技术特征：
1.一种提高细胞慢病毒感染率的增强感染培养基，其特征在于，所述增强感染培养基用于提高mda-mb-231细胞慢病毒感染率，所述增强感染培养基的组分包括leibovitz’s l-15培养基、rpmi-1640培养基、胎牛血清、非必需氨基酸和表皮细胞生长因子；按照总原料的体积百分比计算，所述胎牛血清的添加量为10％，所述非必需氨基酸的添加量为1％；所述表皮细胞生长因子的添加量为2～3ng/ml。2.根据权利要求1所述的提高细胞慢病毒感染率的增强感染培养基，其特征在于，所述增强感染培养基的组分还包括0.5～1ug/ml的氢化可的松或/和0.005～0.01ug/ml的胰岛素样生长因子-1。3.根据权利要求2所述的提高细胞慢病毒感染率的增强感染培养基，其特征在于，在所述增强感染培养基中，所述leibovitz’s l-15培养基和所述rpmi-1640培养基的体积比为1：1。4.根据权利要求1所述的提高细胞慢病毒感染率的增强感染培养基，其特征在于，所述增强感染培养基的组分包括leibovitz’s l-15培养基、rpmi-1640培养基、胎牛血清、非必需氨基酸、表皮细胞生长因子、氢化可的松和胰岛素样生长因子-1；按照总原料的体积百分比计算，所述胎牛血清的添加量为10％，所述非必需氨基酸的添加量为1％；所述表皮细胞生长因子的添加量为3ng/ml，所述氢化可的松的添加量为0.5～1ug/ml，所述胰岛素样生长因子1的添加量为0.01ug/ml。5.一种提高mda-mb-231细胞慢病毒感染率的方法，其特征在于，使用如权利要求1-4任意一项所述的提高细胞慢病毒感染率的增强感染培养基，包括以下步骤；(1)将mda-mb-231细胞消化成单细胞悬液，将单细胞悬液接种至细胞培养板中，加入常规培养基，并在37℃和环境空气的条件下进行培养；(2)待步骤(1)中的mda-mb-231细胞培养至24～48h时，将常规培养基更换为增强感染培养基，并于37℃和体积分数为5％二氧化碳的环境下培养20～26h；(3)维持步骤(2)的培养条件，使用带egfp表达框的慢病毒感染mda-mb-231细胞，感染时间为44～52h；(4)感染完成后，将增强感染培养基更换为常规培养基继续培养，观察有egfp荧光信号的mda-mb-231细胞，并计算感染率。6.根据权利要求5所述的提高mda-mb-231细胞感染率的方法，其特征在于，所述步骤(1)的操作如下：将对数生长期的mda-mb-231细胞消化成成单细胞悬液，按照1
×
105/孔的细胞接种量将单细胞悬液接种至12孔细胞培养板中，加入1ml常规培养基，并在37℃和环境空气的条件下进行培养。7.根据权利要求5所述的提高mda-mb-231细胞感染率的方法，其特征在于，在所述步骤(3)中，所述带egfp表达框的慢病毒的感染复数为30。8.根据权利要求5所述的提高mda-mb-231细胞感染率的方法，其特征在于，在所述步骤(1)和步骤(4)中，所述常规培养基为含谷氨酰胺和胎牛血清的leibovitz’s l-15培养基。
技术总结
本发明公开了一种提高细胞慢病毒感染率的增强感染培养基及方法，涉及MDA-MB-231细胞转染领域。增强感染培养基用于提高MDA-MB-231细胞慢病毒感染率，增强感染培养基的组分包括Leibovitz’sL-15培养基、RPMI-1640培养基、胎牛血清、非必需氨基酸和表皮细胞生长因子；按照总原料的体积百分比计算，所述胎牛血清的添加量为10％，所述非必需氨基酸的添加量为1％；所述表皮细胞生长因子的添加量为2～3ng/ml。通过采用本发明的增强感染培养基，MDA-MB-231细胞可以在37℃和5％CO2的常规环境下进行正常培养，且更为显著的提高了慢病毒对MDA-MB-231细胞的感染效率，使MDA-MB-231细胞基因编辑效率变得更高，解决了目前MDA-MB-231细胞慢病毒感染率低的问题。病毒感染率低的问题。病毒感染率低的问题。
技术研发人员：黄秋凤 莫晓花 沈于钰
受保护的技术使用者：广州源井生物科技有限公司
技术研发日：2022.03.09
技术公布日：2022/6/1