一种固定化脂肪酶及其应用的制作方法

文档序号:32033993发布日期:2022-11-03 02:41阅读:来源:国知局

技术特征:
1.一种固定化脂肪酶,其通过在缓冲溶液中加入游离脂肪酶、固定化载体、稳定剂和生物来源的共固定化剂,在适合所述固定化载体吸附所述游离脂肪酶的条件下搅拌,然后将所得的溶液经过滤、清洗和干燥后制得。2.根据权利要求1所述的固定化脂肪酶,其特征在于:所述游离脂肪酶选自米黑根毛霉(rhizomucor miehei)来源游离脂肪酶、柔毛腐质霉(humicola lanuginosa)来源游离脂肪酶和南极假丝酵母(candida antarctica)来源游离脂肪酶的一种或多种。3.根据权利要求1或2所述的固定化脂肪酶,其特征在于:所述共固定化剂来源于微藻藻油纯化后的极性糖脂混合物,其制备方法包括如下步骤:(1)取微藻生物质加入有机溶剂,于20~50℃,体系压力10~40mpa的条件下搅拌,使得微藻生物质破碎;搅拌完成后离心,获得上清,即粗藻油;将所述上清脱除溶剂,得到藻油固体;(2)将藻油固体经过硅胶柱分离,洗脱溶剂为正庚烷:异丙醇=(4~10):1(v/v);收集1cv至2~3cv(柱体积)组分;将所得组分脱除溶剂后即为共固定化剂。4.根据权利要求3所述的固定化脂肪酶,其特征在于:所述共固定化剂的制备方法中,步骤(1)中,所述微藻生物质为微藻干藻粉;和/或步骤(1)中,所述有机溶剂选自甲醇、氯仿和正己烷中的一种或多种;和/或步骤(2)中,所述藻油固体与所述硅胶的质量比为1:(40~100)。5.根据权利要求1-4任一项所述的固定化脂肪酶,其特征在于:所述稳定剂选自甲基葡萄糖苷、乙基葡萄糖苷和甘油葡萄糖苷中的一种或多种。6.根据权利要求1-5任一项所述的固定化脂肪酶,其特征在于:所述固定化载体为吸附树脂。7.根据权利要求1-6任一项所述的固定化脂肪酶,其特征在于:所述缓冲溶液选自tris-盐酸缓冲液、bis-tris-盐酸缓冲液中的一种或多种。8.根据权利要求1-7任一项所述的固定化脂肪酶,其特征在于:所述缓冲溶液的用量为每克游离脂肪酶加入的缓冲溶液的体积为200~300ml;和/或所述共固定化剂和所述稳定剂在缓冲溶液中的质量分数分别为0.5~3%和0.1~1%;和/或所述游离脂肪酶与所述固定化载体的质量比为1:(8~10);和/或所述脂肪酶固定化条件为:温度为20~50℃;搅拌转速为50~100rpm;搅拌时间12~24h。9.权利要求1-8任一项所述的固定化脂肪酶在催化合成维生素a棕榈酸酯中的应用。10.一种维生素a棕榈酸酯的酶法合成方法,包括使用权利要求1-8任一项所述的固定化脂肪酶为催化剂,催化原料维生素a醋酸酯和棕榈酸反应生成维生素a棕榈酸酯的步骤。

技术总结
本发明公开一种固定化脂肪酶及其应用。本发明公开的固定化脂肪酶是通过在缓冲溶液中加入游离脂肪酶、固定化载体、稳定剂和生物来源的共固定化剂,在适合所述固定化载体吸附所述游离脂肪酶的条件下搅拌,然后将所得的溶液经过滤、清洗和干燥后制得。本发明所用的生物来源的共固定化剂与脂肪酶的相容性好且有利于脂肪酶在体系中分散,提高了脂肪酶吸附效率,所用的稳定剂能保证脂肪酶的活性。本发明公开的固定化脂肪酶应用于维生素A棕榈酸酯合成中转化率高,有很大的工业化应用的潜力。有很大的工业化应用的潜力。


技术研发人员:姜君鹏 王竞辉 孔令晓 张光祥 孙烨 潘亚男 李兴华
受保护的技术使用者:万华化学集团股份有限公司
技术研发日:2022.08.11
技术公布日:2022/11/2
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