1.本发明涉及多肽的制备技术领域，尤其涉及一种细胞激活能量蛋白及其制备方法。
背景技术：
2.酪蛋白多肽是一种从牛乳酪蛋白中提炼酶解出来的小分子蛋白短肽，经消化系统吸收进入人体循环系统后，能够针对人体免疫细胞完成激活、修复、再生及提升活性，从而激发免疫系统的主动性，达到恢复及巩固自身免疫系统的作用。鲣鱼弹性蛋白肽提取自深海鲣鱼的心脏动脉球组织，鲣鱼弹性蛋白肽中含有锁链素和异锁链素，能够与胶原蛋白肽发挥协同作用，激活人体真皮产生成纤维细胞，减缓弹性蛋白的流失，从而改善肌肤的弹性和柔软度，减少肌肤皱纹。
3.酪蛋白多肽及鲣鱼弹性蛋白肽具有上述优点及功效，已作为有效成分应用于各类保健品的生产制备中。发明人发现，现有的应用中，酪蛋白多肽及鲣鱼弹性蛋白肽往往直接添加至口服保健品。酪蛋白多肽及鲣鱼弹性蛋白肽进入消化体统后，大部分被各类消化酶分解为氨基酸后吸收，难以发挥原有的生物活性功效。同时，多肽成分的稳定性也直接影响了有效成分的实际效果，多肽的不稳定性是物理及化学两方面双重影响产生的结果，多肽的非酶催化的脱酰胺反应与环境条件及多肽自身的结构有关，温度的升高及ph的变化都会诱导多肽脱酰胺反应的进行，造成残基的水解；另外，多肽形成的溶液容易发生氧化及水解，不利于产品的保存，并且由氧化或水解引发的多肽变性过程形成的中间体在溶液中的溶解度减小，容易析出并形成聚集体，产生难溶于水的沉淀，大大阻碍了多肽的吸收，对产品造成不利的影响。
4.专利cn 107858390 a提供了一种基于胃肠消化的玉米大分子多肽制备的方法，采用超声预处理玉米醇溶蛋白，显著提高酶解产物的均一性；专利cn 108576502 a公开了一种利用鳀鱼皮中活性多肽制备的复配物的方法，选用以红枣为主原料制备复配物并通过添加中草药成分丰富复配物功效再配合蜂蜜、苹果汁、鳀鱼活性多肽等成分进一步丰富复配物的口感，同时避免使用白糖，制备所得的复配物具有润肠通便、降火解毒、消食除胀、健脾益胃、明目的功效，同时通过添加鳀鱼活性多肽使复配物具有很好的抗氧化性能。上述专利都是将多肽直接作为原料，实际应用中可能会出现氧化、水解导致的功能下降等技术问题，并且不利于保存。
技术实现要素：
5.有鉴于现有技术的上述缺陷，本发明所解决的技术问题是：(1)提供一种细胞激活能量蛋白的制备方法，提升细胞激活能量蛋白的稳定性、抗氧化性；(2)加强肽载体对蛋白肽的结合能力，提升细胞激活能量蛋白的乳化性能。
6.为了提升酪蛋白多肽及鲣鱼弹性蛋白肽的稳定性，发明人以茶氨酸乙酯及色氨酸甲酯盐酸盐为原料，与β-酵母葡聚糖形成复合物，并以所述复合物作为酪蛋白多肽及鲣鱼
弹性蛋白肽的肽载体，进而提升两种多肽的综合稳定性。茶氨酸的乙酰化过程中，发明人选择了较低的反应温度以避免在70℃上出现的消旋现象。发明人在肽载体得制备中使用1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺来促进原料件的结合，1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺通过激活羧基生成不稳定的中间体o-酰基异脲，然后中间体进一步与胺结合形成稳定的酰胺键。为了达到最佳的活化效果，发明人将反应的ph严格控制在5～6，在维持反应正常进行的同时避免胺基出现质子化导致的对中间体的亲和性降低。
7.一种细胞激活能量蛋白的制备方法，包括下述步骤：以茶氨酸乙酯及色氨酸甲酯盐酸盐合成形成的复合物或茶氨酸乙酯及色氨酸甲酯盐酸盐与β-酵母葡聚糖合成形成的复合物为肽载体，使用该肽载体对酪蛋白多肽及鲣鱼弹性蛋白肽进行包封。
8.优选的，一种细胞激活能量蛋白的制备方法，包括下述步骤：
9.s1将酪蛋白多肽及鲣鱼弹性蛋白肽分散于水中，得到蛋白分散液；
10.s2向蛋白分散液加入肽载体，经匀浆、离心得到上清液，上清液经冻干后得到所述细胞激活能量蛋白。
11.进一步优选的，一种细胞激活能量蛋白的制备方法，包括下述步骤，以重量份计：
12.s1将2～5份酪蛋白多肽及0.3～0.6份鲣鱼弹性蛋白肽经超声分散于50～100份水中，得到蛋白分散液；
13.s2向蛋白分散液加入3～8份肽载体，经匀浆、离心得到上清液，上清液经冻干后得到所述细胞激活能量蛋白。
14.优选的，步骤s1中所述超声的超声功率为550～800w，超声频率为28～40khz，超声时间为5～15min。
15.优选的，步骤s2中所述匀浆的速率为8000～12000rpm，均浆时间为5～10min。
16.优选的，步骤s2中所述离心的速率为6000～8000rpm，离心时间为10～20min。
17.优选的，步骤s2中所述冻干的操作步骤为：在-10～-20℃预冻1～2h，随后在-60～-80℃冷冻12～24h。
18.优选的，步骤s2中所述肽载体的制备方法如下，以重量份计：
19.x1将1.8～2.4份l-茶氨酸加入20～40份乙醇，混合后加入3～6份浓度为1～2mol/l的盐酸，反应后经减压去除乙醇、干燥，得到l-茶氨酸乙酯盐酸盐；
20.x2将步骤x1得到的l-茶氨酸乙酯盐酸盐复溶于25～50份水，加入浓度为1～2mol/l的氢氧化钠的水溶液以调节ph至8～9，经沉淀、过滤得滤饼、水洗、干燥，得到l-茶氨酸乙酯；
21.x3向60～100份水加入步骤x2得到的l-茶氨酸乙酯、0.2～0.6份1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺、1.6～4.8份l-色氨酸甲酯盐酸盐，进行反应，反应期间使用浓度为1～2mol/l的盐酸及1～2mol/l的氢氧化钠的水溶液调节反应体系ph为5～6，得到初反应溶液；
22.x4使用膜分离工艺，步骤x3中得到的初反应溶液经超滤截留得到分子量为3500da的粗产物，粗产物在乙醇中沉淀后过滤得滤饼，醇洗后复溶于水，再次使用膜分离，超滤截留得到分子量为3500da的纯化产物，纯化产物经冻干，得到所述肽载体。
23.进一步优选的，步骤x1中所述反应的温度为45～55℃，反应时间为1～2h。
24.进一步优选的，步骤x3中所述反应的温度为45～60℃，反应时间为18～36h。
25.进一步优选的，步骤x4中所述冻干的操作步骤为：在-10～-20℃预冻1～2h，随后在-60～-80℃冷冻12～24h。
26.在长期的生产实践中发明人发现，以l-氨酸乙酯及l-色氨酸甲酯盐酸盐合成形成的复合物作为肽载体的装载效果有待提升，由于肽载体对蛋白肽负载不完全，导致成品出现抗氧化性及稳定性难以达到设计的预期。针对这一技术问题，发明人经过长期的观察和改良发现，产生这种现象的原因在于，由于底物对肽载体表现出较严格的立体特异性，它对n末端含l-型氨基酸的亲和力较低，导致两者的结合效果降低。为此，发明人以乙酯化的d-茶氨酸及d-色氨酸甲酯盐酸盐制备了肽载体，该种肽载体对疏水性、侧链体积较大的底物，如含支链氨基酸、蛋氨酸或苯丙氨酸的肽，具有较高的亲和力。
27.在肽载体的制备过程中，为了避免多肽理化不稳定性对生产造成不利影响，发明人在肽载体上通过β-酵母葡聚糖与胺基发生美拉德反应引入还原糖，最终制备得到的肽载体是一种还原糖-多肽复合物。β-酵母葡聚糖是一种现具有免疫活性的葡聚糖，它能够活化巨噬细胞、嗜中性白血球等，从而提高白细胞素、细胞分裂素和特殊抗体的含量，具有刺激机体的免疫系统并对受损细胞有非常好的修复作用。
28.由于分子链中引入了β-酵母葡聚糖，肽载体对温度和电解质刺激的耐受性增加，相比原有的技术方案，该种复合物体现出了更好的乳化性能及长期稳定性。
29.进一步优选的，步骤x1中l-茶氨酸可以替换为d-茶氨酸；步骤x3还可以为：将2～4份β-酵母葡聚糖溶于60～100份水，继续加入步骤x2得到的d-茶氨酸乙酯、0.2～0.6份1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺、1.6～4.8份d-色氨酸甲酯盐酸盐，进行反应，反应期间使用浓度为1～2mol/l的盐酸及1～2mol/l的氢氧化钠的水溶液调节反应体系ph为5～6，得到初反应溶液。
30.在符合本领域常识的基础上，上述各优选条件，可以任意组合，即得本发明各较佳实施例。
31.本发明配方中部分原料的介绍及作用如下：
32.酪蛋白多肽：一种从牛乳酪蛋白中提炼酶解出来的小分子蛋白多肽，可以针对人体免疫细胞完成激活、修复、再生、提升活性的全过程，激发自身免疫系统的主动性，从根本上恢复和加固自身免疫系统。
33.鲣鱼弹性蛋白肽：提取自鲣鱼心脏球动脉球组织的多肽，保留了锁链素和异锁链素两种标志性氨基酸，以及可被人体分解的氨基酸肽链，能够与胶原蛋白肽发挥协同作用，能够显著促进人体合成胶原蛋白，使肌肤年轻丰盈；改善肌肤的弹性和柔软度，减少肌肤皱纹，改善皮肤纹理。
34.茶氨酸：一种氨基酸，具有良好的保健效果，具备一定降血压、辅助抑制肿瘤、松弛神经紧张等功效，对脑神经细胞由保护作用。本发明中作为制备肽载体的原料。
35.色氨酸甲酯盐酸盐：一种化合物，本发明中作为制备肽载体的原料。
36.β-酵母葡聚糖：一种具有水不溶性的分支聚合物，主链以β-1,3糖苷健结合，支链以β-1,6糖苷健结合，具有增强免疫力、抗感染、提高抗病能、降低血脂等保健功效。本发明中作为制备肽载体的原料。
37.本发明的有益效果：
38.与现有技术相比，本发明使用茶氨酸乙酯及色氨酸甲酯盐酸盐形成复合物，并以
所述复合物作为酪蛋白多肽及鲣鱼弹性蛋白肽的肽载体，提升了两种多肽的综合稳定性。
39.相比现有技术，本发明优化了制备工艺，以d-茶氨酸乙酯及d-色氨酸甲酯盐酸盐与β-酵母葡聚糖反应形成肽载体，提升了对温度和电解质刺激的耐受性，增加了细胞激活能量蛋白乳化性能及长期稳定性。
具体实施方式
40.下面通过实施例的方式进一步说明本发明，但并不因此将本发明限制在所述的实施例范围之中。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，按照常规方法和条件，或按照商品说明书选择。
41.本发明对照例及实施例中部分原材料参数如下：
42.酪蛋白多肽，英格兰地伊亚股份公司。
43.鲣鱼弹性蛋白肽，toyo science corp。
44.l-色氨酸甲酯盐酸盐，cas号：7524-52-9；
45.d-茶氨酸，cas号：5822-62-8；
46.d-色氨酸甲酯盐酸盐，cas号：14907-27-8；
47.β-酵母葡聚糖，cas号：9041-22-9。
48.实施例1
49.一种细胞激活能量蛋白，采用如下方法制备而成：
50.s1将2.5kg酪蛋白多肽及0.3kg鲣鱼弹性蛋白肽经超声分散于50kg水中，所述超声的超声功率为550w，超声频率为28khz，超声时间为10min，得到蛋白分散液；
51.s2向蛋白分散液加入4.5kg肽载体，经匀浆、离心得到上清液，上清液经冻干后得到所述细胞激活能量蛋白。
52.步骤s2中所述匀浆的速率为9000rpm，均浆时间为5min。
53.步骤s2中所述离心的速率为6000rpm，离心时间为15min。
54.步骤s2中所述冻干的操作步骤为：在-20℃预冻1h，随后在-80℃冷冻18h。
55.步骤s2中所述肽载体的制备方法如下，以重量份计：
56.x1将1.8kg l-茶氨酸加入30kg乙醇，混合后加入3kg浓度为1mol/l的盐酸，在50℃反应1.5h，反应后经减压去除乙醇、干燥，得到l-茶氨酸乙酯盐酸盐；
57.x2将步骤x1得到的l-茶氨酸乙酯盐酸盐复溶于25kg水，加入浓度为1mol/l的氢氧化钠的水溶液以调节ph至8，经沉淀、过滤得滤饼、水洗、干燥，得到l-茶氨酸乙酯；
58.x3向60kg水中加入步骤x2得到的l-茶氨酸乙酯、0.2kg 1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺、1.6kg l-色氨酸甲酯盐酸盐，进行反应，在60℃反应18h，反应期间使用浓度为1mol/l的盐酸及1mol/l的氢氧化钠的水溶液调节反应体系ph为5，得到初反应溶液；
59.x4使用膜分离工艺，步骤x3中得到的初反应溶液经超滤截留得到分子量为3500da的粗产物，粗产物在乙醇中沉淀后过滤得滤饼，醇洗后复溶于水，再次使用膜分离，超滤截留得到分子量为3500da的纯化产物，纯化产物经冻干，得到所述肽载体。
60.步骤x4中所述冻干的操作步骤为：在-20℃预冻1h，随后在-80℃冷冻18h。
61.实施例2
62.一种细胞激活能量蛋白，采用如下方法制备而成：
63.s1将2.5kg酪蛋白多肽及0.3kg鲣鱼弹性蛋白肽经超声分散于50kg水中，所述超声的超声功率为550w，超声频率为28khz，超声时间为10min，得到蛋白分散液；
64.s2向蛋白分散液加入4.5kg肽载体，经匀浆、离心得到上清液，上清液经冻干后得到所述细胞激活能量蛋白。
65.步骤s2中所述匀浆的速率为9000rpm，均浆时间为5min。
66.步骤s2中所述离心的速率为6000rpm，离心时间为15min。
67.步骤s2中所述冻干的操作步骤为：在-20℃预冻1h，随后在-80℃冷冻18h。
68.步骤s2中所述肽载体的制备方法如下，以重量份计：
69.x1将1.8kg l-茶氨酸加入30kg乙醇，混合后加入3kg浓度为1mol/l的盐酸，在70℃反应1.5h，反应后经减压去除乙醇、干燥，得到l-茶氨酸乙酯盐酸盐；
70.x2将步骤x1得到的l-茶氨酸乙酯盐酸盐复溶于25kg水，加入浓度为1mol/l的氢氧化钠的水溶液以调节ph至8，经沉淀、过滤得滤饼、水洗、干燥，得到l-茶氨酸乙酯；
71.x3向60kg水中加入步骤x2得到的l-茶氨酸乙酯、0.2kg 1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺、1.6kg l-色氨酸甲酯盐酸盐，进行反应，在60℃反应18h，反应期间使用浓度为1mol/l的盐酸及1mol/l的氢氧化钠的水溶液调节反应体系ph为5，得到初反应溶液；
72.x4使用膜分离工艺，步骤x3中得到的初反应溶液经超滤截留得到分子量为3500da的粗产物，粗产物在乙醇中沉淀后过滤得滤饼，醇洗后复溶于水，再次使用膜分离，超滤截留得到分子量为3500da的纯化产物，纯化产物经冻干，得到所述肽载体。
73.步骤x4中所述冻干的操作步骤为：在-20℃预冻1h，随后在-80℃冷冻18h。
74.实施例3
75.一种细胞激活能量蛋白，采用如下方法制备而成：
76.s1将2.5kg酪蛋白多肽及0.3kg鲣鱼弹性蛋白肽经超声分散于50kg水中，所述超声的超声功率为550w，超声频率为28khz，超声时间为10min，得到蛋白分散液；
77.s2向蛋白分散液加入4.5kg肽载体，经匀浆、离心得到上清液，上清液经冻干后得到所述细胞激活能量蛋白。
78.步骤s2中所述匀浆的速率为9000rpm，均浆时间为5min。
79.步骤s2中所述离心的速率为6000rpm，离心时间为15min。
80.步骤s2中所述冻干的操作步骤为：在-20℃预冻1h，随后在-80℃冷冻18h。
81.步骤s2中所述肽载体的制备方法如下，以重量份计：
82.x1将1.8kg l-茶氨酸加入30kg乙醇，混合后加入3kg浓度为1mol/l的盐酸，在50℃反应1.5h，反应后经减压去除乙醇、干燥，得到l-茶氨酸乙酯盐酸盐；
83.x2将步骤x1得到的l-茶氨酸乙酯盐酸盐复溶于25kg水，加入浓度为1mol/l的氢氧化钠的水溶液以调节ph至8，经沉淀、过滤得滤饼、水洗、干燥，得到l-茶氨酸乙酯；
84.x3将2kgβ-酵母葡聚糖溶于60kg水，继续加入步骤x2得到的l-茶氨酸乙酯、0.2kg 1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺、1.6kg l-色氨酸甲酯盐酸盐，进行反应，在60℃反应18h，反应期间使用浓度为1mol/l的盐酸及1mol/l的氢氧化钠的水溶液调节反应体系ph为5，得到初反应溶液；
85.x4使用膜分离工艺，步骤x3中得到的初反应溶液经超滤截留得到分子量为3500da的粗产物，粗产物在乙醇中沉淀后过滤得滤饼，醇洗后复溶于水，再次使用膜分离，超滤截
留得到分子量为3500da的纯化产物，纯化产物经冻干，得到所述肽载体。
86.步骤x4中所述冻干的操作步骤为：在-20℃预冻1h，随后在-80℃冷冻18h。
87.实施例4
88.一种细胞激活能量蛋白，采用如下方法制备而成：
89.s1将2.5kg酪蛋白多肽及0.3kg鲣鱼弹性蛋白肽经超声分散于50kg水中，所述超声的超声功率为550w，超声频率为28khz，超声时间为10min，得到蛋白分散液；
90.s2向蛋白分散液加入4.5kg肽载体，经匀浆、离心得到上清液，上清液经冻干后得到所述细胞激活能量蛋白。
91.步骤s2中所述匀浆的速率为9000rpm，均浆时间为5min。
92.步骤s2中所述离心的速率为6000rpm，离心时间为15min。
93.步骤s2中所述冻干的操作步骤为：在-20℃预冻1h，随后在-80℃冷冻18h。
94.步骤s2中所述肽载体的制备方法如下，以重量份计：
95.x1将1.8kg d-茶氨酸加入30kg乙醇，混合后加入3kg浓度为1mol/l的盐酸，在50℃反应1.5h，反应后经减压去除乙醇、干燥，得到d-茶氨酸乙酯盐酸盐；
96.x2将步骤x1得到的d-茶氨酸乙酯盐酸盐复溶于25kg水，加入浓度为1mol/l的氢氧化钠的水溶液以调节ph至8，经沉淀、过滤得滤饼、水洗、干燥，得到d-茶氨酸乙酯；
97.x3向60kg水中加入步骤x2得到的d-茶氨酸乙酯、0.2kg 1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺、1.6kg d-色氨酸甲酯盐酸盐，进行反应，在60℃反应18h，反应期间使用浓度为1mol/l的盐酸及1mol/l的氢氧化钠的水溶液调节反应体系ph为5，得到初反应溶液；
98.x4使用膜分离工艺，步骤x3中得到的初反应溶液经超滤截留得到分子量为3500da的粗产物，粗产物在乙醇中沉淀后过滤得滤饼，醇洗后复溶于水，再次使用膜分离，超滤截留得到分子量为3500da的纯化产物，纯化产物经冻干，得到所述肽载体。
99.步骤x4中所述冻干的操作步骤为：在-20℃预冻1h，随后在-80℃冷冻18h。
100.实施例5
101.一种细胞激活能量蛋白，采用如下方法制备而成：
102.s1将2.5kg酪蛋白多肽及0.3kg鲣鱼弹性蛋白肽经超声分散于50kg水中，所述超声的超声功率为550w，超声频率为28khz，超声时间为10min，得到蛋白分散液；
103.s2向蛋白分散液加入4.5kg肽载体，经匀浆、离心得到上清液，上清液经冻干后得到所述细胞激活能量蛋白。
104.步骤s2中所述匀浆的速率为9000rpm，均浆时间为5min。
105.步骤s2中所述离心的速率为6000rpm，离心时间为15min。
106.步骤s2中所述冻干的操作步骤为：在-20℃预冻1h，随后在-80℃冷冻18h。
107.步骤s2中所述肽载体的制备方法如下，以重量份计：
108.x1将1.8kg d-茶氨酸加入30kg乙醇，混合后加入3kg浓度为1mol/l的盐酸，在50℃反应1.5h，反应后经减压去除乙醇、干燥，得到d-茶氨酸乙酯盐酸盐；
109.x2将步骤x1得到的d-茶氨酸乙酯盐酸盐复溶于25kg水，加入浓度为1mol/l的氢氧化钠的水溶液以调节ph至8，经沉淀、过滤得滤饼、水洗、干燥，得到d-茶氨酸乙酯；
110.x3将2kgβ-酵母葡聚糖溶于60kg水，继续加入步骤x2得到的d-茶氨酸乙酯、0.2kg 1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺、1.6kg d-色氨酸甲酯盐酸盐，进行反应，在60℃
反应18h，反应期间使用浓度为1mol/l的盐酸及1mol/l的氢氧化钠的水溶液调节反应体系ph为5，得到初反应溶液；
111.x4使用膜分离工艺，步骤x3中得到的初反应溶液经超滤截留得到分子量为3500da的粗产物，粗产物在乙醇中沉淀后过滤得滤饼，醇洗后复溶于水，再次使用膜分离，超滤截留得到分子量为3500da的纯化产物，纯化产物经冻干，得到所述肽载体。
112.步骤x4中所述冻干的操作步骤为：在-20℃预冻1h，随后在-80℃冷冻18h。
113.对照例1
114.一种细胞激活能量蛋白，采用如下方法制备而成：
115.s1将2.5kg酪蛋白多肽及0.3kg鲣鱼弹性蛋白肽经超声分散于50kg水中，所述超声的超声功率为550w，超声频率为28khz，超声时间为10min，得到蛋白分散液；
116.s2向蛋白分散液经冻干后得到所述细胞激活能量蛋白。
117.步骤s2中所述冻干的操作步骤为：在-20℃预冻1h，随后在-80℃冷冻18h。
118.测试例1
119.肽载体的结合能力通过间接法，测定各实施例得到的细胞激活能量蛋白的质量占肽载体和酪蛋白多肽及鲣鱼弹性蛋白肽的总质量的百分比来进行表观，测试结果见表1。肽载体和受体的结合百分比通过以下公式计算得到：
[0120][0121]
式中，q为原料使用率；m1为细胞激活能量蛋白的质量；m2为肽载体的质量；m3为酪蛋白多肽和鲣鱼弹性蛋白肽的总质量。
[0122]
表1
[0123] 原料使用率(％)实施例157.9实施例245.8实施例366.5实施例483.1实施例592.8
[0124]
肽载体和受体的结合能力越强则原料使用率越高。通过上述实施例的对比可以看出，采用了d-茶氨酸和d-色氨酸甲酯盐酸盐的实施例具有更佳的结合能力。产生这种现象的原因可能在于，底物对肽载体表现出较严格的立体特异性，它对n末端含l-型氨基酸的亲和力较低，导致两者的结合效果降低；以乙酯化的d-茶氨酸及d-色氨酸甲酯盐酸盐制备的肽载体对疏水性、侧链体积较大的底物，如含支链氨基酸、蛋氨酸或苯丙氨酸的肽，具有较高的亲和力。
[0125]
测试例2
[0126]
细胞激活能量蛋白的抗氧化性能测试参考gb/t 39100-2020《多肽抗氧化性测定dpph和abts法》的具体要求进行。测试使用dpph法，清除自由基的能力，以待测多肽半数清除量与谷胱甘肽半数清除量的比值(ao值)来表示。计算结果以平行测试值的算术平均值表示，保留三位有效数字。细胞激活能量蛋白的抗氧化性能测试结果见表2。
[0127]
表2
[0128] dpph清除率(％)实施例168.2实施例259.5实施例374.6实施例481.7实施例590.1对照例128.9
[0129]
dpph清除率愈高，细胞激活能量蛋白的抗氧化性能越强。通过上述实施例及对照例的对比可以看出，经过肽载体封装后的细胞激活能量蛋白抗氧化性得到提升。其原因可能在于，经肽载体包封后，肽载体在外层提供了保护，原多肽内部的脱酰胺反应受阻，残基的水解作用减弱，氧化性物质难以直接与多肽进行反应，导致细胞激活能量蛋白抗氧化性的增强。
[0130]
以上详细描述了本发明的较佳具体实施例。应当理解，本领域的普通技术人员无需创造性劳动就可以根据本发明的构思作出诸多修改和变化。因此，凡本技术领域中技术人员依本发明的构思在现有技术的基础上通过逻辑分析、推理或者有限的实验可以得到的技术方案，皆应在由权利要求书所确定的保护范围内。