技术特征：
1.一种重组hsv病毒，其不表达功能性icp0蛋白和icp34.5蛋白；但能够表达功能性ul43蛋白，功能性ul41蛋白(即，vhs蛋白)，功能性ul48蛋白(即，vmw65蛋白)，或其任何组合；优选地，所述重组hsv病毒为重组hsv-2病毒，或hsv-1/hsv-2嵌合病毒。2.权利要求1的重组hsv病毒，其中，所述重组hsv病毒的基因组包含下述修饰：2个拷贝的icp0基因各自独立地包含功能丧失性突变(例如，一个或多个碱基的添加、缺失和/或置换)或者被缺失或者被置换为外源核苷酸序列(例如，编码外源蛋白的核苷酸序列)；并且，2个拷贝的icp34.5基因各自独立地包含功能丧失性突变(例如，一个或多个碱基的添加、缺失和/或置换)或者被缺失或者被置换为外源核苷酸序列(例如，编码外源蛋白的核苷酸序列)；例如，在所述重组hsv病毒的基因组中，(a1)一个拷贝的icp0基因包含功能丧失性突变(例如一个或多个碱基的添加、缺失和/或置换)，并且另一个拷贝的icp0基因包含功能丧失性突变(例如，一个或多个碱基的添加、缺失和/或置换)或者被缺失或者被置换为外源核苷酸序列(例如，编码外源蛋白的核苷酸序列)；或者(b1)一个拷贝的icp0基因被缺失，并且另一个拷贝的icp0基因包含功能丧失性突变(例如，一个或多个碱基的添加、缺失和/或置换)或者被缺失或者被置换为外源核苷酸序列(例如，编码外源蛋白的核苷酸序列)；或者(c1)一个拷贝的icp0基因被置换为外源核苷酸序列(例如，编码外源蛋白的核苷酸序列)，并且另一个拷贝的icp0基因包含功能丧失性突变(例如，一个或多个碱基的添加、缺失和/或置换)或者被缺失或者被置换为外源核苷酸序列(例如，编码外源蛋白的核苷酸序列)；并且(a2)一个拷贝的icp34.5基因包含功能丧失性突变(例如一个或多个碱基的添加、缺失和/或置换)，并且另一个拷贝的icp34.5基因包含功能丧失性突变(例如，一个或多个碱基的添加、缺失和/或置换)或者被缺失或者被置换为外源核苷酸序列(例如，编码外源蛋白的核苷酸序列)；或者(b2)一个拷贝的icp34.5基因被缺失，并且另一个拷贝的icp34.5基因包含功能丧失性突变(例如，一个或多个碱基的添加、缺失和/或置换)或者被缺失或者被置换为外源核苷酸序列(例如，编码外源蛋白的核苷酸序列)；或者(c2)一个拷贝的icp34.5基因被置换为外源核苷酸序列(例如，编码外源蛋白的核苷酸序列)，并且另一个拷贝的icp34.5基因包含功能丧失性突变(例如，一个或多个碱基的添加、缺失和/或置换)或者被缺失或者被置换为外源核苷酸序列(例如，编码外源蛋白的核苷酸序列)；优选地，所述2个拷贝的icp0基因包含相同的功能丧失性突变或者不同的功能丧失性突变；或者都被缺失；或者被置换为相同的外源核苷酸序列或者不同的外源核苷酸序列；优选地，所述2个拷贝的icp34.5基因包含相同的功能丧失性突变或者不同的功能丧失性突变；或者都被缺失；或者被置换为相同的外源核苷酸序列或者不同的外源核苷酸序列；优选地，在所述重组hsv病毒的基因组中，
(1)所述2个拷贝的icp0基因各自独立地包含功能丧失性突变(例如一个或多个碱基的添加、缺失和/或置换)，并且，所述2个拷贝的icp34.5基因各自独立地包含功能丧失性突变(例如一个或多个碱基的添加、缺失和/或置换)；或者(2)所述2个拷贝的icp0基因各自独立地包含功能丧失性突变(例如一个或多个碱基的添加、缺失和/或置换)，并且，所述2个拷贝的icp34.5基因被缺失；或者(3)所述2个拷贝的icp0基因各自独立地包含功能丧失性突变(例如一个或多个碱基的添加、缺失和/或置换)，并且，所述2个拷贝的icp34.5基因各自独立地被置换为外源核苷酸序列(例如，编码外源蛋白的核苷酸序列)；或者(4)所述2个拷贝的icp0基因被缺失；并且，所述2个拷贝的icp34.5基因各自独立地包含功能丧失性突变(例如一个或多个碱基的添加、缺失和/或置换)；或者(5)所述2个拷贝的icp0基因被缺失；并且，所述2个拷贝的icp34.5基因被缺失；或者(6)所述2个拷贝的icp0基因被缺失；并且，所述2个拷贝的icp34.5基因各自独立地被置换为外源核苷酸序列(例如，编码外源蛋白的核苷酸序列)；或者(7)所述2个拷贝的icp0基因各自独立地被置换为外源核苷酸序列(例如，编码外源蛋白的核苷酸序列)，并且，所述2个拷贝的icp34.5基因各自独立地包含功能丧失性突变(例如一个或多个碱基的添加、缺失和/或置换)；或者(8)所述2个拷贝的icp0基因各自独立地被置换为外源核苷酸序列(例如，编码外源蛋白的核苷酸序列)，并且，所述2个拷贝的icp34.5基因被缺失；或者(9)所述2个拷贝的icp0基因各自独立地被置换为外源核苷酸序列(例如，编码外源蛋白的核苷酸序列)，并且，所述2个拷贝的icp34.5基因各自独立地被置换为外源核苷酸序列(例如，编码外源蛋白的核苷酸序列)；优选地，在所述重组hsv病毒的基因组中，(1)第一拷贝的icp0基因包含第一功能丧失性突变，第二拷贝的icp0基因包含第二功能丧失性突变；并且，第一拷贝的icp34.5基因包含第三功能丧失性突变，第二拷贝的icp34.5基因包含第四功能丧失性突变；或者(2)第一拷贝的icp0基因包含第一功能丧失性突变，第二拷贝的icp0基因包含第二功能丧失性突变；并且，所述2个拷贝的icp34.5基因被缺失；或者(3)第一拷贝的icp0基因包含第一功能丧失性突变，第二拷贝的icp0基因包含第二功能丧失性突变；并且，第一拷贝的icp34.5基因被置换为第三外源核苷酸序列，第二拷贝的icp34.5基因被置换为第四外源核苷酸序列；或者(4)所述2个拷贝的icp0基因被缺失；并且，第一拷贝的icp34.5基因包含第三功能丧失性突变，第二拷贝的icp34.5基因包含第四功能丧失性突变；或者(5)所述2个拷贝的icp0基因被缺失；并且，所述2个拷贝的icp34.5基因被缺失；或者(6)所述2个拷贝的icp0基因被缺失；并且，第一拷贝的icp34.5基因被置换为第三外源核苷酸序列，第二拷贝的icp34.5基因被置换为第四外源核苷酸序列；或者(7)第一拷贝的icp0基因被置换为第一外源核苷酸序列，第二拷贝的icp0基因被置换为第二外源核苷酸序列；并且，第一拷贝的icp34.5基因包含第三功能丧失性突变，第二拷贝的icp34.5基因包含第四功能丧失性突变；或者(8)第一拷贝的icp0基因被置换为第一外源核苷酸序列，而第二拷贝的icp0基因被置
换为第二外源核苷酸序列；并且，所述2个拷贝的icp34.5基因被缺失；或者(9)第一拷贝的icp0基因被置换为第一外源核苷酸序列，第二拷贝的icp0基因被置换为第二外源核苷酸序列；并且，第一拷贝的icp34.5基因被置换为第三外源核苷酸序列，第二拷贝的icp34.5基因被置换为第四外源核苷酸序列。3.权利要求2的重组hsv病毒，其中，所述第一功能丧失性突变、第二功能丧失性突变、第三功能丧失性突变和第四功能丧失性突变各自独立地选自错义突变、无义突变、移码突变、碱基缺失、碱基置换、碱基添加、以及其任何组合(例如，基因片段的缺失或置换或添加)；和/或，所述第一外源核苷酸序列、第二外源核苷酸序列、第三外源核苷酸序列和第四外源核苷酸序列各自独立地编码选自下列的外源蛋白：荧光蛋白、免疫调节多肽、细胞因子、趋化因子、抗体和细胞毒性肽；优选地，所述荧光蛋白选自绿色荧光蛋白(例如，具有如seq id no:7所示氨基酸序列的绿色荧光蛋白)，红色荧光蛋白，蓝色荧光蛋白，黄色荧光蛋白，及其任何组合；优选地，所述免疫调节多肽选自cd40l、ox40l、可诱导共刺激分子(icos)、ftl3l、light、cd137l、cd70、4-1bb、gitr、cd28，及其任何组合；优选地，所述细胞因子选自白介素(例如il-2、il-12和il-15)、干扰素(例如ifnα、ifnβ、ifnγ)、肿瘤坏死因子(例如tnfα)、集落刺激因子(例如gm-csf)，及其任何组合；优选地，所述趋化因子选自ccl2、rantes、ccl7、ccl9、ccl10、ccl12、ccl15、ccl19、ccl21、ccl20、xcl-1，及其任何组合；优选地，所述细胞毒性肽选自胸苷激酶tk(tk/gcv)、trail、fasl，及其任何组合；优选地，所述抗体选自抗pd-1抗体、抗pd-l1抗体、抗tigit抗体、抗btla抗体、抗ctla-4抗体、抗tim-3抗体、抗lag-3抗体、抗cd137抗体、抗ox40抗体、抗gitr抗体、抗cd73抗体、抗kir抗体、抗icos抗体、抗csf1r抗体、抗egfr抗体、抗vegfr抗体、抗her2抗体、抗pdgfr抗体，及其任何组合。4.权利要求1-3任一项的重组hsv病毒，其中，所述重组hsv病毒的基因组包含能够表达功能性ul43蛋白的ul43基因，能够表达功能性ul41蛋白的ul41基因(即，vhs基因)，和/或，能够表达功能性ul48蛋白的ul48基因(即，vmw65基因)；优选地，所述重组hsv病毒还具有选自下列的一个或多个特征：(1)一个或多个非必需基因被缺失或突变(例如包含功能丧失性突变，或者被置换为外源核苷酸序列)；优选地，所述非必需基因选自ul3基因，ul4基因，ul14基因，ul16基因，ul21基因，ul24基因，ul31基因，ul32基因，us3基因，ul51基因，ul55基因，ul56基因，us2基因，us12基因(即，icp47基因)，lat基因，对应于jq673480.1的nt5853-nt7485的核苷酸片段，及其任何组合；优选地，ul55基因、us2基因、lat基因和对应于jq673480.1的nt5853-nt7485的核苷酸片段中的一个或多个被缺失或突变(例如包含功能丧失性突变，或者被置换为外源核苷酸序列)；(2)所述重组hsv病毒的必需基因未被缺失，且不包含功能丧失性突变；优选地，一个或多个必需基因(例如，icp27基因、icp4基因、vp5基因、gl基因、gh基因、gd基因、gk基因、gb基因、gn基因、ul5基因、ul6基因、ul8基因、ul9基因、ul12基因、ul25基因、ul26基因、ul28基因、ul29基因、ul30基因、ul33基因、ul36基因、ul38基因、ul42基因、ul48基因和/或ul52基
因)的原生启动子被替换为肿瘤特异性启动子，例如htert的启动子；和(3)除了2个拷贝的icp0基因和2个拷贝的icp34.5基因之外，所述重组hsv病毒的基因组含有野生型hsv病毒的所有其他基因，并且所述其他基因均不包含功能丧失性突变；优选地，所述重组hsv病毒的基因组还包含下述修饰：一个或多个hsv基因的原生启动子被替换为肿瘤特异性启动子，例如htert的启动子；优选地，所述hsv基因选自vp5基因、icp27基因和icp4基因；优选地，所述重组hsv病毒的基因组还包含有选自下述的一项或多项修饰：(1)vp5基因的原生启动子被替换为肿瘤特异性启动子，例如htert的启动子；(2)icp27基因的原生启动子被替换为肿瘤特异性启动子，如htert的启动子；(3)icp4基因的原生启动子被替换为肿瘤特异性启动子，如htert启动子；和(4)ul55基因、us2基因、lat基因和对应于jq673480.1的nt5853-nt7485的核苷酸片段中的一个或多个被缺失或突变(例如包含功能丧失性突变，或者被置换为外源核苷酸序列)；优选地，所述htert启动子具有如seq id no:5所示的序列。5.权利要求1-4任一项的重组hsv病毒，其中，所述重组hsv病毒还包含第五外源核苷酸序列；优选地，所述第五外源核苷酸序列编码选自下列的外源蛋白：荧光蛋白、免疫调节多肽、细胞因子、趋化因子、抗体和细胞毒性肽。6.一种病毒载体，其包含根据权利要求1-5任一项的重组hsv病毒的基因组或者由根据权利要求1-5任一项的重组hsv病毒的基因组组成。7.一种病毒载体，其包含或者由经突变的hsv基因组组成；所述经突变的hsv基因组不表达功能性icp0蛋白和功能性icp34.5蛋白，但能够表达功能性ul43蛋白，功能性ul41蛋白(即，vhs蛋白)，功能性ul48蛋白(即，vmw65蛋白)，或其任何组合；优选地，所述经突变的hsv基因组衍生自hsv-2病毒，或hsv-1/hsv-2嵌合病毒的基因组。8.权利要求7的病毒载体，其中，所述经突变的hsv基因组包含下述修饰：2个拷贝的icp0基因各自独立地包含功能丧失性突变(例如，一个或多个碱基的添加、缺失和/或置换)或者被缺失或者被置换为外源核苷酸序列(例如，编码外源蛋白的核苷酸序列)；并且，2个拷贝的icp34.5基因各自独立地包含功能丧失性突变(例如，一个或多个碱基的添加、缺失和/或置换)或者被缺失或者被置换为外源核苷酸序列(例如，编码外源蛋白的核苷酸序列)；例如，在所述经突变的hsv基因组中，(a1)一个拷贝的icp0基因包含功能丧失性突变(例如一个或多个碱基的添加、缺失和/或置换)，并且另一个拷贝的icp0基因包含功能丧失性突变(例如，一个或多个碱基的添加、缺失和/或置换)或者被缺失或者被置换为外源核苷酸序列(例如，编码外源蛋白的核苷酸序列)；或者(b1)一个拷贝的icp0基因被缺失，并且另一个拷贝的icp0基因包含功能丧失性突变(例如，一个或多个碱基的添加、缺失和/或置换)或者被缺失或者被置换为外源核苷酸序列
(例如，编码外源蛋白的核苷酸序列)；或者(c1)一个拷贝的icp0基因被置换为外源核苷酸序列(例如，编码外源蛋白的核苷酸序列)，并且另一个拷贝的icp0基因包含功能丧失性突变(例如，一个或多个碱基的添加、缺失和/或置换)或者被缺失或者被置换为外源核苷酸序列(例如，编码外源蛋白的核苷酸序列)；并且(a2)一个拷贝的icp34.5基因包含功能丧失性突变(例如一个或多个碱基的添加、缺失和/或置换)，并且另一个拷贝的icp34.5基因包含功能丧失性突变(例如，一个或多个碱基的添加、缺失和/或置换)或者被缺失或者被置换为外源核苷酸序列(例如，编码外源蛋白的核苷酸序列)；或者(b2)一个拷贝的icp34.5基因被缺失，并且另一个拷贝的icp34.5基因包含功能丧失性突变(例如，一个或多个碱基的添加、缺失和/或置换)或者被缺失或者被置换为外源核苷酸序列(例如，编码外源蛋白的核苷酸序列)；或者(c2)一个拷贝的icp34.5基因被置换为外源核苷酸序列(例如，编码外源蛋白的核苷酸序列)，并且另一个拷贝的icp34.5基因包含功能丧失性突变(例如，一个或多个碱基的添加、缺失和/或置换)或者被缺失或者被置换为外源核苷酸序列(例如，编码外源蛋白的核苷酸序列)；优选地，所述2个拷贝的icp0基因包含相同的功能丧失性突变或者不同的功能丧失性突变；或者都被缺失；或者被置换为相同的外源核苷酸序列或者不同的外源核苷酸序列；优选地，所述2个拷贝的icp34.5基因包含相同的功能丧失性突变或者不同的功能丧失性突变；或者都被缺失；或者被置换为相同的外源核苷酸序列或者不同的外源核苷酸序列；优选地，在所述经突变的hsv基因组中，(1)所述2个拷贝的icp0基因各自独立地包含功能丧失性突变(例如一个或多个碱基的添加、缺失和/或置换)，并且，所述2个拷贝的icp34.5基因各自独立地包含功能丧失性突变(例如一个或多个碱基的添加、缺失和/或置换)；或者(2)所述2个拷贝的icp0基因各自独立地包含功能丧失性突变(例如一个或多个碱基的添加、缺失和/或置换)，并且，所述2个拷贝的icp34.5基因被缺失；或者(3)所述2个拷贝的icp0基因各自独立地包含功能丧失性突变(例如一个或多个碱基的添加、缺失和/或置换)，并且，所述2个拷贝的icp34.5基因各自独立地被置换为外源核苷酸序列(例如，编码外源蛋白的核苷酸序列)；或者(4)所述2个拷贝的icp0基因被缺失；并且，所述2个拷贝的icp34.5基因各自独立地包含功能丧失性突变(例如一个或多个碱基的添加、缺失和/或置换)；或者(5)所述2个拷贝的icp0基因被缺失；并且，所述2个拷贝的icp34.5基因被缺失；或者(6)所述2个拷贝的icp0基因被缺失；并且，所述2个拷贝的icp34.5基因各自独立地被置换为外源核苷酸序列(例如，编码外源蛋白的核苷酸序列)；或者(7)所述2个拷贝的icp0基因各自独立地被置换为外源核苷酸序列(例如，编码外源蛋白的核苷酸序列)，并且，所述2个拷贝的icp34.5基因各自独立地包含功能丧失性突变(例如一个或多个碱基的添加、缺失和/或置换)；或者(8)所述2个拷贝的icp0基因各自独立地被置换为外源核苷酸序列(例如，编码外源蛋白的核苷酸序列)，并且，所述2个拷贝的icp34.5基因被缺失；或者
(9)所述2个拷贝的icp0基因各自独立地被置换为外源核苷酸序列(例如，编码外源蛋白的核苷酸序列)，并且，所述2个拷贝的icp34.5基因各自独立地被置换为外源核苷酸序列(例如，编码外源蛋白的核苷酸序列)；优选地，在所述经突变的hsv基因组中，(1)第一拷贝的icp0基因包含第一功能丧失性突变，第二拷贝的icp0基因包含第二功能丧失性突变；并且，第一拷贝的icp34.5基因包含第三功能丧失性突变，第二拷贝的icp34.5基因包含第四功能丧失性突变；或者(2)第一拷贝的icp0基因包含第一功能丧失性突变，第二拷贝的icp0基因包含第二功能丧失性突变；并且，所述2个拷贝的icp34.5基因被缺失；或者(3)第一拷贝的icp0基因包含第一功能丧失性突变，第二拷贝的icp0基因包含第二功能丧失性突变；并且，第一拷贝的icp34.5基因被置换为第三外源核苷酸序列，第二拷贝的icp34.5基因被置换为第四外源核苷酸序列；或者(4)所述2个拷贝的icp0基因被缺失；并且，第一拷贝的icp34.5基因包含第三功能丧失性突变，第二拷贝的icp34.5基因包含第四功能丧失性突变；或者(5)所述2个拷贝的icp0基因被缺失；并且，所述2个拷贝的icp34.5基因被缺失；或者(6)所述2个拷贝的icp0基因被缺失；并且，第一拷贝的icp34.5基因被置换为第三外源核苷酸序列，第二拷贝的icp34.5基因被置换为第四外源核苷酸序列；或者(7)第一拷贝的icp0基因被置换为第一外源核苷酸序列，第二拷贝的icp0基因被置换为第二外源核苷酸序列；并且，第一拷贝的icp34.5基因包含第三功能丧失性突变，第二拷贝的icp34.5基因包含第四功能丧失性突变；或者(8)第一拷贝的icp0基因被置换为第一外源核苷酸序列，而第二拷贝的icp0基因被置换为第二外源核苷酸序列；并且，所述2个拷贝的icp34.5基因被缺失；或者(9)第一拷贝的icp0基因被置换为第一外源核苷酸序列，第二拷贝的icp0基因被置换为第二外源核苷酸序列；并且，第一拷贝的icp34.5基因被置换为第三外源核苷酸序列，第二拷贝的icp34.5基因被置换为第四外源核苷酸序列。9.权利要求8的病毒载体，其中，所述第一功能丧失性突变、第二功能丧失性突变、第三功能丧失性突变和第四功能丧失性突变各自独立地选自错义突变、无义突变、移码突变、碱基缺失、碱基置换、碱基添加、以及其任何组合(例如，基因片段的缺失或置换或添加)；和/或，所述第一外源核苷酸序列、第二外源核苷酸序列、第三外源核苷酸序列和第四外源核苷酸序列各自独立地编码选自下列的外源蛋白：荧光蛋白、免疫调节多肽、细胞因子、趋化因子、抗体和细胞毒性肽；优选地，所述荧光蛋白选自绿色荧光蛋白(例如，具有如seq id no:7所示氨基酸序列的绿色荧光蛋白)，红色荧光蛋白，蓝色荧光蛋白，黄色荧光蛋白，及其任何组合；优选地，所述免疫调节多肽选自cd40l、ox40l、可诱导共刺激分子(icos)、ftl3l、light、cd137l、cd70、4-1bb、gitr、cd28，及其任何组合；优选地，所述细胞因子选自白介素(例如il-2、il-12和il-15)、干扰素(例如ifnα、ifnβ、ifnγ)、肿瘤坏死因子(例如tnfα)、集落刺激因子(例如gm-csf)，及其任何组合；优选地，所述趋化因子选自ccl2、rantes、ccl7、ccl9、ccl10、ccl12、ccl15、ccl19、
ccl21、ccl20、xcl-1，及其任何组合；优选地，所述细胞毒性肽选自胸苷激酶tk(tk/gcv)、trail、fasl，及其任何组合；优选地，所述抗体选自抗pd-1抗体、抗pd-l1抗体、抗tigit抗体、抗btla抗体、抗ctla-4抗体、抗tim-3抗体、抗lag-3抗体、抗cd137抗体、抗ox40抗体、抗gitr抗体、抗cd73抗体、抗kir抗体、抗icos抗体、抗csf1r抗体、抗egfr抗体、抗vegfr抗体、抗her2抗体、抗pdgfr抗体，及其任何组合。10.权利要求7-9任一项的病毒载体，其中，所述经突变的hsv基因组包含能够表达功能性ul43蛋白的ul43基因，能够表达功能性ul41蛋白的ul41基因(即，vhs基因)，和/或，能够表达功能性ul48蛋白的ul48基因(即，vmw65基因)；优选地，所述经突变的hsv基因组还具有选自下列的一个或多个特征：(1)一个或多个非必需基因被缺失或突变(例如包含功能丧失性突变，或者被置换为外源核苷酸序列)；优选地，所述非必需基因选自ul3基因，ul4基因，ul14基因，ul16基因，ul21基因，ul24基因，ul31基因，ul32基因，us3基因，ul51基因，ul55基因，ul56基因，us2基因，us12基因(即，icp47基因)，lat基因，对应于jq673480.1的nt5853-nt7485的核苷酸片段，及其任何组合；优选地，ul55基因、us2基因、lat基因和对应于jq673480.1的nt5853-nt7485的核苷酸片段中的一个或多个被缺失或突变(例如包含功能丧失性突变，或者被置换为外源核苷酸序列)；(2)所述经突变的hsv基因组中的必需基因未被缺失，且不包含功能丧失性突变；优选地，一个或多个必需基因(例如，icp27基因、icp4基因、vp5基因、gl基因、gh基因、gd基因、gk基因、gb基因、gn基因、ul5基因、ul6基因、ul8基因、ul9基因、ul12基因、ul25基因、ul26基因、ul28基因、ul29基因、ul30基因、ul33基因、ul36基因、ul38基因、ul42基因、ul48基因和/或ul52基因)的原生启动子被替换为肿瘤特异性启动子，例如htert的启动子；和(3)除了2个拷贝的icp0基因和2个拷贝的icp34.5基因之外，所述经突变的hsv基因组含有野生型hsv病毒的所有其他基因，并且所述其他基因均不包含功能丧失性突变；优选地，所述经突变的hsv基因组还包含下述修饰：一个或多个hsv基因的原生启动子被替换为肿瘤特异性启动子，例如htert的启动子；优选地，所述hsv基因选自vp5基因、icp27基因和icp4基因；优选地，所述经突变的hsv基因组还包含有选自下述的一项或多项修饰：(1)vp5基因的原生启动子被替换为肿瘤特异性启动子，例如htert的启动子；(2)icp27基因的原生启动子被替换为肿瘤特异性启动子，如htert的启动子；(3)icp4基因的原生启动子被替换为肿瘤特异性启动子，如htert启动子；和(4)ul55基因、us2基因、lat基因和对应于jq673480.1的nt5853-nt7485的核苷酸片段中的一个或多个被缺失或突变(例如包含功能丧失性突变，或者被置换为外源核苷酸序列)；优选地，所述htert启动子具有如seq id no:5所示的序列。11.权利要求7-10任一项的病毒载体，其中，所述经突变的hsv基因组还包含第五外源核苷酸序列；优选地，所述第五外源核苷酸序列编码选自下列的外源蛋白：荧光蛋白、免疫调节多肽、细胞因子、趋化因子、抗体和细胞毒性肽。
12.一种宿主细胞，其感染了权利要求1-5任一项的重组hsv病毒，或者包含有权利要求1-5任一项的重组hsv病毒的基因组，或者转染了权利要求6-11任一项的病毒载体；优选地，所述细胞为肿瘤细胞，例如肺癌细胞，肝癌细胞，乳腺癌细胞，骨肉瘤细胞，卵巢癌细胞，宫颈癌细胞，前列腺癌细胞，神经胶质瘤细胞，黑色素瘤细胞，结直肠癌细胞，和胰腺癌细胞。13.一种获得权利要求1-5任一项的重组hsv病毒的方法，其包括：(1)培养根据权利要求12的宿主细胞；(2)待所述宿主细胞发生病变后，收集和裂解所述宿主细胞，以获得所述宿主细胞的裂解液；和(3)从所述裂解液中回收所述重组hsv病毒。14.一种药物组合物，其包含根据权利要求1-5任一项的重组hsv病毒，或者根据权利要求1-5任一项的重组hsv病毒的基因组，或者根据权利要求6-11任一项的病毒载体，以及药学上可接受的载体或赋形剂；优选地，所述药物组合物用于治疗肿瘤，例如，肺癌，肝癌，乳腺癌，骨肉瘤，卵巢癌，前列腺癌，神经胶质瘤，黑色素瘤，结直肠癌，和胰腺癌；优选地，所述药物组合物为注射液或冻干粉剂；优选地，所述药物组合物包含治疗有效量(例如治疗肿瘤有效量)的所述重组hsv病毒或重组hsv病毒的基因组或病毒载体；优选地，所述药物组合物以单位剂量形式存在；例如每单位剂量的药物组合物中包含10
2-109pfu的重组hsv病毒。15.一种治疗肿瘤的方法，其包括，给有此需要的受试者施用治疗有效量的根据权利要求1-5任一项的重组hsv病毒，或者根据权利要求6-11任一项的病毒载体，或者权利要求14的药物组合物；优选地，所述肿瘤选自肺癌，肝癌，乳腺癌，骨肉瘤，卵巢癌，前列腺癌，神经胶质瘤，黑色素瘤，结直肠癌，和胰腺癌；优选地，所述受试者是哺乳动物，例如人。16.根据权利要求1-5任一项的重组hsv病毒或者根据权利要求6-11任一项的病毒载体用于制备药物组合物的用途，所述药物组合物用于治疗受试者的肿瘤；优选地，所述肿瘤选自肺癌，肝癌，乳腺癌，骨肉瘤，卵巢癌，前列腺癌，神经胶质瘤，黑色素瘤，结直肠癌，和胰腺癌；优选地，所述受试者是哺乳动物，例如人。
技术总结
本发明涉及病毒学和肿瘤治疗领域。特别地，本发明提供了一种重组单纯疱疹病毒(Herpes Simplex Virus，HSV)，其能够特异性地在肿瘤细胞中以高水平复制并杀伤肿瘤细胞，但是在正常细胞中以低水平复制，从而本发明的重组单纯疱疹病毒不仅对肿瘤细胞具有高杀伤力，而且具有显著降低的副作用(特别是神经毒性)。进一步，本发明涉及了基于所述重组单纯疱疹病毒构建的病毒载体，包含所述重组单纯疱疹病毒或所述病毒载体的药物组合物，以及所述重组单纯疱疹病毒或所述病毒载体的用途。本发明的重组单纯疱疹病毒可以用于感染并杀伤肿瘤细胞，并且可以用于将基因药物递送至肿瘤细胞内，进行基因治疗。行基因治疗。行基因治疗。
技术研发人员：黄承浩 罗勇 袁权 张军 夏宁邵
受保护的技术使用者：养生堂有限公司
技术研发日：2018.02.28
技术公布日：2023/3/21