技术特征：
1.一种taq dna聚合酶突变体，其特征在于，所述taq dna聚合酶突变体的氨基酸序列相较于野生型taq dna聚合酶的氨基酸序列发生p382g的突变；所述野生型taq dna聚合酶的氨基酸序列如seq id no.2所示，所述p382g表示seq id no.2中的第382位氨基酸由p突变为g。2.编码如权利要求1中所述的taq dna聚合酶突变体的dna序列。3.根据权利要求2所述的taq dna聚合酶突变体的dna序列，其特征在于，所述野生型taq dna聚合酶的编码核苷酸序列如seq id no.1所示，所述p382g的核苷酸序列与seq id no.1相比，区别仅在于，第382位氨基酸的密码子由ccg替换为ggt。4.包含如权利要求2中所述的dna序列的载体。5.包含如权利要求2中所述的dna序列的细胞。6.如权利要求1所述的taq dna聚合酶突变体在核酸扩增中的应用。7.如权利要求1所述的taq dna聚合酶突变体在qpcr中的应用。8.一种qpcr检测试剂盒，其特征在于，包括：目标序列引物、插入染料或标记的目标探针、以及权利要求1中所述的taq dna聚合酶突变体。9.根据权利要求8所述的一种qpcr检测试剂盒，其特征在于：插入染料是sybr green或evagreen。10.一种qpcr检测方法，其特征在于：所述qpcr的反应体系以总体积20μl计，包含4μl50ng/μl如权利要求1中所述的taq dna聚合酶突变体，1μl 10μm正向引物，1μl 10μm反向引物，1μl 5μm标签探针，1μl模板，2μl 10
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buffer，余量为水；反应程序为：95℃变性30秒；95℃退火4秒，60℃延伸1秒，40个循环；所述buffer包含20mm tris-hcl，80mm tris-acetate，10mm(nh4)2so4，10mm kcl，2mm mgso4，3mm mg-acetate，0.1％-x-100，ph 8.8。
技术总结
本申请属于分子生物学技术领域，尤其涉及用于探针法qPCR的Taq DNA聚合酶突变体。本申请中基于探针法qPCR对Taq DNA聚合酶突变体进行设计、表征和筛选，采用快速扩增时间(延伸期1秒)的循环过程，获得了部分Taq DNA聚合酶突变体。与野生型Taq DNA聚合酶相比，本申请提供的突变体具有快速检测扩增结果的特点，这显著降低了qPCR过程所需的总时间，提高了qPCR或实时qPCR的检测效率。因此，本申请提供的突变体具有较大的经济优势。本申请提供的Taq DNA聚合酶突变体可以用于常规的qPCR检测，包括基因表达分析和其他DNA定量检测。表达分析和其他DNA定量检测。表达分析和其他DNA定量检测。
技术研发人员：朱振宇 孙大鹏
受保护的技术使用者：武汉爱博泰克生物科技有限公司
技术研发日：2021.09.30
技术公布日：2023/3/30