一种胰酶生产制备方法与流程

1.本发明涉及生物医药技术领域，特别涉及一种胰酶生产制备方法。


背景技术：

2.胰酶系各国药典收载的助消化药，是从动物胰脏中提取的多种酶的混合物，主要成分为胰蛋白酶、胰脂肪酶和胰淀粉酶。胰酶主要用于消化不良，食欲不振及肝、胰腺疾病引起的消化障碍，同时也适用于先天性胰功能不全、腹部手术和外伤胰腺切除导致的胰功能不全。此外，胰酶中含有多种活性物质，可以作为基础原料从中提取多种生化药品，如胰激肽酶原，弹性蛋白酶，门冬酰胺酶，糜蛋白酶，羧肽酶等，具有重大的工业价值。
3.目前胰酶的生产主要是由动物胰脏提取，具有重大的工业价值，采用现有胰酶制备工艺生产，其产品胰酶收率较低，且其主要指标胰蛋白酶含量3500u/g左右、胰淀粉酶50000u/g左右、胰脂肪酶含量20000u/g左右；均处于较低水平。所以有必要提高胰酶产品收率，解决胰酶中胰蛋白酶、胰淀粉酶、胰脂肪酶含量低的问题。


技术实现要素：

4.本发明的目的在于提供一种胰酶生产制备方法，以解决现有的胰酶制备工艺收率较低，其主要指标胰蛋白酶、胰淀粉酶、胰脂肪酶含量低的问题。
5.为解决上述技术问题，本发明提供了一种胰酶生产制备方法，包括如下步骤：步骤（a）：解冻：取冷冻胰脏，室温自然解冻软化1～2h；步骤（b）：绞碎：将解冻后的胰脏放入绞碎机中多次处理得到胰糜，合并后称重；步骤（c）：磨浆：将胰糜放入磨浆机中处理得到胰浆；步骤（d）：搅拌：将胰浆放入搅拌机中进行搅拌，在搅拌过程中依次加入0.4%～0.5%胰糜重量的氯化钙和0.5%～0.8%胰糜重量的胰酶；步骤（e）：间歇搅拌：将添加入氯化钙和胰酶的胰浆在22～25℃条件下间歇搅拌3h；步骤（f）：活化：胰浆在20～25℃条件下完全静置1～2h进行活化；步骤（g）：第一次过滤：将活化后的胰浆放入纱布中过滤得到胰乳；步骤（h）：第二次过滤：搅拌条件下在胰乳中加入预冷至-10℃以下的2～3倍量的丙酮，搅拌均匀后及时用单层纱布过滤，保留滤液；步骤（i）：沉淀：将滤液放入-18℃的冷库静置5～6h，取出后过滤，留沉淀物并压干称重；步骤（j）：第一次脱脂：在沉淀物中加入预冷至-10℃以下的2～3倍量的丙酮浸泡0.5～1h，过滤后收集一次脱脂后的沉淀物并压干称重；步骤（k）：第二次脱脂：在一次脱脂后的沉淀物中加入预冷至-10℃以下的3倍量的丙酮浸泡过夜，过滤后收集二次脱脂后的沉淀物并压干称重；步骤（l）：干燥：二次脱脂后的沉淀物在低温条件下真空干燥；
步骤（m）：成品：将干燥后的胰酶放入聚乙烯药品包装袋中，标上状态标识后封口。
6.优选的，在步骤（a）中室温下自然解冻软化胰脏过程中修剪胰脏上附着的白色油脂。
7.优选的，在步骤（c）中将胰糜放入磨浆机的同时依次加入总量为20%胰糜重量的纯化水，从而得到胰浆。
8.优选的，在步骤（d）中，胰浆搅拌至40～50min时加入0.4%～0.5%胰糜重量的氯化钙；胰浆搅拌至50～60min时加入0.5%～0.8%胰糜重量的胰酶。
9.优选的，所述搅拌机的转速设定为40～50r/min，且氯化钙预先用适量纯化水溶解后加入。
10.优选的，在步骤（d）中，间歇搅拌为每30min搅拌一次，每次搅拌5min。
11.优选的，在步骤（f）中，活化温度为20℃。
12.优选的，在步骤（j）中，第一次脱脂重复两次，每次丙酮浸泡时间为0.5h。
13.优选的，在步骤（k）中，在一次脱脂后的沉淀物中加入预冷至-10℃以下的3倍量的丙酮浸泡8～12h。
14.优选的，在步骤（l）中，二次脱脂后的沉淀物在30～40℃条件下真空干燥4h。
15.与现有技术相比，本发明的有益效果是：本发明通过调整胰酶提取步骤及工艺参数，从而提高胰酶产品的收率高和产品中胰蛋白酶、胰淀粉酶和胰脂肪酶的含量。
附图说明
16.图1是本发明提供的胰酶生产制备的流程图。
具体实施方式
17.以下结合附图和具体实施例对本发明作出的进一步详细说明。根据下面说明和权利要求书，本发明的优点和特征将更清楚。需说明的是，附图均采用非常简化的形式且均使用非精准的比例，仅用以方便、明晰地辅助说明本发明实施例的目的。
18.实施例一本发明提供了一种胰酶生产制备方法，包括如下步骤：步骤（a）：解冻：取冷冻胰脏，室温自然解冻软化1～2h；步骤（b）：绞碎：将解冻后的胰脏放入绞碎机中多次处理得到胰糜，合并后称重；步骤（c）：磨浆：将胰糜放入磨浆机中处理得到胰浆；步骤（d）：搅拌：将胰浆放入搅拌机中进行搅拌，在搅拌过程中依次加入0.4%～0.5%胰糜重量的氯化钙和0.5%～0.8%胰糜重量的胰酶；步骤（e）：间歇搅拌：将添加入氯化钙和胰酶的胰浆在22～25℃条件下间歇搅拌3h；步骤（f）：活化：胰浆在20～25℃条件下完全静置1～2h进行活化；步骤（g）：第一次过滤：将活化后的胰浆放入纱布中过滤得到胰乳；步骤（h）：第二次过滤：搅拌条件下在胰乳中加入预冷至-10℃以下的2～3倍量的丙酮，搅拌均匀后及时用单层纱布过滤，保留滤液；
步骤（i）：沉淀：将滤液放入-18℃的冷库静置5～6h，取出后过滤，留沉淀物并压干称重；步骤（j）：第一次脱脂：在沉淀物中加入预冷至-10℃以下的2～3倍量的丙酮浸泡0.5～1h，过滤后收集一次脱脂后的沉淀物并压干称重；步骤（k）：第二次脱脂：在一次脱脂后的沉淀物中加入预冷至-10℃以下的3倍量的丙酮浸泡过夜，过滤后收集二次脱脂后的沉淀物并压干称重；步骤（l）：干燥：二次脱脂后的沉淀物在低温条件下真空干燥；步骤（m）：成品：将干燥后的胰酶放入聚乙烯药品包装袋中，标上状态标识后封口。
19.具体的，在步骤（a）中室温下自然解冻软化胰脏过程中修剪胰脏上附着的白色油脂。
20.具体的，在步骤（c）中将胰糜放入磨浆机的同时依次加入总量为20%胰糜重量的纯化水，从而得到胰浆。
21.具体的，在步骤（d）中，胰浆搅拌至40～50min时加入0.4%～0.5%胰糜重量的氯化钙；胰浆搅拌至50～60min时加入0.5%～0.8%胰糜重量的胰酶（选用活力4280单位的胰酶）。
22.具体的，所述搅拌机的转速设定为40～50r/min，且氯化钙预先用适量纯化水溶解后加入。
23.具体的，在步骤（d）中，间歇搅拌为每30min搅拌一次，每次搅拌5min。
24.具体的，在步骤（f）中，活化温度为20℃。
25.具体的，在步骤（j）中，第一次脱脂重复两次，每次丙酮浸泡时间为0.5h。
26.具体的，在步骤（k）中，在一次脱脂后的沉淀物中加入预冷至-10℃以下的3倍量的丙酮浸泡8～12h。
27.具体的，在步骤（l）中，二次脱脂后的沉淀物在30～40℃条件下真空干燥4h。
28.实施例二本发明还提供了一种胰酶生产制备方法，请参阅图1所示，包括如下步骤：步骤（a）：解冻：取冷冻胰脏2.5kg，室温自然解冻软化1～2h；并且在解冻软化胰脏过程中修剪胰脏上附着的白色油脂；步骤（b）：绞碎：将解冻后的胰脏放入绞碎机中多次处理得到胰糜，并对胰糜进行称重；步骤（c）：磨浆：将胰糜放入磨浆机的同时依次加入总量为20%胰糜重量的纯化水，从而得到胰浆；步骤（d）：搅拌：将胰浆放入搅拌机中以每分钟40～50r进行搅拌，在搅拌过程中胰浆搅拌至40min时加入0.4%胰糜重量的氯化钙；搅拌至60min时加入0.8%胰糜重量的胰酶；并且所述氯化钙预先用适量纯化水溶解后加入；步骤（e）：间歇搅拌：将添加入氯化钙和胰酶的胰浆在22～25℃条件下间歇搅拌3h，间歇搅拌的频率为每30min搅拌一次，每次搅拌5min；步骤（f）：活化：胰浆在20℃条件下完全静置2h进行活化；步骤（g）：第一次过滤：将活化后的胰浆放入纱布中过滤得到胰乳；步骤（h）：第二次过滤：搅拌条件下在胰乳中加入预冷至-18℃的2～3倍量的丙酮，使得胰乳中丙酮密度达到0.85左右，搅拌均匀后及时用单层纱布过滤，保留滤液；
步骤（i）：沉淀：将滤液放入-18℃的冷库静置5～6h，取出后过滤，留沉淀物并压干称重；步骤（j）：第一次脱脂：在沉淀物中加入预冷至-18℃的2～3倍量的丙酮浸泡0.5h，重复两次，过滤后收集一次脱脂后的沉淀物并压干称重，且所述丙酮必须完全浸没沉淀物；步骤（k）：第二次脱脂：在一次脱脂后的沉淀物中加入预冷至-18℃的3倍量的丙酮浸泡8～12h，过滤后收集二次脱脂后的沉淀物并压干称重，且所述丙酮必须完全浸没沉淀物；步骤（l）：干燥：二次脱脂后的沉淀物在真空度0.04～0.08mpa，温度40℃条件下真空干燥4h；步骤（m）：成品：将干燥后的胰酶放入聚乙烯药品包装袋中，标上状态标识后封口；最后通过取样检验。
29.运用本发明生产的胰酶，经检验，胰蛋白酶效价为3620u/g、胰淀粉酶效价为108000u/g、胰脂肪酶效价为43800u/g，胰酶重量收率达到14.2%，大大提高了胰酶产品收率，解决胰酶中胰蛋白酶、胰淀粉酶、胰脂肪酶含量低的问题。
30.上述描述仅是对本发明较佳实施例的描述，并非对本发明范围的任何限定，本发明领域的普通技术人员根据上述揭示内容做的任何变更、修饰，均属于权利要求书的保护范围。