喹喔啉衍生物、制备方法及用途

1.本发明涉及农药合成技术领域，特别涉及喹喔啉衍生物、制备方法及用途。


背景技术：

2.喹喔啉衍生物是一类含氮杂环化合物，是一类重要的化学中间体，在新型杂环化合物的设计和合成中发挥着重要作用，对药物的发现具有重要意义。大量文献报道表明，喹喔啉衍生物具有广谱生物活性，如抗菌，抗病毒，抗肿瘤，抗结核等。具有一定的研究和应用价值，近年来人们对它的研究也越来越多。
3.2001年，rangisetty等(rangisetty j.b.,gupta c.n.,prasad a.l.,et al.j.pharm.pharmacol.,2001,53,1409-1413.)设计合成了一系列2-芳基氨基喹喔啉。所有的化合物都进行了抗疟活性测试。其中部分化合物在75mg/kg时具有一定的抗疟疾活性。
4.2005年，赵翠花等(赵翠花,陈奕,丁健,等,药学学报,2005,40,814-819.)设计合成一系列喹喔啉类抗肿瘤药物，初步体外抗肿瘤活性测试表明，1
×
10-4
mol/l浓度时，部分化合物的抗肿瘤活性和xk469相当。
5.2013年，parhi等(parhi a k.,zhang y z.,saionz k w.,et al.bioorg.med.chem.lett.,2013,23,4968-4974.)合成了一系列喹喔啉类化合物，并对合成的化合物进行2种金黄色葡萄球菌和2种粪肠球菌的抑菌活性研究。结果表明，其中一个化合物对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(mrsa)和对甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌(mssa)的mic都为0.5μmol/l，优于万古霉素对mrsa和mssa的抑制浓度(2μmol/l和1μmol/l)。
6.2017年，ibrahim等(ibrahim m k.,eissa i h.,abdallah.e.,et al.bioorgan.med.chem.,2017,25,1496-1513.)将磺酰脲或磺酰基硫脲引入到喹喔啉的骨架中，并对目标化合物进行了抗高血糖活性测试。测试表明，目标化合物表现显著的抗高血糖活性。
7.2019年，mixo等(mixo a.s.,lerato r.,dikgale m.,et al,molecules,2019,24,407.)合成了一组具有广泛生物活性的喹喔啉衍生物，具有靶向和选择性抗癌药物活性，部分化合物表现出抑制细胞活力的能力，刺激活性氧的产生，并诱导a549肺癌细胞凋亡。
8.综上所述，喹喔啉结构独特，在药物的研究与应用中有资源优势，在医药中应用广泛，在农药方面具有少量商品化的药剂，但在抗菌方面的的应用较少。因此，提供喹喔啉衍生物、制备方法及抗植物病菌的用途具有重要的现实意义。


技术实现要素：

9.有鉴于此，本发明提供了喹喔啉衍生物、制备方法及用途。本发明的实验结果表明，喹喔啉衍生物对植物病菌具有一定的抑制作用，其中部分目标化合物对抗植物病菌表现出优良活性，可作为潜在的抗植物病菌药物，具有较好的应用前景。
10.为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：
11.本发明提供了喹喔啉衍生物，其结构如式i所示：
[0012][0013]
其中，r1选自氢、氯；和/或
[0014]
r2选自甲基、烷氧基、硝基、氰基或卤素中的一种或多种。
[0015]
在本发明的一些具体实施方案中，所述的喹喔啉衍生物中，
[0016]
所述甲基包括2-甲基；和/或
[0017]
所述烷氧基包括3-甲氧基；和/或
[0018]
所述硝基包括4-硝基；和/或
[0019]
所述卤素包括2,4-二氯、2-氟、2-氯、3-氟、4-氯或2-氯-6-氟中的一种或多种；和/或
[0020]
所述氰基包括4-氰基。
[0021]
在本发明的一些具体实施方案中，所述喹喔啉衍生物包括：
[0022]
r1为h，r2为2,4-二氯；和/或
[0023]
r1为h，r2为4-硝基；和/或
[0024]
r1为h，r2为2-甲基；和/或
[0025]
r1为h，r2为2-氟；和/或
[0026]
r1为h，r2为3-甲氧基；和/或
[0027]
r1为h，r2为2-氯；和/或
[0028]
r1为h，r2为3-氟；和/或
[0029]
r1为h，r2为4-氯；和/或
[0030]
r1为h，r2为2-氯-6-氟；和/或
[0031]
r1为h，r2为4-氰基；和/或
[0032]
r1为cl，r2为2,4-二氯；和/或
[0033]
r1为cl，r2为4-硝基；和/或
[0034]
r1为cl，r2为2-甲基；和/或
[0035]
r1为cl，r2为2-氟；和/或
[0036]
r1为cl，r2为3-甲氧基；和/或
[0037]
r1为cl，r2为2-氯；和/或
[0038]
r1为cl，r2为3-氟；和/或
[0039]
r1为cl，r2为4-氯；和/或
[0040]
r1为cl，r2为2-氯-6-氟；和/或
[0041]
r1为cl，r2为4-氰基。
[0042]
本发明还提供了所述喹喔啉衍生物的制备方法，包括以下步骤：
[0043]
步骤1：以取代邻苯二胺和乙醛酸为原料，乙醇(ch3ch2oh)为溶剂，回流制备中间体取代的2-羟基喹喔啉；再以n,n-二甲基甲酰胺(dmf)为溶剂，取代的2-羟基喹喔啉经pocl3氯化后，制得取代的2-氯喹喔啉；
[0044]
步骤2：以丙酮为溶剂，碳酸铯(cs2co3)为催化剂，所述取代的2-氯喹喔啉与尼泊金甲酯反应，制得4-(喹喔啉-2-氧基)苯甲酸甲酯；
[0045]
步骤3：取所述4-(喹喔啉-2-氧基)苯甲酸甲酯经koh，四氢呋喃回流反应，制得4-(喹喔啉-2-氧基)苯甲酸；
[0046]
步骤4：以所述4-(喹喔啉-2-氧基)苯甲酸和取代苄氯为原料，k2co3为催化剂，乙腈为溶剂，制得所述喹喔啉衍生物。
[0047]
此外，本发明还提供了抑菌剂或杀菌剂，包括所述喹喔啉衍生物或所述制备方法制得的所述喹喔啉衍生物，以及可接受的辅料或助剂。
[0048]
在本发明的一些具体实施方案中，所述抑菌剂或杀菌剂的剂型包括乳油、可湿性粉剂、悬浮剂、粉剂、可溶性粉剂、水剂、水分散粒剂、烟剂、颗粒剂、种衣剂、干拌种剂、湿拌种剂或涂布剂中的一种或多种。
[0049]
本发明还提供了所述喹喔啉衍生物、所述制备方法制得的所述喹喔啉衍生物、所述抑菌剂或杀菌剂在抗植物病原菌中的应用。
[0050]
在本发明的一些具体实施方案中，所述病原菌包括细菌和/或真菌。
[0051]
在本发明的一些具体实施方案中，所述细菌包括甜瓜细菌性果斑病菌(ac)、番茄青枯病菌(rs)、水稻白叶枯病菌(xoo)、马铃薯软腐病菌(pcb)、芒果细菌性黑斑病菌(xcm)中的一种或多种。
[0052]
在本发明的一些具体实施方案中，所述真菌包括白菜黑斑病菌(ab)、草莓串珠镰刀病菌(ff)、黄瓜枯萎病菌(fo)、辣椒炭疽病菌(ct)、辣椒疫霉病菌(pc)、芒果胶胞病菌(cg)、水稻纹枯病菌(rs)、小麦赤霉病菌(fg)、大豆疫霉病菌(ps)、烟草黑胫病菌(pp)、番茄灰霉病菌(bc)或荔枝霜疫霉病菌(pl)中的一种或多种。
[0053]
本发明将具有活性的喹喔啉结构通过结构修饰合成了一系列喹喔啉衍生物。
[0054]
抗植物病原细菌的生物活性测试结果表明，本发明提供的化合物对甜瓜细菌性果斑病菌(ac)、番茄青枯病菌(rs)、水稻白叶枯病菌(xoo)、马铃薯软腐病菌(pcb)和芒果细菌性角斑病菌(xcm)均有一定的抑制活性。其中，当浓度为200μg/ml时，化合物i11对ac(甜瓜细菌性果斑病菌)的抑制率为86.2％，优于对照药tc(57.6％)和bt(41.0％)。化合物i15对pcb(马铃薯软腐病菌)的抑制率为72.6％，优于对照药tc(51.0％)和bt(49.6％)。化合物i2和i3对rs(番茄青枯病菌)的抑制率分别为71.3,70.4％,均优于对照药tc(66.0％)和bt(42.3％)。化合物i16,i17对xcm(芒果细菌性黑斑病菌)的抑制效果分别为75.1和74.2％，均优于对照药tc(67.8％)和bt(46.8％)。
[0055]
抗植物病原真菌活性测试结果表明，在浓度100μg/ml时，化合物i11对ff(草莓串珠镰刀病菌)，ps(大豆疫霉病菌)，pp(烟草黑胫病菌)的抑制率分别为89.3，89.9和89.3％，均优于对照药嘧菌酯(76.4，55.7和77.1％)。化合物i10和i20对rs(水稻纹枯病菌)的抑制率分别为89.5和95.1％，优于对照药嘧菌酯(76.4％)。
[0056]
以上实验活性数据表明喹喔啉衍生物对植物病菌具有一定的抑制作用，其中部分目标化合物对抗植物病菌表现出优良活性，可作为潜在的抗植物病菌药物，具有较好的应用前景。
具体实施方式
[0057]
本发明公开了喹喔啉衍生物、制备方法及用途，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。
[0058]
本发明的技术方案之一：提供一种含喹喔啉衍生物，结构式如式i所示：
[0059][0060]
其中，r1为氢、氯；r2为甲基、烷氧基、硝基和卤素中的一种或多种。
[0061]
优选的，所述的r1基为喹喔啉苯环上的6位含有一个氢原子，或者一个氯原子，所诉的r2基为甲基、烷氧基、硝基和卤素原子中的一种或多种。
[0062]
本发明技术方案之二：提供一种上述喹喔啉衍生物的制备方法，包括以下步骤：
[0063]
(1)以取代邻苯二胺和乙醛酸为原料，乙醇(ch3ch2oh)为溶剂，回流制备中间体取代的2-羟基喹喔啉；然后n,n-二甲基甲酰胺(dmf)为溶剂，取代的2-羟基喹喔啉经pocl3氯化后得到取代的2-氯喹喔啉；
[0064]
(2)以丙酮为溶剂，碳酸铯(cs2co3)为催化剂，取代的2-氯喹喔啉与尼泊金甲酯反应，制备4-(喹喔啉-2-氧基)苯甲酸甲酯；
[0065]
(3)4-(喹喔啉-2-氧基)苯甲酸甲酯经koh，四氢呋喃回流反应，制备4-(喹喔啉-2-氧基)苯甲酸；
[0066]
(4)以4-(喹喔啉-2-氧基)苯甲酸和取代苄氯为原料，k2co3为催化剂，乙腈为溶剂，制备得到一系列喹喔啉衍生物。
[0067]
优选的，所诉步骤(1)中的取代邻苯二胺和乙醛酸在无水乙醇溶剂中反应，所诉步骤(1)中氯化试剂为pocl3，溶剂也为pocl3，dmf为催化剂。
[0068]
本发明步骤(1)中包括两步反应，第二步经pocl3将羟基氯化，反应过程如下：
[0069][0070]
优选的，所诉步骤(2)的反应在丙酮溶剂中进行。
[0071]
本发明步骤(2)的反应过程如下：
[0072][0073]
本发明步骤(3)的反应过程如下：
[0074][0075]
优选的，所诉步骤(4)的反应在加热90℃条件下进行。
[0076]
本发明步骤(4)的反应过程如下：
[0077][0078]
本发明技术方案之三：提供一种上述喹喔啉衍生物在制备抑植物病原菌中的应用。
[0079]
本发明的有益技术效果如下：
[0080]
本发明将具有活性的喹喔啉结构通过结构修饰合成了一系列喹喔啉衍生物。通过对所合成的喹喔啉衍生物进行抗植物病原菌活性测试，证明本发明制备的喹喔啉衍生物有很好的抑植物病原菌(细菌，真菌)活性，可用于制备做杀菌的药剂。
[0081]
对于本发明中的数值范围，应理解为还具体公开了该范围的上限和下限之间的每个中间值。在任何陈述值或陈述范围内的中间值以及任何其他陈述值或在所述范围内的中间值之间的每个较小的范围也包括在本发明内。这些较小范围的上限和下限可独立地包括或排除在范围内。
[0082]
除非另有说明，否则本文使用的所有技术和科学术语具有本发明所述领域的常规技术人员通常理解的相同含义。虽然本发明仅描述了优选的方法和材料，但是在本发明的实施或测试中也可以使用与本文所述相似或等同的任何方法和材料。
[0083]
关于本文中所使用的“包含”、“包括”、“具有”、“含有”等等，均为开放性的用语，即意指包含但不限于。
[0084]
本发明提供的喹喔啉衍生物、制备方法及用途中，所用原料及试剂均可由市场购得。
[0085]
下面结合实施例，进一步阐述本发明：
[0086]
实施例1 2,4-二氯苄基4-(喹喔啉-2-氧基)苯甲酸酯(目标化合物i1)的制备方法如下：
[0087]
(1)2-氯喹喔啉(中间体1)的制备：
[0088]
在100ml圆底烧瓶中加入2.0g(18.49mmol)邻苯二胺和30ml ch3ch2oh,升温至60℃后缓慢加入1.51g(20.34mmol)乙醛酸，tlc跟踪反应(石油醚：乙酸乙酯＝8:1,v/v)。停止反应后，减压浓缩，烘干后得到2-羟基喹喔啉。在100ml圆底烧瓶中加入2.0g(13.68mmol)2-羟基喹喔啉和10.49g(68.42mmol)pocl3，加入dmf(1ml),90℃回流反应，tlc跟踪反应(石油醚：乙酸乙酯＝5:1,v/v)。停止反应后，倒入冰水中有沉淀产生，抽滤得棕色固体(中间体1)备用。产率：71％。
[0089]
(2)4-(喹喔啉-2-氧基)苯甲酸甲酯(中间体2)的制备：
[0090]
在100ml圆底烧瓶中依次加入中2-氯喹喔啉(中间体1)2.00g(12.15mmol)、对羟基
苯甲酸甲酯2.22g(14.58mmol)、碳酸铯4.75g(14.58mmol)和30ml丙酮，室温搅拌48h，tlc跟踪反应(石油醚:乙酸乙酯＝8:1,v/v)。停止反应后，减压浓缩，加入40ml蒸馏水，用乙酸乙酯萃取三次，合并有机层，减压浓缩，得到粗产物4-(喹喔啉-2-氧基)苯甲酸甲酯(中间体2)，产率：58％。
[0091]
(3)4-(喹喔啉-2-氧基)苯甲酸(中间体3)的制备：
[0092]
在100ml的三口圆底烧瓶中依次加入4-(喹喔啉-2-氧基)苯甲酸甲酯(中间体2)2.0g(7.14mmol)、koh 1.2g(21.41mmol)和40ml四氢呋喃，加热至70℃回流反应，tlc监测反应(乙酸乙酯)。停止反应后，冷却至室温，冰浴条件下使用盐酸调节ph＝1，有白色固体析出，抽滤，烘干即得到4-(喹喔啉-2-氧基)苯甲酸(中间体3)，产率：63％。
[0093]
(4)2,4-二氯苄基4-(喹喔啉-2-氧基)苯甲酸酯(目标化合物i1)的制备：
[0094]
在100ml的单口烧瓶中依次加入4-(喹喔啉-2-氧基)苯甲酸(中间体3)0.5g(1.88mmol)、k2co
3 0.35g(2.56mmol)和40ml乙腈,加热搅拌0.5－1h后，加入2,4-二氯苄氯0.33g(1.71mmol)，tlc追踪反应(石油醚：乙酸乙酯＝8:1,v/v)，停止反应后，将其倒入装有100ml的水中，有白色沉淀析出，待溶液澄清后，抽滤得到粗产物，经柱层析分离提纯(石油醚：乙酸乙酯＝30:1,v/v)得到白色固体(目标化合物i1)，产率：61％。
[0095]
实施例2 4-硝基苄基4-(喹喔啉-2-氧基)苯甲酸酯(目标化合物i2)的制备方法如下：
[0096]
(1)2-氯喹喔啉(中间体1)的制备：
[0097]
如实施例1中的第(1)步。
[0098]
(2)4-(喹喔啉-2-氧基)苯甲酸甲酯(中间体2)的制备：
[0099]
如实施例1中的第(2)步。
[0100]
(3)4-(喹喔啉-2-氧基)苯甲酸(中间体3)的制备：
[0101]
如实施例1中的第(3)步。
[0102]
(4)4-硝基苄基4-(喹喔啉-2-氧基)苯甲酸酯(目标化合物i2)的制备：
[0103]
如实施例1中的第(4)步，区别在于将2,4-二氯苄氯替换为等摩尔量的4-硝基苄氯。产率：58％。
[0104]
实施例3 2-甲基苄基4-(喹喔啉-2-氧基)苯甲酸酯(目标化合物i3)的制备方法如下：
[0105]
(1)2-氯喹喔啉(中间体1)的制备：
[0106]
如实施例1中的第(1)步。
[0107]
(2)4-(喹喔啉-2-氧基)苯甲酸甲酯(中间体2)的制备：
[0108]
如实施例1中的第(2)步。
[0109]
(3)4-(喹喔啉-2-氧基)苯甲酸(中间体3)的制备：
[0110]
如实施例1中的第(3)步。
[0111]
(4)2-甲基苄基4-(喹喔啉-2-氧基)苯甲酸酯(目标化合物i3)的制备：
[0112]
如实施例1中的第(4)步，区别在于将2,4-二氯苄氯替换为2-甲基苄氯。产率：59％。
[0113]
实施例4 2-氟苄基4-(喹喔啉-2-氧基)苯甲酸酯(目标化合物i4)的制备方法如下：
[0114]
(1)2-氯喹喔啉(中间体1)的制备：
[0115]
如实施例1中的第(1)步。
[0116]
(2)4-(喹喔啉-2-氧基)苯甲酸甲酯(中间体2)的制备：
[0117]
如实施例1中的第(2)步。
[0118]
(3)4-(喹喔啉-2-氧基)苯甲酸(中间体3)的制备：
[0119]
如实施例1中的第(3)步。
[0120]
(4)2-氟苄基4-(喹喔啉-2-氧基)苯甲酸酯(目标化合物i4)的制备：
[0121]
如实施例1中的第(4)步，区别在于将2,4-二氯苄氯替换为等摩尔量的2-氟苄氯。产率：67％。
[0122]
实施例5 3-甲氧基苄基4-(喹喔啉-2-氧基)苯甲酸酯(目标化合物i5)的制备方法如下：
[0123]
(1)2-氯喹喔啉(中间体1)的制备：
[0124]
如实施例1中的第(1)步。
[0125]
(2)4-(喹喔啉-2-氧基)苯甲酸甲酯(中间体2)的制备：
[0126]
如实施例1中的第(2)步。
[0127]
(3)4-(喹喔啉-2-氧基)苯甲酸(中间体3)的制备：
[0128]
如实施例1中的第(3)步。
[0129]
(4)3-甲氧基苄基4-(喹喔啉-2-氧基)苯甲酸酯(目标化合物i5)的制备：
[0130]
如实施例1中的第(4)步，区别在于将2,4-二氯苄氯替换为等摩尔量的3-甲氧基苄氯。产率：49％。
[0131]
实施例6 2-氯苄基4-(喹喔啉-2-氧基)苯甲酸酯(目标化合物i6)的制备方法如下：
[0132]
(1)2-氯喹喔啉(中间体1)的制备：
[0133]
如实施例1中的第(1)步。
[0134]
(2)4-(喹喔啉-2-氧基)苯甲酸甲酯(中间体2)的制备：
[0135]
如实施例1中的第(2)步。
[0136]
(3)4-(喹喔啉-2-氧基)苯甲酸(中间体3)的制备：
[0137]
如实施例1中的第(3)步。
[0138]
(4)2-氯苄基4-(喹喔啉-2-氧基)苯甲酸酯(目标化合物i6)的制备：
[0139]
如实施例1中的第(4)步，区别在于将2,4-二氯苄氯替换为等摩尔量的2-氯苄氯。产率：52％。
[0140]
实施例7 3-氟苄基4-(喹喔啉-2-氧基)苯甲酸酯(目标化合物i7)的制备方法如下：
[0141]
(1)2-氯喹喔啉(中间体1)的制备：
[0142]
如实施例1中的第(1)步。
[0143]
(2)4-(喹喔啉-2-氧基)苯甲酸甲酯(中间体2)的制备：
[0144]
如实施例1中的第(2)步。
[0145]
(3)4-(喹喔啉-2-氧基)苯甲酸(中间体3)的制备：
[0146]
如实施例1中的第(3)步。
[0147]
(4)3-氟苄基4-(喹喔啉-2-氧基)苯甲酸酯(目标化合物i7)的制备：
[0148]
如实施例1中的第(4)步，区别在于将2,4-二氯苄氯替换为等摩尔量的3-氟苄氯。产率：64％。
[0149]
实施例8 4-氯苄基4-(喹喔啉-2-氧基)苯甲酸酯(目标化合物i8)的制备方法如下：
[0150]
(1)2-氯喹喔啉(中间体1)的制备：
[0151]
如实施例1中的第(1)步。
[0152]
(2)4-(喹喔啉-2-氧基)苯甲酸甲酯(中间体2)的制备：
[0153]
如实施例1中的第(2)步。
[0154]
(3)4-(喹喔啉-2-氧基)苯甲酸(中间体3)的制备：
[0155]
如实施例1中的第(3)步。
[0156]
(4)4-氯苄基4-(喹喔啉-2-氧基)苯甲酸酯(目标化合物i8)的制备：
[0157]
如实施例1中的第(4)步，区别在于将2,4-二氯苄氯替换为等摩尔量的4-氯苄氯。产率：73％。
[0158]
实施例9 2-氯-6-氟苄基4-(喹喔啉-2-氧基)苯甲酸酯(目标化合物i9)的制备方法如下：
[0159]
(1)2-氯喹喔啉(中间体1)的制备：
[0160]
如实施例1中的第(1)步。
[0161]
(2)4-(喹喔啉-2-氧基)苯甲酸甲酯(中间体2)的制备：
[0162]
如实施例1中的第(2)步。
[0163]
(3)4-(喹喔啉-2-氧基)苯甲酸(中间体3)的制备：
[0164]
如实施例1中的第(3)步。
[0165]
(4)2-氯-6-氟苄基4-(喹喔啉-2-氧基)苯甲酸酯(目标化合物i9)的制备：
[0166]
如实施例1中的第(4)步，区别在于将2,4-二氯苄氯替换为等摩尔量的2-氯-6-氟苄氯。产率：54％。
[0167]
实施例10 4-氰基苄基4-(喹喔啉-2-氧基)苯甲酸酯(目标化合物i10)的制备方法如下：
[0168]
(1)2-氯喹喔啉(中间体1)的制备：
[0169]
如实施例1中的第(1)步。
[0170]
(2)4-(喹喔啉-2-氧基)苯甲酸甲酯(中间体2)的制备：
[0171]
如实施例1中的第(2)步。
[0172]
(3)4-(喹喔啉-2-氧基)苯甲酸(中间体3)的制备：
[0173]
如实施例1中的第(3)步。
[0174]
(4)4-氰基苄基4-(喹喔啉-2-氧基)苯甲酸酯(目标化合物i10)的制备：
[0175]
如实施例1中的第(4)步，区别在于将2,4-二氯苄氯替换为等摩尔量的4-氰基苄氯。产率：91％。
[0176]
实施例11 2,4-二氯苄基4-((6-氯喹喔啉-2-基)氧基)苯甲酸酯(目标化合物i11)的制备方法如下：
[0177]
(1)2,6-二氯喹喔啉(中间体1)的制备：
[0178]
如实施例1中的第(1)步，区别在于以等摩尔量的4-氯邻二苯胺为原料。
[0179]
(2)4-((6-氯喹喔啉-2-基)氧基)苯甲酸甲酯(中间体2)的制备：
[0180]
如实施例1中的第(2)步。
[0181]
(3)4-((6-氯喹喔啉-2-基)氧基)苯甲酸(中间体3)的制备：
[0182]
如实施例1中的第(3)步。
[0183]
(4)2,4-二氯苄基4-((6-氯喹喔啉-2-基)氧基)苯甲酸酯(目标化合物i11)的制备：
[0184]
如实施例1中的第(4)步。产率：62％。
[0185]
实施例12 4-硝基苄基4-((6-氯喹喔啉-2-基)氧基)苯甲酸酯(目标化合物i12)的制备方法如下：
[0186]
(1)2,6-二氯喹喔啉(中间体1)的制备：
[0187]
如实施例1中的第(1)步，区别在于以等摩尔量的4-氯邻二苯胺为原料。
[0188]
(2)4-((6-氯喹喔啉-2-基)氧基)苯甲酸甲酯(中间体2)的制备：
[0189]
如实施例1中的第(2)步。
[0190]
(3)4-((6-氯喹喔啉-2-基)氧基)苯甲酸(中间体3)的制备：
[0191]
如实施例1中的第(3)步。
[0192]
(4)4-硝基苄基4-((6-氯喹喔啉-2-基)氧基)苯甲酸酯(目标化合物i12)的制备：
[0193]
如实施例1中的第(4)步，区别在于将2,4-二氯苄氯替换为等摩尔量的4-硝基苄氯。产率：51％。
[0194]
实施例13 2-甲基苄基4-((6-氯喹喔啉-2-基)氧基)苯甲酸酯(目标化合物i13)的制备方法如下：
[0195]
(1)2,6-二氯喹喔啉(中间体1)的制备：
[0196]
如实施例1中的第(1)步，区别在于以等摩尔量的4-氯邻二苯胺为原料。
[0197]
(2)4-((6-氯喹喔啉-2-基)氧基)苯甲酸甲酯(中间体2)的制备：
[0198]
如实施例1中的第(2)步。
[0199]
(3)4-((6-氯喹喔啉-2-基)氧基)苯甲酸(中间体3)的制备：
[0200]
如实施例1中的第(3)步。
[0201]
(4)2-甲基苄基4-((6-氯喹喔啉-2-基)氧基)苯甲酸酯(目标化合物i13)的制备：
[0202]
如实施例1中的第(4)步，区别在于将2,4-二氯苄氯替换为等摩尔量的2-甲基苄氯。产率：36％。
[0203]
实施例14 2-氟苄基4-((6-氯喹喔啉-2-基)氧基)苯甲酸酯(目标化合物i14)的制备方法如下：
[0204]
(1)2,6-二氯喹喔啉(中间体1)的制备：
[0205]
如实施例1中的第(1)步，区别在于以等摩尔量的4-氯邻二苯胺为原料。
[0206]
(2)4-((6-氯喹喔啉-2-基)氧基)苯甲酸甲酯(中间体2)的制备：
[0207]
如实施例1中的第(2)步。
[0208]
(3)4-((6-氯喹喔啉-2-基)氧基)苯甲酸(中间体3)的制备：
[0209]
如实施例1中的第(3)步。
[0210]
(4)2-氟苄基4-((6-氯喹喔啉-2-基)氧基)苯甲酸酯(目标化合物i14)的制备：
[0211]
如实施例1中的第(4)步，区别在于将2,4-二氯苄氯替换为等摩尔量的2-氟苄氯。产率：75％。
[0212]
实施例15 3-甲氧基苄基4-((6-氯喹喔啉-2-基)氧基)苯甲酸酯(目标化合物i15)的制备方法如下：
[0213]
(1)2,6-二氯喹喔啉(中间体1)的制备：
[0214]
如实施例1中的第(1)步，区别在于以等摩尔量的4-氯邻二苯胺为原料。
[0215]
(2)4-((6-氯喹喔啉-2-基)氧基)苯甲酸甲酯(中间体2)的制备：
[0216]
如实施例1中的第(2)步。
[0217]
(3)4-((6-氯喹喔啉-2-基)氧基)苯甲酸(中间体3)的制备：
[0218]
如实施例1中的第(3)步。
[0219]
(4)3-甲氧基苄基4-((6-氯喹喔啉-2-基)氧基)苯甲酸酯(目标化合物i15)的制备：
[0220]
如实施例1中的第(4)步，区别在于将2,4-二氯苄氯替换为等摩尔量的3-甲氧基苄氯。产率：80％。
[0221]
实施例16 2-氯苄基4-((6-氯喹喔啉-2-基)氧基)苯甲酸酯(目标化合物i16)的制备方法如下：
[0222]
(1)2,6-二氯喹喔啉(中间体1)的制备：
[0223]
如实施例1中的第(1)步，区别在于以等摩尔量的4-氯邻二苯胺为原料。
[0224]
(2)4-((6-氯喹喔啉-2-基)氧基)苯甲酸甲酯(中间体2)的制备：
[0225]
如实施例1中的第(2)步。
[0226]
(3)4-((6-氯喹喔啉-2-基)氧基)苯甲酸(中间体3)的制备：
[0227]
如实施例1中的第(3)步。
[0228]
(4)2-氯苄基4-((6-氯喹喔啉-2-基)氧基)苯甲酸酯(目标化合物i16)的制备：
[0229]
如实施例1中的第(4)步，区别在于将2,4-二氯苄氯替换为等摩尔量的2-氯苄氯。产率：69％。
[0230]
实施例17 3-氟苄基4-((6-氯喹喔啉-2-基)氧基)苯甲酸酯(目标化合物i17)的制备方法如下：
[0231]
(1)2,6-二氯喹喔啉(中间体1)的制备：
[0232]
如实施例1中的第(1)步，区别在于以等摩尔量的4-氯邻二苯胺为原料。
[0233]
(2)4-((6-氯喹喔啉-2-基)氧基)苯甲酸甲酯(中间体2)的制备：
[0234]
如实施例1中的第(2)步。
[0235]
(3)4-((6-氯喹喔啉-2-基)氧基)苯甲酸(中间体3)的制备：
[0236]
如实施例1中的第(3)步。
[0237]
(4)3-氟苄基4-((6-氯喹喔啉-2-基)氧基)苯甲酸酯(目标化合物i17)的制备：
[0238]
如实施例1中的第(4)步，区别在于将2,4-二氯苄氯替换为等摩尔量的3-氟苄氯。产率：53％。
[0239]
实施例18 4-氯苄基4-((6-氯喹喔啉-2-基)氧基)苯甲酸酯(目标化合物i18)的制备方法如下：
[0240]
(1)2,6-二氯喹喔啉(中间体1)的制备：
[0241]
如实施例1中的第(1)步，区别在于以等摩尔量的4-氯邻二苯胺为原料。
[0242]
(2)4-((6-氯喹喔啉-2-基)氧基)苯甲酸甲酯(中间体2)的制备：
[0243]
如实施例1中的第(2)步。
[0244]
(3)4-((6-氯喹喔啉-2-基)氧基)苯甲酸(中间体3)的制备：
[0245]
如实施例1中的第(3)步。
[0246]
(4)4-氯苄基4-((6-氯喹喔啉-2-基)氧基)苯甲酸酯(目标化合物i18)的制备：
[0247]
如实施例1中的第(4)步，区别在于将2,4-二氯苄氯替换为等摩尔量的4-氯苄氯。产率：48％。
[0248]
实施例19 2-氯-6-氟苄基4-((6-氯喹喔啉-2-基)氧基)苯甲酸酯(目标化合物i19)的制备方法如下：
[0249]
(1)2,6-二氯喹喔啉(中间体1)的制备：
[0250]
如实施例1中的第(1)步，区别在于以等摩尔量的4-氯邻二苯胺为原料。
[0251]
(2)4-((6-氯喹喔啉-2-基)氧基)苯甲酸甲酯(中间体2)的制备：
[0252]
如实施例1中的第(2)步。
[0253]
(3)4-((6-氯喹喔啉-2-基)氧基)苯甲酸(中间体3)的制备：
[0254]
如实施例1中的第(3)步。
[0255]
(4)2-氯-6-氟苄基4-((6-氯喹喔啉-2-基)氧基)苯甲酸酯(目标化合物i19)的制备：
[0256]
如实施例1中的第(4)步，区别在于将2,4-二氯苄氯替换为等摩尔量的2-氯-6-氟苄氯。产率：55％。
[0257]
实施例20 4-氰基苄基4-((6-氯喹喔啉-2-基)氧基)苯甲酸酯(目标化合物i20)的制备方法如下：
[0258]
(1)2,6-二氯喹喔啉(中间体1)的制备：
[0259]
如实施例1中的第(1)步，区别在于以等摩尔量的4-氯邻二苯胺为原料。
[0260]
(2)4-((6-氯喹喔啉-2-基)氧基)苯甲酸甲酯(中间体2)的制备：
[0261]
如实施例1中的第(2)步。
[0262]
(3)4-((6-氯喹喔啉-2-基)氧基)苯甲酸(中间体3)的制备：
[0263]
如实施例1中的第(3)步。
[0264]
(4)4-氰基苄基4-((6-氯喹喔啉-2-基)氧基)苯甲酸酯(目标化合物i20)的制备：
[0265]
如实施例1中的第(4)步，区别在于将2,4-二氯苄氯替换为等摩尔量的4-氰基苄氯。产率：45％。
[0266]
所合成喹喔啉衍生物的理化性质和质谱数据见表1，核磁共振氢谱(1h nmr),碳谱(
13
c nmr)和氟谱(
19
f nmr)数据见表2。
[0267]
表1实施例化合物i1-i20的理化性质
[0268][0269][0270]
表2目标化合物i1-i20核磁共振氢谱、碳谱和氟谱数据
[0271]
[0272]
[0273]
[0274]
[0275][0276][0277]
试验例1抗植物病原细菌测试：
[0278]
(1)测试方法
[0279]
采96孔板法，在200μg/ml和100μg/ml浓度下，测试了目标化合物对甜瓜细菌性果斑病菌(ac)、番茄青枯病菌(rs)、水稻白叶枯病菌(xoo)、马铃薯软腐病菌(pcb)和芒果细菌性黑斑病菌(xcm)的体外抑制活性，对照药剂为叶枯唑(bt)和噻菌酮(tc)，具体操作步骤如下：
[0280]
制备菌液：挑取一个单菌落于液体培养基中(不同菌采用不同的培养基)，置于28℃、180r/min的摇床中培养至对数生长期后，取两管2ml的菌液在转速为6000rpm条件下离心5min，除去培养基液体，加入2ml无菌水，使菌体与水混匀，取一管于紫外分光光度计波长为600nm下测定，并将吸光度值调整为0.6，另一管保存备用。制备药液：将1mg测试药物溶于100μl dmso中，用液体培养基(不同菌对应不同的培养基)将其终浓度配制为200μg/ml和100μg/ml的含药培养基。向96孔板中加入190μl的含药培养基和制备好的菌液10μl，阴性对照为加菌不加药液的培养基，阳性对照为商品药剂噻菌铜和叶枯唑，同时以加药不加菌的培养基作为空白对照。将96孔板置于28℃，180r/min的摇床中培养至阴性对照的od值为0.6-0.8时，用酶标仪对所有菌液的od
600nm
值进行测定，并使用spss计算出测试药物对供试细菌的抑制率。每个处理设置3个重复，每个试验重复3次。抑制率计算如下：
[0281]
校正od
600
值＝含菌培养基od
600-无菌培养基od
600
[0282]
抑制率(％)＝(校正后对照培养基菌液od
600-校正含药培养基od
600
)/校正后对照培养基菌液od值
×
100％。
[0283]
(2)抗植物病原细菌的生物活性测试结果
[0284]
表3实施例1-20制备化合物的抑菌活性(抑制率％)a[0285]
[0286][0287]
备注：a平均三次重复；b将叶枯唑和噻菌铜(20％可湿性粉剂)用作阳性对照。
[0288]
从表3中可以看出，所有化合物对甜瓜细菌性果斑病菌(ac)、番茄青枯病菌(rs)、水稻白叶枯病菌(xoo)、马铃薯软腐病菌(pcb)和芒果细菌性角斑病菌(xcm)均有一定的抑制活性。其中，当浓度为200μg/ml时，化合物i11对ac(甜瓜细菌性果斑病菌)的抑制率为86.2％，优于对照药tc(57.6％)和bt(41.0％)。化合物i15对pcb(马铃薯软腐病菌)的抑制率为72.6％，优于对照药tc(51.0％)和bt(49.6％)。化合物i2和i3对rs(番茄青枯病菌)的抑制率分别为71.3,70.4％,均优于对照药tc(66.0％)和bt(42.3％)。化合物i16,i17对xcm(芒果细菌性黑斑病菌)的抑制效果分别为75.1和74.2％，均优于对照药tc(67.8％)和bt
(46.8％)。
[0289]
试验例2抗植物病原真菌活性测试：
[0290]
(1)测试方法
[0291]
采用菌丝生长速率法对白菜黑斑病菌(ab)、草莓串珠镰刀病菌(ff)、黄瓜枯萎病菌(fo)、辣椒炭疽病菌(ct)、辣椒疫霉病菌(pc)、芒果胶胞病菌(cg)、水稻纹枯病菌(rs)、小麦赤霉病菌(fg)、大豆疫霉病菌(ps)、烟草黑胫病菌(pp)、番茄灰霉病菌(bc)和荔枝霜疫霉病菌(pl)这十二种植物病原真菌进行了体外活性评价，以商品药剂嘧菌酯作为阳性对照。具体步骤如下：
[0292]
将3mg测试药物溶于300μl dmso中，取200μl药液加入1980μl融化的pda养基中，使其配制成终浓度为100μg/ml的含药培养基，并均匀地倒入三个已灭菌的培养皿中，待其凝固后，从真菌菌落中打出4.00mm的菌饼，放置在含药培养皿的中心，封口膜封好，阴性对照为加菌不加药液的培养基，阳性对照为商品药剂多菌灵，置于28℃培养箱中培养2～6d，采用十字交叉法测量菌落直径，并使用spss计算出测试药物对供试真菌的抑制率。每个处理设置3个重复，每个试验重复3次。抑制率计算如下：
[0293]
抑制率i(％)＝(c
tur-t
tur
)/(c
tur-0.4)
×
100
[0294]ctur
:对照菌落直径即dmso处理的菌落直径；
[0295]
t
tur
:药剂处理的菌落直径；
[0296]
0.4：菌饼直径；
[0297]
i:抑制率.
[0298]
pda培养基：200g马铃薯、20g葡萄糖、20g琼脂、1000ml蒸馏水
[0299]
去皮后的马铃薯切块，置于800ml蒸馏水中煮至马铃薯一戳即碎，纱布过滤，滤液和20g葡萄糖，20g琼脂再次煮沸，使其混匀后加蒸馏水定容至1000ml。
[0300]
(2)抗植物病原真菌的生物活性测试结果
[0301]
表4
[0302][0303][0304]
在浓度100μg/ml时，化合物i11对ff(草莓串珠镰刀病菌)，ps(大豆疫霉病菌)，pp(烟草黑胫病菌)的抑制率分别为89.3，89.9和89.3％，均优于对照药嘧菌酯(76.4，55.7和77.1％)。化合物i10和i20对rs(水稻纹枯病菌)的抑制率分别为89.5和95.1％，优于对照药嘧菌酯(76.4％)。
[0305]
以上实验活性数据表明喹喔啉衍生物对植物病菌具有一定的抑制作用，其中部分目标化合物对抗植物病菌表现出优良活性，可作为潜在的抗植物病菌药物，具有较好的应用前景。
[0306]
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应
视为本发明的保护范围。