技术特征：
1.一种子宫内膜炎症的类器官体外模型的建立方法，其特征在于，包括：
①
进行正常组织的子宫内膜类器官培养，获得正常组织的子宫内膜类器官；
②
将获得的正常组织的子宫内膜类器官传代培养3天；
③
向步骤
②
所述的类器官腔体中注射细菌；
④
向步骤
③
获得的培养体系中加入中性白细胞；
⑤
向步骤
④
获得的培养体系中加入10-1,000ng/ml的lps作为诱导试剂进行炎症诱导。2.根据权利要求1所述的一种子宫内膜炎症的类器官体外模型的建立方法，其特征在于，还包括急性炎症模型鉴定：利用qpcr方法鉴定tnf-a、inf-r、il-1b的表达。3.根据权利要求1所述的一种子宫内膜炎症的类器官体外模型的建立方法，其特征在于，所述步骤
③
中注射3-8ul细菌。4.根据权利要求1或3所述的一种子宫内膜炎症的类器官体外模型的建立方法，其特征在于，所述细菌为大肠杆菌或金黄色葡萄球菌。5.根据权利要求1所述的一种子宫内膜炎症的类器官体外模型的建立方法，其特征在于，所述步骤
④
中加入10
4-106中性白细胞。6.根据权利要求1所述的一种子宫内膜炎症的类器官体外模型的建立方法，其特征在于，步骤
①
所述正常组织的子宫内膜类器官培养包括以下步骤：将获得的子宫内膜标本经过预处理得到细胞数量为30个细胞左右的细胞团；将细胞团与matrigel基质胶混匀后铺板，待凝固后倒置固定20-30min；加入子宫内膜类器官培养基，于37℃、5％co2条件下培养4-7天，期间每隔2-3天更换一次培养基。7.根据权利要求1或4所述的一种子宫内膜炎症的类器官体外模型的建立方法，其特征在于，步骤
④
所述中性白细胞是通过血液中性白细胞分离提取获得的，包括以下步骤：将全血使用pbs1:1混匀后，加入2倍体积的葡聚糖dextran t-500并混匀，置于4℃静置40min后取上清按照质量比为1:1的比例加入pbs+tris+hepes缓冲液中，于4℃，500g离心25min后弃上清；使用pbs+tris+hepes缓冲液对沉淀进行清洗，后加入裂红试剂，沉淀与裂红试剂的质量比为1:2，使用hbss清洗2次，并重悬于dmem中备用。8.根据权利要求1或3所述的一种子宫内膜炎症的类器官体外模型的建立方法，其特征在于，步骤
③
所述细菌是通过细菌培养扩增获得的，包括以下步骤：从-70℃冰箱中取200μl感受态细胞悬液，室温下使其解冻，解冻后立即置冰上；向管中加入1ml lb液体培养基(不含amp)，混匀后37℃振荡培养1小时，使细菌恢复正常生长状态；将上述菌液摇匀后取100μl涂布于平板上，正面向上放置半小时，待菌液完全被培养基吸收后倒置培养皿，37℃培养16-24小时；从lb平板上挑取新活化的单个菌落，接种于3-5ml lb液体培养基中，37℃下振荡培养12小时左右，直至对数生长后期。9.一种子宫内膜炎症的类器官体外模型，其特征在于：是采用权利要求1～8任意一项所述的方法建立。10.权利要求9所述的子宫内膜炎症的类器官体外模型在研究细胞间相互作用上的用途。
技术总结
本发明涉及一种子宫内膜炎症的类器官体外模型及其建立方法和应用，包括：
技术研发人员：兰坚强 朱宇 井建玲 黄敏
受保护的技术使用者：创芯国际生物科技（广州）有限公司
技术研发日：2022.06.14
技术公布日：2022/9/30