技术特征：
1.一种dna甲基化调控mmp2基因转录的方法，其特征在于：通过调节mmp2基因启动子区dna甲基化水平，实现猪卵巢颗粒细胞中mmp2基因转录活性的调控；所述的mmp2基因启动子区dna甲基化为mmp2基因启动子区中bsp1甲基化和/或bsp2甲基化；所述的bsp1为mmp2基因启动子-1884～-1654bp区域，所述的bsp2为mmp2基因启动子-1381～-1148bp区域。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的mmp2基因启动子区dna甲基化水平降低，mmp2基因转录活性升高。3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述的bsp1甲基化的位点为第10个cg位点，所述的bsp2甲基化的位点为第2个cg位点。4.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述的mmp2基因启动子区dna甲基化水平降低通过dna甲基转移酶抑制剂5-aza-cdr或rna干扰技术抑制dna甲基转移酶dnmt3a或dnmt3b的表达实现。5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：采用的抑制dnmt3a的sirna如下：dnmt3a-sirna：5
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。6.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：采用的抑制dnmt3b的sirna如下：dnmt3b-sirna：5
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。7.一种猪卵巢颗粒细胞mmp2基因的核心启动子功能调节区，其特征在于：为mmp2基因启动子-1884～-1654bp区域或-1381～-1148bp区域。8.一种调控猪卵巢颗粒细胞mmp2基因表达的核酸片段，其特征在于：为dna甲基转移酶dnmt3a或dnmt3b的sirna。9.根据权利要求8所述的核酸片段，其特征在于：所述sirna为如下序列中的任意一种：dnmt3a-sirna：5
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acccttacaaagaagtttaca-3
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；dnmt3b-sirna：5
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。10.权利要求7中所述的核心启动子功能调节区或权利要求8-9任一项中所述的核酸片段在调控猪卵巢颗粒细胞mmp2基因表达中的应用。
技术总结
本发明公开一种DNA甲基化调控MMP2基因转录的方法，属于细胞工程和基因工程技术领域。本发明以MMP2基因启动子区DNA甲基化以及MMP2基因为研究对象，通过分析MMP2基因在卵泡发育过程中的表达与甲基化水平的关联，然后利用5-Aza-CdR或DNMT1-siRNA、DNMT3A-siRNA和DNMT3B-siRNA验证MMP2基因启动子低甲基化促进其表达。本发明通过探究DNA甲基化调控MMP2基因转录表达机制的应用，对研究MMP2基因启动子区的DNA甲基化影响卵巢卵泡发育以及母猪初情启动等的分子机制具有一定的应用价值。情启动等的分子机制具有一定的应用价值。情启动等的分子机制具有一定的应用价值。
技术研发人员：袁晓龙 李泳光 李加琪 方明 吕嫒媛 张哲 张豪
受保护的技术使用者：华南农业大学
技术研发日：2022.05.30
技术公布日：2022/9/6