一种核酸检测试剂盒及其制备工艺的制作方法

1.本发明涉及核酸检测试剂盒技术领域，尤其涉及一种核酸检测试剂盒及其制备工艺。


背景技术：

2.核酸是生命体遗传信息的载体,是所有已知生命形式必不可少的组成物质。核酸dna和rna两类,主要存在于细胞核内并以与蛋白质结合的状态存在。随着分子生物学的快速发展,对于核酸的研究与分析在临床诊断、食品安全、环境检测、农林畜牧等领域不断得以推广和应用。聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,pcr)技术是一种体外快速扩增dna的技术,该技术可用于基因分离、克隆和核酸序列分析等基础研究,此外还可用于其他任何含有dna或rna的地方，例如疾病诊断过程中。
3.核酸分析技术，作为一种强有力的分子诊断技术，在病原体诊断、传染病预防、疾病监测治疗等方面具有重要的应用，相对于常规的免疫学诊断方法，浅酸分析具有高特异性、高灵敏度等突出优势，由于大多数目标基因的浓度低，难以直接分析检测，所以基于核酸扩增原理的pcr、lamp等核酸分析方法成为了当前核酸分析的主要手段，其完整过程通常包括核酸提取、核酸扩增以及核酸检测三大环节。现有的核酸检测盒很难将核酸提取与核酸检测全流程合并至同一密闭空间内，导致核酸检测过程中，因需要将核酸提取与核酸检测全流程分开而造成样本的气溶胶交叉污染很容易造成后续样品的核酸检测假阳性，检测效率较低。因此，有必要提供一种核酸检测试剂盒及其制备工艺解决上述技术问题。


技术实现要素：

4.为解决上述技术问题，本发明提供一种核酸检测试剂盒及其制备工艺。
5.本发明提供的一种核酸检测试剂盒，包括下圆环固定盖，所述下圆环固定盖的内侧套接有圆形试剂盒，所述圆形试剂盒的顶部设置有密封膜，所述密封膜的下端设置有下乳胶塑胶压盖，所述下乳胶塑胶压盖的底部与密封膜的下端挤压接触，且密封膜的底部与圆形试剂盒的顶部挤压接触，所述下圆环固定盖的外侧通过轴承等距转动连接有第一螺栓，所述第一螺栓通过第一螺纹孔与下乳胶塑胶压盖螺纹连接，所述圆形试剂盒的中部设置有金属棒存放孔，所述密封膜的上方设置有上盖，所述圆形试剂盒的一侧设置有加样口，所述加样口的中部过盈连接有胶塞，所述上盖的中部固定有金属棒，所述金属棒的下端与金属棒存放孔插接，所述上盖的外壁固定有上圆环固定盖，所述密封膜的上端设置有上乳胶塑胶压盖，所述上乳胶塑胶压盖的顶部与密封膜的上端挤压接触，且密封膜的顶部与上盖的底部挤压接触，所述上圆环固定盖的外圈通过轴承等距转动连接有第二螺栓，所述第二螺栓通过第二螺纹孔与上乳胶塑胶压盖螺纹连接，所述圆形试剂盒的一侧开设有预埋管装配孔，所述圆形试剂盒的底部位于预埋管装配孔的外侧固定有pcr管，所述预埋管装配孔的内侧设置有预埋管组件，所述圆形试剂盒远离pcr管的一侧等距设置有浅管，所述圆形试剂盒的顶部靠近浅管的一侧设置有u型铝箔膜，所述上盖的一侧开设有检测孔，所述检测孔
的内壁过盈连接有检测塞。
6.优选的，所述下圆环固定盖的底部固定有第一连接机构，所述第一连接机构用于驱动第一螺栓同时转动，所述上圆环固定盖的顶部设置有第二连接机构，所述第二连接机构用于驱动第二螺栓同时转动。
7.优选的，所述预埋管组件包括预埋管主体、铝箔膜b和铝箔膜a，所述预埋管装配孔内壁设置有预埋管主体，所述预埋管主体的底部热封接有铝箔膜b，所述预埋管主体的顶部热封接有铝箔膜a，所述铝箔膜b的底部与pcr管的顶部挤压接触。
8.优选的，所述第一连接机构包括底部连接板、内齿环、第一连接轴、第一齿轮、蜗轮环、支撑块、蜗杆和第一转轮，所述下圆环固定盖的底部固定有底部连接板，所述底部连接板的下表面通过轴承转动连接有内齿环，所述第一螺栓下表面的中部固定有第一连接轴，所述第一连接轴的中部固定有第一齿轮，六个所述第一齿轮均与内齿环啮合连接，所述内齿环的底部固定有蜗轮环，所述底部连接板下表面的一侧对称固定有支撑块，两个所述支撑块之间通过轴承转动连接有蜗杆，所述蜗杆与蜗轮环啮合连接，所述蜗杆的一端穿过支撑块固定有第一转轮。
9.优选的，所述下圆环固定盖的顶部等距固定有第一定位柱，所述下乳胶塑胶压盖的外壁等距固定有第一定位套，所述第一定位柱与第一定位套插接。
10.优选的，所述第二连接机构包括第二连接轴、第二齿轮、转动环、齿轮环和第二转轮，所述第二螺栓上表面的中部固定有第二连接轴，所述第二连接轴的上端固定有第二齿轮，所述上圆环固定盖上表面的中部通过轴承转动连接有转动环，所述转动环上端的外壁固定有齿轮环，六个第二齿轮均与齿轮环啮合连接，所述上圆环固定盖上一侧的一个第二连接轴的顶部固定有第二转轮。
11.优选的，所述上圆环固定盖的外壁等距固定有第二定位柱，所述上乳胶塑胶压盖的外壁等距固定有第二定位套，所述第二定位柱与第二定位套插接，所述第一转轮和第二转轮均呈梅花状设置。
12.优选的，所述第一定位柱的顶部和第二定位柱的底部均开设有倒角。
13.优选的，所述底部连接板的底部等距固定有支撑柱，所述支撑柱的底部固定有橡胶摩擦垫。
14.优选的，所述密封膜(3)包括有弹性膜或非弹性膜。
15.本发明还提供一种核酸检测试剂盒的制备工艺，其步骤包括：
16.1)、将加样口用胶塞堵上，先用u型铝箔膜封装圆形试剂盒内的核酸提取试剂、磁珠，所述核酸提取试剂、磁珠放置在圆形试剂盒对应的存放口内，所述磁珠可以用磁珠液替换；
17.2)、pcr管内加入液体或固体试剂，然后压入预埋管组件；所述步骤1)、步骤2)顺序可调换；
18.3)密封膜粘接在圆形试剂盒的顶部以及上盖的底部并进行压紧固定；
19.4)接外界气源通过上盖的检测孔(27)打入气体检验密封膜的密封性；
20.5)检测无漏气，将上盖的检测孔(27)用检测塞(28)堵上即可。
21.作为本发明的一种优选实施例，所述密封膜内空间，固定有干燥剂，所述干燥剂固定在上盖或者底座上，只要是不影响金属棒活动和试剂封装的位置即可；
22.所述pcr管的外壁厚度为0.1-1.5mm，透光率不小于60％，主要以保证其能够通过光学检测，
23.所述u型铝箔膜上表面不与存放的试剂发生反应，下表面附着有一层pp塑料膜，可以与浅管内的液体、固体接触存放，而预埋管主体顶部的铝箔膜a为单面接触试剂，其底部的铝箔膜b为双面可接触试剂，预埋管组件16主体封装的顺序为先封装底部铝箔膜b，装入预埋的试剂后封装顶部的铝箔膜a；把底部的液体或固体试剂放入到pcr管内，然后再清洗铝箔膜b的底面并放入预埋管组件，实现对pcr管的封装；
24.与相关技术相比较，本发明提供的核酸检测试剂盒及其制备工艺具有如下有益效果：
25.本发明提供核酸检测试剂盒及其制备工艺：
26.1、本发明提供的一种核酸检测试剂盒在进行核酸检测试剂的封装的时候能够极大的提高封装的效率，方便人们操作，同时在封装结束的时候能够进行漏气检测功能，相对于传统的检测试剂盒极大的提高了封装的质量。
27.2、本发明提供的一种核酸检测试剂盒在进行核酸提取、扩增反应、荧光检测等过程中，密封膜有阻隔气溶胶泄漏出试剂盒外，有防交叉污染的作用。
28.3、本发明提供的一种核酸检测试剂盒在包括核酸提取、核酸扩增以及核酸检测三大环节的完整过程，保证了核酸检测试剂装置的密封环境，减少样本交叉污染的风险，能够有效提升核酸检测的检测效率。
附图说明
29.图1为本发明提供的整体结构示意图；
30.图2为本发明提供的上乳胶塑胶压盖位置结构示意图；
31.图3为本发明提供的密封膜形状结构示意图；
32.图4为本发明提供的金属棒存放孔位置结构示意图；
33.图5为本发明提供的预埋管装配孔位置结构示意图；
34.图6为本发明提供的pcr管位置结构示意图；
35.图7为本发明提供的预埋管组件结构示意图；
36.图8为本发明提供的第一连接机构结构示意图；
37.图9为本发明提供的第二连接机构结构示意图；
38.图10为本发明提供的a处放大图；
39.图11为本发明提供的浅管位置结构示意图。
40.图中标号：1、下圆环固定盖；2、圆形试剂盒；3、密封膜；4、下乳胶塑胶压盖；5、第一螺栓；6、金属棒存放孔；7、上盖；8、加样口；9、胶塞；10、金属棒；11、上圆环固定盖；12、上乳胶塑胶压盖；13、第二螺栓；14、预埋管装配孔；15、pcr管；16、预埋管组件；161、预埋管主体；162、铝箔膜b；163、铝箔膜a；17、浅管；18、u型铝箔膜；19、第一连接机构；191、底部连接板；192、内齿环；193、第一连接轴；194、第一齿轮；195、蜗轮环；196、支撑块；197、蜗杆；198、第一转轮；20、第二连接机构；201、第二连接轴；202、第二齿轮；203、转动环；204、齿轮环；205、第二转轮；21、第一定位柱；22、第一定位套；23、第二定位柱；24、第二定位套；25、支撑柱；26、橡胶摩擦垫；27、检测孔；28、检测塞；a、清洗液存放口1；b、清洗液存放口2；c、清洗液存
放口3；d、清洗液存放口4；e、裂解液存放管。
具体实施方式
41.下面结合附图和实施方式对本发明作进一步说明。在具体实施过程中，如图1、图2、图3、图4、图5、图6和图11所示，一种核酸检测试剂盒，包括下圆环固定盖1，所述下圆环固定盖1的内侧套接有圆形试剂盒2，所述圆形试剂盒2的顶部设置有密封膜3，所述密封膜3的下端设置有下乳胶塑胶压盖4，所述下乳胶塑胶压盖4的底部与密封膜3的下端挤压接触，且密封膜3的底部与圆形试剂盒2的顶部挤压接触，所述下圆环固定盖1的外侧通过轴承等距转动连接有第一螺栓5，所述第一螺栓5通过第一螺纹孔与下乳胶塑胶压盖4螺纹连接，所述圆形试剂盒2的中部设置有金属棒存放孔6，所述密封膜3的上方设置有上盖7，所述圆形试剂盒2的一侧设置有加样口8，所述加样口8的中部过盈连接有胶塞9，所述上盖7的中部固定有金属棒10，所述金属棒10的下端与金属棒存放孔6插接，金属棒10是与上盖7在注塑成型时嵌入，也可以是上盖7加工后与金属棒10键合，所述上盖7的外壁固定有上圆环固定盖11，所述密封膜3的上端设置有上乳胶塑胶压盖12，所述上乳胶塑胶压盖12的顶部与密封膜3的上端挤压接触，且密封膜3的顶部与上盖7的底部挤压接触，密封膜3四十五度(或其他角度)面贴3m双面胶增加摩擦，防止上盖7在拉扯时，密封膜3因变薄而被拉扯脱落，所述上圆环固定盖11的外圈通过轴承等距转动连接有第二螺栓13，所述第二螺栓13通过第二螺纹孔与上乳胶塑胶压盖12螺纹连接，所述圆形试剂盒2的一侧开设有预埋管装配孔14，所述圆形试剂盒2的底部位于预埋管装配孔14的外侧固定有pcr管15，所述预埋管装配孔14的内侧设置有预埋管组件16，所述圆形试剂盒2远离pcr管15的一侧等距设置有浅管17，所述圆形试剂盒2的顶部靠近浅管17的一侧设置有u型铝箔膜18，u型铝箔膜18的功能是封装存储用，以及在试剂盒检测使用时用探针穿刺u型铝箔膜18，然后u型铝箔膜18能撑开比金属棒10直径大的孔，u型铝箔膜18不会影响金属棒10上下直线运动，封装的铝箔膜的材料也可以是其他塑料膜等，所述下圆环固定盖1的底部固定有第一连接机构19，所述第一连接机构19用于驱动第一螺栓5同时转动，所述上圆环固定盖11的顶部设置有第二连接机构20，所述第二连接机构20用于驱动第二螺栓13同时转动，所述上盖7的一侧开设有检测孔27，所述检测孔27的内壁过盈连接有检测塞28。
42.需要说明的是，本发明在进行核酸检测试剂的封装的时候能够极大的提高封装的效率，方便人们操作，同时在封装结束的时候能够进行漏气检测功能，相对于传统的检测试剂盒极大的提高了封装的质量。
43.参考图7所示，所述预埋管组件16包括预埋管主体161、铝箔膜b162和铝箔膜a163，所述预埋管装配孔14内壁设置有预埋管主体161，所述预埋管主体161的底部热封接有铝箔膜b162，所述预埋管主体161的顶部热封接有铝箔膜a163，所述铝箔膜b162的底部与pcr管15的顶部挤压接触。
44.需要说明的是，pcr管15内液体或固体试剂的密封是通过铝箔膜b162与pcr管15上台阶压紧后实现，台阶与铝箔膜b162中间也可增加密封材料；预埋管组件16的固定:压入圆形试剂盒2后可通过焊接、粘接、结构紧配等方式实现。
45.参考图8所示，所述第一连接机构19包括底部连接板191、内齿环192、第一连接轴193、第一齿轮194、蜗轮环195、支撑块196、蜗杆197和第一转轮198，所述下圆环固定盖1的
底部固定有底部连接板191，所述底部连接板191的下表面通过轴承转动连接有内齿环192，所述第一螺栓5下表面的中部固定有第一连接轴193，所述第一连接轴193的中部固定有第一齿轮194，六个所述第一齿轮194均与内齿环192啮合连接，所述内齿环192的底部固定有蜗轮环195，所述底部连接板191下表面的一侧对称固定有支撑块196，两个所述支撑块196之间通过轴承转动连接有蜗杆197，所述蜗杆197与蜗轮环195啮合连接，所述蜗杆197的一端穿过支撑块196固定有第一转轮198。
46.参考图1所示，所述下圆环固定盖1的顶部等距固定有第一定位柱21，所述下乳胶塑胶压盖4的外壁等距固定有第一定位套22，所述第一定位柱21与第一定位套22插接，用于在压紧下乳胶塑胶压盖4的时候对下乳胶塑胶压盖4进行定位。
47.参考图9和图10所示，所述第二连接机构20包括第二连接轴201、第二齿轮202、转动环203、齿轮环204和第二转轮205，所述第二螺栓13上表面的中部固定有第二连接轴201，所述第二连接轴201的上端固定有第二齿轮202，所述上圆环固定盖11上表面的中部通过轴承转动连接有转动环203，所述转动环203上端的外壁固定有齿轮环204，六个第二齿轮202均与齿轮环204啮合连接，所述上圆环固定盖11上一侧的一个第二连接轴201的顶部固定有第二转轮205。
48.需要说明的是，通过设置的第一连接机构19和第二连接机构20能够在压紧密封膜3的时候通过转动第一转轮198和第二转轮205就能够带动第一螺栓5或者第二螺栓13同时转动，进而极大的提高了封装的效率，方便人们使用。
49.且塑料乳胶压盖压紧的方式除上述连接方式，还可以是：将上、下圆环固定盖换成塑料的，再通过超声波焊接等塑料方式把上、下乳胶塑料胶盖分别和上、下圆环固定盖焊接
50.参考图1所示，所述上圆环固定盖11的外壁等距固定有第二定位柱23，所述上乳胶塑胶压盖12的外壁等距固定有第二定位套24，所述第二定位柱23与第二定位套24插接，需要说明的是，用于在压紧上乳胶塑胶压盖12的时候对上乳胶塑胶压盖12进行定位。
51.参考图8和图10所示，所述第一转轮198和第二转轮205均呈梅花状设置，能够方便人们转动第一转轮198或者第二转轮205。
52.参考图1所示，所述第一定位柱21的顶部和第二定位柱23的底部均开设有倒角，能够方便第一定位柱21插入到第一定位套22内，且方便第二定位柱23插入到第二定位套24内。
53.参考图8所示，所述底部连接板191的底部等距固定有支撑柱25，所述支撑柱25的底部固定有橡胶摩擦垫26，能够使得底部连接板191稳定的放置。
54.更进一步地，所述密封膜3包括有弹性膜或非弹性膜。在本技术中，所述密封膜3优选使用非弹性膜而不是弹性膜，一方面由于非弹性膜更容易贴合于圆形试剂盒2的顶部，形成更严密的密封环境；另一方面是由于非弹性膜成本更低。
55.本发明还提供一种核酸检测试剂盒的制备工艺，其步骤包括：
56.1)、将加样口8用胶塞9堵上，先用u型铝箔膜18封装圆形试剂盒2内的核酸提取试剂、磁珠，所述核酸提取试剂、磁珠放置在圆形试剂盒2对应的存放口内，所述磁珠可以用磁珠液替换，其中提取试剂为裂解液、清洗液1、清洗液2、清洗液3、清洗液4，裂解液放置在裂解液存放管e内，清洗液1到清洗液4分别放置进清洗液存放口1a、清洗液存放口2b、清洗液存放口3c和清洗液存放口4d内；
57.2)、pcr管15内加入液体或固体试剂，然后压入预埋管组件16；所述步骤1)、步骤2)顺序可调换；
58.3)密封膜3粘接在圆形试剂盒2的顶部以及上盖7的底部并进行压紧固定，根据需要可提前放置干燥剂等在上盖7的底部；
59.4)接外界气源通过上盖7的检测孔27打入气体检验密封膜3的密封性；
60.5)检测无漏气，将上盖7的检测孔27用检测塞28堵上即可。
61.在本发明的一个较佳实施例中，所述密封膜3内空间，固定有干燥剂，所述干燥剂固定在上盖7或者底座上，只要是不影响金属棒10活动和试剂封装的位置即可；
62.所述pcr管15的外壁厚度为0.1-1.5mm，透光率不小于60％，主要以保证其能够通过光学检测，
63.所述u型铝箔膜18上表面不与存放的试剂发生反应，下表面附着有一层pp塑料膜，可以与浅管17内的液体、固体接触存放，而预埋管主体161顶部的铝箔膜a163为单面接触试剂，其底部的铝箔膜b162为双面可接触试剂，预埋管组件16主体封装的顺序为先封装底部铝箔膜b162，装入预埋的试剂后封装顶部的铝箔膜a163；把底部的液体或固体试剂放入到pcr管15内，然后再清洗铝箔膜b162的底面并放入预埋管组件16，通过预埋管组件16底部的铝箔膜b162及预埋管组件16底部的台阶与pcr管15顶部压紧密封；或者通过预埋管组件16底部的铝箔膜b162及预埋管组件16底部的台阶与pcr管15顶部的圆形试剂盒2内部的结构紧配实现对下方的pcr管15的密封，预埋管组件16可通过压接即结构紧配或者焊接或者胶粘的方式实现对pcr管15的封装；预埋管组件16下的台阶可以设置为圆弧形台阶，
64.工作原理：使用的时候，当将试剂、磁珠或者磁珠液放置进圆形试剂盒2上的各存放口内后，再在pcr管15内封装预埋管组件16，同时将u型铝箔膜18封装在浅管17上，完成封装工作后，将密封膜3粘贴在圆形试剂盒2上，进而将密封膜3下端的下乳胶塑胶压盖4压紧在圆形试剂盒2上，压紧过程为，通过拿起下乳胶塑胶压盖4，并转动下乳胶塑胶压盖4，保证下乳胶塑胶压盖4上的第一定位套22对准下圆环固定盖1上的第一定位柱21，进而向下移动下乳胶塑胶压盖4，使得第一定位套22套在第一定位柱21的外侧，完成下乳胶塑胶压盖4的定位工作，最终使得第一螺栓5的上端插入到第一螺纹孔内，进而通过转动第一转轮198，从而带动蜗杆197转动，进而蜗杆197带动蜗轮环195转动，通过蜗轮环195能够带动内齿环192转动，而内齿环192转动的时候能够同时带动六个第一齿轮194转动，进而带动第一连接轴193转动，进而能够带动六个第一螺栓5同时转动，进而使得第一螺栓5与第一螺纹孔螺纹连接，从而通过第一螺栓5向下拉紧下乳胶塑胶压盖4，最终通过下乳胶塑胶压盖4将密封膜3压紧在圆形试剂盒2上；
65.进入再进行上盖7的安装工作以及密封膜3上端的压紧工作，通过拿起上盖7，将上盖7上的金属棒10插入到圆形试剂盒2中部的金属棒存放孔6内，进而拿起密封膜3外侧的上乳胶塑胶压盖12，进行上乳胶塑胶压盖12的安装工作，将上乳胶塑胶压盖12上的六个第二定位套24对准上圆环固定盖11上的六个第二定位柱23，并上移上乳胶塑胶压盖12直至将第二定位套24套在第二定位柱23的外侧，最终使得第二螺纹孔套在第二螺栓13下端的外侧，进而捏紧上乳胶塑胶压盖12和上圆环固定盖11，进而通过转动第二转轮205，从而带动与第二转轮205固定的第二连接轴201转动，从而带动与第二连接轴201固定的一个第二螺栓13固定，而在该第二连接轴201转动的时候能够带动第二齿轮202转动，进而带动齿轮环204转
动，进而使得六个第二齿轮202同时转动，从而能够带动六个第二螺栓13同时转动，从而能够第二螺栓13与第二螺纹孔螺纹连接，进而能够向上拉紧上乳胶塑胶压盖12，直至上乳胶塑胶压盖12将密封膜3压紧在上盖7上，从而完成封装工作；且封装完成后能够打开检测塞28，通过检测孔27加气，检测密封膜3是否口气，检测完成进而塞紧检测塞28；
66.本发明能够极大的提高封装的效率，方便人们操作，同时在封装结束的时候能够进行漏气检测功能，相对于传统的检测试剂盒极大的提高了封装的质量，同时能够提高了封装的效率。此外，本发明提供的一种核酸检测试剂盒在包括核酸提取、核酸扩增以及核酸检测三大环节的完整过程，保证了核酸检测试剂装置的密封环境，减少样本交叉污染的风险，能够有效提升核酸检测的检测效率。
67.以上所述仅为本发明的实施例，并非因此限制本发明的专利范围，凡是利用本发明说明书及附图内容所作的等效结构或等效流程变换，或直接或间接运用在其它相关的技术领域，均同理包括在本发明的专利保护范围内。