一种高效降血压水产品活性肽的制备方法

文档序号:32308615发布日期:2022-11-23 10:49阅读:来源:国知局

技术特征:
1.一种高效降血压水产品活性肽的制备方法,其特征在于包括以下步骤:步骤1、利用胃蛋白酶酶解超高压处理后的鳙鱼肉得到粗多肽,将粗多肽进行分离、纯化、鉴定后筛选出ace潜在活性最大的肽段ylrlhf;具体步骤如下:1)粗多肽的制备:300mpa超高压处理鳙鱼肉20min,得到超高压处理后的鳙鱼肉;按超高压处理后的鳙鱼肉:水的质量比=1:5,在超高压处理后的鳙鱼肉中加入水,加入4000μ/g的胃蛋白酶,在55℃水浴下反应6h;95℃水浴中加热10min终止反应,水解产物离心,收集上清液利用透析袋(md77-5m)透析除盐即为粗多肽;2)多肽的分离、纯化:将粗多肽使用装有5kda截留超滤膜的超滤杯超滤,膜压力为0.05mpa,得到分子量<5kda和>5kda的两个级分,<5kda被冻干后利用质谱测定氨基酸序列,选取置信值>99%的肽段通过peptideranker软件进行活性评分,对评分结果>0.5的肽段进行分子对接,根据分子对接结果筛选出ace潜在活性最大的肽段ylrlhf(酪氨酸-亮氨酸-精氨酸-亮氨酸-组氨酸-苯丙氨酸);步骤2、利用peppowertm多肽合成平台通过固相合成法合成了多肽序列ylrlhf,得到ace抑制肽ylrlhf;步骤3、将纳米级材料溶于水超声2h后制备得到0.1mg/ml的分散液;所述纳米级材料为:纳米级氧化石墨烯(go)、羧基介孔二氧化硅纳米颗粒(carboxyl mesoporous silica nanoparticles,cmsn)、聚乙二醇包裹金纳米粒子(末端羧基修饰)(gold nanoparticles-peg-n3,gn-p)、羧基功能化的四氧化三铁(dmsa@fe3o4)中的一种;步骤4、10倍纳米级材料为质量分数的1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐(edcl)和20倍纳米级材料为质量分数的n-羟基硫代琥珀酰亚胺(nhs)加入到分散液中,并搅拌5min;步骤5、按步骤2得到的ace抑制肽ylrlhf:纳米级材料的质量分数为1-2:2-1,再加入步骤2得到的ace抑制肽ylrlhf,混合均匀后磁力搅拌器上反应6h,得到反应液;步骤6、将步骤5得到的反应液离心,沉淀物用超纯水洗涤3次,冷冻干燥后得到高效降血压水产品活性肽。2.如权利要求1所述一种高效降血压水产品活性肽的制备方法,其特征在于,步骤1的粗多肽的制备中水解产物离心为:水解产物在离心力为10000g下离心20min。3.如权利要求1所述一种高效降血压水产品活性肽的制备方法,其特征在于,所述步骤5中,按步骤2得到的ace抑制肽ylrlhf:纳米级材料的质量分数最佳为1:2-2:1。

技术总结
本发明属于降血压产品的制备技术领域。一种高效降血压水产品活性肽的制备方法,其特征在于包括以下步骤:步骤1、利用胃蛋白酶酶解超高压处理后的鳙鱼肉得到粗多肽,分离、纯化、鉴定;步骤2、利用PepPowerTM多肽合成平台通过固相合成法合成了多肽序列YLRLHF;步骤3、将纳米级材料为溶于水超声后制备得到0.1mg/mL的分散液;步骤4、1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐和N-羟基硫代琥珀酰亚胺加入到分散液中;步骤5、再加入ACE抑制肽YLRLHF,混合均匀后搅拌,得到反应液;步骤6、将步骤5得到的反应液离心,沉淀物洗涤,冷冻干燥后得到高效降血压水产品活性肽。该方法得到的产物对血管紧张素转化酶(ACE)的抑制效果好。紧张素转化酶(ACE)的抑制效果好。


技术研发人员:汪兰 吴文锦 陈梦婷 熊光权 丁安子 石柳 陈胜 乔宇 陈朗
受保护的技术使用者:湖北省农业科学院农产品加工与核农技术研究所
技术研发日:2022.09.21
技术公布日:2022/11/22
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