技术特征：
1.一种利用蜡状芽孢杆菌制备聚3-羟基丁酸酯的方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)将蜡状芽孢杆菌接种至种子培养基，30℃培养12h，获得种子液；(2)将种子液以体积浓度1％的接种量接种至无机盐培养基，震荡培养后，离心弃上清，收集湿菌体；(3)将湿菌体进行提纯，得到聚3-羟基丁酸酯；步骤(1)中，所述蜡状芽孢杆菌为蜡状芽孢杆菌(bacillus cereus)菌株tq-0513-2，已保藏于中国典型培养物中心，保藏编号为cctcc no:m 2020433，保藏日期为2020年9月2日，保藏地址为中国武汉，武汉大学；步骤(2)中，所述无机盐培养基的配方为：碳源20-25g/l；磷酸氢二钠2800mg/l；磷酸二氢钾1000mg/l；硫酸铵500mg/l；氯化镁53mg/l；四水钙盐50mg/l；edta二钠0.5mg/l；七水合硫酸亚铁0.2mg/l；七水硫酸锌0.01mg/l；四水氯化锰0.003mg/l；硼酸0.03mg/l；六水氯化钴0.02mg/l；二水氯化铜0.001mg/l；六水氯化镍0.002mg/l；二水钼酸钠0.003mg/l，ph为7.0。2.如权利要求1所述利用蜡状芽孢杆菌制备聚3-羟基丁酸酯的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述种子培养基为lb培养基，其组成为：氯化钠10.0g/l，酵母提取物5.0g/l，蛋白胨10.0g/l，溶剂为水，ph值为7.0。3.如权利要求1所述利用蜡状芽孢杆菌制备聚3-羟基丁酸酯的方法，其特征在于，步骤(2)中，所述无机盐培养基的配方中，碳源为酵母提取物、葡萄糖、甘油、阿拉伯糖、麦芽糖中的一种或几种。4.如权利要求3所述利用蜡状芽孢杆菌制备聚3-羟基丁酸酯的方法，其特征在于，所述无机盐培养基的配方中，碳源为酵母提取物和葡萄糖。5.如权利要求1所述利用蜡状芽孢杆菌制备聚3-羟基丁酸酯的方法，其特征在于，步骤(2)中，所述震荡培养的条件为：30℃，200r/min培养24h。6.如权利要求1至5任一项所述利用蜡状芽孢杆菌制备聚3-羟基丁酸酯的方法，其特征在于，步骤(3)中，所述提纯方法为：湿菌体经液氮反复冻融，离心后，沉淀用蒸馏水和丙酮各洗涤2次，最后70℃烘干，得到聚3-羟基丁酸脂。
技术总结
本发明公开了一种利用蜡状芽孢杆菌制备聚3-羟基丁酸酯的方法，将蜡状芽孢杆菌菌株TQ-0513-2接种至种子培养基，30℃培养12h，获得种子液，将种子液以体积浓度1％的接种量接种至无机盐培养基，震荡培养后，离心弃上清，收集湿菌体，将湿菌体进行提纯，得到聚3-羟基丁酸酯。本发明方法中，采用的菌株能够高效稳定地利用葡萄糖、麦芽糖和甘油等为碳源，在细胞内大量积累聚3-羟基丁酸酯，最高含量可占细胞干重的56.2％。该菌株在生物合成聚3-羟基丁酸酯中具有潜在的应用价值。本发明中涉及的菌株在聚3-羟基丁酸酯的制备中具有良好的工业应用前景。用前景。用前景。
技术研发人员：张志刚 王旻宇 纪晓俊 童琦 慎立群
受保护的技术使用者：南京工业大学
技术研发日：2022.09.22
技术公布日：2022/11/25