一种细胞分离方法与流程

1.本发明涉及细胞分离技术领域，更具体的说是一种细胞分离方法。


背景技术：

2.细胞分离技术包括离心技术、流式细胞术和细胞电泳，离心是研究如细胞核、线粒体、高尔基体、溶酶体和微体，以及各种大分子基本手段，流式细胞术是对单个细胞进行快速定量分析与分选的一门技术，细胞电泳是指在一定ph值下细胞表面带有净的正或负电荷，能在外加电场的作用下发生泳动，而离心技术是人们最常使用的细胞分离技术，可用于教学和临床试验，但是现有的离心技术只是使用简单的离心力对细胞进行分离，不能针对不同的细胞改变其离心力。


技术实现要素：

3.本发明的目的是提供一种细胞分离方法，其有益效果是可根据不同的胚胎干细胞去改变其离心力，进一步加快胚胎干细胞的分离速度。
4.本发明的目的通过以下技术方案来实现：
5.一种细胞分离方法，该方法包括以下步骤：
6.步骤一、提取饱满的胚胎干细胞，并对其进行细胞分离培养；
7.步骤二、进行培养基配制，并将饱满的胚胎干细胞放置到培养基内；
8.步骤三、还需对细胞进行定期观察，观察细胞形态，并及时更换培养液；
9.步骤四、将培养完成的细胞放置到离心腔内并进行高速转动，完成细胞的分离。
10.所述培养基配制包括完全培养基、消化酶液和冲洗液。
11.优选的，所述离心腔上转动连接有固定腔，固定腔上固定连接有调整构件，调整构件固定连接在主转轴上，主转轴转动连接在转托板上，离心腔上固定连接有收集腔，收集腔的下方固定连接有排液管。
12.优选的，所述调整构件包括方滑腔、方联板和横移丝杠，方滑腔固定连接在主转轴上，方联板滑动连接在方滑腔内，固定腔与方联板固定连接，横移丝杠转动连接在方滑腔上，方联板与横移丝杠通过螺纹传动连接。
13.优选的，所述离心分离装置还包括密封盖、延伸腔、螺纹连板、滑塞板和外螺纹杆，密封盖滑动连接在固定腔上，延伸腔固定连接在固定腔上，螺纹连板固定连接在延伸腔的外端，滑塞板滑动连接在延伸腔内，外螺纹杆通过螺纹连接在螺纹连板上，滑塞板与外螺纹杆转动连接。
14.优选的，所述离心分离装置还包括延伸框板和方联滑杆，延伸框板固定连接在方滑腔上，方联滑杆转动连接在延伸框板上，外螺纹杆与方联滑杆滑动连接。
15.优选的，所述离心分离装置还包括轴承座、摩擦轮、锥齿轮i和锥齿轮ii，轴承座固定连接在固定腔上，摩擦轮转动连接有轴承座上，锥齿轮i固定连接在摩擦轮的内端，锥齿轮ii固定连接在排液管上，锥齿轮i与锥齿轮ii啮合传动连接。
16.优选的，所述离心分离装置还包括底存腔，底存腔的上方固定连接有转托板，主转轴与底存腔转动连接。
17.优选的，所述离心分离装置还包括固齿环，固齿环固定连接在底存腔内，方联滑杆与固齿环啮合传动连接。
18.优选的，所述离心分离装置还包括摩擦漏板，摩擦漏板固定连接在底存腔内，摩擦轮与摩擦漏板接触。
附图说明
19.下面结合附图和具体实施方法对本发明做进一步详细的说明。
20.图1是本发明一种细胞分离方法的流程示意图；
21.图2是对细胞进行离心分离实施例的结构示意图；
22.图3是对细胞进行离心分离实施例的部分结构示意图；
23.图4是对细胞进行离心分离实施例的截面剖面结构示意图；
24.图5是对细胞进行储存并带动其进行转动实施例的截面剖面结构示意图；
25.图6是向装置内增压实施例的结构示意图；
26.图7是带动细胞进行自转产生离心力实施例的结构示意图；
27.图8是带动增压进行转动实施例的结构示意图；
28.图9是本发明支撑底座的结构示意图；
29.图10是本发明支撑底座的部分的截面剖面结构示意图。
具体实施方式
30.下面结合附图对本发明作进一步详细说明。
31.下面结合附图1详细说明，一种细胞分离方法，该方法包括以下步骤：
32.步骤一、提取饱满的胚胎干细胞，并对其进行细胞分离培养；
33.步骤二、进行培养基配制，并将饱满的胚胎干细胞放置到培养基内；
34.步骤三、还需对细胞进行定期观察，观察细胞形态，并及时更换培养液；
35.步骤四、将培养完成的细胞放置到离心腔104内并进行高速转动，完成细胞的分离。
36.下面结合附图1详细说明，所述培养基配制包括完全培养基、消化酶液和冲洗液。
37.下面结合附图2-5和8-9详细说明，所述离心分离装置包括转托板101、主转轴102、调整构件、固定腔103、离心腔104、收集腔105和排液管106，转托板101上通过轴承转动连接有主转轴102，调整构件通过焊接固定连接在主转轴102上，固定腔103上通过焊接固定连接有调整构件，离心腔104上通过轴承圈转动连接有固定腔103，收集腔105通过焊接固定连接在离心腔104上，排液管106通过焊接固定连接在收集腔105的下方。
38.进一步的，转托板101起到承载连接的作用，可为主转轴102提供转动的空间，转托板101上可固定连接有减速电机，减速电机的输出轴通过连通器与主转轴102固定连接，而主转轴102可带动调整构件进行转动，而转动的调整构件能够带动固定腔103绕主转轴102的轴心进行转动，通过调整构件的转动即可带动固定腔103进行转动，调整构件的长度可调整，可改变固定腔103到主转轴102轴心线的距离，从而改变固定腔103所产生的离心力大
小，当固定腔103发生转后，固定腔103将会带动离心腔104进行转动，而离心腔104上设置有多个离心孔，当离心腔104发生转动时，产生的离心力将会作用到细胞上，让细胞壁从离心腔104上的多个离心孔排出，而收集腔105起到收集的作用，当细胞壁从离心腔104上的多个离心孔排出后将会进到收集腔105内，而收集腔105的底面为锥面结构设计，方便细胞壁流到收集腔105的底部，最终进到收集腔105内的细胞壁将会从排液管106排出，而排液管106上设置有阀门，当需要将收集腔105内的细胞壁排出时，只需打开排液管106上的阀门，细胞壁即可从排液管106排出，将培养完成的细胞通过固定腔103添加至离心腔104内，让主转轴102发生转动，从而带动离心腔104进行转动，当离心腔104发生转动时，离心腔104将会产生离心力，从而实现对离心腔104内的细胞进行离心处理，这时细胞壁将会通过离心腔104上的多个离心孔排出进到收集腔105内，最终细胞壁可从排液管106排出，而离心腔104内的剩下的就是细胞膜，细胞壁和细胞膜分离后完成细胞的分离。
39.根据说明书附图2-4和8-9详细说明，所述调整构件包括方滑腔201、方联板202和横移丝杠203，方滑腔201通过焊接固定连接在主转轴102上，方联板202通过方孔滑动连接在方滑腔201内，固定腔103与方联板202通过焊接固定连接，横移丝杠203通过轴承孔转动连接在方滑腔201上，方联板202与横移丝杠203通过螺纹传动连接。
40.进一步的，方滑腔201可为方联板202提供滑动的空间，并对方联板202进行限位处理，让方联板202只能沿着方滑腔201的方向进行滑动，而方联板202可为固定腔103提供固定的空间，转动横移丝杠203后可带动方联板202在方滑腔201内进行滑动，从而改变方联板202与主转轴102轴心线的距离，而方联板202可带动固定腔103进行移动，最终改变离心腔104与主转轴102轴心线的距离，从而改变离心腔104所产生的离心力，因为离心力的大小和转动的半径有直接的关系，根据需求转动横移丝杠203改变离心腔104的位置，让离心腔104内的细胞产生合适的离心力进行分离处理。
41.根据说明书附图2、3、4、6和8详细说明，所述离心分离装置还包括密封盖107、延伸腔301、螺纹连板302、滑塞板303和外螺纹杆304，密封盖107滑动连接在固定腔103上，延伸腔301通过焊接固定连接在固定腔103上，螺纹连板302通过焊接固定连接在延伸腔301的外端，滑塞板303通过键和键槽滑动连接在延伸腔301内，外螺纹杆304通过螺纹连接在螺纹连板302上，滑塞板303与外螺纹杆304通过孔转动连接，并利用两和圆板对外螺纹杆304进行限位处理，让外螺纹杆304与滑塞板303只能转动，而当外螺纹杆304发生移动时将会带动滑塞板303进行移动。
42.进一步的，利用密封盖107可实现对固定腔103上方的开口进行遮挡处理，密封盖107上设置有把手，方便密封盖107的拆卸，防止固定腔103内的气体排出，而设置有延伸腔301后可增大固定腔103的空间，螺纹连板302可为外螺纹杆304提供连接的空间，延伸腔301和滑塞板303之间通过键和键槽滑动连接，实现对滑塞板303的限位处理，让滑塞板303只能在延伸腔301内进行滑动，而当滑塞板303在延伸腔301内滑动时，可对固定腔103内的空气进行挤压处理，让固定腔103和离心腔104内产生高压，这时可加快细胞的分离，而转动外螺纹杆304可带动滑塞板303在延伸腔301内进行滑动，当细胞添加至离心腔104内后，安装好密封盖107，对固定腔103上方的开口进行遮挡处理，这时在固定腔103进行转动时，外螺纹杆304也会转动从而带动滑塞板303在延伸腔301内进行滑动，让离心腔104处于高压状态，让细胞在高压的状态下进行离心分离处理，进一步加快细胞分离的速度。
43.根据说明书附图2、8和9细说明，所述离心分离装置还包括延伸框板401和方联滑杆402，延伸框板401通过焊接固定连接在方滑腔201上，方联滑杆402通过轴承孔转动连接在延伸框板401上，外螺纹杆304与方联滑杆402通过方腔滑动连接。
44.进一步的，延伸框板401可为方联滑杆402提供转动的空间，方联滑杆402的外端固定连接有齿轮，通过方联滑杆402的转动可带动外螺纹杆304进行转动，而当固定腔103的位置发生改变时，方联滑杆402和外螺纹杆304之间会发生滑动，不会妨碍方联滑杆402带动外螺纹杆304进行转动。
45.根据说明书附图2-5、7和9详细说明，所述离心分离装置还包括轴承座501、摩擦轮502、锥齿轮i503和锥齿轮ii504，轴承座501通过焊接固定连接在固定腔103上，摩擦轮502通过轴承转动连接有轴承座501上，锥齿轮i503通过焊接固定连接在摩擦轮502的内端，锥齿轮ii504通过焊接固定连接在排液管106上，锥齿轮i503与锥齿轮ii504啮合传动连接。
46.进一步的，轴承座501可为摩擦轮502提供转动的空间，当固定腔103进行转动时，可通过轴承座501带动锥齿轮i503绕主转轴102的轴心线进行转动，绕主转轴102轴心线进行转动的摩擦轮502与固定的摩擦板接触时，摩擦轮502将会发生转动，而转动的摩擦轮502将会带动锥齿轮i503进行转动，而转动的锥齿轮i503将会带动锥齿轮ii504进行转动，转动的锥齿轮ii504将会通过排液管106和收集腔105来带动离心腔104进行转动，这时的离心腔104将会发生两种运动，其一时绕主转轴102轴心线进行转动，其二还能绕自身的轴心线进行转动，这样离心腔104内的细胞将会产生更大的离心力，进一步提升离心腔104内细胞的分离过程，缩短细胞的分离时间。
47.根据说明书附图9和10详细说明，所述离心分离装置还包括底存腔601，底存腔601的上方通过焊接固定连接有转托板101，主转轴102与底存腔601通过圆孔转动连接。
48.进一步的，底存腔601可为转托板101提供固定的空间，还能为主转轴102的下方提供转动的空间，这时主转轴102上下两端均有限位处理，主转轴102能够进行平稳的转动，而从排液管106排出的细胞壁将会直接落到底存腔601内，底存腔601上通过多个螺栓连接有支撑腿，利用支撑腿方便将底存腔601放置到地面上，而底存腔601的底面为锥形结构设计，其最底面设置有多个圆通孔，当细胞壁进到底存腔601内时，可直接从多个圆通孔排出，在细胞分离之前将储存桶防止到底存腔601的下方，排出的细胞壁将会直接流到储存桶内。
49.根据说明书附图9和10详细说明，所述离心分离装置还包括固齿环602，固齿环602通过焊接固定连接在底存腔601内，方联滑杆402与固齿环602啮合传动连接。
50.进一步的，当方联滑杆402随着固定腔103绕主转轴102轴心线进行转动时，方联滑杆402也会与固定的固齿环602啮合，这时的方联滑杆402将会发生转动，从而带动滑塞板303在延伸腔301内进行滑动，做到只有离心腔104内的细胞产生离心力时，才会向离心腔104和固定腔103增压处理。
51.根据说明书附图9和10详细说明，所述离心分离装置还包括摩擦漏板603，摩擦漏板603通过焊接固定连接在底存腔601内，摩擦轮502与摩擦漏板603接触。
52.进一步的，摩擦漏板603的表面摩擦系数较大，当固定腔103绕主转轴102轴心线进行转动时，摩擦轮502将会绕主转轴102轴心线进行转动并与摩擦漏板603接触，由于摩擦轮502和摩擦漏板603的表面很粗糙，所以这时的摩擦轮502将会发生绕自身轴线进行转动的运动，从而带动离心腔104绕自身的轴心线进行转动，让离心腔104内的细胞产生更大的离
心力，摩擦漏板603上设置有多个漏孔，从排液管106排出的细胞壁将会先落到摩擦漏板603上，最后进到底存腔601内，再由底存腔601上的多个圆通孔排出，而且当摩擦轮502随着固定腔103进行移动时，摩擦轮502也会实时与摩擦漏板603接触，作用只要摩擦轮502绕主转轴102轴心线进行转动就会发生绕自身转动的运动。