三环类化合物及其用途的制作方法

三环类化合物及其用途
1.本发明要求2021年6月10日向中国国家知识产权局提交的，专利申请号为202110649480.4，发明名称为“三环类化合物及其用途”的在先申请的优先权。上述在先申请的全文通过引用的方式结合于本发明中。
技术领域
2.本发明属于医药技术领域，具体的涉及一种三环类化合物或其药学上可接受的盐，含有它们的药物组合物以及其作为sos1抑制剂在预防或治疗相关疾病中的用途。


背景技术：

3.ras家族蛋白包括kras(v-ki-ras2 kirsten大鼠肉瘤病毒致癌基因同源物)、nras(神经母细胞瘤ras病毒致癌基因同源物)和hras(harvey鼠肉瘤病毒致癌基因)等，是存在于细胞中处于gtp结合状态或gdp结合状态的小gtp酶(mccormick等人,j.mol.med.(berl).,2016,94(3):253-8；nimnual等人,sci.stke.,2002,2002(145):pe36)。
4.ras家族蛋白在人类癌症中起着重要作用。ras蛋白突变引起的肿瘤占人类所有肿瘤的20-30％，并且被认为是致瘤驱动因素，特别是在肺癌，结直肠癌和胰腺癌中(malumbres&barbacid 2002nature reviews cancer，pylayeva-gupta等人，2011nature reviews cancer)。
5.sos1(son of sevenless homolog 1)蛋白是一种在细胞中广泛表达的调控蛋白，作为ras、rac蛋白的一类鸟嘌呤核苷酸交换因子，在细胞内ras、rac信号转导通路中起着重要的调控作用。sos1具有两个针对ras家族蛋白的结合位点：催化位点，所述催化位点结合gdp结合的ras家族蛋白以促进鸟嘌呤核苷酸交换；变构位点，所述变构位点结合gtp结合的ras家族蛋白，这导致sos1的催化gef功能进一步增加(freedman等人，proc.natl.acad.sci.usa.,2006,103(4 5):16692-7；pierre等人,biochem.pharmacol.,2011,82(9):1049-56)。公开数据表明sos1参与在癌症中的突变kras活化和致癌信号传导(jeng等人,nat.commun.,2012,3:1168)。消耗sos1水平会降低携带kras突变的肿瘤细胞的增殖率和存活，而在kras野生型细胞系中没有观察到作用。sos1丧失的影响无法通过引入催化位点突变的sos1弥补，进一步证明了sos1 gef活性在kras突变癌细胞中的重要作用。
6.在近几十年中，ras家族蛋白-sos1蛋白相互作用已进行了越来越多的研究。已鉴别出小的激活分子，其结合至紧密靠近ras结合位点的sos1的亲脂性口袋(burns等人，proc.natl.acad.sci.2014,111(9):3401-6)。然而，这些分子的结合似乎导致核苷酸交换增加，从而激活ras而非使其失活。
7.虽然现有文献中也报道了一些sos1小分子抑制剂(如专利文献wo2018/115380a1)，但仍有大量的患者无法得到满意的临床治疗效果，因此目前仍然需要开发具有活性更好，选择性更好、安全性更佳的sos1抑制剂。


技术实现要素：

8.本发明提供式(i)所示化合物及其药学上可接受的盐。这些化合物可以抑制sos1的活性，从而影响生物学功能。
9.本发明提供了一种式(i)所示化合物或其药学上可接受的盐，
[0010][0011]
其中，
[0012]
x选自ch或n；
[0013]
y选自ch或n；
[0014]
z选自ch或n；
[0015]
l选自化学键、nr6或o；
[0016]
r6选自h或c
1-c6烷基；
[0017]
r1选自h、卤素、羟基、氰基、氨基、c
1-c6烷基、c
1-c3卤代烷基、c
1-c3氘代烷基、-o-c
1-c6烷基或c
3-c6环烷基；
[0018]
r2选自c
3-c
10
环烷基、c
6-c
10
芳基、3-10元杂环基或5-10元杂芳基，所述c
3-c
10
环烷基、c
6-c
10
芳基、3-10元杂环基或5-10元杂芳基任选地被r
2b
和/或r
2c
取代；
[0019]r2b
独立地选自卤素、氰基、-or
2c
、-n(r
2c
)2、-c(o)r
2c
、-c(o)n(r
2c
)2、-c(o)or
2c
、-s(o)2r
2c
、-s(o)2n(r
2c
)2、-nhc(o)r
2c
或-n(c
1-c3烷基)c(o)r
2c
；
[0020]
每一个r
2c
独立地选自h、氘、c
1-c3氘代烷基、c
1-c6烷基、c
3-c
10
环烷基、c
6-c
10
芳基、3-10元杂环基或5-10元杂芳基，所述c
1-c6烷基、c
3-c
10
环烷基、c
6-c
10
芳基、3-10元杂环基或5-10元杂芳基任选地被r
2d
取代；
[0021]r2d
选自独立地卤素、羟基、氰基、氨基、-c(o)r
2f
、-c(o)n(r
2f
)2、-c(o)or
2f
、-s(o)2r
2f
、-s(o)2n(r
2f
)2、-n(c
1-c3烷基)r
2f
、-nhc(o)r
2f
或-n(c
1-c3烷基)c(o)r
2f
；
[0022]
每一个r
2f
独立地选自h或c
1-c6烷基；
[0023]
r3、r4独立地选自h、氘、c
1-c3氘代烷基、c
1-c6烷基或c
1-c3卤代烷基；
[0024]
r5选自卤素、羟基、氰基、氨基、c
1-c6烷基、c
3-c6环烷基、-o-c
1-c6烷基、-o-c
3-c6环烷基、-o-(4-7元杂环基)、-s(o)
2-c
1-c3烷基、-p(o)(r
5b
)2、-c(o)r
5b
、-c(o)n(r
5b
)2、-c(o)or
5b
、4-7元杂环基或5-10元杂芳基，所述c
1-c6烷基、c
3-c6环烷基、-o-c
1-c6烷基、-o-c
3-c6环烷基、-o-(4-7元杂环基)、-s(o)
2-c
1-c3烷基、4-7元杂环基或5-10元杂芳基任选地被r
5a
取代；
烷基、c
3-c6环烷基、-o-c
1-c6烷基、-s(o)
2-c
1-c3烷基、4-7元杂环基或5-10元杂芳基任选地被r
5a
取代。
[0050]
在一些实施方案中，r5选自卤素、羟基、氰基、氨基、c
1-c6烷基、-o-c
1-c6烷基、-s(o)
2-c
1-c3烷基、-p(o)(r
5b
)2、或4-7元杂环基，所述c
1-c6烷基、-o-c
1-c6烷基、-s(o)
2-c
1-c3烷基或4-7元杂环基任选地被r
5a
取代。
[0051]
在一些实施方案中，r5选自卤素、氨基、c
1-c6烷基、-s(o)
2-c
1-c3烷基、-p(o)(r
5b
)2或所述c
1-c6烷基或-s(o)
2-c
1-c3烷基任选地被r
5a
取代。
[0052]
在一些实施方案中，r5选自f、ch3、氨基、-s(o)
2-ch3或-p(o)(ch3)2，所述ch3或-s(o)
2-ch3任选地被r
5a
取代。
[0053]
在一些实施方案中，r5选自卤素、氨基或c
1-c6烷基基，所述c
1-c6烷基任选地被r
5a
取代。
[0054]
在一些实施方案中，r5选自f、ch3或氨基，所述ch3任选地被r
5a
取代。
[0055]
在一些实施方案中，r5选自卤素或c
1-c6烷基，所述c
1-c6烷基任选地被r
5a
取代。
[0056]
在一些实施方案中，r5选自f或ch3，所述ch3任选地被r
5a
取代。
[0057]
在一些实施方案中，r5选自f或chf2。
[0058]
在一些实施方案中，r
5a
选自卤素。
[0059]
在一些实施方案中，n选自0、1或2。
[0060]
在一些实施方案中，n选自2。
[0061]
在一些实施方案中，环a选自c
6-10
芳基、9-10元杂环基或9-10元杂芳基。
[0062]
在一些实施方案中，环a选自c
6-10
芳基。
[0063]
在一些实施方案中，环a选自苯基。
[0064]
在一些实施方案中，式(i)所示化合物或其药学上可接受的盐选自式(ii)所示化合物或其药学上可接受的盐：
[0065][0066]
其中，环a，l，r1，r2，r3，r4，r5，n如上文的定义。
[0067]
在一些实施方案中，式(i)所示化合物或其药学上可接受的盐选自式(iii)所示化合物或其药学上可接受的盐，
[0068][0069]
其中，环a，l，r1，r2，r3，r4，r5，n如上文的定义。
[0070]
在一些实施方案中，式(i)所示化合物或其药学上可接受的盐选自式(iv)所示化合物或其药学上可接受的盐，
[0071][0072]
其中，环a，l，r1，r2，r3，r4，r5，n如上文的定义。
[0073]
在一些实施方案中，式(i)所示化合物或其药学上可接受的盐选自式(v)所示化合物或其药学上可接受的盐，
[0074][0075]
其中，环a，l，r1，r2，r3，r4，r5，n如上文的定义。
[0076]
在一些实施方案中，式(i)所示化合物或其药学上可接受的盐选自以下化合物或其药学上可接受的盐，
[0077][0078][0079]
进一步，本发明还提供了一种药物组合物，所述药物组合物包含式(i)所示化合物或其药学上可接受的盐，以及药学上可接受的辅料。
[0080]
进一步，本发明涉及的式(i)所示化合物或其药学上可接受的盐，或其药物组合物在制备预防或者治疗与sos1相关疾病的药物中的用途。
[0081]
进一步，本发明涉及的式(i)化合物所示或其药学上可接受的盐，或其药物组合物在预防或者治疗与sos1相关疾病中的用途。
[0082]
进一步，本发明涉及预防或者治疗sos1相关疾病的式(i)化合物或其药学上可接受的盐，或其药物组合物。
[0083]
本发明还涉及治疗sos1相关疾病的方法，该方法包括给以患者治疗上有效剂量的本发明所述的式(i)化合物或其药学上可接受的盐，或其药物组合物。
[0084]
进一步，所述sos1相关疾病选自癌症。
[0085]
除非另有说明，本发明中所用的术语具有下列含义，本发明中记载的基团和术语定义，包括其作为实例的定义、示例性的定义、优选的定义、表格中记载的定义、实施例中具体化合物的定义等，可以彼此之间任意组合和结合。一个特定的术语在没有特别定义的情况下不应该被认为是不确定的或不清楚的，而应该按照本领域普通的含义去理解。当本文中出现商品名时，意在指代其对应的商品或其活性成分。
[0086]
本文中表示连接位点。
[0087]
本文中消旋体或者对映体纯的化合物的图示法来自maehr，j.chem.ed.1985，62:114-120。除非另有说明，用楔形键和虚楔键表示一个立体中心的绝对构型，用黑实键和虚键表示一个立体中心的相对构型(如脂环化合物的顺反构型)。
[0088]
术语“互变异构体”是指因分子中某一原子在两个位置迅速移动而产生的官能团异构体。本发明化合物可表现出互变异构现象。互变异构的化合物可以存在两种或多种可相互转化的种类。互变异构体一般以平衡形式存在，尝试分离单一互变异构体时通常产生一种混合物，其理化性质与化合物的混合物是一致的。平衡的位置取决于分子内的化学特性。例如，在很多脂族醛和酮如乙醛中，酮型占优势；而在酚中，烯醇型占优势。本发明包含化合物的所有互变异构形式。
[0089]
术语“立体异构体”是指由分子中原子在空间上排列方式不同所产生的异构体，包括顺反异构体、对映异构体和非对映异构体。
[0090]
本发明的化合物可以具有不对称原子如碳原子、硫原子、氮原子、磷原子或不对称双键，因此本发明的化合物可以存在特定的几何或立体异构体形式。特定的几何或立体异构体形式可以是顺式和反式异构体、e型和z型几何异构体、(-)-和(+)-对映体、(r)-和(s)-对映体、非对映异构体、(d)-异构体、(l)-异构体，以及其外消旋混合物或其它混合物，例如对映异构体或非对映体富集的混合物，以上所有这些异构体以及它们的混合物都属于本发明化合物的定义范围之内。烷基等取代基中可存在另外的不对称碳原子、不对称硫原子、不对称氮原子或不对称磷原子，所有取代基中涉及到的这些异构体以及它们的混合物，也均包括在本发明化合物的定义范围之内。本发明的含有不对称原子的化合物可以以光学活性纯的形式或外消旋形式被分离出来，光学活性纯的形式可以从外消旋混合物拆分，或通过使用手性原料或手性试剂合成。
[0091]
术语“被取代”是指特定原子上的任意一个或多个氢原子被取代基取代，只要特定原子的价态是正常的并且取代后的化合物是稳定的。当取代基为氧代(即＝o)时，意味着两个氢原子被取代，氧代不会发生在芳香基上。
[0092]
术语“任选”或“任选地”是指随后描述的事件或情况可以发生或不发生，该描述包括发生所述事件或情况和不发生所述事件或情况。例如，乙基“任选”被卤素取代，是指乙基可以是未被取代的(ch2ch3)、单取代的(ch2ch2f、ch2ch2cl等)、多取代的(chfch2f、ch2chf2、chfch2cl、ch2chcl2等)或完全被取代的(cf2cf3、cf2ccl3、ccl2ccl3等)。本领域技术人员可理解，对于包含一个或多个取代基的任何基团，不会引入任何在空间上不可能存在和/或不能合成的取代或取代模式。
[0093]
当任何变量(例如ra、rb)在化合物的组成或结构中出现一次以上时，其在每一种情况下的定义都是独立的。例如，如果一个基团被2个rb所取代，则每个rb都有独立的选项。
[0094]
当一个连接基团的数量为0时，比如-(ch2)
0-，表示该连接基团为键。
[0095]
当其中一个变量选自化学键或不存在时，表示其连接的两个基团直接相连，比如a-l-z中l代表键时表示该结构实际上是a-z。
[0096]
当本文中涉及到的连接基团若没有指明其连接方向，则其连接方向是任意的。例如当结构单元中的l1选自“c
1-c3亚烷基-o”时，此时l1既可以按照与从左到右的方向连接环q和r1构成“环q-c
1-c3亚烷基-o-r
1”，也可以按照从右到左的方向连接环q和r1构成“环q-o-c
1-c3亚烷基-r
1”。
[0097]
当一个取代基的键交叉连接到一个环上的两个原子时，这种取代基可以与这个环上的任意原子相键合。例如，结构单元表示r5可在苯环上的任意一个位置发生取代。
[0098]
本文中的c
m-cn是指具有m-n范围中的整数个碳原子。例如“c
1-c
10”是指该基团可具有1个碳原子、2个碳原子、3个碳原子、4个碳原子、5个碳原子、6个碳原子、7个碳原子、8个碳原子、9个碳原子或10个碳原子。
[0099]
术语“c
1-c3卤代烷基”包含单卤代的c
1-c3烷基或多卤代的c
1-c3烷基，具体实例包括但不限于三氟甲基、2,2,2-三氯乙基或3-氟丙基等。
[0100]
术语“c
1-c3氘代烷基”包含单氘代的c
1-c3烷基或多氘代的c
1-c3烷基，具体实例包括但不限于cd3、ch2cd3等。
[0101]
术语“烷基”是指通式为c
nh2n+1
的烃基，该烷基可以是直链或支链的。术语“c
1-c
10
烷基”可理解为表示具有1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个碳原子的直链或支链饱和烃基。所述烷基的具体实例包括但不限于甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基、异丙基、异丁基、仲丁基、叔丁基、异戊基、2-甲基丁基、1-甲基丁基、1-乙基丙基、1，2-二甲基丙基、新戊基、1，1-二甲基丙基、4-甲基戊基、3-甲基戊基、2-甲基戊基、1-甲基戊基、2-乙基丁基、1-乙基丁基、3，3-二甲基丁基、2，2-二甲基丁基、1，1-二甲基丁基、2，3-二甲基丁基、1，3-二甲基丁基或1，2-二甲基丁基等；术语“c
1-c6烷基”可理解为表示具有1至6个碳原子的烷基，具体实例包括但不限于甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、1-甲基丁基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、新戊基、己基、2-甲基戊基等。术语“c
1-c3烷基”可理解为表示具有1至3个碳原子的直链或支链饱和烷基。所述“c
1-c
10
烷基”可以包含“c
1-c6烷基”或“c
1-c3烷基”等范围，所述“c
1-c6烷基”可以进一步包含“c
1-c3烷基”。
[0102]
术语“环烷基”是指完全饱和的且以单环、并环、桥环或螺环等形式存在的碳环。除
非另有指示，该碳环通常为3至10元环。术语“c
3-c
10
环烷基”可理解为表示饱和的单环、并环、螺环或桥环，其具有3～10个碳原子。所述环烷基的具体实例包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基、环壬基、环癸基，降冰片基(双环[2.2.1]庚基)、双环[2.2.2]辛基、金刚烷基、螺[4.5]癸烷基等。术语“c
3-c
10
环烷基”可以包含“c
3-c6环烷基”，术语“c
3-c6环烷基”可理解为表示饱和的单环或双环烃环，其具有3～6个碳原子，具体实例包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基或环己基等。
[0103]
术语“杂环基”是指完全饱和的或部分饱和的(整体上不是具有芳香性的杂芳族)单环、并环、螺环或桥环基团，其环原子中含有1-5个杂原子或杂原子团(即含有杂原子的原子团)，所述“杂原子或杂原子团”包括但不限于氮原子(n)、氧原子(o)、硫原子(s)、磷原子(p)、硼原子(b)、-s(＝o)
2-、-s(＝o)-、-p(＝o)
2-、-p(＝o)-、-nh-、-s(＝o)(＝nh)-、-c(＝o)nh-或-nhc(＝o)nh-等。术语“3-10元杂环基”是指环原子数目为3、4、5、6、7、8、9或10的杂环基，且其环原子中含有1-5个独立选自上文所述的杂原子或杂原子团。“3-10元杂环基”包括“4-7元杂环基”，其中，4元杂环基的具体实例包括但不限于氮杂环丁烷基或氧杂环丁烷基；5元杂环基的具体实例包括但不限于四氢呋喃基、二氧杂环戊烯基、吡咯烷基、咪唑烷基、吡唑烷基、吡咯啉基、4,5-二氢噁唑基或2,5-二氢-1h-吡咯基；6元杂环基的具体实例包括但不限于四氢吡喃基、哌啶基、吗啉基、二噻烷基、硫代吗啉基、哌嗪基、三噻烷基、四氢吡啶基或4h-[1,3,4]噻二嗪基；7元杂环基的具体实例包括但不限于二氮杂环庚烷基。所述杂环基还可以是双环基，其中，5,5元双环基的具体实例包括但不限于六氢环戊并[c]吡咯-2(1h)-基；5,6元双环基的具体实例包括但不限于六氢吡咯并[1,2-a]吡嗪-2(1h)-基、5,6,7,8-四氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪基或5,6,7,8-四氢咪唑并[1,5-a]吡嗪基。任选地，所述杂环基可以是上述4-7元杂环基的苯并稠合环基，具体实例包括但不限于二氢异喹啉基等。“4-10元杂环基”可以包含“5-10元杂环基”、“4-7元杂环基”、“5-6元杂环基”、“6-8元杂环基”、“4-10元杂环烷基”、“5-10元杂环烷基”、“4-7元杂环烷基”、“5-6元杂环烷基”、“6-8元杂环烷基”等范围，“4-7元杂环基”进一步可以包含“4-6元杂环基”、“5-6元杂环基”、“4-7元杂环烷基”、“4-6元杂环烷基”、“5-6元杂环烷基”等范围。本发明中尽管有些双环类杂环基部分地含有一个苯环或一个杂芳环，但所述杂环基整体上仍是无芳香性的。
[0104]
术语“芳基”是指具有共轭的π电子体系的全碳单环或稠合多环的芳香环基团。芳基可以具有6-20个碳原子，6-14个碳原子或6-12个碳原子。术语“c
6-c
20
芳基”可理解为具有6～20个碳原子的芳基。特别是具有6个碳原子的环(“c6芳基”)，例如苯基；或者具有9个碳原子的环(“c9芳基”)，例如茚满基或茚基；或者具有10个碳原子的环(“c
10
芳基”)，例如四氢化萘基、二氢萘基或萘基；或者具有13个碳原子的环(“c
13
芳基”)，例如芴基；或者是具有14个碳原子的环(“c
14
芳基”)，例如蒽基。术语“c
6-c
10
芳基”可理解为具有6～10个碳原子的芳基。特别是具有6个碳原子的环(“c6芳基”)，例如苯基；或者具有9个碳原子的环(“c9芳基”)，例如茚满基或茚基；或者具有10个碳原子的环(“c
10
芳基”)，例如四氢化萘基、二氢萘基或萘基。术语“c
6-c
20
芳基”可以包含“c
6-c
10
芳基”[0105]
术语“杂芳基”是指具有芳香性的单环或稠合多环体系，其中含有至少一个选自n、o、s的环原子，其余环原子为c的芳香环基。术语“5-10元杂芳基”可理解为包括这样的单环或双环芳族环系：其具有5、6、7、8、9或10个环原子，特别是5或6或9或10个环原子，且其包含1-5个，优选1-3个独立选自n、o和s的杂原子。特别地，杂芳基选自噻吩基、呋喃基、吡咯基、
噁唑基、噻唑基、咪唑基、吡唑基、异噁唑基、异噻唑基、噁二唑基、三唑基或噻二唑基等以及它们的苯并衍生物，例如苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、苯并异噁唑基、苯并咪唑基、苯并三唑基、吲唑基、吲哚基或异吲哚基等；或吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基或三嗪基等以及它们的苯并衍生物，例如喹啉基、喹唑啉基或异喹啉基等；或吖辛因基、吲嗪基、嘌呤基等以及它们的苯并衍生物；或噌啉基、酞嗪基、喹唑啉基、喹喔啉基、萘啶基、蝶啶基、咔唑基、吖啶基、吩嗪基、吩噻嗪基或吩噁嗪基等。术语“5-6元杂芳基”指具有5或6个环原子的芳族环系，且其包含1-3个，优选1-2个独立选自n、o和s的杂原子。
[0106]
术语“卤”或“卤素”是指氟、氯、溴或碘。
[0107]
术语“羟基”是指-oh基团。
[0108]
术语“氰基”是指-cn基团。
[0109]
术语“氨基”是指-nh2基团。
[0110]
术语“硝基”是指-no2基团。
[0111]
术语“治疗有效量”是指(i)治疗特定疾病、病况或病症，(ii)减轻、改善或消除特定疾病、病况或病症的一种或多种症状，或(iii)延迟本文中所述的特定疾病、病况或病症的一种或多种症状发作的本发明化合物的用量。构成“治疗有效量”的本发明化合物的量取决于该化合物、疾病状态及其严重性、给药方式以及待被治疗的哺乳动物的年龄而改变，但可例行性地由本领域技术人员根据其自身的知识及本公开内容而确定。
[0112]
术语“药学上可接受的”，是针对那些化合物、材料、组合物和/或剂型而言，它们在可靠的医学判断的范围之内，适用于与人类和动物的组织接触使用，而没有过多的毒性、刺激性、过敏性反应或其它问题或并发症，与合理的利益/风险比相称。
[0113]
术语“药学上可接受的盐”是指药学上可接受的酸或碱的盐，包括化合物与无机酸或有机酸形成的盐，以及化合物与无机碱或有机碱形成的盐。
[0114]
术语“药物组合物”是指一种或多种本发明的化合物或其盐与药学上可接受的辅料组成的混合物。药物组合物的目的是有利于对有机体给予本发明的化合物。
[0115]
术语“药学上可接受的辅料”是指对有机体无明显刺激作用，而且不会损害该活性化合物的生物活性及性能的那些辅料。合适的辅料是本领域技术人员熟知的，例如碳水化合物、蜡、水溶性和/或水可膨胀的聚合物、亲水性或疏水性材料、明胶、油、溶剂、水等。
[0116]
词语“包括(comprise)”或“包含(comprise)”及其英文变体例如comprises或comprising可理解为开放的、非排他性的意义，即“包括但不限于”。
[0117]
本发明还包括与本文中记载的那些相同的，但一个或多个原子被原子量或质量数不同于自然中通常发现的原子量或质量数的原子置换的同位素标记的本发明化合物。可结合到本发明化合物的同位素的实例包括氢、碳、氮、氧、磷、硫、氟、碘和氯的同位素，诸如分别为2h、3h、
11
c、
13
c、
14
c、
13
n、
15
n、
15
o、
17
o、
18
o、
31
p、
32
p、
35
s、
18
f、
123
i、
125
i和
36
cl等。
[0118]
某些同位素标记的本发明化合物(例如用3h及
14
c标记)可用于化合物和/或底物组织分布分析中。氚化(即3h)和碳-14(即
14
c)同位素对于由于它们易于制备和可检测性是尤其优选的。正电子发射同位素，诸如
15
o、
13
n、
11
c和
18
f可用于正电子发射断层扫描(pet)研究以测定底物占有率。通常可以通过与公开于下文的方案和/或实施例中的那些类似的下列程序，通过同位素标记试剂取代未经同位素标记的试剂来制备同位素标记的本发明化合物。
[0119]
本发明的药物组合物可通过将本发明的化合物与适宜的药学上可接受的辅料组合而制备，例如可配制成固态、半固态、液态或气态制剂，如片剂、丸剂、胶囊剂、粉剂、颗粒剂、膏剂、乳剂、悬浮剂、栓剂、注射剂、吸入剂、凝胶剂、微球及气溶胶等。
[0120]
给予本发明化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物的典型途径包括但不限于口服、直肠、局部、吸入、肠胃外、舌下、阴道内、鼻内、眼内、腹膜内、肌内、皮下、静脉内给药。
[0121]
本发明的药物组合物可以采用本领域众所周知的方法制造，如常规的混合法、溶解法、制粒法、乳化法、冷冻干燥法等。
[0122]
在一些实施方案中，药物组合物是口服形式。对于口服给药，可以通过将活性化合物与本领域熟知的药学上可接受的辅料混合，来配制该药物组合物。这些辅料能使本发明的化合物被配制成片剂、丸剂、锭剂、糖衣剂、胶囊剂、液体、凝胶剂、浆剂、悬浮剂等，用于对患者的口服给药。
[0123]
可以通过常规的混合、填充或压片方法来制备固体口服组合物。例如，可通过下述方法获得：将所述的活性化合物与固体辅料混合，任选地碾磨所得的混合物，如果需要则加入其它合适的辅料，然后将该混合物加工成颗粒，得到了片剂或糖衣剂的核心。适合的辅料包括但不限于：粘合剂、稀释剂、崩解剂、润滑剂、助流剂或矫味剂等。
[0124]
药物组合物还可适用于肠胃外给药，如合适的单位剂型的无菌溶液剂、混悬剂或冻干产品。
[0125]
本文所述的通式(ⅰ)化合物的所有施用方法中，每天给药的剂量为0.01mg/kg到200mg/kg体重，优选为0.05mg/kg到50mg/kg体重，更优选0.1mg/kg到30mg/kg体重，以单独或分开剂量的形式。
具体实施方式
[0126]
以下实施例详细说明发明的技术方案，但本发明的保护范围包括但不限于此。
[0127]
化合物的结构是通过核磁共振(nmr)和/或质谱(ms)来确定的。nmr位移的单位为10-6
(ppm)。nmr测定的溶剂为氘代二甲基亚砜、氘代氯仿、氘代甲醇等，内标为四甲基硅烷(tms)；“ic
50”指半数抑制浓度，指达到最大抑制效果一半时的浓度。
[0128]
缩略词：
[0129]
nbs：n-溴代丁二酰亚胺；dmf：n,n-二甲基甲酰胺；thf：四氢呋喃；ethanol：乙醇；pyaop：三唑并[4,5-b]吡啶-3-氧基)三-1-吡咯烷基六氟磷酸盐；dbu:1,8-二氮杂双环[5.4.0]-7-十一碳烯；pd(dppf)cl2:[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯；dioxane:二氧六环；formic acid：甲酸；pd/c：钯碳；acoh：醋酸；methanol：甲醇；nh2nh2:水合肼。
[0130]
实施例1：(r)-n-(1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)-6-(3,6-二氢-2h-吡喃-4-基)-2-甲基-[1,2,4]三唑并[4',3':1,6]吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-胺
[0131][0132]
步骤1：2-氨基-5-溴-6-氯吡啶-3-羧酸的合成
[0133][0134]
将2-氨基-6-氯吡啶-3-羧酸(25.0g)溶于150ml n,n-二甲基甲酰胺中，分批加入n-溴代丁二酰亚胺(28.4g)，加热至70℃搅拌2小时后反应完毕。将反应液冷却至室温，倒入500ml冰水混合物中，抽滤，滤饼用水洗涤三次，滤饼干燥后制得标题化合物。
[0135]
步骤2：6-溴-7-氯-2-甲基-吡啶并[2,3-d][1,3]恶嗪-4-酮的合成
[0136][0137]
将2-氨基-5-溴-6-氯吡啶-3-羧酸(36.0g)溶于500ml乙酸酐中，加热至130℃搅拌36小时后反应完毕，将反应液冷却至室温，浓缩干燥后直接投入下一步中。
[0138]
步骤3：6-溴-7-氯-2-甲基-3h-吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-酮的合成
[0139][0140]
将上述步骤2所得粗品溶于1l四氢呋喃中，-30℃条件下滴加氨甲醇(7.0mol/l，415ml)至反应液中，滴加完毕后，反应体系升至室温反应12小时后反应完毕。将反应液倒入1l冰水中，加入4n稀盐酸调节ph至8-9，有淡黄色固体析出，过滤，滤饼用水洗涤三次后干燥，随后用石油醚：乙酸乙酯＝3：1(v:v)打浆纯化得标题化合物。
[0141]
步骤4：6-溴-7-肼基-2-甲基吡啶并[2,3-d]嘧啶-4(3h)-酮的合成
[0142][0143]
将6-溴-7-氯-2-甲基-3h-吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-酮(1.10g)，水合肼(927ul)溶于10ml乙醇，70℃搅拌反应3小时后反应完毕，抽滤，乙醇洗涤滤饼，滤饼干燥制得标题化合
物。
[0144]
步骤5：6-溴-2-甲基-[1,2,4]三唑并[4',3':1,6]吡啶并[2,3-d]嘧啶-4(3h)-酮的合成
[0145][0146]
将6-溴-7-肼基-2-甲基吡啶并[2,3-d]嘧啶-4(3h)-酮(990mg)溶于12ml甲酸，100℃反应4小时反应完毕，减压浓缩后制得标题化合物。
[0147]
步骤6：(r)-6-溴-n-(1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)-2-甲基-[1,2,4]三唑并[4',3':1,6]吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-胺的合成
[0148][0149]
将6-溴-2-甲基-[1,2,4]三唑并[4',3':1,6]吡啶并[2,3-d]嘧啶-4(3h)-酮(200mg)，(3h-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶-3-氧基)三-1-吡咯烷基六氟磷酸盐(558mg)溶于5ml n,n-二甲基甲酰胺，加入1,8-二氮杂双环[5.4.0]-7-十一碳烯(320ul)，室温搅拌30分钟，然后加入(r)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙烷-1-胺盐酸盐(193mg)，室温反应过夜。反应完毕，加入乙酸乙酯稀释，水洗，饱和食盐水洗，有机相无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，经柱层析(石油醚/乙酸乙酯梯度洗脱)制得标题化合物。
[0150]
步骤7：(r)-n-(1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)-6-(3,6-二氢-2h-吡喃-4-基)-2-甲基-[1,2,4]三唑并[4',3':1,6]吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-胺的合成
[0151][0152]
将(r)-6-溴-n-(1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)-2-甲基-[1,2,4]三唑[4'，3'：1,6]吡啶[2,3-d]嘧啶-4-胺(100mg)，3,6-二氢-2h-吡喃-4-硼酸频哪醇酯(69.9mg)，[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(16.2mg),碳酸钠(47.0mg)溶于2ml二氧六环和0.5ml水，置换氩气，100℃搅拌2小时。反应完毕，加入乙酸乙酯稀释，水洗，饱和食盐水洗，
有机相无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，经柱层析(石油醚/乙酸乙酯梯度洗脱)制得标题化合物。
[0153]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ
h 9.59(s,1h),8.78(d,j＝7.2hz,1h),8.06(s,1h),7.74-7.66(m,2h),7.52(t,j＝7.1hz,1h),7.32(t,j＝7.7hz,1h),7.25(t,j＝54.4hz,1h),5.83(p,j＝7.0hz,1h),4.40-4.38(m,2h),3.95(t,j＝5.5hz,2h),2.78-2.61(m,2h),2.45(s,3h),1.64(d,j＝7.1hz,3h).
[0154]
lc/ms(m/z,mh
+
):455.2.
[0155]
实施例2：(r)-1-(4-(4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-[1,2,4]三唑并[4'，3'：1,6]吡啶并[2,3-d]嘧啶-6-基)哌啶-1-基)乙-1-酮
[0156][0157]
步骤1：(r)-1-(4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-[1,2,4]三唑并[4'，3'：1,6]吡啶并[2,3-d]嘧啶-6-基)-3,6-二氢吡啶-1(2h)-基)乙烷-1-酮的合成
[0158][0159]
将(r)-6-溴-n-(1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)-2-甲基-[1,2,4]三唑[4'，3”：1,6]吡啶[2,3-d]嘧啶-4-胺(100mg)，1-乙酰基-5,6-二氢-2h-吡啶-4-硼酸频哪醇酯(83.6mg)，[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(16.2mg),碳酸钠(47.0mg)溶于2ml二氧六环和0.5ml水，置换氩气，100℃搅拌2小时。反应完毕，加入乙酸乙酯稀释，水洗，饱和食盐水洗，有机相无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，经柱层析(石油醚/乙酸乙酯梯度洗脱)制得标题化合物。
[0160]
步骤2：(r)-1-(4-(4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-[1,2,4]三唑并[4'，3'：1,6]吡啶并[2,3-d]嘧啶-6-基)哌啶-1-基)乙烷-1-酮的合成
[0161][0162]
将(r)-1-(4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-[1,2,4]三唑并[4'，3'：1,6]吡啶并[2,3-d]嘧啶-6-基)-3,6-二氢吡啶-1(2h)-基)乙烷-1-酮(30.0mg)溶于5ml甲醇中，加入钯碳(6.00mg)，一滴醋酸，置换氢气，室温搅拌过夜。反应完毕，加入乙酸乙酯稀释，水洗，饱和食盐水洗，有机相无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，经柱层析(二氯甲烷/甲醇梯度洗脱)制得标题化合物。
[0163]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ
h 9.57(s,1h),8.63(d,j＝7.1hz,1h),7.99(s,1h),7.69(t,j＝7.4hz,1h),7.52(t,j＝7.0hz,1h),7.32(t,j＝7.7hz,1h),7.25(t,j＝54.4hz,1h),5.80(p,j＝7.0hz,1h),4.67-4.64(m,1h),4.04-4.01(m,1h),3.49-3.38(m,1h),3.30-3.23(m,1h),2.74-2.64(m,1h),2.44(s,3h),2.15-2.00(m,5h),1.86-1.72(m,2h),1.63(d,j＝7.0hz,3h).
[0164]
lc/ms(m/z,mh
+
):498.
[0165]
实验例1本发明化合物对h358细胞p-erk通路的影响
[0166]
通过advanced phospho-erk(thr202/tyr204)cellular kit试剂盒方法评估本发明的化合物对h358细胞p-erk通路的影响。
[0167]
实验方法概述如下：
[0168]
h358细胞(atcc，crl-5807)在含有10％fbs(胎牛血清)(gibco，10100147)和100u/ml青链霉素混合液(gibco，15140163)的rpmi1640(thermofisher，a1049101)完全培养基中培养，当细胞在培养容器中覆盖率达80-90％时，将细胞吹散后种植于96孔板(corning，3599)，每孔50000细胞(90μl rpmi1640完全培养基)，静置5分钟之后放于37℃、5％co2的培养箱中培养6h，更换为无血清的rpmi1640饥饿过夜。
[0169]
过夜后用排枪每孔加入10μl稀释后的化合物，将96孔板置于37℃、5％co2的培养箱中培养1h。倾倒上清，pbs缓冲液洗一遍，每孔加50μl裂解液(advanced phospho-erk(thr202/tyr204)cellular kit，64aerpeh)，室温450rpm震荡1h，待细胞完全裂解之后，取16ul上清加入到384孔(pe,6007299)，加入混合好的抗体(d2/eu＝1:1),室温孵育4h，酶标仪选择htrf读板，ratio＝signal 665nm/signal 620nm x 10 4
。该实验中，未加细胞组(用1640培养基替代)作为100％抑制组，加细胞但是未加化合物组作为0％抑制组。
[0170]
化合物对h358细胞p-erk通路抑制的百分比可以用以下公式计算：
[0171]
抑制百分比＝100*(0％抑制组信号值-待测化合物特定浓度下信号值)/(0％抑制组信号值-100％抑制组信号值)。
[0172]
化合物ic
50
值由8个浓度点用xlfit(id business solutions ltd.，uk)软件通过以下公式计算：
[0173]
y＝bottom+(top-bottom)/(1+10^((logic
50-x)
×
slope factor))
[0174]
其中y为抑制百分比，x为待测化合物浓度的对数值，bottom为最小抑制百分比，top为最大抑制百分比，slope factor为曲线斜率系数。使用默认拟合曲线来拟合s形曲线斜率以确定ic
50
值。测试本发明所述化合物相应的抑制测试结果具体见表1。
[0175]
表1本发明实施例化合物对p-erk抑制的测试结果
[0176]
实施例ic
50
(nm)12032313
[0177]
实验例2：本发明实施例对sos1与kras g12d结合抑制活性的测定
[0178]
使用kras-g12d/sos1 binding assay kits(cisbio，货号：63adk000cb21peh)评估本发明的化合物对krasg12d::sos1结合抑制的影响。
[0179]
实验方法：
[0180]
用100％dmso将阳性对照bay-293和待测化合物(10mm储液)稀释5倍至0.1mm，在384孔稀释板中以1:3进行等比稀释11个浓度。使用echo转移0.1μl梯度稀释的化合物溶液到384孔板中，每个化合物做2个复孔，1000rpm/min，离心1min。转移5μl 4x kras g12d(终浓度1x)及gtp溶液(终浓度10μμ，sigma，货号：v900868)到384反应板中，1000rpm/min，离心1min，25℃孵育15min。转移5μl 4x sos1溶液(终浓度1x)到384反应板中，1000rpm/min，离心1min，25℃孵育45min。bay-293化合物终浓度为10，3.33，1.11，0.37，0.12，0.04，0.014，0.0046，0.0015，0.0005，0.00017，0um。待测化合物终浓度10，3.33，1.11，0.37，0.12，0.04，0.014，0.0046，0.0015，0.0005，0.00017，0um。dmso终浓度均为0.5％。转移10μl 2x检测试剂溶液到384反应板中，1000rpm/min，离心1min，4℃孵育180min。使用envision多功能酶标仪读取激发波长665nm和发射波长615nm。665/615ratio信号强度用于表征酶的活性程度。
[0181]
数据处理方法：通过graphpad prism 8非线性回归方程拟合化合物ic
50
：
[0182]
阴性对照：dmso
[0183]
阳性对照：10μm bay-293
[0184]
利用以下非线性拟合公式来得到化合物的ic
50
(半数抑制浓度)：
[0185]
y＝bottom+(top-bottom)/(1+10^((logic
50-x)
×
hillslope))
[0186]
x:待测化合物浓度log值
[0187]
y:抑制百分比
[0188]
bottom为最小抑制百分比，top为最大抑制百分比，hillslope为hill斜率；
[0189]
试验结果：在本实验条件下，测试化合物对krasg12d::sos1结合具有良好的抑制活性。测试化合物相应的活性测试结果具体见表2。
[0190]
表2本发明实施例化合物对kras g12d::sos1结合的抑制活性测试结果
[0191]
实施例ic
50
(nm)15.826.2