技术特征：
1.一种检测gnrh结合蛋白生物学活性的方法，其特征在于，先构建共表达gnrhr和带有免疫相关信号通路反应元件的报告基因的效应细胞，然后孵育包含gnrh结合蛋白、效应细胞的混合物，孵育后加入酶反应底物，根据测定的信号值拟合四参数曲线确定gnrh结合蛋白的生物学活性；所述效应细胞为共表达gnrhr和nfat-荧光素酶报告基因的中国仓鼠卵巢细胞chok1/gnrhr/nfat，2022年7月22日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址为中国.武汉.武汉大学，保藏编号为cctcc no：c2022163。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述gnrh结合蛋白是gnrh激动剂或抑制剂。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述gnrh结合蛋白为gnrh激动剂，检测gnrh激动剂的生物学活性的步骤如下： （1）构建、筛选得到共表达gnrhr和带有免疫相关信号通路反应元件的报告基因的效应细胞； （2）将gnrh激动剂进行梯度稀释，并将梯度稀释后的gnrh激动剂分别与步骤（1）中所述效应细胞一起孵育； （3）加入荧光素酶反应底物，根据测定的信号值拟合四参数曲线确定gnrh激动剂的生物学活性。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述gnrh结合蛋白为gnrh抑制剂，检测gnrh抑制剂的生物学活性的步骤如下： （1）构建、筛选得到共表达gnrhr和带有免疫相关信号通路反应元件的报告基因的效应细胞； （2）将gnrh抑制剂进行梯度稀释，并将梯度稀释后的gnrh抑制剂分别与gnrh激动剂、步骤（1）中所述的效应细胞一起孵育； （3）加入荧光素酶反应底物，根据测定的信号值拟合四参数曲线确定gnrh抑制剂的生物学活性。5.根据权利要求3或4所述的方法，其特征在于，孵育时所述效应细胞密度是3
×
106~5
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10
6 cell/ml。6.根据权利要求3或4所述的方法，其特征在于，孵育时所述效应细胞密度是3.3
×
10
6 ~5
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10
6 cell/ml。7.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述gnrh激动剂为gnrh。8.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述gnrh抑制剂为醋酸加尼瑞克注射液。9.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述gnrh激动剂的浓度是0.005~0.05nm。10.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述gnrh激动剂的浓度是0.007~0.04nm。11.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述检测gnrh结合蛋白时的孵育条件为35~38℃、7~10％co2的条件震荡孵育5~7小时。12.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，孵育后，加入的酶反应底物与孵育混合物的体积为1:1~1.5。13.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，孵育后，加入的酶反应底物与孵育混合物的体积为1:1~1.3。14.一种测定gnrh结合蛋白的生物活性的组合物，其特征在于，包括以下组分：1）一种共表达gnrhr和nfat-荧光素酶报告基因的中国仓鼠卵巢细胞chok1/gnrhr/nfat，2022年7月22日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址为中国.武汉.武汉大学，保藏编号为cctcc no：c2022163；2）荧光素酶反应底物。15.一种用于测定gnrh结合蛋白的生物活性的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括如权利要求14所述的组合物。16.一种共表达gnrhr和nfat-荧光素酶报告基因的中国仓鼠卵巢细胞chok1/gnrhr/
nfat，2022年7月22日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址为中国.武汉.武汉大学，保藏编号为cctcc no：c2022163。
技术总结
本发明涉及一种检测GNRH结合蛋白的生物学活性方法及试剂盒，属于医学检测领域。本发明的目的是快速检测GNRH结合蛋白的生物学活性，具体地，所述方法通过先构建和筛选出共表达GNRHR和NFAT-荧光素酶报告基因的中国仓鼠卵巢细胞CHOK1/GnRHR/NFAT，然后孵育包含GNRH结合蛋白、效应细胞的混合物，孵育后加入酶反应底物，根据测定的信号值拟合四参数曲线确定GNRH结合蛋白的生物学活性。GNRH结合蛋白的生物学活性。GNRH结合蛋白的生物学活性。
技术研发人员：冯速 张晓颖 曹林 张辉 刘晨晨 王子鸣
受保护的技术使用者：南京诺唯赞检测技术有限公司
技术研发日：2022.08.30
技术公布日：2022/10/3