技术特征：
1.一种猪急性腹泻综合征冠状病毒抗原的纯化浓缩方法，其包括对猪急性腹泻综合征冠状病毒液进行深层过滤预处理，和对预处理后的病毒液进行切向流过滤纯化浓缩处理，使得处理过程中病毒抗原基本不损失(病毒抗原损失率小于10％，可选为损失率小于5％，进一步可选为损失率小于2％)，且基本上去除所有蛋白(蛋白去除率为98％以上)。2.根据权利要求1所述的纯化浓缩方法，其中，所述深层过滤预处理为采用深层过滤滤膜对所述猪急性腹泻综合征冠状病毒液进行滤过处理，其中所述深层过滤滤膜的孔径为0.65μm-1.2μm。3.根据权利要求1或2所述的纯化浓缩方法，其中，所述切向流过滤纯化浓缩处理采用中空纤维浓缩系统或超滤膜包系统对所述预处理后的病毒液进行纯化浓缩处理。4.根据权利要求3所述的纯化浓缩方法，其中，所述对预处理后的病毒液进行切向流过滤纯化浓缩处理的操作包括：s1：将所述预处理后的病毒液置于所述中空纤维浓缩系统或超滤膜包系统中进行切向流过滤纯化浓缩处理，控制进口压力≤0.1mpa，控制透过端流速为1-3l/min，控制跨膜压差≤0.1mpa；s2：当浓缩至预定倍数时，使用磷酸盐缓冲液进行洗滤；s3：洗滤结束后，使用预定量的磷酸盐缓冲液流经所述中空纤维浓缩系统或超滤膜包系统收集纯化浓缩后的病毒液。5.根据权利要求3或4所述的纯化浓缩方法，其中，所述中空纤维浓缩系统或超滤膜包系统的截留猪急性腹泻综合征冠状病毒抗原的孔径为100-300kd，使得10倍或10倍以上浓缩液中病毒抗原的含量为10
8.75
tcid
50
/ml以上(可选为10
9.00
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50
/ml以上)或20μg/ml以上，且蛋白的含量为250μg/ml以下(可选为220μg/ml以下)。6.根据权利要求4或5所述的纯化浓缩方法，其中，步骤s2中所述磷酸盐缓冲液的流速为1-3l/min。7.根据权利要求1-6中任一项所述的纯化浓缩方法，其中，所述猪急性腹泻综合征冠状病毒液为培养猪急性腹泻综合征冠状病毒所收获的病毒上清液，或经灭活后的猪急性腹泻综合征冠状病毒液。8.一种猪急性腹泻综合征冠状病毒的纯化浓缩液，其由权利要求1-7中任一项所述的方法制备，其中浓缩10倍或以上的猪急性腹泻综合征冠状病毒的纯化浓缩液中蛋白的含量为250μg/ml以下(可选为220μg/ml以下)，病毒抗原的含量为10
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/ml以上(可选为10
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/ml以上)或20μg/ml以上。9.一种猪急性腹泻综合征冠状病毒灭活疫苗的制备方法，其包括将权利要求8所述的猪急性腹泻综合征冠状病毒的纯化浓缩液与免疫佐剂混合。10.一种猪急性腹泻综合征冠状病毒灭活疫苗，其由权利要求9所述的制备方法获得。
技术总结
本发明公开一种猪急性腹泻综合征冠状病毒抗原的纯化浓缩方法，属于病毒疫苗制备技术领域。提供的方法采用深层过滤和切向流过滤纯化浓缩相结合的方式对SADS-CoV抗原进行纯化浓缩，两者共同作用，使得SADS-CoV抗原的浓缩倍数可达10倍以上，并且抗原回收率高，可达100％左右，蛋白去除率在98％以上，可以为制备高质量的SADS-CoV病毒疫苗提供高质量的病毒抗原原料。抗原原料。
技术研发人员：齐志涛 吉格木德 宋庆庆 赵丽霞 陈坚 屠颉 闫聪 杨波 乔煜婷 胡莉红 王玉雯 乌日罕
受保护的技术使用者：内蒙古自治区农畜产品质量安全中心
技术研发日：2022.02.25
技术公布日：2022/5/25