1.一种双特异性抗体,所述双特异性抗体包含
2.如权利要求1所述的双特异性抗体,其中所述taa是psma、her2或bcma。
3.如权利要求1所述的双特异性抗体,其中所述taa是psma。
4.如权利要求1-3中任一项所述的双特异性抗体,其中所述第一多肽与所述第二多肽通过至少一个二硫键接合。
5.如权利要求1-4中任一项所述的双特异性抗体,其中结合至所述taa的所述第一scfv呈vh-vl取向。
6.如权利要求1-4中任一项所述的双特异性抗体,其中结合至所述taa的所述第一scfv呈vl-vh取向。
7.如权利要求1-6中任一项所述的双特异性抗体,其中结合至所述taa的所述第二scfv呈vh-vl取向。
8.如权利要求1-6中任一项所述的双特异性抗体,其中结合至所述taa的所述第二scfv呈vl-vh取向。
9.如权利要求1-8中任一项所述的双特异性抗体,其中结合至所述taa的所述第一scfv与结合至所述taa的所述第二scfv是相同的。
10.如权利要求1-9中任一项所述的双特异性抗体,其中结合至cd3的所述scfv呈vh-vl取向。
11.如权利要求1-9中任一项所述的双特异性抗体,其中结合至cd3的所述scfv呈vl-vh取向。
12.如权利要求1-11中任一项所述的双特异性抗体,其中所述第一多肽中的所述免疫球蛋白恒定区包含节突变和/或所述第二多肽中的所述免疫球蛋白恒定区包含孔突变。
13.如权利要求1-11中任一项所述的双特异性抗体,其中所述第一多肽中的所述免疫球蛋白恒定区包含孔突变和/或所述第二多肽中的所述免疫球蛋白恒定区包含结突变。
14.如权利要求12或13所述的双特异性抗体,其中包含结突变的免疫球蛋白恒定区包含seq id no:66的氨基酸序列和/或包含孔突变的所述免疫球蛋白恒定区包含seq id no:68的氨基酸序列。
15.如权利要求1-14中任一项所述的双特异性抗体,其中与野生型免疫球蛋白恒定区相比,所述免疫球蛋白恒定区包含一个、两个、三个、四个、五个或更多个氨基酸取代和/或缺失以防止fcγr1和/或fcγriiib的结合。
16.如权利要求1-14中任一项所述的双特异性抗体,其中与野生型免疫球蛋白恒定区相比,所述免疫球蛋白恒定区包含一个、两个、三个、四个、五个或更多个氨基酸取代和/或缺失以防止或降低cdc活性。
17.如权利要求1-16中任一项所述的双特异性抗体,其中所述免疫球蛋白恒定区包含igg1 ch2结构域,根据eu编号系统,所述igg1 ch2结构域包含e233p、l234a、l235a、g237a和k322a取代以及g236缺失。
18.如权利要求1-17中任一项所述的双特异性抗体,其中所述免疫球蛋白恒定区包含igg1的免疫球蛋白ch2和ch3结构域。
19.如权利要求1-18中任一项所述的双特异性抗体,其中所述双特异性抗体不含ch1结构域。
20.如权利要求1-19中任一项所述的双特异性抗体,其中结合至所述taa的所述第一scfv、结合至cd3的所述scfv和/或结合至所述taa的所述第二scfv包含甘氨酸-丝氨酸接头。
21.如权利要求1-19中任一项所述的双特异性抗体,其中结合至所述taa的所述第一scfv、结合至cd3的所述scfv和/或结合至所述taa的所述第二scfv包括含氨基酸序列(gly4ser)n的甘氨酸-丝氨酸接头,其中n=1-5。
22.如权利要求21所述的双特异性抗体,其中n=4。
23.如权利要求1-22中任一项所述的双特异性抗体,其中所述第一多肽和/或所述第二多肽还在scfv与免疫球蛋白恒定结构域之间包含至少一个接头。
24.如权利要求23所述的双特异性抗体,其中所述接头包含铰链区。
25.如权利要求24所述的双特异性抗体,其中所述铰链是igg1铰链区。
26.如权利要求25所述的双特异性抗体,其中所述铰链包含seq id no:156的氨基酸序列。
27.如权利要求3-26中任一项所述的双特异性抗体,其中结合至psma的所述第一scfv和/或结合至psma的所述第二scfv能够结合至食蟹猴psma。
28.如权利要求27所述的双特异性抗体,其中结合至psma的所述第一scfv和/或结合至食蟹猴psma的所述第二scfv具有比结合至人psma的ec50高不超过5倍的ec50。
29.如权利要求1-28中任一项所述的双特异性抗体,其中所述双特异性抗体能够同时结合至所述taa和cd3。
30.如权利要求1-29所述的双特异性抗体,其中结合至cd3的所述scfv结合至cd3ε。
31.如权利要求3-30中任一项所述的双特异性抗体,其中结合至psma的所述第一scfv包含可变重链(vh)互补决定区(cdr)1、vh cdr2和vh cdr3,所述vh cdr1、vh cdr2和vhcdr3分别包含seq id no:70、72和74的氨基酸序列,并且包含可变轻链(vl)cdr1、vl cdr2和vl cdr3,所述vl cdr1、vl cdr2和vl cdr3分别包含seq id no:76、78和80的氨基酸序列。
32.如权利要求3-31中任一项所述的双特异性抗体,其中结合至psma的所述第一scfv包括含seq id no:82的氨基酸序列的vh结构域,并且包括含seq id no:84的氨基酸序列的vl结构域。
33.如权利要求3-32中任一项所述的双特异性抗体,其中结合至psma的所述第一scfv包含seq id no:86的氨基酸序列。
34.如权利要求1-33中任一项所述的双特异性抗体,其中结合至cd3的所述scfv包含vhcdr1、vh cdr2和vh cdr3,所述vh cdr1、vh cdr2和vh cdr3分别包含seq id no:88、90和92的氨基酸序列,并且包含vl cdr1、vl cdr2和vl cdr3,所述vl cdr1、vl cdr2和vl cdr3分别包含seq id no:94、96和98的氨基酸序列。
35.如权利要求1-34中任一项所述的双特异性抗体,其中结合至cd3的所述scfv包括含seq id no:100的氨基酸序列的vh结构域,并且包括含seq id no:102的氨基酸序列的vl结构域。
36.如权利要求1-35中任一项所述的双特异性抗体,其中结合至cd3的所述scfv包含seq id no:104或110的氨基酸序列。
37.如权利要求3-36中任一项所述的双特异性抗体,其中结合至psma的所述第二scfv包含vh cdr1、vh cdr2和vh cdr3,所述vh cdr1、vh cdr2和vh cdr3分别包含seq id no:70、72和74的氨基酸序列,并且包含vl cdr1、vl cdr2和vl cdr3,所述vl cdr1、vl cdr2和vl cdr3分别包含seq id no:76、78和80的氨基酸序列。
38.如权利要求3-37中任一项所述的双特异性抗体,其中结合至psma的所述第二scfv包括含seq id no:82的氨基酸序列的vh结构域,并且包括含seq id no:84的氨基酸序列的vl结构域。
39.如权利要求3-38中任一项所述的双特异性抗体,其中结合至psma的所述第二scfv包含seq id no:86的氨基酸序列。
40.如权利要求3-39中任一项所述的双特异性抗体,其中所述第一多肽包含seq idno:106、178或112的氨基酸序列。
41.如权利要求3-39中任一项所述的双特异性抗体,其中所述第二多肽包含seq idno:108的氨基酸序列。
42.如权利要求1-41中任一项所述的双特异性抗体,其中所述抗体能够促进cd8+t细胞和/或cd4+t细胞的扩增。
43.如权利要求1-42中任一项所述的双特异性抗体,其中所述抗体能够活化cd8+t细胞和/或cd4+t细胞。
44.如权利要求1-43中任一项所述的双特异性抗体,其中所述抗体能够增加中央记忆t细胞(tcm)和/或效应记忆t细胞(tem)。
45.如权利要求1-44中任一项所述的双特异性抗体,其中所述抗体能够减少原始和/或终末分化t细胞(teff)。
46.如权利要求1-45中任一项所述的双特异性抗体,其中所述抗体能够减少ifn-γ、il-2、il-6、tnf-α、颗粒酶b、il-10和/或gm-csf的分泌。
47.如权利要求1-46中任一项所述的双特异性抗体,其中所述抗体能够增加nfκb、nfat和/或erk信号传导路径的信号传导。
48.一种包含psma结合结构域的抗体或其抗原结合片段,其中所述psma结合结构域包含vh和vl,其中所述vh包含seq id no:82的氨基酸序列。
49.一种包含psma结合结构域的抗体或其抗原结合片段,其中所述psma结合结构域包含vh和vl,其中所述vl包含seq id no:84的氨基酸序列。
50.如权利要求48或49所述的抗体或其抗原结合片段,其中所述vh包含seq id no:82的氨基酸序列,并且所述vl包含seq id no:84的氨基酸序列。
51.一种包含cd3抗原结合结构域的抗体或其抗原结合片段,其中所述cd3抗原结合结构域包含vh和vl,其中所述vh包含seq id no:100的氨基酸序列。
52.一种包含cd3抗原结合结构域的抗体或其抗原结合片段,其中所述cd3抗原结合结构域包含vh和vl,其中所述vl包含seq id no:102的氨基酸序列。
53.如权利要求51或52所述的抗体或其抗原结合片段,其中所述vh包含seq id no:100的氨基酸序列,并且所述vl包含seq id no:102的氨基酸序列。
54.如权利要求48-53中任一项所述的抗体或其抗原结合片段,其中所述抗体是igg抗体,任选地其中所述igg抗体是igg1抗体。
55.如权利要求54所述的抗体或其抗原结合片段,其中所述抗体还包含重链恒定区和轻链恒定区,任选地其中所述重链恒定区是人igg1重链恒定区,并且任选地其中所述轻链恒定区是人iggκ轻链恒定区。
56.如权利要求48-53中任一项所述的抗体或其抗原结合片段,其中所述抗体包含fab、fab'、f(ab')2、scfv、二硫键连接的fv,或scfv-fc。
57.如权利要求56所述的抗体或其抗原结合片段,其中所述抗体包含scfv。
58.如权利要求48-50和56中任一项所述的抗体或其抗原结合片段,其中所述抗体或抗原结合片段包含seq id no:86的氨基酸序列。
59.如权利要求48-53和56中任一项所述的抗体或其抗原结合片段,其中所述抗体或抗原结合片段包含seq id no:104的氨基酸序列。
60.如权利要求48-59中任一项所述的抗体或其抗原结合片段,其中所述抗体或片段是双特异性的。
61.如权利要求60所述的抗体或抗原结合片段,其中所述双特异性抗体或片段包含特异性结合psma的抗原结合结构域和特异性结合cd3的抗原结合结构域。
62.如权利要求61所述的抗体或其抗原结合片段,其中(i)特异性结合psma的所述抗原结合结构域包含seq id no:82和84的氨基酸序列,和/或(ii)特异性结合cd3的所述抗原结合结构域包含seq id no:100和102的氨基酸序列。
63.如权利要求61或62所述的抗体或其抗原结合片段,其中特异性结合psma的所述抗原结合结构域包含呈vh-vl取向的vh和vl。
64.如权利要求61或62所述的抗体或抗原结合片段,其中特异性结合psma的所述抗原结合结构域包含呈vl-vh取向的vh和vl。
65.如权利要求61-64中任一项所述的抗体或其抗原结合片段,其中特异性结合cd3的所述抗原结合结构域包含呈vh-vl取向的vh和vl。
66.如权利要求61-64中任一项所述的抗体或抗原结合片段,其中特异性结合cd3的所述抗原结合结构域包含呈vl-vh取向的vh和vl。
67.如权利要求61或62所述的抗体或其抗原结合片段,其中特异性结合psma的所述抗原结合结构域包括含seq id no:86的氨基酸序列的scfv。
68.如权利要求61或62所述的抗体或其抗原结合片段,其中特异性结合cd3的所述抗原结合结构域包括含seq id no:104的氨基酸序列的scfv。
69.如权利要求51-68中任一项所述的抗体或其抗原结合片段,其中所述抗体对于cd3是单价的。
70.如权利要求51-68中任一项所述的抗体或其抗原结合片段,其中所述抗体对于cd3是二价的。
71.如权利要求48-50和48-70中任一项所述的抗体或其抗原结合片段,其中所述抗体对于psma是二价的。
72.如权利要求48-50和48-70中任一项所述的抗体或其抗原结合片段,其中所述抗体对于psma是单价的。
73.如权利要求48-68中任一项所述的抗体或其抗原结合片段,其中所述抗体或片段包含多肽,所述多肽按从氨基末端到羧基末端的顺序包含(i)第一单链可变片段(scfv);(ii)接头,任选地其中所述接头是铰链区;(iii)免疫球蛋白恒定区;以及(iv)第二scfv,其中(a)所述第一scfv包含人cd3抗原结合结构域,并且所述第二scfv包含人psma抗原结合结构域,或者(b)所述第一scfv包含人psma抗原结合结构域并且所述第二scfv包含人cd3抗原结合结构域。
74.如权利要求48-72中任一项所述的抗体或其抗原结合片段,其中所述抗体或片段包含节突变和孔突变。
75.一种双特异性抗体,所述双特异性抗体包含:
76.一种结合至psma和cd3的双特异性抗体,其中所述双特异性抗体包含:第一多肽,所述第一多肽包含seq id no:106、178或112的氨基酸序列;以及第二多肽,所述第二多肽包含seq id no:108的氨基酸序列,并且其中所述双特异性抗体仅含一个cd3结合结构域。
77.一种结合至psma和cd3的双特异性抗体,其中所述双特异性抗体由包含seq id no:106、178或112的氨基酸序列的第一多肽和包含seq id no:108的氨基酸序列的第二多肽组成。
78.一种多核苷酸,所述多核苷酸编码权利要求1-47和75-77中任一项所述的双特异性抗体或权利要求48-74中任一项所述的抗体。
79.一种载体,所述载体包含权利要求78所述的多核苷酸,任选地其中所述载体是表达载体。
80.一种宿主细胞,所述宿主细胞包含权利要求78所述的多核苷酸或权利要求79所述的载体。
81.一种宿主细胞,所述宿主细胞包含编码权利要求1-47和75-77中任一项所述的双特异性抗体或权利要求48-74中任一项所述的抗体的多核苷酸的组合。
82.如权利要求81所述的宿主细胞,其中所述多核苷酸在单一载体上编码。
83.如权利要求81所述的宿主细胞,其中所述多核苷酸在多个载体上编码。
84.如权利要求81-83中任一项所述的宿主细胞,所述宿主细胞选自由cho、hek293或cos细胞组成的组。
85.一种产生特异性结合至人psma和人cd3的双特异性抗体的方法,所述方法包括培养权利要求81-84中任一项所述的宿主细胞以产生所述抗体,任选地还包括回收所述抗体。
86.一种用于检测样品中的psma和cd3的方法,所述方法包括使所述样品与权利要求1-47和75-77中任一项所述的双特异性抗体接触,任选地其中所述样品包含细胞。
87.一种药物组合物,所述药物组合物包含权利要求1-47和75-77中任一项所述的双特异性抗体或权利要求48-74中任一项所述的抗体,以及药学上可接受的赋形剂。
88.一种用于增加t细胞增殖的方法,所述方法包括使t细胞与权利要求1-47和75-77中任一项所述的双特异性抗体或权利要求78所述的药物组合物接触。
89.如权利要求88所述的方法,其中所述t细胞是cd4+t细胞。
90.如权利要求88所述的方法,其中所述t细胞是cd8+t细胞。
91.如权利要求88-90中任一项所述的方法,其中所述细胞在受试者体内并且所述接触包括向所述受试者施用所述抗体或所述药物组合物。
92.一种用于增强受试者体内的免疫反应的方法,所述方法包括向所述受试者施用有效量的权利要求1-47和75-77中任一项所述的双特异性抗体或权利要求87所述的药物组合物。
93.一种用于诱导针对表达前列腺特异性膜抗原(psma)的细胞的重定向t细胞的细胞毒性(rtcc)的方法,所述方法包括
94.一种用于治疗受试者的病症的方法,其中所述疾病以前列腺特异性膜抗原(psma)的过表达为特征,所述方法包括向所述受试者施用治疗有效量的权利要求1-47和75-77中任一项所述的双特异性抗体或权利要求87所述的组合物。
95.如权利要求94所述的方法,其中权利要求1-47和75-77中任一项所述的双特异性抗体或权利要求87所述的组合物在所述受试者体内诱导重定向t细胞的细胞毒性(rtcc)。
96.如权利要求94或95所述的方法,其中所述双特异性抗体促进cd8+和/或cd4+t细胞的扩增或增殖。
97.如权利要求94或95所述的方法,其中所述双特异性抗体活化cd8+和/或cd4+t细胞。
98.如权利要求94或95所述的方法,其中所述双特异性抗体增加中央记忆t细胞(tcm)和/或效应记忆t细胞(tem)。
99.如权利要求94或95所述的方法,其中所述双特异性抗体减少原始和/或终末分化t细胞(teff)。
100.如权利要求94或95所述的方法,其中所述双特异性抗体减少ifn-γ、il-2、il-6、tnf-α、颗粒酶b、il-10和/或gm-csf的分泌。
101.如权利要求94或95所述的方法,其中所述双特异性抗体增加nfκb、nfat和/或erk信号传导路径的信号传导。
102.如权利要求94所述的方法,其中所述病症是癌症。
103.如权利要求102所述的方法,其中所述癌症选自由以下组成的组:前列腺癌、psma(+)癌症、转移性前列腺癌、透明细胞肾癌、膀胱癌、肺癌、结直肠癌和胃癌。
104.如权利要求102所述的方法,其中所述癌症是前列腺癌。
105.如权利要求104所述的方法,其中所述前列腺癌是去势抵抗性前列腺癌。
106.如权利要求94所述的方法,其中所述病症是前列腺病症。
107.如权利要求106所述的方法,其中所述前列腺病症选自由前列腺癌和良性前列腺增生组成的组。