含噻吩稠环类衍生物、药物组合物及其制备方法和应用与流程

含噻吩稠环类衍生物、药物组合物及其制备方法和应用
1.本技术要求2021年04月29日向中国国家知识产权局提交的，专利申请号为202110477160.5，发明名称为“含噻吩稠环类衍生物、药物组合物及其制备方法和应用”的在先申请的优先权。所述在先申请的全文通过引用的方式结合于本技术中。
技术领域
2.本发明属于药物领域，具体涉及含噻吩稠环类衍生物、药物组合物及其制备方法和应用。


背景技术：

3.促性腺激素释放激素(gonadoliberin；gonadotropin releasing hormone；gnrh)也称黄体生成素释放激素(lh-rh)，是由下丘脑神经内分泌细胞合成的十肽激素(pglu-his-trp-ser-tyr-gly-leu-arg-pro-gly-nh2)，是内分泌生殖系统中的中枢调节因素。其通过下丘脑垂体门脉循环系统将其输送到垂体，与垂体前叶的gnrh受体细胞结合，促性腺激素如黄体生成素(luteinizing hormone，lh)和卵泡刺激素(follicle-stimulating hormone，fsh)的分泌和释放，调节卵巢和黄体的正常发育，在下丘脑-垂体-性腺轴发挥重要作用。gnrh受体通过与能够激活磷脂酰肌醇钙第二信使体系的g蛋白偶联发挥其调节作用，而lh则调节性类固醇的产生，fsh调节男性精子发生及女性卵泡的发育。
4.lh和fsh被释放到循环中，并与卵巢或睾丸的特异性细胞上受体相结合，刺激类固醇的生成。性类固醇存在的情况下，疾病例如子宫内膜异位症、子宫肌瘤和前列腺癌等病情加重，需给予长效肽类的gnrh受体激动剂和拮抗剂进行治疗控制。
5.肽类gnrh受体拮抗剂包括西曲瑞克、加尼瑞克等，主要通过快速竞争性结合gnrh受体来阻断gnrh与其受体结合，阻断二聚体复合物的形成和信号的传递，从而抑制lh及fsh的释放。然而肽类化合物存在许多待解决的包括口服吸收性、剂型、剂量体积、药物稳定性、持续作用及代谢稳定性等问题。而小分子gnrh受体拮抗剂治疗优于现存的肽类治疗法的主要原因在于小分子gnrh受体拮抗剂可以直接进行口服给药，方便快捷。研究证明小分子拮抗剂对子宫内膜异位症、性早熟、前列腺癌等激素依赖性疾病具有显著的疗效。
6.鉴于肽类gnrh受体拮抗剂的局限性，一些非肽类的gnrh受体拮抗剂已被提出并进入开发、临床试验及上市阶段，例如abbvie公司开发的elagolix已获批用于子宫内膜异位症的治疗，同时子宫肌瘤适应症已申报上市；takada公司开发的relugolix已获批用于子宫肌瘤的治疗，并且针对子宫内膜异位症和前列腺癌的适应症都已进入三期临床阶段；obseva公司和kissei公司合作开发的linzagolix针对子宫内膜异位症和子宫肌瘤两个适应症，都处于三期临床试验阶段。
7.尽管大量有意义的研究已在该领域进行，目前仍需要继续研究开发更加有效的小分子gnrh受体拮抗剂，本发明提供了一种新型结构的化合物作为gnrh受体拮抗剂，并发现具有此类结构的化合物具有良好的活性，能够有效治疗内分泌生殖系统疾病。


技术实现要素：

8.本发明提供了一种式(i)所示的化合物、其消旋体、立体异构体、互变异构体、同位素标记物、溶剂化物、多晶型物、药学上可接受的盐或其前药化合物：
[0009][0010]
其中：
[0011]
x1为n或cr1；
[0012]
x2为n或cr2；
[0013]
l选自键、氨基、c
2-6
亚烯基、c
2-6
亚炔基、-(ch2)
n-或-nh-co-；
[0014]
y选自键、c
1-6
亚烷基、c
2-6
亚烯基、c
2-6
亚炔基、c
1-6
亚烷氧基、c
1-6
亚烷硫基、c
1-6
亚卤代烷基、c
1-6
亚卤代烷氧基、c
3-12
亚环烷基、3-12元亚杂环基、c
6-14
亚芳基或5-14元亚杂芳基，所述的c
1-6
亚烷基、c
2-6
亚烯基、c
2-6
亚炔基、c
1-6
亚烷氧基、c
1-6
亚烷硫基、c
1-6
亚卤代烷基、c
1-6
亚卤代烷氧基、c
3-12
亚环烷基、3-12元亚杂环基、c
6-14
亚芳基和5-14元亚杂芳基，任选地进一步被氢、氘、卤素、氨基、羟基、硝基、氰基、巯基、c
1-6
烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
卤代烷氧基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基和5-14元杂芳基中的一个或多个取代基所取代；
[0015]
r1和r2各自独立的选自氢、氘、卤素、氨基、羟基、硝基、氰基、巯基、c
1-6
烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
卤代烷氧基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基或5-14元杂芳基，所述的氨基、c
1-6
烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
卤代烷氧基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基和5-14元杂芳基，任选地进一步被氢、氘、卤素、氨基、羟基、硝基、氰基、巯基、c
1-6
烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
卤代烷氧基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基和5-14元杂芳基中的一个或多个取代基所取代；
[0016]
r3选自氢、氘、卤素、氨基、羟基、硝基、氰基、巯基、c
1-6
烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
卤代烷氧基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基、5-14元杂芳基、-nrarb、-conrarb、-nracorb、-nracoorb、-nraconrbrc或-nraconrborc，所述的氨基、c
1-6
烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
卤代烷氧基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基和5-14元杂芳基，任选地进一步被氢、氘、卤素、氨基、羟
基、硝基、氰基、巯基、c
1-6
烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
卤代烷氧基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基和5-14元杂芳基中的一个或多个取代基所取代；
[0017]
r4选自氢、氘、卤素、氨基、羟基、硝基、氰基、巯基、c
1-6
烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
卤代烷氧基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基、5-14元杂芳基、-(ch2)nord、-co(ch2)nrd、-co(ch2)nord或-(ch2)ncord，所述的氨基、c
1-6
烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
卤代烷氧基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基和5-14元杂芳基，任选地进一步被氢、氘、卤素、氨基、羟基、硝基、氰基、巯基、c
1-6
烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
卤代烷氧基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基和5-14元杂芳基中的一个或多个取代基所取代；
[0018]
r5选自氢、氘、卤素、氨基、羟基、硝基、氰基、巯基、c
1-6
烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
卤代烷氧基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基、5-14元杂芳基、-(ch2)nore、-(ch2)nsre、-(ch2)nsore、-(ch2)nso2re、-(ch2)nnrerf、-(ch2)ncore、-(ch2)nconrerf或-(ch2)ncoore，所述的氨基、c
1-6
烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
卤代烷氧基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基和5-14元杂芳基，任选地进一步被氢、氘、卤素、氨基、羟基、硝基、氰基、巯基、c
1-6
烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
卤代烷氧基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基和5-14元杂芳基中的一个或多个取代基所取代；
[0019]
r6和r7各自独立的选自氢、氘、卤素、氨基、羟基、硝基、氰基、巯基、c
1-6
烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
卤代烷氧基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基或5-14元杂芳基，所述的氨基、c
1-6
烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
卤代烷氧基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基和5-14元杂芳基，任选地进一步被氢、氘、卤素、氨基、羟基、硝基、氰基、巯基、c
1-6
烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
卤代烷氧基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基和5-14元杂芳基中的一个或多个取代基所取代；
[0020]
ra～rf各自独立的选自氢、氘、卤素、氨基、羟基、硝基、氰基、巯基、c
1-6
烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
卤代烷氧基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基或5-14元杂芳基，所述的氨基、c
1-6
烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
卤代烷氧基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基和5-14元杂芳基，任选地进一步被氢、氘、卤素、氨基、羟基、硝基、氰基、巯基、c
1-6
烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
卤代烷氧基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基和5-14元杂芳基中的一个或多个取代基所取代；且
[0021]
n为0～12的整数。
[0022]
在本发明的一个优选实施方式中，所述l选自键、氨基或-nh-co-；
[0023]
在本发明的一个优选实施方式中，所述y选自键、c
1-6
亚烷基、c
2-6
亚炔基、c
6-10
亚芳基或5-10元亚杂芳基，所述的c
1-6
亚烷基、c
2-6
亚炔基、c
6-10
亚芳基和5-10元亚杂芳基，任选地进一步被氢、氘、卤素、氨基、羟基、硝基、氰基、巯基、c
1-6
烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
卤代烷氧基、c
3-8
环烷基、3-8元杂环基、c
6-10
芳基和5-10元杂芳基中的一个或多个取代基所取代；
[0024]
在本发明的一个优选实施方式中，所述r3选自氢、氘、卤素、氨基、羟基、硝基、氰基、巯基、c
1-6
烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
卤代烷氧基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基、5-14元杂芳基、-nh-c
1-6
烷基、-conh2、-conh-c
1-6
烷基、-nhco-c
1-6
烷基、-nhcoo-c
1-6
烷基、-nhconh-c
1-6
烷基或-nhconho-c
1-6
烷基。
[0025]
在本发明的一个优选实施方式中，所述的化合物、其立体异构体、互变异构体、同位素标记物、氮氧化物或药学上可接受盐进一步如通式(ii)所示，具体结构如下：
[0026][0027]
其中：
[0028]
x3为n或ch；
[0029]
x4为n或ch；
[0030]
x1、x2、r4、r5、r6、r7如以上所定义。
[0031]
在本发明的一个优选实施方式中，所述的化合物、其立体异构体、互变异构体、同位素标记物、氮氧化物或药学上可接受盐，进一步如通式(iii)所示，具体结构如下：
[0032]
[0033]
其中，x1、x2、r4、r5、r6如以上所定义。
[0034]
在本发明的一个优选实施方式中，所述x1为n或cr1；
[0035]
r1选自氢、氘、卤素、氨基、羟基、硝基、氰基、巯基、c
1-3
烷基、c
2-3
烯基、c
2-3
炔基、c
1-3
烷氧基、c
1-3
烷硫基、c
1-3
卤代烷基、c
1-3
卤代烷氧基、c
3-8
环烷基、3-8元杂环基、c
6-10
芳基或5-10元杂芳基。
[0036]
在本发明的一个优选实施方式中，所述x2为n或cr2；
[0037]
r2选自氢、氘、卤素、氨基、羟基、硝基、氰基、巯基、c
1-3
烷基、c
2-3
烯基、c
2-3
炔基、c
1-3
烷氧基、c
1-3
烷硫基、c
1-3
卤代烷基、c
1-3
卤代烷氧基、c
3-8
环烷基、3-8元杂环基、c
6-10
芳基或5-10元杂芳基。
[0038]
在本发明的一个优选实施方式中，所述r4选自氢、氘、卤素、氨基、羟基、硝基、氰基、巯基、c
1-3
烷基、c
2-3
烯基、c
2-3
炔基、c
1-3
烷氧基、c
1-3
烷硫基、c
1-3
卤代烷基、c
1-3
卤代烷氧基、c
3-8
环烷基、3-8元杂环基、c
6-10
芳基、5-10元杂芳基、-coc
1-3
烷基、-c
1-3
烷基cooc
1-3
烷基、-co-c
1-3
烷基c
1-3
烷氧基、-c
1-3
烷基c
1-3
烷氧基或-conhc
1-3
烷基；
[0039]
在本发明的一个优选实施方式中，所述r5选自氢、氘、卤素、氨基、羟基、硝基、氰基、巯基、c
1-3
烷基、c
2-3
烯基、c
2-3
炔基、c
1-3
烷氧基、c
1-3
烷硫基、c
1-3
卤代烷基、c
1-3
卤代烷氧基、c
3-8
环烷基、3-8元杂环基、c
6-10
芳基、5-10元杂芳基、-so2c
1-3
烷基、-coc
1-3
烷基、-coc
1-3
烷氧基、-n(c
1-3
烷基)2或-conh(c
1-3
烷基)；
[0040]
在本发明的一个优选实施方式中，所述x1为n或cr1；r1选自氟、氯、溴或甲氧基；
[0041]
在本发明的一个优选实施方式中，所述x2为n或cr2；r2选自氟、氯、溴或甲氧基；
[0042]
在本发明的一个优选实施方式中，所述r4选自-ch3、-ch(ch3)2、-coch3、-ch2cooch3、-co-ch2och3、-(ch2)2och3、-ch2ch3或-conh(ch3)；
[0043]
在本发明的一个优选实施方式中，所述r5选自-h、-och3、-sch3、-so2ch3、-coch3、-cooch3、-n(ch3)2或-conh(ch3)；
[0044]
在本发明的一个优选实施方式中，所述r6选自氟、氯、溴或三氟甲基。
[0045]
根据本发明的实施方案，式(i)化合物的结构如下所示：
[0046]
[0047]
[0048][0049]
另一方面，本发明还提供一种式(ii)所示化合物的制备方法，方案如下：
[0050][0051]
1)式(ii-6)化合物与式(ii-7)发生偶联反应得到式(ii-5)化合物；
[0052]
2)式(ii-5)化合物脱去保护基pg1得到式(ii-4)化合物；
[0053]
3)式(ii-4)化合物与包含r4的卤代烷基、醛或多聚醛发生反应得到式(ii-3)化合物；
[0054]
4)式(ii-3)化合物进一步脱去保护基pg2得到式(ii-2)化合物；
[0055]
5)式(ii-2)化合物与氯甲酸苯酯发生反应得到式(ii-1)化合物；
[0056]
6)式(ii-1)化合物与邻甲基羟胺或其盐酸盐发生反应得到式(ii)化合物；
[0057]
其中，
[0058]
x为卤素；优选氟、氯、溴或碘；
[0059]
pg1和pg2为氨基保护基，各自独立的选自叔丁氧羰基(boc)、苄氧羰基(cbz)、2-联苯基-2-丙氧羰基(bpoc)、邻苯二甲酰亚胺基、对甲苯磺酰基、三苯甲基、甲酰基或三氟乙酰基；
[0060]
条件是，pg1和pg2不同；
[0061]
r8选自硼酸或硼酸酯；
[0062]
r4～r7、x1～x4如式(ii)定义所述。
[0063]
本发明还提供一种药物组合物，其包含治疗有效量的式(i)所示的化合物、其消旋体、立体异构体、互变异构体、同位素标记物、溶剂化物、多晶型物、药学上可接受的盐或其前药化合物中的至少一种。
[0064]
根据本发明的实施方案，所述药物组合物还包括一种或多种药学上可接受的辅料。
[0065]
根据本发明的实施方案，所述药物组合物还可以进一步含有一种或多种额外的治疗剂。
[0066]
本发明还提供治疗与性腺激素有关的疾病的方法，包括给予患者预防或治疗有效量的式(i)所示的化合物、其消旋体、立体异构体、互变异构体、同位素标记物、溶剂化物、多晶型物、药学上可接受的盐或其前药化合物中的至少一种。
[0067]
本发明还提供治疗与性腺激素有关的疾病的方法，包括给予患者预防或治疗有效量的上述药物组合物。
[0068]
所述与性腺激素有关的疾病包括性激素依赖性癌症、性激素依赖性癌症的骨质转移、前列腺肥大、子宫肌瘤、子宫内膜异位症、子宫纤维瘤、性早熟、闭经、月经前期综合症、痛经、多房性卵巢综合症、多囊性卵巢综合症、痤疮、脱毛症、阿尔茨海默病、不育症、过敏性肠综合症、不依赖于激素且lh-rh敏感的良性或恶性肿瘤或潮红；所述的性激素依赖性癌症选自前列腺癌、子宫瘤、乳腺癌、垂体癌。
[0069]
在一些实施方案中，所述患者包括哺乳动物，优选是人。
[0070]
本发明还提供用于预防或治疗与性腺激素有关的疾病的式(i)所示的化合物、其消旋体、立体异构体、互变异构体、同位素标记物、溶剂化物、多晶型物、药学上可接受的盐或其前药化合物中的至少一种，或其药物组合物。
[0071]
本发明还提供式(i)所示的化合物、其消旋体、立体异构体、互变异构体、同位素标记物、溶剂化物、多晶型物、药学上可接受的盐或其前药化合物中的至少一种在制备药物中的用途。
[0072]
根据本发明的实施方案，所述用途可以为在制备预防或治疗性腺激素相关的疾病的药物中的用途，如在制备gnrh受体拮抗剂的药物中的用途。
[0073]
根据本发明的实施方案，所述用途可以为在制备治疗或预防性激素依赖性癌症、性激素依赖性癌症的骨质转移、前列腺肥大、子宫肌瘤、子宫内膜异位症、子宫纤维瘤、性早熟、闭经、月经前期综合症、痛经、多房性卵巢综合症、多囊性卵巢综合症、痤疮、脱毛症、阿尔茨海默病、不育症、过敏性肠综合症、不依赖于激素且lh-rh敏感的良性或恶性肿瘤或潮红的疾病的药物中的用途；如作为制备生殖调节物、避孕药、排卵诱发物中的用途；或作为制备预防性激素依赖性癌症的手术后复发的药物中的用途，其中所述性激素依赖性癌症选
自前列腺癌、子宫瘤、乳腺癌、垂体癌。
[0074]
所述药物可以用于与性腺激素有关的疾病。
[0075]
活性化合物的有效剂量的范围可很大，通常按药用有效量给药。但是，可以理解实际给予的化合物的量通常由医师根据相关情况决定，它们包括所治疗的病症、所选择的给药途径、所给予的实际化合物；患者个体的年龄、重量和反应；患者症状的严重程度等。
[0076]
给予患者的化合物或组合物的量不固定，取决于给予的药物、给药的目的例如预防或治疗；患者的状态、给药的方式等。在治疗应用时，可给予已患疾病的患者足够治愈或至少部分抑制疾病及其并发症症状的量的组合物。有效剂量应取决于所治疗的疾病状态和主治临床医师的判断，该判断取决于例如疾病的严重程度、患者的年龄、体重和一般状况等因素。
[0077]
给予患者的组合物可以是上述药用组合物形式。可通过常规灭菌技术或可过滤灭菌，将这些组合物灭菌。
[0078]
本发明化合物的治疗剂量可根据例如以下而定：治疗的具体用途、给予化合物的方式、患者的健康和状态，以及签处方医师的判断。本发明化合物在药用组合物中的比例或浓度可不固定，取决于多种因素，它们包括剂量、化学特性(例如疏水性)和给药途径。例如可通过含约0.1～10％w/v该化合物的生理缓冲水溶液提供本发明化合物，用于肠胃外给药。某些典型剂量范围为约1μg/kg～约1g/kg体重/日。在某些实施方案中，剂量范围为约0.01mg/kg～约100mg/kg体重/日。剂量很可能取决于此类变量，如疾病或病症的种类和发展程度、具体患者的一般健康状态、所选择的化合物的相对生物学效力、赋形剂制剂及其给药途径。可通过由体外或动物模型试验系统导出的剂量-反应曲线外推，得到有效剂量。
[0079]
有益效果
[0080]
本发明提供的化合物具有良好的gnrh受体拮抗作用，可用于治疗或预防与性腺激素有关的病症和疾病，以及制备用于此类病征和疾病的药物。并且，所述化合物的灌胃时吸收较好。
[0081]
术语定义与说明
[0082]
除非另有说明，本技术说明书和权利要求书中记载的基团和术语定义，包括其作为实例的定义、示例性的定义、优选的定义、表格中记载的定义、实施例中具体化合物的定义等，可以彼此之间任意组合和结合。这样的组合和结合后的基团定义及化合物结构，应当被理解为本技术说明书和/或权利要求书记载的范围内。
[0083]
除非另有说明，本说明书和权利要求书记载的数值范围相当于至少记载了其中每一个具体的整数数值。例如，数值范围“1-40”相当于记载了数值范围“1-10”中的每一个整数数值即1、2、3、4、5、6、7、8、9、10，以及数值范围“11-40”中的每一个整数数值即11、12、13、14、15、......、35、36、37、38、39、40。此外，当某些数值范围被定义为“数”时，应当理解为记载了该范围的两个端点、该范围内的每一个整数以及该范围内的每一个小数。例如，“0～10的数”应当理解为不仅记载了0、1、2、3、4、5、6、7、8、9和10的每一个整数，还至少记载了其中每一个整数分别与0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9的和。
[0084]
例如，n为0～12的整数，相当于n可以选自0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12中的每个整数，优选n为0～6的整数，更优选n为0～3的整数。
[0085]
应当理解，本文在描述1、2个或更多个中，“更多个”应当是指大于2，例如大于等于
甲基戊-3-炔基、4-甲基戊-2-炔基、1-甲基戊-2-炔基、4-甲基戊-1-炔基、3-甲基戊-1-炔基、2-乙基丁-3-炔基、1-乙基丁-3-炔基、1-乙基丁-2-炔基、1-丙基丙-2-炔基、1-异丙基丙-2-炔基、2,2-二甲基丁-3-炔基、1,1-二甲基丁-3-炔基、1,1-二甲基丁-2-炔基或3,3-二甲基丁-1-炔基。特别地，所述炔基是乙炔基、丙-1-炔基或丙-2-炔基。
[0092]
术语“c
3-40
环烷基”应理解为表示饱和的一价单环、二环(如稠环、桥环、螺环)烃环或三环烷烃，其具有3～40个碳原子，优选“c
3-10
环烷基”，更优选“c
3-8
环烷基”。术语“c
3-10
环烷基”应理解为表示饱和的一价单环、双环(如桥环、螺环)烃环或三环烷烃，其具有3、4、5、6、7、8、9或10个碳原子。所述c
3-10
环烷基可以是单环烃基，如环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基、环壬基或环癸基，或者是双环烃基如龙脑基、吲哚基、六氢吲哚基、四氢萘基、十氢萘基、二环[2.1.1]己基、二环[2.2.1]庚基、二环[2.2.1]庚烯基、6,6-二甲基二环[3.1.1]庚基、2,6,6-三甲基二环[3.1.1]庚基、二环[2.2.2]辛基、2,7-二氮杂螺[3,5]壬烷基、2,6-二氮杂螺[3,4]辛烷基，或者是三环烃基如金刚烷基。
[0093]
除非另有定义，术语“3-20元杂环基”是指饱和的或不饱和的非芳族的环或环系，例如，其是4-、5-、6-或7-元的单环、7-、8-、9-、10-、11-或12-元的二环(如稠环、桥环、螺环)或者10-、11-、12-、13-、14-或15-元的三环环系，并且含有至少一个，例如1、2、3、4、5个或更多个选自o、s和n的杂原子，其中n和s还可以任选被氧化成各种氧化状态，以形成氮氧化物、-s(o)-或-s(o)
2-的状态。优选地，所述杂环基可以选自“3-10元杂环基”。术语“3-10元杂环基”意指饱和的或不饱和的非芳族的环或环系，并且含有至少一个选自o、s和n的杂原子。所述杂环基可以通过所述碳原子中的任一个或氮原子(如果存在的话)与分子的其余部分连接。所述杂环基可以包括稠合的或桥连的环以及螺环的环。特别地，所述杂环基可以包括但不限于：4元环，如氮杂环丁烷基、氧杂环丁烷基；5元环，如四氢呋喃基、二氧杂环戊烯基、吡咯烷基、咪唑烷基、吡唑烷基、吡咯啉基；或6元环，如四氢吡喃基、哌啶基、吗啉基、二噻烷基、硫代吗啉基、哌嗪基或三噻烷基；或7元环，如二氮杂环庚烷基。任选地，所述杂环基可以是苯并稠合的。所述杂环基可以是双环的，例如但不限于5,5元环，如六氢环戊并[c]吡咯-2(1h)-基环，或者5,6元双环，如六氢吡咯并[1,2-a]吡嗪-2(1h)-基环。杂环基可以是部分不饱和的，即它可以包含一个或多个双键，例如但不限于二氢呋喃基、二氢吡喃基、2,5-二氢-1h-吡咯基、4h-[1,3,4]噻二嗪基、4,5-二氢噁唑基或4h-[1,4]噻嗪基，或者，它可以是苯并稠合的，例如但不限于二氢异喹啉基。所述3-20元杂环基与其它基团相连构成本发明的化合物时，可以为3-20元杂环基上的碳原子与其它基团相连，也可以为3-20元杂环基环上杂环原子与其它基团相连。例如当3-20元杂环基选自哌嗪基时，可以为哌嗪基上的氮原子与其它基团相连。或当3-20元杂环基选自哌啶基时，可以为哌啶基环上的氮原子和其对位上的碳原子与其它基团相连。
[0094]
术语“c
6-20
芳基”应理解为优选表示具有6～20个碳原子的一价芳香性或部分芳香性的单环、二环(如稠环、桥环、螺环)或三环烃环，其可以是单芳族环或稠合在一起的多芳族环，优选“c
6-14
芳基”。术语“c
6-14
芳基”应理解为优选表示具有6、7、8、9、10、11、12、13或14个碳原子的一价芳香性或部分芳香性的单环、双环或三环烃环(“c
6-14
芳基”)，特别是具有6个碳原子的环(“c6芳基”)，例如苯基；或联苯基，或者是具有9个碳原子的环(“c9芳基”)，例如茚满基或茚基，或者是具有10个碳原子的环(“c
10
芳基”)，例如四氢化萘基、二氢萘基或萘基，或者是具有13个碳原子的环(“c
13
芳基”)，例如芴基，或者是具有14个碳原子的环(“c
14
芳基”)，例如蒽基。当所述c
6-20
芳基被取代时，其可以为单取代或者多取代。并且，对其取代位点没有限制，例如可以为邻位、对位或间位取代。
[0095]
术语“5-20元杂芳基”应理解为包括这样的一价单环、二环(如稠环、桥环、螺环)或三环芳族环系：其具有5～20个环原子且包含1-5个独立选自n、o和s的杂原子，例如“5-14元杂芳基”。术语“5-14元杂芳基”应理解为包括这样的一价单环、双环或三环芳族环系：其具有5、6、7、8、9、10、11、12、13或14个环原子，特别是5或6或9或10个碳原子，且其包含1-5个，优选1-3各独立选自n、o和s的杂原子并且，另外在每一种情况下可为苯并稠合的。“杂芳基”还指其中杂芳族环与一个或多个芳基、脂环族或杂环基环稠合的基团，其中所述连接的根基或点在杂芳族环上。非限制性实例包括1-、2-、3-、5-、6-、7-或8-吲嗪基、1-、3-、4-、5-、6-或7-异吲哚基、2-、3-、4-、5-、6-或7-吲哚基、2-、3-、4-、5-、6-或7-吲唑基、2-、4-、5-、6-、7-或8-嘌呤基、1-、2-、3-、4-、6-、7-、8-或9-喹嗪基、2-、3-、4-、5-、6-、7-或8-喹啉基、1-、3-、4-、5-、6-、7-或8-异喹啉基、1-、4-、5-、6-、7-或8-酞嗪基(phthalazinyl)、2-、3-、4-、5-或6-萘啶基、2-、3-、5-、6-、7-或8-喹唑啉基、3-、4-、5-、6-、7-或8-噌啉基、2-、4-、6-或7-蝶啶基、1-、2-、3-、4-、5-、6-、7-或8-4ah咔唑基、1-、2-、3-、4-、5-、6-、7-或8-咔唑基咔唑基、1-、3-、4-、5-、6-、7-、8-或9-咔啉基、1-、2-、3-、4-、6-、7-、8-、9-或10-菲啶基、1-、2-、3-、4-、5-、6-、7-、8-或9-吖啶基、1-、2-、4-、5-、6-、7-、8-或9-啶基、2-、3-、4-、5-、6-、8-、9-或10-菲咯啉基、1-、2-、3-、4-、6-、7-、8-或9-吩嗪基、1-、2-、3-、4-、6-、7-、8-、9-或10-吩噻嗪基、1-、2-、3-、4-、6-、7-、8-、9-或10-吩嗪基、2-、3-、4-、5-、6-或1-、3-、4-、5-、6-、7-、8-、9-或10-苯并异喹啉基、2-、3-、4-或噻吩并[2,3-b]呋喃基、2-、3-、5-、6-、7-、8-、9-、10-或11-7h-吡嗪并[2,3-c]咔唑基、2-、3-、5-、6-或7-2h-呋喃并[3,2-b]-吡喃基、2-、3-、4-、5-、7-或8-5h-吡啶并[2,3-d]-邻-嗪基、1-、3-或5-1h-吡唑并[4,3-d]-唑基、2-、4-或54h-咪唑并[4,5-d]噻唑基、3-、5-或8-吡嗪并[2,3-d]哒嗪基、2-、3-、5-或6-咪唑并[2,1-b]噻唑基、1-、3-、6-、7-、8-或9-呋喃并[3,4-c]噌啉基、1-、2-、3-、4-、5-、6-、8-、9-、10或11-4h-吡啶并[2,3-c]咔唑基、2-、3-、6-或7-咪唑并[1,2-b][1,2,4]三嗪基、7-苯并[b]噻吩基、2-、4-、5-、6-或7-苯并唑基、2-、4-、5-、6-或7-苯并咪唑基、2-、4-、4-、5-、6-或7-苯并噻唑基、1-、2-、4-、5-、6-、7-、8-或9-苯并氧杂基(benzoxapinyl)、2-、4-、5-、6-、7-或8-苯并嗪基、1-、2-、3-、5-、6-、7-、8-、9-、10-或11-1h-吡咯并[1,2-b][2]苯并氮杂基(benzazapinyl)。典型的稠合杂芳基包括但不限于2-、3-、4-、5-、6-、7-或8-喹啉基、1-、3-、4-、5-、6-、7-或8-异喹啉基、2-、3-、4-、5-、6-或7-吲哚基、2-、3-、4-、5-、6-或7-苯并[b]噻吩基、2-、4-、5-、6-或7-苯并唑基、2-、4-、5-、6-或7-苯并咪唑基和2-、4-、5-、6-或7-苯并噻唑基。优选地，杂芳基选自噻吩基、呋喃基、吡咯基、噁唑基、噻唑基、咪唑基、吡唑基、异噁唑基、异噻唑基、噁二唑基、三唑基、噻二唑基、噻-4h-吡唑基等以及它们的苯并衍生物，例如苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并噁唑基、苯并异噁唑基、苯并咪唑基、苯并三唑基、吲唑基、吲哚基、异吲哚基等；或吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、三嗪基等，以及它们的苯并衍生物，例如喹啉基、喹唑啉基、异喹啉基等；或吖辛因基、吲嗪基、嘌呤基等以及它们的苯并衍生物；或噌啉基、酞嗪基、喹唑啉基、喹喔啉基、萘啶基、蝶啶基、咔唑基、吖啶基、吩嗪基、吩噻嗪基、吩噁嗪基等。当所述5-20元杂芳基与其它基团相连构成本发明的化合物时，可以为5-20元杂芳基环上的碳原子与其它基团相连，也可以为5-20元杂芳基环上的杂原子与其它基团相连。当所述5-20元杂芳基被取代时，其可以为单取代或者多取代。并且，对其取代位点没有限制，例如可以为
杂芳基环上与碳原子相连的氢被取代，或者杂芳基环上与杂原子相连的氢被取代。
[0096]
术语“螺环”是指两个环共用1个成环原子的环系。术语“稠环”是指两个环共用2个成环原子的环系。术语“桥环”是指两个环共用3个以上成环原子的环系。术语“亚”是指含有两个孤对电子的基团，可以作为中间连接基团连接两端，例如：亚烷基、亚烯基、亚炔基、亚烷氧基、亚烷硫基、亚卤代烷基、亚卤代烷氧基、亚环烷基、亚杂环基、亚芳基和亚杂芳基等。
[0097]“thf”指四氢呋喃。“etoac”指乙酸乙酯。“meoh”指甲醇。“dmf”指n,n-二甲基甲酰胺。“dipea”指二异丙基乙胺。“tfa”指三氟乙酸。“mecn”指乙腈。“dma”指n,n-二甲基乙酰胺。“et2o”指乙醚。“dce”指1,2二氯乙烷。“dipea”指n,n-二异丙基乙胺。“nbs”指n-溴代琥珀酰亚胺。“nis”指n-碘代丁二酰亚胺。“cbz-cl”指氯甲酸苄酯。“pd2(dba)
3”指三(二亚苄基丙酮)二钯。“dppf”指1,1
’‑
双二苯基膦二茂铁。“hatu”指2-(7-氧化苯并三氮唑)-n,n,n’,n
’‑
四甲基脲六氟磷酸酯。“khmds”指六甲基二硅基胺基钾。“lihmds”指双三甲基硅基胺基锂。“meli”指甲基锂。“n-buli”指正丁基锂。“nabh(oac)
3”指三乙酰氧基硼氢化钠。
[0098]
除非另有说明，杂环基、杂芳基或亚杂芳基包括其所有可能的异构形式，例如其位置异构体。因此，对于一些说明性的非限制性实例，可以包括在其1-、2-、3-、4-、5-、6-、7-、8-、9-、10-、11-、12-位等(如果存在)中的1、2个或更多个位置上取代或与其他基团键合的形式，包括吡啶-2-基、亚吡啶-2-基、吡啶-3-基、亚吡啶-3-基、吡啶-4-基和亚吡啶-4-基；噻吩基或亚噻吩基包括噻吩-2-基、亚噻吩-2-基、噻吩-3-基和亚噻吩-3-基；吡唑-1-基、吡唑-3-基、吡唑-4-基、吡唑-5-基。术语“氧代”是指取代基中的碳原子、氮原子或硫原子被氧化后形成的氧基取代(＝o)。除非另有说明，本文中术语的定义同样适用于包含该术语的基团，例如c
1-6
烷基的定义也适用于c
1-6
烷基氧基、c
3-8
环烷基-c
1-6
烷基-等。
[0099]
本领域技术人员可以理解，式(i)所示化合物可以以各种药学上可接受的盐的形式存在。如果这些化合物具有碱性中心，则其可以形成酸加成盐；如果这些化合物具有酸性中心，则其可以形成碱加成盐；如果这些化合物既包含酸性中心(例如羧基)又包含碱性中心(例如氨基)，则其还可以形成内盐。
[0100]
本发明的化合物可以溶剂合物(如水合物)的形式存在，其中本发明的化合物包含作为所述化合物晶格的结构要素的极性溶剂，特别是例如水、甲醇或乙醇。极性溶剂特别是水的量可以化学计量比或非化学计量比存在。
[0101]
根据其分子结构，本发明的化合物可以是手性的，因此可能存在各种对映异构体形式。因而这些化合物可以以消旋体形式或光学活性形式存在。本发明的化合物涵盖了各手性碳为r或s构型的异构体或其混合物、消旋体。本发明的化合物或其中间体可以通过本领域技术人员公知的化学或物理方法分离为对映异构体化合物，或者以此形式用于合成。在外消旋的胺的情况中，通过与光学活性的拆分试剂反应，从混合物制得非对映异构体。适当的拆分试剂的示例是光学活性的酸，例如r和s形式的酒石酸、二乙酰酒石酸、二苯甲酰酒石酸、扁桃酸、苹果酸、乳酸、适当的n-保护的氨基酸(例如n-苯甲酰脯氨酸或n-苯磺酰基脯氨酸)或各种光学活性的樟脑磺酸。借助光学活性的拆分试剂(例如固定在硅胶上的二硝基苯甲酰基苯基甘氨酸、三乙酸纤维素或其它碳水化合物的衍生物或手性衍生化的异丁烯酸酯聚合物)，也可有利地进行色谱对映体拆分。用于此目的的适当的洗脱剂是含水或含醇的溶剂混合物，例如，己烷/异丙醇/乙腈。
[0102]
可以根据已知的方法，例如通过萃取、过滤或柱层析来分离相应的稳定异构体。
[0103]
术语“患者”是指包括哺乳动物在内的任何动物，优选小鼠、大鼠、其它啮齿类动物、兔、狗、猫、猪、牛、羊、马或灵长类动物，最优选人。
[0104]
术语“治疗有效量”是指研究人员、兽医、医师或其它临床医师正在组织、系统、动物、个体或人中寻找的引起生物学或医学反应的活性化合物或药物的量，它包括以下一项或多项：(1)预防疾病：例如在易感染疾病、紊乱或病症但尚未经历或出现疾病病理或症状的个体中预防疾病、紊乱或病症。(2)抑制疾病：例如在正经历或出现疾病、紊乱或病症的病理或症状的个体中抑制疾病、紊乱或病症(即阻止病理和/或症状的进一步发展)。(3)缓解疾病：例如在正经历或出现疾病、紊乱或病症的病理或症状的个体中缓解疾病、紊乱或病症(即逆转病理和/或症状)。
具体实施方式
[0105]
下文将结合具体实施例对本发明的技术方案做更进一步的详细说明。应当理解，下列实施例仅为示例性地说明和解释本发明，而不应被解释为对本发明保护范围的限制。凡基于本发明上述内容所实现的技术均涵盖在本发明旨在保护的范围内。
[0106]
除非另有说明，以下实施例中使用的原料和试剂均为市售商品，或者可以通过已知方法制备。
[0107]
本发明的化合物结构是通过核磁共振(nmr)或/和液质联用色谱(lc-ms)来确定的。nmr化学位移(δ)以百万分之一(ppm)的单位给出。nmr的测定是用bruker avance-400核磁仪，测定溶剂为氘代二甲基亚砜(dmso-d6)，氘代甲醇(cd3od)和氘代氯仿(cdcl3)，内标为四甲基硅烷(tms)。
[0108]
液质联用色谱lc-ms的测定用agilent 1200infinity series质谱仪。hplc的测定使用安捷伦1200dad高压液相色谱仪(sunfire c18 150
×
4.6mm色谱柱)和waters 2695-2996高压液相色谱仪(gimini c18 150
×
4.6mm色谱柱)。
[0109]
薄层层析硅胶板使用烟台黄海hsgf254或青岛gf254硅胶板，tlc采用的规格是0.15mm～0.20mm，薄层层析分离纯化产品采用的规格是0.4mm～0.5mm。柱层析使用烟台黄海硅胶200～300目硅胶为载体。
[0110]
在无特殊说明的情况下，本发明的所有反应均在连续的磁力搅拌下，在干燥氮气或氩气气氛下进行，溶剂为经干燥的溶剂，反应温度单位为摄氏度。
[0111]
实施例1
[0112]
1-(2,6-二氟苄基)-5-{(二甲氨基)甲基)-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-6-(2-(甲胺基)-1h-苯并[d]咪唑-5-基}噻吩并[2,3-d]嘧啶-2,4(1h,3h)-二酮
[0113][0114]
第一步
[0115]
5-溴-1,3-二氢-1,3-苯并二唑-2-酮的制备
[0116]
将1,1'-羰基二咪唑(17.4g，0.107mmol)加入dmf(500ml)中的4-溴苯-1,2-二胺(10g，0.0535mmol)溶液中。反应混合物在25℃搅拌16h。反应液用水洗涤并在真空下干燥，得到5-溴-1,3-二氢-1,3-苯并二唑-2-酮(9g，灰白色固体)，产率:71％。
[0117]
ms m/z(esi):213.0[m+1]
+
.
[0118]
第二步
[0119]
5-溴-2-氯-1h-1,3-苯并二唑的制备
[0120]
将5-溴-1,3-二氢-1,3-苯并二唑-2-酮(9g，61.2mmol)溶于三氯氧磷(120ml)中，并在100℃下搅拌3小时。反应完成后，用水(100ml)缓慢稀释所得混合物，并在0℃下用naoh(120ml，1m)将混合液的ph值调至7。然后使用乙酸乙酯(3x10ml)萃取所得混合物，得到的有机层用无水硫酸钠干燥，并在减压下浓缩。得到5-溴-2-氯-1h-1,3-苯并二唑(4.0g，白色固体)，收率：45％。
[0121]
ms m/z(esi):231.0[m+1]
+
.
[0122]
第三步
[0123]
5-溴-n-甲基-1h-1,3-苯并二唑-2-胺的制备
[0124]
在室温下将5-溴-2-氯-1h-1,3-苯并二唑(4g，17.28mmol)溶于nmp(100ml)中，再在溶液中加入三乙胺(8.74g，86.4mmol)和盐酸羟胺(6.3g，69.12mmol)。在氮气保护下，将所得混合物在120℃下搅拌16h。反应结束后用水(100ml)洗涤反应液，然后用乙酸乙酯(3x50ml)萃取所得混合物。所得的有机相用无水硫酸钠干燥，再在减压下浓缩。粗产品用硅胶柱(二氯甲烷/甲醇＝10/1)进一步纯化，得到5-溴-n-甲基-1h-1,3-苯并二唑-2-胺(2.5g，棕色固体)，收率：60％。
[0125]
ms m/z(esi):226.1[m+1]
+
.
[0126]
第四步
[0127]
5-溴代-2-[(叔丁氧羰基)(甲基)氨基]-1h苯并[d]咪唑-1-甲酸叔丁酯的制备
[0128]
向5-溴-n-甲基-1h-1,3-苯并二唑-2-胺(2.5g，11.1mmol)存于四氢呋喃(50ml)中的溶液中添加二碳酸二叔丁酯(11.69g，55.4mmol)、三乙胺(5.6g，55.4mmol)和4-二甲氨基
吡啶(0.1g，1.1mmol)。将混合溶液在70℃下搅拌16h。反应结束后，反应液用乙酸乙酯(3x50ml)萃取，得到的有机相用无水硫酸钠干燥，并在减压下浓缩。粗产品用硅胶柱(二氯甲烷/甲醇＝20/1)纯化，得到5-溴代-2-[(叔丁氧羰基)(甲基)氨基]-1h苯并[d]咪唑-1-甲酸叔丁酯(1.3g，白色固体)，收率：30％。
[0129]
ms m/z(esi):426.1[m+1]
+
.
[0130]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ7.94
–
7.56(m,2h),7.45(s,1h),3.34(s,3h),1.68(s,9h),1.49
–
1.20(m,9h).
[0131]
第五步
[0132]
2-[(叔丁氧羰基)(甲基)氨基]-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂戊烷-2-基)-1h-苯并[d]咪唑-1-甲酸叔丁酯的制备
[0133]
将5-溴代-2-[(叔丁氧羰基)(甲基)氨基]-1h苯并[d]咪唑-1-甲酸叔丁酯(1.3g，3.0mmol)溶于二氧六环(15ml)中，在溶液中分别加入联硼酸频那醇酯(3.07g，12.2mmol)、乙酸钾(446.4mg，4.5mmol)、三环己基膦(221.4mg.0.3mmol)和三二亚苄基丙酮二钯(996.8mg，0.3mmol)。在氮气氛围下，混合液在80℃下搅拌15h。反应结束后，用乙酸乙酯(3x30ml)萃取所得混合物，得到的有机层用无水硫酸钠干燥并在减压下浓缩。用硅胶柱(二氯甲烷/甲醇＝5/1)进一步纯化残余物，得到2-[(叔丁氧羰基)(甲基)氨基]-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂戊烷-2-基)-1h-苯并[d]咪唑-1-甲酸叔丁酯(650mg，棕黄色油状)，收率：35％。
[0134]
ms m/z(esi):473.2[m+1]
+
.
[0135]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ8.40(s,1h),7.77(d,j＝7.8hz,1h),7.66(d,j＝8.0hz,1h),3.36(s,3h),1.70(s,9h),1.64(s,9h),1.36(s,12h).
[0136]
第六步
[0137]
2-[(叔丁氧羰基)(甲基)氨基]-5-[1-(2,6-二氟苄基)-5-(二甲氨基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧基-1,2,3,4-四氢噻吩[2,3-d]嘧啶-6-基-1h苯并[d]咪唑-1-甲酸叔丁酯的制备
[0138]
将2-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-1h-苯并[d]咪唑-1-甲酸叔丁酯(170mg，0.4mmol)溶于乙醇/甲苯/水＝2:7:1(5ml)的溶液中，随后分别加入6-溴-1-(2,6-二氟苄基)-5-((二甲基氨基)甲基)-3-(6-甲氧基吡啶并-3-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2,4(1h，3h)-二酮(650mg，1.36mmol)，三二亚苄基丙酮二钯(91.8mg，0.1mmol)，二环己基(2'，6'-二异丙氧基联苯)和碳酸钾(139.4mg，1.0mmol)。氮气保护下，混合液在80℃下于微波中反应30分钟。反应结束后将反应溶液用乙酸乙酯(3
×
30ml)萃取，得到的有机层用无水硫酸钠干燥并在减压下浓缩。将残余物通过反相柱进一步纯化，得到2-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)-5-(1-(2,6-二氟苄基)-5-((二甲基氨基)甲基)-3-(6-甲氧基吡啶并-3-基)-2,4-二氧-1,2,3,4-四氢噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基-1h-苯并[d]咪唑-1-甲酸叔丁酯(80mg，白色固体)，收率：25％。
[0139]
ms m/z(esi):805.2[m+1]
+
.
[0140]
第七步
[0141]
1-[((2,6-二氟苯基)甲基]-5-[(二甲基氨基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-6-[2-(甲基氨基)-1h-1,3-苯并二唑-5-基]噻吩并[2,3-d]嘧啶-2,4-二酮的制备将2-((叔丁
氧羰基)(甲基)氨基)-5-(1-(2,6-二氟苄基)-5-(二甲氨基)甲基)-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧基-1,2,3,4-四氢噻吩[2,3-d]嘧啶-6-基)-1h苯并[d]咪唑-1-甲酸叔丁酯(80mg，0.1mmol)溶于三氟乙酸/二氯甲烷＝1:5(5ml)中，溶液在25℃中搅拌2h。反应结束后，在混合液中加入2ml dmf，并减压浓缩。通过反相色谱法(20％乙腈/水)纯化残余物，得到1-(2,6-二氟苄基)-5-{(二甲氨基)甲基)-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-6-(2-(甲胺基)-1h-苯并[d]咪唑-5-基}噻吩并[2,3-d]嘧啶-2,4(1h,3h)-二酮(5mg，黄色固体)，收率：8％。
[0142]
ms m/z(esi):605.1[m+1]
+
.
[0143]
hplc:92.84％(214nm),95.38％(254nm).
[0144]1h nmr(400mhz,meod)δ8.48
–
8.40(m,1h),7.70(d,j＝9.3hz,1h),7.51
–
7.40(m,2h),7.34(d,j＝8.1hz,1h),7.28(s,1h),7.11
–
7.01(m,2h),5.44(m,j＝10.8hz,2h),4.47(s,2h),4.18(s,2h),3.02(s,2h),2.70(s,6h).
[0145]
实施例2
[0146]
1-(3-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]5-(二甲胺基)甲基][3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)2,4-二羰基噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基}丙基-2-炔-1-基)3-甲氧基脲
[0147][0148]
第一步
[0149]
n-{[6-(3-{(叔丁基羰基)氨基}丙基-1-炔-1-基)1-[(2,6-二氟苯基)甲基]3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)2,4-二羰基噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基]甲基}-n-氨基甲酸苄酯的制备
[0150]
氮气气氛下，将n-{[6
–
溴-1-[(2,6-二氟苯基)甲基]3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)2,4-二羰基噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基]甲基}-n-氨基甲酸苄酯(500mg,0.76mmol)溶于三乙胺(5ml)中，加入n-(丙基-2-炔-1-基)氨基甲酸叔丁酯(354mg,2.28mmol)，双(三苯基膦)二氯化钯(ii)(107mg,0.16mmol)和碘化亚铜(i)(29mg,0.16mmol)。反应液在100℃搅拌12小时。将反应液浓缩得到的残留物用硅胶柱(石油醚/乙酸乙酯＝3/2)纯化得到标题产物n-{[6-(3-{(叔丁基羰基)氨基}丙基-1-炔-1-基)-1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二羰基噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基]甲基}-n-氨基甲酸苄酯(400mg,橙色固体)，收率：57％。
[0151]
ms m/z(esi):733.2[m+1]
+
.
[0152]
第二步
[0153]
n-{[6-(3-氨基丙基-1-炔-1-基)-1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二羰基噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基]甲基}-n-氨基甲酸苄酯的制备
[0154]
将n-{[6-(3-{(叔丁基羰基)氨基}丙基-1-炔-1-基)-1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二羰基噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基]甲基}-n-氨基甲酸苄酯(400mg,0.55mmol)溶于二氯甲烷(5ml)中，加入三氟乙酸(1255mg,11mmol)。反应液在25℃搅拌2小时。将反应液浓缩得到标题产物n-{[6-(3-氨基丙基-1-炔-1-基)-1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二羰基噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基]甲基}-n-氨基甲酸苄酯(300mg,橙色油状物)，收率：57％。
[0155]
ms m/z(esi):633.2[m+1]
+
.
[0156]
第三步
[0157]
n-({1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-6-{3-[(甲氧基氨基甲酰基)氨基]丙基-1-炔-1-基}-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二羰基噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基}甲基)-n-氨基甲酸苄酯的制备
[0158]
氮气气氛下，将n-{[6-(3-氨基丙基-1-炔-1-基)-1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二羰基噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基]甲基}-n-氨基甲酸苄酯(300mg,0.47mmol)溶于四氢呋喃(5ml)中，加入三乙胺(150mg,0.71mmol)和n-甲氧基氨基甲酸-4-硝基苯酯(10mg,0.05mmol)。反应液在25℃搅拌12小时。将反应液浓缩得到的残留液用硅胶柱(石油醚/乙酸乙酯＝1/9)纯化得到标题产物n-({1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-6-{3-[(甲氧基氨基甲酰基)氨基]丙基-1-炔-1-基}-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二羰基噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基}甲基)-n-氨基甲酸苄酯(105mg,黄色固体)，收率：30％。
[0159]
ms m/z(esi):706.2[m+1]
+
.
[0160]
第四步
[0161]
1-(3-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-5-[(甲胺基)甲基]-2,4-二羰基噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基}丙基-2-炔-1-基)-3-甲氧基脲的制备
[0162]
将n-({1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-6-{3-[(甲氧基氨基甲酰基)氨基]丙基-1-炔-1-基}-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二羰基噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基}甲基)-n-氨基甲酸苄酯(50mg,0.07mmol)溶于二氯甲烷(3ml)中，加入1m三氯化硼的二氯甲烷溶液(0.7ml,0.7mmol)。反应液在25℃搅拌2小时。反应液用甲醇淬灭，浓缩得到标题产物1-(3-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-5-[(甲胺基)甲基]-2,4-二羰基噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基}丙基-2-炔-1-基)-3-甲氧基脲(45mg,淡黄色油状物)，收率：90％。
[0163]
ms m/z(esi):572.2[m+1]
+
.
[0164]
第五步
[0165]
1-(3-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-(二甲胺基)甲基][3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二羰基噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基}丙基-2-炔-1-基)-3-甲氧基脲的制备
[0166]
将1-(3-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-5-[(甲胺基)甲基]-2,4-二羰基噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基}丙基-2-炔-1-基)-3-甲氧基脲(40mg,0.07mmol)溶于四氢呋喃(2ml)中，加入三乙胺(22mg,0.21mmol)和碘甲烷(15mg,
0.11mmol)。反应液在25℃搅拌2小时。将反应液浓缩得到的残留物用prep-hplc(乙腈/水(0.1％三氟乙酸))纯化得到标题产物1-(3-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-(二甲胺基)甲基][3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二羰基噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基}丙基-2-炔-1-基)-3-甲氧基脲(3.7mg,白色固体)，收率：8％。
[0167]
ms m/z(esi):586.2[m+1]
+
.
[0168]
hplc:100％(214nm),98.88％(254nm).
[0169]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ9.42(s,1h),7.53(dd,j＝10.8,5.2hz,2h),7.49-7.46(m,1h),7.18(t,j＝8.4hz,2h),7.08(dd,j＝9.6,2.4hz,1h),5.40(s,2h),5.19(s,2h),4.69(d,j＝12.8hz,3h),4.17(d,j＝5.6hz,2h),3.54(s,3h),3.12(s,6h).
[0170]
19
f nmr(376mhz,dmso)δ-112.23.
[0171]
实施例3
[0172]
1-{6-{1-(2,6-二氟苄基)-5-[(二甲基氨基)甲基]-3-(6-甲氧吡啶并-3-基)-2,4-二氧-1,2,3,4-四氢噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基}吡啶-3-基}-3-甲氧基脲
[0173][0174][0175]
第一步
[0176]
(6-溴吡啶-3-基)氨基甲酸叔丁酯的制备
[0177]
在室温下，将6-溴吡啶-3-胺(2.0g，11.56mmol)溶于二氯甲烷溶液中，之后加入二碳酸二叔丁酯(6.3g，29mmol)、三乙胺(5.8g，57.89mmol)和4-二甲氨基吡啶(14mg，0.01mmol)。将所得混合物在40℃下搅拌16小时。反应结束后，将混合物过滤并用水(200ml)淬灭，随后用乙酸乙酯(2
×
50ml)萃取，盐水(200ml)洗涤有机层，再用无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。用色谱柱(乙酸乙酯/石油醚＝0-10％)纯化残余物，得到基(6-溴吡啶-3-基)氨
基)-2,4-二氧基-1,2,3,4-四氢噻吩[2,3-d]嘧啶-6-基}吡啶-3-基}氨基甲酸酯(25mg，0.04mmol)溶于二氯甲烷/三氟乙酸＝3/1的溶液中，溶液在25℃下搅拌1h。反应结束后，所得反应液在减压下浓缩。加入适量水和乙腈，然后冷冻干燥得到6-(5-氨基吡啶-2-基)-1-(2,6-二氟苄基)-5-[(二甲氨基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2,4(1h,3h)-二酮(20mg，黄色固体)，收率：82％。
[0194]
ms m/z(esi):552.2[m+1]
+
。
[0195]
第六步
[0196]
1-{6-[1-(2,6-二氟苄基)-5-(二甲氨基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧基-1,2,3,4-四氢噻吩[2,3-d]嘧啶-6-基}吡啶-3-甲氧基脲的制备
[0197]
向6-(5-氨基吡啶-2-基)-1-(2,6-二氟苄基)-5-((二甲胺基)甲基)-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)噻吩[2,3-d]嘧啶-2,4(1h,3h)-二酮(20mg，0.04mmol)的四氢呋喃(2ml)溶液中添加4-硝基苯甲氧基氨基甲酸酯(42mg，0.2mmol)和三乙胺(20mg，0.2mmol)，将混合物在25℃下搅拌48小时。反应结束后，混合液在30℃下减压浓缩残余物，然后在hplc(fa)条件下制备纯化得到1-{6-[1-(2,6-二氟苄基)-5-(二甲氨基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧基-1,2,3,4-四氢噻吩[2,3-d]嘧啶-6-基}吡啶-3-甲氧基脲(4.02mg，黄色固体)，收率：16％。
[0198]
ms m/z(esi):625.17[m+1]
+
。
[0199]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ8.80
–
8.68(m,1h),8.37
–
8.25(m,1h),7.78
–
7.68(m,1h),7.47(d,j＝9.1hz,1h),7.39
–
7.30(m,1h),7.16(d,j＝9.0hz,1h),6.95(t,j＝8.1hz,1h),5.38(s,2h),4.46(s,1h),4.19(s,2h),3.80(s,2h),2.72(s,3h).
[0200]
hplc：95：84％(214nm),97.38％(254nm)。
[0201]
实施例4
[0202]
1-(5-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-[(二甲基氨基)甲基]-3-(6-甲氧基吡啶并-3-基)-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基}吡啶-2-基)-3-甲氧基脲
[0203][0204]
第一步
[0205]
n-[5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼硼烷-2-基)吡啶-2-基]氨基甲酸叔丁酯的制备
[0206]
将4-溴-2-甲基吲唑(2.72g,10mmol)溶于1,4-二氧六环(30ml)，室温下依次加入联硼酸频哪醇酯(3.8g,15mmol)，[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(730mg,1mmol)，醋酸钾(1.472g,15mmol)。将反应在氮气保护下，置于90℃下反应4小时。反应完成后，加入水淬灭，用乙酸乙酯萃取(3x20ml)，合并有机相，用饱和食盐水洗涤(50ml)。有机相合并后用无水硫酸钠干燥，浓缩。将得到的残留物用硅胶柱(二氯甲烷/甲醇＝98/2)分离纯化后得到反应中间体n-[5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼硼烷-2-基)吡啶-2-基]氨基甲酸叔丁酯(800mg,白色固体)，产率：22％。
[0207]
ms m/z(esi):239.2[m+1]
+
。
[0208]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ8.70(s,1h),8.65(s,1h),8.04(dd,j＝8.4,2.0hz,1h),7.98(d,j＝8.4hz,1h),1.34(s,12h),1.24(s,9h).
[0209]
第二步
[0210]
5-溴-2-{[[((2,6-二氟苯基)甲基](乙氧基羰基)氨基}-4-[((甲基氨基)甲基]噻吩-3-甲酸乙酯的制备
[0211]
将甲胺盐酸盐(9.3g,138mmol)溶于n,n-二甲基甲酰胺(25ml)，冰浴下加入三乙胺(27.9g,276mmol)，待混合液降温之后，将溶于n,n-二甲基甲酰胺(25ml)的5-溴-4-(溴甲基)-2-{[((2,6-二氟苯基)甲基](乙氧羰基)氨基}噻吩-3-甲酸乙酯(5g,9.2mmol)慢慢滴
加到上述混合液大约1h。冰浴0℃反应1小时。反应完成后，用二氯甲烷(50ml)稀释，依次用水(50ml)和饱和食盐水(3x 50ml)洗涤。有机相合并后用无水硫酸钠干燥，浓缩。将得到的残留物用硅胶柱(石油醚/乙酸乙酯＝89/11)分离纯化后得到反应中间体5-溴-2-{[[((2,6-二氟苯基)甲基](乙氧基羰基)氨基}-4-[((甲基氨基)甲基]噻吩-3-甲酸乙酯(2.2g,黄色油状液体)，产率：43％。
[0212]
ms m/z(esi):491.1[m+1]
+
。
[0213]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ7.32
–
7.21(m,1h),6.84(t,j＝8.0hz,2h),4.91(s,2h),4.27
–
4.18(m,2h),4.12(dd,j＝14.4,7.2hz,3h),3.83(s,1h),2.35(s,2h),2.05(s,3h),1.31(t,j＝7.2hz,2h),1.26(t,j＝7.2hz,3h).
[0214]
第三步
[0215]
4-({[((苄氧基)羰基)(甲基)氨基}甲基)-5-溴-2-{[((2,6-二氟苯基)甲基](乙氧基羰基)氨基}噻吩-3-甲酸乙酯的制备
[0216]
将5-溴-2-{[[((2,6-二氟苯基)甲基](乙氧基羰基)氨基}-4-[((甲基氨基)甲基]噻吩-3-甲酸乙酯(2.0g,4.1mmol)溶于二氯甲烷(20ml)，冰浴下加入三乙胺(1.2g,12.3mmol)，待混合液降温之后，将氯甲酸苄酯(1.05g,6.1mmol)慢慢滴加到上述混合液。混合液在冰浴0℃下反应1小时。反应完成后，用二氯甲烷(20ml)稀释，依次用水(20ml)和饱和食盐水(3x 20ml)洗涤。有机相合并后用无水硫酸钠干燥，浓缩。将得到的残留物用硅胶柱(石油醚/乙酸乙酯＝10/90)分离纯化后得到反应中间体4-({[((苄氧基)羰基)(甲基)氨基}甲基)-5-溴-2-{[((2,6-二氟苯基)甲基](乙氧基羰基)氨基}噻吩-3-甲酸乙酯的制备(2.38g,黄色固体)，产率：82.9％。
[0217]
ms m/z(esi):625.1[m+1]
+
。
[0218]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ7.41
–
7.34(m,4h),7.33
–
7.20(m,2h),6.88-6.78(m,4h),5.15(s,2h),4.92(s,2h),4.70(s,2h),4.22
–
4.04(m,3h),2.67(s,3h),1.25(t,j＝6.8hz,3h),0.92
–
0.81(m,2h).
[0219]
第四步
[0220]
4-({[((苄氧基)羰基](甲基)氨基}甲基)-5-溴-2-{[((2,6-二氟苯基)甲基](乙氧基羰基)氨基}噻吩-3-甲酸的制备
[0221]
将4-({[((苄氧基)羰基)(甲基)氨基}甲基)-5-溴-2-{[((2,6-二氟苯基)甲基](乙氧基羰基)氨基}噻吩-3-甲酸乙酯的制备(2.2g,3.2mmol)溶于乙醇(30ml)，加入48％氢氧化钾的水溶液(1.2ml)，混合液在65℃反应16小时。反应结束后，用1m盐酸调节体系ph＝6-7，用乙酸乙酯萃取(2x50ml)。将有机相合并，用无水硫酸钠干燥、过滤，滤液经浓缩后用柱层析(流动相：二氯甲烷/甲醇＝10/1)纯化后得到4-({[((苄氧基)羰基](甲基)氨基}甲基)-5-溴-2-{[((2,6-二氟苯基)甲基](乙氧基羰基)氨基}噻吩-3-甲酸(1.88g,棕色油状液体)，产率：80％。
[0222]
ms m/z(esi):597.0[m+1]
+
。
[0223]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ7.39
–
7.35(m,2h),7.34
–
7.27(m,3h),7.25
–
7.16(m,1h),6.81(t,j＝7.8hz,2h),5.10(s,2h),4.95(s,2h),4.71(s,1h),4.66(s,2h),2.88
–
2.53(m,3h),1.26(t,j＝7.2hz,6h).
[0224]
第五步
2-基]氨基甲酸叔丁酯(96mg,0.3mmol)，碳酸钾(62mg,0.45mmol)，三(二亚苄-base丙酮)二钯(41mg,0.045mmol)，2-二环己基磷-2',6'-二异丙氧基-1,1'-联苯(21mg,0.045mmol)。将反应在氮气保护下，置于80℃微波下反应0.5小时。反应完成后，加入水淬灭，用乙酸乙酯萃取(3x20ml)，合并有机相，用饱和食盐水洗涤(50ml)。有机相合并后用无水硫酸钠干燥，浓缩。将得到的残留物经柱层析(流动相：石油醚/乙酸乙酯＝10/90)纯化后得到[(6-{6-[(叔丁氧基羰基)氨基]吡啶-3-基}-1-(2,6-二氟苄基)-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧杂-1,2,3,4-四氢噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲基](甲基)氨基甲酸苄酯(74mg,白色固体)，收率：63％。
[0237]
ms m/z(esi):772.2[m+1]
+
。
[0238]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ8.28-8.10(m,1h),8.00(s,1h),7.38(t,j＝8.8hz,1h),7.34-7.28(m,3h),7.28
–
7.18(m,4h),7.15(d,j＝9.0hz,1h),6.94(t,j＝8.0hz,2h),5.33(s,2h),4.94(s,4h),4.20(s,3h),2.65(s,3h),1.54(s,9h).
[0239]
第八步
[0240]
n-(5-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧吡啶并-3-基)-5-[(甲基氨基)甲基]-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基}吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的制备
[0241]
将n-[(6-{6-[(叔丁氧基羰基)氨基]吡啶-3-基}-1-(2,6-二氟苄基)-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧杂-1,2,3,4-四氢噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲基](甲基)氨基甲酸苄酯(300mg,0.39mmol)溶于甲醇(20ml)中。依次加入乙酸(10d),钯碳(415mg,3.9mmol)(10％,50％水)，氢气球换气三次。在氢气球气氛下25℃反应16小时。反应结束后抽滤得滤液，浓缩得叔丁基n-(5-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧吡啶并-3-基)-5-[(甲基氨基)甲基]-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基}吡啶-2-基)氨基甲酸酯(296mg,白色固体)，产率：95％。
[0242]
ms m/z(esi):638.3[m+1]
+
。
[0243]
第九步
[0244]
n-(5-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-[(二甲氨基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基}吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的制备
[0245]
将叔丁基n-(5-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧吡啶并-3-基)-5-[(甲基氨基)甲基]-2,4-二氧噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-基}吡啶-2-基)氨基甲酸酯(50mg,0.08mmol)溶于甲醇(4ml)，依次加入多聚甲醛(72mg,2.4mmol)，乙酸(3滴)，氰基硼氢化钠(5mg,0.08mmol)，反应液在氮气保护下25℃反应1小时。反应结束后，加入饱和氯化铵溶液(10ml)淬灭，用乙酸乙酯萃取(3x30ml)。有机相用饱和食盐水洗涤(3x20ml)后用无水硫酸钠干燥、过滤，滤液经浓缩后用柱层析(流动相：二氯甲烷/甲醇＝88/12)得到中间体n-(5-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-[(二甲氨基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基}吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯(55mg,黄色油状液体)，产率：95％。
[0246]
ms m/z(esi):652.2[m+1]
+
。
[0247]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.06(s,1h),8.52-8.42(m,1h),8.01-7.89(m,2h),7.75(d,j＝9.2hz,1h),7.47(d,j＝8.4hz,2h),7.15(t,j＝8.0hz,2h),5.45-5.15(m,2h),4.09(s,2h),3.94(s,3h),1.48(d,j＝8.8hz,9h),1.29(s,3h),1.16(s,3h).
[0248]
第十步
[0249]
6-(6-氨基吡啶-3-基)-1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-[(二甲基氨基)甲基]-3-(6-甲氧基吡啶并-3-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2,4-二酮的制备
[0250]
将n-(5-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-[(二甲氨基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基}吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯(270mg,0.41mmol)溶于二氯甲烷：三氟乙酸＝2：1(10ml)的混合溶剂中，室温下反应1h。反应液用二氯甲烷(10ml)稀释,用水(10ml)和饱和食盐水(3x10ml)洗，合并有机相用无数硫酸钠干燥，浓缩。浓缩液经柱层析(流动相：乙腈/水＝20/80)纯化后得到6-(6-氨基吡啶-3-基)-1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-[(二甲基氨基)甲基]-3-(6-甲氧基吡啶并-3-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2,4-二酮(150mg,白色固体)，产率：60％。
[0251]
ms m/z(esi):552.2[m+1]
+
。
[0252]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ8.08(s,1h),7.55(s,1h),7.35
–
7.27(m,1h),7.21
–
7.12(m,2h),6.92(t,j＝8.0hz,2h),6.60(d,j＝8.8hz,1h),4.73(s,2h),4.17(s,2h),2.99
–
2.73(m,3h),2.70-2.20(m,6h).
[0253]
第十一步
[0254]
n-(5-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-[(二甲氨基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基}吡啶-2-基)氨基甲酸苯酯的制备
[0255]
将6-(6-氨基吡啶-3-基)-1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-[(二甲基氨基)甲基]-3-(6-甲氧基吡啶并-3-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2,4-二酮(80mg,0.15mmol)溶于二氯甲烷(5ml)，加入吡啶(36mg,0.45mmol)在冰水浴下冷却，加入氯甲酸苯酯(70mg,0.45mmol)，在氮气保护下，于0℃反应1小时。反应结束后，将反应液浓缩，得到粗品n-(5-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-[(二甲氨基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基}吡啶-2-基)氨基甲酸苯酯(80mg,黄色固体)，产率：82％。
[0256]
ms m/z(esi):672.2[m+1]
+
。
[0257]
第十二步
[0258]
1-(5-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-[(二甲基氨基)甲基]-3-(6-甲氧基吡啶并-3-基)-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基}吡啶-2-基)-3-甲氧基脲的制备
[0259]
将n-(5-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-[(二甲氨基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基}吡啶-2-基)氨基甲酸苯酯(100mg,0.15mmol)溶于四氢呋喃(10ml)，依次加入三乙胺(304mg,12.3mmol)，与邻甲基羟胺盐酸盐(250mg,3mmol)。反应液在60℃反应16小时。待反应结束，浓缩。浓缩液经柱层析(流动相：乙腈/水＝3/1)纯化后得到粗品，粗品经制备柱(流动相：0.1％甲酸/乙腈/水)纯化后得到1-(5-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-[(二甲基氨基)甲基]-3-(6-甲氧基吡啶并-3-基)-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基}吡啶-2-基)-3-甲氧基脲(9.93mg,白色固体)，产率：9.8％。
[0260]
ms m/z(esi):639.2[m+1]
+
。
[0261]
hplc:92.44％(214nm),96.92％(254nm).
[0262]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ8.04-7.94(m,1h),7.81(d,j＝7.6hz,1h),7.64(s,1h),7.34-7.27(m,1h),7.19(t,j＝8.0hz,1h),7.13-7.07(m,2h),7.01(t,j＝7.2hz,1h),6.90(t,j＝8.0hz,2h),5.60-4.80(m,4h),4.16(s,3h),3.82(s,3h),2.42(s,6h)..
[0263]
19
f nmr(376mhz,cdcl3)δ-112.287.
[0264]
实施例5
[0265]
6-氨基-1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-[(二甲氨基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)噻吩[2,3-d]嘧啶-2,4-二酮
[0266][0267]
第一步
[0268]
n-({1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧基-6-(2,2,2-三氟乙酰氨基)噻吩[2,3-d]嘧啶-5-基}甲基)-n-甲基氨基甲酸叔丁酯的制备
[0269]
将n-({6-溴-1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧噻吩[2,3-d]嘧啶-5-基]甲基)-n-甲基氨基甲酸叔丁酯(200mg,0.32mmol)溶入dmf(9ml)中，然后加入反式-(1r，2r)n，n'-二甲基环己烷-1,2-二胺(20mg,0.14mmol),三氟乙酰胺(109mg,0.96mmol),cui(83mg,0.43mmol)和k3po4(82mg,0.38mmol)。反应液在100℃下微波2小时，向反应液中加入h2o(20ml)，用dcm(3x10ml)萃取,有机相用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥后浓缩，残留物用反向柱层析(乙腈/水＝50％)得到n-({1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧基-6-(2,2,2-三氟乙酰氨基)噻吩[2,3-d]嘧啶-5-基}甲基)-n-甲基氨基甲酸叔丁酯(50mg,黄色固体)，产率：21％。
[0270]
ms m/z(esi):657.2[m+1]
+
。
[0271]
第二步
[0272]
n-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-5-[(甲胺基)甲基]-2,4-二氧噻吩[2,3-d]嘧啶-6-基]-2,2,2-三氟乙酰胺的制备
[0273]
将n-({1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧基-6-(2,2,2-三氟乙酰氨基)噻吩[2,3-d]嘧啶-5-基}甲基)-n-甲基氨基甲酸叔丁酯(50mg,0.08mmol)溶入二氯甲烷(4ml)和三氟乙酸(2ml)中，反应液在25℃下搅拌4小时，反应液浓缩得到n-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-5-[(甲胺基)甲基]-2,4-二氧噻吩[2,3-d]嘧啶-6-基]-2,2,2-三氟乙酰胺(40mg,淡黄色固体)产率：80％。
[0274]
ms m/z(esi):557.2[m+1]
+
。
[0275]
第三步
[0276]
n-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-[(二甲氨基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧噻吩[2,3-d]嘧啶-6-基]-2,2,2-三氟乙酰胺的制备
[0277]
将n-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-5-[(甲胺基)甲基]-2,4-二氧噻吩[2,3-d]嘧啶-6-基]-2,2,2-三氟乙酰胺(40mg,0.07mmol)溶入1，2-二氯乙烷(10ml)中，然后加入多聚甲醛(7mg,0.22mmol)，反应液在25℃下搅拌16小时，反应液浓缩后
加入水(20ml)，用二氯甲烷(3x20ml)萃取，有机相用饱和食盐水(20ml)洗，无水硫酸钠干燥后浓缩得到n-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-[(二甲氨基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧噻吩[2,3-d]嘧啶-6-基]-2,2,2-三氟乙酰胺(55mg,黄色固体)，产率：79％。
[0278]
ms m/z(esi):571.2[m+1]
+
。
[0279]
第四步
[0280]
6-氨基-1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-[(二甲氨基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)噻吩[2,3-d]嘧啶-2,4-二酮的制备
[0281]
将n-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-[(二甲氨基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧噻吩[2,3-d]嘧啶-6-基]-2,2,2-三氟乙酰胺(40mg,0.07mmol)溶入乙醇(10ml)中，然后加入水(5ml)和浓硫酸(3ml)，反应液在25℃下搅拌5小时，反应液用饱和nahco3溶液调ph值至7-9，用乙酸乙酯(3x20ml)，有机相用饱和食盐水(20ml)洗，无水硫酸钠干燥后浓缩，制备(0.1％甲酸/乙腈/水)得到6-氨基-1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-[(二甲氨基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)噻吩[2,3-d]嘧啶-2,4-二酮(7.5mg,淡黄色固体)，产率：22％。
[0282]
ms m/z(esi):475.1[m+1]
+
。
[0283]
hplc:97.58％(214nm),98.34％(254nm).
[0284]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ11.84(s,2h),7.39-7.34(m,2h),7.17-7.14(m,1h),6.97-6.92(m,2h),5.27(s,2h),4.41(s,2h),4.19(s,3h),2.83(d,j＝19.6hz,6h).
[0285]
19
f nmr(376mhz,cdcl3)δ-75.62,-112.79.
[0286]
实施例6
[0287]
1-[((2,6-二氟苯基)甲基]-5-[(二甲基氨基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-6-(2-甲基吲唑-4-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2,4-二酮
[0288][0289]
第一步
[0290]
2-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)吲唑的制备
[0291]
将4-溴-2-甲基吲唑(422mg,2.00mmol)溶于1,4-二氧六环(3ml)，室温下依次加入
联硼酸频哪醇酯(761mg,3.00mmol)，[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(146mg,0.20mmol)，醋酸钾(294.42mg,3mmol)。将反应在氮气保护下，置于90℃下反应4小时。反应完成后，加入水淬灭，用乙酸乙酯萃取(3x20ml)，合并有机相，用饱和食盐水洗涤(50ml)。有机相合并后用无水硫酸钠干燥，浓缩。将得到的残留物用硅胶柱(石油醚/乙酸乙酯＝76/24)分离纯化后得到反应中间体2-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)吲唑(534mg,白色固体)，产率：93％。
[0292]
ms m/z(esi):590.1[m+1]
+
。
[0293]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ8.26(s,1h),7.81(d,j＝8.8hz,1h),7.63(d,j＝6.0hz,1h),7.31(dd,j＝8.8,6.6hz,1h),4.26(s,3h),1.39(s,12h).
[0294]
第二步
[0295]
1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-[(二甲基氨基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-6-(2-甲基吲唑-4-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2,4-二酮的制备
[0296]
将2-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)吲唑(74mg,0.29mmol)溶于甲苯：乙醇：水＝7：2：1(2ml)，然后依次加入6-溴-1-[((2,6-二氟环己-1,3-二烯-1-基)甲基]-5-[(二甲基氨基)甲基]-3-(6-甲氧基吡啶并-3-基)噻吩并[2，3-d]嘧啶-2,4-二酮(100mg,0.19mmol)，碳酸钾(79mg,0.57mmol)，三(二亚苄-base丙酮)二钯(28mg,0.57mmol)，2-二环己基磷-2',6'-二异丙氧基-1,1'-联苯(18mg,0.04mmol)。将反应在氮气保护下，置于80℃微波下反应0.5小时。反应完成后，加入水淬灭，用乙酸乙酯萃取(3x20ml)，合并有机相，用饱和食盐水洗涤(50ml)。有机相合并后用无水硫酸钠干燥，浓缩。将得到的残留物经制备柱(流动相：0.1％三氟乙酸/乙腈/水)纯化后得到1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-[(二甲基氨基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-6-(2-甲基吲唑-4-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2,4-二酮(2.78mg,白色固体)，收率：2.6％。
[0297]
ms m/z(esi):590.1[m+1]
+
。
[0298]
hplc:99.41％(214nm),98.10％(254nm).
[0299]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ8.06(s,1h),7.83(d,j＝8.8hz,1h),7.67(d,j＝9.2hz,1h),7.39-7.34(m,1h),7.33
–
7.28(m,1h),7.17(d,j＝9.2hz,1h),7.08(d,j＝6.8hz,1h),6.91(t,j＝8.0hz,2h),5.59(s,1h),5.09(s,1h),4.84(s,1h),4.27(s,3h),4.17(s,3h),2.85(s,3h),2.38(s,3h).
[0300]
实施例7
[0301]
1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-[(二甲氨基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-6-{[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-6-基]噻吩[2,3-d]嘧啶-2,4-二酮
[0302][0303]
第一步
[0304]
6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂戊烷-2-基)-[1,2,4]三唑[1,5-a]吡啶的制备
[0305]
将6-溴-[1,2,4]三唑[1,5-a]吡啶(500mg,2.52mmol)，4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂环戊烷(960mg,3.78mmol)，乙酸钾(495mg,5.04mmol)溶解在1，4-二氧六环(15ml)，接着加入pd(dppf)cl2(184mg,0.25mmol)。反应氮气保护在100℃下反应16小时。lcms显示反应完成后，加入20ml水，二氯甲烷萃取三次，饱和食盐水洗一次有机相，无水硫酸钠干燥后过滤，减压蒸馏浓缩后的残留物经过硅胶柱(石油醚/乙酸乙酯＝60％)纯化后浓缩溶剂后得6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂戊烷-2-基)-[1,2,4]三唑[1,5-a]吡啶(450mg，白色固体)，产率：66％。
[0306]
ms m/z(esi):164.1(m-81)。
[0307]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ8.98(s,1h),8.38(s,1h),7.84-7.75(m,2h),1.37(s,12h).
[0308]
第二步
[0309]
n-({1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧基-6-{[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-6-基}噻吩[2,3-d]嘧啶-5-基}甲基)-n-甲基氨基甲酸叔丁酯的制备
[0310]
将6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂戊烷-2-基)-[1,2,4]三唑[1,5-a]吡啶(59mg,0.24mmol),叔丁基n-({6-溴-1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧噻吩[2,3-d]嘧啶-5-基]甲基)-n-甲基氨基甲酸酯(100mg,0.16mmol)，碳酸钾(44mg,0.32mmol)和binap((15mg,0.03mmol)溶解在甲苯(7ml),乙醇(2ml)和水(1ml).接着加入pd(dba)(10mg,0.01mmol)。置换完氮气后反应在微波反应仪中80℃反应0.5h。反应完成后加入水(20ml)，用二氯甲烷萃取三次，二氯甲烷层用饱和食盐水洗一次，无水硫酸钠干燥有机相，过滤，浓缩后得到出产品，粗产品经过硅胶柱(石油醚/乙酸乙酯＝80％)浓缩除掉溶剂后得到n-({1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧基-6-{[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-6-基}噻吩[2,3-d]嘧啶-5-基}甲基)-n-甲基氨基甲酸叔丁酯(55mg,黄色固体)，产率：50％。
[0311]
ms m/z(esi):663.2[m+h]
+
。
[0312]
第三步
[0313]
1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-5-[(甲胺基)甲基]-6-{[1,
2,4]三唑[1,5-a]吡啶-6-基]噻吩[2,3-d]嘧啶-2,4-二酮的制备
[0314]
将n-({1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧基-6-{[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-6-基}噻吩[2,3-d]嘧啶-5-基}甲基)-n-甲基氨基甲酸叔丁酯(50mg,0.08mmol)溶解在二氯甲烷(4ml)中，接着加入三氟乙酸(2ml)。反应在室温下反应4h.lcms监测反应完成后减压浓缩掉溶剂得到1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-5-[(甲胺基)甲基]-6-{[1,2,4]三唑[1,5-a]吡啶-6-基]噻吩[2,3-d]嘧啶-2,4-二酮(40mg,黄色固体)，产率：80％。
[0315]
ms m/z(esi):563.1[m+h]
+
。
[0316]
第四步
[0317]
1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-[(二甲氨基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-6-{[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-6-基]噻吩[2,3-d]嘧啶-2,4-二酮的制备
[0318]
将1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-5-[(甲胺基)甲基]-6-{[1,2,4]三唑[1,5-a]吡啶-6-基]噻吩[2,3-d]嘧啶-2,4-二酮(30mg,0.09mmol)溶解在1，2-二氯乙烷(10ml)，接着加入多聚甲醛(5.4mg,0.18mmol)和三滴乙酸。反应在室温下搅拌0.5h后加入三乙酰基硼氢化钠(38mg,0.18mmol)。反应接着在室温下搅拌过夜。lcms监测反应结束后，减压浓缩后经过制备(乙腈/水/0.05％的三氟乙酸)后得到1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-[(二甲氨基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-6-{[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-6-基]噻吩[2,3-d]嘧啶-2,4-二酮(8mg,白色固体)，产率：15％。
[0319]
ms m/z(esi):577.2[m+h]
+
。
[0320]
hplc:99.36％(214nm),100％(254nm)
[0321]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ9.25(s,1h),8.43(s,1h),7.84(d,j＝9.2hz,1h),7.69(dd,j＝9.2,1.6hz,1h),7.48(d,j＝9.2hz,1h),7.38-7.26(m 1h),7.16(d,j＝9.1hz,1h),6.95(t,j＝8.0hz,2h),5.38(s,2h),4.19(s,3h),4.00-3.89(m,2h),2.36(s,6h).
[0322]
19
f nmr(376mhz,cdcl3)δ-112.47.
[0323]
实施例8
[0324]
5-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-[(二甲基氨基)甲基]-3-(6-甲氧基吡啶并-3-基)-2,4-二羰基噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基}喹啉-8-腈
[0325][0326]
在微波管中将6-溴-1-[[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-[(二甲基氨基)甲基]-3-(6-甲氧基吡啶并-3-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2,4-二酮(100mg,0.19mmol)溶于甲苯(3.5ml),乙醇(1ml)和水(0.5ml)的混合溶剂中，依次加入5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)喹啉-8-腈(64mg,0.23mmol)，三(二亚苄基丙酮)二钯(18mg,0.02mmol)，2-二环己基磷-2',6'-二异丙氧基-1,1'-联苯(18mg,0.04mmol)和无水碳酸钾(79mg,0.57mmol)，加料完成后在微波反应器中于80℃搅拌1小时。反应液用50ml水淬灭，然后用乙酸乙酯(3x30ml)萃取。有机相合并后用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥。浓缩后的残留物用prep-hplc(乙腈/水(0.1％甲酸))纯化后得到5-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-[(二甲基氨基)甲基]-3-(6-甲氧基吡啶并-3-基)-2,4-二羰基噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基}喹啉-8-腈(2.33mg,白色固体)，产率：2％。
[0327]
ms m/z(esi):612.2[m+1]
+
.
[0328]
hplc:95.07％(214nm),90.11％(254nm).
[0329]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ9.13(dd,j＝4.4,1.6hz,1h),8.44(d,j＝7.6hz,1h),8.27(d,j＝8.8hz,1h),7.86(d,j＝7.6hz,1h),7.79-7.73(m,2h),7.46(d,j＝9.2hz,2h),7.12(t,j＝8.4hz,2h),5.37(s,2h),5.23(s,2h),4.08(s,3h),1.76(s,6h).
[0330]
19
f nmr(376mhz,dmso-d6)δ-112.78.
[0331]
实施例9
[0332]
5-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-[(二甲基氨基)甲基]-3-(6-甲氧基吡啶并-3-基)-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基}喹啉-8-甲酰胺
[0333][0334][0335]
第一步
[0336]
5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)喹啉-8-甲酸甲酯的制备
[0337]
将5-溴喹啉-8-甲酸甲酯(600mg,2.25mmol)溶于二氧六环(10ml)中，然后依次加入联硼酸频哪醇酯(686mg,2.7mmol)，[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯二氯甲烷络合物(165mg,0.23mmol)和乙酸钾(663mg,6.75mmol)。反应液在90℃下搅拌1小时。冷却至室温后，将反应液浓缩，得到的残留物用硅胶柱(石油醚/乙酸乙酯＝1/2)得到5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)喹啉-8-甲酸甲酯(400mg,黄色油状物)，产率：57％。
[0338]1h nmr(400mhz,dmso)δ9.04(dd,j＝8.8,1.6hz,1h),8.97(dd,j＝4.0,1.6hz,1h),8.07(d,j＝7.2hz,1h),7.90(d,j＝7.2hz,1h),7.68(dd,j＝8.4,4.0hz,1h),3.92(s,3h),1.39(s,12h).
[0339]
第二步
[0340]
5-[5-({[[(叔丁氧基)羰基](甲基)氨基}甲基)-1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧基吡啶并-3-基)-2，4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基]喹啉-8-甲酸甲酯的制备
[0341]
将6-溴-1-[[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-[(二甲基氨基)甲基]-3-(6-甲氧基吡啶并-3-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2,4-二酮(500mg,0.8mmol)溶于甲苯(5.6ml)，乙醇(1.6ml)和水(0.8ml)的混合溶剂中，然后依次加入5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)喹啉-8-甲酸甲酯(301mg,0.96mmol)，三(二亚苄基丙酮)二钯(147mg,0.16mmol),2-二环己基磷-2',6'-二异丙氧基-1,1'-联苯(150mg,0.32mmol)和无水碳酸钾(332mg,2.4mmol)，反应液在微波反应器中于85℃搅拌1小时。反应液用水(100ml)淬灭，然后用乙酸乙酯(3x50ml)萃取。有机相合并后用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥。浓缩后的残留物用硅胶柱(石油醚/乙酸乙酯＝1/9)纯化得到5-[5-({[[(叔丁氧基)羰基](甲基)氨基}甲基)-1-[(2,
6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧基吡啶并-3-基)-2，4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基]喹啉-8-甲酸甲酯(520mg,橙色固体)，产率：80％。
[0342]
ms m/z(esi):731.2[m+1]
+
.
[0343]
第三步
[0344]
n-{[6-(8-氨基甲酰基喹啉-5-基)-1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧基吡啶并-3-基)-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基]甲基}-n-甲基氨基甲酸叔丁酯的制备
[0345]
在5-[5-({[[(叔丁氧基)羰基](甲基)氨基}甲基)-1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧基吡啶并-3-基)-2，4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基]喹啉-8-甲酸甲酯(400mg,0.55mmol)中加入氨甲醇溶液(7.9ml,55mmol)，反应液于25℃搅拌16小时。将反应液浓缩得到n-{[6-(8-氨基甲酰基喹啉-5-基)-1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧基吡啶并-3-基)-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基]甲基}-n-甲基氨基甲酸叔丁酯(380mg,黄色固体)，产率：86％。
[0346]
ms m/z(esi):716.2[m+1]
+
.
[0347]
第四步
[0348]
5-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-5-[(甲基氨基)甲基]-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基}喹啉-8-甲酰胺的制备
[0349]
将n-{[6-(8-氨基甲酰基喹啉-5-基)-1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧基吡啶并-3-基)-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基]甲基}-n-甲基氨基甲酸叔丁酯(400mg,0.56mmol)溶于二氯甲烷(5ml)中，加入三氟乙酸(1278mg,11.2mmol)，反应液于25℃搅拌2小时。反应液浓缩得到5-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-5-[(甲基氨基)甲基]-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基}喹啉-8-甲酰胺(350mg,黄色油状物)，产率：91％。
[0350]
ms m/z(esi):616.2[m+1]
+
.
[0351]
第五步
[0352]
5-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-[(二甲基氨基)甲基]-3-(6-甲氧基吡啶并-3-基)-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基}喹啉-8-甲酰胺的制备
[0353]
将5-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-5-[(甲基氨基)甲基]-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基}喹啉-8-甲酰胺(100mg,0.16mmol)溶于四氢呋喃(3ml)中，在冰水浴下依次加入三乙胺(49mg,0.48mmol)和碘甲烷(25mg,0.18mmol)，反应液于25℃搅拌2小时。将反应液浓缩，得到的残留物用prep-hplc(乙腈/水(0.05％氨水))纯化得到5-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-[(二甲基氨基)甲基]-3-(6-甲氧基吡啶并-3-基)-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基}喹啉-8-甲酰胺(15.3mg,淡黄色固体)，产率：14％。
[0354]
ms m/z(esi):630.2[m+1]
+
.
[0355]
hplc:99.75％(214nm),97.86％(254nm).
[0356]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.04(s,1h),9.09(d,j＝2.4hz,1h),8.58(d,j＝7.6hz,1h),8.27(s,1h),8.03(s,1h),7.86(d,j＝7.2hz,1h),7.79(d,j＝9.2hz,1h),7.70(dd,j＝8.8,4.4hz,1h),7.49(d,j＝9.2hz,2h),7.14(t,j＝8.4hz,2h),5.39(s,2h),5.25(s,2h),4.10(s,3h),1.82(s,6h).
[0357]
实施例10
[0358]
1-{5-{1-(2,6-二氟苄基)-5-[(2-甲氧基乙基)(甲基)氨基]甲基}-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧基-1,2,3,4-四氢噻吩[2,3-d]嘧啶-6-基}吡啶-2-基}-3-甲氧基脲
[0359][0360]
第一步
[0361]
((6-(6-((叔丁氧基羰基)氨基)吡啶-3-基)-1-(2,6-二氟苄基)-3-(6-甲氧基吡啶并-3-基)-2,4-二氧杂-1,2,3,4-四氢噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲基)(甲基)氨基甲酸苄酯的制备将((6-溴-1-(2,6-二氟苄基)-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧-1,2,3,4-四氢噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲基)(甲基)氨基甲酸苄酯(250mg，0.38mmol)溶于乙醇/甲苯/水＝2：7：1(5ml)混合溶液中，随后加入叔丁基[5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊烷-2-基)吡啶-2-基]氨基甲酸酯(182mg，0.57mmol)，三二亚苄基丙酮二钯(104mg，0.11mmol)，2-二环己基磷-2',6'-二异丙氧基-1,1'-联苯(53mg，0.11mmol)和碳酸钾(157mg，1.14mmol)，在氮气保护下，混合液在80℃下搅拌3小时。反应结束后，向反应中加入水(20ml)，并用乙酸乙酯(3x10ml)萃取。合并的有机层用盐水(20ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将残余物通过色谱柱纯化(乙酸乙酯/石油醚＝0-60％)得到((6-(6-((叔丁氧基羰基)氨基)吡啶-3-基)-1-(2,6-二氟苄基)-3-(6-甲氧基吡啶并-3-基)-2,4-二氧杂-1,2,3,4-四氢噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲基)(甲基)氨基甲酸苄酯(80mg，黄色固体)，收率：23％。
[0362]
ms m/z(esi)：772.2[m+1]
+
。
[0363]
第二步
[0364]
(5-(1-(2,6-二氟苄基)-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-5-((甲氨基)甲基)-2,4-二氧-1,2,3，4-四氢噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基)吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的制备
[0365]
将((6-(6-((叔丁氧基羰基)氨基)吡啶-3-基)-1-(2,6-二氟苄基)-3-(6-甲氧基吡啶并-3-基)-2,4-二氧杂-1,2,3,4-四氢噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲基)(甲基)氨基甲酸苄酯(80mg，0.1mmol)溶于甲醇(10ml)中，随后在溶液中添加钯/碳(10mg，0.1mmol)和乙
酸(0.6mg,0.01mmol)，在氢气保护下，反应液在室温下搅拌3小时。反应结束后，把反应液中的固体过滤掉，浓缩得到(5-(1-(2,6-二氟苄基)-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-5-((甲氨基)甲基)-2,4-二氧-1,2,3，4-四氢噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基)吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯(72mg，黄色固体)，收率：85％。粗产品直接用于下一步反应。
[0366]
ms m/z(esi)：638.1[m+1]
+
。
[0367]
第三步
[0368]
6-(6-氨基吡啶-3-基)-1-(2,6-二氟苄基)-5-((((2-甲氧基乙基)(甲基)氨基)甲基)-3-(6-甲氧基吡啶并-3-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2,4(1h，3h)-二酮的制备
[0369]
将(5-(1-(2,6-二氟苄基)-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-5-((甲氨基)甲基)-2,4-二氧-1,2,3，4-四氢噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基)吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯(72mg，0.13mmol)溶于乙腈(6ml)中，随后在溶液中加入1-溴代-2-甲氧基乙烷(36mg，0.26mmol)，碳酸钾(53mg，0.39mmol)和碘化钾(2mg，0.01mmol)。在氮气保护下，将所得混合物在60℃下搅拌12小时。反应结束后，用水(10ml)洗涤所得混合物。然后用乙酸乙酯(3x10ml)萃取所得混合物。有机相用无水硫酸钠干燥并在减压下浓缩得到6-(6-氨基吡啶-3-基)-1-(2,6-二氟苄基)-5-((((2-甲氧基乙基)(甲基)氨基)甲基)-3-(6-甲氧基吡啶并-3-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2,4(1h，3h)-二酮(30mg,棕色固体)，产率：35％。粗产品被直接用于下一步。ms m/z(esi)：696.2[m+1]
+
。
[0370]
第四步
[0371]
6-(6-氨基吡啶-3-基)-1-(2,6-二氟苄基)-5-(((2-甲氧乙基)(甲基)氨基)甲基)-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2,4(1h,3h)-二酮的制备
[0372]
将6-(6-氨基吡啶-3-基)-1-(2,6-二氟苄基)-5-((((2-甲氧基乙基)(甲基)氨基)甲基)-3-(6-甲氧基吡啶并-3-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2,4(1h，3h)-二酮(30mg,0.05mmol)溶于二氯甲烷(2ml)与三氟乙酸(1ml)的混合溶剂中，室温下反应1h。反应液用二氯甲烷(20ml)稀释,用水(10ml)和饱和食盐水(3x10ml)洗，合并有机相用无水硫酸钠干燥，浓缩得到6-(6-氨基吡啶-3-基)-1-(2,6-二氟苄基)-5-(((2-甲氧乙基)(甲基)氨基)甲基)-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2,4(1h,3h)-二酮。粗产品被直接用于下一步。
[0373]
ms m/z(esi)：596.2[m+1]
+
。
[0374]
第五步
[0375]
苯基(5-(1-(2,6-二氟苄基)-5-((((2-甲氧基乙基)(甲基)氨基)甲基)-3-(6-甲氧基哒嗪-3-[0376]
基)-2,4-二氧-1,2,3,4-四氢噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基)吡啶-2-基)氨基甲酸酯的制备
[0377]
将6-(6-氨基吡啶-3-基)-1-(2,6-二氟苄基)-5-(((2-甲氧乙基)(甲基)氨基)甲基)-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2,4(1h,3h)-二酮(30mg,0.05mmol)溶于二氯甲烷(2ml)，接着加入吡啶(40mg，0.504mmol)和氯甲酸苯酯(24mg，0.15mmol)。反应液在室温下搅拌1小时。反应结束后，用水(10ml)洗涤所得混合物。然后用乙酸乙酯(3x10ml)萃取所得混合物。有机相用无水硫酸钠干燥并在减压下浓缩得到苯基(5-(1-(2,6-二氟苄基)-5-((((2-甲氧基乙基)(甲基)氨基)甲基)-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧-1,2,3,4-四氢噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基)吡啶-2-基)氨基甲酸酯。粗产品被直接用于下一步。
[0378]
ms m/z(esi)：716.1[m+1]
+
。
[0379]
第六步
[0380]
1-(5-(1-(2,6-二氟苄基)-5-(((2-甲氧基乙基)(甲基)氨基)甲基)-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧杂-1,2,3,4-四氢噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基脲的制备
[0381]
将苯基(5-(1-(2,6-二氟苄基)-5-((((2-甲氧基乙基)(甲基)氨基)甲基)-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧-1,2,3,4-四氢噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基)吡啶-2-基)氨基甲酸酯(30mg,0.04mmol)溶于四氢呋喃(5ml)中，然后加入甲氧基氯化铵(11mg,0.13mmol)和三乙胺(42mg,0.42mmol)。反应在55℃下搅拌16小时。反应完成后蒸发掉溶剂得到粗产品，经过制备(0.1％甲酸/乙腈/水)纯化得到1-(5-(1-(2,6-二氟苄基)-5-(((2-甲氧基乙基)(甲基)氨基)甲基)-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧杂-1,2,3,4-四氢噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基脲(10mg，淡黄色固体)，产率：36％。
[0382]
ms m/z(esi)：669.2[m+1]
+
。
[0383]
hplc:88.00％(214nm),87.89％(254nm).
[0384]1h nmr(400mhz,cd3od)δ8.42(s,1h),7.95(m,j＝8.7,2.3hz,1h),7.87(s,1h),7.67(d,j＝9.2hz,1h),7.48
–
7.37(m,2h),7.04(t,j＝8.3hz,2h),5.44(m,j＝16.5,11.1hz,2h),4.92(s,2h),4.59(s,6h),4.17(s,3h),3.77(s,2h),3.23(s,3h).
[0385]
实施例11
[0386]
1-(5-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-{[乙基(甲基)氨基]甲基}-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基}吡啶-2-基)-3-甲氧基脲
[0387][0388]
第一步
[0389]
n-(5-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-{[乙基(甲基)氨基]甲基}-3-(6-甲氧基吡啶并-3-基)-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基}吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的制备
[0390]
将[(6-{6-[(叔丁氧基羰基)氨基]吡啶-3-基}-1-(2,6-二氟苄基)-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧杂-1,2,3,4-四氢噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲基](甲基)氨基甲酸苄酯(300mg,0.39mmol)溶于甲醇(20ml)中。依次加入乙醛的四氢呋喃溶液(0.6ml,5m),乙酸(10滴),钯碳(415mg,3.9mmol)，氢气球换气三次。在氢气球气氛下25℃反应36小时。反应结束后抽滤得滤液，浓缩有机相得到粗品n-(5-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-{[乙基(甲基)氨基]甲基}-3-(6-甲氧基吡啶并-3-基)-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基}吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯(270mg,淡黄色油状物)，产率：73％。
[0391]
ms m/z(esi):666.2[m+1]
+
。
[0392]
第二步
[0393]
6-(6-氨基吡啶-3-基)-1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-{[乙基(甲基)氨基]甲基}-3-(6-甲氧基吡啶并-3-基)硫醇[2,3-d]嘧啶-2,4-二酮的制备
[0394]
将n-(5-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-{[乙基(甲基)氨基]甲基}-3-(6-甲氧基吡啶并-3-基)-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基}吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯(270mg,0.53mmol)溶于二氯甲烷(2ml)与三氟乙酸(1ml)的混合溶剂中，室温下反应1h。反应液用二氯甲烷(20ml)稀释,用水(10ml)和饱和食盐水(3x10ml)洗，合并有机相用无数硫酸钠干燥，浓缩。浓缩液经柱层析(流动相：乙腈/水＝20/80)纯化后得到6-(6-氨基吡啶-3-基)-1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-{[乙基(甲基)氨基]甲基}-3-(6-甲氧基吡啶并-3-基)硫醇[2,3-d]嘧啶-2,4-二酮(103mg,白色固体)，产率：31％。
[0395]
ms m/z(esi):566.2[m+1]
+
。
[0396]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ8.05(s,2h),7.50(s,1h),7.33
–
7.25(m,2h),7.21
–
7.14(m,2h),6.90(t,j＝8.0hz,2h),6.60(d,j＝8.8hz,1h),4.76(s,2h),4.14(s,2h),2.83-2.60(m,3h),2.43(d,j＝1.2hz,3h),1.23(s,3h).
[0397]
第三步
[0398]
n-(5-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-{[乙基(甲基)氨基]甲基}-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基}吡啶-2-基)氨基甲酸苯酯的制备
[0399]
将6-(6-氨基吡啶-3-基)-1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-{[乙基(甲基)氨基]甲基}-3-(6-甲氧基吡啶并-3-基)硫醇[2,3-d]嘧啶-2,4-二酮(46mg,0.08mmol)溶于二氯甲烷(4ml)，加入吡啶(19mg,0.24mmol)在冰水浴下冷却，加入氯甲酸苯酯(127mg,0.81mmol)，在氮气保护下，于0℃反应1小时。反应结束后，将反应液浓缩，得到粗品n-(5-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-{[乙基(甲基)氨基]甲基}-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基}吡啶-2-基)氨基甲酸苯酯(50mg,黄色固体)，产率：82％。
[0400]
ms m/z(esi):686.2[m+1]
+
。
[0401]
第四步
[0402]
1-(5-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-{[乙基(甲基)氨基]甲基}-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基}吡啶-2-基)-3-甲氧基脲的制备
[0403]
将n-(5-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-{[乙基(甲基)氨基]甲基}-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基}吡啶-2-基)氨基甲酸苯酯(80mg,0.12mmol)溶于四氢呋喃(2ml)，依次加入三乙胺(243mg,2.4mmol)，与邻甲基羟胺盐酸盐(150mg,1.8mmol)。反应液在60℃反应16小时。待反应结束，浓缩。浓缩液经柱层析(流动相：乙腈/水
＝3/1)纯化后得到粗品，粗品经制备柱(流动相：0.1％甲酸/乙腈/水)纯化后得到1-(5-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-{[乙基(甲基)氨基]甲基}-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基}吡啶-2-基)-3-甲氧基脲(2.16mg,白色固体)，产率：2.83％。
[0404]
ms m/z(esi):639.2[m+1]
+
。
[0405]
hplc:100.00％(214nm),100.00％(254nm).
[0406]1h nmr(400mhz,cd3od)δ8.40-8.30(m,2h),8.19(s,1h),7.98(d,j＝7.6hz,1h),7.89(d,j＝8.8hz,1h),7.56(d,j＝8.0hz,1h),7.36-7.26(m,1h),7.14(d,j＝9.2hz,1h),6.91(t,j＝8.0hz,2h),5.33(s,2h),4.17(s,3h),3.83(s,3h),2.71(s,2h),2.25(s,3h),2.04(s,2h),1.03(t,j＝6.8hz,3h).
[0407]
19
f nmr(376mhz,cdcl3)δ-112.396.
[0408]
实施例12
[0409]
1-(5-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-{[异丙基基(甲基)氨基]甲基}-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基}吡啶-2-基)-3-甲氧基脲
[0410][0411]
第一步
[0412]
n-(5-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧吡啶并-3-基)-5-[(甲基氨基)甲基]-2,4-二氧噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-基}吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的制备
[0413]
将n-[(6-{6-[(叔丁氧基羰基)氨基]吡啶-3-基}-1-(2,6-二氟苄基)-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧杂-1,2,3,4-四氢噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲基](甲基)氨基甲酸苄酯(300mg,0.39mmol)溶于甲醇(20ml)中。依次加入乙酸(10滴),钯碳(415mg,3.9mmol)(10％,50％水)，氢气球换气三次。在氢气球气氛下25℃反应16小时。反应结束后抽滤得滤液，浓缩得n-(5-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧吡啶并-3-基)-5-[(甲基氨基)甲基]-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基}吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯(296mg,白色固体)，产率：95％。
[0414]
ms m/z(esi):638.3[m+1]
+
。
[0415]
第二步
[0416]
n-(5-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-{[异丙基(甲基)氨基]甲基}-3-(6-甲氧基吡啶并-3-基)-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基}吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的制备
[0417]
将n-(5-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧吡啶并-3-基)-5-[(甲基氨基)甲基]-2,4-二氧噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-基}吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯(46mg,0.07mmol)溶于乙腈(3ml)中，在室温下依次加入碳酸钾(29mg,0.21mmol)，2-碘丙烷(36mg,0.21mmol)。反应液在80℃反应4小时。反应结束后浓缩，浓缩液经柱层析(流动相：二氯甲烷/甲醇＝94/6)纯化后得到，浓缩有机相得到n-(5-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-{[异丙基(甲基)氨基]甲基}-3-(6-甲氧基吡啶并-3-基)-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基}吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯(16mg,淡黄色固物)，产率：30％。
[0418]
ms m/z(esi):666.2[m+1]
+
。
[0419]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ8.29(d,j＝2.0hz,1h),8.16(d,j＝8.0hz,1h),8.11(d,j＝8.8hz,1h),8.00(s,1h),7.76(dd,j＝8.8,2.0hz,1h),7.33
–
7.27(m,1h),7.15(d,j＝9.0hz,1h),6.96
–
6.86(m,2h),4.14(s,3h),3.46(s,2h),2.39(s,2h),1.54(s,9h),1.27(s,6h),1.24(s,1h),1.23(s,3h).
[0420]
第三步
[0421]
6-(6-氨基吡啶-3-基)-1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-{[异丙基(甲基)氨基]甲基}-3-(6-甲氧基吡啶并-3-基)硫醇[2,3-d]嘧啶-2,4-二酮的制备
[0422]
将n-(5-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-{[异丙基(甲基)氨基]甲基}-3-(6-甲氧基吡啶并-3-基)-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基}吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯(146mg,0.21mmol)溶于二氯甲烷(2ml)与三氟乙酸(1ml)的混合溶剂中,室温下反应1h。反应结束后，混合液浓缩得到粗品6-(6-氨基吡啶-3-基)-1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-{[异丙基(甲基)氨基]甲基}-3-(6-甲氧基吡啶并-3-基)硫醇[2,3-d]嘧啶-2,4-二酮(140mg,棕色油状液体)，产率：92％。
[0423]
ms m/z(esi):580.2[m+1]
+
。
[0424]
第四步
[0425]
n-(5-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-{[异丙基(甲基)氨基]甲基}-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基))-2,4-二氧噻吩[2,3-d]嘧啶-6-基}吡啶-2-基))氨基甲酸苯酯的制备
[0426]
将6-(6-氨基吡啶-3-基)-1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-{[异丙基(甲基)氨基]甲基}-3-(6-甲氧基吡啶并-3-基)硫醇[2,3-d]嘧啶-2,4-二酮(140mg,0.24mmol)溶于二氯甲烷(4ml)，加入吡啶(57mg,0.72mmol)在冰水浴下冷却，加入氯甲酸苯酯(378mg,2.4mmol)，在氮气保护下，于0℃反应1小时。反应结束后，将反应液浓缩，得到n-(5-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-{[异丙基(甲基)氨基]甲基}-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧噻吩[2,3-d]嘧啶-6-基}吡啶-2-基)氨基甲酸苯酯(150mg,棕色油状液体)，产率：80％。
[0427]
ms m/z(esi):700.2[m+1]
+
。
[0428]
第五步
[0429]
1-(5-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-{[异丙基基(甲基)氨基]甲基}-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基}吡啶-2-基)-3-甲氧基脲的制备
[0430]
将n-(5-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-{[异丙基(甲基)氨基]甲基}-3-(6-甲氧基
哒嗪-3-基)-2,4-二氧噻吩[2,3-d]嘧啶-6-基}吡啶-2-基)氨基甲酸苯酯(150mg,0.21mmol)溶于四氢呋喃(10ml)，依次加入三乙胺(424mg,4.2mmol)，与邻甲基羟胺盐酸盐(351mg,4.2mmol)。反应液在60℃反应16小时。待反应结束，浓缩。浓缩液经柱层析(流动相：乙腈/水＝3/1)纯化后得到粗品，粗品经制备柱(流动相：0.1％三氟乙酸/乙腈/水)纯化后得到1-(5-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-{[异丙基基(甲基)氨基]甲基}-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基}吡啶-2-基)-3-甲氧基脲(5.96mg,白色固体)，产率：4.29％。
[0431]
ms m/z(esi):653.2[m+1]
+
。
[0432]
hplc:98.36％(214nm),98.93％(254nm).
[0433]1h nmr(400mhz,cd3od)δ10.93(s,1h),8.61(s,1h),8.28(s,1h),8.10(s,1h),7.81(d,j＝7.2hz,1h),7.76
–
7.68(m,1h),7.44
–
7.30(m,1h),7.22-7.15(m,1h),6.93(t,j＝8.0hz,2h),5.64
–
5.35(m,1h),5.35
–
4.98(m,1h),4.78(s,1h),4.19(s,3h),3.96
–
3.76(m,5h),2.42(s,3h),1.27(s,6h).
[0434]
实施例13
[0435]
2-[({1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-6-{6-[((甲氧氨基甲酰基)氨基]吡啶-3-基}-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基}甲基)(甲基)氨基]乙酸甲酯
[0436][0437][0438]
第一步
[0439]
(3-{[(2-溴-5-{[(2,6-二氟苯基)甲基](乙氧羰基)氨基}-4-[(6-甲氧基哒嗪-3-基)氨基甲酰基]噻吩-3-基)甲基](甲基)氨基}苯基)甲酸甲酯的制备
[0440]
将5-溴-2-{[[(2,6-二氟苯基)甲基](乙氧羰基)氨基}-4-[({3-[(甲酰氧基)甲基]苯基}(甲基)氨基)甲基]噻吩-3-甲酸(4g,6.7mmol)溶于n,n-二甲基甲酰胺(50ml)中，依次加入6-甲氧基哒嗪-3-胺(0.92g,7.3mmol)，1-丙基磷酸酐(21.32g,33.5mmol)和三乙胺(4.07g,40.2mmol)，反应液于90℃搅拌4小时。加水(500ml)淬灭反应，然后用乙酸乙酯(3x100ml)萃取。有机相合并后用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥。浓缩后得到的残留物用硅胶柱(石油醚/乙酸乙酯＝2/1)纯化得到标题产物(3-{[(2-溴-5-{[(2,6-二氟苯基)甲基](乙氧羰基)氨基}-4-[(6-甲氧基哒嗪-3-基)氨基甲酰基]噻吩-3-基)甲基](甲基)氨基}苯基)甲酸甲酯(3.2g,褐色油状物)，产率：64％。
[0441]
ms m/z(esi):704.1[m+1]
+
.
[0442]
第二步
[0443]
n-({6-溴-1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧基吡啶并-3-基)-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基}甲基)-n-甲基氨基甲酸苄酯的制备
[0444]
将(3-{[(2-溴-5-{[(2,6-二氟苯基)甲基](乙氧羰基)氨基}-4-[(6-甲氧基哒嗪-3-基)氨基甲酰基]噻吩-3-基)甲基](甲基)氨基}苯基)甲酸甲酯(3.2g,4.5mmol)溶于甲醇(40ml)和四氢呋喃(3ml)中，加入甲醇钠(50mg，0.9mmol)。反应液在60℃搅拌1小时。用浓盐酸将反应液的ph值调至6，浓缩得到的残留物用硅胶柱(二氯甲烷/甲醇＝20/1)纯化得到标题产物苄基n-({6-溴-1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧基吡啶并-3-基)-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基}甲基)-n-甲基氨基甲酸酯(2.8g，褐色油状物)，产率：84％。
[0445]
ms m/z(esi):658.1[m+1]
+
.
[0446]
第三步
[0447]
n-{[6-(6-{[((叔丁氧基)羰基]氨基}吡啶-3-基)-1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧基吡啶并-3-基)-2,4-二氧噻吩[2,3-d]嘧啶-5-基]甲基}-n-甲基氨基甲酸苄酯的制备
[0448]
将n-({6-溴-1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧基吡啶并-3-基)-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基}甲基)-n-甲基氨基甲酸苄酯(2g,3mmol)溶于甲苯(14ml)，乙醇(4ml)和水(2ml)的混合溶剂中，依次加入n-[5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼硼烷-2-基)吡啶-2-基]氨基甲酸叔丁酯(1.44g,4.5mmol)，三(二亚苄基丙酮)二钯(0.55g,0.6mmol)，2-二环己基磷-2',6'-二异丙氧基-1,1'-联苯(0.56g,1.2mmol)和无水碳酸钾(1.24g,9mmol)，加料完成后在微波反应器中于85℃搅拌1小时。反应液用100ml水淬灭，然后用乙酸乙酯(3x50ml)萃取。有机相合并后用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥。浓缩后的残留物用硅胶柱(石油醚/乙酸乙酯＝1/2)纯化得到标题产物n-{[6-(6-{[((叔丁氧基)羰基]氨基}吡啶-3-基)-1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧基吡啶并-3-基)-2,4-二氧噻吩[2,3-d]嘧啶-5-基]甲基}-n-甲基氨基甲酸苄酯(2.1g,淡褐色固体)，产率：53％。
[0449]
ms m/z(esi):772.2[m+1]
+
.
[0450]
第四步
[0451]
n-(5-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-5-[(甲基氨基)甲基]-2,4-二氧噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-基}吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的制备
[0452]
将n-{[6-(6-{[((叔丁氧基)羰基]氨基}吡啶-3-基)-1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧基吡啶并-3-基)-2,4-二氧噻吩[2,3-d]嘧啶-5-基]甲基}-n-甲基氨基甲酸苄酯
(400mg,0.52mmol)溶于四氢呋喃(20ml)中，加入钯碳(56mg,0.52mmol)和醋酸(63mg,1.04mmol)，反应液在氢气气氛下于25℃搅拌16小时。过滤，滤液浓酸，得到的残留物用硅胶柱(二氯甲烷/甲醇＝10/1)纯化得到标题产物n-(5-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-5-[(甲基氨基)甲基]-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基}吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯(150mg,白色固体)，产率：43％。
[0453]
ms m/z(esi):638.2[m+1]
+
.
[0454]
第五步
[0455]
2-({[6-(6-{[((叔丁氧基)羰基]氨基}吡啶-3-基)-1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基]甲基}(甲基)氨基)乙酸甲酯的制备
[0456]
将n-(5-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-5-[(甲基氨基)甲基]-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基}吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯(160mg,0.25mmol)溶于二氯乙烷(5ml)中，加入乙醛酸甲酯(111mg,1.25mmol)和醋酸(3mg,0.05mmol)，反应液在氮气气氛下于80℃搅拌16小时。将反应液浓缩，得到的残留物用硅胶柱(石油醚/乙酸乙酯＝1/4)纯化得到标题产物2-({[6-(6-{[((叔丁氧基)羰基]氨基}吡啶-3-基)-1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基]甲基}(甲基)氨基)乙酸甲酯(140mg,白色固体)，产率：74％。
[0457]
ms m/z(esi):710.2[m+1]
+
.
[0458]
第六步
[0459]
2-({[6-(6-氨基吡啶-3-基)-1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧噻吩并[2，3-d]嘧啶-5-基]甲基}(甲基)氨基)乙酸甲酯的制备
[0460]
将2-({[6-(6-{[((叔丁氧基)羰基]氨基}吡啶-3-基)-1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基]甲基}(甲基)氨基)乙酸甲酯(150mg,0.21mmol)溶于二氯甲烷(5ml)中，加入三氟乙酸(482mg,4.23mmol)，反应液于25℃搅拌2小时。将反应液浓缩，得到的残留物用反向柱(乙腈/水＝1/1)纯化得到标题产物基2-({[6-(6-氨基吡啶-3-基)-1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧噻吩并[2，3-d]嘧啶-5-基]甲基}(甲基)氨基)乙酸甲酯(100mg,白色固体)，产率：73％。
[0461]
ms m/z(esi):610.2[m+1]
+
.
[0462]
第七步
[0463]
2-[({1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧基吡啶并-3-基)-2,4-二氧-6-{{6-[(苯氧羰基)氨基]吡啶-3-基}噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基}甲基)(甲基)氨基]乙酸甲酯的制备
[0464]
将基2-({[6-(6-氨基吡啶-3-基)-1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基]甲基}(甲基)氨基)乙酸甲酯(100mg,0.37mmol)溶于二氯甲烷(5ml)中，在冰水浴下依次加入吡啶(39mg,0.5mmol)和氯甲酸苯酯(52mg,0.33mmol)，反应液于0℃搅拌2小时。将反应液浓缩得到标题产物基2-[({1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧基吡啶并-3-基)-2,4-二氧-6-{{6-[(苯氧羰基)氨基]吡啶-3-基}噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基}甲基)(甲基)氨基]乙酸甲酯(100mg,黄色油状物)，产率：66％。
[0465]
ms m/z(esi):730.1[m+1]
+
.
[0466]
第八步
[0467]
2-[({1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-6-{6-[((甲氧氨基甲酰基)氨基]吡啶-3-基}-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基}甲基)(甲基)氨基]乙酸甲酯的制备
[0468]
将2-[({1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧基吡啶并-3-基)-2,4-二氧-6-{{6-[(苯氧羰基)氨基]吡啶-3-基}噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基}甲基)(甲基)氨基]乙酸甲酯(100mg,0.14mmol)溶于四氢呋喃(5ml)中，加入三乙胺(278mg,2.74mmol)和盐酸邻甲基羟胺(229mg,2.74mmol)，反应液于60℃搅拌16小时。将反应液浓缩，得到的残留物用prep-hplc(乙腈/水(0.05％氨水)纯化得到标题产物基2-[({1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-6-{6-[((甲氧氨基甲酰基)氨基]吡啶-3-基}-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基}甲基)(甲基)氨基]乙酸甲酯(29mg,白色固体)，产率：28％。
[0469]
ms m/z(esi):683.1[m+1]
+
.
[0470]
hplc:91.38％(214nm),92.01％(254nm).
[0471]1h nmr(400mhz,d
6-dmso)δ10.17(s,1h),9.28(s,1h),8.47(d,j＝2.0hz,1h),8.00(dd,j＝8.8,2.4hz,1h),7.81(d,j＝8.8hz,1h),7.75(d,j＝9.2hz,1h),7.47(t,j＝7.2hz,2h),7.15(t,j＝8.0hz,2h),5.29(d,j＝61.2hz,4h),4.09(s,3h),3.87(d,j＝20.4hz,3h),3.66(s,3h),3.44(s,2h),2.20(s,3h).
[0472]
实施例14
[0473]
n-((1-(2,6-二氟苄基)-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-6-(6-(3-甲氧基脲基)吡啶-3-基)-2,4-二氧基-1,2,3,4-四氢噻吩[2,3-d]嘧啶-5-基)甲基)-2-甲氧基-n-甲基乙酰胺
[0474]
[0475]
第一步
[0476]
n-((6-溴-1-(2,6-二氟苄基)-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧基-1,2,3,4-四氢噻吩[2,3-d]嘧啶-5-基)甲基)-2-甲氧基-n-甲基乙酰胺的制备
[0477]
向6-溴-1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-5-[(甲胺基)甲基]噻吩[2,3-d]嘧啶-2,4-二酮(300mg，0.57mmol)溶于二氯甲烷(5ml)的溶液中添加三乙胺(173mg，1.71mmol)和2-甲氧基乙酰氯(93mg，0.855mmol)。反应混合液在25℃下搅拌30分钟。反应液中加入二氯甲烷(30ml)。有机相用水和食盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并浓缩得到n-({6-溴-1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧基噻吩[2,3-d]嘧啶-5-基]-甲基)-2-甲氧基-n-甲基乙酰胺(300mg，黄色固体)。产率：75％。
[0478]
ms m/z(esi):596.0[m+h]
+
。
[0479]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ7.38-7.34(m,2h),7.13(d,j＝9.2hz,1h),6.95(t,j＝8.0hz,2h),5.28(s,2h),4.96-4.76(m,2h),4.36(s,0.67h),4.19(s,3h),4.09(s,1.39h),2.82(d,j＝31.8hz,3h).
[0480]
第二步
[0481]
(5-(1-(2,6-二氟苄基)-5-((2-甲氧基-n-甲基乙酰氨基)甲基)-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧基-1,2,3,4-四氢噻吩[2,3-d]嘧啶-6-基)吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的制备
[0482]
向n-({6-溴-1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧噻吩[2,3-d]嘧啶-5-基}甲基)-2-甲氧基-n-甲基乙酰胺(300mg，0.5mmol)溶于甲苯/乙醇/水:7/2/1(10ml)的溶液中加入叔丁基[5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊烷-2-基)吡啶-2-基]氨基甲酸酯(209mg，0.65mmol)，碳酸钾(207mg,1.5mmol)、三(二亚苄-base丙酮)二钯(46mg，0.05mmol)和二环己基(2'，6'-二异丙氧基联苯-2-基)膦(24mg，0.05mmol)。将反应溶液置换氮气三次并用氮气保护，在85℃下搅拌16小时。浓缩反应液并加入二氯甲烷(30ml)。有机相用食盐水(15ml)，无水硫酸钠干燥并浓缩。浓缩所得的油状物经硅胶柱纯化(dcm/meoh：100/1至30/1)得到(5-(1-(2,6-二氟苄基)-5-((2-甲氧基-n-甲基乙酰氨基)甲基)-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧基-1,2,3,4-四氢噻吩[2,3-d]嘧啶-6-基)吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯(210mg,黄色固体)，产率：53％。
[0483]
ms m/z(esi):710.2[m+h]
+
。
[0484]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ8.23(s,1h),8.07-7.98(m,1h),7.68(d,j＝10.4hz,2h),7.44
–
7.28(m,2h),7.14(d,j＝9.2hz,1h),6.93(t,j＝8.0hz,2h),5.34(s,2h),4.94-4.77(m,2h),4.19(s,3h),4.11(s,0.68h),3.78(s,1.35h),3.30(s,3h),2.73(s,2h),2.59(s,1h),1.53(s,9h).
[0485]
第三步
[0486]
(5-(1-(2,6-二氟苄基)-5-((2-甲氧基-n-甲基乙酰氨基)甲基)-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧基-1,2,3,4-四氢噻吩[2,3-d]嘧啶-6-基)吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的制备
[0487]
将基(5-(1-(2,6-二氟苄基)-5-((2-甲氧基-n-甲基乙酰氨基)甲基)-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧基-1,2,3,4-四氢噻吩[2,3-d]嘧啶-6-基)吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯(210mg，0.30mmol)溶于二氯甲烷/三氟乙酸(4ml/1ml)的溶液在25℃下搅拌2h。反应混
合液浓缩并加入碳酸钠水溶液(10ml)，然后用二氯甲烷(3
×
30ml)萃取。合并有机相，用无水硫酸钠干燥并浓缩得到n-{[6-(6-氨基吡啶-3-基)-1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧噻吩[2,3-d]嘧啶-5-基]甲基]-2-甲氧基-n-甲基乙酰胺(160mg,黄色固体)，产率：78％。
[0488]
ms m/z(esi):610.1[m+h]
+
。
[0489]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ8.02(d,j＝9.0hz,1h),7.49
–
7.30(m,3h),7.14(d,j＝9.0hz,1h),6.93(t,j＝8.0hz,2h),6.54(t,j＝9.2hz,1h),5.34(s,2h),4.97-4.80(m,2h),4.19(s,3h),4.06(s,0.7h),3.78(s,1.3h),3.32(s,3h),2.67(d,j＝28.0hz,3h).
[0490]
第四步
[0491]
(5-(1-(2,6-二氟苄基)-5-((2-甲氧基-n-甲基乙酰氨基)甲基)-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧基-1,2,3,4-四氢噻吩[2,3-d]嘧啶-6-基)吡啶-2-基)氨基甲酸苯酯的制备
[0492]
0℃下，向n-{[6-(6-氨基吡啶-3-基)-1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧噻吩[2,3-d]嘧啶-5-基]甲基}-2-甲氧基-n-甲基乙酰胺(110mg,0.18mmol)溶于二氯甲烷(4ml)的溶液中加入吡啶(213mg,2.7mmol)和氯甲酸苯酯(84mg,0.54mmol)。将反应混合物在0℃搅拌1h。将反应溶液浓缩并用于下一步，无需其他纯化。
[0493]
ms m/z(esi):730.2[m+h]
+
。
[0494]
第五步
[0495]
n-({1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-6-{6-[(甲氧基氨甲酰)氨基]吡啶-3-基}-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧基二氧基[2,3-d]嘧啶-5-基]-甲基)-2-甲氧基-n-甲基乙酰胺的制备
[0496]
向(5-(1-(2,6-二氟苄基)-5-((2-甲氧基-n-甲基乙酰氨基)甲基)-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧基-1,2,3,4-四氢噻吩[2,3-d]嘧啶-6-基)吡啶-2-基)氨基甲酸苯酯(120mg，0.16mmol)溶于thf(4ml)的溶液中加入三乙胺(243mg，2.4mmol)和o-甲基羟胺盐酸盐(134mg.1.6mmol)。将反应混合物在50℃下搅拌16h。向反应液中加入二氯甲烷(20ml)，用水冲洗两次，盐水洗一次。有机溶液用无水硫酸钠干燥并浓缩。浓缩得到的残留物制备纯化得到n-({1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-6-{6-[(甲氧基氨甲酰)氨基]吡啶-3-基}-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧基二氧基[2,3-d]嘧啶-5-基]-甲基)-2-甲氧基-n-甲基乙酰胺(63mg，近白色固体)。产率：56.56％。
[0497]
ms m/z(esi):683.2[m+h]
+
。
[0498]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ8.24(s,1h),7.92(s,1h),7.74(s,1h),7.41
–
7.30(m,2h),7.15(d,j＝9.0hz,1h),6.94(t,j＝8.2hz,2h),5.34(s,2h),4.93(s,2h),4.19(s,3h),3.81(d,j＝20.6hz,3h),3.31(s,3h),2.68(d,j＝59.4hz,3h).
[0499]
实施例15
[0500]
n-((1-(2,6-二氟苄基)-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-6-(6-(3-甲氧基脲基)吡啶-3-基)-2,4-二氧基-1,2,3,4-四氢噻吩[2,3-d]嘧啶-5-基)甲基)-n-甲基乙酰胺
[0501][0502][0503]
第一步
[0504]
5-溴-4-(溴甲基)-2-((2,6-二氟苄基)(乙氧羰基)氨基)噻吩-3-甲酸乙酯的制备
[0505]
向5-溴-2-((2,6-二氟苄基)(乙氧羰基)氨基)-4-甲基噻吩-3-甲酸乙酯(4.00g，8.70mmol)溶于乙酸乙酯(40ml)的溶液中加入nbs(1.80g，10.40mmol)和aibn(143mg，0.80mmol)。反应混合液在80℃搅拌18小时。加入乙酸乙酯(60ml)，有机相用水和盐水洗涤两次，然后用无水na2so4干燥并浓缩得到5-溴-4-(溴甲基)-2-((2,6-二氟苄基)(乙氧羰基)氨基)噻吩-3-甲酸乙酯(6.5g，黄色油)。产率：88％。
[0506]
ms m/z(esi):542.2[m+h]
+
。
[0507]
第二步
[0508]
5-溴-4-(溴甲基)-2-((2,6-二氟苄基)(乙氧羰基)氨基)噻吩-3-甲酸乙酯的制备
[0509]
向dmf(60ml)中加入甲胺盐酸盐(11.74g，17.40mmol)和三乙胺(35.20g，34.80mmol)。反应混合液在25℃下搅拌20min，0℃下缓慢加入5-溴-4-(溴甲基)-2-((2,6-二氟苄基)(乙氧羰基)氨基)噻吩-3-甲酸乙酯(6.3g，11.6mmol)溶于dmf(20ml)的溶液，反应混合物在0℃氮气下搅拌1h。加入水(250ml)，用etoac(3
×
80ml)萃取。合并有机相，用水和盐水分别洗涤有机相，然后用无水na2so4干燥并浓缩得到粗品化合物5-溴-2-((2,6-二氟苄基)(乙氧羰基)氨基)-4-((甲胺基)甲基)噻吩-3-甲酸乙酯(7.80g，黄色油状物)。产率：40％。
[0510]
ms m/z(esi):491.1[m+h]
+
。
[0511]
第三步
[0512]
5-溴-4-({[(叔丁氧基)羰基](甲基)氨基}甲基)-2-{[(2,6-二氟苯基)甲基](乙氧羰基)氨基}噻吩-3-甲酸乙酯的制备
[0513]
向5-溴-2-((2,6-二氟苄基)(乙氧羰基)氨基)-4-((甲胺基)甲基)噻吩-3-甲酸乙酯(7.80g，15.90mmol)溶于乙酸乙酯(80ml)和水(100ml)的溶液中加入(boc)2o(5.20g，23.80mmol)和na2co3(5.10g，47.7 0mmol)。反应混合物在25℃下搅拌4h，反应液分层得到有机相。水相用etoac(2
×
80ml)萃取。合并的有机相用无水na2so4干燥并浓缩。浓缩的残留物用柱层析法(石油醚/乙酸乙酯：20/1至8/1)纯化得到5-溴-4-({[(叔丁氧基)羰基](甲基)氨基}甲基)-2-{[(2,6-二氟苯基)甲基](乙氧羰基)氨基}噻吩-3-甲酸乙酯(2.8g，黄色油状物)。产率：27％。
[0514]
ms m/z(esi):613.3[m+h]
+
。
[0515]1h nmr(400mhz,cd3od)δ7.44
–
7.34(m,1h),6.95(t,j＝8.0hz,2h),4.97(s,2h),4.58(s,2h),4.23
–
4.10(m,4h),2.61(s,3h),1.48(s,9h),1.28-1.17(m,6h).
[0516]
第四步
[0517]
5-溴-4-((叔丁氧羰基)(甲基)氨基)甲基)-2-((2,6-二氟苄基)(乙氧羰基)氨基)噻吩-3-甲酸的制备
[0518]
向5-溴-4-({[(叔丁氧基)羰基](甲基)氨基}甲基)-2-{[(2,6-二氟苯基)甲基](乙氧羰基)氨基}噻吩-3-甲酸乙酯(2.8g，4.7mmol)溶于乙醇(30ml)的溶液中加入氢氧化钾(48％的水溶液)(3.5ml)。反应混合液在65℃下搅拌16h。反应混合液浓缩。向浓缩残留物中加水(40ml)，用盐酸(2m)酸化至ph＝6-7，并用乙酸乙酯(3
×
50ml)萃取。合并的有机相用无水na2so4干燥并浓缩得到5-溴-4-((叔丁氧羰基)(甲基)氨基)甲基)-2-((2,6-二氟苄基)(乙氧羰基)氨基)噻吩-3-甲酸(2.00g，棕色固体)。产率：64％。
[0519]
ms m/z(esi):585.0[m+h]
+
。
[0520]1h nmr(400mhz,d
6-dmso)δ7.46-7.39(m,1h),7.09-7.03(m,2h),4.86(s,2h),4.48(s,2h),4.03(dd,j＝14.0,7.2hz,2h),2.59
–
2.53(m,3h),1.36(s,9h),1.06(s,3h).
[0521]
第五步
[0522]
[(2-溴-5-{[(2,6-二氟苯基)甲基](乙氧羰基)氨基}-4-[(6-甲氧基哒嗪-3-基)氨甲酰噻吩-3-基)甲基](甲基)氨基甲酸叔丁酯的制备
[0523]
将6-甲氧基吡啶-3-胺(0.48g，3.8mmol)、t3p(50％的乙酸乙酯溶液)(11.1g，17.5mmol)和三乙胺(2.1g，21mmol)分别加入到5-溴-4-((叔丁氧羰基)(甲基)氨基)甲基)-2-((2,6-二氟苄基)(乙氧羰基)氨基)噻吩-3-甲酸(2g，3.5mmol)溶于dmf(20ml)的溶液中。
将反应混合物在90℃下搅拌4h。向反应液中加入水(70ml)。用etoac(3
×
30ml)萃取。合并有机相用h2o(2
×
20ml)和盐水(20ml)洗涤，用无水na2so4干燥然后浓缩。浓缩残留物用柱层析法纯化(pe/etoac：10/1至3/1)得到[(2-溴-5-{[(2,6-二氟苯基)甲基](乙氧羰基)氨基}-4-[(6-甲氧基哒嗪-3-基)氨甲酰噻吩-3-基)甲基](甲基)氨基甲酸叔丁酯(1.1g，棕色固体)。产率：40％。
[0524]
ms m/z(esi):670.1[m+h]
+
。
[0525]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ8.37(d,j＝7.6hz,1h),7.21(dd,j＝8.4,6.4hz,1h),7.06(d,j＝9.4hz,1h),6.77(t,j＝8.0hz,2h),4.94(s,2h),4.44(s,2h),4.35(d,j＝7.2hz,2h),4.10(s,3h),2.69(s,3h),1.35(s,9h),1.29(d,j＝7.2hz,3h).
[0526]
第六步
[0527]
({6-溴-1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧噻吩[2,3-d]嘧啶-5-基}甲基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯的制备
[0528]
向[(2-溴-5-{[(2,6-二氟苯基)甲基](乙氧羰基)氨基}-4-[(6-甲氧基哒嗪-3-基)氨甲酰噻吩-3-基)甲基](甲基)氨基甲酸叔丁酯(3g，4.5mmol)溶于meoh(60ml)的溶液中加入甲醇钠(0.73g，13.5mmol)。反应混合物于25℃下搅拌1h，然后反应溶液用hcl(2m)酸化至ph＝6-7，浓缩。向浓缩残留物中加入h2o(40ml)，用etoac(3
×
30ml)萃取。合并有机相，用无水硫酸钠干燥并浓缩。浓缩残留物用柱层析法进行纯化(pe/etoac：5/1至2/1)得到产物({6-溴-1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧噻吩[2,3-d]嘧啶-5-基}甲基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(2.9g，黄色固体)。产率：90％。
[0529]
ms m/z(esi):524.0(m-100)。
[0530]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ7.39
–
7.30(m,2h),7.12(d,j＝9.2hz,1h),6.96-6.92(m,2h),5.28(s,2h),4.81(s,2h),4.18(s,3h),2.75(s,3h),1.44(s,9h).
[0531]
第七步
[0532]
6-溴-1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-5-[(甲胺基)甲基]噻吩[2,3-d]嘧啶-2,4-二酮的制备
[0533]
将({6-溴-1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧噻吩[2,3-d]嘧啶-5-基}甲基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(500mg,0.80mmol)溶于二氯甲烷/三氟乙酸(1/1)(10ml)的反应液在25℃下搅拌1h，浓缩。向浓缩残留物中加入h2o(10ml)，用饱和碳酸钠溶液碱化至ph＝8-9。水相用dcm(3
×
10ml)萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥并浓缩得到产物6-溴-1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-5-[(甲胺基)甲基]噻吩[2,3-d]嘧啶-2,4-二酮(400mg，黄色固体)。产率：85％。
[0534]
ms m/z(esi):524.0[m+h]
+
。
[0535]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ7.41-7.32(m,2h),7.14(d,j＝9.2hz,1h),7.03
–
6.88(m,2h),5.30(s,2h),4.19(s,3h),3.95(s,2h),2.43(s,3h).
[0536]
第八步
[0537]
n-({6-溴-1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧噻吩[2,3-d]嘧啶-5-基}甲基)-n-甲基乙酰胺的制备
[0538]
向6-溴-1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-5-[(甲胺基)甲基]噻吩[2,3-d]嘧啶-2,4-二酮的(350mg,0.1mmol)溶于二氯甲烷(5ml)的溶液中加入三乙胺
(339mg,3.35mmol)和乙酰氯(79mg,1mmol)反应混合液在25℃下搅拌1h。向反应混合液中加入h2o(20ml)。水相用dcm(3
×
20ml)萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥并浓缩，浓缩得到的油状物用柱层析的方法(二氯甲烷/甲醇：50/1)纯化得到产物n-({6-溴-1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧噻吩[2,3-d]嘧啶-5-基}甲基)-n-甲基乙酰胺(370mg，黄色固体)。产率：85％。
[0539]
ms m/z(esi):566.0[m+h]
+
。
[0540]1h nmr(400mhz,dmso)δ7.74(d,j＝9.2hz,1h),7.53
–
7.42(m,2h),7.16(t,j＝8.4hz,2h),5.24(m,2h),4.73(d,j＝21.2hz,2h),4.06(s,3h),2.82-2.6(m,3h),2.13-1.99(m,3h).
[0541]
第九步
[0542]
[5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊烷-2-基)吡啶-2-基]氨基甲酸叔丁酯的制备
[0543]
向(5-溴吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯(3g,10.9mmol)溶于二氧六环(30ml)的溶液中加入乙酸钾(3.2g,32.7mmol),联硼酸频那醇酯(3.4g,13mmol)和[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯二氯甲烷络合物(0.9g,1mmol).反应混合液氮气置换三次，在氮气保护下，在100℃下搅拌2h。向反应混合液中加入二氯甲烷(40ml)，过滤，滤液浓缩。浓缩得到的油状物用柱层析的方法(石油醚/乙酸乙酯：8/1至2/1)纯化得到产物(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊烷-2-基)吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯(1.70g，黄色固体)。产率：44％。
[0544]
ms m/z(esi):321.2[m+h]
+
。
[0545]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ9.18(s,1h),8.69(dd,j＝1.6,1.0hz,1h),8.07
–
7.93(m,2h),1.57(s,9h),1.39
–
1.30(m,12h).
[0546]
第十步
[0547]
(5-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-5-[(n-甲基乙酰胺基)甲基]-2,4-二氧噻吩[2,3-d]嘧啶-6-基]-吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的制备
[0548]
向n-({6-溴-1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧噻吩[2,3-d]嘧啶-5-基}甲基)-n-甲基乙酰胺(700mg,0.04mmol)溶于甲苯/乙醇/水:7/2/1(14.5ml)的溶液中加入叔丁基[5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊烷-2-基)吡啶-2-基]氨基甲酸酯(518mg,1.61mmol)，碳酸钾(521mg,3.72mmol)、三(二亚苄-base丙酮)二钯(114mg,0.124mmol)和二环己基(2',6'-二异丙氧基联苯-2-基)膦(58mg,0.124mmol)。将反应溶液置换氮气三次并用氮气保护，在85℃下搅拌16小时。浓缩反应液并加入二氯甲烷(30ml)。有机相用食盐水(15ml)，无水硫酸钠干燥并浓缩。浓缩所得的油状物经硅胶柱纯化(dcm/meoh：70/1至50/1)得到基(5-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-5-[(n-甲基乙酰胺基)甲基]-2,4-二氧噻吩[2,3-d]嘧啶-6-基]-吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯(590mg,黄色固体)。产率：63％。
[0549]
ms m/z(esi):680.2[m+h]
+
。
[0550]1h nmr(400mhz,cdc3)δ8.24(d,j＝1.8hz,1h),8.08-8.00(m,1h),7.73
–
7.61(m,2h),7.44
–
7.32(m,2h),7.16(d,j＝9.2hz,1h),6.98-6.93(m,2h),5.36(s,2h),4.88(d,j＝73.2hz,2h),4.21(s,3h),2.75(s,2h),2.61(s,1h),2.02(s,1h),1.79(s,2h),1.56(d,j＝2.2hz,9h).
[0551]
第十一步
[0552]
n-{[6-(6-氨基吡啶-3-基)-1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧噻吩[2,3-d]嘧啶-5-基]甲基}-n-甲基乙酰胺的制备
[0553]
将(5-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-5-[(n-甲基乙酰胺基)甲基]-2,4-二氧噻吩[2,3-d]嘧啶-6-基]-吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯(540mg,0.66mmol)溶于二氯甲烷/三氟乙酸(10ml/5ml)的溶液在25℃下搅拌1h。反应混合液浓缩并加入碳酸钠水溶液(10ml)，然后用二氯甲烷(3
×
20ml)萃取。合并有机相，用无水硫酸钠干燥并浓缩得到n-{[6-(6-氨基吡啶-3-基)-1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧噻吩[2,3-d]嘧啶-5-基]甲基}-n-甲基乙酰胺(420mg，黄色固体)。产率：90％。
[0554]
ms m/z(esi):580.2[m+h]
+
。
[0555]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ8.03(d,j＝4.4hz,1h),7.45-7.32(m,3h),7.14(d,j＝9.1hz,1h),6.93(t,j＝8.0hz,2h),6.55-6.50(m,1h),5.32(d,j＝13.8hz,2h),5.05
–
4.63(m,4h),4.19(s,3h),2.72(s,2h),2.62(s,1h),1.98(s,1h),1.78(s,2h).
[0556]
第十二步
[0557]
(5-(1-(2,6-二氟苄基)-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-5-((n-甲基乙酰氨基)甲基)-2,4-二氧基-1,2,3,4-四氢噻吩[2,3-d]嘧啶-6-基)吡啶-2-基)氨基甲酸苯酯的制备
[0558]
0℃下，向n-{[6-(6-氨基吡啶-3-基)-1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧噻吩[2,3-d]嘧啶-5-基]甲基}-n-甲基乙酰胺(100mg,0.17mmol)溶于二氯甲烷(4ml)的溶液加入吡啶(201mg,2.55mmol)和氯甲酸苯酯(80mg,0.51mmol)。将反应混合物在0℃搅拌1h。将反应溶液浓缩并用于下一步，无需其他纯化。
[0559]
ms m/z(esi):700.1[m+h]
+
。
[0560]
第十三步
[0561]
n-({1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-6-{6-[(甲氧基氨甲酰)氨基]吡啶-3-基}-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧噻吩[2,3-d]嘧啶-5-基}甲基)-n-甲基乙酰胺的制备
[0562]
向(5-(1-(2,6-二氟苄基)-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-5-((n-甲基乙酰氨基)甲基)-2,4-二氧基-1,2,3,4-四氢噻吩[2,3-d]嘧啶-6-基)吡啶-2-基)氨基甲酸苯酯(170mg,0.24mmol)溶于thf(5ml)的溶液中加入三乙胺(364mg,3.6mmol)和o-甲基羟胺盐酸盐(200mg，2.4mmol)。将反应混合物在50℃下搅拌16h。向反应液中加入二氯甲烷(20ml)，用水冲洗两次，盐水洗一次。有机溶液用无水硫酸钠干燥并浓缩。浓缩得到的残留物制备纯化得到n-({1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-6-{6-[(甲氧基氨甲酰)氨基]吡啶-3-基}-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧噻吩[2,3-d]嘧啶-5-基}甲基)-n-甲基乙酰(47mg，近白固体)。产率：30％。
[0563]
ms m/z(esi):653.2[m+h]
+
。
[0564]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ8.33(d,j＝17.0hz,1h),8.19(s,1h),7.94(d,j＝47.2hz,1h),7.69-7.62(m,1h),7.43
–
7.29(m,2h),7.15(d,j＝9.2hz,1h),6.93(t,j＝8.0hz,2h),5.34(s,2h),4.98(s,2h),4.20(s,3h),3.84(d,j＝3.4hz,3h),2.74(s,2h),2.60(s,1h),2.01(s,1h),1.76(s,2h).
[0565]
实施例16
[0566]
5-n-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-[(二甲氨基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧噻吩[2,3-d]嘧啶-6-基}-2-n-甲基吡啶-2,5-二甲酰胺
[0567][0568]
第一步
[0569]
6-(甲氨基甲酰)吡啶-3-甲酸甲酯的制备
[0570]
将5-(甲氧羰基)吡啶-2-甲酸(500mg,2.76mmol)，),hatu(2.10g,5.52mmol)和三乙胺(878mg,8.28mmol)溶解在二氯甲烷(20ml)中，接着加入甲胺盐酸盐(372mg,5.52mmol)。反应在室温下过夜。lcms监测反应完成后。减压浓缩溶剂后得到粗产品，经过硅胶柱(石油醚/乙酸乙酯＝30％)纯化后得6-(甲氨基甲酰)吡啶-3-甲酸甲酯(150mg，白色固体)，产率：27％。
[0571]
ms m/z(esi):195.2[m+1]
+
。
[0572]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ9.13(d,j＝1.6hz,1h),8.44(dd,j＝8.0,2.0hz,1h),8.28(d,j＝8.0hz,1h),8.05(s,1h),3.98(s,3h),3.06(d,j＝5.2hz,3h).
[0573]
第二步
[0574]
6-(甲基氨甲酰)吡啶-3-甲酸的制备
[0575]
将6-(甲氨基甲酰)吡啶-3-甲酸甲酯(120mg,0.62mmol)溶解在四氢呋喃(10ml)和水(3ml),接着加入一水合氢氧化锂(78mg,1.86mmol)。反应在室温条件下搅拌3h。lcms监测反应结束后用1n的盐酸将ph调到4-5，接着用二氯甲烷萃取三次，有机相用饱和食盐水洗一次，无水硫酸钠干燥，过滤后减压浓缩后得产物6-(甲基氨甲酰)吡啶-3-甲酸(100mg，白色固体)，产率：85％。
[0576]
ms m/z(esi):181.2[m+1]
+
。
[0577]1h nmr(400mhz,d
6-dmso)δ13.68(s,1h),9.07(dd,j＝2.0,0.8hz,1h),8.94(d,j＝4.8hz,1h),8.43(dd,j＝8.0,2.0hz,1h),8.13(dd,j＝8.0,0.8hz,1h),2.83(d,j＝4.8hz,3h).
[0578]
第三步
[0579]
2-n-甲基吡啶-2,5-二甲酰胺的制备
[0580]
将6-(甲基氨甲酰)吡啶-3-甲酸(1.50g,8.33mmol)溶解在dmf(10ml)，接着加入hatu(4.75g,12.50mmol)和dipea(3.23g,24.99mmol)，室温搅拌10分钟后加入nh4cl
(308mg,5.76mmol)。反应在室温下搅拌过夜。lcms监测反应完成后，过滤掉固体，经过c18(乙腈/水＝20％)纯化，冻干掉溶剂后得到2-n-甲基吡啶-2,5-二甲酰胺(600mg,白色固体)，产率：38％。
[0581]
ms m/z(esi):180.1[m+1]
+
。
[0582]
第四步
[0583]
n-({1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-6-[6-(甲基氨甲酰基)吡啶-3-氨基]-2,4-二氧噻吩[2,3-d]嘧啶-5-基]-甲基氨基甲酸叔丁酯的制备
[0584]
将n-({6-溴-1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧噻吩[2,3-d]嘧啶-5-基]甲基)-n-甲基氨基甲酸叔丁酯(300mg,0.48mmol)，2-n-甲基吡啶-2,5-二甲酰胺(172mg,0.96mmol)，反式-(1r，2r)n，n'-二甲基环己烷-1,2-二胺(29mg,0.21mmol)，cui(123mg,0.58mmol)和磷酸钾(122mg,0.58mmol)溶解在n,n-二甲基甲酰胺(20ml)。反应在置换过氮气后在100℃的微波条件下反应1h。lcms监测反应完成后，向反应中加入20ml水，二氯甲烷萃取三次，二氯甲烷层用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤后浓缩掉溶剂得到粗产品。粗产品经过c18反向柱纯化后得到n-({1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-6-[6-(甲基氨甲酰基)吡啶-3-氨基]-2,4-二氧噻吩[2,3-d]嘧啶-5-基]-甲基氨基甲酸叔丁酯(25mg,白色固体)，产率：5％。
[0585]
ms m/z(esi):723.1[m+1]
+
。
[0586]
第五步
[0587]
5-n-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-5-[(甲胺基)甲基]-2,4-二氧噻吩[2,3-d]嘧啶-6-基]-2-n-甲基吡啶-2,5-二甲酰胺的制备
[0588]
将n-({1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-6-[6-(甲基氨甲酰基)吡啶-3-氨基]-2,4-二氧噻吩[2,3-d]嘧啶-5-基]-甲基氨基甲酸叔丁酯(25mg,0.03mmol)溶解在烷二氯甲烷(4ml)和三氟乙酸(2ml)中。反应在室温下搅拌2h。lcms显示反应完成后，减压浓缩掉溶剂后得到5-n-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-5-[(甲胺基)甲基]-2,4-二氧噻吩[2,3-d]嘧啶-6-基]-2-n-甲基吡啶-2,5-二甲酰胺(18mg,淡黄色固体)，产率：57％。
[0589]
ms m/z(esi):623.2[m+1]
+
。
[0590]
第六步
[0591]
5-n-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-[(二甲氨基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧噻吩[2,3-d]嘧啶-6-基}-2-n-甲基吡啶-2,5-二甲酰胺的制备
[0592]
将5-n-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-5-[(甲胺基)甲基]-2,4-二氧噻吩[2,3-d]嘧啶-6-基]-2-n-甲基吡啶-2,5-二甲酰胺(11mg,0.02mmol)溶解在甲醇(5ml)中，接着加入3滴乙酸和多聚甲醛(3mg,0.1mmol)。反应在室温下搅拌0.5h后，接着加入氰基硼氢化钠(3mg,0.04mmol)。反应在室温下搅拌1h。lcms监测反应完成后，加入水10ml，用二氯甲烷萃取三次，饱和食盐水洗一次，无水硫酸钠能干燥，过滤后，减压浓缩掉溶剂得到粗产品，粗产品经过制备(乙腈/水/0.1％的三氟乙酸)得到5-n-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-[(二甲氨基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧噻吩[2,3-d]嘧啶-6-基}-2-n-甲基吡啶-2,5-二甲酰胺的制备(3mg,白色固体)，产率：23％。
[0593]
ms m/z(esi):637.1[m+1]
+
。
[(二甲胺基)甲基]-3-{[6-(甲基磺胺基)哒嗪-3-基]氨甲酰基}-5-(4-硝基苯基)噻吩-2-基}氨基甲酸乙酯(400mg，黄色固体)，产率：62％。
[0607]
ms m/z(esi):643.1[m+1]
+
.
[0608]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ13.97(s,1h),8.44(d,j＝9.2hz,1h),8.29(d,j＝8.4hz,2h),7.48(d,j＝8.4hz,2h),7.31(d,j＝9.2hz,1h),7.09-7.16(m,1h),6.74(t,j＝7.6hz,2h),5.02(s,2h),4.23(s,2h),3.50(s,2h),2.70(s,3h),2.20(s,6h),1.56(s,3h).
[0609]
第三步
[0610]
1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-[(二甲胺基)甲基]-3-[6-(甲基磺胺基)哒嗪-3-基]-6-(4-硝基苯基)噻吩[2,3-d]嘧啶-2,4-二酮的制备
[0611]
将n-[(2,6-二氟苯基)甲基]-n-{4-[(二甲胺基)甲基]-3-{[6-(甲基磺胺基)哒嗪-3-基]氨甲酰基}-5-(4-硝基苯基)噻吩-2-基}氨基甲酸乙酯(200mg，0.31mmol)溶解在甲醇(10ml)中，在0℃下往反应液中加入甲氧基钠(50mg，0.93mmol)。反应液在25℃下反应16小时。反应结束后，往反应液中加入水(20ml)，然后用乙酸乙酯(3x20ml)萃取，并用饱和食盐水洗涤有机相。有机相合并后用无水硫酸钠干燥，旋干溶剂后得到1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-[(二甲胺基)甲基]-3-[6-(甲基磺胺基)哒嗪-3-基]-6-(4-硝基苯基)噻吩[2,3-d]嘧啶-2,4-二酮(180mg，黄色固体)，产率：88％。
[0612]
ms m/z(esi):597.2[m+1]
+
.
[0613]
第四步
[0614]
6-(4-氨基苯基)-1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-[(二甲氨基)甲基]-3-[6-(甲基磺胺基)哒嗪-3-基]噻吩[2,3-d]嘧啶-2,4-二酮的制备
[0615]
将1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-[(二甲胺基)甲基]-3-[6-(甲基磺胺基)哒嗪-3-基]-6-(4-硝基苯基)噻吩[2,3-d]嘧啶-2,4-二酮(80mg，0.13mmol)溶于甲醇(5ml)中，加入铁粉(363mg，6.5mmol)和饱和氯化铵溶液(5ml)。反应液在25℃反应4小时。反应结束后，过滤，收集滤液，旋干溶液得到粗产品。粗产品用二氯甲烷(3x20ml)进行萃取，并用饱和食盐水洗涤有机相。有机相合并后用无水硫酸钠干燥，旋干溶剂后得到6-(4-氨基苯基)-1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-[(二甲氨基)甲基]-3-[6-(甲基磺胺基)哒嗪-3-基]噻吩[2,3-d]嘧啶-2,4-二酮(220mg，黄色固体)，产率：71％。
[0616]
ms m/z(esi):567.1[m+1]
+
.
[0617]
第五步
[0618]
1-(4-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-[(二甲氨基)甲基]-3-[6-(甲基磺胺基)哒嗪-3-基]-2,4-二氧噻吩[2,3-d]嘧啶-6-基}苯基)-3-甲氧基脲的制备
[0619]
将6-(4-氨基苯基)-1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-[(二甲氨基)甲基]-3-[6-(甲基磺胺基)哒嗪-3-基]噻吩[2,3-d]嘧啶-2,4-二酮(40mg，0.09mmol)溶于四氢呋喃(10ml)中，加入三乙胺(30mg，0.18mmol)和4-硝基苯基-n-甲氧基氨基甲酸酯(27mg，0.27mmol)。反应液在25℃反应4小时。反应结束后，旋干溶剂得到粗产品。粗产品经过反相柱层析(乙腈/水(0.1％三氟乙酸))分离纯化得到1-(4-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-[(二甲氨基)甲基]-3-[6-(甲基磺胺基)哒嗪-3-基]-2,4-二氧噻吩[2,3-d]嘧啶-6-基}苯基)-3-甲氧基脲(18.4mg，白色固体)，产率：40％。
[0620]
ms m/z(esi):640.2[m+1]
+
.
[0621]
hplc:97.67％(214nm),97.85％(254nm).
[0622]1h nmr(400mhz,cd3od)δ7.82(d,j＝9.2hz,1h),7.73(d,j＝8.4hz,2h),7.57(d,j＝9.2hz,1h),7.45(dd,j＝8.4,6.4hz,1h),7.40(d,j＝8.4hz,2h),7.03(t,j＝8.4hz,2h),5.44(s,2h),4.46(s,2h),3.73(s,3h),3.31(s,3h),2.72(s,6h).
[0623]
19
f nmr(376mhz,cd3od)δ-77.10,-114.53
–‑
114.80.
[0624]
实施例18
[0625]
1-(4-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-[(二甲胺基)甲基]-3-(6-甲基磺酰吡啶-3-基)-2,4-二氧噻吩[2,3-d]嘧啶-6-基}苯基)-3-甲氧基脲
[0626][0627]
将1-(4-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-[(二甲氨基)甲基]-3-[6-(甲基磺胺基)哒嗪-3-基]-2,4-二氧噻吩[2,3-d]嘧啶-6-基}苯基)-3-甲氧基脲(40mg,0.06mmol)溶解在二氯甲烷(5ml)中，接着加入间氯过氧苯甲酸(21mg,0.12mmol)。反应在室温下反应1h。lcms显示反应完成后，向反应液中加入水(20ml)，接着用二氯甲烷萃取三次，饱和食盐水洗一次二氯甲烷层，无水硫酸钠干燥，过滤后减压浓缩得到粗产品。粗产品经过制备(乙腈/水/0.1％甲酸)得到1-(4-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-[(二甲胺基)甲基]-3-(6-甲基磺酰吡啶-3-基)-2,4-二氧噻吩[2,3-d]嘧啶-6-基}苯基)-3-甲氧基脲(6mg,白色固体)，产率：15％。
[0628]
ms m/z(esi):672.2[m+1]
+
。
[0629]
hplc:100％(214nm),99.78％(254nm).
[0630]1h nmr(400mhz,cd3od)δ8.45(d,j＝8.8hz,1h),8.14(d,j＝8.8hz,1h),7.74(d,j＝8.8hz,2h),7.48(d,j＝8.7hz,2h),7.43-7.45(m,1h),7.05(t,j＝8.4hz,2h),5.47(s,2h),5.24(s,2h),3.74(s,3h),3.24(s,6h),3.08(s,3h).
[0631]
19
f nmr(376mhz,cd3od)δ-77.01,-114.49
‑‑
114.71.
[0632]
实施例19
[0633]
1-(4-(3-(6-乙酰基哒嗪-3-基)-1-(2,6-二氟苄基)-5-((二甲氨基)甲基)-2,4-二酮-1,2,3,4-四氢噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基)苯基)-3-甲氧基脲
[0634][0635][0636]
第一步
[0637]
6-(1-乙氧基乙烯基)哒嗪-3-氨基的制备
[0638]
将6-氯哒嗪-3-氨基(400mg,3.09mmol)与三丁基(1-乙氧基乙烯基)锡烷(2.23g,6.18mmol)，双三苯基磷二氯化钯(480mg,0.62mmol)溶于n,n-二甲基甲酰胺(10ml)。氮气氛围下，反应液于25℃反应6小时。反应结束后抽滤，滤液用rp-c18柱柱层析法(乙腈/水/0.01％甲酸：50/50)纯化，得到6-(1-乙氧基乙烯基)哒嗪-3-氨基(180mg,棕色固体)，收率：32％。
[0639]
ms m/z(esi):166.2[m+1]
+
。
[0640]
第二步
[0641]
1-(6-氨基哒嗪-3-基)乙基-1-酮的制备
[0642]
将6-(1-乙氧基乙烯基)哒嗪-3-氨基(170mg,1.03mmol)溶于丙酮(20ml)。然后滴加2m的盐酸(5ml)。反应液在25℃反应1小时。反应液浓缩后得到粗品1-(6-氨基哒嗪-3-基)乙基-1-酮(140mg,棕色固体)，产率：89％。
[0643]
ms m/z(esi):138.1[m+1]
+
。
[0644]
第三步(3-((6-乙酰基哒嗪-3-基)氨基甲酰)-4-((二甲氨基)甲基)-5-(4-硝基苯基)噻吩-2-基)(2,6-二氟苄基)氨基甲酸乙酯的制备
[0645]
将2-{[(2,6-二氟苯基)甲基](乙氧基乙烯基)胺}-4-[(二甲氨基)甲基]-5-(4-硝基苯基)噻吩-3-甲酸(475mg,0.88mmol)溶于n,n-二甲基甲酰胺dmf(10ml)，然后依次加入
1-(6-氨基哒嗪-3-基)乙基-1-酮(120mg,0.88mmol)，1-丙基磷酸酐(1.4g,4.4mmol)，n,n-二异丙基乙胺(568.6mg,4.4mmol)。反应液在85℃反应16小时。用乙酸乙酯(3x30ml)萃取，有机相合并后用无水硫酸钠干燥，浓缩后用柱层析法(石油醚/乙酸乙酯：60/40)纯化得到(3-((6-乙酰基哒嗪-3-基)氨基甲酰)-4-((二甲氨基)甲基)-5-(4-硝基苯基)噻吩-2-基)(2,6-二氟苄基)氨基甲酸乙酯(280mg,黄色油状)，产率：45％。
[0646]
ms m/z(esi):639.2[m+1]
+
。
[0647]
第四步
[0648]
3-(6-乙酰基哒嗪-3-基)-1-(2,6-二氟苄基)-5-((二甲氨基)甲基)-6-(4-硝基苯)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2,4(1h,3h)-二酮的制备
[0649]
将(3-((6-乙酰基哒嗪-3-基)氨基甲酰)-4-((二甲氨基)甲基)-5-(4-硝基苯基)噻吩-2-基)(2,6-二氟苄基)氨基甲酸乙酯(250mg,0.39mmol)溶于n,n-二甲基甲酰胺(5ml)，然后加入30％的甲醇钠甲醇溶液(0.2ml)。反应液在25℃反应16小时。用乙酸乙酯(3x30ml)萃取，有机相合并后用无水硫酸钠干燥，浓缩后用柱层析法(石油醚/乙酸乙酯：60/40)纯化得到3-(6-乙酰基哒嗪-3-基)-1-(2,6-二氟苄基)-5-((二甲氨基)甲基)-6-(4-硝基苯)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2,4(1h,3h)-二酮(120mg,黄色固体)，产率：48％。
[0650]
ms m/z(esi):593.1[m+1]
+
。
[0651]
第五步
[0652]
3-(6-乙酰基哒嗪-3-基)-6-(4-氨基苯基)-1-(2,6-二氟苄基)-5-((二甲氨基)甲基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2,4(1h,3h)-二酮的制备
[0653]
将3-(6-乙酰基哒嗪-3-基)-1-(2,6-二氟苄基)-5-((二甲氨基)甲基)-6-(4-硝基苯)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2,4(1h,3h)-二酮(100mg,0.17mmol)溶于乙醇和水的混合溶液后(4/1，15ml)，然后加入铁粉(47.5mg,0.85mmol)，氯化铵(90mg,1.7mmol)。反应液在80℃反应1小时。用乙酸乙酯(3x10ml)萃取，有机相合并后用无水硫酸钠干燥，浓缩后用柱层析法(石油醚/乙酸乙酯：80/20)纯化得到3-(6-乙酰基哒嗪-3-基)-6-(4-氨基苯基)-1-(2,6-二氟苄基)-5-((二甲氨基)甲基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2,4(1h,3h)-二酮(80mg,黄色固体)，产率：70％。
[0654]
ms m/z(esi):563.1[m+1]
+
。
[0655]
第六步
[0656]
1-(4-(3-(6-乙酰基哒嗪-3-基)-1-(2,6-二氟苄基)-5-((二甲氨基)甲基)-2,4-二酮-1,2,3,4-四氢噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基)苯基)-3-甲氧基脲的制备
[0657]
将3-(6-乙酰基哒嗪-3-基)-6-(4-氨基苯基)-1-(2,6-二氟苄基)-5-((二甲氨基)甲基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2,4(1h,3h)-二酮(50mg,0.09mmol)溶于四氢呋喃(1ml)，然后加入三乙胺(27.3mg,0.27mmol)，盐酸邻甲基羟胺(22.9mg,0.11mmol)。反应液在25℃反应1小时。反应结束后，减压除去溶剂，浓缩后经过hplc制备纯化得到1-(4-(3-(6-乙酰基哒嗪-3-基)-1-(2,6-二氟苄基)-5-((二甲氨基)甲基)-2,4-二酮-1,2,3,4-四氢噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基)苯基)-3-甲氧基脲(13.7mg,白色固体)，产率：24％。
[0658]
ms m/z(esi):636.2[m+1]
+
。
[0659]
hplc:97.10％(214nm),96.60％(254nm).
[0660]1h nmr(400mhz,meod)δ8.44(d,j＝8.8hz,1h),8.01(d,j＝8.8hz,1h),7.75(d,j
＝8.7hz,2h),7.47-7.42(m,3h),7.06(t,j＝8.4hz,2h),5.47(s,2h),4.49(s,2h),3.75(s,3h),2.87(s,3h),2.74(s,6h).
[0661]
实施例20
[0662]
6-(1-(2,6-二氟苄基)-5-((二甲基氨基)甲基)-6-(4-(3-甲氧基脲基)苯基)-2,4-二氧代-1,4-二氢噻吩并[2,3-d]嘧啶-3(2h)-基)-n-甲基哒嗪-3-甲酰胺
[0663][0664]
第一步
[0665]
6-氨基哒嗪-3-甲酸甲酯的制备
[0666]
将6-氯哒嗪-3-胺(300mg,2.32mmol)溶于甲醇(10ml)中，依次加入[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(ii)(192mg,0.23mmol)和三乙胺(1.17g,11.60mmol)。加料完毕后，反应液在一氧化碳保护下，在80℃搅拌8小时。反应完成后加入水(10ml)淬灭，用二氯甲烷(3x30ml)萃取，合并水相冻干后得到6-氨基哒嗪-3-甲酸甲酯(239mg,黄色固体)，产率：67％。
[0667]
ms m/z(esi):154.2[m+1]
+
。
[0668]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ7.76(d,j＝9.2hz,1h),7.23(s,2h),6.83(d,j＝9.2hz,1h),3.85(s,3h).
[0669]
第二步
[0670]
6-(2-(((2,6-二氟苄基)(乙氧基羰基)氨基)-4-((二甲基氨基)甲基)-5-(4-硝基苯基)噻吩-3-甲酰胺基)哒嗪-3-甲酸甲酯的制备
[0671]
将2-((2,6-二氟苄基)(乙氧羰基)氨基)-4-((二甲基氨基)甲基)-5-(4-硝基苯基)噻吩-3-甲酸(400mg,0.77mmol)溶于dmf(10ml)中，依次加入6-氨基哒嗪-3-甲酸甲酯(118mg,0.77mmol)，丙基膦酸酐(735mg,2.31mmol)和n，n-二异丙基乙胺(498mg,3.85mmol)。加料完毕后，反应液在氮气保护下，于90℃搅拌8小时。反应完成后加入水
1,4-二氢噻吩并[2,3-d]嘧啶-3(2h)-基)-n-甲基哒嗪-3-甲酰胺(61mg,0.10mmol)溶于乙醇(3ml)和水(3ml),加入铁粉(17mg,0.30mmol)和氯化铵(16mg,0.30mmol)。加料完毕后，反应液在氮气保护下，于80℃搅拌1小时。反应完成后用二氯甲烷萃取(3x20ml),合并有机相，用无水硫酸钠干燥、过滤和浓缩后得到6-[6-(4-氨基苯基)-1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-[(二甲基氨基)甲基]-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-3-基]-n-甲基哒嗪-3-甲酰胺(50mg,黄色固体)，产率：86％。
[0687]
ms m/z(esi):578.2[m+1]
+
。
[0688]
第六步
[0689]
6-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-[(二甲基氨基)甲基]-6-{4-[(甲氧基氨基甲酰基)氨基]苯基}-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-3-基}-n-甲基哒嗪-3-甲酰胺的制备
[0690]
将6-[6-(4-氨基苯基)-1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-[(二甲基氨基)甲基]-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-3-基]-n-甲基哒嗪-3-甲酰胺(61mg,0.11mmol)溶于四氢呋喃(3ml)中，加入三乙胺(32mg,0.32mmol)和4-硝基苯基甲氧基氨基甲酸酯(25mg,0.12mmol)。加料完毕后，反应液在氮气保护下，于25℃搅拌8小时。反应结束后将反应液浓缩，浓缩液经制备柱纯化后得到6-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-[(二甲基氨基)甲基]-6-{4-[(甲氧基氨基甲酰基)氨基]苯基}-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-3-基}-n-甲基哒嗪-3-甲酰胺(2mg,白色固体)，产率：3％。
[0691]
ms m/z(esi):651.2[m+1]
+
。
[0692]
hplc:99.24％(214nm),98.48％(254nm).
[0693]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ8.53(s,1h),8.14(d,j＝5.4hz,1h),7.71-7.66(m,2h),7.38-7.32(m,2h),7.22(s,1h),6.96
–
6.92(m,2h),5.36(s,3h),4.54(s,2h),3.85(s,3h),3.12(d,j＝5.0hz,4h),2.72(s,6h).
[0694]
实施例21
[0695]
6-(1-(2,6-二氟苄基)-5-((二甲基氨基)甲基)-6-(4-(3-甲氧基脲基)苯基)-2,4-二氧代-1,4-二氢噻吩并[2,3-d]嘧啶-3(2h)-基)哒嗪-3-甲酸甲酯
[0696][0697]
第一步
[0698]
6-氨基哒嗪-3-甲酸甲酯的制备
[0699]
将6-氯哒嗪-3-胺(300mg,2.32mmol)溶于甲醇(10ml)中，依次加入[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(ii)(192mg,0.23mmol)和三乙胺(1.17g,11.60mmol)。加料完毕后，反应液在一氧化碳保护下，在80℃搅拌8小时。反应完成后加入水(10ml)淬灭，用二氯甲烷(3x30ml)萃取，合并水相冻干后得到6-氨基哒嗪-3-甲酸甲酯(239mg,黄色固体)，产率：67％。
[0700]
ms m/z(esi):154.2[m+1]
+
。
[0701]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ7.76(d,j＝9.2hz,1h),7.23(s,2h),6.83(d,j＝9.2hz,1h),3.85(s,3h).
[0702]
第二步
[0703]
6-(2-(((2,6-二氟苄基)(乙氧基羰基)氨基)-4-((二甲基氨基)甲基)-5-(4-硝基苯基)噻吩-3-甲酰胺基)哒嗪-3-甲酸甲酯的制备
[0704]
将2-((2,6-二氟苄基)(乙氧羰基)氨基)-4-((二甲基氨基)甲基)-5-(4-硝基苯基)噻吩-3-甲酸(400mg,0.77mmol)溶于dmf(10ml)中，依次加入6-氨基哒嗪-3-甲酸甲酯(118mg,0.77mmol)，丙基膦酸酐(735mg,2.31mmol)和n，n-二异丙基乙胺(498mg,3.85mmol)。加料完毕后，反应液在氮气保护下，于90℃搅拌8小时。反应完成后加入水(10ml)淬灭，用乙酸乙酯(3x30ml)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(3x20ml)洗涤、无水硫酸钠干燥、过滤和浓缩。浓缩液经柱层析(流动相：50％乙酸乙酯/50％石油醚)纯化后得到6-(2-(((2,6-二氟苄基)(乙氧基羰基)氨基)-4-((二甲基氨基)甲基)-5-(4-硝基苯基)噻吩-3-甲酰胺基)哒嗪-3-甲酸甲酯(362mg,黄色固体)，产率：72％。
[0705]
ms m/z(esi):655.1[m+1]
+
。
[0706]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ14.90(s,1h),8.72(d,j＝9.6hz,1h),8.31(d,j＝8.4hz,2h),8.16(d,j＝9.6hz,1h),7.50(d,j＝8.4hz,2h),7.09(s,1h),6.72(s,2h),5.03(s,2h),4.28-4.22(m,2h),4.06(s,3h),3.54(s,2h),2.23(s,6h),1.70(s,3h).
[0707]
第三步
[0708]
6-(1-(2,6-二氟苄基)-5-((二甲基氨基)甲基)-6-(4-硝基苯基)-2,4-二氧代-1,4-二氢噻吩并[2,3-d]嘧啶-3(2h)-基)哒嗪-3-甲酸的制备
[0709]
将6-(2-(((2,6-二氟苄基)(乙氧基羰基)氨基)-4-((二甲基氨基)甲基)-5-(4-硝基苯基)噻吩-3-甲酰胺基)哒嗪-3-甲酸甲酯(166mg,0.25mmol)溶于甲醇(5ml)中,然后加入甲醇钠(68mg,1.27mmol)。加料完毕后，反应液在氮气保护下，于25℃搅拌8小时。反应结束后经反相柱层析(流动相：50％乙腈/50％水)纯化后得到6-(1-(2,6-二氟苄基)-5-((二甲基氨基)甲基)-6-(4-硝基苯基)-2,4-二氧代-1,4-二氢噻吩并[2,3-d]嘧啶-3(2h)-基)哒嗪-3-甲酸(130mg,黄色固体)，产率：86％。
[0710]
ms m/z(esi):595.2[m+1]
+
。
[0711]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.35(s,1h),8.33(s,3h),8.00(d,j＝8.4hz,2h),7.52-7.45(m,2h),7.16(t,j＝8.2hz,2h),2.54(s,1h),2.52(s,1h),2.09(s,6h).
[0712]
第四步
[0713]
6-(1-(2,6-二氟苄基)-5-((二甲基氨基)甲基)-6-(4-硝基苯基)-2,4-二氧代-1,4-二氢噻吩并[2,3-d]嘧啶-3(2h)-基)哒嗪-3-甲酸甲酯的制备
[0714]
将6-(1-(2,6-二氟苄基)-5-((二甲基氨基)甲基)-6-(4-硝基苯基)-2,4-二氧代-1,4-二氢噻吩并[2,3-d]嘧啶-3(2h)-基)哒嗪-3-甲酸(65mg,0.11mmol)溶于二氯甲烷(3ml)中,加入草酰氯(69.37mg,0.55mmol)和催化量的n，n-二甲基甲酰胺。加料完毕后，反应液在25℃搅拌10分钟。将反应液浓缩后溶于二氯甲烷(3ml),滴加到甲醇(2ml)中，于25℃搅拌30分钟。反应结束后经反相柱层析(流动相：40％乙腈/60％水)纯化后得到6-(1-(2,6-二氟苄基)-5-((二甲基氨基)甲基)-6-(4-硝基苯基)-2,4-二氧代-1,4-二氢噻吩并[2,3-d]嘧啶-3(2h)-基)哒嗪-3-甲酸甲酯(50mg,黄色固体)，产率：75％。
[0715]
ms m/z(esi):609.0[m+1]
+
。
[0716]
第五步
[0717]
6-(6-(4-氨基苯基)-1-(2,6-二氟苄基)-5-((二甲基氨基)甲基)-2,4-二氧代-1,4-二氢噻吩并[2,3-d]嘧啶-3(2h)-基)哒嗪-3-甲酸甲酯的制备
[0718]
将基6-(1-(2,6-二氟苄基)-5-((二甲基氨基)甲基)-6-(4-硝基苯基)-2,4-二氧代-1,4-二氢噻吩并[2,3-d]嘧啶-3(2h)-基)哒嗪-3-甲酸甲酯(50mg,0.08mmol)溶于乙醇(3ml)和水(3ml),加入铁粉(23mg,0.41mmol)和氯化铵(22mg,0.41mmol)。加料完毕后，反应液在氮气保护下，于80℃搅拌1小时。反应完成后用二氯甲烷萃取(3x20ml),合并有机相，用无水硫酸钠干燥、过滤、浓缩。浓缩液经反相柱层析(流动相：30％乙腈/70％水)纯化后得到基6-(6-(4-氨基苯基)-1-(2,6-二氟苄基)-5-((二甲基氨基)甲基)-2,4-二氧代-1,4-二氢噻吩并[2,3-d]嘧啶-3(2h)-基)哒嗪-3-甲酸甲酯(37mg,黄色固体)，产率：78％。
[0719]
ms m/z(esi):579.2[m+1]
+
。
[0720]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.48(d,j＝8.8hz,1h),8.25(s,2h),8.11(d,j＝8.8hz,1h),7.26(d,j＝8.8hz,2h),7.15(t,j＝8.2hz,3h),6.62(d,j＝8.8hz,2h),5.46(s,2h),
胺(0.54g，4.10mmol)，丙基磷酸酐(6.05g,19.00mmol)和三乙醇胺(2.30g，22.80mmol)。反应在90℃下搅拌4小时。反应结束后，通过乙酸乙酯(2x20ml)进行萃取，收集有机相并通过无水硫酸钠进行干燥，旋干溶剂得到粗产品1-(4-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-[(二甲基氨基)甲基]-3-(6-甲磺酰基吡啶并嗪-3-基)-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基}苯基)-3-甲氧基脲(1.8g，黄色固体)，产率：68％。
[0733]
ms m/z(esi):631.2[m+1]
+
.
[0734]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ14.53(s,1h),8.63(d,j＝9.4hz,1h),8.30(d,j＝8.4hz,2h),7.47(t,j＝9.2hz,3h),7.12(s,1h),6.74(t,j＝7.6hz,2h),5.01(s,2h),4.23(s,2h),3.51(s,2h),2.20(s,6h),1.35-1.18(m,3h).
[0735]
第二步
[0736]
3-(6-氯哒嗪-3-基)-1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-[(二甲基氨基)甲基]-6-(4-硝基苯基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2,4-二酮的制备
[0737]
将1-(4-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-[(二甲基氨基)甲基]-3-(6-甲磺酰基吡啶并嗪-3-基)-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基}苯基)-3-甲氧基脲(300mg，0.48mmol)溶于n,n-二甲基甲酰胺(15ml)，在0℃加入甲基硫烷基钠(100mg，1.44mmol)。反应液在室温下搅拌16小时。反应结束后，加入水(20ml)，利用二氯甲烷(3x20ml)进行萃取，收集有机相并用饱和食盐水洗涤，利用无水硫酸钠干燥，旋干溶剂得到粗产品。粗产品通过柱层析(石油醚：乙酸乙酯＝4：1)得到3-(6-氯哒嗪-3-基)-1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-[(二甲基氨基)甲基]-6-(4-硝基苯基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2,4-二酮(110mg，黄色固体)，产率：37％。
[0738]
ms m/z(esi):585.1[m+1]
+
.
[0739]
第三步
[0740]
1-[((2,6-二氟苯基)甲基]-5-[(二甲基氨基)甲基]-3-[6-(二甲基氨基)哒嗪-3-基]-6-(4-硝基苯基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2,4-二酮的制备
[0741]
将3-(6-氯哒嗪-3-基)-1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-[(二甲基氨基)甲基]-6-(4-硝基苯基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2,4-二酮(50mg，0.09mmol)溶于乙醇(20ml)，加入盐酸二甲胺(37mg，0.45mmol)和三乙胺(55mg，0.54mmol)。反应液在室温下搅拌72小时。反应结束后，旋干溶剂得到粗产品，再通过柱层析(纯石油醚)分离纯化得到1-[((2,6-二氟苯基)甲基]-5-[(二甲基氨基)甲基]-3-[6-(二甲基氨基)哒嗪-3-基]-6-(4-硝基苯基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2,4-二酮(45mg，黄色固体)，产率：80％。
[0742]
ms m/z(esi):594.2[m+1]
+
.
[0743]
第四步
[0744]
6-(4-氨基苯基)-1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-[(二甲基氨基)甲基]-3-[6-(二甲基氨基)哒嗪-3-基]噻吩并[2,3-d]嘧啶-2,4-二酮的制备
[0745]
将1-[((2,6-二氟苯基)甲基]-5-[(二甲基氨基)甲基]-3-[6-(二甲基氨基)哒嗪-3-基]-6-(4-硝基苯基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2,4-二酮(50mg，0.08mmol)溶于甲醇(10ml)，加入铁粉(200mg，4mmol)和饱和氯化铵溶液(10ml)。反应液在室温下搅拌4小时。反应结束后，过滤，收集滤液。滤液通过二氯甲烷(3x20ml)萃取，收集有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，旋干溶剂得到6-(4-氨基苯基)-1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-[(二甲基氨基)甲基]-3-[6-(二甲基氨基)哒嗪-3-基]噻吩并[2,3-d]嘧啶-2,4-二酮(40mg，黄色固体)，产
率：84％。
[0746]
ms m/z(esi):564.1[m+1]
+
.
[0747]
第五步
[0748]
1-(4-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-[(二甲基氨基)甲基]-3-[6-(二甲基氨基)哒嗪-3-基]-2,4-二氧噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-基}苯基)-3-甲氧基脲的制备
[0749]
将6-(4-氨基苯基)-1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-[(二甲基氨基)甲基]-3-[6-(二甲基氨基)哒嗪-3-基]噻吩并[2,3-d]嘧啶-2,4-二酮(40mg，0.07mmol)溶于四氢呋喃(5ml)，加入三乙胺(21mg，0.21mmol)和4-硝基苯基n-甲氧基氨基甲酸酯(45mg，0.21mmol)。反应液在室温搅拌2小时。反应结束后，旋干溶剂得到粗产品，粗产品通过反相柱层析(乙腈/水(0.1％三氟乙酸))分离纯化得到1-(4-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-[(二甲基氨基)甲基]-3-[6-(二甲基氨基)哒嗪-3-基]-2,4-二氧噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-基}苯基)-3-甲氧基脲(8mg，白色固体)，产率：18％。
[0750]
ms m/z(esi):637.2[m+1]
+
.
[0751]
hplc:98.79％(214nm),98.84％(254nm).
[0752]1h nmr(400mhz,cd3od)δ7.7-7.70(m,2h),7.50(d,j＝9.6hz,1h),7.47-7.37(m,4h),7.05-6.99(m,2h),5.42(s,2h),4.46(s,2h),3.73(s,3h),3.25(s,6h),2.73(s,6h).
[0753]
19
f nmr(376mhz,cd3od)δ-77.10,-114.58
‑‑
114.81.
[0754]
实施例23
[0755]
(5-(1-(2,6-二氟苄基)-5-(二甲氨基)甲基)-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧基-1,2,3,4-四氢噻吩[2,3-d]嘧啶-6-基)噻吩-2-基)氨基甲酸甲酯
[0756][0757]
向5-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-[(二甲氨基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧噻吩[2,3-d]嘧啶-6-基}噻吩-2-甲酸(40mg,0.068mmol)溶于甲苯(1ml)的溶液中加入三乙胺(35mg,0.34mmol)和叠氮磷酸二苯酯(57mg,0.205mmol)。将反应溶液在110℃下
搅拌4小时后，甲醇(0.5ml)加入到反应液中在25℃下搅拌2小时。反应完成后反应液浓缩。浓缩所得的油状物经制备(乙腈/水/0.1％甲酸)冷冻干燥纯化后得到n-(5-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-[(二甲氨基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧噻吩[2,3-d]嘧啶-6-基]-噻吩-2-基)氨基甲酸甲酯(1.74mg，近白色固体)。产率：3.8％。
[0758]
ms m/z(esi):615.2[m+h]
+
。
[0759]
hplc:99.41％(93.87nm),92.31％(254nm).
[0760]1h nmr(400mhz,meod)δ8.53(s,1h),7.67(d,j＝9.2hz,1h),7.48
–
7.37(m,2h),7.10
–
6.98(m,3h),6.59(d,j＝4.0hz,1h),5.41(s,2h),4.59(s,5h),4.17(s,3h),3.79(d,j＝5.6hz,3h),2.57(s,3h).
[0761]
实施例24
[0762]
1-(5-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-[(二甲基氨基)甲基]-3-(6-甲氧基吡啶并-3-基)-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基}吡啶-2-基)-3-甲氧基脲
[0763][0764]
第一步
[0765]
n-[4-({[((苄氧基)羰基)(甲基)氨基}甲基)-5-溴-3-[(2-氟-3-甲氧基苯基)氨基甲酰基]噻吩-2-基]-n-[(2,6-二氟苯基)甲基]氨基甲酸酯的制备
[0766]
将4-({[((苄氧基)羰基](甲基)氨基}甲基)-5-溴-2-{[((2,6-二氟苯基)甲基](乙氧基羰基)氨基}噻吩-3-甲酸(1.0g,1.70mmol)溶于n,n-二甲基甲酰胺(12ml)，在室温下依次加入2-氟-3-甲氧基苯胺(280mg,2.00mmol)，1-丙基磷酸酐(9.5g,18mmol，50％在乙酸乙酯)和三乙胺(0.86g,8.40mmol)。反应混合液在90℃反应4h。反应完成后，用乙酸乙酯(20ml)稀释，依次用水(20ml)和饱和食盐水(3x 20ml)洗涤。有机相合并后用无水硫酸钠干燥，浓缩。将得到的残留物用硅胶柱(石油醚/乙酸乙酯＝70/30)纯化后得到n-[4-({[((苄氧基)羰基)(甲基)氨基}甲基)-5-溴-3-[(2-氟-3-甲氧基苯基)氨基甲酰基]噻吩-2-基]-n-[(2,6-二氟苯基)甲基]氨基甲酸酯(440mg,棕色油状液体)，产率：29％。
[0767]
ms m/z(esi):720.1[m+1]
+
。
[0768]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ7.76(t,j＝7.4hz,1h),7.39-7.27(m,5h),7.22-7.17(m,1h),7.01(td,j＝8.4,2.0hz,1h),6.78
–
6.65(m,3h),5.05(s,2h),4.91(s,2h),4.52(s,2h),4.34(q,j＝7.0hz,2h),3.89(s,3h),2.77(s,3h),1.32
–
1.27(m,3h).
[0769]
第二步
[0770]
n-({6-溴-1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(2-氟-3-甲氧基苯基)-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-yl}甲基)-n-甲基氨基甲酸苄酯的制备
[0771]
将n-[4-({[((苄氧基)羰基)(甲基)氨基}甲基)-5-溴-3-[(2-氟-3-甲氧基苯基)氨基甲酰基]噻吩-2-基]-n-[(2,6-二氟苯基)甲基]氨基甲酸酯(340mg,0.47mmol)溶于甲醇(6ml),加入甲醇钠(76mg,1.41mmol)，在氮气保护下，于0℃反应0.5小时。反应结束后，加入水(10ml)淬灭，用1m盐酸调节ph＝6-7，减压旋蒸除去甲醇，混合液用二氯甲烷萃取(3x30ml)。有机相用饱和食盐水洗涤(30ml)后用无水硫酸钠干燥、过滤，滤液经浓缩后用柱层析(流动相：二氯甲烷/甲醇＝99/1)，得到n-({6-溴-1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(2-氟-3-甲氧基苯基)-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基}甲基)-n-甲基氨基甲酸苄酯(368mg,黄色固体)，产率：97％。
[0772]
ms m/z(esi):674.1[m+1]
+
。
[0773]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ.39
–
7.27(m,6h),7.19(td,j＝8.4,1.6hz,1h),7.09
–
7.03(m,1h),6.98
–
6.90(m,2h),6.89
–
6.83(m,1h),5.33
–
5.23(m,2h),5.14(s,2h),4.94
–
4.79(m,2h),3.92(s,3h),2.90-2.80(m,3h).
[0774]
第三步
[0775]
n-{[6-(6-{[((叔丁氧基)羰基]氨基}吡啶-3-基)-1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(2-氟-3-甲氧基苯基)-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基]甲基}-n-甲基氨基甲酸苄酯的制备
[0776]
将n-({6-溴-1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(2-氟-3-甲氧基苯基)-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基}甲基)-n-甲基氨基甲酸苄酯(286mg,0.41mmol)溶于甲苯：乙醇：水＝7：2：1(3ml)，然后依次加入n-[5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼硼烷-2-基)吡啶-2-基]氨基甲酸叔丁酯(171mg,0.53mmol)，碳酸钾(170mg,1.23mmol)，三(二亚苄-base丙酮)二钯(113mg,0.12mmol)，2-二环己基磷-2',6'-二异丙氧基-1,1'-联苯(57mg,0.12mmol)。将反应在氮气保护下，置于80℃微波下反应0.5小时。反应完成后，加入水淬灭，用乙酸乙酯萃取(3x20ml)，合并有机相，用饱和食盐水洗涤(50ml)。有机相合并后用无水硫酸钠干燥，浓缩。将得到的残留物经柱层析(流动相：石油醚/乙酸乙酯＝30/70)纯化后得到n-{[6-(6-{[((叔丁氧基)羰基]氨基}吡啶-3-基)-1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(2-氟-3-甲氧基苯基)-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基]甲基}-n-甲基氨基甲酸苄酯(186mg,白色固体)，收率：56％。
[0777]
ms m/z(esi):788.2[m+1]
+
。
[0778]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ8.28-8.10(m,1h),7.93(s,1h),7.74-7.36(m,2h),7.36
–
7.26(m,4h),7.24
–
7.16(m,3h),7.11
–
7.03(m,1h),6.98
–
6.85(m,3h),5.42
–
5.29(m,2h),5.01
–
4.82(m,4h),3.92(s,3h),2.78
–
2.56(m,3h),1.53(s,9h).
[0779]
第四步
[0780]
n-(5-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(2-氟-3-甲氧基苯基)-5-[(甲基氨基)甲基]-2,4-二氧噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-基}吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的制备
[0781]
将苄基n-{[6-(6-{[((叔丁氧基)羰基]氨基}吡啶-3-基)-1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(2-氟-3-甲氧基苯基)-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基]甲基}-n-甲基氨基甲酸酯(186mg,0.24mmol)溶于甲醇(40ml)中。依次加入乙酸(6滴),钯碳(106mg,3.50mmol)(10％,50％水)，氢气球换气三次。在氢气球气氛下25℃反应16小时。反应结束后抽滤得滤液，浓缩得n-(5-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(2-氟-3-甲氧基苯基)-5-[(甲基氨基)甲基]-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基}吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯(160mg,白色固体)，产率：99％。
[0782]
ms m/z(esi):654.2[m+1]
+
。
[0783]
第五步
[0784]
n-(5-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-[(二甲氨基)甲基]-3-(2-氟-3-甲氧基苯基)-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基}吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的制备
[0785]
将n-(5-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(2-氟-3-甲氧基苯基)-5-[(甲基氨基)甲基]-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基}吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯(160mg,0.24mmol)溶于甲醇(40ml)，依次加入多聚甲醛(220mg,7.3mmol)，乙酸(6滴)，氰基硼氢化钠(46mg,0.73mmol)，反应液在氮气保护下25℃反应1小时。反应结束后，加入饱和氯化铵溶液(10ml)淬灭，用乙酸乙酯萃取(3x20ml)。有机相用饱和食盐水洗涤(3x20ml)后用无水硫酸钠干燥、过滤，滤液经浓缩后用柱层析(流动相：二氯甲烷/甲醇＝91/9)得到中间体n-(5-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-[(二甲氨基)甲基]-3-(2-氟-3-甲氧基苯基)-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基}吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯(146mg,白色固体)，产率：80％。
[0786]
ms m/z(esi):668.2[m+1]
+
。
[0787]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.14(s,1h),8.39(s,1h),7.93(dd,j＝16.4,8.8hz,2h),7.54
–
7.42(m,1h),7.36
–
7.24(m,2h),7.16(t,j＝8.4hz,2h),7.01
–
6.88(m,1h),5.46-5.25(m,2h),3.90(s,2h),3.17(d,j＝4.8hz,3h),1.91(s,9h),1.49(s,6h).
[0788]
第六步
[0789]
6-(6-氨基吡啶-3-基)-1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-[(二甲基氨基)甲基]-3-(2-氟-3-甲氧基苯基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2,4-二酮的制备
[0790]
将n-(5-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-[(二甲氨基)甲基]-3-(2-氟-3-甲氧基苯基)-2,4-二氧噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-基}吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯(146mg,0.22mmol)溶于二氯甲烷：三氟乙酸＝2：1(3ml)的混合溶剂中，室温下反应1h。反应液用二氯甲烷(10ml)稀释,用水(10ml)和饱和食盐水(3x10ml)洗，合并有机相用无数硫酸钠干燥，浓缩。浓缩液经柱层析(流动相：乙腈/水＝20/80)纯化后得到6-(6-氨基吡啶-3-基)-1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-[(二甲基氨基)甲基]-3-(2-氟-3-甲氧基苯基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2,4-二酮(130mg,白色固体)，产率：94％。
[0791]
ms m/z(esi):568.1[m+1]
+
。
[0792]
第七步
[0793]
n-(5-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-[(二甲基氨基)甲基]-3-(2-氟-3-甲氧基苯基)-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基}吡啶-2-基)氨基甲酸苯酯的制备
[0794]
将6-(6-氨基吡啶-3-基)-1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-[(二甲基氨基)甲基]-3-(2-氟-3-甲氧基苯基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2,4-二酮(130mg,0.23mmol)溶于二氯甲烷(4ml)，加入吡啶(181mg,2.29mmol)在冰水浴下冷却，加入氯甲酸苯酯(143mg,0.92mmol)，在氮气保护下，于0℃反应1小时。反应结束后，将反应液浓缩，得到粗品n-(5-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-[(二甲基氨基)甲基]-3-(2-氟-3-甲氧基苯基)-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基}吡啶-2-基)氨基甲酸苯酯(150mg,白色固体)，产率：48％。
[0795]
ms m/z(esi):688.2[m+1]
+
。
[0796]
第八步
[0797]
1-(5-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-[(二甲基氨基)甲基]-3-(6-甲氧基吡啶并-3-基)-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基}吡啶-2-基)-3-甲氧基脲的制备
[0798]
将n-(5-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-[(二甲基氨基)甲基]-3-(2-氟-3-甲氧基苯基)-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基}吡啶-2-基)氨基甲酸苯酯(150mg,0.21mmol)溶于四氢呋喃(10ml)，依次加入三乙胺(441mg,4.36mmol)，与邻甲基羟胺盐酸盐(364mg,4.36mmol)。反应液在60℃反应16小时。待反应结束，浓缩。浓缩液经柱层析(流动相：乙腈/水＝3/1)纯化后得到粗品，粗品经制备柱(流动相：0.1％甲酸/乙腈/水)纯化后得到1-(5-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-[(二甲基氨基)甲基]-3-(2-氟-3-甲氧基苯基)-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基}吡啶-2-基)-3-甲氧基脲(7.00mg,白色固体)，产率：4.91％。
[0799]
ms m/z(esi):641.2[m+1]
+
。
[0800]
hplc:98.65％(214nm),98.71％(254nm).
[0801]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.20(s,1h),9.29(s,1h),8.47(d,j＝2.4hz,1h),7.97(dd,j＝8.8,2.4hz,1h),7.83(d,j＝8.8hz,1h),7.51-7.43(m,1h),7.32-7.24(m,2h),7.15(t,j＝8.4hz,2h),6.99-6.95(m,1h),5.42(d,j＝16.0hz,1h),5.25(d,j＝16.0hz,1h),3.90(s,3h),3.66(s,3h),2.15(d,j＝16.8hz,6h).
[0802]
19
f nmr(376mhz,cdcl3)δ-73.44，-113.51，-143.74.
[0803]
实施例25
[0804]
1-(5-(5-((二甲基氨基)甲基)-3-(2-氟-3-甲氧基苯基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氢噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基脲
[0805][0806]
第一步
[0807]
5-溴-4-(((叔丁氧羰基)(甲基)氨基)甲基)-2-((乙氧羰基)(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)氨基)噻吩-3-甲酸的制备
[0808]
将5-溴-4-((((叔丁氧羰基)(甲基)氨基)甲基)-2-((乙氧羰基)(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)氨基)噻吩-3-羧酸乙酯(4.00g,6.20mol)与氢氧化钾(1.04g,18.60mmol)溶于乙醇(100ml)中。然后加入水(3.6ml)。反应液在65℃下反应5小时。然后1m稀盐酸调ph至6-7，用乙酸乙酯(2x100ml)萃取。有机相合并后用无水硫酸钠干燥，浓缩后得到5-溴-4-(((叔丁氧羰基)(甲基)氨基)甲基)-2-((乙氧羰基)(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)氨基)噻吩-3-甲酸(3.5g,黄色液体)，产率:85.48％。
[0809]
ms m/z(esi)：613.0[m+1]
+
。
[0810]
第二步
[0811]
((2-溴-5-(乙氧基羰基)(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)氨基)-4-((2-氟-3-甲氧基苯基)氨基甲酰基)噻吩-3-基甲基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯的制备
[0812]
将5-溴-4-(((叔丁氧羰基)(甲基)氨基)甲基)-2-((乙氧羰基)(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)氨基)噻吩-3-羧酸(330mg,1.36mmol)与2-氟-3-甲氧基苯胺(0.25g,1.70mmol)溶于二甲基甲酰胺(10ml)，然后加入三乙胺(0.97g,9.60mmol)与丙基磷酸酐(2.55g,8mmol)。反应液在90℃反应4小时。然后用乙酸乙酯(2x10ml)萃取。有机相合并后用无水硫酸钠干燥，浓缩后用柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝70/30)纯化得到((2-溴-5-(乙氧基羰基)(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)氨基)-4-((2-氟-3-甲氧基苯基)氨基甲酰基)噻吩-3-基甲基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(314mg,黄色油状物)，产率:25.5％。
[0813]
ms m/z(esi)：736.1[m+1]
+
。
[0814]1h nmr(400mhz,cd3od)δ7.78(t,j＝7.2hz,1h),7.41(d,j＝3.6hz,2h),7.05-6.95(m,2h),6.75(t,j＝7.6hz,1h),5.08(s,2h),4.37(d,j＝5.6hz,4h),3.92-3.90(m,3h),2.70(s,3h),1.60-1.43(m,9h),0.88(d,j＝6.8hz,3h).
[0815]
第三步
[0816]
((6-溴-3-(2-氟-3-甲氧基苯基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧-1,2,3,4-四氢噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯的制备
[0817]
将((2-溴-5-(乙氧基羰基)(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)氨基)-4-((2-氟-3-甲氧基苯基)氨基甲酰基)噻吩-3-基甲基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(1.00g,1.50mmol)与甲醇钠(0.24g,4.50mmol)溶于甲醇(10ml)。反应液在40℃反应0.5小时。然后用1m稀盐酸调ph至6-7，用乙酸乙酯(2x10ml)萃取。有机相合并后用无水硫酸钠干燥，浓缩后用柱层析法(石油醚/乙酸乙酯：80/20)纯化得到((6-溴-3-(2-氟-3-甲氧基苯基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧-1,2,3,4-四氢噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(1g,红色固体)，产率:87％。
[0818]
ms m/z(esi)：590.0[m+1]
+
。
[0819]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ7.57(d,j＝8.0hz,1h),7.45(dd,j＝10.4,7.2hz,1h),7.17(dt,j＝8.4,4.0hz,1h),7.05(t,j＝7.6hz,1h),6.85(t,j＝6.4hz,1h),5.47(s,2h),4.82(s,2h),3.90(s,3h),2.75(s,3h),1.42(s,9h).
[0820]
第四步
[0821]
6-溴-3-(2-氟-3-甲氧基苯基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-5-((甲基氨基)甲基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2,4(1h，3h)-二酮的制备
[0822]
将((6-溴-3-(2-氟-3-甲氧基苯基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧-1,2,3,4-四氢噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(210mg,0.0144mmol)溶于二氯甲烷：三氟乙酸＝4：1(5ml)。反应液在25℃反应1小时。浓缩反应液后得到6-溴-3-(2-氟-3-甲氧基苯基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-5-((甲基氨基)甲基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2,4(1h，3h)-二酮(180mg,红色固体)，产率:90％。
[0823]
ms m/z(esi)：590.0[m+1]
+
。
[0824]
第五步
[0825]
((6-溴-3-(2-氟-3-甲氧基苯基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧-1,2,3,4-四氢噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲基)(甲基)氨基甲酸苄酯的制备
[0826]
将6-溴-3-(2-氟-3-甲氧基苯基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-5-((甲基氨基)甲基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2,4(1h，3h)-二酮(900mg,1.52mmol)与三乙胺(462mg,4.57mmol)，氯甲酸苄酯(389mg,2.28mmol)溶于二氯甲烷(10ml)。反应液于25℃反应1小时。反应结束后，用饱和食盐水(2x10ml)萃取。将有机相合并，无水硫酸钠干燥并浓缩后用柱层析法(石油醚/乙酸乙酯：70/30)纯化得到((6-溴-3-(2-氟-3-甲氧基苯基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧-1,2,3,4-四氢噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲基)(甲基)氨基甲酸苄酯(800mg,黄色固体)，收率:63％。
[0827]
ms m/z(esi)：724.0[m+1]
+
。
[0828]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ7.58(d,j＝8.0hz,1h),7.52-7.44(m,1h),7.38-7.26(m,6h),7.20(td,j＝8.4,1.6hz,1h),7.09-7.04(m,1h),6.88(d,j＝6.8hz,1h),5.47(s,2h),5.14(s,2h),4.86(s,2h),4.12(q,j＝7.2hz,3h),2.86(d,j＝8.8hz,3h).
[0829]
第六步
[0830]
((6-(6-((叔丁氧基羰基)氨基)吡啶-3-基)-3-(2-氟-3-甲氧基苯基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧-1,2,3,4-四氢噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲基)(甲基)氨基
甲酸苄酯的制备
[0831]
将((6-溴-3-(2-氟-3-甲氧基苯基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧-1,2,3,4-四氢噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲基)(甲基)氨基甲酸苄酯(110mg,0.178mmol)，(6-氨基吡啶-3-基)硼二醇(68.58mg,0.49mmol)，碳酸钾(68.58mg,0.49mmol)，三二亚苄基丙酮二钯(45.44mg,0.0496mmol)与2-双环已基膦-2',6'-二异丙氧基联苯(23.15mg,0.049mmol)溶于甲苯：乙醇：水＝7：2：1(1ml)。反应液于80℃微波反应30分钟。然后用二氯甲烷(2x5ml)萃取。将有机相合并，无水硫酸钠干燥浓缩后用柱层析法(石油醚/乙酸乙酯：80/20)纯化得到((6-(6-((叔丁氧基羰基)氨基)吡啶-3-基)-3-(2-氟-3-甲氧基苯基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧-1,2,3,4-四氢噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲基)(甲基)氨基甲酸苄酯(120mg,白色固体)，收率:77％。
[0832]
ms m/z(esi)：828.1[m+1]
+
。
[0833]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ8.13(d,j＝26.0hz,1h),7.87(s,1h),7.54(d,j＝7.2hz,2h),7.46
–
7.39(m,3h),7.18(dd,j＝5.2,3.6hz,4h),7.06(t,j＝8.0hz,2h),6.92
–
6.82(m,2h),5.51(s,2h),5.12(d,j＝9.6hz,2h),4.90(s,2h),3.91(d,j＝2.8hz,3h),2.64(d,j＝18.8hz,3h),1.51(s,9h).
[0834]
第七步
[0835]
(5-(5-(((二甲基氨基)甲基)-3-(2-氟-3-甲氧基苯基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧-1，2,3,4-四氢噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基)吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的制备
[0836]
将((6-(6-((叔丁氧基羰基)氨基)吡啶-3-基)-3-(2-氟-3-甲氧基苯基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧-1,2,3,4-四氢噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲基)(甲基)氨基甲酸苄酯(440mg,0.0701mmol)，乙酸(3滴)，pd-c(427mg,3.09mmol)，多聚甲醛(100mg,0.56mmol)溶于甲醇(10ml)。氢气条件下25℃反应16小时。反应结束后，过滤除去固体后浓缩得到(5-(5-(((二甲基氨基)甲基)-3-(2-氟-3-甲氧基苯基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧-1，2,3,4-四氢噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基)吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯(420mg,淡黄色固体)，收率:40％。
[0837]
ms m/z(esi)：718.2[m+1]
+
。
[0838]
第八步
[0839]
6-(6-氨基吡啶-3-基)-5-((二甲基氨基)甲基)-3-(2-氟-3-甲氧基苯基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)噻吩并[2，3-d]嘧啶-2,4(1h，3h)-二酮的制备
[0840]
将(5-(5-(((二甲基氨基)甲基)-3-(2-氟-3-甲氧基苯基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧-1，2,3,4-四氢噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基)吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯(180mg,0.30mmol)溶于二氯甲烷：三氟乙酸＝4：1(5ml)。反应液在25℃反应1小时。浓缩反应液后得到6-(6-氨基吡啶-3-基)-5-((二甲基氨基)甲基)-3-(2-氟-3-甲氧基苯基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)噻吩并[2，3-d]嘧啶-2,4(1h，3h)-二酮(156mg,白色固体)，产率:80％。
[0841]
ms m/z(esi)：618.2[m+1]
+
。
[0842]
第九步
[0843]
(5-(5-(((二甲基氨基)甲基)-3-(2-氟-3-甲氧基苯基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)
苄基)-2,4-二氧-1,2，3,4-四氢噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基)吡啶-2-基)氨基甲酸苯酯的制备
[0844]
将6-(6-氨基吡啶-3-基)-5-((二甲基氨基)甲基)-3-(2-氟-3-甲氧基苯基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)噻吩并[2，3-d]嘧啶-2,4(1h，3h)-二酮(30mg,0.05mmol)与氯甲酸苄酯溶于二氯甲烷(5ml)，然后加入三乙胺(80.32mg,0.79mmol)。反应液于0℃反应60分钟。反应结束后，不做任何后处理，得到(5-(5-(((二甲基氨基)甲基)-3-(2-氟-3-甲氧基苯基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧-1,2，3,4-四氢噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基)吡啶-2-基)氨基甲酸苯酯。
[0845]
ms m/z(esi)：738.2[m+1]
+
。
[0846]
第十步
[0847]
1-(5-(5-((二甲基氨基)甲基)-3-(2-氟-3-甲氧基苯基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代-1，2,3,4-四氢噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基脲的制备
[0848]
将苯基(5-(5-(((二甲基氨基)甲基)-3-(2-氟-3-甲氧基苯基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧-1,2，3,4-四氢噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基)吡啶-2-基)氨基甲酸酯(30mg,0.05mmol)与盐酸邻甲基羟胺(3.39mg,0.0406mmol)溶于四氢呋喃(2ml)。反应液于25℃反应90分钟。反应结束后，减压浓缩掉溶剂，用rp-c18柱粗纯化后再经过制备(乙腈/水/0.01％甲酸)纯化后得到1-(5-(5-((二甲基氨基)甲基)-3-(2-氟-3-甲氧基苯基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代-1，2,3,4-四氢噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基)吡啶-2-基)-3-甲氧基脲(5.3mg,白色固体)，收率:15％。
[0849]
ms m/z(esi)：691.1[m+1]
+
。
[0850]
hplc:96.97％(214nm),98.92％(254nm).
[0851]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ8.36(d,j＝8.8hz,2h),7.86-7.79(m,1h),7.57(d,j＝8.0hz,1h),7.47(dd,j＝13.2,8.0hz,1h),7.29(d,j＝11.2hz,1h),7.22(dd,j＝8.4,1.2hz,1h),7.08(t,j＝7.6hz,1h),7.00(t,j＝6.6hz,1h),5.56(dd,j＝46.4,16.7hz,2h),4.32-4.22(m,1h),4.03-3.95(m,1h),3.92(s,3h),3.83(d,j＝5.2hz,3h),2.46(s,6h).
[0852]
实施例26
[0853]
1-(3-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-[(二甲基氨基)甲基]-3-(6-甲氧基吡啶并-3-基)-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基}丙基)-3-甲氧基脲
[0854][0855]
第一步
[0856]
n-({1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-6-{3-[(甲氧基氨基甲酰基)氨基]丙基}-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基}甲基)-n-甲基氨基甲酸苄酯的制备
[0857]
将n-({1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-6-{3-[(甲氧基氨基甲酰基)氨基]丙基-1-炔-1-基}-3-(6-甲氧基吡啶并-3-基)-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基}甲基)-n-甲基氨基甲酸苄酯(40mg,0.06mmol)溶于乙酸乙酯(1ml)和甲醇(1ml)中，加入湿钯碳(7mg,0.06mmol)，反应液在氢气气氛下于25℃搅拌6小时。过滤，将滤液浓缩得到标题产物n-({1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-6-{3-[(甲氧基氨基甲酰基)氨基]丙基}-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基}甲基)-n-甲基氨基甲酸苄酯(40mg,黄色油状物)，产率：84％。
[0858]
ms m/z(esi):710.2[m+1]
+
.
[0859]
第二步
[0860]
1-(3-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-5-[(甲基氨基)甲基]-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基}丙基)-3-甲氧基脲的制备
[0861]
将n-({1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-6-{3-[(甲氧基氨基甲酰基)氨基]丙基}-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基}甲基)-n-甲基氨基甲酸苄酯(40mg,0.06mmol)溶于二氯甲烷(3ml)中，在冰水浴条件下，加入1m三氯化硼的二氯甲烷溶液(0.6ml,0.6mmol)。反应液在25℃搅拌4小时。加入甲醇淬灭反应，将反应液浓缩得到标题产物1-(3-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-5-[(甲基氨基)甲基]-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基}丙基)-3-甲氧基脲(30mg,黄色油状物)，产率：78％。
[0862]
ms m/z(esi):576.2[m+1]
+
.
[0863]
第三步
[0864]
1-(3-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-[(二甲基氨基)甲基]-3-(6-甲氧基吡啶并-3-基)-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基}丙基)-3-甲氧基脲的制备
[0865]
将1-(3-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-5-[(甲基氨基)甲基]-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基}丙基)-3-甲氧基脲(30mg,0.05mmol)溶于四氢呋喃(2ml)中，加入三乙胺(16mg,0.16mmol)和碘甲烷(9mg,0.06mmol)。反应液在25℃搅拌4小时。将反应液浓缩，得到的残留物用prep-hplc(乙腈/水(0.1％三氟乙酸))纯化得到标题产物1-(3-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-[(二甲基氨基)甲基]-3-(6-甲氧基吡啶并-3-基)-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基}丙基)-3-甲氧基脲(2.43mg,白色固体)，产率：7％。
[0866]
ms m/z(esi):590.2[m+1]
+
.
[0867]
hplc:96.88％(214nm),99.78％(254nm).
[0868]1h nmr(400mhz,cd3od)δ7.65(d,j＝9.2hz,1h),7.48-7.39(m,2h),7.07-6.99(m,2h),5.38(s,2h),4.45(s,2h),4.16(s,3h),3.65(s,3h),3.27(d,j＝6.8hz,2h),2.99-2.93(m,2h),2.90(s,6h),1.94-1.85(m,2h).
[0869]
实施例27
[0870]
1-(5-(1-(2,6-二氟苄基)-5-(二甲氨基)甲基)-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧基-1,2,3,4-四氢噻吩[2,3-d]嘧啶-6-基)噻吩-2-基)-3-甲氧基脲
[0871][0872]
第一步
[0873]
5-[5-({[叔丁基(甲酰基)-l-{3}-氧化基](甲基)氨基}甲基)-1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧噻吩[2,3-d]嘧啶-6-基]噻吩-2-甲酸的制备
[0874]
向({6-溴-1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧噻吩[2,3-d]嘧啶-5-基}甲基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(1000mg,1.6mmol)溶于乙二醇二甲醚/乙醇/水:10/5/2(17ml)的溶液中加入5-(二羟基硼烷基)噻吩-2-甲酸(358mg,2.08mmol)，碳酸钠(518mg,4.8mmol)和双三苯基膦二氯化钯(112mg,0.16mmol)。将反应溶液置换氮气三次并用氮气保护，在65℃下搅拌16小时。反应完成后反应液用(2m)盐酸调节ph＝4-5并用二氯甲烷(3
×
30ml)萃取。合并的有机相用食盐水(15ml)洗涤一次，无水硫酸钠干燥并浓缩。浓缩所得的油状物经硅胶柱纯化(dcm/meoh：100/1至30/1)得到5-[5-({[叔丁基(甲酰基)-l-{3}-氧化基](甲基)氨基}甲基)-1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧噻吩[2,3-d]嘧啶-6-基]噻吩-2-甲酸(0.7g,黄色固体)。产率：58.5％。
[0875]
ms m/z(esi):572.0[m+1]
+
。
[0876]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ7.76(d,j＝3.6hz,1h),7.40(d,j＝9.2hz,1h),7.34(s,1h),7.16(d,j＝9.2hz,2h),6.94(t,j＝8.0hz,2h),5.35(s,2h),4.93(s,2h),4.20(s,3h),2.64(s,3h),1.40(s,9h).
[0877]
第二步
[0878]
((6-(5-((苄氧基)羰基)氨基)噻吩-2-基)-1-(2,6-二氟苄基)-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧基-1,2,3,4-四氢噻吩[2,3-d]嘧啶-5-基)甲基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯的制备
[0879]
向5-[5-({[叔丁基(甲酰基)-l-{3}-氧化基](甲基)氨基}甲基)-1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧噻吩[2,3-d]嘧啶-6-基]噻吩-2-甲酸(700mg,1.04mmol)溶于甲苯(10ml)的溶液中加入三乙胺(527mg,5.2mmol)，苄醇(338mg,
3.12mmol)和叠氮磷酸二苯酯(860mg,3.12mmol)。将反应溶液在110℃下搅拌4小时。反应完成后反应液浓缩。浓缩所得的油状物经硅胶柱纯化(石油醚/乙酸乙酯：3/1至1/1)得到叔丁基((6-(5-((苄氧基)羰基)氨基)噻吩-2-基)-1-(2,6-二氟苄基)-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧基-1,2,3,4-四氢噻吩[2,3-d]嘧啶-5-基)甲基)(甲基)氨基甲酸酯(610mg,黄色固体)。产率：67.8％。
[0880]
ms m/z(esi):677.2(m+m+h-100)。
[0881]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ7.40
–
7.31(m,7h),7.13(d,j＝9.2hz,1h),6.92(dd,j＝14.0,5.6hz,2h),6.81(d,j＝4.0hz,1h),6.47(d,j＝3.6hz,1h),5.33(s,2h),5.21(s,2h),4.81(s,2h),4.19(s,3h),2.62(d,j＝4.0hz,3h),1.36(d,j＝6.4hz,9h).
[0882]
第三步
[0883]
(5-(1-(2,6-二氟苄基)-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-5-((甲胺基)甲基)-2,4-二氧基-1,2,3,4-四氢噻吩[2,3-d]嘧啶-6-基)噻吩-2-基)氨基甲酸苄酯的制备
[0884]
将((6-(5-((苄氧基)羰基)氨基)噻吩-2-基)-1-(2,6-二氟苄基)-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧基-1,2,3,4-四氢噻吩[2,3-d]嘧啶-5-基)甲基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(610mg,0.78mmol)溶于二氯甲烷/三氟乙酸(6ml/4ml)的溶液在25℃下搅拌1h。反应混合液浓缩并加入碳酸钠水溶液(10ml)，然后用二氯甲烷(3
×
20ml)萃取。合并有机相，用无水硫酸钠干燥并浓缩得到(5-(1-(2,6-二氟苄基)-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-5-((甲胺基)甲基)-2,4-二氧基-1,2,3,4-四氢噻吩[2,3-d]嘧啶-6-基)噻吩-2-基)氨基甲酸苄酯(450mg,黄色固体)。产率：72％。
[0885]
ms m/z(esi):677.2[m+1]
+
。
[0886]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ7.74(d,j＝9.2hz,1h),7.47
–
7.35(m,7h),7.14(t,j＝8.4hz,2h),7.02(d,j＝4.0hz,1h),6.56(d,j＝4.0hz,1h),5.37
–
5.17(m,4h),4.08(s,3h),3.81(s,2h),2.26
–
2.18(m,3h).
[0887]
第四步
[0888]
(5-(1-(2,6-二氟苄基)-5-(二甲氨基)甲基)-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧基-1,2,3,4-四氢噻吩[2,3-d]嘧啶-6-基)噻吩-2-基)氨基甲酸苄酯的制备
[0889]
向(5-(1-(2,6-二氟苄基)-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-5-((甲胺基)甲基)-2,4-二氧基-1,2,3,4-四氢噻吩[2,3-d]嘧啶-6-基)噻吩-2-基)氨基甲酸苄酯(450mg,0.66mmol)溶于甲醇(10ml)的溶液中加入多聚甲醛(707mg,24mmol)和催化量的乙酸。反应混合液在25℃下搅拌半小时。氰基硼氢化钠(255mg,4.06mmol)加入到反应液中并继续反应16消失。反应混合液过滤，并加入二氯甲烷(20ml)。得到的混合液用水洗一次，食盐水洗一次。有机相用无水硫酸钠干燥并浓缩。浓缩所得的油状物经硅胶柱纯化(二氯甲烷/甲醇：100/1至30/1)得到(5-(1-(2,6-二氟苄基)-5-(二甲氨基)甲基)-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧基-1,2,3,4-四氢噻吩[2,3-d]嘧啶-6-基)噻吩-2-基)氨基甲酸苄酯(410mg，黄色固体)。产率：87％。
[0890]
ms m/z(esi):691.2[m+1]
+
。
[0891]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ8.02(s,1h),7.88(d,j＝9.2hz,1h),7.40
–
7.33(m,5h),7.20(d,j＝9.2hz,1h),6.95(t,j＝8.0hz,2h),6.84(d,j＝3.6hz,1h),6.54(d,j＝3.6hz,1h),5.21(s,2h),5.02(s,1h),4.73(s,1h),4.37(s,2h),4.12(d,j＝8.4hz,3h),2.86(s,
3h),2.61(s,3h).
[0892]
第五步
[0893]
6-(5-氨基噻吩-2-基)-1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-[(二甲氨基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)噻吩[2,3-d]嘧啶-2,4-二酮的制备
[0894]
向基(5-(1-(2,6-二氟苄基)-5-(二甲氨基)甲基)-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧基-1,2,3,4-四氢噻吩[2,3-d]嘧啶-6-基)噻吩-2-基)氨基甲酸苄酯(410mg,0.61mmol)溶于二氯甲烷(10ml)的溶液中加入三氯化硼的二氯甲烷溶液(1.0m)。反应混合液在25℃下搅拌2小时。反应完成后碳酸钠水溶液(30ml)，然后用二氯甲烷(3
×
30ml)萃取。合并有机相，用无水硫酸钠干燥并浓缩。浓缩所得的油状物经硅胶柱纯化(二氯甲烷/甲醇：100/1至10/1)得到6-(5-氨基噻吩-2-基)-1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-[(二甲氨基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)噻吩[2,3-d]嘧啶-2,4-二酮(100mg,棕色固体)。产率：26％。
[0895]
ms m/z(esi):557.1[m+1]
+
。
[0896]
第六步
[0897]
1-(5-(1-(2,6-二氟苄基)-5-(二甲氨基)甲基)-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧基-1,2,3,4-四氢噻吩[2,3-d]嘧啶-6-基)噻吩-2-基)-3-甲氧基脲
[0898]
向6-(5-氨基噻吩-2-基)-1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-5-[(二甲氨基)甲基]-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)噻吩[2,3-d]嘧啶-2,4-二酮(50mg,0.09mmol)溶于二氯甲烷(4ml)的溶液中加入三乙胺(91mg,0.9mmol)和4-硝基苯基甲氧基氨基甲酸酯(57mg,0.27mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌4小时。反应完成后反应液浓缩。浓缩得到的残留物制备(乙腈/水/0.1％甲酸)纯化得到1-(5-(1-(2,6-二氟苄基)-5-(二甲氨基)甲基)-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧基-1,2,3,4-四氢噻吩[2,3-d]嘧啶-6-基)噻吩-2-基)-3-甲氧基脲(1.12mg，近白固体)。产率：1.9％。
[0899]
ms m/z(esi):630.2[m+1]
+
。
[0900]1h nmr(400mhz,cd3od)δ8.52(s,1h),7.65(d,j＝9.2hz,1h),7.47
–
7.36(m,2h),7.03(dd,j＝13.6,6.0hz,3h),6.77(d,j＝4.0hz,1h),5.41(s,2h),4.38(s,2h),4.15(s,3h),3.72(s,3h),2.65(d,j＝12.4hz,6h).
[0901]
实施例28
[0902]
1-(5-{5-[(二甲基氨基)甲基]-1-{[2-氟-6-(三氟甲基)苯基]甲基}-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基}吡啶-2-基)-3-甲氧基脲
[0903][0904]
第一步
[0905]
5-溴-2-[(乙氧羰基)({[2-氟-6-(三氟甲基)苯基]甲基})氨基]-4-甲基噻吩-3-甲酸乙酯的制备
[0906]
将5-溴-2-[[(乙氧基羰基)氨基]-4-甲基噻吩-3-甲酸乙酯(10.00g，0.03mol)的溶液中，2-(溴甲基)-1-氟-3-(三氟甲基)苯(8.40g，0.03mol)，碳酸钾(10.00g，0.07mol)，碘化钾(5.00g，0.03mol)溶于dmf(20ml)中。将混合液在65℃下搅拌6小时。然后用乙酸乙酯(2x100ml)萃取。有机相合并后用无水硫酸钠干燥，浓缩后将得到的残留物用硅胶柱(石油醚/乙酸乙酯＝3/1)分离纯化后得到5-溴-2-[(乙氧羰基)({[2-氟-6-(三氟甲基)苯基]甲基})氨基]-4-甲基噻吩-3-甲酸乙酯(9.10g，橙色油状物),产率：52％。
[0907]
ms m/z(esi):512.0[m+1]
+
。
[0908]
第二步
[0909]
5-溴-4-(溴甲基)-2-[(乙氧羰基)({[2-氟-6-(三氟甲基)苯基]甲基})氨基]噻吩-3-甲酸乙酯的制备
[0910]
将5-溴-2-[(乙氧羰基)({[2-氟-6-(三氟甲基)苯基]甲基})氨基]-4-甲基噻吩-3-甲酸乙酯(9.10g，0.02mol)的溶液中，nbs(35.00g，0.20mol)和aibn(3.00g，0.02mol)溶于乙酸乙酯(20ml)中，混合液在85℃下搅拌18h。然后用乙酸乙酯(2x100ml)萃取。有机相合并后用无水硫酸钠干燥，浓缩后得到粗品5-溴-4-(溴甲基)-2-[(乙氧羰基)({[2-氟-6-(三氟甲基)苯基]甲基})氨基]噻吩-3-甲酸乙酯(9.50g，棕红色油状物),产率：72％。
[0911]
ms m/z(esi):590.0[m+1]
+
。
[0912]
第三步
[0913]
5-溴-2-[(乙氧基羰基)({[2-氟-6-(三氟甲基)苯基]甲基})氨基]-4-[(甲基氨
基)甲基]噻吩-3-甲酸乙酯的制备
[0914]
将甲胺盐酸盐(16.00g，0.24mol)与三乙胺(49.00g，0.48mol)溶于dmf(50ml)溶液中，混合物在0℃下搅拌30分钟，然后将溶于dmf(30ml)的5-溴-4-(溴甲基)-2-[(乙氧羰基)({[2-氟-6-(三氟甲基)苯基]甲基})氨基]噻吩-3-甲酸乙酯溶液(9.50g，0.02mol)缓慢滴加到上述溶液中，此混合液在0℃下搅拌5小时。然后用乙酸乙酯(2x100ml)萃取。有机相合并后用无水硫酸钠干燥，浓缩后得到粗品5-溴-2-[(乙氧基羰基)({[2-氟-6-(三氟甲基)苯基]甲基})氨基]-4-[(甲基氨基)甲基]噻吩-3-甲酸乙酯(9.80g，棕红色油状物),产率：57％。
[0915]
ms m/z(esi):541.1[m+1]
+
。
[0916]
第四步
[0917]
({[(叔丁氧基)羰基](甲基)氨基}甲基)-2-[(乙氧基羰基)({[2-氟-6-(三氟甲基)苯基]甲基})氨基]乙基噻吩-3-甲酸-5-溴-4-乙酯盐的制备
[0918]
将5-溴-2-[(乙氧基羰基)({[2-氟-6-(三氟甲基)苯基]甲基})氨基]-4-[((甲基氨基)甲基]噻吩-3-甲酸乙酯(9.80g,0.02mol)，二碳酸二叔丁酯(16.00g，0.07mol)，三乙胺(24.00g，0.24mol)和4-二甲基吡啶(11.00g，0.09mol)溶于二氯甲烷(50ml)中。此混合液在25℃下搅拌1小时。然后用二氯甲烷(2x100ml)萃取。有机相合并后用无水硫酸钠干燥，浓缩后将得到的残留物用硅胶柱(石油醚/乙酸乙酯＝2/1)分离纯化后得到({[(叔丁氧基)羰基](甲基)氨基}甲基)-2-[(乙氧基羰基)({[2-氟-6-(三氟甲基)苯基]甲基})氨基]乙基噻吩-3-甲酸5-溴-4-乙酯(4.00g，黄色油状物),产率：30％。
[0919]
ms m/z(esi):541.0[m+1-100]。
[0920]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ7.8-7.41(m,2h),7.22(d,j＝8.4hz,1h),5.10(s,2h),4.64(s,2h),4.30(q,j＝7.2hz,2h),4.19-4.09(m,2h),1.54(s,3h),1.46(s,9h),1.36(t,j＝7.2hz,3h),1.22-1.11(m,3h).
[0921]
第五步
[0922]
5-溴-4-({[(叔丁氧基)羰基](甲基)氨基}甲基)-2-[(乙氧基羰基)({[2-氟-6-(三氟甲基)苯基]甲基})氨基]噻吩-3-甲酸的制备
[0923]
将({[(叔丁氧基)羰基](甲基)氨基}甲基)-2-[(乙氧基羰基)({[2-氟-6-(三氟甲基)苯基]甲基})氨基]乙基噻吩-3-甲酸5-溴-4-乙酯(4.00g,6.20mmol)与氢氧化钾(1.04g,18.60mmol)溶于乙醇(100ml)中。然后加入水(3.6ml)。反应液在65℃下反应5小时。然后1m稀盐酸调ph至6-7，用乙酸乙酯(2x100ml)萃取。有机相合并后用无水硫酸钠干燥，浓缩后得到5-溴-4-({{叔丁基(甲酰基)-l-{3}-氧化氧烷基](甲基)氨基}甲基)-2-[({{2-[((二氟甲基)-l-{2}-氟烷基]-6-氟苯基}甲基)(乙氧羰基)氨基]噻吩-3-甲酸(3.50g,黄色油状物)，产率：85.48％。
[0924]
ms m/z(esi):513.0(m+1-100)。
[0925]
第六步
[0926]
(n-[5-溴-4-({[((叔-丁氧基)羰基][甲基]氨基}甲基)乙基-3-[(6-甲氧基哒嗪-3-基)氨基甲酰基]噻吩-2-基]-n-{[[2-氟-6-(三氟甲基)苯基]甲基}氨基甲酸酯的制备
[0927]
向5-溴-4-({{叔丁基(甲酰基)-l-{3}-氧化氧烷基](甲基)氨基}甲基)-2-[({{2-[((二氟甲基)-l-{2}-氟烷基]-6-氟苯基}甲基)(乙氧羰基)氨基]噻吩-3-甲酸(2.00g，
3.3mmol)，6-甲氧基吡啶并-3-胺(0.45g，3.60mmol)和三乙胺(4.01g，3.96mmol)，t3p(10.5g，33.00mmol)溶于dmf(20ml)中，混合液在90℃下反应4小时。然后用乙酸乙酯(2x100ml)萃取。有机相合并后用无水硫酸钠干燥，浓缩后用柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝3/1)纯化得到(n-[5-溴-4-({[((叔-丁氧基)羰基][甲基]氨基}甲基)乙基-3-[(6-甲氧基哒嗪-3-基)氨基甲酰基]噻吩-2-基]-n-{[[2-氟-6-(三氟甲基)苯基]甲基}氨基甲酸酯(1.40g,黄色油状物)，产率：51％。
[0928]
ms m/z(esi):720.1[m+1]
+
。
[0929]
第七步
[0930]
n-[(6-溴-1-{[2-氟-6-(三氟甲基)苯基]甲基}-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲基]-n-甲基氨基甲酸叔丁酯的制备
[0931]
将(n-[5-溴-4-({[((叔-丁氧基)羰基][甲基]氨基}甲基)乙基-3-[(6-甲氧基哒嗪-3-基)氨基甲酰基]噻吩-2-基]-n-{[[2-氟-6-(三氟甲基)苯基]甲基}氨基甲酸酯(1.40g,1.90mmol)与甲醇钠(0.51g,9.5mmol)溶于甲醇/四氢呋喃(16ml)。反应液在65℃反应0.5小时。然后用1m稀盐酸调ph至6-7，用乙酸乙酯(2x100ml)萃取。有机相合并后用无水硫酸钠干燥，浓缩后用柱层析法(石油醚/乙酸乙酯：4/1)纯化得到n-[(6-溴-1-{[2-氟-6-(三氟甲基)苯基]甲基}-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲基]-n-甲基氨基甲酸叔丁酯(1.12g,橙色油状物)，产率：74％。
[0932]
ms m/z(esi):574.0[m+1-100]。
[0933]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ7.59(d,j＝8.0hz,1h),7.52-7.47(m,1h),7.37(d,j＝9.2hz,1h),7.30-7.27(m,1h),7.13(d,j＝9.2hz,1h),5.48(s,2h),4.82(s,2h),4.19(s,3h),2.76(s,3h),1.44(s,9h).
[0934]
第八步
[0935]
6-溴-1-{{[2-氟-6-(三氟甲基)苯基]甲基}-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-5-[(甲基氨基)甲基]噻吩并[2,3-d]嘧啶-2,4-二酮的制备
[0936]
将n-[(6-溴-1-{[2-氟-6-(三氟甲基)苯基]甲基}-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲基]-n-甲基氨基甲酸叔丁酯(1.12g,1.70mmol)溶于二氯甲烷：三氟乙酸＝4：1(5ml)。反应液在25℃下反应1小时。浓缩反应液后得到粗品6-溴-1-{{[2-氟-6-(三氟甲基)苯基]甲基}-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-5-[(甲基氨基)甲基]噻吩并[2,3-d]嘧啶-2,4-二酮(1.00g,红色固体)，产率：71％。
[0937]
ms m/z(esi):574.0[m+1]
+
。
[0938]
第九步
[0939]
n-[(6-溴-1-{[2-氟-6-(三氟甲基)苯基]甲基}-3-(6-甲氧吡啶并-3-基)-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲基]-n-甲基氨基甲酸苄酯的制备
[0940]
将6-溴-1-{{[2-氟-6-(三氟甲基)苯基]甲基}-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-5-[(甲基氨基)甲基]噻吩并[2,3-d]嘧啶-2,4-二酮(1.00g,1.70mmol)与三乙胺(1.03g,10.1mmol)，氯甲酸苄酯(0.87g,5.00mmol)溶于二氯甲烷(10ml)。反应液于室温下反应1小时。反应结束后，用饱和食盐水(2x50ml)萃取。将有机相合并，无水硫酸钠干燥并浓缩后用柱层析法(石油醚/乙酸乙酯：3/1)纯化得到n-[(6-溴-1-{[2-氟-6-(三氟甲基)苯基]甲基}-3-(6-甲氧吡啶并-3-基)-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲基]-n-甲基氨基甲酸
苄酯的制备(900mg,黄色固体)，收率：59％。
[0941]
ms m/z(esi):708.0[m+1]
+
。
[0942]
第十步
[0943]
[3-({[6-(6-{[(叔丁氧基)羰基]氨基}吡啶-3-基)-1-{[2-氟-6-(三氟甲基)苯基]甲基}-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基]甲基}(甲基)氨基)苯基]甲酸甲酯的制备
[0944]
将纯化得到n-[(6-溴-1-{[2-氟-6-(三氟甲基)苯基]甲基}-3-(6-甲氧吡啶并-3-基)-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲基]-n-甲基氨基甲酸苄酯的制备(900mg,1.27mmol)，(6-氨基吡啶-3-基)硼二醇(529mg,1.65mmol)，碳酸钾(527mg,3.81mmol)，三二亚苄基丙酮二钯(162mg,0.38mmol)与2-双环已基膦-2',6'-二异丙氧基联苯(356mg,0.76mmol)溶于甲苯：乙醇：水＝7：2：1(1ml)。反应液于80℃微波反应30分钟。然后用二氯甲烷(2x50ml)萃取。将有机相合并，无水硫酸钠干燥浓缩后用柱层析法(石油醚/乙酸乙酯：5/1)纯化得到[3-({[6-(6-{[(叔丁氧基)羰基]氨基}吡啶-3-基)-1-{[2-氟-6-(三氟甲基)苯基]甲基}-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基]甲基}(甲基)氨基)苯基]甲酸甲酯(600mg,橙色固体)，收率：40％。
[0945]
ms m/z(esi):822.2[m+1]
+
。
[0946]
第十一步
[0947]
n-(5-{5-[(二甲基氨基)甲基]-1-{[2-氟-6-(三氟甲基)苯基]甲基}-3-(6-甲氧基吡啶并-3-基)-2，4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基}吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的制备
[0948]
将[3-({[6-(6-{[(叔丁氧基)羰基]氨基}吡啶-3-基)-1-{[2-氟-6-(三氟甲基)苯基]甲基}-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基]甲基}(甲基)氨基)苯基]甲酸甲酯(600mg,0.73mmol)，乙酸(3滴)，pd-c(427mg,3.09mmol)，多聚甲醛(329mg,3.65mmol)溶于甲醇(10ml)。氢气条件下室温下反应16小时。反应结束后，过滤除去固体后浓缩得到粗品基n-(5-{5-[(二甲基氨基)甲基]-1-{[2-氟-6-(三氟甲基)苯基]甲基}-3-(6-甲氧基吡啶并-3-基)-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基}吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯(400mg,黄色油状物)，收率：39％。
[0949]
ms m/z(esi):702.1[m+1]
+
。
[0950]
第十二步
[0951]
6-(6-氨基吡啶-3-基)-5-[(二甲基氨基)甲基]-1-{[2-氟-6-(三氟甲基)苯基]甲基}-3-(6-甲氧基吡啶并-3-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2,4-二酮的制备
[0952]
将粗品基n-(5-{5-[(二甲基氨基)甲基]-1-{[2-氟-6-(三氟甲基)苯基]甲基}-3-(6-甲氧基吡啶并-3-基)-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基}吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯(400mg,0.57mmol)溶于二氯甲烷：三氟乙酸＝4：1(5ml)。反应液在室温下反应1小时。浓缩反应液后得到粗品6-(6-氨基吡啶-3-基)-5-[(二甲基氨基)甲基]-1-{[2-氟-6-(三氟甲基)苯基]甲基}-3-(6-甲氧基吡啶并-3-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2,4-二酮(200mg,棕色油状物)，产率：29％。
[0953]
ms m/z(esi):602.0[m+1]
+
。
[0954]
第十三步
[0955]
n-(5-{5-[(二甲基氨基)甲基]-1-{[2-氟-6-(三氟甲基)苯基]甲基}-3-(6-甲氧
基吡啶并-3-基)-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基}吡啶-2-基)氨基甲酸苯酯的制备
[0956]
将6-(6-氨基吡啶-3-基)-5-[(二甲基氨基)甲基]-1-{[2-氟-6-(三氟甲基)苯基]甲基}-3-(6-甲氧基吡啶并-3-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2,4-二酮(10mg,0.02mmol)与氯甲酸苯酯(13mg,0.08mmol)溶于二氯甲烷(5ml)，然后加入吡啶(6.57mg,0.08mmol)。反应液于0℃下反应60分钟。反应结束后，不做任何后处理，得到粗品苯基n-(5-{5-[(二甲基氨基)甲基]-1-{[2-氟-6-(三氟甲基)苯基]甲基}-3-(6-甲氧基吡啶并-3-基)-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基}吡啶-2-基)氨基甲酸酯(12mg,黄色固体)，产率：30％。
[0957]
ms m/z(esi):722.2[m+1]
+
。
[0958]
第十四步
[0959]
1-(5-{5-[(二甲基氨基)甲基]-1-{[2-氟-6-(三氟甲基)苯基]甲基}-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基}吡啶-2-基)-3-甲氧基脲的制备
[0960]
将n-(5-{5-[(二甲基氨基)甲基]-1-{[2-氟-6-(三氟甲基)苯基]甲基}-3-(6-甲氧基吡啶并-3-基)-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基}吡啶-2-基)氨基甲酸苯酯(50mg,0.07mmol)，盐酸邻甲基羟胺(23mg,0.27mmol)及diea(35mg,0.27mmol)溶于四氢呋喃(5ml)。反应液于60℃下反应两天。反应结束后，减压浓缩掉溶剂，用c18反向柱粗纯化后再经过制备(乙腈/水/0.01％甲酸)纯化后得到1-(5-{5-[(二甲基氨基)甲基]-1-{[2-氟-6-(三氟甲基)苯基]甲基}-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二氧噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基}吡啶-2-基)-3-甲氧基脲(1.87mg,白色固体)，收率：4％。
[0961]
ms m/z(esi):675.1[m+1]
+
。
[0962]
hplc:90.15％(214nm),85.91％(254nm).
[0963]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ8.30(d,j＝8.8hz,2h),8.12(d,j＝6.4hz,1h),8.00(d,j＝8.8hz,1h),7.79(dd,j＝8.8,2.0hz,1h),7.69-7.65(m,1h),7.57(d,j＝8.0hz,1h),7.49-7.44(m,1h),7.30-7.27(d,1h),7.17(d,j＝9.2hz,1h),5.54(s,4h),4.18(s,3h),3.83(s,3h),2.50(s,6h).
[0964]
实施例29
[0965]
1-(5-(1-(2,6-二氟苄基)-5-((二甲氨基)甲基)-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二酮-1,2,3,4-四氢噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基)嘧啶-2-基)-3-甲氧基脲
[0966][0967]
第一步
[0968]
((6-(2-氨基嘧啶-5-基)-1-(2,6-二氟苄基)-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二酮-1,2,3,4-四氢噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯的制备
[0969]
将((6-溴-1-(2,6-二氟苄基)-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二酮-1,2,3,4-四氢噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(1000mg,1.61mmol)溶于甲苯，乙醇和水的混合溶液(7：2：1，10ml)中。依次加入2-氨基嘧啶-5-硼酸频哪酯(444.3mg,3.22mmol)，三(二亚苄基丙酮)二钯(736.6mg,0.81mmol)，2-二环己基磷-2',6'-二异丙氧基-1,1'-联苯(377.9mg,0.81mmol)，碳酸钾(666.5mg,4.83mmol)，氮气换气三次。在微波条件下，80℃反应40分钟。反应结束后抽滤，滤液用乙酸乙酯萃取(3x30ml)。合并有机相并用无水硫酸钠干燥，浓缩。浓缩残留物经柱层析(流动相：石油醚/乙酸乙酯＝10/1)纯化后得到((6-(2-氨基嘧啶-5-基)-1-(2,6-二氟苄基)-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二酮-1,2,3,4-四氢噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(400mg,黄色固体)，产率：38.9％。
[0970]
ms m/z(esi):539.1(m+1-100)。
[0971]
第二步
[0972]
((1-(2,6-二氟苄基)-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二酮-6-(2-((苯氧基羰基)氨基)嘧啶-5-基)-1,2,3,4-四氢噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯的制备
[0973]
将((6-(2-氨基嘧啶-5-基)-1-(2,6-二氟苄基)-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二酮-1,2,3,4-四氢噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(390mg,0.61mmol)溶于二氯甲烷溶液(10ml)中，在冰浴环境下依次加入三乙胺(616.1mg,6.1mmol)，氯甲酸苯酯(190.9mg,1.22mmol)。在氮气气球氛围下，室温搅拌2小时。反应结束后，减压浓缩反应液。浓缩后得到基((1-(2,6-二氟苄基)-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二
酮-6-(2-((苯氧基羰基)氨基)嘧啶-5-基)-1,2,3,4-四氢噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(粗品，400mg,黄色固体)，直接用于下一步反应。
[0974]
ms m/z(esi):659.1[m+1-100]。
[0975]
第三步
[0976]
((1-(2,6-二氟苄基)-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-6-(2-(3-甲氧基脲基)嘧啶-5-基)-2,4-二酮-1,2,3,4-四氢噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯的制备
[0977]
将((1-(2,6-二氟苄基)-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二酮-6-(2-((苯氧基羰基)氨基)嘧啶-5-基)-1,2,3,4-四氢噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(400mg,0.53mmol)溶于四氢呋喃溶液(10ml)中，依次加入甲氧胺盐酸盐(88.5mg,1.06mmol)，三乙胺(267.6mg,2.65mmol)。在氮气气球氛围下，60℃搅拌16小时。反应结束后，减压浓缩反应液。浓缩液经柱层析(流动相：石油醚/乙酸乙酯＝10/1)纯化后得到((1-(2,6-二氟苄基)-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-6-(2-(3-甲氧基脲基)嘧啶-5-基)-2,4-二酮-1,2,3,4-四氢噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(300mg,白色固体)，产率：79.5％。
[0978]
ms m/z(esi):712.1[m+1]
+
。
[0979]
第四步
[0980]
1-(5-(1-(2,6-二氟苄基)-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-5-((甲氨基)甲基)-2,4-二酮-1,2,3,4-四氢噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基)嘧啶-2-基)-3-甲氧基脲的制备
[0981]
将((1-(2,6-二氟苄基)-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-6-(2-(3-甲氧基脲基)嘧啶-5-基)-2,4-二酮-1,2,3,4-四氢噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(250mg,0.35mmol)溶于二氯甲烷溶液(10ml)中，加入三氟乙酸(199.5mg,1.75mmol)。室温搅拌2小时。反应结束后，减压浓缩反应液。浓缩液经柱层析(流动相：二氯甲烷/甲醇＝10/1)纯化后得到1-(5-(1-(2,6-二氟苄基)-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-5-((甲氨基)甲基)-2,4-二酮-1,2,3,4-四氢噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基)嘧啶-2-基)-3-甲氧基脲的制备(120mg,白色固体)，产率：56.3％。
[0982]
ms m/z(esi):612.1[m+1]
+
。
[0983]
第五步
[0984]
1-(5-(1-(2,6-二氟苄基)-5-((二甲氨基)甲基)-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二酮-1,2,3,4-四氢噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基)嘧啶-2-基)-3-甲氧基脲的制备
[0985]
将1-(5-(1-(2,6-二氟苄基)-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-5-((甲氨基)甲基)-2,4-二酮-1,2,3,4-四氢噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基)嘧啶-2-基)-3-甲氧基脲的制备(50mg,0.08mmol)溶于二氯甲烷(5ml)中，依次加入多聚甲醛(72.0mg,0.80mmol)，三乙酰基硼氢化钠(169.6mg,0.80mmol)。室温搅拌2小时。反应结束后，反应液过滤。滤液浓缩后经hplc制备(流动相：乙腈/水)纯化后得到1-(5-(1-(2,6-二氟苄基)-5-((二甲氨基)甲基)-3-(6-甲氧基哒嗪-3-基)-2,4-二酮-1,2,3,4-四氢噻吩并[2,3-d]嘧啶-6-基)嘧啶-2-基)-3-甲氧基脲(2.40mg，白色固体)，产率4.8％。
[0986]
ms m/z(esi):626.1[m+1]
+
。
[0987]
hplc:95.20％(214nm),93.87％(254nm).
[0988]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ11.20(s,1h),10.25(s,1h),8.82(s,2h),8.21(s,1h),7.76(d,j＝9.2hz,1h),7.47(d,j＝9.2hz,2h),7.15(t,j＝8.4hz,2h),5.39(s,2h),5.23(s,2h),4.09(s,3h),3.69(s,3h),2.07(s,6h).
[0989]
生物学评价
[0990]
测试例1、本发明化合物对人源gnrhr活性的测定
[0991]
该方法用来测定本发明中的化合物对人源gnrhr/hek293稳转细胞株中所表达的人源gnrhr蛋白活性的拮抗作用。
[0992]
1、试验材料及仪器
[0993]
1.1培养基
[0994]
f12(gibco,cat#11765-047)；fbs(corning,cat#35-076-cv)；geneticin(invitrogen,cat#10131)；penicillin/streptomycin(invitrogen,cat#15140)。
[0995]
1.2试剂
[0996]
fluo-4 direct(invitrogen,cat#f10471)；hbss(gibco,cat#14025076)；hepes(gibco,cat#15630080)；bonine serum albumin(sgima,cat#b2064-100g)。
[0997]
1.3仪器耗材
[0998]
384well poly-d-lysine protein coating plate(greiner,cat#781946)；flipr(molecular devices)；vi-cell xr cell viability analyzer(beckman coulter)；incubator(thermo)。
[0999]
2、实验步骤
[1000]
2.1人源gnrhr/hek293稳转细胞株接种于384-well细胞培养板，接种密度为12000cells/well/25μl，于37℃，5％co2培养过夜；
[1001]
2.2冻融20x component a至室温，用assay buffer将其稀释至2x工作浓度，于室温待用；
[1002]
2.3将细胞培养板于室温平衡10分钟，去除培养基，加入20μl assay buffer和20μl 2xcomponent a，200g，rt离心3-5sec，37℃，孵育2小时；
[1003]
2.4利用dmso将化合物于384pp_dmso板中进行3倍稀释，然后利用echo 550将化合物转移各240nl/well至工作板中，200g，rt，1min；加入40μl assay buffer至工作板中，200g，rt，1min后，于振荡器2500rpm，20min，混匀后200g，rt，1min待用；
[1004]
2.5用assay buffer配制180nm lh-rh(6x)，取50ul至3657板中，待用；
[1005]
2.6取出细胞培养板于室温静置10min，加入10μl步骤2.4中稀释好的化合物至相应孔中于25℃静置30min；
[1006]
2.7利用flipr tetra将10μl步骤2.5中稀释好的化合物加入相应实验孔中，收集数据。
[1007]
3.实验数据：
[1008]
本发明中化合物对人源gnrhr拮抗活性通过以上的实验进行测定，测得的ic
50
值见表1。
[1009]
表1本发明中化合物对人源gnrhr拮抗活性的ic
50
值。
[1010][1011][1012]
4.实验结论：
[1013]
以上数据显示，本发明化合物对人源gnrhr活性具有明显的拮抗作用，效果明显优于阳性对照药物relugolix。
[1014]
测试例2、本发明化合物的herg抑制测试
[1015]
人心室快速激活延迟整流钾电流(ikr)主要由心脏中人类ether-a-go-go相关基因(herg)钾离子通道介导。对ikr的抑制是非心脏病类药物引起心室肌动作电位时程延长的最常见机理。动作电位时程的延长将导致临床心电图上出现qt间期延长，这与危险的室性心律失常、扭转性心动过速相关。由于这些心脏毒性作用，许多药物已经从后期临床试验中被撤出，因此在药物研发早期对抑制剂进行鉴定是很重要的。因此在异源表达的系统中研究药物对herg钾离子通道的作用是ich推荐的作为测试药物对qt间期影响的非临床研究方法。
[1016]
herg抑制研究旨在定量本发明的化合物对在稳定转染的具有人类ether-a-go-go相关基因(herg)的hek 293细胞中在常氧条件下所产生的钾选择性ikr电流的体外作用。
[1017]
细胞种在细胞记录槽中放置在倒置显微镜载物台上，随机选择记录槽中的一个细胞进行试验。灌流系统固定在倒置显微镜载物台上用ecs持续灌流细胞。
[1018]
用毛细玻璃管制备手动膜片钳试验记录微电极，其中充灌细胞内液。在膜片钳试验当天，使用硼硅酸盐玻璃管(gc150tf-10,harvard apparatus co.uk)制备电极。电极充灌ics后电阻在2-5mω之间。
[1019]
钳制电压为-80mv，第一步去极化至+60mv并维持850ms开放herg通道。然后，电压设置为-50mv并维持1275ms，产生反弹电流或者称为尾电流，尾电流的峰值将被测量并用于分析。最后，电压恢复到钳制电压(-80mv)。试验过程中，这个指令电压程序每间隔15s重复一次。
[1020]
在溶媒对照工作溶液灌流的记录开始阶段，监测尾电流峰值直至稳定3条以上扫描曲线后则可以灌流待测试的化合物工作溶液，直到化合物工作溶液对herg电流峰值的抑制作用达到稳定状态。一般以最近的连续3个电流曲线峰值基本重合作为判断是否稳定状态的标准，达到稳定态势以后继续灌流下一浓度化合物。
[1021]
对于每一个浓度记录到所有的细胞抑制百分比取均值，ic
50
值由浓度效应曲线中得出。ic
50
值高于10μm的所有化合物均被认为不是herg通道的强效抑制剂，而具有低于1μm的ic
50
值的化合物则被认为是强效的herg通道抑制剂。
[1022]
实验数据：
[1023]
表2本发明中化合物在herg抑制测试中的ic
50
值
[1024]
实施例编号ic
50
(μm)relugolix25.144》30
[1025]
实验结论：
[1026]
以上数据显示，本发明化合物均不是herg通道的强效抑制剂。
[1027]
测试例3、本发明化合物的大鼠药代动力学测试
[1028]
1、实验目的：
[1029]
以sd大鼠为受试动物，应用lc/ms/ms法测定了大鼠灌胃给予实施例化合物后不同时刻血浆中的药物浓度。研究本发明的化合物在大鼠体内的药代动力学行为，评价其药动学特征。
[1030]
2、实验方案
[1031]
2.1实验药品
[1032]
本发明实施例化合物，自制。
[1033]
2.2实验动物
[1034]
健康成年sd大鼠。
[1035]
2.3药物配制
[1036]
称取适量样品，灌胃给药组溶剂配方为2％dma+97.4％(0.5％cmc-na)+0.6％2m naoh，超声配制成0.3mg/ml的混悬液。
[1037]
2.4给药
[1038]
sd大鼠，禁食过夜后分别灌胃给药，给药剂量为3mg/kg。
[1039]
3、实验步骤：
[1040]
灌胃给药组于给药前及给药后30min、1h、4h、6h、8h、12h、24h、48h、72h、96h、168h、240h采血0.1ml置于肝素化试管中，3500rpm离心10分钟，分离血浆，于-20℃保存。给药后4
小时后恢复给食/自由饮水。
[1041]
用lc/ms/ms法测定灌胃给药后大鼠血浆中的待测化合物含量。
[1042]
4、实验数据：
[1043]
表3本发明中化合物的药代动力学参数。
[1044][1045][1046]
nd：未检测到数据；n/a：不适用。
[1047]
5、实验结论：
[1048]
以上数据显示，本发明化合物的大鼠灌胃药代吸收较好，具有明显的药代吸收效果。
[1049]
以上，对本发明的实施方式进行了说明。但是，本发明不限定于上述实施方式。凡在本发明的精神和原则之内，所做的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。