技术特征：
1.一种恒温扩增结合胶体金免疫层析法检测病毒或细菌的试剂盒，其特征在于，包括试纸条和试剂，所述试剂包括扩增反应液和样本稀释液，所述试纸条包括胶条(1)以及位于所述胶条(1)内的反应层(2)，所述反应层(2)包括pvc背板以及依次设置于所述pvc背板上的样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水纸，所述样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水纸在相邻处重叠设置，所述硝酸纤维素膜上平行间隔设置检测线和质控线，所述检测线和质控线所在的方向与所述pvc背板的长度方向相垂直，所述胶条(1)靠近所述样品垫的一端设置有反应杯(3)，所述反应杯(3)内含有冻干粉，所述反应杯(3)内壁上设置有具有恒温加热功能的恒温层(4)，还包括用于将反应杯(3)底部戳破的加样控制组件(5)。2.如权利要求1所述的恒温扩增结合胶体金免疫层析法检测病毒或细菌的试剂盒，其特征在于，所述冻干粉包括解旋酶、重组酶、聚合酶、扩增引物、扩增探针和镁盐，所述扩增引物使用biotin修饰，所述扩增探针的两端分别由fitc或fam和3’block修饰，所述结合垫包被有金标抗体，所述金标抗体由纳米金粒子和能与所述fitc结合的anti-fitc抗体或能与fam结合的anti-fam抗体结合而制得，检测线包被有能与biotin结合的生物素配体，所述质控线包被有能与金标抗体结合的二抗抗体。3.如权利要求2所述的恒温扩增结合胶体金免疫层析法检测病毒或细菌的试剂盒，其特征在于，所述反应杯(3)包括设置于胶条(1)上的环形件(3a)以及设置于所述环形件(3a)底部的封口膜(3b)，所述恒温层(4)设置于所述环形件(3a)的内壁，所述加样控制件包括具有尖端的第一戳破件(5a)以及与所述第一戳破件(5a)相连的插接件(5b)，所述环形件(3a)和恒温层(4)开设有供所述插接件(5b)穿过的穿过孔(6)，所述第一戳破件(5a)的尖端与所述封口膜(3b)相对。4.如权利要求3所述的恒温扩增结合胶体金免疫层析法检测病毒或细菌的试剂盒，其特征在于，所述第一戳破件(5a)包括具有尖端的尖端部(5a1)和与尖端部(5a1)相连的流出部(5a2)，所述尖端部(5a1)的尖端与所述封口膜(3b)相对，所述流出部(5a2)在所述胶条(1)所在平面上的投影位于所述尖端部(5a1)在所述胶条(1)所在平面上的投影之内。5.如权利要求4所述的恒温扩增结合胶体金免疫层析法检测病毒或细菌的试剂盒，其特征在于，还包括隔离盖(7)，所述隔离盖(7)与所述环形件(3a)顶部的外壁螺纹连接。6.如权利要求5所述的恒温扩增结合胶体金免疫层析法检测病毒或细菌的试剂盒，其特征在于，还包括灭菌组件(8)，所述灭菌组件(8)包括试剂腔(8a)、开设于所述隔离盖(7)上的第一通孔(8b)、与所述第一通孔(8b)活动配合的按压件(8c)以及具有尖端的第二戳破件(8d)，所述试剂腔(8a)内装有灭菌剂，按压所述按压件(8c)时，所述第二戳破件(8d)将所述灭菌腔戳破而使灭菌剂流出流至反应层(2)。7.如权利要求6所述的恒温扩增结合胶体金免疫层析法检测病毒或细菌的试剂盒，其特征在于，所述试剂腔(8a)成型于所述按压件(8c)内，还包括与所述隔离盖(7)平面部分的底部相连的连接件(9)，所述第二戳破件(8d)与所述连接件(9)的顶部相连，所述第二戳破件(8d)位于所述按压件(8c)的下方。8.如权利要求6所述的恒温扩增结合胶体金免疫层析法检测病毒或细菌的试剂盒，其特征在于，所述试剂腔(8a)包括与所述隔离盖(7)平面部分的底部相连的筒部(8a1)以及与筒部(8a1)底部相连的膜部(8a2)，所述第二戳破件(8d)与所述按压件(8c)的底部相连。9.如权利要求6-8任一所述的恒温扩增结合胶体金免疫层析法检测病毒或细菌的试剂
盒，其特征在于，所述灭菌组件(8)还包括复位弹簧(8e)，所述复位弹簧(8e)绕设于所述按压件(8c)上，所述复位弹簧(8e)的两端分别与所述按压件(8c)和所述隔离盖(7)平面部分的顶部相连。10.一种恒温扩增结合胶体金免疫层析法检测病毒或细菌的检测方法，其特征在于，使用如权利要求9所述的恒温扩增结合胶体金免疫层析法检测病毒或细菌的试剂盒进行检测，包括以下步骤：s1，拧开所述隔离盖(7)，在反应杯(3)内加入样本，之后加入扩增反应液，拧上所述隔离盖(7)恒温扩增30分钟；s2，拧开所述隔离盖(7)，加入样本稀释液，拧上所述隔离盖(7)，按下所述环形件(3a)外的插接件(5b)，插接件(5b)带动第一戳破件(5a)戳破所述封口膜(3b)形成加样孔，所述反应杯(3)内的液体由所述加样孔流向反应层(2)，反应15分钟后，判读结果；s3，判读结果后，按压按压件(8c)，带动第二锥形件戳破所述膜部(8a2)或试剂腔(8a)的底部，灭菌剂从戳破处流出流至反应层(2)对其进行灭菌消毒；所述判读结果具体为：若所述检测线和所述质控线出现带色的条带，结果为阳性；若所述检测线未出现带色的条带，所述质控线出现带色的条带，结果为阴性；若质控线未出现带色的条带，说明样本量不足。
技术总结
本发明公开了一种恒温扩增结合胶体金免疫层析法检测病毒或细菌的试剂盒，包括试纸条和试剂，所述试剂扩增反应液和样本稀释液，所述试纸条包括胶条以及位于胶条内的反应层，所述反应层包括PVC背板以及依次设置于所述PVC背板上的样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水纸，所述硝酸纤维素膜上平行间隔设置检测线和质控线，所述胶体靠近所述样品垫的一端设置有反应杯，所述反应杯内含有冻干粉，所述反应杯内壁上设置有具有恒温加热功能的恒温层，还包括用于将反应杯底部戳破的加样控制组件。本发明的试剂盒及利用该试剂盒的检测方法，能够简便、快速、准确检测病毒或细菌，完全摆脱对设备的依赖，可用于现场检测，具有很大的应用价值。具有很大的应用价值。具有很大的应用价值。
技术研发人员：黄二辉 张连海 梁芳芳 黄春英 梁毅 黄品豪
受保护的技术使用者：珠海市慧康生物科技有限公司
技术研发日：2022.11.24
技术公布日：2023/1/5