一种检测菌株实验用监测装置及其方法与流程

1.本发明属于菌株实验技术领域，具体涉及一种检测菌株实验用监测装置及其方法。


背景技术：

2.食品加工中，长会出现批量的调料食品出现腐坏现象，缺乏一种能够主语人员对食品的加工进行菌株检测的检测装置。
3.目前缺乏能助于人员进行多角度调节的电动滑轨监测装置，不利于人员在菌株检测的培养过程中对菌株的培养状进行实时记录。为此，我们提出一种检测菌株实验用监测装置及其方法。


技术实现要素：

4.本发明的目的在于提供一种检测菌株实验用监测装置及其方法，以解决上述背景技术中提出的问题。
5.为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种检测菌株实验用监测装置，包括支撑底座、钢化玻璃罩和转盘，还包括摄像头和红外温度传感器，所述支撑底座顶部外围胶设连接有钢化玻璃罩，所述钢化玻璃罩内且位于支撑底座顶部通过轴承转动连接有转盘，所述支撑底座一侧拐角处通过螺栓安装有支撑柱，所述支撑柱顶部通过螺栓安装有z轴电动滑轨，所述z轴电动滑轨的滑动块顶部通过螺栓安装有x轴电动滑轨，所述x轴电动滑轨的滑动块一侧通过螺栓安装有安装块，所述安装块一侧通过螺栓安装有摄像头，所述安装块底部通过螺栓安装有红外温度传感器，所述钢化玻璃罩内两侧分别通过螺栓安装有培养灯。
6.进一步地，所述支撑底座内通过螺栓安装有伺服电机，所述伺服电机的驱动端与转盘底部螺栓安装连接。
7.进一步地，所述钢化玻璃罩一侧通过铰链安装有防护门。
8.一种检测菌株实验用监测装置的检测方法，包括以下步骤：
9.步骤一：人员将需要检测的菌株先行进行菌落总数检测，样品用无菌生理盐水制成10-1
、10-2
稀释样液，分别取1ml样液于无菌平皿中，且每个稀释都做两个平皿，取冷却至室温的的pca培养基倾注平皿，快速转动混合均匀，待琼脂凝固后于36℃
±
1℃培养12-24h，并将pca平板放置于转盘上，培养12h后观察平板是否生成菌落；
10.步骤二：用灭菌后的接种针挑取pca平板上的菌落少许，点种于琼脂平板上，间隔均匀地点种4-8个点，将pca平板放置于转盘上，然后36℃
±
1℃培养12-24h，形成菌落后，在琼脂平板上滴加革兰氏碘液，以铺满菌落周围为度，此时平板呈蓝色，等待一段时间，若菌落周围有无色透明圈出现，说明淀粉被水解，透明圈的大小说明水解淀粉能力的大小；
11.步骤三：使用无接种的淀粉琼脂平板作为空白，并重复步骤二操作，空白平板滴加革兰氏碘液呈蓝色应长时间不褪色，若蓝色变浅或褪去表明平板受污染，实验结果不可靠；
12.步骤四：通过划线分离纯化，得出单菌落，按照步骤二和步骤三操作，能够确认是哪些类群的细菌具有水解淀粉能力和步骤一培养的pca平板菌落呈蔓延状；
13.步骤五：挑取送样斜面培养基上的单菌落，转接至5ml的液体lb培养基中，置于37℃，160rpm恒温摇床中培养12h后,接种环取于固体lb平板上，进行培养，剩余菌液用小型高速离心机在8000rpm,2min条件下收集菌体，用于后续细菌基因组的提取；
14.步骤六：将基因组稀释10倍作为pcr反应的模板，进行细菌16srdna序列的扩增，pcr产物通过胶回收进行dna纯化，纯化产物连接至peasy载体并转化至dh5α感受态细胞中，35-37℃培养1h后吸取100μl培养液均匀涂布于lb含氨苄抗生素固体培养基上，37℃恒温培养箱倒置培养12-24h，将测序结果与ncbi细菌16srdna数据库中序列进行比对以确定细菌的种属。
15.进一步地，所述取胰蛋白胨5g、葡萄糖1g、琼脂15g、蒸馏水1000ml，ph7.0
±
0.2进行混合溶解，并在121℃高压灭菌15min，冷却至室温℃倒平板。
16.进一步地，所述步骤五中接种环取于固体lb平板上的菌以37℃恒温培养箱倒置培养12h。
17.与现有技术相比，本发明的有益效果是：通过细菌的分离纯化确定水解淀粉菌的种属，使检测方法更准确可靠，为人员提供菌株检测实验的监测装置，能够助于人员实时对检测的菌株进行监测，从而助于人员更好的观察菌株的生长情况。
附图说明
18.图1为本发明一种检测菌株实验用监测装置及其方法的整体结构示意图。
19.图2为本发明一种检测菌株实验用监测装置及其方法的转盘结构示意图。
20.图中：1、支撑底座；2、钢化玻璃罩；3、转盘；4、培养灯；5、支撑柱；6、z轴电动滑轨；7、x轴电动滑轨；8、安装块；9、摄像头；10、红外温度传感器；11、防护门；12、伺服电机。
具体实施方式
21.下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
22.实施例1
23.如图1-2所示，一种检测菌株实验用监测装置，包括支撑底座1、钢化玻璃罩2和转盘3，还包括摄像头9和红外温度传感器10，所述支撑底座1顶部外围胶设连接有钢化玻璃罩2，所述钢化玻璃罩2内且位于支撑底座1顶部通过轴承转动连接有转盘3，所述支撑底座1一侧拐角处通过螺栓安装有支撑柱5，所述支撑柱5顶部通过螺栓安装有z轴电动滑轨6，所述z轴电动滑轨6的滑动块顶部通过螺栓安装有x轴电动滑轨7，所述x轴电动滑轨7的滑动块一侧通过螺栓安装有安装块8，所述安装块8一侧通过螺栓安装有摄像头9，所述安装块8底部通过螺栓安装有红外温度传感器10，所述钢化玻璃罩2内两侧分别通过螺栓安装有培养灯4。
24.其中，所述支撑底座1内通过螺栓安装有伺服电机12，所述伺服电机12的驱动端与
转盘3底部螺栓安装连接。
25.其中，所述钢化玻璃罩2一侧通过铰链安装有防护门11。
26.一种检测菌株实验用监测装置的检测方法，包括以下步骤：
27.步骤一：人员将需要检测的菌株先行进行菌落总数检测，样品用无菌生理盐水制成10-1
、10-2
稀释样液，分别取1ml样液于无菌平皿中，且每个稀释都做两个平皿，取冷却至室温的的pca培养基倾注平皿，快速转动混合均匀，待琼脂凝固后于36℃
±
1℃培养24h，并将pca平板放置于转盘3上，培养12h后观察平板是否生成菌落；
28.步骤二：用灭菌后的接种针挑取pca平板上的菌落少许，点种于琼脂平板上，间隔均匀地点种8个点，将pca平板放置于转盘3上，然后36℃
±
1℃培养24h，形成菌落后，在琼脂平板上滴加革兰氏碘液，以铺满菌落周围为度，此时平板呈蓝色，等待一段时间，若菌落周围有无色透明圈出现，说明淀粉被水解，透明圈的大小说明水解淀粉能力的大小；
29.步骤三：使用无接种的淀粉琼脂平板作为空白，并重复步骤二操作，空白平板滴加革兰氏碘液呈蓝色应长时间不褪色，若蓝色变浅或褪去表明平板受污染，实验结果不可靠；
30.步骤四：通过划线分离纯化，得出单菌落，按照步骤二和步骤三操作，能够确认是哪些类群的细菌具有水解淀粉能力和步骤一培养的pca平板菌落呈蔓延状；
31.步骤五：挑取送样斜面培养基上的单菌落，转接至5ml的液体lb培养基中，置于37℃，160rpm恒温摇床中培养12h后,接种环取于固体lb平板上，进行培养，剩余菌液用小型高速离心机在8000rpm,2min条件下收集菌体，用于后续细菌基因组的提取；
32.步骤六：将基因组稀释10倍作为pcr反应的模板，进行细菌16srdna序列的扩增，pcr产物通过胶回收进行dna纯化，纯化产物连接至peasy载体并转化至dh5α感受态细胞中，以37℃培养1h后吸取100μl培养液均匀涂布于lb含氨苄抗生素固体培养基上，37℃恒温培养箱倒置培养12-24h，将测序结果与ncbi细菌16srdna数据库中序列进行比对以确定细菌的种属。
33.其中，所述取胰蛋白胨5g、葡萄糖1g、琼脂15g、蒸馏水1000ml，ph7.0
±
0.2进行混合溶解，并在121℃高压灭菌15min，冷却至室温℃倒平板。
34.其中，所述步骤五中接种环取于固体lb平板上的菌以37℃恒温培养箱倒置培养12h。
35.实施例2
36.如图1-2所示，一种检测菌株实验用监测装置及其方法，包括支撑底座1、钢化玻璃罩2和转盘3，还包括摄像头9和红外温度传感器10，所述支撑底座1顶部外围胶设连接有钢化玻璃罩2，所述钢化玻璃罩2内且位于支撑底座1顶部通过轴承转动连接有转盘3，所述支撑底座1一侧拐角处通过螺栓安装有支撑柱5，所述支撑柱5顶部通过螺栓安装有z轴电动滑轨6，所述z轴电动滑轨6的滑动块顶部通过螺栓安装有x轴电动滑轨7，所述x轴电动滑轨7的滑动块一侧通过螺栓安装有安装块8，所述安装块8一侧通过螺栓安装有摄像头9，所述安装块8底部通过螺栓安装有红外温度传感器10，所述钢化玻璃罩2内两侧分别通过螺栓安装有培养灯4。
37.其中，所述支撑底座1内通过螺栓安装有伺服电机12，所述伺服电机12的驱动端与转盘3底部螺栓安装连接。
38.其中，所述钢化玻璃罩2一侧通过铰链安装有防护门11。
39.一种检测菌株实验用监测装置的检测方法，包括以下步骤：
40.步骤一：人员将需要检测的菌株先行进行菌落总数检测，样品用无菌生理盐水制成10-1
、10-2
稀释样液，分别取1ml样液于无菌平皿中，且每个稀释都做两个平皿，取冷却至室温的的pca培养基倾注平皿，快速转动混合均匀，待琼脂凝固后于36℃
±
1℃培养12h，并将pca平板放置于转盘3上，培养12h后观察平板是否生成菌落；
41.步骤二：用灭菌后的接种针挑取pca平板上的菌落少许，点种于琼脂平板上，间隔均匀地点种4个点，将pca平板放置于转盘3上，然后36℃
±
1℃培养12h，形成菌落后，在琼脂平板上滴加革兰氏碘液，以铺满菌落周围为度，此时平板呈蓝色，等待一段时间，若菌落周围有无色透明圈出现，说明淀粉被水解，透明圈的大小说明水解淀粉能力的大小；
42.步骤三：通过划线分离纯化，得出单菌落，按照步骤二和步骤三操作，能够确认是哪些类群的细菌具有水解淀粉能力和步骤一培养的pca平板菌落呈蔓延状；
43.步骤四：挑取送样斜面培养基上的单菌落，转接至5ml的液体lb培养基中，置于37℃，160rpm恒温摇床中培养12h后,接种环取于固体lb平板上，进行培养，剩余菌液用小型高速离心机在8000rpm,2min条件下收集菌体，用于后续细菌基因组的提取；
44.步骤五：将基因组稀释10倍作为pcr反应的模板，进行细菌16srdna序列的扩增，pcr产物通过胶回收进行dna纯化，纯化产物连接至peasy载体并转化至dh5α感受态细胞中，35℃培养1h后吸取100μl培养液均匀涂布于lb含氨苄抗生素固体培养基上，37℃恒温培养箱倒置培养12h，将测序结果与ncbi细菌16srdna数据库中序列进行比对以确定细菌的种属。
45.其中，所述取胰蛋白胨5g、葡萄糖1g、琼脂15g、蒸馏水1000ml，ph7.0
±
0.2进行混合溶解，并在121℃高压灭菌15min，冷却至室温℃倒平板。
46.其中，所述步骤五中接种环取于固体lb平板上的菌以37℃恒温培养箱倒置培养12h。
47.本发明的工作原理及使用流程：将需要检测的菌株先行进行菌落总数检测，样品用无菌生理盐水制成10-1
、10-2
稀释样液，分别取1ml样液于无菌平皿中，且每个稀释都做两个平皿，取冷却至室温的的pca培养基倾注平皿，快速转动混合均匀，待琼脂凝固后于36℃
±
1℃培养12h，并将pca平板放置于转盘3上，培养12h后观察平板是否生成菌落；用灭菌后的接种针挑取pca平板上的菌落少许，点种于琼脂平板上，间隔均匀地点种4个点，将pca平板放置于转盘3上，然后36℃
±
1℃培养12h，形成菌落后，在琼脂平板上滴加革兰氏碘液，以铺满菌落周围为度，此时平板呈蓝色，等待一段时间，若菌落周围有无色透明圈出现，说明淀粉被水解，透明圈的大小说明水解淀粉能力的大小；通过划线分离纯化，得出单菌落，能够确认是哪些类群的细菌具有水解淀粉能力和培养的pca平板菌落呈蔓延状。
48.尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。