拌的溶液中。使反应混合物在室温下搅拌4小时，然后在50ml乙酸乙酯与50ml1m hcl溶液之间分配。将有机物分离，并且将水溶液用50ml乙酸乙酯再萃取3次。将合并的有机物用1m hcl洗涤，然后用盐水洗涤。将有机物经硫酸钠干燥，过滤，浓缩并在真空中蒸发，得到2-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁酯esi-ms m/z计算值717.356，实验值718.7(m+1)
+
；保留时间：2.26(lc方法a)。
[2695]
将产物用hcl(4m的5ml，20.00mmol)(二噁烷中的4m)处理并在室温下搅拌2小时并且然后在真空中浓缩。将所得残余物溶解于1.8ml dmso中，并通过反相hplc使用水中的1-99％ mecn(hcl改性剂)的15分钟梯度纯化，得到(11r)-12-(7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)(352mg，41％)esi-ms m/z计算值617.3036，实验值618.8(m+1)
+
；保留时间：1.35分钟(lc方法a)。
[2696]
步骤3：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-12-[7-(2-甲氧基乙基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基]-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(化合物138)
[2697][2698]
将(11r)-12-(7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)(44.4mg，0.06786mmol)和tea(70μl，0.5022mmol)的混合物加热至55℃并用1-溴-2-甲氧基-乙烷(8μl，0.08513mmol)处理。将反应搅拌16小时。将溶液过滤并将滤液溶解于0.8ml dmso中，并通过反相hplc使用水中的1-99％ mecn(hcl改性剂)的15分钟梯度纯化，得到(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-12-[7-(2-甲氧基乙基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基]-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)(19.4mg，38％)。esi-ms m/z计算值675.34546，实验值676.7(m+1)
+
；保留时间：1.4分钟；lc方法a。
[2699]
实例111：化合物139的制备
[2700]
步骤1：(2r)-2-[(3-苄氧基环丁基)氨基]-4,4-二甲基-戊烷-1-醇
[2701][2702]
向3-苄氧基环丁酮(3.014g，16.591mmol)于无水dce(30ml)中的溶液中添加(2r)-2-氨基-4,4-二甲基-戊烷-1-醇(盐酸盐)(3.527g，21.035mmol)。将反应在室温下搅拌30分钟，然后添加三乙酰氧基硼氢化钠(6.496g，29.118mmol)。将反应混合物在室温下搅拌2小时。将反应用2n碳酸钠(水溶液)(30ml)淬灭。将水层用氯仿(3
×
30ml)萃取。将合并的有机层用盐水(20ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法使用0至10％甲醇/二氯甲烷(用0.3％ nh4oh缓冲)纯化，得到呈澄清油的(2r)-2-[(3-苄氧基环丁基)氨基]-4,4-二甲基-戊烷-1-醇(4.905g，100％)。产物是非对映异构体的混合物。esi-ms m/z计算值291.21982，实验值292.3(m+1)
+
；保留时间：2.29分钟；lc方法t。
[2703]
步骤2：3-[[4-[(2r)-2-[(3-苄氧基环丁基)氨基]-4,4-二甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸
[2704][2705]
在0℃下向(2r)-2-[(3-苄氧基环丁基)氨基]-4,4-二甲基-戊烷-1-醇(4.905g，16.663mmol)和3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(6.964g，16.666mmol)于无水thf(50ml)中的溶液中添加叔丁醇钠(8.17g，83.312mmol)。将反应在室温下搅拌3小时。在0℃下将反应用1n hcl(水溶液)(50ml)淬灭。将两个层分离并将水层用乙酸乙酯(2
×
50ml)萃取。将合并的有机层用盐水(50ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并且然后在真空下浓缩，得到呈类白色固体的3-[[4-[(2r)-2-[(3-苄氧基环丁基)氨基]-4,4-二甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(11.758g，90％)。将粗产物在不经纯化的情况下用于下一步骤反应。esi-ms m/z计算值672.29816，实验值673.4(m+1)
+
；保留时间：2.74分钟；lc方法t。
[2706]
步骤3：(11r)-12-(3-苄氧基环丁基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮
[2707][2708]
在0℃下，向3-[[4-[(2r)-2-[(3-苄氧基环丁基)氨基]-4,4-二甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(15.4g，19.541mmol)于dmf(300ml)中的溶液中添加comu(12.55g，29.304mmol)。将diea(10.091g，13.6ml，78.078mmol)滴加到反应中。将反应缓慢升温至室温并搅拌过夜。将反应用10％柠檬酸水溶液(300ml)淬灭。将水溶液用乙酸乙酯(3
×
300ml)萃取。将合并的有机层用盐水(3
×
300ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法使用20至50％丙酮/己烷(加载有甲苯，330g硅胶柱)纯化，得到呈红色泡沫状固体的(11r)-12-(3-苄氧基环丁基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(14.24g，82％)。esi-ms m/z计算值654.2876，实验值655.4(m+1)
+
；保留时间：3.68分钟，lc方法t。
[2709]
步骤4：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-12-(3-羟基环丁基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4
(19),5,7,14,16-六烯-13-酮
[2710][2711]
向(11r)-12-(3-苄氧基环丁基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(62mg，0.0701mmol)于甲醇(5ml)中的溶液中添加10％钯/炭(10mg，0.0094mmol)。将反应混合物用氮气吹扫并且然后将其在1atm氢气气氛下氢化16小时。将活性碳(60mg)添加到反应混合物中。将溶液在60℃下加热1小时。在冷却至室温之后，将固体通过硅藻土垫过滤去除。添加另一批10％钯/炭(10mg，0.0094mmol)。将反应在1atm氢气气氛下搅拌3小时。添加20％ pd(oh)2(20mg，0.0285mmol)。将反应在1atm氢气气氛下搅拌2天。添加水(5ml)。添加反应。将催化剂通过硅藻土垫过滤去除，并用甲醇(5ml)洗涤。将合并的滤液真空浓缩。向残余物中添加10％柠檬酸(10ml)，并用乙酸乙酯(3
×
20ml)萃取。将合并的有机层用盐水(20ml)洗涤，经无水硫酸镁干燥并在真空下浓缩，得到呈透明凝胶的(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-12-(3-羟基环丁基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(39mg，94％)(非对映异构体的混合物)。esi-ms m/z计算值564.24066，实验值565.2(m+1)
+
；保留时间：2.88分钟；lc方法t。
[2712]
步骤5：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2-二氧代-12-(3-氧代环丁基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮
[2713][2714]
在0℃下向(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-12-(3-羟基环丁基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(4.3g，7.2340mmol)于dcm(100ml)中的溶液中添加dmp(3.7g，8.7235mmol)。将反应在室温下搅拌2天。将反应用乙酸乙酯(100ml)和饱和碳酸氢钠与10％硫代硫酸钠的1:1混合物(100ml)稀释。将两个层分离，并将水层用乙酸乙酯(2
×
100ml)萃取。将合并的有机层用盐水(100ml)洗涤，经无水硫酸镁干燥并在真空下浓缩。向残余物中添加乙酸(1ml)并且然后再次浓缩。将残余物通过硅胶色谱法使用0至50％丙酮/
己烷，然后使用0至10％甲醇/dcm纯化。将正确的级分合并并且然后在真空下浓缩。将残余物用乙醚(40ml)研磨，得到呈白色固体的(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2-二氧代-12-(3-氧代环丁基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(1.8521g，44％)。esi-ms m/z计算值562.225，实验值563.5(m+1)
+
；保留时间：2.47分钟；lc方法w。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ13.08(s,1h),8.56(s,1h),7.95(s,1h),7.79
–
7.56(m,2h),7.26(t,j＝7.6,7.6hz,1h),7.12(s,2h),6.44(s,1h),5.18(dd,j＝10.8,4.6hz,1h),4.48
–
4.21(m,2h),3.83(ddd,j＝12.5,8.1,4.7hz,1h),3.76
–
3.60(m,2h),3.49
–
3.33(m,2h,与dmso-d6中的水峰重叠),2.30
–
1.75(m,6h),1.67(dd,j＝15.3,8.2hz,1h),1.43(d,j＝15.1hz,1h),0.49(s,9h)。
[2715]
步骤6：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-12-(3-羟基-3-甲基-环丁基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(化合物139)
[2716][2717]
将(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2-二氧代-12-(3-氧代环丁基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(50mg，0.08886mmol)溶解于thf(0.50ml)中并冷却至0℃，以添加溴(甲基)镁(3.0m的50μl，0.1500mmol)于乙醚中的溶液。在0℃下继续搅拌15分钟，并使反应混合物在室温下搅拌过夜。将反应混合物过滤，并且将产物通过uv触发的反相hplc分离，用带有在水相中的0.5mm hcl酸性改性剂的10-99％乙腈/水梯度洗脱15分钟，得到(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-12-(3-羟基-3-甲基-环丁基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(36.9mg，72％)esi-ms m/z578.2563，实验值579.2(m+1)
+
；保留时间：1.69分钟；lc方法a。未知构型的单一异构体
[2718]
实例112：化合物140的制备
[2719]
步骤1：(11r)-12-(3-苄基-3-羟基-环丁基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(化合物140)
[2720]
[2721]
将(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2-二氧代-12-(3-氧代环丁基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(50mg，0.08886mmol)溶解于thf(0.50ml)中。将溶液冷却至0℃。以添加苄基(氯)镁(1.0m的125μl，0.1250mmol)于thf中的溶液。在0℃下继续搅拌15分钟，并使反应混合物在室温下搅拌过夜。将反应混合物过滤并且将产物通过uv触发的反相hplc分离，用10-99％乙腈/水梯度在水相中用0.5mm hcl酸改性剂洗脱15分钟。获得(11r)-12-(3-苄基-3-羟基-环丁基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(11.3mg，19％)。esi-ms m/z计算值654.2876，实验值655.2(m+1)
+
；保留时间：2.0分钟；lc方法a。
[2722]
实例113：化合物141的制备
[2723]
步骤1：3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(2r)-2-[(3-甲氧羰基环丁基)氨基]-4,4-甲基-戊氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸
[2724][2725]
在氮气下，向100ml烧瓶中装入3-[[4-[(2r)-2-氨基-4,4-二甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(1.614g，2.939mmol)、无水dcm(5ml)和diea(0.56ml，3.215mmol)。搅拌混合物，直到几乎完全溶解为止。添加乙酸(0.19ml，3.341mmol)，然后迅速添加3-氧代环丁烷羧酸甲酯(0.46ml)。将溶液在室温下搅拌20分钟，添加三乙酰氧基硼氢化钠(1.31g，6.181mmol)，并将悬浮液在室温下搅拌7小时。将混合物在-20℃的冷冻箱中储存2天。将所述混合物温热至室温。添加更多3-氧代环丁烷羧酸甲酯(0.46ml)和三乙酰氧基硼氢化钠(1.25g，5.898mmol)并且将反应再搅拌6小时。将反应在冰中冷却并且通过缓慢添加1nhcl水溶液(50ml)淬灭。添加etoac(30ml)和盐水(15ml)并且将两个相分离。将水相用etoac(2
×
20ml)进一步萃取。将组合的萃取物经硫酸钠干燥并且将溶剂蒸发。将残余物用乙醚(100ml)稀释并且将所得悬浮液搅拌10分钟。将产物过滤，用乙醚洗涤并干燥，得到呈白色固体的3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(2r)-2-[(3-甲氧羰基环丁基)氨基]-4,4-甲基-戊氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(1.503g，77％)。esi-ms m/z计算值624.2618，实验值625.29(m+1)
+
；保留时间：1.19分钟；lc方法a。
[2726]
步骤2：3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-12-基]环丁烷-1-羧酸甲酯，非对映异构体1，以及3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-12-基]环丁烷-1-羧酸甲酯，非
对映异构体2
[2727][2728]
在氮气下向250ml圆底烧瓶中装入comu(2.25g，5.254mmol)、无水dmf(70ml)和diea(2.0ml，11.48mmol)。通过注射器在5分钟的时间段内滴加粗3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(2r)-2-[(3-甲氧羰基环丁基)氨基]-4,4-甲基-戊氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(1.5g，2.269mmol)于无水dmf(20ml)中的溶液。将混合物在室温下搅拌21小时(可见两个异构体，比率70:30)。将反应浓缩至三分之一并用乙酸乙酯(50ml)、1nhcl水溶液(40ml)和盐水(20ml)稀释。将两个相分离，并将水相用etoac(2
×
15ml)进一步萃取。将组合的萃取物经硫酸钠干燥并且将溶剂蒸发。将残余物溶解于dcm中并通过硅胶快速色谱法(80g柱)使用乙酸乙酯(30分钟内20至100％)/己烷的梯度纯化，得到：非对映异构体1，更少极性次要异构体，洗脱约50-55％ etoac，3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-12-基]环丁烷-1-羧酸甲酯(102mg，25％)。esi-ms m/z计算值606.2512，实验值607.41(m+1)
+
；保留时间：1.81分钟(lc方法a)；以及非对映异构体2，更多极性的主要异构体，3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-12-基]环丁烷-1-羧酸甲酯(331mg，34％)。esi-ms m/z计算值606.2512，实验值607.18(m+1)
+
；保留时间：1.81分钟(lc方法a)。
[2729]
步骤3：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-12-[3-(2-羟基丙烷-2-基)环丁基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮(化合物141)
[2730]
6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-12-[3-(2-羟基丙烷-2-基)环丁基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮(11.9mg，42％)。esi-ms m/z计算值606.2876，实验值607.53(m+1)
+
；保留时间：1.84分钟(lc方法a)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ13.43-11.61(宽m,1h),8.43(s,1h),7.91(s,1h),7.66(s,2h),7.33-7.19(m,1h),7.12(s,2h),6.39(s,1h),5.12(d,j＝9.6hz,1h),4.34(t,j＝11.4hz,1h),4.19(s,1h),3.89(p,j＝8.8hz,1h),3.75-3.59(br m,1h),2.68(dt,j＝10.2,5.4hz,2h),2.28-1.78(m,9h),1.69(dd,j＝15.2,8.3hz,1h),1.39(d,j＝15.0hz,1h),1.05(s,6h),0.50(s,9h)。.
[2736]
实例115：化合物143的制备
[2737]
步骤1：6-[[(1r)-1-(羟甲基)-3,3-二甲基-丁基]氨基]-3-氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-羧酸叔丁酯
[2738][2739]
将6-氧代-3-氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-羧酸叔丁酯(150mg，0.7100mmol)添加到(2r)-2-氨基-4,4-二甲基-戊烷-1-醇(盐酸盐)(146mg，0.8707mmol)于无水二氯甲烷(1ml)中的溶液中并在室温下搅拌30分钟。添加三乙酰氧基硼氢化钠(480mg，2.265mmol)并将反应再搅拌3小时，然后放置在冰箱中16小时。然后使反应混合物温热至室温，用5ml二氯甲烷稀释并缓慢添加hcl水溶液(1m的3.04ml，3.040mmol)并将反应在室温下再搅拌10分钟。添加碳酸钾(1.25g，9.045mmol)于水(1.25ml)中的溶液并将有机物分离。将水相用dcm萃取，然后用乙酸乙酯萃取，并且将合并的有机物用盐水洗涤并经硫酸钠干燥，在浓缩之后得到呈无色油的6-[[(1r)-1-(羟甲基)-3,3-二甲基-丁基]氨基]-3-氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-羧酸叔丁酯(190mg，82％)。esi-ms m/z计算值326.25696，实验值327.6(m+1)
+
；保留时间：0.45分钟；lc方法d。
[2740]
步骤2：3-[[4-[(2r)-2-[(3-叔丁氧基羰基-3-氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-基)氨基]-4,4-二甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸
[2741][2742]
将3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(240mg，0.5743mmol)和6-[[(1r)-1-(羟甲基)-3,3-二甲基-丁基]氨基]-3-氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-羧酸叔丁酯(190mg，0.5820mmol)在thf(1ml)中合并，并将叔丁醇钠(277mg，2.882mmol)分两部分添加。将反应搅拌一小时。将混合物在乙酸乙酯与1m hcl之间分配。将有机物分离
并且将水溶液用乙酸乙酯再萃取3次。将合并的有机物用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并蒸发。将所得物质通过反相色谱法(1-99％ meoh/水，hcl改性剂)纯化，在干燥后得到呈白色粉末的3-[[4-[(2r)-2-[(3-叔丁氧基羰基-3-氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-基)氨基]-4,4-二甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(125mg，29％)。esi-ms m/z计算值707.33527，实验值708.6(m+1)
+
；保留时间：0.58分钟；lc方法d。
[2743]
步骤3：(1s,5r)-6-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]-3-氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-氨基甲酸甲酯(化合物143)
[2744][2745]
将于dmf(3ml)中的3-[[4-[(2r)-2-[(3-叔丁氧基羰基-3-氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-基)氨基]-4,4-二甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(125mg，0.1679mmol)滴加到comu(150mg，0.3502mmol)和dipea(150μl，0.8612mmol)于dmf(17ml)中的搅拌的溶液中。将反应混合物在室温下搅拌24小时(在第8小时添加另外的comu(75mg，0.1751mmol)和dipea(50μl，0.2871mmol))。尽管起始材料显示出两个立体异构体，但环化产物似乎只有单个峰。在指定的反应时间之后，将反应混合物用水淬灭并部分浓缩。将粗混合物在1m hcl与乙酸乙酯之间分配并将水层用乙酸乙酯再萃取3次。将合并的有机物用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。将粗物质通过硅胶色谱法纯化，用0-100％乙酸乙酯/己烷的梯度洗脱，得到(1s,5r)-6-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]-3-氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-氨基甲酸叔丁酯(20mg，17％)esi-ms m/z计算值689.3247，实验值690.6(m+1)
+
；保留时间：0.81分钟，lc方法d。
[2746]
将产物与hcl(4m的850μl，3.400mmol)(在二噁烷中)和dcm(1ml)合并，并在室温下搅拌30分钟。然后将反应混合物浓缩，添加己烷然后蒸发，在干燥之后得到呈淡黄色固体的(11r)-12-[(1s,5r)-3-氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-基]-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)(19mg，18％)esi-ms m/z计算值589.2723，实验值590.5(m+1)
+
；保留时间：0.5分钟。lc方法d。
[2747]
将8mg的上述产物与氯甲酸甲酯(3μl，0.03883mmol)和dipea(30μl，0.1722mmol)在dcm(0.5ml)中合并，并在室温下搅拌5分钟。然后将反应混合物用几滴1m hcl淬灭，部分浓缩，然后用1:1dmso/甲醇稀释，过滤并通过反相hplc(1-99％ acn/水，hcl改性剂，15分钟运行)纯化，在干燥之后得到呈白色粉末的(1s,5r)-6-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环
[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]-3-氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-氨基甲酸甲酯(4.7mg，4％)esi-ms m/z计算值647.2778，实验值648.5(m+1)
+
；保留时间：1.75分钟(lc方法a)。
[2748]
实例116：化合物144的制备
[2749]
步骤1：3-[[4-[(2r)-2-[(6-叔丁氧基羰基-6-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)氨基]-4,4-二甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸
[2750][2751]
在反应小瓶中，将3-[[4-[(2r)-2-氨基-4,4-二甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(193mg，0.3515mmol)与2-氧代-6-氮杂螺[3.5]壬烷-6-羧酸叔丁酯(126.2mg，0.5273mmol)在二氯甲烷(920μl)中混合。将反应混合物在室温下搅拌15分钟，然后添加三乙酰氧基硼氢化钠(193.7mg，0.9139mmol)。将反应在室温下搅拌4小时，然后添加另外的三乙酰氧基硼氢化钠(74.5mg，0.3515mmol)。将反应在室温下搅拌12小时，然后在乙酸乙酯与1n hcl之间分配。将反应混合物用乙酸乙酯(3x)萃取，并且将有机层用饱和nacl溶液洗涤。将有机层分离，经无水硫酸钠干燥，过滤并蒸发至干燥。将粗物质通过反相hplc使用20-80％acn/水梯度纯化以提供呈白色固体的产物。收集呈非对映异构体的混合物的最终产物，然后在乙酸乙酯与1n hcl之间分配。将反应混合物用乙酸乙酯(3x)萃取，并且将有机层用饱和nacl溶液洗涤。将有机层分离，经无水硫酸钠干燥，过滤并蒸发至干燥。将粗物质通过反相hplc使用20-80％acn/水梯度纯化以提供呈白色固体的产物。收集呈非对映异构体的混合物的最终产物3-[[4-[(2r)-2-[(6-叔丁氧基羰基-6-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)氨基]-4,4-二甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(80mg，29％)esi-ms m/z计算值735.3666，实验值736.4(m+1)
+
；保留时间：0.57(lc方法d)。
[2752]
步骤2：2-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]-6-氮杂螺[3.5]壬烷-6-羧酸叔丁酯，非对映异构体1，以及2-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]-6-氮杂螺[3.5]壬烷-6-羧酸叔丁酯，非对映异构体2
[2753][2754]
在反应小瓶中，将3-[[4-[(2r)-2-[(6-叔丁氧基羰基-6-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)氨基]-4,4-二甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(80mg，0.1025mmol)与4-甲基吗啉(22.6μl，0.2056mmol)一起溶解于dmf(4ml)中并冷却至0℃。向反应中添加2-氯-4,6-二甲氧基-1,3,5-三嗪(18mg，0.1025mmol)并使反应在0℃下搅拌1小时。然后添加另外的4-甲基吗啉(11.3μl，0.1028mmol)。使反应温热至室温并在该温度下搅拌过夜。将反应浓缩至体积的三分之一，然后在乙酸乙酯与1n hcl溶液之间分配。将有机物分离，经硫酸钠干燥并蒸发至干燥。将粗物质通过硅胶柱色谱法使用10-60％乙酸乙酯/己烷梯度纯化，得到两个异构体：首先洗脱，非对映异构体1，2-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]-6-氮杂螺[3.5]壬烷-6-羧酸叔丁酯(15.6mg，21％)esi-ms m/z计算值717.356，实验值718.5(m+1)
+
；保留时间：2.24分钟(lc方法a)；并且其次洗脱，非对映异构体2，2-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]-6-氮杂螺[3.5]壬烷-6-羧酸叔丁酯(18.8mg，25％)esi-ms m/z计算值717.356，实验值718.4(m+1)
+
；保留时间：2.28分钟(lc方法a)。
[2755]
步骤3：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-12-[6-(2-羟基乙酰基)-6-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基]-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(化合物144)
[2756][2757]
在反应小瓶中，将2-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4
(19),5,7,14,16-六烯-12-基]-6-氮杂螺[3.5]壬烷-6-羧酸叔丁酯(非对映异构体1，15.6mg，0.02173mmol)溶解于(1:1)三氟乙酸(250μl，3.245mmol)/二氯甲烷(250μl)中并在室温下搅拌1小时。将反应混合物蒸发至干燥。将物质从乙酸乙酯/己烷中沉淀出来，得到白色固体。物质无需进一步纯化即可用于下一反应。在反应小瓶中，将(11r)-12-(6-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(三氟乙酸盐)(18.6mg，117％)与二异丙基乙胺(25μl，0.1435mmol)一起溶解于二氯甲烷(500μl)中并冷却至-10℃。向反应混合物中添加2-苄氧基乙酰氯(11.32μl，0.07174mmol)并使反应温热至室温。在室温下搅拌之后，将反应在乙酸乙酯与1n hcl之间分配。将有机层用饱和nacl溶液洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并蒸发至干燥。将粗物质与几滴水一起溶解于甲醇(1ml)中。将反应混合物用氮气(3x)冲洗，然后添加钯(50mg，0.4698mmol)并将反应在室温下在氢气气氛下搅拌1小时，然后通过硅藻土过滤。将滤液蒸发至干燥并将粗产物通过制备型hplc纯化。回收呈白色固体的产物。(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-12-[6-(2-羟基乙酰基)-6-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基]-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(6.1mg，42％)esi-ms m/z计算值675.3091，实验值676.3(m+1)
+
；保留时间：1.66分钟(lc方法a)。
[2758]
实例117：化合物145的制备
[2759]
步骤3：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-12-[6-(2-羟基乙酰基)-6-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基]-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(化合物145)
[2760][2761]
在反应小瓶中，将2-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]-6-氮杂螺[3.5]壬烷-6-羧酸叔丁酯(非对映异构体2，18.8mg，0.02593mmol)溶解于(1:1)三氟乙酸(250μl，3.245mmol)/二氯甲烷(250μl)中并在室温下搅拌1小时。将反应混合物蒸发至干燥。将物质从乙酸乙酯/己烷中沉淀出来，得到白色固体。物质无需进一步纯化即可用于下一反应。在反应小瓶中，将(11r)-12-(6-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮
(三氟乙酸盐)(26.9mg，142％)与二异丙基乙胺(29.8μl，0.1711mmol)一起溶解于二氯甲烷(500μl)中并冷却至-10℃。向反应混合物中添加2-苄氧基乙酰氯(13.5μl，0.08555mmol)并使反应温热至室温。在室温下搅拌x小时之后，将反应在乙酸乙酯与1n hcl之间分配。将有机层用饱和nacl溶液洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并蒸发至干燥。将粗物质与几滴水一起溶解于甲醇(1ml)中。将反应混合物用氮气(3x)冲洗，然后添加钯(50mg，0.4698mmol)并将反应在室温下在氢气气氛下搅拌1小时，然后通过硅藻土过滤。将滤液蒸发至干燥并将粗产物通过制备型hplc纯化。回收呈白色固体的产物。(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-12-[6-(2-羟基乙酰基)-6-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基]-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(8.6mg，49％)esi-ms m/z计算值675.3091，实验值676.3(m+1)
+
；保留时间：1.79分钟(lc方法a)。
[2762]
实例118：化合物146的制备
[2763]
步骤1：3-[[4-[(2r)-2-[(1-叔丁氧基羰基-1-氮杂螺[3.3]庚烷-6-基)氨基]-4,4-二甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸
[2764][2765]
在反应小瓶中，将3-[[4-[(2r)-2-氨基-4,4-二甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(800mg，1.457mmol)与6-氧代-1-氮杂螺[3.3]庚烷-1-羧酸叔丁酯(308mg，1.458mmol)在二氯甲烷(5.2ml)中混合。将反应混合物在室温下搅拌15分钟，然后添加三乙酰氧基硼氢化钠(618mg，2.916mmol)。将反应在室温下搅拌1.5小时，然后在乙酸乙酯与1n hcl之间分配。将反应混合物用乙酸乙酯(3x)萃取，并且将有机层用饱和nacl溶液洗涤。将有机层分离，经无水硫酸钠干燥，过滤并蒸发至干燥。将粗物质通过反相色谱法使用20-100％水/acn梯度纯化。通过添加三乙胺将产物级分呈碱性，然后蒸发至干燥。将残余物在乙酸乙酯与1nhcl之间分配。将水层用乙酸乙酯萃取。将组合的有机层用饱和nacl溶液洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并蒸发至干燥，得到呈白色固体的两个产物：3-[[4-[(2r)-2-[(1-叔丁氧基羰基-1-氮杂螺[3.3]庚烷-6-基)氨基]-4,4-二甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(108mg，10％)1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ9.11(s,1h),8.47(t,j＝1.8hz,1h),8.14(t,j＝7.8hz,2h),7.69(t,j＝7.8hz,1h),7.26(t,j＝7.6hz,1h),7.13(d,j＝7.6hz,2h),6.32(s,1h),5.02(s,1h),4.42-4.18(m,1h),4.23-4.03(m,1h),3.87-3.77(m,1h),3.71-3.60(m,3h),2.36-2.18(m,5h),2.19-2.08(m,3h),1.40(s,7h),1.35(s,9h),0.93(s,9h)。esi-ms m/z计算值707.33527，实验值708.6(m+1)
+
；保留时间：1.93分钟(lc方法a)；以及3-[[4-[(2r)-2-[[3-[2-(叔丁氧基羰基氨基)乙基]环丁基]氨基]-4,4-二甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)
嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(315.4mg，28％)1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.52-8.43(m,1h),8.14(ddd,j＝9.2,5.2,1.6hz,2h),7.70(t,j＝7.8hz,1h),7.27(t,j＝7.6hz,1h),7.13(d,j＝7.6hz,2h),6.78(q,j＝5.3hz,1h),6.3 5(s,1h),4.31(d,j＝12.6hz,1h),4.21-4.07(m,1h),4.03(q,j＝7.1hz,1h),3.95-3.80(m,1h),3.75-3.55(m,1h),2.96-2.77(m,2h),2.41-2.29(m,1h),2.27-2.17(m,1h),2.17-2.07(m,1h),2.00(d,j＝12.4hz,6h),1.73-1.60(m,1h),1.63-1.51(m,2h),1.50-1.39(m,2h),1.36(s,9h),0.93(s,9h)。esi-ms m/z计算值709.3509，实验值610.5(m+1-boc)
+
；保留时间：1.4分钟(lc方法a)。
[2766]
步骤2：(11r)-12-(1-氮杂螺[3.3]庚烷-6-基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮
[2767][2768]
在反应小瓶中，将3-[[4-[(2r)-2-[(1-叔丁氧基羰基-1-氮杂螺[3.3]庚烷-6-基)氨基]-4,4-二甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(106mg，0.1396mmol)与4-甲基吗啉(31μl，0.2820mmol)一起溶解于dmf(4.9ml)中并冷却至0℃。向反应中添加2-氯-4,6-二甲氧基-1,3,5-三嗪(24.6mg，0.1401mmol)并使反应在0℃下搅拌1.5小时。然后添加另外的4-甲基吗啉(15.5μl，0.1410mmol)。使反应温热至室温并在该温度下搅拌过夜。将反应浓缩至体积的三分之一，然后在乙酸乙酯与0.5nhcl溶液之间分配。将有机物分离，经硫酸钠干燥并蒸发至干燥。将粗物质通过硅胶柱色谱法使用20-100％乙酸乙酯/己烷梯度纯化。分离出呈白色固体的产物。(11r)-12-(1-氮杂螺[3.3]庚烷-6-基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(45.5mg，55％)。1h nmr(400mhz，氯仿-d)δ8.67(t,j＝1.9hz,1h),7.94(d,j＝7.8hz,1h),7.85(d,j＝7.6hz,1h),7.59(t,j＝7.8hz,1h),7.21(t,j＝7.6hz,1h),7.06(d,j＝7.6hz,2h),6.18(s,1h),5.42(dd,j＝10.6,4.2hz,1h),4.18-4.01(m,1h),3.91-3.77(m,4h),3.03(s,2h),2.84-2.78(m,1h),2.47(dt,j＝10.4,6.4hz,1h),2.41-2.31(m,3h),1.98(s,6h),1.71(dd,j＝15.1,8.3hz,2h),1.31-1.20(m,1h),0.58(s,9h)。esi-ms m/z计算值589.2723，实验值590.3(m+1)
+
；保留时间：2.04分钟(lc方法a)。
[2769]
步骤3：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-12-[1-(2-羟基乙酰基)-1-氮杂螺[3.3]庚烷-6-基]-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(化合物146)
[2770][2771]
在反应小瓶中，将6-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基苯基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]-1-氮杂螺[3.3]庚烷-1-羧酸叔丁酯(43mg，0.07291mmol)与二异丙基乙胺(37.5μl，0.2153mmol)在二氯甲烷(900μl)中混合。将反应冷却至-10℃，然后添加2-苄氧基乙酰氯(11.3μl，0.07161mmol)。使反应温热至0℃。在0℃下搅拌30分钟之后，将反应混合物蒸发至干燥，然后用乙酸乙酯稀释，然后用1n hcl(3x)和饱和nacl溶液洗涤。将有机层分离，经硫酸钠干燥，过滤并蒸发至干燥。将粗物质在不进行进一步纯化的情况下用于下一步骤。在反应小瓶中，将(11r)-12-[1-(2-苄氧基乙酰基)-1-氮杂螺[3.3]庚烷-6-基]-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(49.3mg，92％)与1滴水一起溶解于甲醇(1.5ml)中。将反应混合物用氮气冲洗，然后添加钯(10％w/w的60mg，0.05638mmol)。将反应在氢气气氛下搅拌1小时。将反应通过硅藻土过滤并蒸发至干燥。将粗物质通过硅胶柱色谱法使用0-10％ meoh/dcm梯度纯化。将分离的产物通过制备型hplc进一步纯化，得到呈类白色固体的产物。(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-12-[1-(2-羟基乙酰基)-1-氮杂螺[3.3]庚烷-6-基]-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(13.1mg，25％)。1h nmr(400mhz，甲醇-d4)δ8.63(d,j＝37.3hz,1h),8.03(dt,j＝7.6,1.5hz,1h),7.71(dt,j＝19.2,7.5hz,2h),7.27(t,j＝7.6hz,1h),7.13(d,j＝7.7hz,2h),6.26(d,j＝12.6hz,1h),4.60-4.43(m,2h),4.11(t,j＝7.6hz,1h),3.99(s,2h),3.92-3.84(m,2h),3.83-3.74(m,1h),2.67-2.44(m,4h),2.20(s,2h),1.55(d,j＝15.1hz,2h),1.37(s,2h),1.29(s,3h),0.94-0.79(m,3h),0.60(d,j＝3.2hz,9h)。esi-ms m/z计算值647.2778，实验值648.3(m+1)
+
(lc方法a)。
[2772]
实例119：化合物147、化合物148和化合物149的制备
[2773]
步骤1：(11r)-12-(2-环丙基环丁基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮，非对映异构体1(化合物147)、(11r)-12-(2-环丙基环丁基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮，非对映异构体2(化合物148)以及(11r)-12-(2-环丙基环丁基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮，非对映异构体3和4的混合物(化合物149)
[2774][2775]
将3-[[4-[(2r)-2-氨基-4,4-二甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(70mg，0.1275mmol)与2-环丙基环丁酮(18mg，0.1634mmol)在dcm(0.5ml)中合并，并在室温下搅拌15分钟。添加三乙酰氧基硼氢化钠并将反应再搅拌20分钟。添加另外的三乙酰氧基硼氢化钠(80mg，0.3775mmol)并将反应在室温下再搅拌4小时。然后将反应混合物在1m hcl与乙酸乙酯之间分配。将层分离并且将水溶液用乙酸乙酯再萃取3次。将合并的有机物用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。将所得粗物质溶解于1:1dmso/甲醇中，过滤并通过反相hplc(1-70％ acn/水，hcl改性剂，15分钟运行)纯化，得到呈白色固体的还原胺化产物。
[2776]
将上述产物与在cdmt(25mg，0.1424mmol)在dmf(10ml)中合并，并通过注射器添加n-甲基吗啉(45μl，0.4093mmol)。在室温下搅拌指定时间之后，将反应混合物通过旋转蒸发浓缩至小于1ml的体积，过滤并通过反相hplc(1-99％ acn/水，hcl改性剂，30分钟运行)纯化，得到4个立体异构体产物，其作为单一立体异构体分离，并且其中两个作为非对映异构体对一起分离：非对映异构体1，(11r)-12-(2-环丙基环丁基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(1.5mg，2％)，esi-ms m/z计算值588.27704，实验值589.5(m+1)
+
；保留时间：2.06分钟；lc方法a；以及非对映异构体2，(11r)-12-(2-环丙基环丁基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(1.5mg，2％)，esi-ms m/z计算值588.27704，实验值589.5(m+1)
+
；保留时间：2.1分钟；lc方法a；以及非对映异构体3和4的混合物，(11r)-12-(2-环丙基环丁基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮，esi-ms m/z计算值588.27704，实验值589.5(m+1)
+
；保留时间：2.13分钟；lc方法a。
[2777]
实例120：化合物150和化合物151的制备
[2778]
步骤1：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-12-(3-甲氧基环丁基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮，非对映异构体1(化合物150)，以及(11r)-6-(2,6-二甲基苯
基)-11-(2,2-二甲基丙基)-12-(3-甲氧基环丁基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮，非对映异构体2(化合物151)
[2779][2780]
将3-[[4-[(2r)-2-氨基-4,4-二甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(75mg，0.1207mmol)和3-甲氧基环丁酮(18mg，0.1798mmol)合并，并在二氯甲烷(3ml)中搅拌5分钟成为悬浮液。添加一部分三乙酰氧基硼氢化钠(钠盐)(77mg，0.3633mmol)。获得半透明-澄清反应混合物。在室温下搅拌1小时之后，添加另一部分三乙酰氧基硼氢化钠(钠盐)(40mg，0.1887mmol)。使反应混合物在室温下搅拌。然后将反应混合物用etoac(10ml)稀释并用1m hcl水溶液(1
×
10ml)和盐水(1
×
10ml)洗涤。有机层经硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。将hatu(92mg，0.2420mmol)溶解于dmf(6ml)中，并且然后添加diea(100μl，0.5741mmol)。将该澄清黄色溶液添加到上文获得的粗中间体中。使反应混合物在室温下搅拌过夜。将粗物质通过反相hplc使用由phenomenex销售的luna c
18
(2)柱(50
×
21.2mm，5μm粒径)(pn：00b-4252-p0-ax)和15.0分钟内从10-99％流动相b运行的双梯度纯化。流动相a＝水(5mm hcl酸性改性剂)。流动相b＝乙腈。流速＝35毫升/分钟，进样体积＝950μl，并且柱温＝25℃。使用254nm处的uv迹线收集级分，并分离出两个异构体：获得非对映异构体1，(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-12-(3-甲氧基环丁基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(5.9mg，8％)。esi-ms m/z计算值578.2563，实验值579.3(m+1)
+
；保留时间：1.84分钟(lc方法a)；并且获得非对映异构体2，(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-12-(3-甲氧基环丁基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(4.8mg，7％)。esi-ms m/z计算值578.2563，实验值579.3(m+1)
+
；保留时间：1.85分钟。(lc方法a)。
[2781]
实例121：化合物152和化合物153的制备
[2782]
步骤1：3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(2r)-2-[[3-(2-甲氧基-2-氧代-乙基)环丁基]氨基]-4,4-二甲基-戊氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸
[2783][2784]
将3-[[4-[(2r)-2-氨基-4,4-二甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(274.54mg，0.5mmol)溶解于dcm(4ml)中并添加2-(3-氧代环丁基)乙酸甲酯(142.15mg，1.0000mmol)。将混合物搅拌0.5小时，然后添加nabh(oac)3(317.91mg，1.5000mmol)，并且将反应搅拌3天。将混合物通过硅胶色谱法(24g，洗脱剂dcm-meoh 100:0至92:8梯度)直接纯化，得到3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(2r)-2-[[3-(2-甲氧基-2-氧代-乙基)环丁基]氨基]-4,4-二甲基-戊氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(165mg，51％)esi-ms m/z计算值638.2774，实验值639.6(m+h)+；保留时间：2.62分钟(lc方法t)。
[2785]
步骤2：2-[3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]环丁基]乙酸甲酯
[2786][2787]
将3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(2r)-2-[[3-(2-甲氧基-2-氧代-乙基)环丁基]氨基]-4,4-二甲基-戊氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(150mg，0.2348mmol)和comu(121mg，0.2825mmol)溶解于无水dmf(5ml)中，然后添加dipea(148.40mg，0.2ml，1.1482mmol)，并将溶液搅拌18小时。将混合物用etoac(25ml)稀释，用hcl(1m，2
×
5ml)萃取，然后用饱和碳酸氢钠水溶液(5ml)和盐水(5ml)萃取。将有机相经硫酸钠干燥，过滤，浓缩并通过硅胶色谱法，洗脱剂dcm-meoh 100:0至90:10梯度纯化，得到呈白色固体的2-[3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]环丁基]乙酸甲酯(121mg，79％)esi-ms m/z计算值620.2669，实验值621.7(m+h)+；保留时间：3.52分钟，lc方法t。
[2788]
步骤3：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-12-[3-(2-羟基-2-甲基-丙基)环丁基]-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]
十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮
[2789][2790]
向2-[3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]环丁基]乙酸甲酯(50mg，0.0805mmol)于无水thf(2ml)中的搅拌的溶液中添加于thf:甲苯(1:3)中的memgbr(1.4m的0.5750ml，0.8050mmol)，并将所得溶液搅拌1小时。将混合物用饱和氯化铵水溶液(1ml)淬灭，用etoac(2
×
3ml)萃取，经硫酸钠干燥，浓缩并通过制备型hplc纯化，得到(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-12-[3-(2-羟基-2-甲基-丙基)环丁基]-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(21.8mg，42％)esi-ms m/z计算值620.3032，实验值621.5(m+h)+；保留时间：2.57分钟，lc方法w。
[2791]
步骤4：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-12-[3-(2-羟基-2-甲基丙基)环丁基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮，非对映异构体1(化合物152)，以及(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-12-[3-(2-羟基-2-甲基丙基)环丁基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮，非对映异构体2(化合物153)
[2792][2793]
使用phenomenex lux-4(250
×
10mm)，40℃下的5um柱对(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-12-[3-(2-羟基-2-甲基丙基)环丁基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮(22mg，0.03544mmol)(1:1异构混合物)进行sfc分离；流动相：32％ meoh(无改性剂)，68％ co2；流速：10毫升/分钟；浓度：meoh中的24mg/ml(无改性剂)；进样体积：70μl；压力：148bar；波长：210nm。对于每种化合物，将溶剂蒸发。使用dcm/己烷将残余物转移到小瓶中。
蒸发得到呈类白色固体的分离的异构体：非对映异构体1，sfc峰1：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-12-[3-(2-羟基-2-甲基丙基)环丁基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮(5.4mg，49％)。esi-ms m/z计算值620.3032，实验值621.28(m+1)
+
；保留时间：1.83分钟(lc方法a)；以及非对映异构体2，sfc峰2：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-12-[3-(2-羟基-2-甲基丙基)环丁基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮(6.7mg，61％)。esi-ms m/z计算值620.3032，实验值621.28(m+1)
+
；保留时间：1.82分钟(lc方法a)。
[2794]
实例122：化合物154和化合物155的制备
[2795]
步骤1：3-[[4-[(2r)-2-[[3-[2-(叔丁氧基羰基氨基)乙基]环丁基]氨基]-4,4-二甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸
[2796][2797]
在反应小瓶中，将3-[[4-[(2r)-2-氨基-4,4-二甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(800mg，1.457mmol)与6-氧代-1-氮杂螺[3.3]庚烷-1-羧酸叔丁酯(308mg，1.458mmol)在二氯甲烷(5.2ml)中混合。将反应混合物在室温下搅拌15分钟，然后添加三乙酰氧基硼氢化钠(618mg，2.916mmol)。将反应在室温下搅拌1.5小时，然后在乙酸乙酯与1n hcl之间分配。将反应混合物用乙酸乙酯(3x)萃取，并且将有机层用饱和nacl溶液洗涤。将有机层分离，经无水硫酸钠干燥，过滤并蒸发至干燥。将粗物质通过反相色谱法使用20-100％水/acn梯度纯化。通过添加三乙胺将产物级分呈碱性，然后蒸发至干燥。将残余物在乙酸乙酯与1nhcl之间分配。将水层用乙酸乙酯萃取。将合并的有机层用饱和nacl溶液洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并蒸发至干燥以提供呈白色固体的两个产物：3-[[4-[(2r)-2-[(1-叔丁氧基羰基-1-氮杂螺[3.3]庚烷-6-基)氨基]-4,4-二甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(108mg，10％)1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ9.11(s,1h),8.47(t,j＝1.8hz,1h),8.14(t,j＝7.8hz,2h),7.69(t,j＝7.8hz,1h),7.26(t,j＝7.6hz,1h),7.13(d,j＝7.6hz,2h),6.32(s,1h),5.02(s,1h),4.42-4.18(m,1h),4.23-4.03(m,1h),3.87-3.77(m,1h),3.71-3.60(m,3h),2.36-2.18(m,5h),2.19-2.08(m,3h),1.40(s,7h),1.35(s,9h),0.93(s,9h)。esi-ms m/z计算值707.33527，实验值708.6(m+1)
+
；保留时间：1.93分钟(lc方法a)；以及3-[[4-[(2r)-2-[[3-[2-(叔丁氧基羰基氨基)乙基]环丁基]氨基]-4,4-二甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(315.4mg，28％)，1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.52-8.43(m,1h),8.14(ddd,j＝9.2,5.2,1.6hz,2h),7.70(t,j＝7.8hz,1h),7.27(t,j＝7.6hz,1h),7.13(d,j＝7.6hz,2h),6.78(q,j＝5.3hz,1h),6.3 5(s,1h),4.31(d,j＝12.6hz,1h),
4.21-4.07(m,1h),4.03(q,j＝7.1hz,1h),3.95-3.80(m,1h),3.75-3.55(m,1h),2.96-2.77(m,2h),2.41-2.29(m,1h),2.27-2.17(m,1h),2.17-2.07(m,1h),2.00(d,j＝12.4hz,6h),1.73-1.60(m,1h),1.63-1.51(m,2h),1.50-1.39(m,2h),1.36(s,9h),0.93(s,9h)。esi-ms m/z计算值709.3509，实验值710.5(m+1)
+
；保留时间：1.4分钟(lc方法a)。
[2798]
步骤2：(11r)-12-[3-(2-氨基乙基)环丁基]-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮
[2799][2800]
在反应小瓶中，将3-[[4-[(2r)-2-[[3-[2-(叔丁氧基羰基氨基)乙基]环丁基]氨基]-4,4-二甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(298.6mg，0.3841mmol)与4-甲基吗啉(85.3μl，0.7759mmol)一起溶解于二甲基甲酰胺(13.5ml)中并冷却至0℃。向反应中添加2-氯-4,6-二甲氧基-1,3,5-三嗪(67.7mg，0.3856mmol)并使反应在0℃下搅拌1.5小时。然后添加另外的4-甲基吗啉(42.65μl，0.3879mmol)。使反应温热至室温并在该温度下搅拌过夜。将反应浓缩至体积的三分之一，然后在乙酸乙酯与0.5n hcl溶液之间分配。将有机物分离，经硫酸钠干燥并蒸发至干燥。将粗物质通过硅胶柱色谱法使用20-80％乙酸乙酯/己烷梯度纯化。分离出呈白色固体的中间体，n-[2-[3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]环丁基]乙基]氨基甲酸叔丁酯(162.8mg，61％)，随后将其与hcl(4m的118μl，0.4720mmol)(二噁烷中的4m)一起溶解于二氯甲烷(1ml)中并在室温下搅拌5小时。将反应在真空下蒸发至干燥，得到(11r)-12-[3-(2-氨基乙基)环丁基]-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)(131.1mg，54％)esi-ms m/z计算值591.2879，实验值592.3(m+1)
+
；保留时间：0.51分钟(lc方法d)。
[2801]
步骤3：n-(2-{3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-12-基]环丁基}乙基)乙酰胺，非对映异构体1(化合物154)，以及n-(2-{3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-12-基]环丁基}乙基)乙酰胺，非对映异构体2(化合物155)
[2802][2803]
在反应小瓶中，将(11r)-12-[3-(2-氨基乙基)环丁基]-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)(80mg，0.1133mmol)与二异丙基乙胺(65.2μl，0.3743mmol)在二氯甲烷(0.5ml)中混合。向反应中添加乙酰氯(13.3μl，0.1871mmol)，并将反应在室温下搅拌12小时。将反应混合物蒸发至干燥，然后用乙酸乙酯稀释，然后用1n hcl(3x)和饱和nacl溶液洗涤。将有机层分离，经无水硫酸钠干燥，过滤并蒸发至干燥。将粗物质通过反相hplc使用带有hcl改性剂的20-80％ acn/水梯度纯化，得到两个异构体：非对映异构体1，n-(2-{3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-12-基]环丁基}乙基)乙酰胺(49.4mg，69％)1h nmr(400mhz，甲醇-d4)δ8.56(t,j＝1.8hz,1h),8.02(dt,j＝7.6,1.5hz,1h),7.80-7.58(m,2h),7.27(t,j＝7.7hz,1h),7.14(d,j＝7.6hz,2h),6.27(s,1h),5.27(dd,j＝10.7,4.4hz,1h),4.41-4.05(m,2h),3.83(dq,j＝12.2,5.0hz,1h),3.29-3.23(m,1h),3.22-3.10(m,3h),2.58-2.33(m,1h),2.27-1.99(m,7h),1.96(s,4h),1.79(q,j＝7.5hz,2h),1.65(dd,j＝15.3,8.0hz,1h),1.52(d,j＝15.0hz,1h),0.58(s,9h)。esi-ms m/z计算值633.29846，实验值634.2(m+1)
+
；保留时间：1.62分钟(lc方法a)；以及非对映异构体2，n-(2-{3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-12-基]环丁基}乙基)乙酰胺(23mg，32％)1h nmr(400mhz，甲醇-d4)δ8.56(d,j＝1.8hz,1h),8.02(dt,j＝7.4,1.7hz,1h),7.72(dd,j＝6.9,2.5hz,1h),7.71(s,0h),7.69(d,j＝7.5hz,1h),7.27(t,j＝7.6hz,1h),7.14(d,j＝7.7hz,2h),6.27(s,1h),5.29(dd,j＝10.7,4.4hz,1h),4.25(t,j＝11.2hz,1h),3.93(p,j＝8.8hz,1h),3.81(ddd,j＝11.8,7.8,4.3hz,1h),3.17(t,j＝7.1hz,2h),2.79(dq,j＝34.8,9.6hz,2h),2.49-2.30(m,2h),2.18-2.02(m,j＝8.0,7.4hz,2h),1.95(s,3h),1.94(s,1h),1.80(d,j＝7.2hz,1h),1.79-1.67(m,2h),1.51(d,j＝15.1hz,1h),0.59(s,9h)。esi-ms m/z计算值633.29846，实验值634.2(m+1)
+
；保留时间：1.66分钟(lc方法a)。
[2804]
实例123：化合物156和化合物157的制备
[2805]
步骤1：3-苄氧基-1-甲基-环丁醇
[2806][2807]
将3-苄氧基环丁酮(503mg，2.8545mmol)溶解于二乙醚(1.4ml)中，然后在室温下滴加二乙醚中的甲基溴化镁3m(3m的1.40ml，4.2000mmol)。将反应搅拌一小时，然后冷却至0℃并用氯化铵(5ml)淬灭。将混合物用etoac(5ml)稀释并将层分离。将水层用etoac(2x 5ml)萃取。将合并的有机物经硫酸钠干燥并浓缩。将残余物干燥加载到硅胶上并通过快速柱色谱法使用0-30％ etoac/己烷纯化，得到呈无色油的3-苄氧基-1-甲基-环丁醇(283mg，46％)。1h nmr(250mhz,dmso-d6)δ7.40-7.24(m,5h),4.40-4.29(m,2h),2.33-2.12(m,2h),2.02-1.84(m,2h),1.15(s,3h)。非对映异构体峰：1.28(s,3h)
[2808]
步骤2：[3-甲基-3-(三氟甲氧基)环丁氧基]甲苯
[2809][2810]
将3-苄氧基-1-甲基-环丁醇(9.23g，48.009mmol)溶解于乙酸乙酯(325ml)中，然后添加三氟甲磺酸银(37.05g，144.20mmol)、selectfluor(25.61g，72.292mmol)和氟化钾(11.02g，189.68mmol)。将容器用氮气冲洗并添加2-氟吡啶(14.100g，12.5ml，145.23mmol)和三氟甲基三甲基硅烷(20.683g，21.5ml，145.46mmol)。使混合物在氮气气氛下在室温下搅拌3天。将混合物通过硅藻土垫过滤，并且干燥加载到硅胶上并通过快速柱色谱法使用0-30％乙酸乙酯/己烷纯化。收集适当的级分，得到呈无色油的[3-甲基-3-(三氟甲氧基)环丁氧基]甲苯(2.58g，19％)。1h nmr(250mhz,cdcl3)δ7.47-7.16(m,5h),4.43(s,2h),3.77(p,j＝6.9hz,1h),2.49(d,j＝6.3hz,4h),1.50(s,3h)。注意：5.30处的峰是dcm
[2811]
步骤3：3-甲基-3-(三氟甲氧基)环丁醇
[2812][2813]
将[3-甲基-3-(三氟甲氧基)环丁氧基]甲苯(635mg，2.4399mmol)溶解于乙酸甲酯(15.875ml)中并添加pd/c(683mg，10％w/w，0.6418mmol)。将反应置于氢气气氛(气球)下并搅拌或48小时。添加硅藻土并将固体滤出并用乙醚冲洗。将滤液浓缩，得到呈无色油的3-甲基-3-(三氟甲氧基)环丁醇(364.5mg，79％)。1h nmr(250mhz,cdcl3)δ4.04(p,j＝7.0hz,1h),2.67-2.49(m,2h),2.49-2.32(m,2h),1.87(bs,1h),1.55-1.42(m,3h)。
[2814]
步骤4：(2r)-4,4-二甲基-2-[[3-甲基-3-(三氟甲氧基)环丁基]氨基]戊烷-1-醇
[2815][2816]
在0℃下向3-甲基-3-(三氟甲氧基)环丁醇(432mg，2.5392mmol)和吡啶(606.36mg，0.62ml，7.6657mmol)于无水dcm(4ml)中的溶液中添加三氟甲基磺酰基三氟甲磺酸酯(1.0804g，0.73ml，3.8293mmol)。将反应在室温下搅拌2小时。tlc指示起始材料消失。将反应混合物用己烷(40ml)稀释，并用1n hcl(20ml)、饱和碳酸氢钠(20ml)和盐水(20ml)洗涤。将溶液经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩，得到三氟甲磺酸盐，其不经纯化用于下一步骤反应。将(2r)-2-氨基-4,4-二甲基-戊烷-1-醇(盐酸盐)(518mg，3.0893mmol)悬浮于dcm(30ml)和2n碳酸钠溶液(30ml)中。将两个层分离，并将水层用dcm(2
×
30ml)萃取。将有机层合并，并且经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残余物与粗三氟甲磺酸盐合并，并溶解于acn(10ml)中。向反应混合物中添加碳酸钾(1.77g，12.807mmol)，将其加热至60℃并搅拌过夜。将溶剂在真空下去除之前，将固体滤出。将残余物通过硅胶色谱法使用0至10％甲醇/dcm纯化，得到呈黄色油的(2r)-4,4-二甲基-2-[[3-甲基-3-(三氟甲氧基)环丁基]氨基]戊烷-1-醇(401mg，56％)。esi-ms m/z计算值283.1759，实验值284.2(m+1)
+
；保留时间：3.67分钟，3.49分钟(lc方法s)，非对映异构混合物。
[2817]
步骤5：3-[[4-[(2r)-4,4-二甲基-2-[[3-甲基-3-(三氟甲氧基)环丁基]氨基]戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸
[2818][2819]
在环境温度下向(2r)-4,4-二甲基-2-[[3-甲基-3-(三氟甲氧基)环丁基]氨基]戊烷-1-醇(401mg，1.415mmol)和3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(685mg，1.6393mmol)于无水thf(10ml)中的溶液中添加叔丁醇钠(689mg，7.1694mmol)。将反应混合物在室温下搅拌2小时，然后将其用1n hcl(水溶液)(25ml)淬灭并用氯仿(25ml)稀释。将两个层分离，并将水层用氯仿(2
×
25ml)萃取。将合并的有机层用盐水(25ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法使用0至10％甲醇/dcm纯化，得到呈类白色固体的3-[[4-[(2r)-4,4-二甲基-2-[[3-甲基-3-(三氟甲氧基)环丁基]氨基]戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(897mg，72％)。esi-ms m/z计算值664.2542，实验值665.2(m+1)
+
；保留时间：4.71分钟，lc方法s。
[2820]
步骤6：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-12-[3-甲基-3-(三氟甲氧基)环丁基]-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十
九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮，非对映异构体1(化合物156)，以及(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-12-[3-甲基-3-(三氟甲氧基)环丁基]-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮，非对映异构体2(化合物157)
[2821][2822]
向3-[[4-[(2r)-4,4-二甲基-2-[[3-甲基-3-(三氟甲氧基)环丁基]氨基]戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(897mg，1.0795mmol)和diea(1.1130g，1.5ml，8.6117mmol)于无水dmf(15ml)中的溶液中滴加hatu(839mg,2.2066mmol)于无水dmf(15ml)中的溶液。将反应混合物在室温下搅拌过夜。将反应用水(20ml)淬灭，并用乙酸乙酯(3
×
30ml)萃取。将合并的有机层用盐水(3
×
30ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法使用0-30％丙酮/己烷纯化，得到两个非对映异构体的粗混合物(约0.34g)。将粗产物通过反相hplc使用0至100％乙腈/水(用0.1％ tfa缓冲)进一步纯化，得到：呈白色粉末的主要异构体，非对映异构体1(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-12-[3-甲基-3-(三氟甲氧基)环丁基]-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(94.4mg，13％)1h nmr(500mhz,dmso-d 6)δ8.49(s,1h),7.94(t,j＝3.6hz,1h),7.70(d,j＝4.8hz,2h),7.26(t,j＝7.6hz,1h),7.13(d,j＝7.6hz,2h),6.42(s,1h),5.11(dd,j＝10.7,4.5hz,1h),4.35(t,j＝11.2hz,1h),4.26(p,j＝8.9hz,1h),3.87(m,1h,与水峰重叠),3.26(dd,j＝13.8,8.6hz,1h),3.18(dd,j＝13.9,8.5hz,1h),2.69(dd,j＝13.7,9.6hz,2h),2.23
–
1.79(m,6h),1.73(s,3h),1.54(dd,j＝15.3,8.3hz,1h),1.41(d,j＝15.0hz,1h),0.49(s,9h)esi-ms m/z计算值646.2437，实验值647.6(m+1)
+
；保留时间：3.26分钟，lc方法w；以及呈类白色粉末的次要异构体，非对映异构体2(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-12-[3-甲基-3-(三氟甲氧基)环丁基]-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(25.7mg，3％)。将次要异构体通过sfc使用以下条件再次纯化：使用由chiral技术公司(chiral technologies)销售的od-h柱(250
×
21.2mm，5μm粒径)的正相sfc-ms方法(pn：14445)和在14.5分钟内从5-25％流动相b运行的双梯度。流动相a＝co2。流动相b＝meoh(20mm nh3)。流速＝50-80％ meoh[20mm nh3]40毫升/分钟。进样体积＝可变，并且柱温＝40℃，得到纯非对映异构体2(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-12-[3-甲基-3-(三氟甲氧基)环丁基]-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(14.8mg，57％)1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ12.96(s,1h),8.48(s,1h),7.92(s,1h),7.67(s,2h),7.24(s,1h),7.10
(s,2h),6.38(s,1h),5.08(s,1h),4.33(s,1h),3.83(s,1h),3.77(d,j＝16.7hz,1h),3.64(s,1h),3.53(s,1h),2.37(s,2h),2.02(s,6h),1.60(d,j＝8.7hz,4h),1.36(s,1h),0.49(s,9h)。esi-ms m/z计算值646.24365，实验值647.0(m+1)
+
；保留时间：2.18分钟(lc方法a)。
[2823]
实例124：化合物158的制备
[2824]
步骤1：3-[[4-[(2r)-2-[[3,3-双(异丙氧基羰基)环丁基]氨基]-4,4-二甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸
[2825][2826]
在氮气下，向100ml烧瓶中装入3-[[4-[(2r)-2-氨基-4,4-二甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(1.824g，3.322mmol)、无水dcm(5ml)和diea(0.63ml，3.617mmol)。搅拌混合物，直到几乎完全溶解为止。添加乙酸(0.21ml，3.693mmol)，然后迅速添加3-氧代环丁烷-1,1-二羧酸二异丙酯(0.68ml，3.368mmol)。将溶液在室温下搅拌20分钟，添加三乙酰氧基硼氢化钠(1.186g，5.596mmol)，并将悬浮液在室温下搅拌3小时。添加更多3-氧代环丁烷-1,1-二羧酸二异丙酯(0.68ml，3.368mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(440mg，2.076mmol)并且将反应再搅拌2小时。将混合物在-20℃的冷冻箱中储存过夜。使反应温热至室温，在冰中冷却，并且通过缓慢添加1n hcl水溶液(50ml)淬灭。添加etoac(30ml)和盐水(40ml)并且将两个相分离。将水相用etoac(2
×
20ml)进一步萃取。将组合的萃取物经硫酸钠干燥并且将溶剂蒸发。将残余物用乙醚(100ml)稀释并且将所得悬浮液搅拌10分钟。将产物过滤，用乙醚洗涤并干燥，得到呈白色固体的3-[[4-[(2r)-2-[[3,3-双(异丙氧基羰基)环丁基]氨基]-4,4-二甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(1.3g，50％)。esi-ms m/z计算值738.32983，实验值739.61(m+1)
+
；保留时间：1.5分钟(lc方法a)。
[2827]
步骤2：1,1-双(丙烷-2-基)3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-12-基]环丁烷-1,1-二羧酸酯
[2828][2829]
在氮气下向250ml圆底烧瓶中装入comu(1.60g，3.736mmol)、无水dmf(60ml)和diea(1.5ml，8.612mmol)。通过注射器在5分钟的时间段内滴加3-[[4-[(2r)-2-[[3,3-双(异丙氧基羰基)环丁基]氨基]-4,4-二甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(1.3g，1.677mmol)(含有物质的大约30％的混合物)于无水dmf(30ml)中的溶液。将混合物在室温下搅拌21小时。将反应浓缩至三分之一并用乙酸乙酯(50ml)、1n hcl水溶液(40ml)和盐水(20ml)稀释。将两个相分离，并将水相用etoac(2
×
15ml)进一步萃取。将组合的萃取物经硫酸钠干燥并且将溶剂蒸发。将残余物溶解于dcm中并通过硅胶快速色谱法(80g柱)使用乙酸乙酯/己烷的梯度(30分钟内20至100％)纯化。产物洗脱出约50-55％乙酸乙酯。在蒸发之后，将残余物在etoac/己烷中研磨。溶剂的蒸发得到呈白色固体的1,1-双(丙烷-2-基)3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-12-基]环丁烷-1,1-二羧酸酯(244mg，20％)。esi-ms m/z计算值720.3193，实验值721.5(m+1)
+
；保留时间：2.17分钟(lc方法a)。
[2830]
步骤3：(11r)-12-[3,3-双(羟甲基)环丁基]-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮(化合物158)
[2831][2832]
向4ml小瓶中装入1,1-双(丙烷-2-基)3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-12-基]环丁烷-1,1-二羧酸酯(28mg，0.03884mmol)、无水thf(0.5ml)。将混合液在冰浴中冷却。滴加libh4(2m的0.29ml，0.5800mmol)(thf中的2m)。将混合物在冰浴中搅拌5分钟，然后将其在室温下搅拌2.5小时(6％转化)。将反应在70℃下搅拌30分钟(完全转化)。在冷却之后，将反应通过缓慢添加乙酸(100μl)和甲醇(100μl)淬灭。通过吹入氮气将溶剂部分蒸发。将剩余溶液用dmso(1ml)稀
释。将溶液通过注射器过滤盘微过滤并通过反相制备型hplc(c
18
)使用乙腈/水的梯度(15分钟内1至99％)和hcl作为改性剂纯化。蒸发得到呈白色固体的(11r)-12-[3,3-双(羟甲基)环丁基]-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮(20.3mg，83％)。esi-ms m/z计算值608.26685，实验值609.56(m+1)
+
；保留时间：1.45分钟(lc方法a)。
[2833]
实例125：化合物159的制备
[2834]
步骤1：3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-12-基]-1-(2-羟基丙烷-2-基)环丁烷-1-羧酸丙烷-2-基酯，非对映异构体1和2
[2835][2836]
在氮气下向4ml小瓶中装入1,1-双(丙烷-2-基)3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-12-基]环丁烷-1,1-二羧酸酯(31mg，0.04300mmol)、无水thf(0.6ml)，并且将溶液在冰浴中冷却。滴加溴(甲基)镁(3m的0.08ml，0.2400mmol)(二乙醚中的3m溶液)。将反应混合物在冰浴中搅拌5分钟，然后将其在室温下搅拌2小时。将混合物在冰中冷却并通过添加氯化铵(2ml)的饱和水溶液淬灭。将产物用etoac(3
×
2ml)萃取。将组合的萃取物经硫酸钠干燥并且将溶剂蒸发。将残余物溶解于dmso(1ml)中。将溶液通过注射器过滤盘微过滤并通过反相制备型hplc(c
18
)使用乙腈/水的梯度(15分钟内1至99％)和hcl作为改性剂纯化，这导致两个异构体的基线分离。收集纯级分并将溶剂蒸发，得到两个异构体：更多极性的异构体，非对映异构体1，3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-12-基]-1-(2-羟基丙烷-2-基)环丁烷-1-羧酸丙烷-2-基酯(9mg，60％)。esi-ms m/z计算值692.32434，实验值693.29(m+1)
+
；保留时间：1.86分钟(lc方法a)；以及更少极性，非对映异构体2，3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-12-基]-1-(2-羟基丙烷-2-基)环丁烷-1-羧酸丙烷-2-基酯(7mg，47％)。esi-ms m/z计算值692.32434，实验值693.74(m+1)
+
；保留时间：2.03分钟(lc方法a)。
[2837]
步骤2：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-12-[3-(羟甲基)-3-(2-羟基丙烷-2-基)环丁基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十
基酯(7mg，0.01010mmol)(更少极性的异构体，非对映异构体2)、无水thf(0.2ml)。滴加硼氢化锂(2m的0.09ml，0.1800mmol)(thf中的2m)并将反应在70℃下搅拌40分钟。在冷却之后，将反应通过缓慢添加乙酸(100μl)和甲醇(100μl)淬灭。通过吹入氮气将溶剂部分蒸发。将剩余溶液用dmso(1ml)稀释。将溶液通过注射器过滤盘微过滤并通过反相制备型hplc(c
18
)使用乙腈/水的梯度(15分钟内1至99％)和hcl作为改性剂纯化。蒸发得到呈白色固体的(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-12-[3-(羟甲基)-3-(2-羟基丙烷-2-基)环丁基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮(3.2mg，49％)。esi-ms m/z计算值636.29816，实验值637.58(m+1)
+
；保留时间：1.61分钟(lc方法a)。
[2844]
实例127：化合物161和化合物162的制备
[2845]
步骤1：2-[[(1r)-1-(羟甲基)-3,3-二甲基-丁基]氨基]螺[3.3]庚烷-6-羧酸甲酯
[2846][2847]
在氮气下向配备有磁力搅拌棒的500ml圆底烧瓶中装入2-氧代螺[3.3]庚烷-6-羧酸甲酯(12.18g，72.42mmol)和无水dce(200ml)。开始搅拌并添加(2r)-2-氨基-4,4-二甲基-戊烷-1-醇(盐酸盐)(12.2g，72.76mmol)。向悬浮液中添加diea(15ml，86.12mmol)和乙酸(4.8ml，84.41mmol)并将反应在室温下搅拌5-10分钟(完全溶解)。添加三乙酰氧基硼氢化钠(22.5g，106.2mmol)并在室温下继续搅拌16小时。将反应在冰浴(内部温度2℃)中冷却并通过缓慢添加hcl水溶液(4m的40ml，160.0mmol)淬灭，同时维持温度低于7℃。缓慢添加碳酸氢钠(45g，535.7mmol)于水(100ml)中的悬浮液(起泡)，同时维持温度低于10℃。添加更多水(50ml)和盐水(50ml)并且搅拌混合物，直到气体停止释放为止(最终ph＝7-8)。将两个相分离，并将水相用dcm(3
×
50ml)进一步萃取。将合并的萃取物用盐水(50ml)洗涤，经硫酸钠干燥并通过硅藻土垫过滤。溶剂的蒸发得到呈白色固体的2-[[(1r)-1-(羟甲基)-3,3-二甲基-丁基]氨基]螺[3.3]庚烷-6-羧酸甲酯(21.08g，100％)。esi-ms m/z计算值283.21475，实验值284.12(m+1)
+
；保留时间：0.88分钟；lc方法a。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ7.77(宽s,1h),5.23(宽s,1h),3.57(s,3h),3.54-3.42(m,2h),3.31(dd,j＝11.8,5.9hz,1h),3.09-2.97(m,1h),2.73(br s,1h),2.40-1.95(m,8h),1.39(dd,j＝14.4,7.6hz,1h),1.25(dd,j＝14.4,2.4hz,1h),0.89(s,9h)。
[2848]
步骤2：(2r)-2-[[6-(1-羟基-1-甲基-乙基)螺[3.3]庚烷-2-基]氨基]-4,4-二甲基-戊烷-1-醇
[2849][2850]
在氮气下，向100ml烧瓶中装入2-[[(1r)-1-(羟甲基)-3,3-二甲基-丁基]氨基]螺[3.3]庚烷-6-羧酸甲酯(322mg，1.136mmol)和无水thf(7ml)。将混合物在冰浴中冷却并通过注射器在5分钟的时间段内滴加memgbr(3m的1.7ml，5.100mmol)(乙醚中的3m)(在添加开
始时可见气体释放)。在添加结束时(澄清溶液)，将冰浴去除，并且将反应在室温下搅拌1小时。添加更多的thf(4ml)以易于搅拌。在30分钟之后，添加更多memgbr(3m的0.2ml，0.6000mmol)并且将混合物在室温下搅拌6小时。将反应冷却并用饱和氯化铵(50ml)、盐水(30ml)和etoac(40ml)处理。将两个相分离，并将水相用etoac(3
×
30ml)萃取。将合并的萃取物用盐水(40ml)洗涤，经硫酸钠干燥并将溶剂蒸发，得到呈无色树脂的粗(2r)-2-[[6-(1-羟基-1-甲基-乙基)螺[3.3]庚烷-2-基]氨基]-4,4-二甲基-戊烷-1-醇(288mg，89％)。esi-ms m/z计算值283.25113，实验值284.18(m+1)
+
；保留时间：0.91分钟；lc方法a。
[2851]
步骤3：6-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(2r)-2-[[6-(1-羟基-1-甲基-乙基)螺[3.3]庚烷-2-基]氨基]-4,4-二甲基-戊氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]吡啶-2-羧酸
[2852][2853]
在配备有磁力搅拌棒和氮气管线的100ml圆底烧瓶中，装入6-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]吡啶-2-羧酸(717mg，1.712mmol)、(2r)-2-[[6-(1-羟基-1-甲基-乙基)螺[3.3]庚烷-2-基]氨基]-4,4-二甲基-戊烷-1-醇(501mg，1.768mmol)和无水thf(5ml)(悬浮液)。添加叔丁醇钠(890mg，9.261mmol)(观察到轻微放热)。添加更多thf(4ml)并且将混合物在室温下搅拌1.5小时。添加更多叔丁醇钠(489mg，5.088mmol)并将混合物再搅拌30分钟。然后将反应在乙酸乙酯(50ml)、1m hcl溶液(50ml)和盐水(50ml)之间分配。将水相用etoac(2
×
30ml)进一步萃取。将合并的有机物用盐水(50ml)洗涤，经硫酸钠干燥，经硅藻土垫过滤并蒸发至干燥。将残余物在etoac/乙醚(1:3混合物，大约150ml)中研磨。将悬浮液在室温下搅拌过夜。将固体过滤并干燥，得到呈类白色固体的粗6-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(2r)-2-[[6-(1-羟基-1-甲基-乙基)螺[3.3]庚烷-2-基]氨基]-4,4-二甲基-戊氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]吡啶-2-羧酸(盐酸盐)(657mg，53％)。将粗固体在不经任何进一步纯化的情况下用于下一步骤。esi-ms m/z计算值665.3247，实验值666.37(m+1)
+
；保留时间：1.32分钟；lc方法a。
[2854]
步骤4：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-12-[6-(2-羟基丙烷-2-基)螺[3.3]庚烷-2-基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,18,19-五氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮，非对映异构体1(化合物161)，以及(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-12-[6-(2-羟基丙烷-2-基)螺[3.3]庚烷-2-基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,18,19-五氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮，非对映异构体2(化合物162)
[2855][2856]
在氮气下向100ml圆底烧瓶中装入[二甲基氨基(三唑并[4,5-b]吡啶-3-基氧基)亚甲基]-二甲基铵(六氟化磷离子)(747mg，1.965mmol)(hatu)、无水dmf(15ml)和diea(0.83ml，4.765mmol)。在5分钟的时间段内滴加粗6-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(2r)-2-[[6-(1-羟基-1-甲基-乙基)螺[3.3]庚烷-2-基]氨基]-4,4-二甲基-戊氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]吡啶-2-羧酸(盐酸盐)(657mg，0.9355mmol)于无水dmf(20ml)中的溶液。将混合物在室温下搅拌17小时。将溶剂蒸发，并且将残余物溶解于dcm中。将产物通过硅胶快速色谱法(40g柱)使用乙酸乙酯/己烷的梯度(30分钟内0至100％)纯化。产物洗脱出约70-85％ ea。溶剂的蒸发得到溶解于dmso(2ml)中的粗固体。将溶液通过注射器过滤盘微过滤并通过反相制备型hplc(c
18
)使用乙腈/水的梯度(30分钟内10至60％)和hcl作为改性剂纯化。将两个异构体基线分离。对于每种化合物，将有机溶剂蒸发。将所得沉淀用dcm萃取并将有机相经硫酸钠干燥。蒸发、在dcm/己烷中研磨和蒸发得到呈白色固体的两个异构体：非对映异构体1，更多极性的异构体，(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-12-[6-(2-羟基丙烷-2-基)螺[3.3]庚烷-2-基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,18,19-五氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮(86mg，28％)。esi-ms m/z计算值647.31415，实验值648.31(m+1)
+
；保留时间：1.83分钟(lc方法a)，1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ13.50-11.75(宽m,1h),8.17(s,1h),8.05(s,1h),7.75(s,1h),7.27(t,j＝7.6hz,1h),7.13(s,2h),6.38(s,1h),5.66-5.47(m,1h),4.12(t,j＝10.5hz,1h),3.98(s,1h),3.90(p,j＝8.9hz,1h),3.60-3.44(m,1h),3.07(t,j＝9.5hz,1h),2.98(t,j＝9.8hz,1h),2.31-2.24(m,1h),2.21-1.86(m,11h),1.81(td,j＝8.0,4.1hz,1h),1.56(dd,j＝15.1,8.2hz,1h),1.44-1.35(m,1h),0.97(s,3h),0.97(s,3h),0.49(s,9h)；以及非对映异构体2，更少极性异构体，(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-12-[6-(2-羟基丙烷-2-基)螺[3.3]庚烷-2-基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,18,19-五氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮(90mg,29％)，esi-ms m/z计算值647.31415，实验值648.31(m+1)
+
；保留时间：1.88分钟(lc方法a)；1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ13.34-11.83(m,1h),8.17(s,1h),8.06(s,1h),7.76(s,1h),7.27(t,j＝7.6hz,1h),7.13(s,2h),6.38(s,1h),5.68-5.52(m,1h),4.09(t,j＝10.6hz,1h),4.00(s,1h),3.90(p,j＝8.8hz,1h),3.58-3.46(m,1h),3.07(t,j＝9.6hz,1h),2.98(t,j＝9.8hz,1h),2.38-2.28(m,1h),2.24-1.86(m,11h),1.81(td,j＝7.8,4.0hz,1h),1.59(dd,j＝15.1,8.3hz,1h),1.44-1.35(m,1h),0.97(s,6h),0.50(s,9h)。
[2857]
实例128：化合物163的制备
[2858]
步骤1：(2r)-2-(螺[2.3]己-5-基氨基)-3-[1-(三氟甲基)环丙基]丙烷-1-醇
[2859][2860]
在环境温度下在氮气下向(2r)-2-氨基-3-[1-(三氟甲基)环丙基]丙烷-1-醇(盐酸盐)(600mg，2.732mmol)于无水1,2-二氯乙烷(15ml)的搅拌的乳状乳液中添加螺[2.3]己-5-酮(330mg，3.433mmol)于无水1,2-二氯乙烷(3ml)中的溶液，然后添加冰乙酸(200μl，3.517mmol)。将混合物搅拌30分钟，然后以2分钟的间隔分3批(等量)添加固体三乙酰氧基硼氢化钠(2.22g，10.47mmol)。将反应搅拌过夜(13小时)。将悬浮液在冰水浴中冷却并通过缓慢添加盐酸水溶液(2.0m的6ml，12.00mmol)至ph为约1.0淬灭。将乳液(无透明相)搅拌20分钟。将所得冷却(冰浴)悬浮液通过缓慢添加碳酸钠(1.50g，14.15mmol)碱化(注意！强烈起泡)以调节ph为约10。将不均匀相分离，并且将水层用二氯甲烷(2
×
40ml)萃取。将合并的有机物用盐水(20ml)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并在减压下蒸发，得到呈澄清稠密油的(2r)-2-(螺[2.3]己-5-基氨基)-3-[1-(三氟甲基)环丙基]丙烷-1-醇(698mg，97％)，其过夜变成固体。esi-ms m/z计算值263.1497，实验值264.1(m+1)
+
；保留时间：0.91分钟；lc方法a，1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ3.48(p,j＝7.4hz,1h),3.39(dd,j＝10.6,4.6hz,1h),3.28(dd,j＝10.8,5.2hz,1h),2.66-2.58(m,1h),2.24-2.04(m,2h),2.00-1.81(m,2h),1.78-1.61(m,1h),1.52(dd,j＝14.9,7.1hz,1h),1.00-0.72(m,4h),0.41(dd,j＝9.0,6.2hz,2h),0.33(dd,j＝8.8,5.9hz,2h)。
[2861]
步骤2：6-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(2r)-2-(螺[2.3]己-5-基氨基)-3-[1-(三氟甲基)环丙基]丙氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]吡啶-2-羧酸
[2862][2863]
向(2r)-2-(螺[2.3]己-5-基氨基)-3-[1-(三氟甲基)环丙基]丙烷-1-醇(4.0g，15.19mmol)和6-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]吡啶-2-羧酸(5.26g，12.56mmol)于2-methf(60ml)中的溶液中按份添加叔丁醇钠(4.4g，45.78mmol)，保持反应温度《40℃。添加是放热的并且使用碱添加速率来控制反应温度。将反应在室温下搅拌90分钟，剩余约15％ sm。添加另外的叔丁醇钠(1.1g，11.45mmol)并再搅拌90分钟(温热几次)。将反应通过缓慢添加hcl(6m的14ml，84.00mmol)淬灭并搅拌5分钟。将混合物使用2me-thf和水转移到分液漏斗中。将水相分离并用100ml的2me-thf萃取。将合并的有机相用100ml的盐水洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并在真空中浓缩。暗黄色泡沫无需进一步纯化即可使用。6-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(2r)-2-(螺[2.3]己-5-基氨基)-3-[1-(三氟甲基)环丙基]丙氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]吡啶-2-羧酸(盐酸盐)(7.49g，87％)。esi-ms m/z计算值
645.22327，实验值646.3(m+1)
+
；保留时间：1.24分钟；lc方法a。
[2864]
步骤3：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-2,2-二氧代-12-螺[2.3]己-5-基-11-[[1-(三氟甲基)环丙基]甲基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,18,19-五氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(化合物163)
[2865][2866]
向6-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(2r)-2-(螺[2.3]己-5-基氨基)-3-[1-(三氟甲基)环丙基]丙氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]吡啶-2-羧酸(盐酸盐)(7.49g，10.98mmol)于nmp(110ml)中的溶液中添加diea(6.1ml，35.02mmol)，随后添加hatu(6.2g，16.31mmol)。将混合物在环境温度下搅拌16小时。向反应混合物中缓慢添加hcl(0.2m的275ml，55.00mmol)并在环境温度下搅拌30分钟。将黄色浆液使用m玻璃料过滤。将固体用400ml的etoac稀释(得到乳状乳液)。添加另外的100ml的etoac和100ml的dcm。添加另外的200ml的methf，得到澄清溶液。将水相分离，并将有机相用300ml的盐水洗涤。将有机相分离，经硫酸镁干燥，过滤并在真空中浓缩，得到暗黄色泡沫。将泡沫用150ml的acn稀释并在环境温度下搅拌1小时。将固体使用m玻璃料收集并用acn洗涤。将滤液在真空中浓缩。将残余物用acn稀释并加热，得到与产物一起接种的澄清溶液。将所得沉淀使用m玻璃料收集并用冷mecn洗涤，得到(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-2,2-二氧代-12-螺[2.3]己-5-基-11-[[1-(三氟甲基)环丙基]甲基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,18,19-五氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(4.0g，58％)。esi-ms m/z计算值627.2127，实验值628.3(m+1)
+
；保留时间：2.59分钟；lcms lc方法i。将该物质在纯化之前与另一批合并。
[2867]
将合并批次的(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-2,2-二氧代-12-螺[2.3]己-5-基-11-[[1-(三氟甲基)环丙基]甲基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,18,19-五氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(5.2g，8.285mmol)溶解于dmso(25ml)中并在450g反相柱上进行色谱分析，用40-100％acn/水洗脱。将含有纯产物的级分合并并在真空中浓缩，去除大部分acn。将沉淀的产物使用m玻璃料收集并将固体用水洗涤。将固体风干1小时，然后在45℃下在真空下干燥1小时。将固体在45℃下的真空烘箱中干燥16小时，缓慢通入氮气，得到类白色自由流动固体。(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-2,2-二氧代-12-螺[2.3]己-5-基-11-[[1-(三氟甲基)环丙基]甲基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,18,19-五氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(4.38g，84％)。esi-ms m/z计算值627.2127，实验值628.3(m+1)
+
；保留时间：1.84分钟；lc方法a，1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ13.15(s,1h),8.20(s,1h),8.07(s,1h),7.85(s,1h),7.31(s,1h),7.17(s,2h),6.43(s,1h),5.47(d,j＝7.1hz,1h),4.25(q,j＝11.8,8.7hz,2h),4.00(s,1h),3.43(t,j＝9.4hz,1h),2.29-2.05(m,6h),1.96(s,3h),1.60(dd,j＝16.5,9.6hz,1h),0.87(d,j＝5.2hz,1h),0.79(d,j＝9.2hz,1h),0.71(s,1h),0.53(dt,j＝17.1,7.6hz,6h)。
3-基氧基)亚甲基]-二甲基铵(六氟化磷离子)(52mg，0.1368mmol)(hatu)和diea(75μl，0.4306mmol)。将氮气吹扫20秒并将小瓶加盖。将反应在环境温度下搅拌15分钟。将反应微过滤并通过反相hplc(c
18
柱，使用1-99％乙腈/水，5mm hcl作为改性剂，15分钟内)纯化，得到呈白色固体获得的(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-12-螺[2.3]己-5-基-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,18,19-五氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(41mg，68％)。esi-ms m/z计算值561.24097，实验值562.4(m+1)
+
；保留时间：1.93分钟；lc方法a。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ12.74(s,1h),8.19(t,j＝7.8hz,1h),8.06(d,j＝7.9hz,1h),7.81(d,j＝7.7hz,1h),7.27(t,j＝7.7hz,1h),7.14(d,j＝7.6hz,2h),6.34(s,1h),5.61(dd,j＝9.7,4.9hz,1h),4.29(p,j＝8.5hz,1h),4.19(t,j＝10.6hz,1h),3.62(tt,j＝11.0,4.2hz,1h),3.36(q,j＝8.9hz,2h),2.19-2.10(m,2h),2.04(s,6h),1.67(ddd,j＝14.1,10.5,3.3hz,1h),1.36(dtt,j＝12.7,9.3,4.7hz,1h),1.23(ddd,j＝13.6,10.0,3.1hz,1h),0.74(d,j＝6.6hz,3h),0.57-0.51(m,2h),0.49(tt,j＝9.1,4.1hz,2h),0.29(d,j＝6.3hz,3h)。
[2875]
实例130：化合物165的制备
[2876]
步骤1：3-[[4-[(2r)-2-[[3-(叔丁氧基羰基氨基)环丁基]氨基]-4,4-二甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸
[2877][2878]
将3-[[4-[(2r)-2-氨基-4,4-二甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(2.968g，5.405mmol)、n-(3-氧代环丁基)氨基甲酸叔丁酯(1.208g，6.522mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(3.88g，18.31mmol)在dcm(9ml)中合并，并在室温下搅拌6小时。还有剩余的起始材料。添加更多三乙酰氧基硼氢化钠(1.49g，7.030mmol)并将反应搅拌1小时。仍然没有变化，所以添加更多n-(3-氧代环丁基)氨基甲酸叔丁酯(0.5g，2.699mmol)并将反应再搅拌4小时。将反应用甲醇淬灭，然后在乙酸乙酯与1m hcl溶液之间分配。将有机物用1m hcl洗涤两次以上，然后用盐水洗涤。将有机物经硫酸钠干燥并蒸发。将固体用乙醚研磨并进一步干燥，得到3-[[4-[(2r)-2-[[3-(叔丁氧基羰基氨基)环丁基]氨基]-4,4-二甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(3.36g，52％)。将反应在粗上进行到下一步骤。esi-ms m/z计算值681.31964，实验值682.2(m+1)
+
；保留时间：0.55分钟；lc方法d。
[2879]
步骤2：n-[3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]环丁基]氨基甲酸叔丁酯，非对映异构体1，以及n-[3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]环丁基]氨基甲酸叔
丁酯，非对映异构体2
[2880][2881]
将3-[[4-[(2r)-2-[[3-(叔丁氧基羰基氨基)环丁基]氨基]-4,4-二甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(3.283g，2.742mmol)溶解于dmf(10ml)中并添加到4-(6-氰基-2-甲基-7-氧代-4,8-二氧杂-2,5-二氮杂-5-烯-3-亚基)吗啉-4-六氟磷酸盐(v)(1.21g，2.825mmol)和三乙胺(1.6ml，11.48mmol)于dmf(25ml)中的搅拌的溶液中。将反应混合物在室温下搅拌16小时，然后蒸发。将粗物质通过硅胶色谱法纯化，用30-100％乙酸乙酯/己烷洗脱，得到顺式/反式环化产物的混合物。将顺式/反式产物通过反相hplc(200mg/注射)在50mm
×
100mm柱上进一步纯化，用40-80％ acn/5mmol hcl水溶液洗脱。将期望的级分蒸发，得到两个产物。非对映异构体1，峰1：n-[3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]环丁基]氨基甲酸叔丁酯(612mg，34％)。esi-ms m/z计算值663.3091，实验值664.3(m+1)
+
；保留时间：1.94分钟；lc方法a；以及非对映异构体2，峰2：n-[3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]环丁基]氨基甲酸叔丁酯(334mg，18％)，esi-ms m/z计算值663.3091，实验值664.3(m+1)
+
；保留时间：1.99分钟；lc方法a。
[2882]
步骤3：(11r)-12-(3-氨基环丁基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(化合物165)
[2883][2884]
将n-[3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]环丁基]氨基甲酸叔丁酯非对映异构体1(58.4mg，0.08797mmol)溶解于二噁烷中的4m hcl(4m的1.5ml，6.000mmol)中并在室温下搅拌30分钟。将反应蒸发至干燥并无需
进一步纯化即可使用，得到非对映异构体1(11r)-12-(3-氨基环丁基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)(52mg，98％)。esi-ms m/z计算值563.25665，实验值564.7(m+1)
+
；保留时间：0.49分钟；lc方法d。
[2885]
将少量(11r)-12-(3-氨基环丁基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)(15mg，0.02124mmol)通过lc/ms利用1-99％乙腈/5mm hcl水溶液的梯度纯化，得到(11r)-12-(3-氨基环丁基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)(11.2mg，88％)。esi-ms m/z计算值563.25665，实验值564.7(m+1)
+
；保留时间：1.14分钟；lc方法a。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ13.13(s,1h),8.49(s,1h),8.18(d,j＝5.1hz,3h),7.95(s,1h),7.69(s,2h),7.26(t,j＝7.7hz,1h),7.17-7.05(m,2h),6.42(s,1h),5.14(dd,j＝10.8,4.4hz,1h),4.48(p,j＝8.3hz,1h),4.13(t,j＝11.3hz,1h),3.96-3.84(m,1h),3.77-3.68(m,1h),3.33-3.15(m,2h),2.38(s,2h),2.01(d,j＝78.0hz,6h),1.54-1.35(m,2h),0.49(s,9h)。
[2886]
实例131：化合物166的制备
[2887]
步骤1：(11r)-12-(3-氨基环丁基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(化合物166)
[2888][2889]
将通过类似于上文所描述的非对映异构体1的方式制备的(11r)-12-(3-氨基环丁基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)非对映异构体2(13mg，0.01906mmol)通过lc/ms利用1-99％乙腈/5mm hcl水溶液的梯度纯化，得到(11r)-12-(3-氨基环丁基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)(7.2mg，63％)esi-ms m/z计算值563.25665，实验值564.7(m+1)
+
；保留时间：1.2分钟。(lc方法a)。
[2890]
实例132：化合物167的制备
[2891]
步骤1：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-12-[3-(2-氧代-1,3-噁唑烷-3-基)环丁基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-2,2,13-三酮(化合物167)
[2892][2893]
将(11r)-12-(3-氨基环丁基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)(非对映异构体2，40mg，0.05865mmol)与2-苄氧基乙醛(9mg，0.05993mmol)在dcm(0.5ml)中合并，并搅拌20分钟。将反应混合物在冰浴中冷却至0℃，然后添加三乙酰氧基硼氢化钠(37mg，0.1746mmol)，并将反应混合物搅拌一小时。添加第二部分2-苄氧基乙醛(4mg，0.02664mmol)，导致几乎完全转化和少量二烷基化。将反应混合物在1m hcl与乙酸乙酯之间分配。将层分离，并且将水溶液用乙酸乙酯再萃取三次。将合并的有机物用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到呈白色固体的(约15％双烷基化，但未经纯化用于下一步骤)(11r)-12-(3-{[2-(苄氧基)乙基]氨基}环丁基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-2,2,13-三酮(盐酸盐)(47mg，109％)esi-ms m/z计算值697.3298，实验值698.5(m+1)
+
；保留时间：0.62分钟；lc方法d。
[2894]
将产物与氯甲酸甲酯(11mg，0.1164mmol)在dcm(0.5ml)中合并，并添加dipea(50μl，0.2871mmol)。将反应在室温下搅拌10分钟，然后在1m hcl与乙酸乙酯之间分配。将水层用乙酸乙酯萃取3次，并且将合并的有机物用盐水洗涤并经硫酸钠干燥。所得物质(仍带有来自步骤1的杂质)无需进一步纯化即可用于下一步骤。n-[2-(苄氧基)乙基]-n-{3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-12-基]环丁基}氨基甲酸甲酯(42mg，95％)。esi-ms m/z计算值755.33527，实验值756.6(m+1)
+
；保留时间：0.81分钟；lc方法d。
[2895]
在氮气吹扫的小瓶中，将产物与于甲醇(1.5ml)中的二羟基钯(15mg，0.01068mmol)合并。将氢气通过气球鼓入10分钟，然后在室温下将反应再搅拌3小时，同时将氢气气球放在适当的位置。然后将反应小瓶用氮气吹扫，并且将反应混合物用甲醇稀释并通过硅藻土过滤，在干燥之后得到呈白色固体的n-{3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2,13-三氧基-9-氧-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-12-基]环丁基}-n-(2-羟乙基)氨基甲酸甲酯(25mg，64％)，其不经纯化即用于下一步骤(现在仍然存在双脱苄基的杂质)。esi-ms m/z计算值665.2883，实验值666.4(m+1)
+
；保留时间：0.65分钟；lc方法d。
[2896]
将产物溶解于thf(1.5ml)中，并且一次性添加叔丁醇钠(28mg，0.2914mmol)。在5分钟之后，将反应混合物在1m hcl与乙酸乙酯之间分配。将层分离，并且将水溶液用乙酸乙酯再萃取三次，并且将合并的有机物用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。将所得粗物质溶解于1:1dmso/甲醇中，过滤并通过反相hplc(1-99％ acn/水，hcl改性剂，15分钟运行)纯化，
得到主要产物(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-12-[3-(2-氧代-1,3-噁唑烷-3-基)环丁基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-2,2,13-三酮(14.3mg，38％)esi-ms m/z计算值633.2621，实验值634.6(m+1)
+
；保留时间：1.62分钟(lc方法a)。
[2897]
实例133：化合物168的制备
[2898]
步骤1：n-{3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-12-基]环丁基}氨基甲酸甲酯(化合物168)
[2899][2900]
将(11r)-12-(3-氨基环丁基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮，非对映异构体1(盐酸盐)(30mg，0.04249mmol)、氯甲酸甲酯(8μl，0.1035mmol)和diea(37μl，0.2124mmol)在dcm(0.5ml)中合并，并在室温下搅拌15分钟。将反应混合物蒸发并将粗产物通过反相hplc利用10-99％乙腈/5mm hcl水溶液的梯度纯化，得到n-{3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-12-基]环丁基}氨基甲酸甲酯(20.9mg，79％)。esi-ms m/z计算值621.2621，实验值622.5(m+1)
+
；保留时间：1.65分钟；lc方法a。
[2901]
实例134：化合物169和化合物170的制备
[2902]
步骤1：n-[3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]环丁基]-n-甲基-氨基甲酸甲酯(立体异构体化合物169，非对映异构体1和化合物170，非对映异构体2)
[2903][2904]
将(11r)-12-(3-氨基环丁基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)(非对映异构体1，25mg，0.03541mmol)与氯甲酸甲酯(大约6.692mg，5.472μl，0.07082mmol)在dcm(0.5ml)中合并，并添加dipea(大约22.88mg，30.84μl，0.1770mmol)。将反应在室温下搅拌10分钟，然后在1m hcl与乙酸乙酯之间分配。将层分离，并且将水溶液用乙酸乙酯再萃取2次。将合并的有机物用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。将所得白色固体在不经进一步纯化的情况下用于下一步骤。将产物溶解于thf(0.5ml)中，并在冰浴中冷却至0℃。添加氢化钠(大约5.275mg，0.1319mmol)，并且在一分钟之后将反应从冰浴中去除并在室温下搅拌20分钟。然后将反应放回冰浴中并添加碘甲烷(大约1m的32.98μl，0.03298mmol)。将冰浴再次去除，并且使反应在室温下搅拌3小时。在此之后，将反应在1m hcl与乙酸乙酯之间分配。将层分离，并且将水溶液用乙酸乙酯再萃取2次。将合并的有机物用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。将所得粗物质溶解于1:1dmso/甲醇中，过滤并通过反相hplc(1-99％ acn/水，hcl改性剂，15分钟运行)纯化，得到呈白色固体的n-[3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]环丁基]-n-甲基-氨基甲酸甲酯(非对映异构体1，10.7mg，47％)。esi-ms m/z计算值635.2778，实验值636.5(m+1)
+
；保留时间：1.81分钟；lc方法a。对(11r)-12-(3-氨基环丁基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)(非对映异构体2，15mg，0.02199mmol)应用类似条件的单独反应产生n-[3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]环丁基]-n-甲基-氨基甲酸甲酯(非对映异构体2，7.1mg，50％)。esi-ms m/z计算值635.2778，实验值636.5(m+1)
+
；保留时间：1.82分钟；lc方法a。
[2905]
实例135：化合物171的制备
[2906]
步骤1：(11r)-12-(3-氨基-3-甲基环丁基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-2,2,13-三酮，非对映异构体1和2
[2907][2908]
将3-[[4-[(2r)-2-氨基-4,4-二甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(1.06g，1.930mmol)与n-(1-甲基-3-氧代-环丁基)氨基甲酸叔丁酯(500mg，2.509mmol)在dcm(4ml)中合并，并在室温下搅拌10分钟。添加三乙酰氧基硼氢化钠(1.25g，5.898mmol)，并且将反应在室温下搅拌90分钟。转化似乎已经停止，并且添加另外部分的三乙酰氧基硼氢化钠(600mg，2.831mmol)与n-(1-甲基-3-氧代-环丁基)氨基甲酸叔丁酯(200mg，1.004mmol)。将反应在室温下再搅拌两小时，然后在1m hcl与乙酸乙酯之间分配(各自150ml)。将层分离，并且将水溶液用100ml乙酸乙酯再萃取2次。将合并的有机物用盐水洗涤并经硫酸钠干燥。所得产物无需进一步纯化即用于下一步骤(含有大量的n-连接重排副产物)。esi-ms m/z计算值695.33527，实验值696.7(m+1)
+
；保留时间：分钟；lc方法d.4
[2909]
在5分钟内向上述产物于dmf(5ml)中的溶液中滴加comu(1.7g，3.969mmol)和dipea(2.1ml，12.06mmol)于dmf(45ml)中的搅拌的溶液。使反应混合物在室温下搅拌16小时。然后将所述反应混合物通过旋转蒸发浓缩并且将剩余的残余物在1m hcl与乙酸乙酯之间分配。将层分离，并且将水溶液用乙酸乙酯再萃取3次。将合并的有机物用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。将所得粗物质通过硅胶色谱法纯化，用梯度0-100％乙酸乙酯/己烷的梯度洗脱。将含有产物的级分合并，得到大环内酰胺化产物。esi-ms m/z计算值677.3247，实验值678.7(m+1)
+
；保留时间：0.8分钟；lc方法d。
[2910]
将产物溶解于dcm(5ml)和hcl(4m的5ml，20.00mmol)中并在室温下搅拌30分钟。然后将反应混合物通过旋转蒸发浓缩。将所得粗物质通过反相(1-99％甲醇/水，hcl改性剂，中间的浅梯度)纯化，分别得到两个非对映异构产物，峰1，非对映异构体1：(11r)-12-(3-氨基-3-甲基环丁基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-2,2,13-三酮(盐酸盐)(84mg，7％)esi-ms m/z计算值577.2723，实验值578.7(m+1)
+
；保留时间：0.49分钟(lc方法d)；以及非对映异构体2，峰2：(11r)-12-(3-氨基-3-甲基环丁基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-2,2,13-三酮(盐酸盐)(114mg，10％)esi-ms m/z计算值577.2723，实验值578.8(m+1)
+
；保留时间：0.52分钟(lc方法a)。
[2911]
步骤2：n-{3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-12-基]-1-甲基环丁基}氨基甲酸甲酯(化合物171)
[2912][2913]
将(11r)-12-(3-氨基-3-甲基环丁基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-2,2,13-三酮(盐酸盐)，非对映异构体1，(38mg，0.06187mmol)与氯甲酸甲酯(大约11.69mg，9.558μl，0.1237mmol)和dipea(大约39.99mg，53.89μl，0.3094mmol)在dcm中合并，并且在室温下搅拌30分钟。在此之后，将反应混合物用几滴1m hcl水溶液淬灭。然后将反应混合物部分浓缩，用1:1dmso和甲醇稀释，过滤并通过反相hplc(1-99％ acn/水，hcl改性剂，15分钟运行)纯化，在干燥之后得到n-{3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-12-基]-1-甲基环丁基}氨基甲酸甲酯(24.9mg，63％)。esi-ms m/z计算值635.2778，实验值636.5(m+1)
+
；保留时间：1.73分钟；lc方法a。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ13.08(s,1h),8.44(s,1h),7.92(s,1h),7.67(s,2h),7.28(d,j＝26.5hz,2h),7.11(s,2h),6.40(s,1h),5.10(d,j＝9.7hz,1h),4.24(s,1h),4.02(t,j＝8.9hz,1h),3.69(s,1h),3.54(s,3h),2.94(dt,j＝28.9,10.2hz,2h),2.46(d,j＝7.3hz,2h),2.32-1.70(m,6h),1.69-1.52(m,1h),1.45(s,3h),1.38(d,j＝14.9hz,1h),0.49(s,9h)。
[2914]
实例136：化合物172的制备
[2915]
步骤1：n-{3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-12-基]-1-甲基环丁基}氨基甲酸甲酯(化合物172)
[2916][2917]
将(11r)-12-(3-氨基-3-甲基环丁基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-2,2,13-三酮，非对映异构体2(盐酸盐)(36mg，0.05861mmol)与氯甲酸甲酯(大
约11.08mg，9.060μl，0.1172mmol)和dipea(大约37.87mg，51.04μl，0.2930mmol)在dm中合并，并且在室温下搅拌30分钟。在此之后，将反应混合物用几滴1m hcl水溶液淬灭。然后将反应混合物部分浓缩，用1:1dmso和甲醇稀释，过滤并通过制备型hplc(1-99％ acn/水，hcl改性剂，15分钟运行)纯化，在干燥之后得到n-{3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-12-基]-1-甲基环丁基}氨基甲酸甲酯(20.5mg，54％)。esi-ms m/z计算值635.2778，实验值636.6(m+1)
+
；保留时间：1.77分钟(lc方法a)。
[2918]
实例137：化合物173的制备
[2919]
步骤1：n-[3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]-1-甲基-环丁基]-n-甲基-氨基甲酸甲酯(化合物173)
[2920][2921]
将thf中的n-{3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-12-基]-1-甲基环丁基}氨基甲酸酯(15mg，0.02359mmol)添加到螺旋盖小瓶中的nah(大约4.720mg，0.1180mmol)中。将反应混合物在室温下搅拌20分钟，然后冷却至0℃。将碘甲烷(大约1m的47.18μl，0.04718mmol)作为于thf中的溶液添加。然后将反应混合物恢复至室温一小时并且然后加热至40℃。在总共另外四小时之后，将反应混合物在1m hcl与乙酸乙酯之间分配。将层分离，并且将水溶液用乙酸乙酯再萃取一次。将合并的有机物经硫酸钠干燥并浓缩，然后溶解于1:1dmso/甲醇中并过滤，然后通过反相hplc(1-99％ acn/水，hcl改性剂，15分钟运行)纯化，在干燥之后得到呈白色粉末的n-[3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]-1-甲基-环丁基]-n-甲基-氨基甲酸甲酯(6.4mg，41％)。esi-ms m/z计算值649.2934，实验值650.5(m+1)
+
；保留时间：1.87分钟；lc方法a。
[2922]
实例138：化合物174、化合物175和化合物176的制备
[2923]
步骤1：1-(叔丁氧羰基氨基)-3-[[(1r)-1-(羟甲基)-3,3-二甲基-丁基]氨基]环丁烷羧酸乙酯
[2924][2925]
将1-(叔丁氧羰基氨基)-3-氧代-环丁烷羧酸乙酯(300mg，1.166mmol)添加到(2r)-2-氨基-4,4-二甲基-戊烷-1-醇(盐酸盐)(240mg，1.431mmol)于无水二氯甲烷(2ml)中的溶液中并在室温下搅拌30分钟。添加三乙酰氧基硼氢化钠(790mg，3.727mmol)并将反应再搅拌3小时，然后放置在冰箱中16小时。然后使反应混合物温热至室温，用5ml二氯甲烷稀释并缓慢添加hcl水溶液(1m的5ml，5.000mmol)并将反应在室温下再搅拌10分钟。添加碳酸钾(2g，14.47mmol)于水(2.5ml)中的溶液并将有机物分离。将水相用dcm萃取，然后用乙酸乙酯萃取，并且将合并的有机物用盐水洗涤并经硫酸钠干燥，在浓缩之后得到呈无色油的1-(叔丁氧羰基氨基)-3-[[(1r)-1-(羟甲基)-3,3-二甲基-丁基]氨基]环丁烷羧酸乙酯(393mg，90％)。esi-ms m/z计算值372.26242，实验值373.7(m+1)
+
；保留时间：0.46分钟；(lc方法d)。
[2926]
步骤2：n-[1-(羟甲基)-3-[[(1r)-1-(羟甲基)-3,3-二甲基-丁基]氨基]环丁基]氨基甲酸叔丁酯
[2927][2928]
将1-(叔丁氧羰基氨基)-3-[[(1r)-1-(羟甲基)-3,3-二甲基-丁基]氨基]环丁烷羧酸乙酯(393mg，1.055mmol)与硼氢化锂(2m的6ml，12.00mmol)在thf(5ml)中混合，并在室温下搅拌6小时。将反应冷却至0℃，并且添加甲醇(3ml，74.06mmol)和水(3ml)并将反应搅拌15分钟(轻微起泡)。滴加饱和氯化铵水溶液，并且反应混合物开始剧烈起泡。添加另外的饱和氯化铵，直到停止起泡为止，并将反应在室温下再搅拌20分钟。然后将反应混合物用水和乙酸乙酯稀释，并将层分离。将水相用乙酸乙酯再萃取3次，并且将合并的有机物用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到呈白色固体的n-[1-(羟甲基)-3-[[(1r)-1-(羟甲基)-3,3-二甲基-丁基]氨基]环丁基]氨基甲酸叔丁酯(310mg，89％)e esi-ms m/z计算值330.25186，实验值331.3(m+1)
+
；保留时间：0.43分钟。esi-ms m/z计算值330.25186，实验值331.3(m+1)
+
；保留时间：0.43分钟；(lc方法d)。
[2929]
步骤3：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-12-{6-氧代-7-氧杂-5-氮杂螺[3.4]辛烷-2-基}-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮，非对映异构体1(化合物175)，以及(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-12-{6-氧代-7-氧杂-5-氮杂螺[3.4]辛烷-2-基}-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮，非对映异构体2(化合物176)
[2930][2931]
将n-[1-(羟甲基)-3-[[(1r)-1-(羟甲基)-3,3-二甲基-丁基]氨基]环丁基]氨基甲酸叔丁酯(310mg，0.9381mmol)与叔丁醇钠(535mg，5.567mmol)在thf(9ml)中合并，并在50℃下搅拌30分钟。然后将反应混合物从热中去除并且添加3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(350mg，0.8376mmol)和另外的叔丁醇钠(250mg，2.601mmol)并将反应恢复至50℃1小时。将反应混合物冷却至室温并在1m hcl与乙酸乙酯之间分配。将层分离，并且将水溶液用乙酸乙酯萃取4次。将合并的有机物用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。将该物质通过制备型hplc(1-70％ acn/水，hcl改性剂，15分钟运行)纯化，得到3-[[4-[(2r)-4,4-二甲基-2-[(6-氧代-7-氧杂-5-氮杂螺[3.4]辛烷-2-基)氨基]戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(166.0mg，28％)。在5分钟内将该产物于dmf(5ml)中的溶液滴加到comu(300mg，0.7005mmol)和dipea(350μl，2.009mmol)于dmf(15ml)中的搅拌的溶液中。将反应混合物在室温下再搅拌3小时，然后在1m hcl与乙酸乙酯之间分配。将层分离，并且将水溶液用乙酸乙酯再萃取3次。将合并的有机物用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。将所得粗物质溶解于1:1dmso/甲醇中，过滤并通过反相色谱法(1-99％ meoh/水/hcl改性剂)纯化，分别得到螺环的两个立体异构体，峰1，非对映异构体1，(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-12-{6-氧代-7-氧杂-5-氮杂螺[3.4]辛烷-2-基}-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮(45mg，8％)esi-ms m/z计算值619.24646，实验值620.6(m+1)
+
；保留时间：1.51分钟(lc方法a)；以及峰2，非对映异构体2，(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-12-{6-氧代-7-氧杂-5-氮杂螺[3.4]辛烷-2-基}-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮(19mg，3％)esi-ms m/z计算值619.24646，实验值620.5(m+1)
+
；保留时间：1.59分钟(lc方法a)。
[2932]
步骤4：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-12-(5-甲基-6-氧代-7-氧杂-5-氮杂螺[3.4]辛烷-2-基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(化合物174)
[2933][2934]
将thf中的(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-12-{6-氧代-7-氧杂-5-氮杂螺[3.4]辛烷-2-基}-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮，非对映异构体1(10mg，0.01597mmol)添加到螺旋盖小瓶中的nah(大约3.194mg，0.07985mmol)中。将反应混合物在室温下搅拌20分钟，然后冷却至0℃。将碘甲烷(大约1m的31.94μl，0.03194mmol)作为于thf中的溶液添加。然后将反应混合物恢复至室温一小时。然后将反应加热至40℃。在40℃下在1小时之后添加另外的碘甲烷(大约1m的31.94μl，0.03194mmol)。在总共四小时之后，将反应混合物各自在1m hcl与乙酸乙酯之间分配。将层分离，并且将水溶液用乙酸乙酯再萃取一次。将合并的有机物经硫酸钠干燥并浓缩，然后溶解于1:1dmso/甲醇中并过滤，然后通过反相hplc(1-99％ acn/水，hcl改性剂，15分钟运行)纯化，在干燥之后得到呈白色粉末的(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-12-(5-甲基-6-氧代-7-氧杂-5-氮杂螺[3.4]辛烷-2-基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(3.7mg，36％)。esi-ms m/z计算值633.2621，实验值634.6(m+1)
+
；保留时间：1.62分钟；lc方法a。
[2935]
实例139：化合物177的制备
[2936]
步骤1：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-12-(5-甲基-6-氧代-7-氧杂-5-氮杂螺[3.4]辛烷-2-基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(化合物177)
[2937][2938]
将thf中的(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-12-{6-氧代-7-氧杂-5-氮杂螺[3.4]辛烷-2-基}-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]
十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮，非对映异构体2(10mg，0.01597mmol)添加到螺旋盖小瓶中的nah(大约3.194mg，0.07985mmol)中。将反应混合物在室温下搅拌20分钟，然后冷却至0℃。将碘甲烷(大约1m的31.94μl，0.03194mmol)作为于thf中的溶液添加。然后将反应混合物恢复至室温一小时。然后将反应加热至40℃。在40℃下在1小时之后添加另外的碘甲烷(大约1m的31.94μl，0.03194mmol)。在总共四小时之后，将反应混合物在1m hcl与乙酸乙酯之间分配。将层分离，并且将水溶液用乙酸乙酯再萃取一次。将合并的有机物经硫酸钠干燥并浓缩，然后溶解于1:1dmso/甲醇中并过滤，然后通过反相hplc(1-99％acn/水，hcl改性剂，15分钟运行)纯化，在干燥之后得到呈白色粉末的(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-12-(5-甲基-6-氧代-7-氧杂-5-氮杂螺[3.4]辛烷-2-基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(3.8mg，36％)。esi-ms m/z计算值633.2621，实验值634.4(m+1)
+
；保留时间：1.63分钟；lc方法a。
[2939]
实例140：化合物178的制备
[2940]
步骤1：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-12-(3-吗啉代环丁基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(化合物178)
[2941][2942]
将(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2-二氧代-12-(3-氧代环丁基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(50mg，0.08886mmol)和吗啉(16mg，0.1837mmol)合并，并溶解于二氯甲烷(0.50ml)中。将混合物在室温下搅拌15分钟。然后添加三乙酰氧基硼氢化钠(57mg，0.2689mmol)，并且使反应混合物在室温下搅拌过夜。将反应混合物过滤并且将产物通过uv触发的反相hplc分离，用10-99％乙腈/水梯度在水相中用0.5mm hcl酸改性剂洗脱15分钟。获得(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-12-(3-吗啉代环丁基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(41.5mg，74％)。esi-ms m/z计算值633.29846，实验值634.3(m+1)
+
；保留时间：1.29分钟；lc方法a。
[2943]
实例141：化合物179的制备
[2944]
步骤1：3-[[4-[(1r)-2-氨基-1-甲基-乙氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸
[2945][2946]
将3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(3g，7.179mmol)和(2r)-1-氨基丙-2-醇(885mg，11.78mmol)在thf(18ml)中合并，并添加叔丁醇钠(2.76g，28.72mmol)。反应混合物摸起来变暖并在没有任何另外的加热的情况下搅拌15分钟。然后将反应混合物添加到含有1mhcl和乙酸乙酯的分液漏斗中。将层分离，并且将水溶液用乙酸乙酯再萃取3次。将合并的有机物用盐水洗涤。此时，一些产物似乎开始从溶液中析出并且将盐水层用乙酸乙酯再萃取一次。将合并的有机物经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到白色固体3-[[4-[(1r)-2-氨基-1-甲基-乙氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(2.1g，59％)esi-ms m/z计算值456.14673，实验值457.1(m+1)
+
；保留时间：0.37分钟；(lc方法d)。1hnmr(500mhz,dmso)δ8.45(d,j＝2.4hz,1h),8.22(s,2h),8.14(dd,j＝13.6,7.8hz,2h),7.72(t,j＝7.8hz,1h),7.27(t,j＝7.7hz,1h),7.14(d,j＝7.5hz,2h),6.27(s,1h),5.11(t,j＝7.5hz,1h),3.19(d,j＝13.2hz,1h),3.08(t,j＝11.1hz,1h),2.02(d,j＝20.9hz,6h),1.30(d,j＝6.2hz,3h)。
[2947]
步骤2：2-[(10r)-6-(2,6-二甲基苯基)-10-甲基-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁酯
[2948][2949]
将3-[[4-[(1r)-2-氨基-1-甲基-乙氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(100mg，0.2191mmol)与对应的2-氧代-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁酯(大约104.9mg，0.4382mmol)在二氯甲烷(1ml)中合并，并在室温下搅拌。在5分钟之后，添加三乙酰氧基硼氢化钠(大约139.3mg，0.6573mmol)，并且将反应混合物在室温下搅拌30分钟。添加另外部分的三乙酰氧基硼氢化钠，并将反应在室温下再搅拌2小时。然后将反应混合物在1m hcl与乙酸乙酯之间分配。将层分离并且将水溶液用乙酸乙酯再萃取4次。将合并的有机物经硫酸钠干燥并浓缩。将所得粗物质在不进行进一步纯化的情况下用于下一步骤。将产物与hatu(大约108.3mg，0.2848mmol)在dmf(25ml)中合并，并且添加dipea(大约141.7mg，191.0μl，1.096mmol)并将反应在室温下搅拌6小时。将反应混合物在1m hcl与乙酸乙酯之间分配并将层分离。将水溶液用乙酸乙酯萃取两次，并且将合并的有机物用水和盐水洗涤并经硫酸钠干燥并浓缩。将所得粗通过硅胶柱色谱法纯化，用0-100％乙酸乙酯/
二氯甲烷洗脱，得到2-[(10r)-6-(2,6-二甲基苯基)-10-甲基-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁酯(40mg，28％)。esi-ms m/z计算值661.2934，实验值662.3(m+1)
+
；保留时间：0.74分钟；lc方法d。
[2950]
步骤3：(10r)-12-(7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)-6-(2,6-二甲基苯基)-10-甲基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮
[2951][2952]
将2-[(10r)-6-(2,6-二甲基苯基)-10-甲基-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁酯(40mg，0.06044mmol)溶解于dcm(0.3ml)中并添加hcl(4m的300μl，1.200mmol)。将反应在室温下搅拌30分钟然后浓度。添加己烷并且将反应混合物再次浓缩，得到白色固体(10r)-12-(7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)-6-(2,6-二甲基苯基)-10-甲基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)(36mg，100％)其在不进行进一步纯化的情况下用于下一步骤。esi-ms m/z计算值561.24097，实验值562.5(m+1)
+
；保留时间：0.43分钟；(lc方法d)。
[2953]
步骤4：(10r)-6-(2,6-二甲基苯基)-10-甲基-12-(7-甲基-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(化合物179)
[2954][2955]
将(10r)-12-(7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)-6-(2,6-二甲基苯基)-10-甲基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)(22mg，0.03678mmol)与甲酸(0.2ml)和甲醛水溶液(0.3ml，10.89mmol)合并，并在螺旋盖小瓶中加热至95℃16小时。在冷却至室温之后，将反应混合物
部分浓缩，过滤，用甲醇稀释并通过反相hplc(1-70％ acn/水，hcl改性剂，15分钟运行)纯化，得到呈白色固体的(10r)-6-(2,6-二甲基苯基)-10-甲基-12-(7-甲基-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)(4.1mg，18％)esi-ms m/z计算值575.25665，实验值576.5(m+1)
+
；保留时间：1.03分钟；lc方法a。
[2956]
实例142：化合物180的制备
[2957]
步骤1：(10r)-6-(2,6-二甲基苯基)-10-甲基-2,2-二氧代-12-螺[2.3]己-5-基-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(化合物180)
[2958][2959]
在室温下将3-[[4-[(1r)-2-氨基-1-甲基-乙氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(40mg，0.08762mmol)与螺[2.3]己-5-酮(大约16.84mg，0.1752mmol)化合物在二氯甲烷(0.3ml)中合并。在室温下搅拌5分钟之后，添加三乙酰氧基硼氢化钠(大约55.72mg，0.2629mmol)。在30分钟之后，添加第二部分三乙酰氧基硼氢化钠(大约55.72mg，0.2629mmol)，并且将反应混合物在室温下再搅拌一小时。然后将反应混合物在1m hcl与乙酸乙酯之间分配。将层分离，并且将水层用乙酸乙酯再萃取三次。将合并的有机物用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。将所得还原胺化产物在不进行进一步纯化的情况下用于下一步骤。在5分钟内将产物溶解于dmf(2ml)中并滴加到hatu(大约43.31mg，0.1139mmol)和dipea(大约56.62mg，76.31μl，0.4381mmol)于dmf(10ml)中的搅拌的溶液中。在添加完成之后，使反应混合物在室温下搅拌一小时，然后浓缩至1ml的体积，过滤并通过反相hplc纯化，得到(10r)-6-(2,6-二甲基苯基)-10-甲基-2,2-二氧代-12-螺[2.3]己-5-基-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(2.9mg，6％)。esi-ms m/z计算值518.1988，实验值519.3(m+1)
+
；保留时间：1.76分钟；lc方法a。
[2960]
实例143：化合物181的制备
[2961]
步骤1：2-[(10r)-6-(2,6-二异丙基苯基)-10-甲基-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸异丙酯(化合物181)
[2962][2963]
将2-[(10r)-6-(2,6-二甲基苯基)-10-甲基-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁酯(21mg，0.03173mmol)(sm中存在的几种主要杂质)溶解于二氯甲烷(0.5ml)中并添加hcl(4m的300μl，1.200mmol)。将反应混合物在室温下搅拌20分钟，并且然后浓度至固体残余物。将己烷和少量二氯甲烷添加到所得残余物中并蒸发，得到白色固体，其无需进一步纯化即用于第二步骤：(10r)-12-(7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)-6-(2,6-二甲基苯基)-10-甲基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)esi-ms m/z计算值561.24097，实验值562.4(m+1)
+
；保留时间：0.42分钟；(lc方法d)。
[2964]
将产物溶解于二氯甲烷(0.5ml)中并且添加三乙胺(25μl，0.1794mmol)，然后添加氯甲酸异丙酯(2m的30μl，0.06000mmol)。将反应在室温下搅拌5分钟，然后用三滴1m hcl淬灭。将反应混合物部分浓缩，然后溶解于1:1甲醇/dmso中，过滤并通过反相hplc(1-99％ acn/水，hcl改性剂，30分钟运行)纯化。将封闭洗脱杂质部分重叠并将产物用第二反相hplc(1-70％ acn/水，hcl改性剂，30分钟)进一步纯化，得到2-[(10r)-6-(2,6-二异丙基苯基)-10-甲基-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸异丙酯(4.2mg，20％)esi-ms m/z计算值647.2778，实验值648.5(m+1)
+
；保留时间：1.82分钟；(lc方法a)。
[2965]
实例144：化合物182的制备
[2966]
步骤1：(2r)-4,4-二甲基-2-(螺[2.3]己-5-基氨基)戊烷-1-醇
[2967][2968]
将(2r)-2-氨基-4,4-二甲基-戊烷-1-醇(盐酸盐)(504mg，3.0058mmol)溶解于dce(10ml)中并添加螺[2.3]己-5-酮(321mg，3.3393mmol)。将混合物在室温下搅拌30分钟，然后分3批添加三乙酰氧基硼氢化钠(1.92g，9.0591mmol)。使混合物搅拌过夜并且然后添加1m hcl，直到ph达到约1为止。将混合物剧烈搅拌20分钟。将层分离，并且将水层用dcm(10ml)萃取两次。将有机层用经硫酸钠干燥并浓缩，得到呈粘稠无色油的(2r)-4,4-二甲基-2-(螺[2.3]己-5-基氨基)戊烷-1-醇(570mg，90％)。1h nmr(250mhz,dmso)δ4.51(t,j＝5.5hz,1h),3.53-3.41(m,1h),3.35-3.25(m,1h),3.19-3.03(m,1h),2.18-2.01(m,2h),
2.02-1.85(m,2h),1.14(d,j＝4.8hz,2h),0.89(s,9h),0.47-0.27(m,4h)。
[2969]
步骤2：3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(2r)-4,4-二甲基-2-(螺[2.3]己-5-基氨基)戊氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸
[2970][2971]
在20ml小瓶中，向(2r)-4,4-二甲基-2-(螺[2.3]己-5-基氨基)戊烷-1-醇(145mg，0.6861mmol)于无水四氢呋喃(7ml)中的溶液中添加3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(275mg，0.6581mmol)。在氮气下将不均匀混合物搅拌2分钟，形成乳状乳液。向乳液中立即添加固体叔丁醇钾(336mg，2.994mmol)。将反应在室温下搅拌1.5小时。将反应混合物在乙酸乙酯(150ml)与1m hcl溶液(足以使ph值达到1)之间分配。将合并的有机物用盐水(10ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩。将粗通过反相hplc(c
18
柱)使用1-99％乙腈/水(5mm hcl作为改性剂)纯化15分钟，得到呈白色固体获得的3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(2r)-4,4-二甲基-2-(螺[2.3]己-5-基氨基)戊氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(207mg，50％)。esi-ms m/z计算值592.2719，实验值593.4(m+1)
+
；保留时间：1.32分钟；lc方法a。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ9.33(s,1h),8.47(s,1h),8.15(t,j＝8.3hz,2h),7.72(t,j＝7.9hz,1h),7.27(t,j＝8.4hz,1h),7.14(d,j＝7.5hz,2h),6.37(s,1h),4.33(d,j＝12.4hz,1h),4.21-4.11(m,1h),4.06-3.93(m,1h),3.17(s,1h),2.58-2.52(m,2h),2.19(t,j＝9.8hz,1h),2.12-2.08(m,1h),2.03(s,6h),1.69(dd,j＝14.8,8.8hz,1h),1.60(d,j＝14.4hz,1h),0.93(s,9h),0.55-0.46(m,2h),0.45-0.37(m,2h)。
[2972]
步骤3：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2-二氧代-12-螺[2.3]己-5-基-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(化合物182)
[2973][2974]
在4ml小瓶中，按该顺序向3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(2r)-4,4-二甲基-2-(螺[2.3]己-5-基氨基)戊氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(20mg，0.03179mmol)于无水dmf(1.2ml)中的搅拌的溶液中添加[二甲基氨基(三唑并[4,5-b]吡啶-3-基氧基)亚甲基]-二甲基铵(六氟化磷离子)(14mg，0.03682mmol)(hatu)和diea(30μl，0.1722mmol)。将氮气吹扫20秒并加盖。将反应在环境温度下搅拌6小时。将反应用二甲亚砜(0.5ml)稀释，微过滤(0.45um)并通过反相制备型hplc(c
18
)使用乙腈/水的梯度(15分钟内1至99％，hcl作为
基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(2.7mg，13％)。esi-ms m/z计算值610.26135，实验值611.3(m+1)
+
；保留时间：2.06分钟；lc方法a。
[2982]
实例146：化合物184的制备
[2983]
步骤1：(2r)-2-[(1-叔丁基吡唑-4-基)氨基]-4,4-二甲基-戊烷-1-醇
[2984][2985]
将1-叔丁基-4-碘代吡唑(大约149.2mg，0.5965mmol)与(2r)-2-氨基-4,4-二甲基-戊烷-1-醇(盐酸盐)(100mg，0.5964mmol)、cui(大约11.36mg，0.05965mmol)和naoh(大约95.43mg，2.386mmol)(用研钵和研杵研磨)在螺旋盖小瓶中合并，然后用氮气吹扫。添加dmso(0.3ml)和水(0.15ml)并将反应混合物在90℃下搅拌16小时。在冷却至室温之后，将反应混合物用甲醇过滤并稀释。将滤液通过旋转蒸发浓缩并且将所得残余物溶解于1:1dmso/甲醇中，再次过滤并通过反相hplc(1-50％ acn/水，hcl改性剂，15分钟运行)纯化，在干燥之后得到指定的(2r)-2-[(1-叔丁基吡唑-4-基)氨基]-4,4-二甲基-戊烷-1-醇(盐酸盐)(75mg，43％)。esi-ms m/z计算值253.21541，实验值254.7(m+1)
+
；保留时间：0.39分钟；lc方法d。
[2986]
步骤2：(11r)-12-(1-叔丁基吡唑-4-基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(化合物184)
[2987][2988]
将(2r)-2-[(1-叔丁基吡唑-4-基)氨基]-4,4-二甲基-戊烷-1-醇(盐酸盐)(75mg，0.2588mmol)与3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(大约83.20mg，0.1991mmol)在thf(0.75ml)中合并，并搅拌直到固体大部分溶解/变成悬浮液为止。添加叔丁醇钠(大约114.8mg，1.195mmol)并且反应短暂变得稍微温热。在没有外部加热的情况下继续搅拌15分钟。然后将反应混合物在1m hcl与乙酸乙酯之间分配。将层分离，并且将水溶液用乙酸乙酯再萃取4次。将合并的有机物用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。将所得粗物质溶解于1:1dmso/甲醇中，过滤并通过反相hplc(1-60％ acn/水，hcl改性剂，15分钟运行)纯化，得到snar产物。将产物溶解于dmf(8ml)中并添加nmm(大约60.42mg，65.67μl，0.5973mmol)。将反应混合物冷却至0℃并添加cdmt(大约52.43mg，0.2986mmol)。在冰融化时使反应温热至室温并搅拌48小时。将反应混合物用几滴水淬灭，部分浓缩，用1:1dmso/甲醇稀释，过滤并通过反相hplc(1-70％acn/水，hcl改性剂，30分钟运行)纯化，得到(11r)-12-(1-叔丁基吡唑-4-基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六
烯-13-酮(8.9mg，7％)。esi-ms m/z计算值616.2832，实验值617.8(m+1)
+
；保留时间：1.87分钟；lc方法a。
[2989]
实例147：化合物185的制备
[2990]
步骤1：(2r)-2-[(1-苄基吡唑-4-基)氨基]-4,4-二甲基-戊烷-1-醇
[2991][2992]
将cui(73mg，0.3833mmol)、naoh(610mg，15.251mmol)(新研磨的)、(2r)-2-氨基-4,4-二甲基-戊烷-1-醇(盐酸盐)(500mg，2.9819mmol)和1-苄基-4-碘-吡唑(1.08g，3.8015mmol)在压力小瓶中合并并用氮气吹扫。添加dmso(6ml)和水(3ml)。然后将反应混合物加热至90℃16小时。然后将反应混合物冷却至室温，在硅藻土垫上过滤并用etoac和水漂洗。添加饱和氯化铵水溶液(40ml)以中和碱，并且将产物用etoac(3
×
10ml)萃取。将合并的有机层用10％盐水洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并在减压下浓缩。将粗残余物通过40g硅胶柱筒色谱法使用30-100％ etoac/庚烷并且然后0-20％ meoh/etoac的梯度纯化，得到呈浅橙色油的(2r)-2-[(1-苄基吡唑-4-基)氨基]-4,4-二甲基-戊烷-1-醇(300mg，35％)。esi-ms m/z计算值287.19977，实验值288.4(m+1)
+
；保留时间：1.34分钟；lc方法x。1h nmr(400mhz,cdcl3)δ7.37-7.29(m,3h),7.22-7.16(m,3h),6.96(s,1h),5.21(s,2h),3.67(dd,j＝10.8,3.9hz,1h),3.34(dd,j＝10.6,6.7hz,1h),3.06(dt,j＝10.8,5.4hz,1h),2.32(br.s.,1h),1.40-1.31(m,2h),0.92(s,9h)。
[2993]
步骤2：3-[[4-[(2r)-2-[(1-苄基吡唑-4-基)氨基]-4,4-二甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸
[2994][2995]
向(2r)-2-[(1-苄基吡唑-4-基)氨基]-4,4-二甲基-戊烷-1-醇(900mg，3.1315mmol)于thf(10ml)中的溶液中添加氢化钠(矿物油中的60％)(355mg，60％w/w，8.8759mmol)并将反应混合物在室温下搅拌0.5小时。然后添加3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(1.3g，2.8614mmol)并将反应混合物在室温下搅拌16小时。添加另一部分氢化钠(60％在矿物油中)(115mg，60％w/w，2.8753mmol)，并将反应混合物在室温下搅拌1小时。添加2-methf(25ml)，然后添加1n hcl水溶液(25ml)。将相分离，并将水相用2-methf(2
×
25ml)洗涤。将合并的有机层用盐水(25ml)洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并在减压下浓缩。将残余物通过50g c
18
筒反相色谱法使用10-100％ meoh/水的梯度(含0.1％ hcl)纯化两次。将纯级分在meoh/水中冻干，得到呈橙红色固体的3-[[4-[(2r)-2-[(1-苄基吡唑-4-基)氨基]-4,4-二甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(1.49g，74％)。esi-ms m/z计算值668.2781，实验值669.2(m+1)
+
；保留时间：1.83分钟；lc方法x。
[2996]
步骤3：(11r)-12-(1-苄基吡唑-4-基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮
[2997][2998]
向n-甲基吗啉(5.8880g，6.4ml，58.212mmol)于dmf(1l)中的0℃溶液中添加2-氯-4,6-二甲氧基-1,3,5-三嗪(3.5g，19.935mmol)，然后添加3-[[4-[(2r)-2-[(1-苄基吡唑-4-基)氨基]-4,4-二甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(9.9g，13.448mmol)。在5分钟之后，将反应回到室温并搅拌64小时。将反应混合物在50℃下在减压下浓缩。将剩余的粗用dcm(250ml)稀释。将该溶液用水和盐水的1:1v/v混合物(4
×
150ml)、水(2
×
100ml)和盐水(100ml)洗涤。将所得有机层经硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩。将粗通过快速色谱法使用120g筒纯化，用etoac/dcm的梯度(在25cv中为0至100％)洗脱。首先得到呈类白色固体的(10r)-9-(1-苄基吡唑-4-基)-6-(2,6-二甲基苯基)-10-(2,2-二甲基丙基)-2,2-二氧代-12-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,9,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(750mg，8％)esi-ms m/z计算值650.2675，实验值651.2(m+1)
+
；保留时间：4.27分钟，并且然后得到呈类白色固体的(11r)-12-(1-苄基吡唑-4-基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(1.4g，14％)esi-ms m/z计算值650.2675，实验值651.2(m+1)
+
；保留时间：4.27分钟；lc方法y。
[2999]
步骤4：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2-二氧代-12-(1h-吡唑-4-基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(化合物185)
[3000][3001]
向密封管中的氢氧化钯20％w/w，50％水(280mg，10％w/w，0.1994mmol)添加(11r)-12-(1-苄基吡唑-4-基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(1.4g，2.1491mmol)于meoh(10ml)中的溶液。在70psi的氢气下对管加压并将反应温热至70℃24小时。将反应混合物回到室温并将管用n2吹扫。将粗经硅藻土过滤，用meoh(80ml)冲洗。将挥发物在真空下去除。将粗物质再次溶解于meoh(10ml)中并添加到氢氧化钯20％w/w，50％水(320mg，10％w/w，0.2279mmol)中。在70psi的氢气下对管加压并将
反应温热至70℃24小时。将反应混合物回到室温并将管用n2吹扫。将粗经硅藻土过滤，用meoh(70ml)和methf(40ml)冲洗。将挥发物在真空下去除。将粗物质再次溶解于meoh(10ml)中并添加到氢氧化钯20％w/w，50％水(260mg，10％w/w，0.1851mmol)中。在70psi的氢气下对管加压并将反应温热至70℃24小时。将反应混合物回到室温并将管用n2吹扫。将粗经硅藻土过滤，用meoh和methf的1:1v/v混合物(200ml)冲洗。将挥发物在真空下去除。将粗残余物通过反相色谱法在两个相等的批次上每次使用20g c
18
筒纯化，在15cv中用40至70％的mecn/酸性水(0.1％v/v甲酸)的梯度洗脱。将含有目标化合物的级分在真空下浓缩至三分之一体积并将所得固体过滤。得到呈白色固体的(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-2,2-二氧代-12-(1h-吡唑-4-基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(320mg，23％)。esi-ms m/z计算值560.2206，实验值561.2(m+1)
+
；保留时间：3.54分钟；lc方法y.1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ13.05(br.s.,1h),8.72(br.s.,1h),7.97(br.s.,2h),7.73(br.s.,2h),7.69-7.58(m,1h),7.26(t,j＝7.8hz,1h),7.17-7.07(m,2h),6.40(br.s.,1h),5.44(d,j＝7.6hz,1h),4.04-3.89(m,2h),2.26-1.82(m,6h),1.53(dd,j＝15.0,7.2hz,1h),1.17(d,j＝14.9hz,1h),0.55(s,9h)。
[3002]
实例148：化合物186的制备
[3003]
步骤1：3-[[4-氯-6-[(2r)-4-甲基-2-(螺[2.3]己-5-基氨基)戊氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸
[3004][3005]
在反应小瓶中，将3-[(4,6-二氯嘧啶-2-基)氨磺酰基]苯甲酸(2.02g，5.802mmol)和(2r)-4-甲基-2-(螺[2.3]己-5-基氨基)戊烷-1-醇(盐酸盐)(1.37g，5.860mmol)溶解于thf(12.5ml)中，然后添加叔丁醇钠(2.79g，29.03mmol)。将反应在室温下搅拌45分钟。然后将反应混合物在乙酸乙酯与1mhcl溶液之间分配。将有机物分离，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并蒸发至干燥。将固体物质在50％乙酸乙酯/己烷中制成浆液，然后过滤，得到产物(hcl盐)。3-[[4-氯-6-[(2r)-4-甲基-2-(螺[2.3]己-5-基氨基)戊氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(2.6157g，80％)。esi-ms m/z计算值508.15472，实验值509.3(m+1)
+
；保留时间：1.24分钟；(lc方法a)。
[3006]
步骤2：(11r)-6-氯-11-异丁基-2,2-二氧代-12-螺[2.3]己-5-基-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-酮
[3007][3008]
将hatu(3.8g，9.9940mmol)添加到3-[[4-氯-6-[(2r)-4-甲基-2-(螺[2.3]己-5-基氨基)戊氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(2.7g，4.9498mmol)和diea(3.2g，4.3127ml，24.760mmol)于dmf(300ml)中的溶液中，并使所得混合物在室温下搅拌十七小时。将反应混合物滴加到快速搅拌的水(1.5l)中，然后使用1m盐酸将ph调节至3-4。将所得沉淀通过真空过滤收集，然后用水(50ml)研磨。将固体通过真空过滤收集，在真空中干燥，然后通过硅胶色谱法使用0至60％乙酸乙酯/己烷纯化，得到(11r)-6-氯-11-异丁基-2,2-二氧代-12-螺[2.3]己-5-基-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-酮(1.4g，58％)。esi-ms m/z计算值490.14417，实验值491.7(m+1)
+
；保留时间：6.64分钟；lc方法s。
[3009]
步骤3：(11r)-6-氯-11-异丁基-3-(甲氧基甲基)-2,2-二氧代-12-螺[2.3]己-5-基-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-酮
[3010][3011]
将碳酸钾(236mg，1.7076mmol)添加到(11r)-6-氯-11-异丁基-2,2-二氧代-12-螺[2.3]己-5-基-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-酮(300mg，0.6110mmol)和氯(甲氧基)甲烷(92mg，0.0868ml，1.1427mmol)的溶液中，并使所得浆液在室温下搅拌四小时。将反应用少量水淬灭，然后用dcm(6ml)稀释。将相分离：将水相丢弃并且将有机相在真空中干燥并通过硅胶色谱法使用0-60％乙醚/己烷纯化，得到(11r)-6-氯-11-异丁基-3-(甲氧基甲基)-2,2-二氧代-12-螺[2.3]己-5-基-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-酮(190mg，55％)。esi-ms m/z计算值534.17035，实验值535.2(m+1)
+
；保留时间：7.44分钟；lc方法s。
[3012]
步骤4：(11r)-6-[2,6-双(三氟甲基)苯基]-11-异丁基-2,2-二氧代-12-螺[2.3]己-5-基-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4,6,8(19),14,16-六烯-13-酮(化合物186)
基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(1.867g，71％)。esi-ms m/z计算值789.3383，实验值790.5(m+1)
+
；保留时间：1.55分钟。(lc方法a)。
[3019]
步骤2：2-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-2,2,13-三氧代-11-(3,3,3-三氟-2,2-二甲基丙基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-12-基]-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁酯(化合物187)
[3020][3021]
在氮气下向250ml烧瓶中装入hatu(1.75g，4.602mmol)、无水dmf(40ml)和diea(2ml，11.48mmol)。通过注射器在10分钟的时间段内滴加3-[[4-[(2r)-2-[(7-叔丁氧基羰基-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)氨基]-5,5,5-三氟-4,4-二甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(1.867g，2.259mmol)于无水dmf(20ml)中的溶液。将混合物在室温下搅拌17小时。将混合物浓缩。将残余物在etoac(50ml)与1n hcl(1m)之间分配。将水相用盐水(25ml)洗涤。在经硫酸钠干燥并将溶剂蒸发之后，将固体溶解于dcm和少量甲醇中并通过硅胶快速色谱法(120g柱)使用乙酸乙酯/己烷的梯度(30分钟内15至100％)纯化。产物洗脱出约60％ etoac。将纯级分合并，并将溶剂蒸发，得到呈白色固体的2-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-2,2,13-三氧代-11-(3,3,3-三氟-2,2-二甲基丙基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-12-基]-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁酯(261mg，15％)。esi-ms m/z计算值771.32776，实验值772.46(m+1)
+
；保留时间：2.18分钟(lc方法a)。
[3022]
实例150：化合物188、化合物189和化合物190的制备
[3023]
步骤1：(11r)-12-{7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基}-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(3,3,3-三氟-2,2-二甲基丙基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮
[3024]
[3025]
将含有2-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-2,2,13-三氧代-11-(3,3,3-三氟-2,2-二甲基丙基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-12-基]-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁酯(257mg，0.3263mmol)的100ml烧瓶在室温下用dcm(2ml)和hcl(4m的1ml，4.000mmol)(二噁烷中的4m)处理2小时。通过蒸发去除挥发物。添加dcm和己烷，并且将溶剂蒸发。重复操作，直到获得白色固体为止。在真空下干燥得到呈白色固体的(11r)-12-{7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基}-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(3,3,3-三氟-2,2-二甲基丙基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮(盐酸盐)(256mg，111％)。esi-ms m/z计算值671.2753，实验值672.35(m+1)
+
；保留时间：1.43分钟(lc方法a)。
[3026]
步骤2：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-12-[7-(2-甲氧基乙基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基]-11-(3,3,3-三氟-2,2-二甲基丙基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮(化合物190)，以及(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-12-[7-(3-甲氧基丙基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基]-11-(3,3,3-三氟-2,2-二甲基丙基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮(化合物188)，以及(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-12-{7-[2-(丙烷-2-基氧基)乙基]-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基}-11-(3,3,3-三氟-2,2-二甲基丙基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮(化合物189)
[3027][3028]
三个烷基化反应在不同的小瓶中进行。对于每个反应，在氮气下向4ml小瓶中装入粗(11r)-12-{7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基}-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(3,3,3-三氟-2,2-二甲基丙基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮(盐酸盐)(25mg，0.03530mmol)、无水乙腈(500μl)、diea(35μl，0.2009mmol)和1-溴-2-甲氧基-乙烷(11μl，0.1171mmol)(反应a)、1-溴-3-甲氧基-丙烷(12μl，0.1067mmol)(反应b)或2-(2-溴乙氧基)丙烷(18mg，0.1078mmol)(反应c)。将小瓶用氮气短暂吹扫，加盖并在55℃下剧烈搅拌15小时。(反应b完成)。对于反应a和c，添加更多烷基化剂(与之前相同的量)并将混合物再搅拌7小时(反应c完成)。向反应物a中添加另一量的烷基化剂和2滴dmso，并将其搅拌过夜。对于每个反应，将溶液稀释于dmso(0.5ml)中，通过注射器过滤盘微过滤并通过反相制备型hplc(c
18
)使用乙腈/水的梯度(15分钟内1至99％)和hcl作为改性剂纯化，分别得到三种化合物。反应a：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-12-[7-(2-甲氧基乙基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基]-11-(3,3,3-三氟-2,2-二甲基丙基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮(盐酸盐)(6mg，22％)。esi-ms m/z计算值729.3172，实验值730.77(m+1)
+
；保留时间：1.38分钟(lc方法a)；反应b：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-12-[7-(3-甲氧基丙基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基]-11-(3,3,3-三氟-2,2-二甲基丙基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮(盐酸盐)(9.7mg，34％)。esi-ms m/z计算值743.3328，实验值
744.78(m+1)
+
；保留时间：1.39分钟(lc方法a)；以及反应c：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-12-{7-[2-(丙烷-2-基氧基)乙基]-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基}-11-(3,3,3-三氟-2,2-二甲基丙基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮(盐酸盐)(12.3mg，44％)。esi-ms m/z计算值757.34845，实验值758.97(m+1)
+
；保留时间：1.49分钟(lc方法a)。
[3029]
实例151：化合物191的制备
[3030]
步骤1：2-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-2,2,13-三氧代-11-(3,3,3-三氟-2,2-二甲基丙基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-12-基]-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸甲酯(化合物191)
[3031][3032]
向4ml小瓶中装入(11r)-12-{7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基}-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(3,3,3-三氟-2,2-二甲基丙基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮(盐酸盐)(22mg，0.03106mmol)、dcm(0.5ml)和diea(28μl，0.1608mmol)。添加氯甲酸甲酯(5μl，0.06471mmol)(纯)，并且将混合物在室温下搅拌1小时。添加少量甲醇，并且将溶剂蒸发。添加dmso(1ml)。将溶液通过注射器过滤盘微过滤并通过反相制备型hplc(c
18
)使用乙腈/水的梯度(15分钟内1至99％)和hcl作为改性剂纯化，得到呈白色固体的2-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-2,2,13-三氧代-11-(3,3,3-三氟-2,2-二甲基丙基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-12-基]-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸甲酯(12mg，53％)。esi-ms m/z计算值729.28076，实验值730.7(m+1)
+
；保留时间：1.69分钟(lc方法a)。
[3033]
实例152：化合物192、化合物193和化合物194的制备
[3034]
步骤1：3-[[4-[(2r)-2-[[3-(叔丁氧基羰基氨基)环丁基]氨基]-5,5,5-三氟-4,4-二甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸
[3035][3036]
在氮气下，向100ml烧瓶中装入3-[[4-[(2r)-2-氨基-5,5,5-三氟-4,4-二甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(2.08g，3.208mmol)、n-(3-氧代环丁基)氨基甲酸叔丁酯(597mg，3.223mmol)、无水dcm(5ml)j并且将混合物搅拌5-10分钟直到所有固体溶解为止。添加乙酰氧基硼氢化钠(钠盐)(2.51g，11.84mmol)并将混合物在室温下搅拌2小时。将混合物放置在冷冻箱中过夜。添加更多n-(3-氧代环丁基)氨基甲酸叔丁酯(342mg，1.846mmol)和dcm(2ml)和三乙酰氧基硼氢化钠(钠盐)(730mg，3.444mmol)并将混合物在室温下搅拌4小时(90％转化)。添加更多三乙酰氧基硼氢化钠(730mg，3.444mmol)并将混合物再搅拌3小时(无进一步释放)。将反应通过缓慢添加meoh(10ml)、1n hcl(30ml)和乙酸乙酯(30ml)淬灭。添加盐水并将两个相分离。将有机相用etoac(30ml)萃取。将合并的萃取物经硫酸钠干燥并浓缩。将残余物在乙醚(150ml)中研磨并且将所得类白色固体过滤并干燥，得到呈异构体的混合物的粗3-[[4-[(2r)-2-[[3-(叔丁氧基羰基氨基)环丁基]氨基]-5,5,5-三氟-4,4-二甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(2.111g，85％)(大约比率70:30)。esi-ms m/z计算值735.2914，实验值736.63(m+1)
+
；保留时间：1.35分钟(主要异构体)以及保留时间：1.36分钟(次要异构体)(lc方法a)。
[3037]
步骤2：n-{3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯乙基)-2,2,13-三氧代-11-(3,3,3-三氟-2,2-二甲基丙基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-12-基]环丁基}氨基甲酸叔丁酯，主要非对映异构体1(化合物193)，以及n-{3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯乙基)-2,2,13-三氧代-11-(3,3,3-三氟-2,2-二甲基丙基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-12-基]环丁基}氨基甲酸叔丁酯，次要非对映异构体2(化合物194)
[3038][3039]
在氮气下向250ml烧瓶中装入comu(2.398g，5.599mmol)、无水dmf(60ml)和diea(2.5ml，14.35mmol)。通过注射器在5分钟的时间段内滴加3-[[4-[(2r)-2-[[3-(叔丁氧基羰基氨基)环丁基]氨基]-5,5,5-三氟-4,4-二甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(2.111g，2.733mmol)于无水dmf(40ml)中的溶液。将混合物在室温下搅拌22小时。将混合物浓缩并用dcm稀释。将粗溶液通过硅胶快速色谱法(120g柱)使用乙酸乙酯/己烷的梯度(30分钟内10至100％)纯化。产物洗脱约60-70％ ea(作为两个非基线分离的峰)。溶剂的蒸发得到呈黄色固体的粗n-{3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯乙基)-2,2,13-三氧代-11-(3,3,3-三氟-2,2-二甲基丙基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-12-基]环丁基}氨基甲酸叔丁酯(852mg，43％)和异构体的混合物(70:30比率)。esi-ms m/z计算值717.28076，实验值718.68(m+1)
+
；保留时间：1.91分钟(主要)以及保留时间：1.95分钟(次要)(lc方法a)。将163mg的该粗混合物放在一旁。
[3040]
将剩余的物质(698mg)溶解于dmso(8ml)中。将溶液通过注射器过滤盘微过滤并通过反相制备型hplc(c
18
)使用乙腈/水的梯度(20分钟内40至80％)和hcl作为改性剂，提供两个异构体。对于每个异构体，将纯级分合并。将有机溶剂蒸发。添加少量盐水，并且将产物用etoac萃取。在经硫酸钠干燥之后，将残余物在etoac/己烷中研磨并将溶剂蒸发，得到产物。主要和更多极性的非对映异构体1，n-{3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯乙基)-2,2,13-三氧代-11-(3,3,3-三氟-2,2-二甲基丙基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-12-基]环丁基}氨基甲酸叔丁酯(335mg，30％)。esi-ms m/z计算值717.28076，实验值718.75(m+1)
+
；保留时间：1.92分钟(lc方法a)，1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ13.56-11.81(宽m,1h),8.44(s,1h),7.93(s,1h),7.69(s,2h),7.34-7.19(m,2h),7.12(d,j＝7.6hz,2h),6.42(br s,1h),5.14(dd,j＝11.0,4.4hz,1h),4.39-4.15(m,2h),4.07(br s,1h),3.82(br s,1h),3.18(dt,j＝28.6,9.2hz,2h),2.26-1.67(m,10h),1.40(s,9h),0.84(s,3h),0.59(s,3h)；以及次要和更少极性的非对映异构体2，n-{3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯乙基)-2,2,13-三氧代-11-(3,3,3-三氟-2,2-二甲基丙基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-12-基]环丁基}氨基甲酸叔丁酯(152mg，31％)。esi-ms m/z计算值717.28076，实验值718.71(m+1)
+
；保留时间：1.97分钟(lc方法a)。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ13.59-11.95(宽m，1h)，8.45(s,1h),7.93(s,1h),7.68(s,2h),7.35-7.18(m,
三氟-2,2-二甲基丙基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮(盐酸盐)(32mg，0.04892mmol)(主要异构体，非对映异构体1)、dcm(1ml)和diea(42μl，0.2411mmol)。添加氯甲酸异丙酯(2m的30μl，0.06000mmol)(2m甲苯溶液)，并且将混合物在室温下搅拌4小时(60％转化)。添加更多氯甲酸异丙酯(2m的30μl，0.06000mmol)并且将混合物搅拌1.5小时。添加少量甲醇，并且将溶剂蒸发。添加dmso(1ml)。将溶液通过注射器过滤盘微过滤并通过反相制备型hplc(c
18
)使用乙腈/水的梯度(15分钟内1至99％)和hcl作为改性剂纯化，得到呈白色固体的n-{3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-2,2,13-三氟-11-(3,3,3-三氟-2,2-二甲基丙基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-12-基]环丁基}氨基甲酸丙烷-2-基酯(24.2mg，70％)。esi-ms m/z计算值703.26514，实验值704.74(m+1)
+
；保留时间：1.83分钟。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ13.57-11.65(宽m，1h),8.45(s,1h),7.93(s,1h),7.69(s,2h),7.45(d,j＝7.1hz,1h),7.34-7.21(m,1h),7.12(d,j＝7.6hz,2h),6.42(br s,1h),5.14(dd,j＝11.0,4.3hz,1h),4.76(hept,j＝6.3hz,1h),4.30-4.20(m,2h),4.17-3.99(m,1h),3.82(br s,1h),3.28-3.05(m,2h),2.31-1.65(m,10h),1.18(d,j＝6.2hz,6h),0.83(s,3h),0.60(s,3h),(lc方法a)。
[3047]
实例153：化合物195的制备
[3048]
步骤1：(11r)-12-(3-氨基环丁基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(3,3,3-三氟-2,2-二甲基丙基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮，次要非对映异构体2
[3049][3050]
将含有n-{3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯乙基)-2,2,13-三氧代-11-(3,3,3-三氟-2,2-二甲基丙基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-12-基]环丁基}氨基甲酸叔丁酯(124mg，0.1728mmol)(更少极性的次要异构体b，非对映异构体2)的100ml烧瓶在室温下用dcm(1.6ml)和hcl(4m的1.4ml，5.600mmol)(二噁烷中的4m)处理4小时。去除挥发物。将残余物用dcm/己烷处理并且将溶剂通过蒸发去除。将操作重复若干次，直到获得固体为止。分离出呈类白色固体的(11r)-12-(3-氨基环丁基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(3,3,3-三氟-2,2-二甲基丙基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮(盐酸盐)，非对映异构体2(129mg，98％)。esi-ms m/z计算值617.22833，实验值618.66(m+1)
+
；保留时间：1.21分钟。esi-ms m/z计算值617.22833，实验
值618.66(m+1)
+
；保留时间：1.21分钟(lc方法a)。
[3051]
步骤2：n-{3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-2,2,13-三氟-11-(3,3,3-三氟-2,2-二甲基丙基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-12-基]环丁基}氨基甲酸丙烷-2-基酯(化合物195)
[3052][3053]
向4ml小瓶中装入(11r)-12-(3-氨基环丁基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(3,3,3-三氟-2,2-二甲基丙基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-2,2,13-三酮(盐酸盐)(30mg，0.03944mmol)(次要非对映异构体2)、dcm(1ml)和diea(34μl，0.1952mmol)。添加氯甲酸异丙酯(2m的24μl，0.04800mmol)(2m甲苯溶液)，并且将混合物在室温下搅拌4小时(60％转化)。添加更多氯甲酸异丙酯(2m的24μl，0.04800mmol)并且将混合物搅拌1.5小时。添加少量甲醇，并且将溶剂蒸发。添加dmso(1ml)。将溶液通过注射器过滤盘微过滤并通过反相制备型hplc(c
18
)使用乙腈/水的梯度(15分钟内1至99％)和hcl作为改性剂纯化，得到呈白色固体的n-{3-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-2,2,13-三氟-11-(3,3,3-三氟-2,2-二甲基丙基)-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(17),4(19),5,7,14(18),15-六烯-12-基]环丁基}氨基甲酸丙烷-2-基酯(20.2mg，73％)。esi-ms m/z计算值703.26514，实验值704.67(m+1)
+
；保留时间：1.86分钟(lc方法a)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ13.54-11.69(宽m,1h),8.45(s,1h),7.93(s,1h),7.68(s,2h),7.41-7.19(m,2h),7.12(d,j＝7.5hz,2h),6.40(br s,1h),5.16(dd,j＝11.0,4.3hz,1h),4.74(p,j＝6.2hz,1h),4.34(t,j＝11.2hz,1h),3.89-3.66(m,3h),2.78(q,j＝10.0hz,2h),2.52(m,2h,与dmso重叠),2.27-1.81(m,7h),1.75(d,j＝15.7hz,1h),1.16(d,j＝6.2hz,6h),0.86(s,3h),0.64(s,3h)。
[3054]
实例154：化合物196的制备
[3055]
步骤1：4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)吡啶-2-胺
[3056][3057]
向(2,6-二甲基苯基)硼酸(11.515g，76.775mmol)和4,6-二氯吡啶-2-胺(12.513g，76.765mmol)于甲苯(425ml)和etoh(213ml)中的搅拌的溶液中添加碳酸钠水溶液(2m的115ml，230.00mmol)，并将反应混合物用氮气脱气45分钟。然后添加pd(dppf)cl2(6.271g，7.6791mmol)，再继续脱气15分钟。然后将反应小瓶密封，并且将混合物加热至100
℃并在该温度下搅拌24小时。在此之后，将挥发物在减压下去除，并且将残余物用乙酸乙酯(3
×
200ml)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在减压下浓缩。将粗产物通过硅胶柱色谱法(0-25％ etoac/己烷)纯化，并用己烷研磨，得到呈类白色固体的4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)吡啶-2-胺(6.469g，34％)。esi-ms m/z计算值232.07672，实验值233.1(m+1)
+
；保留时间：2.31分钟；(lc方法t)。
[3058]
步骤2：3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)-2-吡啶基]氨磺酰基]苯甲酸甲酯
[3059][3060]
在-78℃和氮气下，向4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)吡啶-2-胺(4.9g，20.635mmol)和3-氯磺酰基苯甲酸甲酯(4.9g，20.046mmol)于thf(200ml)中的溶液中滴加双(三甲基甲硅烷基)氨基锂(1m的45ml，45.000mmol)。将反应混合物在-78℃下搅拌30分钟；然后温热至0℃并在0℃下搅拌2小时。将反应用冷1.0m盐酸(50ml)淬灭并用水(200ml)稀释。将混合物用乙酸乙酯(2
×
400ml)萃取。将有机层合并，用盐水(500ml)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将残余物通过色谱法使用0-20％乙酸乙酯/己烷纯化，得到呈白色固体的3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)-2-吡啶基]氨磺酰基]苯甲酸甲酯(6.2g，68％)。esi-ms m/z计算值430.0754，实验值431.5(m+1)
+
；保留时间：3.65分钟；(lc方法t)。
[3061]
步骤3：3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)-2-吡啶基]氨磺酰基]苯甲酸
[3062][3063]
在室温下，向3-[4-氯-6-(2,6-二甲基-苯基)-吡啶-2-基氨磺酰基]-苯甲酸甲酯(5.3g，12.3mmol)于四氢呋喃(80ml)和水(80ml)的混合物中的搅拌的溶液中添加氢氧化锂一水合物(1.55g，36.9mmol)并将反应混合物在45℃下搅拌2小时。将四氢呋喃在真空下去除，并且将残余物用水(100ml)稀释。将水层用乙醚(2
×
50ml)、己烷(50ml)洗涤并用1.0m盐酸酸化至ph＝2-3。将沉淀的产物通过过滤收集并在75℃下的真空烘箱中干燥至恒重，得到呈白色固体的3-[4-氯-6-(2,6-二甲基-苯基)-吡啶-2-基氨磺酰基]-苯甲酸(4.8g，93％).1h nmr(250mhz,dmso-d6)δ(ppm):8.32(d,j＝1.9hz,1h),8.14(d,j＝7.7hz,1h),8.03(d,j＝8.0hz,1h),7.63(t,j＝7.8hz,1h),7.28-6.96(m,5h),1.77(s,6h)。esi-ms m/z计算值416.8，实验值417.0(m1)。保留时间：5.11分钟。
[3064]
步骤4：3-[[4-[(2r)-2-氨基-4-甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)-2-吡啶基]氨磺酰基]苯甲酸
[3065]
[3066]
按该顺序向20ml小瓶中装入3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)-2-吡啶基]氨磺酰基]苯甲酸(300mg，0.7196mmol)、(2r)-2-氨基-4-甲基-戊烷-1-醇(110mg，0.9387mmol)和无水四氢呋喃(12ml)。然后将小瓶用氮气吹扫30秒，并且在氮气下加盖添加固体叔丁醇钾(350mg，3.119mmol)。在105℃下搅拌14小时(过夜)之后，使反应冷却至环境温度。然后添加冰乙酸(200μl，3.517mmol)，并且将挥发物在减压下去除。向残余物中添加dmso(5ml)并微过滤。通过反相色谱法(c
18
柱，15分钟内1-99％乙腈/水)纯化，得到呈淡黄色固体的3-[[4-[(2r)-2-氨基-4-甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)-2-吡啶基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(278mg，72％)。esi-ms m/z计算值497.19846，实验值498.2(m+1)
+
；保留时间：0.43分钟(lc方法d)。
[3067]
步骤5：3-[[4-[(2r)-2-[(7-叔丁氧基羰基-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)氨基]-4-甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)-2-吡啶基]氨磺酰基]苯甲酸
[3068][3069]
在50ml圆底烧瓶中，在环境温度下按该顺序向3-[[4-[(2r)-2-氨基-4-甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)-2-吡啶基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(300mg，0.6029mmol)和2-氧代-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁酯(300mg，1.254mmol)于无水1,2-二氯乙烷(6ml)中的搅拌的不均匀混合物中添加三乙胺(250μl，1.794mmol)和冰乙酸(50μl，0.8792mmol)。将棕黄色溶液在氮气下在环境温度下搅拌约30分钟。然后添加三乙酰氧基硼氢化钠(500mg，2.359mmol)并在室温下继续搅拌过夜(总共14小时)。添加甲醇(2ml)并且在减压下去除挥发物。将残余物溶于dmso(5ml)中。将溶液微过滤并通过反相制备型色谱法(c
18
)使用1-99％乙腈/水(15分钟内)和hcl作为改性剂纯化。期望的级分的genevac蒸发得到呈白色固体的期望的3-[[4-[(2r)-2-[(7-叔丁氧基羰基-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)氨基]-4-甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)-2-吡啶基]氨磺酰基]苯甲酸(271mg，62％).1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ8.39(s,1h),8.08(d,j＝7.7hz,1h),8.00(d,j＝7.8hz,1h),7.62(t,j＝7.6hz,1h),7.25(d,j＝8.0hz,2h),7.18(d,j＝7.6hz,1h),7.11(d,j＝7.4hz,2h),6.73(s,1h),6.44-6.38(m,1h),4.02(s,2h),3.23-3.19(m,2h),3.16-3.09(m,2h),3.01-2.93(m,1h),1.98(s,6h),1.77-1.68(m,1h),1.61-1.46(m,2h),1.45-1.40(m,2h),1.39(s,9h),1.35-1.28(m,2h),0.88(d,j＝6.6hz,3h),0.85(d,j＝6.4hz,3h)。esi-ms m/z计算值720.35565，实验值721.5(m+1)
+
；保留时间：0.58分钟，lc方法d。
[3070]
步骤6：2-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12-三氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁酯
硫杂-3,5,12-三氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)(33mg，101％)。esi-ms m/z计算值602.29266，实验值603.5(m+1)
+
；保留时间：1.3分钟，lc方法a。
[3076]
步骤8：2-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12-三氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸甲酯(化合物196)
[3077][3078]
在1分钟内向(11r)-12-(7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12-三氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(盐酸盐)(32mg，0.05006mmol)和三乙胺(30μl，0.2152mmol)于无水二氯甲烷(1.0ml)中的溶液中添加氯甲酸甲酯(6mg，0.06349mmol)于无水二氯甲烷(0.5ml)中的溶液，同时维持温度在0℃与5℃之间(冰水浴)，并将混合物在该温度下搅拌2小时。将反应在减压下浓缩，并将残余物溶于dmso(1ml)中。将溶液微过滤并通过制备型反相hplc纯化，得到呈无色固体的2-[(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2,13-三氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12-三氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-12-基]-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸甲酯(18.2mg，54％)。esi-ms m/z计算值660.29816，实验值661.5(m+1)
+
；保留时间：1.86分钟，lc方法a。
[3079]
实例155：化合物197的制备
[3080]
步骤1：6-(2,6-二甲基苯基)-4-[(2r)-4-甲基-2-(螺[2.3]己-5-基氨基)戊氧基]吡啶-2-胺
[3081][3082]
在20ml微波管中，在环境温度下按照该顺序向4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)吡啶-2-胺(400mg，1.719mmol)于无水二甲亚砜(5ml)中的搅拌的溶液中添加(2r)-4-甲基-2-(螺[2.3]己-5-基氨基)戊烷-1-醇(盐酸盐)(450mg，1.925mmol)和粉状氢氧化钾(500mg，
8.912mmol)。将不均匀混合物用氮气吹扫30秒，加盖并在95℃下搅拌过夜(14小时)。然后在112℃下继续搅拌6小时。使反应混合物冷却至环境温度并用冰乙酸(600μl，10.55mmol)酸化，通过硅藻土短塞过滤，然后微过滤并通过反相hplc(c
18
柱，15分钟内1-99％乙腈/水，hcl作为改性剂)纯化，得到呈浅黄色固体的6-(2,6-二甲基苯基)-4-[(2r)-4-甲基-2-(螺[2.3]己-5-基氨基)戊氧基]吡啶-2-胺(二盐酸盐)(507mg，63％)。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ13.73(s,1h),9.79(s,1h),9.69(s,1h),7.93(s,2h),7.35(t,j＝7.6hz,1h),7.22(d,j＝7.6hz,2h),6.58(d,j＝2.3hz,1h),6.51(d,j＝2.4hz,1h),4.48(dd,j＝11.3,3.2hz,1h),4.42(dd,j＝11.2,4.9hz,1h),4.06(s,1h),3.46(s,1h),2.67(dd,j＝11.5,7.8hz,2h),2.24-2.19(m,1h),2.18(s,6h),2.17-2.12(m,1h),1.84-1.74(m,1h),1.74-1.60(m,2h),0.94(d,j＝6.6hz,3h),0.93(d,j＝6.7hz,3h),0.54-0.48(m,2h),0.48-0.39(m,2h)。esi-ms m/z计算值393.278，实验值394.3(m+1)
+
；保留时间：1.01分钟(lc方法a)。
[3083]
步骤2：6-[[6-(2,6-二甲基苯基)-4-[(2r)-4-甲基-2-(螺[2.3]己-5-基氨基)戊氧基]-2-吡啶基]氨磺酰基]吡啶-2-羧酸甲酯
[3084][3085]
在25ml圆底烧瓶中，在室温下在氮气下向6-(2,6-二甲基苯基)-4-[(2r)-4-甲基-2-(螺[2.3]己-5-基氨基)戊氧基]吡啶-2-胺(二盐酸盐)(100mg，0.2325mmol)于无水吡啶(5ml)中的搅拌的溶液中分两部分添加固体6-氯磺酰基吡啶-2-羧酸甲酯(66mg，0.2801mmol)。在该温度下持续搅拌过夜(16小时)。将溶剂在减压下去除，并向稠密的褐色残余物中添加甲苯(20ml)并在减压下去除以去除残余的吡啶。然后将最后的过程用甲苯重复两次。将稠密的残余物用二氯甲烷(15ml)研磨，过滤(去除白色吡啶盐酸盐)。将滤液在减压下浓缩并将残余物溶于dmso(1.5ml)中，微过滤并通过反相hplc(c
18
柱，15分钟内1-99％乙腈/水，hcl作为改性剂)纯化，得到呈类白色固体的6-[[6-(2,6-二甲基苯基)-4-[(2r)-4-甲基-2-(螺[2.3]己-5-基氨基)戊氧基]-2-吡啶基]氨磺酰基]吡啶-2-羧酸甲酯(盐酸盐)(89mg，61％)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ9.15(s,2h),8.30-8.08(m,3h),7.27(s,2h),7.16-6.94(m,2h),6.46(s,1h),4.50-4.28(m,2h),4.14-3.98(m,1h),3.89(s,3h),3.46(s,1h),2.52(t,j＝6.7hz,1h),2.26-2.14(m,2h),2.06(s,6h),1.80-1.61(m,3h),1.59-1.46(m,1h),0.90(d,j＝6.2hz,6h),0.52-0.45(m,2h),0.44-0.34(m,2h)。esi-ms m/z计算值592.2719，实验值593.5(m+1)
+
；保留时间：0.53分钟(lc方法d)。
[3086]
步骤3：6-[[6-(2,6-二甲基苯基)-4-[(2r)-4-甲基-2-(螺[2.3]己-5-基氨基)戊氧基]-2-吡啶基]氨磺酰基]吡啶-2-羧酸
[3087][3088]
在25ml烧瓶中，在环境温度下向6-[[6-(2,6-二甲基苯基)-4-[(2r)-4-甲基-2-(螺[2.3]己-5-基氨基)戊氧基]-2-吡啶基]氨磺酰基]吡啶-2-羧酸甲酯(盐酸盐)(80mg，0.1271mmol)于四氢呋喃(1.5ml)和甲醇(1.5ml)中的搅拌的溶液中立即添加氢氧化钠(1.0m的700μl，0.7000mmol)。在20分钟之后，将反应混合物用冰乙酸(50μl，0.8792mmol)酸化，并且将所得不均匀混合物在减压下浓缩。将残余物溶于dmso(2ml)中，微过滤并通过反相hplc(c
18
柱，15分钟内1-99％乙腈/水，hcl作为改性剂)纯化，得到呈类白色固体的6-[[6-(2,6-二甲基苯基)-4-[(2r)-4-甲基-2-(螺[2.3]己-5-基氨基)戊氧基]-2-吡啶基]氨磺酰基]吡啶-2-羧酸(盐酸盐)(61mg，78％)。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ9.39(s,1h),9.30(s,1h),8.20-8.12(m,3h),7.26(t,j＝7.6hz,1h),7.13(d,j＝7.6hz,3h),6.48(d,j＝2.3hz,1h),4.41(d,j＝11.3hz,1h),4.34(dd,j＝11.3,4.8hz,1h),4.09-4.04(m,1h),3.50-3.42(m,1h),2.58(dt,j＝11.9,7.0hz,2h),2.25-2.18(m,1h),2.18-2.11(m,1h),2.01(s,6h),1.79-1.66(m,2h),1.65-1.57(m,1h),0.93(d,j＝6.6hz,3h),0.92(d,j＝6.6hz,3h),0.49(dt,j＝8.4,3.3hz,2h),0.47-0.40(m,2h)。esi-ms m/z计算值578.2563，实验值579.5(m+1)
+
；保留时间：1.21分钟(lc方法a)。
[3089]
步骤4：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-12-螺[2.3]己-5-基-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,18-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(化合物197)
[3090][3091]
在25ml小瓶中，按该顺序向6-[[6-(2,6-二甲基苯基)-4-[(2r)-4-甲基-2-(螺[2.3]己-5-基氨基)戊氧基]-2-吡啶基]氨磺酰基]吡啶-2-羧酸(盐酸盐)(50mg，0.08128mmol)于无水dmf(3ml)中的搅拌的溶液中添加[二甲基氨基(三唑并[4,5-b]吡啶-3-基氧基)亚甲基]-二甲基铵(六氟化磷离子)(40mg，0.1052mmol)(hatu)和diea(100μl，0.5741mmol)，将氮气吹扫20秒并在氮气下加盖。将反应在环境温度下搅拌2小时。将反应混合物在减压下浓缩至约1ml，然后用dmso(1ml)稀释，微过滤并通过反相hplc(c
18
柱，15分钟内1-99％乙腈/水，hcl作为改性剂)纯化，得到不纯物质(36mg，在uv220中为92％，在uv254
中为100％)。将物质在相同条件下再次纯化，运行30分钟，得到呈白色固体的(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-异丁基-2,2-二氧代-12-螺[2.3]己-5-基-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,18-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(27mg，59％)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.18(t,j＝7.8hz,1h),8.05(dd,j＝7.9,1.0hz,1h),7.83(d,j＝7.6hz,1h),7.74(d,j＝2.4hz,1h),7.24(t,j＝7.6hz,1h),7.13(d,j＝7.6hz,1h),7.08(d,j＝7.6hz,1h),6.31(d,j＝2.1hz,1h),4.70-4.55(m,2h),4.28(p,j＝8.6hz,1h),3.96-3.81(m,1h),3.36(d,j＝9.1hz,2h),2.13(d,j＝9.4hz,1h),2.08(s,3h),2.02(d,j＝9.5hz,1h),1.85(s,3h),1.62(t,j＝12.5hz,1h),1.34-1.20(m,1h),1.11(t,j＝12.3hz,1h),0.69(d,j＝6.6hz,3h),0.55-0.49(m,2h),0.48-0.42(m,2h),0.02(d,j＝6.3hz,3h)。esi-ms m/z计算值560.2457，实验值561.4(m+1)
+
；保留时间：1.38分钟(lc方法a)。
[3092]
实例156：化合物198的制备
[3093]
步骤1：(2r)-2-(螺[2.3]己-5-基氨基)-3-[1-(三氟甲基)环丙基]丙烷-1-醇
[3094][3095]
将(2r)-2-氨基-3-[1-(三氟甲基)环丙基]丙烷-1-醇(盐酸盐)(55g，250.4mmol)悬浮于二氯乙烷(825ml)中，用螺[2.3]己-5-酮(26.6g，276.7mmol)处理并搅拌15分钟(精细凝胶状悬浮液)。然后添加三乙酰氧基硼氢化钠(158g，745.5mmol)并且将精细奶油悬浮液在室温下搅拌18小时。将稠密的悬浮液在冰浴中冷却并通过缓慢添加hcl(1m的750ml，750.0mmol)淬灭，保持内部温度在5与15℃之间。将乳液(2个透明相，水在上面，ph＝1)搅拌15分钟并且然后在冷却下(内部温度5-15℃，强烈发泡)通过添加固体碳酸钾(310g，2.243mol)使其呈碱性。到最后，dce相变成凝胶状悬浮液。添加mtbe(825ml)以得到乳液。将相分离，并且将有机相用饱和碳酸钾洗涤一次。将水相用mtbe(75ml)反萃取一次，并且将合并的有机相干燥，过滤并蒸发。在加热下将粗溶解于庚烷(约250ml)中并将热的澄清溶液静置过夜。将所得稠密的固体物质在冰浴中搅拌1小时。将固体通过过滤收集，用干冰冷庚烷洗涤并干燥，得到呈类白色固体的(2r)-2-(螺[2.3]己-5-基氨基)-3-[1-(三氟甲基)环丙基]丙烷-1-醇(39g，59％)。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ4.53(t,j＝5.2hz,1h),3.47(p,j＝7.4hz,1h),3.40(dd,j＝10.5,4.8hz,1h),3.28(dt,j＝10.6,5.1hz,1h),2.61(p,j＝5.8hz,1h),2.15-2.02(m,2h),1.94(ddd,j＝9.9,7.2,3.6hz,2h),1.68(dd,j＝15.0,6.4hz,2h),1.52(dd,j＝15.0,7.1hz,1h),0.94-0.71(m,4h),0.49-0.20(m,4h)。esi-ms m/z计算值263.1497，实验值264.0(m+1)
+
；保留时间：0.91分钟(lc方法a)。
[3096]
步骤2：3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(2r)-2-(螺[2.3]己-5-基氨基)-3-[1-(三氟甲基)环丙基]丙氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸
[3097][3098]
将(2r)-2-(螺[2.3]己-5-基氨基)-3-[1-(三氟甲基)环丙基]丙烷-1-醇(38.5g，146.2mmol)溶解于thf(1.2l)(浅黄色溶液)中并用氮气吹扫(3x真空/n2)。将浅黄色溶液在丙酮/冰浴中冷却并在-2℃的内部温度下逆着弱氮气流快速添加naotbu(58g，585.4mmol)(约1分钟内，仅轻微放热，内部温度至多1℃)，得到浅黄色混浊溶液/精细悬浮液。在添加之后，在2-3分钟内直接添加3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(61g，146.0mmol)。添加的酸迅速进入溶液中并且内部温度从1升至10℃，得到黄色混浊溶液。一旦内部温度再次开始下降，将冰浴去除并且将混浊溶液在室温下搅拌2小时，然后添加另一部分3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(12g，28.72mmol)并将反应在室温下再搅拌45分钟。在搅拌下将黄色混浊溶液添加到冰冷的hcl(1m的880ml，880.0mmol)中并用乙酸乙酯(1.2l)稀释。将相分离，并且将有机相用盐水(2
×
250ml)洗涤两次。将水相用乙酸乙酯(250ml)反萃取一次。将合并的有机相经硫酸镁干燥，过滤(由于产物hcl盐从乙酸乙酯中结晶出来，所以过滤很快)并将黄色澄清溶液蒸发，得到黄色泡沫/固体(约125g)。将粗用乙酸乙酯研磨并搅拌并且将固体通过过滤收集。将固体溶解于thf中，用乙酸乙酯稀释并将大部分thf在减压下去除(通过添加乙酸乙酯几次并在减压下蒸发)，得到稠密的悬浮液。将固体通过过滤收集，用乙酸乙酯洗涤并干燥，得到呈类白色固体的3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(2r)-2-(螺[2.3]己-5-基氨基)-3-[1-(三氟甲基)环丙基]丙氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(97g，98％)。esi-ms m/z计算值644.228，实验值645.0(m+1)
+
；保留时间：1.31分钟(lc方法a)。
[3099]
步骤3：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-2,2-二氧代-12-螺[2.3]己-5-基-11-[[1-(三氟甲基)环丙基]甲基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(化合物198)
[3100][3101]
将3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(2r)-2-(螺[2.3]己-5-基氨基)-3-[1-(三氟甲基)环丙基]丙氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(96.9g，142.3mmol)溶解于dmf(2.9l)(澄清无色溶液)中，用氮气吹扫(3x真空/n2)，首先用diea(124ml，711.9mmol)处理并且然后立即用hatu(81.2g，213.6mmol)处理，并将反应在室温下搅拌19小时。然后添加另
一部分hatu(5.4g，14.20mmol)，并且将反应在室温下再搅拌2小时。将黄橙色溶液在50-55℃下在减压下浓缩，得到黄橙色物质/玻璃，将其用柠檬酸(1m的710ml，710.0mmol)和冰水(700ml)处理并将所得混合物在室温下搅拌2小时，得到黄色悬浮液。将固体通过过滤收集，用大量水洗涤并吸干过夜。在温热下将固体溶解于乙酸乙酯(1l)和methf(1l)中，得到具有黄色水相的黄橙色溶液并且用0.5m hcl(600、400和200ml)洗涤3次并用盐水(400和200ml)洗涤两次并且将水相用乙酸乙酯(250ml)反萃取一次。将合并的有机相干燥、过滤并且将澄清的黄橙色溶液蒸发并干燥，得到120g的黄橙色泡沫。将泡沫溶解于甲醇(1l)中并将其用来自另一个导致缓慢结晶的反应的物质接种。将橙色悬浮液在室温下搅拌0.5小时，然后在减压下在50-55℃下缓慢浓缩至其原始体积的一半(约500ml)。将橙色悬浮液在室温下搅拌2小时，将固体通过过滤收集，用冷甲醇洗涤(3小部分，滤液从橙色变为无色)并在45℃下在减压下干燥，氮气泄漏过夜，得到呈类白色固体的(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-2,2-二氧代-12-螺[2.3]己-5-基-11-[[1-(三氟甲基)环丙基]甲基]-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(54g，60％)。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ13.04(s,1h),8.35(s,1h),7.89(s,1h),7.67(d,j＝22.8hz,2h),7.26(s,1h),7.12(s,2h),6.37(s,1h),5.06(dd,j＝10.8,4.5hz,1h),4.38(t,j＝11.5hz,1h),4.13(ddd,j＝24.3,16.3,10.4hz,2h),3.22(t,j＝9.4hz,1h),2.31-1.75(m,9h),1.54(dd,j＝16.5,9.3hz,1h),0.82(dt,j＝10.8,5.4hz,1h),0.75(dt,j＝10.2,5.2hz,1h),0.66(d,j＝6.4hz,1h),0.60-0.33(m,5h)。esi-ms m/z计算值626.21747，实验值627.0(m+1)
+
；保留时间：2.02分钟(lc方法a)。
[3102]
vi.新化合物的表征
[3103]
下表中的化合物是使用本文所描述的可商购试剂和中间体以类似于上文所描述的方式制备的。
[3104]
表3：新化合物的lcms数据
[3105]
[3106]
[3107]
[3108]
[3109]
[3110]
[3111]
[3112]
[3113]
[3114]
[3115]
[3116]
[3117]
[3118]
[3119]
[3120][3121]
表4：新化合物的lcms数据
[3122]
[3123]
[3124]
[3125]
[3126]
[3127]
[3128]
[3129][3130]
表5：新化合物的lcms数据
[3131]
[3132]
[3133]
[3134]
[3135]
[3136]
[3137]
[3138]
[3139]
[3140]
[3141]
[3142]
[3143]
[3144]
[3145]
[3146]
[3147]
[3148]
[3149]
[3150]
[3151]
[3152]
[3153]
[3154][3155]
表6：新化合物的nmr数据
[3156]
[3157]
[3158]
[3159]
[3160]
[3161]
[3162]
[3163]
[3164]
[3165]
[3166][3167]
实例157：化合物475-506
[3168]
表7中所描绘的化合物475至506可以按照上文所描述的化合物1-474的程序制备并且cftr调节活性可以使用下面概述的测定的一种或多种来评估。
[3169]
表7：化合物475至506
[3170]
[3171]
[3172]
[3173]
[3174]
[3175]
[3176][3177]
vii.生物活性数据
[3178]
a.肠状测定
[3179]
1.溶液
[3180]
基础培养基(adf+++)由高级dmem/ham's f12、2mm glutamax、10mm hepes、1μg/ml青霉素/链霉素组成。
[3181]
肠类肠道维持培养基(iemm)由adf+++、1x b27补充剂、1x n2补充剂、1.25mm n-乙酰半胱氨酸、10mm烟酰胺、50ng/ml hegf、10nm胃泌素、1μg/ml hr-脊椎蛋白-1,、100ng/ml hnoggin、tgf-b 1型抑制剂a-83-01、100μg/ml primocin、10μm p38 mapk抑制剂sb202190组成。
[3182]
浸浴1缓冲液由1mm mgcl2、160mm nacl、4.5mm kcl、10mm hepes、10mm葡萄糖、2mm cacl2组成。
[3183]
无氯缓冲液由1mm葡萄糖酸镁、2mm葡萄糖酸钙、4.5mm葡萄糖酸钾、160mm葡萄糖酸
24小时。在化合物温育之后，采用膜电位染料测定，使用flipr tetra直接测量在急剧添加10μm毛喉素和300nm n-[2,4-双(1,1-二甲基乙基)-5-羟苯基]-1,4-二氢-4-氧代喹啉-3-甲酰胺之后该测试化合物对cftr介导的氯离子转运的效力和功效。简言之，将细胞在浸浴1缓冲液中洗涤5次。添加浸浴1染料溶液，并且将细胞在室温下温育25分钟。在染料温育之后，将细胞在无氯染料溶液中洗涤3次。通过添加无氯染料刺激溶液起始氯离子转运，并读取荧光信号15分钟。根据针对急剧毛喉素和300nm n-[2,4-双(1,1-二甲基乙基)-5-羟苯基]-1,4-二氢-4-氧代喹啉-3-甲酰胺刺激的荧光反应的auc测定在每种条件下cftr介导的氯离子转运。然后将氯离子转运表示为用1μm(14s)-8-[3-(2-{二螺[2.0.2.1]庚-7-基}乙氧基)-1h-吡唑-1-基]-12,12-二甲基-2λ
6-硫杂-3,9,11,18,23-五氮杂四环[17.3.1.111,14.05,10]二十四碳-1(22),5,7,9,19(23),20-六烯-2,2,4-三酮、3μm(r)-1-(2,2-二氟苯并[d][1,3]二氧环戊烯-5-基)-n-(1-(2,3-二羟丙基)-6-氟-2-(1-羟基-2-甲基丙烷-2-基)-1h-吲哚-5-基)环丙烷甲酰胺和300nm急剧n-[2,4-双(1,1-二甲基乙基)-5-羟苯基]-1,4-二氢-4-氧代喹啉-3-甲酰胺三重组合控制处理之后氯离子转运的百分比(活性％)。
[3195]
b.hbe测定
[3196]
1.cftr介导的短路电流的尤斯室测定
[3197]
使用衍生自cf受试者的ff508del和最小功能cftr突变(f508del/mf-hbe)杂合的人支气管上皮(hbe)细胞进行尤斯室实验，并且如先前所述(neuberger t,burton b,clark h,van goor f methods mol biol 2011:741:39-54)进行培养。在四天之后，移除顶端培养基，并且在使用前在空气液体界面生长细胞》14天。这导致产生有纤毛的完全分化的柱状细胞的单层，该细胞的特征是人支气管气道上皮的特征。
[3198]
为了分离cftr介导的短路(i
sc
)电流，将snapwell
tm
细胞培养插入物上生长的f508del/mf-hbe安装在尤斯室中，并且在电压钳记录条件(v
保持
＝0mv)下在37℃下测量跨上皮i
sc
。基底外侧溶液含有(以mm计)145nacl、0.83k2hpo4、3.3kh2po4、1.2mgcl2、1.2cacl2、10葡萄糖、10hepes(ph用naoh调节至7.4)，并且顶端溶液含有(以mm计)145葡糖酸钠、1.2mgcl2、1.2cacl2、10葡萄糖、10hepes(ph用naoh调节至7.4)和30μm阿米洛利以阻断上皮钠通道。将毛喉素(20μm)添加到顶端表面以活化cftr，随后顶端添加由bpo、glyh-101和cftr抑制剂172(各自在20μm最终测定浓度下)组成的cftr抑制剂混合物以特异性分离cftr电流。根据抑制后对稳态电流的佛司可林峰响应确定每种条件下的cftr介导的i
sc
(μa/cm2)。
[3199]
2.校正剂化合物的鉴定
[3200]
如上文所描述的，cftr校正剂化合物对cftr介导的i
sc
的活性在尤斯室研究中确定。将f508del/mf-hbe细胞培养物与一定浓度范围的校正剂化合物和1μm依伐卡托组合温育，或者与单一固定浓度的10μm校正剂化合物和1μm依伐卡托在37℃和20％人血清存在的情况下组合温育18-24小时。在18-24小时温育期间，具有1μm依伐卡托的校正剂化合物的浓度在cftr介导的i
sc
的整个尤斯室测量中保持恒定，以确保化合物在整个实验中存在。将推定的f508del校正剂的功效和效力与已知的vertex校正剂(14s)-8-[3-(2-{二螺[2.0.2.1]庚-7-基}乙氧基)-1h-吡唑-1-基]-12,12-二甲基-2λ
6-硫杂-3,9,11,18,23-五氮杂四环[17.3.1.111,14.05,10]二十四碳-1(22),5,7,9,19(23),20-六烯-2,2,4-三酮与18μm替扎卡托和1μm依伐卡托组合进行比较。
[3201]
c.生物活性数据表
[3202]
表8表示使用该实例中描述的测定中的一种或多种产生的本公开的代表性化合物的cftr调节活性(ec
50
：+++为《1μm；++为1-《3μm；+为3-《30μm；并且nd为“在该测定中未检测到。”活性％：+++为》60％；++为30-60％；+为《30％)。
[3203]
表8：生物活性数据
[3204]
[3205]
[3206]
[3207]
[3208]
[3209]
[3210]
[3211]
[3212]
[3213]
[3214]
[3215]
[3216]
[3217]
[3218]
[3219]
[3220]
[3221]
[3222][3223]
表9表示使用本文所公开的测定中的一种或多种产生的本公开的代表性化合物的cftr调节活性(ec
50
：+++为《1μm；++为1-《3μm；+为3-《30μm；并且nd为“在该测定中未检测到。”活性％：+++为》60％；++为30-60％；+为《30％)。
[3224]
表9：生物活性数据
[3225]
[3226]
[3227]
[3228]
[3229]
[3230]
[3231]
[3232]
[3233]
[3234]
[3235]
[3236]
[3237]
[3238]
[3239]
[3240]
[3241]
[3242]
[3243][3244]
表10表示使用该实例中描述的测定中的一种或多种产生的本公开的代表性化合物的cftr调节活性(ec
50
：+++为《1μm；++为1-《3μm；+为3-《30μm；并且nd为“在该测定中未检测到。”活性％：+++为》60％；++为30-60％；+为《30％)。
[3245]
表10：生物活性数据
[3246]
[3247]
[3248]
[3249]
[3250]
[3251]
[3252]
[3253]
[3254]
[3255]
[3256]
[3257]
[3258]
[3259]
[3260]
[3261]
[3262][3263]
表11表示使用该实例中描述的测定中的一种或多种产生的本公开的代表性化合物的cftr调节活性(ec
50
：+++为《1μm；++为1-《3μm；+为3-《30μm；并且nd为“在该测定中未检测到。”活性％：+++为》60％；++为30-60％；+为《30％)。
[3264]
表11：生物活性数据
[3265]
[3266]
[3267]
[3268]
[3269][3270]
viii.化合物507和508的合成
[3271]
实例158：化合物507的制备
[3272]
步骤1：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-12-(1-甲基-2-氧代-3-哌啶基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮
[3273][3274]
将3-[[4-[(2r)-2-氨基-4,4-二甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(300mg，0.5464mmol)与1-甲基哌啶-2,3-二酮(69.47mg，0.5464mmol)在dcm(5.4ml)中合并，并在室温下搅拌15分钟。然后添加三乙酰氧基硼氢化钠(115.8mg，0.5464mmol)，然后15分钟后添加另外的三乙酰氧基硼氢化钠(347.4mg，1.639mmol)。使反应在室温下再搅拌60分钟，然后用少量hcl(1m的120μl，0.1200mmol)淬灭，然后部分浓缩。在用1:1dmso/甲醇稀释并过滤之后，然后将反应混合物通过制备型hplc(10-99％ acn/水，hcl改性剂，15分钟运行)纯化，得到白色固体。将粗固体溶解于dmf(5.4ml)中并与2-氯-4,6-二甲氧基-1,3,5-三嗪(95.93mg，0.5464mmol)混合。将反应混合物在冰浴中冷却10分钟并且然后添加4-甲基吗啉(210.2μl，1.912mmol)并将混合物搅拌过夜。将粗混合物用1:1dmso/甲醇稀释并过滤，然后将反应混合物通过制备型hplc(10-99％ acn/水，hcl改性剂，15分钟运行)纯化，得到白色固体。将物质通过硅胶色谱法通过使用0-10％ meoh/dcm溶液进一步纯化，得到白色固体(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-12-(1-甲基-2-氧代-3-哌啶基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮
杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(5.4mg，5％)1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.58(d,j＝1.8hz,1h),8.03(dt,j＝6.6,2.0hz,1h),7.78-7.47(m,2h),7.25(t,j＝7.6hz,1h),7.12(d,j＝7.6hz,2h),6.21(s,1h),5.31(dd,j＝10.5,4.3hz,1h),4.40-4.08(m,1h),4.14-3.76(m,2h),3.65-3.36(m,1h),3.01(s,3h),2.39(dt,j＝19.3,11.0hz,1h),2.30(dd,j＝14.6,5.2hz,1h),2.26-1.55(m,10h),1.49(dd,j＝14.6,2.0hz,1h),0.58(s,9h)。esi-ms m/z计算值605.2672,实验值606.4(m+1)
+
；保留时间：1.3分钟(lc方法a)。
[3275]
实例159：化合物508的制备
[3276]
步骤1：(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-12-(1-甲基-2-氧代-吡咯烷-3-基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮
[3277][3278]
将3-[[4-[(2r)-2-氨基-4,4-二甲基-戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(450mg，0.8195mmol)与1-甲基吡咯烷-2,3-二酮(139mg，1.229mmol)在dcm(2.4ml)中合并，并在室温下搅拌15分钟。然后添加三乙酰氧基硼氢化钠(173.7mg，0.8196mmol)，然后15分钟后添加另外的三乙酰氧基硼氢化钠(521.2mg，2.459mmol)。使反应在室温下再搅拌60分钟，然后用少量hcl(1m的120μl，0.1200mmol)淬灭，然后部分浓缩。在用1:1dmso/甲醇稀释并过滤之后，然后将反应混合物通过制备型hplc(10-99acn/水，hcl改性剂，15分钟运行)纯化，得到白色固体3-[[4-[(2r)-4,4-二甲基-2-[(1-甲基-2-氧代-吡咯烷-3-基)氨基]戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(356mg，71％)esi-ms m/z计算值609.2621，实验值610.6(m+1)
+
；保留时间：0.45分钟(lc方法d)。
[3279]
将3-[[4-[(2r)-4,4-二甲基-2-[(1-甲基-2-氧代-吡咯烷-3-基)氨基]戊氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(356mg，71％)和2-氯-4,6-二甲氧基-1,3,5-三嗪(102.1mg，0.5815mmol)溶解于dmf(22.5ml)中并冷却至0℃并在该温度下搅拌15分钟。向反应混合物中添加4-甲基吗啉(225.2μl，2.048mmol)，将冷却浴去除并在室温下搅拌过夜。将粗物质用1ml meoh稀释，过滤并注射到制备型反相hplc(具有5mm hcl改性剂的1-99％ acn)中，获得白色固体。将该白色固体通过硅胶色谱法(100％ dcm-5％meoh/dcm，30分钟运行)进一步纯化，得到白色固体(11r)-6-(2,6-二甲基苯基)-11-(2,2-二甲基丙基)-12-(1-甲基-2-氧代-吡咯烷-3-基)-2,2-二氧代-9-氧杂-2λ
6-硫杂-3,5,12,19-四氮杂三环[12.3.1.14,8]十九碳-1(18),4(19),5,7,14,16-六烯-13-酮(12.5mg，8％)。1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.62(d,j＝1.9hz,1h),8.04(dt,j＝6.7,1.9hz,1h),7.77-7.49(m,
2h),7.25(t,j＝7.6hz,1h),7.12(d,j＝7.7hz,2h),6.24(s,1h),5.32(dd,j＝10.6,4.4hz,1h),4.58(s,1h),4.35(t,j＝9.0hz,1h),4.20(t,j＝11.2hz,1h),4.04-3.88(m,1h),3.61-3.39(m,2h),2.90(s,3h),2.60-2.28(m,2h),2.30-1.81(m,7h),1.55(dd,j＝14.7,1.7hz,1h),0.59(s,9h)。esi-ms m/z calc.591.2515，实验值592.3(m+1)
+
；保留时间：1.28分钟(lc方法a)。
[3280]
ix.生物活性
[3281]
a.hbe2测定
[3282]
1.cftr介导的短路电流的尤斯室测定
[3283]
使用衍生自cf受试者的ff508del和最小功能cftr突变(f508del/mf-hbe)杂合的人支气管上皮(hbe)细胞进行尤斯室实验，并且如先前所述(neuberger t,burton b,clark h,van goor f methods mol biol 2011:741:39-54)进行培养。在四天之后，移除顶端培养基，并且在使用前在空气液体界面生长细胞》14天。这导致产生有纤毛的完全分化的柱状细胞的单层，该细胞的特征是人支气管气道上皮的特征。
[3284]
为了分离cftr介导的短路(i
sc
)电流，将snapwell
tm
细胞培养插入物上生长的f508del/mf-hbe安装在尤斯室中，并且在电压钳记录条件(v
保持
＝0mv)下在37℃下测量跨上皮i
sc
。基底外侧溶液含有(以mm计)145nacl、0.83k2hpo4、3.3kh2po4、1.2mgcl2、1.2cacl2、10葡萄糖、10hepes(ph用naoh调节至7.4)，并且顶端溶液含有(以mm计)145葡糖酸钠、1.2mgcl2、1.2cacl2、10葡萄糖、10hepes(ph用naoh调节至7.4)和30μm阿米洛利以阻断上皮钠通道。将毛喉素(20μm)添加到顶端表面以活化cftr，随后顶端添加由bpo、glyh-101和cftr抑制剂172(各自在20μm最终测定浓度下)组成的cftr抑制剂混合物以特异性分离cftr电流。根据抑制后对稳态电流的佛司可林峰响应确定每种条件下的cftr介导的i
sc
(μa/cm2)。
[3285]
2.校正剂化合物的鉴定
[3286]
如上文所描述的，cftr校正剂化合物对cftr介导的i
sc
的活性在尤斯室研究中确定。将f508del/mf-hbe细胞培养物与一定浓度范围的校正剂化合物和44nm(6r,12r)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇组合温育，或者与单一固定浓度的1或3μm校正剂化合物和44nm(6r,12r)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇在37℃和20％人血清存在的情况下组合温育18-24小时。在18-24小时温育期间，具有44nm(6r,12r)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇的校正剂化合物的浓度在cftr介导的i
sc
的整个尤斯室测量中保持恒定，以确保化合物在整个实验中存在。将推定的f508del校正剂的功效和效力与已知的vertex校正剂(14s)-8-[3-(2-{二螺[2.0.2.1]庚-7-基}乙氧基)-1h-吡唑-1-基]-12,12-二甲基-2λ
6-硫杂-3,9,11,18,23-五氮杂四环[17.3.1.111,14.05,10]二十四碳-1(22),5,7,9,19(23),20-六烯-2,2,4-三酮与18μm替扎卡托和1μm依伐卡托组合进行比较。
[3287]
b.生物活性数据表
[3288]
表12表示使用该实例中描述的测定产生的化合物507和508的cftr调节活性(ec
50
：+++为《1μm；++为1-《3μm；+为3-《30μm；并且nd为“在该测定中未检测到。”活性％：+++为》
60％；++为30-60％；+为《30％)。
[3289]
表12：生物活性数据
[3290][3291]
x.(6r,12r)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇的合成
[3292]
a.一般方法
[3293]
除非另有说明，否则通过商业来源获得试剂和起始材料，并且在不纯化的情况下使用。
[3294]
在分别以400mhz和100mhz的1h和
13
c共振频率操作的bruker biospin drx 400mhz ftnmr光谱仪上或在300mhz nmr光谱仪上获得质子和碳nmr光谱。使用broadband observe(bbfo)探针，在20hz样品旋转下，分别以0.1834和0.9083hz/pt数字分辨率获取一维质子和碳谱。使用标准、先前公布的脉冲序列和常规处理参数，在30℃的温度控制下获取所有质子和碳谱。
[3295]
nmr(1d和2d)光谱也记录于分别在400mhz和100mhz下操作的配备有5mm多核iprobe的bruker avneo 400mhz光谱仪上。
[3296]
还在varian mercury nmr仪器上使用45度脉冲角度、4800hz谱宽和28860个采集点，在300mhz下记录1h nmr光谱。将fid零填充至32k个点，并且在傅立叶变换之前应用0.3hz谱线增宽。使用30度脉冲角度、100khz谱宽和59202个采集点在282mhz下记录
19
f nmr光谱。将fid零填充至64k个点，并且在傅立叶变换之前应用0.5hz谱线增宽。
[3297]
还在bruker avance iii hd nmr仪器上使用30度脉冲角、8000hz的光谱宽度和128k采集点，在400mhz下记录1h nmr光谱。将fid零填充至256k个点，并且在傅立叶变换之前应用0.3hz谱线增宽。使用30度脉冲角度、89286hz谱宽和128k个采集点在377mhz下记录
19
f nmr光谱。将fid零填充至256k个点，并且在傅立叶变换之前应用0.3hz谱线增宽。
[3298]
nmr谱也记录在配备有：5mm qnp(h1/c13/f19/p31)探针(类型：250-sb，s#23055/c18 3.0x 50mm 2.6μm,3min,5％-95％乙腈/h2o(0.1％甲酸)1.2ml/min。
[3307]
步骤3：3-氨基-6-溴-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯
[3308]
在0℃下向3-氨基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(18.75g,80.91mmol)在乙腈(300ml)中的溶液中按份添加n-溴代琥珀酰亚胺(18.7g,105.3mmol)。将混合物在25℃下搅拌过夜。添加乙酸乙酯(1000ml)。用10％硫代硫酸钠溶液(3
×
200ml)洗涤有机层，用乙酸乙酯(2
×
200ml)反萃取。将合并的有机提取物用饱和碳酸氢钠溶液(3
×
200ml)、盐水(200ml)洗涤，经硫酸钠干燥并在真空下浓缩，得到3-氨基-6-溴-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(25.46g,98％)。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ3.93-4.03(m,3h),6.01(br.s.,2h),7.37(s,1h)ppm。
19
f nmr(282mhz,cdcl3)ppm-64.2(s,3f)。esi-ms m/z计算值297.9565，实验值299.0(m+1)
+
；保留时间：2.55分钟。lcms方法：kinetex c
18 4.6x 50mm 2.6μm。温度：45℃，流速:2.0ml/min，运行时间：6分钟。流动相：初始95％h2o(0.1％甲酸)和5％乙腈(0.1％甲酸)，线性梯度至95％乙腈(0.1％甲酸)持续4.0分钟，然后在95％乙腈(0.1％甲酸)下保持2.0分钟。
[3309]
步骤4：3-[双(叔丁氧基羰基)氨基]-6-溴-5-(三氟甲基)吡啶-2-羧酸甲酯
[3310]
将3-氨基-6-溴-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(5g,15.549mmol)、(boc)2o(11g,11.579ml,50.402mmol)、dmap(310mg,2.5375mmol)和ch2cl2(150ml)的混合物在室温下搅拌过夜。将反应混合物减压浓缩，并通过硅胶色谱法(0-15％，乙酸乙酯/庚烷)纯化，得到呈浅黄色固体的3-[双(叔丁氧基羰基)氨基]-6-溴-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(6.73g,87％)。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ1.42(s,18h),3.96(s,3h),7.85(s,1h)ppm。
19
f nmr(282mhz,cdcl3)δ-63.9(s,3f)ppm。esi-ms m/z计算值498.06134，保留时间：2.34分钟。lcms方法：kinetex c
18 4.6x 50mm 2.6μm。温度：45℃，流速:2.0ml/min，运行时间：3分钟。流动相：初始95％h2o(0.1％甲酸)和5％乙腈(0.1％甲酸)，线性梯度至95％乙腈(0.1％甲酸)持续2.0分钟，然后在95％乙腈(0.1％甲酸)下保持1.0分钟。
[3311]
中间体2：6-溴-3-(叔丁氧基羰基氨基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸的制备步骤1：6-溴-3-(叔丁氧基羰基氨基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸
[3312]
向3-[双(叔丁氧基羰基)氨基]-6-溴-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(247g,494.7mmol)在thf(1.0l)中的混合物中添加lioh(47.2g,1.971mol)在水(500ml)中的溶液。将混合物在环境温度下搅拌18小时，得到黄色浆液。将混合物用冰浴冷却，并且用hcl(1000ml,2m,2.000mol)缓慢酸化，保持反应温度《15℃。将混合物用庚烷(1.5l)稀释，混合并分离有机相。将水相用庚烷(500ml)萃取。将合并的有机相用盐水洗涤，经mgso4干燥，过滤，并在真空中浓缩。将粗油溶解于庚烷(600ml)中，接种并在环境温度下搅拌18小时，得到稠密浆液。将浆液用冷庚烷(500ml)稀释，并且使用中等玻璃料收集沉淀。将滤饼用冷庚烷洗涤并空气干燥1小时，然后在45℃下真空洗涤48小时，得到6-溴-3-(叔丁氧基羰基氨基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(158.3g,83％)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.38(s,1h),9.01(s,1h),1.50(s,9h)ppm。esi-ms m/z计算值383.99326，实验值384.9(m+1)
+
；保留时间：2.55分钟。lcms方法详情：最终纯度通过反相uplc使用waters制造的acquity uplc beh c
18
柱(50
×
2.1mm，1.7μm颗粒)(pn：186002350)和在4.5分钟内从1％-99％流动相b运行的双梯度来确定。流动相a＝h2o(0.05％cf3co2h)。流动相b＝乙腈(0.035％ cf3co2h)。流速＝1.2ml/min，进样体积＝1.5μl，并且柱温＝60℃。
[3313]
中间体3：2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酸的制备
[3314]
步骤1：2-羟基-2-(三氟甲基)己-5-烯酸乙酯
[3315]
在-78℃下历经1.5小时时段向3,3,3-三氟-2-氧代-丙酸乙酯(25.15g,147.87mmol)在et2o(270ml)中的溶液中滴加在thf(190ml,0.817m,155.23mmol)中的溴(丁-3-烯基)镁(内温-72℃至-76℃)。将混合物在-78℃下搅拌20分钟。移除干冰-丙酮浴。在1小时内将混合物缓慢温热至5℃,添加到1n hcl水溶液(170ml)和碎冰(150g)的混合物(ph＝4)中。分离两层。将有机层浓缩，并将残余物与水相合并并用etoac(2x 150ml)萃取。将合并的有机相用5％ nahco3水溶液(50ml)和盐水(20ml)洗涤，用na2so4干燥。将混合物过滤并浓缩，并与thf(2
×
40ml)共蒸发，得到呈无色油的2-羟基-2-(三氟甲基)己-5-烯酸乙酯(37.44g，96％)。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ5.77(ddt,j＝17.0,10.4,6.4hz,1h),5.15-4.93(m,2h),4.49-4.28(m,2h),3.88(s,1h),2.35-2.19(m,1h),2.17-1.89(m,3h),1.34(t,j＝7.0hz,3h)ppm。
19
f nmr(282mhz,cdcl3)δ-78.74(s,3f)ppm。
[3316]
步骤2：2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酸乙酯
[3317]
在0℃下向2-羟基-2-(三氟甲基)己-5-烯酸乙酯(24.29g,87.6％纯度，94.070mmol)在dmf(120ml)中的溶液中按份添加nah(在矿物油中为60％，5.64g,141.01mmol)。将混合物在0℃下搅拌10分钟。添加苄基溴(24.13g,141.08mmol)和tbai(8.68g,23.500mmol)。混合物于室温搅拌过夜。添加nh4cl(3g,0.6eq)。将混合物搅拌10分钟。添加30ml的etoac，然后添加冰水(400g)。混合物用ch2cl2萃取，并将合并的有机层浓缩。通过硅胶色谱法(在庚烷中的0-20％ ch2cl2)纯化提供呈粉红色油的2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酸乙酯(26.05g，88％).1h nmr(300mhz,cdcl3)δ1.34(t,j＝7.2hz,3h),2.00-2.19(m,3h),2.22-2.38(m,1h),4.33(q,j＝7.2hz,2h),4.64(d,j＝10.6hz,1h),4.84(d,j＝10.9hz,1h),4.91-5.11(m,2h),5.62-5.90(m,1h),7.36(s,5h)ppm。
19
f nmr(282mhz,cdcl3)δ-70.5(s,3f)ppm。esi-ms m/z计算值316.12863，实验值317.1(m+1)
+
；保留时间：2.47分钟。lcms方法：kinetex c
18 4.6x 50mm 2.6μm。温度：45℃，流速：2.0ml/min，运行时间：3min。流动相：初始95％h2o(0.1％甲酸)和5％乙腈(0.1％甲酸)，线性梯度至95％乙腈(0.1％甲酸)持续2.0分钟，然后在95％乙腈(0.1％甲酸)下保持1.0分钟。
[3318]
步骤3：2-苄氧基-2(三氟甲基)己-5-烯酸
[3319]
将氢氧化钠(7.86g,196.51mmol)在水(60ml)中的溶液添加到2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酸乙酯(24.86g,78.593mmol)在甲醇(210ml)中的溶液中。将反应在50℃下加热过夜。将反应浓缩以去除甲醇，用水(150ml)稀释，并将羧酸钠盐用庚烷(1
×
100ml)洗涤。用hcl的3n水溶液将水溶液酸化至ph＝2。将羧酸用二氯甲烷(3
×
100ml)萃取，并经硫酸钠干燥。将溶液过滤并浓缩，得到呈淡黄色油状物的2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酸(22.57g,97％)。1h nmr(300mhz,dmso-d6)δ14.31(br.s.,1h),7.55-7.20(m,5h),5.93-5.70(m,1h),5.17-4.91(m,2h),4.85-4.68(m,1h),4.67-4.55(m,1h),2.32-1.94(m,4h)ppm。
19
f nmr(282mhz,dmso-d6)δ-70.29(s,3f)ppm。esi-ms m/z计算值288.09732，实验值287.1(m-1)；保留时间：3.1分钟。lcms方法：kinetex polar c
18 3.0x 50mm 2.6μm,6min,5％-95％乙腈/h2o(0.1％甲酸)1.2ml/min。
[3320]
中间体4：(2r)-2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酸的制备
[3321]
步骤1：(2r)-2苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酸；(r)-4-喹啉基-[(2s,4s)-5-乙烯
基奎宁环-2-基]甲醇
[3322]
向设置为20℃的n2经吹扫的带夹套反应器中添加乙酸异丙酯(ipac,100l,0.173m,20vols)，随后添加先前熔化的用少量反应溶剂制成浆液的2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酸(5.00kg,17.345mol)和辛可尼丁(2.553kg,8.67mol)。将反应器设定为在1小时内将内部温度升温到80℃，其中固体在加热到设定温度后进入溶液中，然后将溶液保持在该温度至少10分钟，然后冷却至70℃，保持，并且用手性盐(50g,1.0重量％)进行接种。将混合物搅拌10分钟，然后在4小时内降温到20℃内部温度，然后在20℃下保持过夜。将混合物过滤，滤饼用乙酸异丙酯(10.0l,2.0vols)洗涤，并在真空下干燥。然后将滤饼在真空(50℃,真空)中干燥，得到4.7kg盐。通过用一部分乙酸异丙酯(94l,20vol，基于当前盐重量计)制成浆液，将所得固体盐返回到反应器中，并泵送到反应器中并搅拌。然后将混合物加热到内部80℃，搅拌热浆料至少10分钟，然后在4-6小时内降温至20℃,然后在20℃下搅拌过夜。然后将物质过滤并用乙酸异丙酯(9.4l,2.0vol)洗涤滤饼，拉干，将滤饼舀出并在真空(50℃,真空)中干燥，得到3.1kg的固体。将固体(3.1kg)和乙酸异丙酯(62l,20vol，基于盐固体重量计)浆化并添加到反应器中，在n2吹扫下搅拌并加热到80℃，并保持在该温度至少10分钟，然后在4-6小时内降温至20℃，然后搅拌过夜。将混合物过滤，滤饼用乙酸异丙酯(6.2l,2vol)洗涤，干，舀出并在真空(50℃,真空)中干燥，得到2.25kg的固体盐。将固体(2.25kg)和乙酸异丙酯(45l,20vol，基于盐固体重量计)浆化并添加到反应器中，在n2吹扫下搅拌并加热到80℃，保持在该温度至少10分钟，然后在4-6小时内降温至20℃，然后搅拌过夜。将混合物过滤，滤饼用乙酸异丙酯(4.5l,2vol)洗涤，干燥，拉干并在真空(50℃)中干燥，得到呈类白色至棕黄色固体的(2r)-2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酸；(r)-4-喹啉基-[(2s,4s)-5-乙烯基奎宁环-2-基]甲醇(1.886kg,》98.0％ee)。手性纯度通过agilent 1200hplc仪器使用phenomenex lux i-amylose-3柱(3μm,150x 4.6mm)和在20.0分钟内以30％至70％的流动相b运行的双等度梯度来确定。流动相a＝h2o(0.1％cf3co2h)。流动相b＝meoh(0.1％ cf3co2h)。流速＝1.0ml/min，进样量＝2μl，柱温＝30℃，样品浓度：1mg/ml，于60％乙腈/40％水中。
[3323]
步骤2：(2r)-2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酸
[3324]
将(2r)-2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酸；(r)-4-喹啉基-[(2s,4s)-5-乙烯基奎宁环-2-基]甲醇(50g,87.931mmol)在乙酸乙酯(500.00ml)中的悬浮液用盐酸水溶液(200ml,1m,200.00mmol)处理。在室温下搅拌15分钟后，分离两个相。将水相用乙酸乙酯(200ml)萃取两次。将合并的有机层用1n hcl(100ml)洗涤。将有机层经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将物质在高真空下干燥过夜，得到呈淡棕色油的(2r)-2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酸(26.18g，96％)。1h nmr(400mhz,cdcl3)δ7.46-7.31(m,5h),5.88-5.73(m,1h),5.15-4.99(m,2h),4.88(d,j＝10.3hz,1h),4.70(d,j＝10.3hz,1h),2.37-2.12(m,4h)ppm。
19
f nmr(377mhz,cdcl3)δ-71.63(br s,3f)ppm。esi-ms m/z计算值288.0973，实验值287.0(m-1)-；保留时间：2.15分钟。lcms方法：kinetex polar c
18 3.0x 50mm 2.6μm,3min,5％-95％乙腈/h2o(0.1％甲酸)1.2ml/min。
[3325]
中间体5：(2r)-2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酰肼的制备
[3326]
步骤1：n-[[(2r)-2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酰基]氨基]氨基甲酸叔丁酯
[3327]
向(2r)-2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酸(365g,1.266mol)在dmf(2l)中的溶液
中添加hatu(612g,1.610mol)和diea(450ml,2.584mol)，并将混合物在环境温度下搅拌10分钟。向混合物中添加n-氨基氨基甲酸叔丁酯(200g,1.513mol)(添加后轻微放热)，并将混合物在环境温度下搅拌16小时。将反应倒入冰水(5l)中。通过过滤收集所得的沉淀并用水洗涤。将固体溶解在etoac(2l)中，并且用盐水洗涤。将有机相经mgso4干燥，过滤并在真空下浓缩。将油用etoac(500ml)稀释，随后用庚烷(3l)稀释，并在环境温度下搅拌数小时，得到稠密浆液。将浆液用另外的庚烷稀释并过滤以收集绒毛状白色固体(343g)。将滤液浓缩并通过硅胶色谱法(0-40％ etoac/己烷)纯化，得到n-[[(2r)-2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酰基]氨基]氨基甲酸叔丁酯(464g,91％,与来自结晶的产物合并)。esi-ms m/z计算值402.17664，实验值303.0(m+1-boc)
+
；保留时间：2.68分钟。最终纯度通过反相uplc使用waters制造的acquity uplc beh c
18
柱(50
×
2.1mm，1.7μm颗粒)(pn：186002350)和在4.5分钟内从1％-99％流动相b运行的双梯度来确定。流动相a＝h2o(0.05％ cf3co2h)。流动相b＝ch3cn(0.035％ cf3co2h)。流速＝1.2ml/min，进样体积＝1.5μl，并且柱温＝60℃。
[3328]
步骤2：(2r)-2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酰肼
[3329]
向n-[[(2r)-2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酰基]氨基]氨基甲酸叔丁酯(464g,1.153mol)在dcm(1.25l)中的溶液中添加hcl(925ml,4m,3.700mol)并且在环境温度下搅拌混合物20小时。将混合物在真空下浓缩，移除大多数dcm。将混合物用乙酸异丙酯(1l)稀释，并用在1l冰水中的naoh(140g,50％w/w,1.750mol)碱化至ph＝6。分离有机相并用1l盐水洗涤，并将合并的水相用乙酸异丙酯(1l)萃取。将合并的有机相经mgso4干燥，过滤并在真空中浓缩，得到暗黄色油的(2r)-2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酰肼(358g，当量)。1h nmr(400mhz,cdcl3)δ8.02(s,1h),7.44-7.29(m,5h),5.81(ddt,j＝16.8,10.1,6.4hz,1h),5.13-4.93(m,2h),4.75(dd,j＝10.5,1.5hz,1h),4.61(d,j＝10.5hz,1h),3.78(s,2h),2.43(ddd,j＝14.3,11.0,5.9hz,1h),2.26-1.95(m,3h)ppm。esi-ms m/z计算值302.1242，实验值303.0(m+1)
+
；保留时间：2.0分钟。最终纯度通过反相uplc使用waters制造的acquity uplc beh c
18
柱(50
×
2.1mm，1.7μm颗粒)(pn：186002350)和在4.5分钟内从1％-99％流动相b运行的双梯度来确定。流动相a＝h2o(0.05％ cf3co2h)。流动相b＝ch3cn(0.035％ cf3co2h)。流速＝1.2ml/min，进样体积＝1.5μl，并且柱温＝60℃。
[3330]
中间体6：n-[2-[5-[(1r)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的制备
[3331]
步骤1：n-[2-[[[(2r)-2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酰基]氨基]氨基甲酰基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯
[3332]
在环境温度下，向6-溴-3-(叔丁氧基羰基氨基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(304g,789.3mmol)和(2r)-2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酰肼(270g,893.2mmol)在etoac(2.25l)中的混合物中添加diea(425ml,2.440mol)。使用冰水浴向混合物中缓慢添加t3p(622g,50％w/w,977.4mmol)，以保持温度《35℃(温度升高至34℃),并将反应混合物在环境温度下搅拌18小时。添加另外的diea(100ml,574.1mmol)和t3p(95g,298.6mmol)并且在环境温度下搅拌2天。仍然观察到起始材料，并且添加另外的t3p(252g,792mmol)并搅拌5天。用缓慢添加水(2.5l)淬灭反应，并将混合物搅拌30分钟。分离有机相，并用etoac(2l)萃取水相。将合并的有机相用盐水洗涤，经mgso4干燥，过滤，并在真空中浓缩。将粗产物溶解在mtbe(300ml)中，并且用庚烷(3l)稀释，将混合物在环境温度下搅拌12小时，得到浅黄色
浆液。过滤浆料，并将所得固体空气干燥2小时，然后在40℃下真空干燥48小时。将滤液在真空中浓缩并且通过硅胶色谱法(0-20％ etoac/己烷)纯化并与结晶得到的物质合并，得到n-[2-[[[(2r)-2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酰基]氨基]氨基甲酰基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(433g，82％).1h nmr(400mhz,dmso)δ11.07(s,1h),10.91(s,1h),10.32(s,1h),9.15(s,1h),7.53-7.45(m,2h),7.45-7.28(m,3h),5.87(ddt,j＝17.0,10.2,5.1hz,1h),5.09(dq,j＝17.1,1.3hz,1h),5.02(dd,j＝10.3,1.9hz,1h),4.84(q,j＝11.3hz,2h),2.37-2.13(m,4h),1.49(s,9h)ppm。esi-ms m/z计算值668.1069，实验值669.0(m+1)
+
；保留时间：3.55分钟。最终纯度通过反相uplc使用waters制造的acquity uplc beh c
18
柱(50
×
2.1mm，1.7μm颗粒)(pn：186002350)和在4.5分钟内从1％-99％流动相b运行的双梯度来确定。流动相a＝h2o(0.05％ cf3co2h)。流动相b＝ch3cn(0.035％ cf3co2h)。流速＝1.2ml/min，进样体积＝1.5μl，并且柱温＝60℃。
[3333]
步骤2：n-[2-[5-[(1r)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯
[3334]
在氮气下向n-[2-[[[(2r)-2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酰基]氨基]氨基甲酰基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(240g,358.5mmol)在无水乙腈(1.5l)中的溶液中添加diea(230ml,1.320mol)并且将橙色溶液加热至70℃。在1小时内向混合物中添加3等份的对-甲苯磺酰氯(80.5g,422.2mmol)。将混合物在70℃下搅拌9小时，然后添加另外的对-甲苯磺酰氯(6.5g,34.09mmol)。将混合物搅拌总共24小时，然后允许其冷却到环境温度。将乙腈在真空中去除，得到深橙色油状物，将其用etoac(1.5l)和水(1.5l)稀释。将有机相分离并用500ml的1m hcl、500ml盐水洗涤，经mgso4干燥，过滤，并在真空中浓缩。通过硅胶色谱法(0-20％ etoac/己烷)的纯化提供n-[2-[5-[(1r)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(200g，86％)。1h nmr(400mhz,dmso)δ10.11(s,1h),9.10(s,1h),7.55-7.48(m,2h),7.47-7.28(m,3h),5.87(ddt,j＝16.7,10.2,6.4hz,1h),5.11(dt,j＝17.2,1.7hz,1h),5.01(dt,j＝10.2,1.5hz,1h),4.74(d,j＝10.6hz,1h),4.65(d,j＝10.6hz,1h),2.55-2.42(m,2h),2.30(qd,j＝11.3,10.3,6.9hz,2h),1.52(s,9h)ppm。esi-ms m/z计算值650.0963，实验值650.0(m+1)
+
；保留时间：3.78分钟。最终纯度通过反相uplc使用waters制造的acquity uplc beh c
18
柱(50
×
2.1mm，1.7μm颗粒)(pn：186002350)和在4.5分钟内从1％-99％流动相b运行的双梯度来确定。流动相a＝h2o(0.05％ cf3co2h)。流动相b＝ch3cn(0.035％ cf3co2h)。流速＝1.2ml/min，进样体积＝1.5μl，并且柱温＝60℃。
[3335]
中间体7：n-[2-[5-[(1r)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]-n-叔丁氧基羰基-氨基甲酸叔丁酯的制备
[3336]
步骤1：n-[2-[5-[(1r)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]-n-叔丁氧基羰基-氨基甲酸叔丁酯
[3337]
向n-[2-[5-[(1r)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(222g,340.8mmol)在mtbe(1.333l)中的溶液中添加dipea(65.3ml,374.9mmol)，随后添加dmap(2.09g,17.11mmol)。在约8分钟内添加二碳酸二叔丁酯(111.6g,511.3mmol)在mtbe(250ml)中的溶液，并将所得混合物搅拌另外30分钟。添加1l水并分离各层。用khso4(886ml,0.5m,443.0mmol)、300ml盐水洗涤有机层，用
mgso4干燥，并且通过在45℃下旋转蒸发来蒸发大部分(》95％)的mtbe，留下稠密的油状物。添加1.125l庚烷，在45℃旋转蒸发浴中旋转直至溶解，然后通过旋转蒸发来蒸发出325ml溶剂。使旋转蒸发浴温度降至室温，并且在蒸发期间产物开始结晶。然后将烧瓶放入-20℃的冰箱中过夜。将所得固体过滤并用冷庚烷洗涤，并在室温下干燥3天，得到n-[2-[5-[(1r)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]-n
‑‑
叔丁氧基羰基-氨基甲酸叔丁酯(240.8g,94％)。1h nmr(400mhz，氯仿-d)δ7.95(s,1h),7.52-7.45(m,2h),7.44-7.36(m,2h),7.36-7.29(m,1h),5.83-5.67(m,1h),5.08-5.00(m,1h),5.00-4.94(m,1h),4.79(d,j＝10.4hz,1h),4.64(d,j＝10.4hz,1h),2.57-2.26(m,3h),2.26-2.12(m,1h),1.41(s,18h)ppm。esi-ms m/z计算值750.14874，实验值751.1(m+1)
+
；保留时间：3.76分钟。最终纯度通过反相uplc使用waters制造的acquity uplc beh c
18
柱(50
×
2.1mm，1.7μm颗粒)(pn：186002350)和在4.5分钟内从1％-99％流动相b运行的双梯度来确定。流动相a＝h2o(0.05％ cf3co2h)。流动相b＝ch3cn(0.035％ cf3co2h)。流速＝1.2ml/min，进样体积＝1.5μl，并且柱温＝60℃。
[3338]
中间体8：n-[2-[5-[(1r)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-羟基-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]-n-叔丁氧基羰基-氨基甲酸叔丁酯的制备
[3339]
步骤1：n-[2-[5-[(1r)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-羟基-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]-n-叔丁氧基羰基-氨基甲酸叔丁酯
[3340]
将n-[2-[5-[(1r)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]-n-叔丁氧基羰基-氨基甲酸叔丁酯(280g,372.6mmol)溶解在dmso(1.82l)(黄色溶液)中，并在室温搅拌下用乙酸铯(215g,1.120mol)处理。将黄色悬浮液在80℃下加热5小时。将反应混合物冷却至室温，并且添加至搅拌的1kg氯化铵溶解在其中的冷水乳液(5.5l)中，并且添加mtbe和庚烷(2l)(在20l中)的1:1混合物。分离各相且有机相用水(3
×
3l)和盐水(1
×
2.5l)洗涤。将有机相用mgso4干燥，过滤且在减压下浓缩。将所得黄色溶液用庚烷(约1l)稀释并用n-[2-[5-[(1r)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-羟基-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]-n-叔丁氧基羰基-氨基甲酸叔丁酯接种并在100mbar压力下在室温下在旋转蒸发器上搅拌1.5小时。将固体物质在室温下机械搅拌2小时，过滤所得的稠密细悬浮液，用干冰冷却的庚烷洗涤，并且在45℃下在真空下用氮气排放干燥16小时，得到呈类白色固体的n-[2-[5-[(1r)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-羟基-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]-n-叔丁氧基羰基-氨基甲酸叔丁酯(220g，85％)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ13.28(s,1h),8.43(s,1h),7.58-7.26(m,5h),5.85(ddt,j＝16.8,10.3,6.5hz,1h),5.10(dq,j＝17.2,1.6hz,1h),5.01(dq,j＝10.2,1.3hz,1h),4.76(d,j＝11.0hz,1h),4.65(d,j＝11.0hz,1h),2.55(dd,j＝9.6,5.2hz,2h),2.23(td,j＝13.2,10.0,5.7hz,2h),1.27(d,j＝3.8hz,18h)ppm。esi-ms m/z计算值688.23315，实验值689.0(m+1)
+
；保留时间：3.32分钟。最终纯度通过反相uplc使用waters制造的acquity uplc beh c
18
柱(50
×
2.1mm，1.7μm颗粒)(pn：186002350)和在4.5分钟内从1％-99％流动相b运行的双梯度来确定。流动相a＝h2o(0.05％cf3co2h)。流动相b＝ch3cn(0.035％ cf3co2h)。流速＝1.2ml/min，进样体积＝1.5μl，并且柱温＝60℃。
[3341]
c.(6r,12r)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇的制备
[3342]
步骤1：n-[2-[5-[(1r)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-[(1r)-1-甲基丁-3-烯氧基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]-n-叔丁氧基羰基-氨基甲酸叔丁酯
[3343]
将n-[2-[5-[(1r)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-羟基-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]-n-叔丁氧基羰基-氨基甲酸叔丁酯(159.3g,231.3mmol)和三苯基膦(72.9g,277.9mmol)溶解在甲苯(1l)中，然后添加(2s)-戊-4-烯-2-醇(28.7ml,278.9mmol)。将混合物加热到45℃,然后在40分钟内缓慢添加diad(58.3ml,296.1mmol)(放热)。在接下来的大约2小时，将混合物冷却至室温。在此冷却期间，在前10分钟之后，添加三苯基膦(6.07g,23.14mmol)。在另外1小时后，添加另外的三苯基膦(3.04g,11.59mmol)。在另外23分钟后，添加diad(2.24ml,11.57mmol)。在约2小时时间段冷却到室温之后，将混合物冷却至15℃,并且添加diad-三苯基膦氧化物复合物的晶种，这引起沉淀，然后添加1000ml庚烷。将混合物在-20℃下贮存3天。滤出并丢弃沉淀并浓缩滤液，得到红色残余物/油状物。将残余物在45℃下溶解在613ml庚烷中，然后冷却至0℃,用diad-三苯基膦氧化物复合物接种，在0℃下搅拌30分钟，然后过滤溶液。将滤液浓缩至较小体积，然后加载到1.5kg硅胶柱上(柱体积＝2400ml，流速＝600ml/min)。在32分钟(8柱体积)内运行1％至6％的etoac/己烷梯度，然后保持在6％的etoac/己烷，直到产物洗脱完成，得到n-[2-[5-[(1r)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-[(1r)-1-甲基丁-3-烯氧基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]-n-叔丁氧基羰基-氨基甲酸叔丁酯(163.5g,93％)。1h nmr(400mhz，氯仿-d)δ7.82(s,1h),7.43-7.27(m,5h),5.88-5.69(m,2h),5.35(h,j＝6.2hz,1h),5.16-4.94(m,4h),4.81(d,j＝10.7hz,1h),4.63(d,j＝10.7hz,1h),2.58-2.15(m,6h),1.42(s,18h),1.36(d,j＝6.2hz,3h)ppm。esi-ms m/z计算值756.2958，实验值757.3(m+1)
+
；保留时间：4.0分钟。最终纯度通过反相uplc使用waters制造的acquity uplc beh c
18
柱(50
×
2.1mm，1.7μm颗粒)(pn：186002350)和在4.5分钟内从1％-99％流动相b运行的双梯度来确定。流动相a＝水(0.05％ cf3co2h)。流动相b＝乙腈(0.035％ cf3co2h)。流速＝1.2ml/min，进样体积＝1.5μl，并且柱温＝60℃。
[3344]
步骤2：n-[(6r,12r)-6-苄氧基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,9,14,16-六烯-17-基]-n-丁氧基羰基-氨基甲酸叔丁酯(e/z混合物)
[3345]
运行以下反应，在平行运行的两个12l反应烧瓶之间等分。使用机械搅拌，并使用粗孔隙率气体分散管对反应进行恒定的氮气吹扫。向每个烧瓶中添加溶解在dce(每个烧瓶中8l)中的n-[2-[5-[(1r)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-[(1r)-1-甲基丁-3-烯氧基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]-n-叔丁氧基羰基-氨基甲酸叔丁酯(每个烧瓶中54g,71.36mmol)，并在室温下用氮气强烈吹扫两个烧瓶。将两个烧瓶加热到62℃,并且将grubbs第1代催化剂(9g，每个烧瓶中的10.94mmol)添加到每个反应中，并且在400rpm下搅拌，同时将内部温度控制设定成75℃,用强氮气吹扫(两个反应在大约20分钟后均达到约75℃)。在5小时15分钟之后，将内部温度控制设定为45℃。在大约2小时后，将2-硫烷基吡啶-3-甲酸(每个烧瓶中的11g,70.89mmol)添加到每个烧瓶中，随后添加三乙胺(每个烧瓶中的10ml,71.75mmol)。在完成添加后，关闭氮气吹扫，并将两个反应烧瓶在45℃下露天搅拌过夜。然后将反应从加热中移除，并将130g硅胶添加到每个反应中，并且将每个反
应在室温下搅拌。在大约2小时后，将绿色混合物组合并在硅藻土上过滤，然后在43℃下通过旋转蒸发浓缩。将获得的残余物溶解于二氯甲烷/庚烷1:1(400ml)中，并且通过过滤去除形成的橙色固体。将绿色母液蒸发，得到115.5g绿色泡沫。将该物质溶解在500ml 1:1二氯甲烷/己烷中，然后加载到3kg硅胶柱上(柱体积＝4800ml，流速＝900ml/min)。在43分钟(8柱体积)内运行2％至9％的etoac/己烷梯度，然后在9％ etoac下运行，直到产物完成洗脱，得到77.8g的不纯产物。将该物质与甲醇(约500ml)共蒸发，然后用甲醇(200ml)稀释，得到234.5g甲醇溶液，分成两半，并且每一半通过反相色谱法(3.8kg，c
18
柱，柱体积＝3300ml，流速＝375ml/min，以甲醇溶液形式加载)纯化。将柱在55％乙腈下运行约5分钟(0.5柱容积)，然后在约170分钟(19-20柱容积)内以55％至100％乙腈/水梯度运行，然后保持在100％乙腈下，直至产物和杂质洗脱完成。将来自两个柱的清洁产物级分合并并通过旋转蒸发浓缩，然后用乙醇转移到5l烧瓶中，蒸发并仔细干燥(成为泡沫),得到烯烃异构体的混合物n-[(6r,12r)-6-苄氧基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,9,14,16-六烯-17-基]-n-叔丁氧基羰基-氨基甲酸叔丁酯(e/z混合物)(55.5g,53％)。esi-ms m/z计算值728.26447，实验值729.0(m+1)
+
；保留时间：3.82分钟。最终纯度通过反相uplc使用waters制造的acquity uplc beh c
18
柱(50
×
2.1mm，1.7μm颗粒)(pn：186002350)和在4.5分钟内从1％-99％流动相b运行的双梯度来确定。流动相a＝水(0.05％ cf3co2h)。流动相b＝乙腈(0.035％ cf3co2h)。流速＝1.2ml/min，进样体积＝1.5μl，并且柱温＝60℃。
[3346]
步骤3：n-[(6r,12r)-6-苄氧基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-17-基]-n-叔丁氧基羰基-氨基甲酸叔丁酯
[3347]
将n-[(6r,12r)-6-苄氧基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,9,14,16-六烯-17-基]-n-叔丁氧基羰基-氨基甲酸叔丁酯(e/z混合物)(11.7g,16.06mmol)溶于搅拌的乙醇(230ml)中并使烧瓶在真空/氮气中循环3次，并用10％ pd/c(50％水湿润,2.2g,5％w/w,1.034mmol)处理。使混合物在真空/氮气之间循环3次并且在真空/氢气之间循环3次。然后将混合物在氢气(气球)下强烈搅拌7.5小时。通过过滤去除催化剂，替换为新鲜的10％ pd/c(50％水湿润,2.2g 5％w/w,1.034mmol)并且在氢气(气球)下剧烈搅拌过夜。然后，再次通过过滤去除催化剂，将滤液蒸发，并且将残余物(11.3g,1g留用)溶解于乙醇(230ml)中，装入新鲜的10％ pd/c(50％水湿润,2.2g,5％w/w,1.034mmol),并在氢气(气球)下剧烈搅拌6小时，再次重新装入新鲜的10％ pd/c(50％水湿润,2.2g,5％w/w,1.034mmol)并在氢气(气球)下剧烈搅拌过夜。通过过滤去除催化剂，并且蒸发滤液(获得10g残余物)。该粗物质(10g+1g上述留用)通过硅胶色谱法(330g柱，液体加载在二氯甲烷中)，用0％至15％乙酸乙酯/己烷的线性梯度纯化，直到产物洗脱，随后用15％至100％乙酸乙酯/己烷纯化，得到呈无色泡沫的n-[(6r,12r)-6-苄氧基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-17-基]-n-叔丁氧基羰基-氨基甲酸叔丁酯(9.1g,78％)。esi-ms m/z计算值730.2801，实验值731.0(m+1)
+
；保留时间：3.89分钟。最终纯度通过反相uplc使用waters制造的acquity uplc beh c
18
柱(50
×
2.1mm，1.7μm颗粒)(pn：186002350)和在4.5分钟内从1％-99％流动相b运行的双梯度来确定。流动相a＝水(0.05％ cf3co2h)。
流动相b＝乙腈(0.035％ cf3co2h)。流速＝1.2ml/min，进样体积＝1.5μl，并且柱温＝60℃。
[3348]
步骤4：(6r,12r)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇
[3349]
将n-[(6r,12r)-6-苄氧基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-17-基]-n-叔丁氧基羰基-氨基甲酸叔丁酯(8.6g,11.77mmol)溶解在乙醇(172ml)中，然后使烧瓶在真空/氮气之间循环3次。用10％ pd/c(50％水湿润,1.8g,5％w/w,0.8457mmol)处理混合物，然后在真空/氮气之间循环3次，并在真空/氢气之间循环3次，然后在氢气(气球)下在室温下剧烈搅拌18小时。将混合物在真空/氮气之间循环3次，在硅藻土上过滤，用乙醇洗涤，然后蒸发滤液，得到7.3g呈类白色固体的n-叔丁氧基羰基-n-[(6r,12r)-6-羟基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯。1h nmr和ms确认了预期产物。使用针对cftr增效剂活性的标准尤斯室测定来确认cftr调节活性。
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其它实施例
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前述论述仅公开并描述了本公开的示例性实施例。所属领域的技术人员将从此类论述以及从附图和权利要求书中容易地认识到，在不脱离如以下权利要求书中限定的本公开的精神和范围的情况下，可在其中进行各种改变、修改和变化。