一种酶法合成假尿苷的方法与流程

文档序号:33628820发布日期:2023-03-28 22:09阅读:来源:国知局

技术特征:
1.一种酶法合成假尿苷的方法,包括如下步骤:(1)核糖-5
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磷酸和尿嘧啶在假尿苷-5
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磷酸糖苷酶存在的条件下反应,生成假尿苷-5
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磷酸;(2)假尿苷-5
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磷酸在磷酸酶存在的条件下反应,生成假尿苷;其中,所述假尿苷-5
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磷酸糖苷酶来源于deinococcus radiodurans、streptomyces himastatinicus、legionella pneumophila或escherichia coli k12。2.一种酶法合成假尿苷的方法,包括如下步骤:(1)尿苷一磷酸在糖苷水解酶存在的条件下反应,生成核糖-5
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磷酸和尿嘧啶;(2)核糖-5
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磷酸和尿嘧啶在假尿苷-5
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磷酸糖苷酶存在的条件下反应,生成假尿苷-5
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磷酸;(3)假尿苷-5
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磷酸在磷酸酶存在的条件下反应,生成假尿苷;其中,所述假尿苷-5
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磷酸糖苷酶来源于deinococcus radiodurans、streptomyces himastatinicus、legionella pneumophila或escherichia coli k12。3.根据权利要求1中所述的方法,核糖-5
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磷酸和尿嘧啶可由糖苷水解酶水解尿苷一磷酸获得。4.根据权利要求1-3中任一所述的方法,假尿苷-5
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磷酸糖苷酶的氨基酸序列选自如wp_010888939.1(ncbi登录号)、wp_009720488.1(ncbi登录号)、wp_010947645.1(ncbi登录号)或wp_001292480.1(ncbi登录号)所示的序列。5.根据权利要求2或3所述的方法,所述糖苷水解酶为ppnn,优选的,其氨基酸序列如wp_000627995.1(ncbi登录号)所示。6.根据权利要求1或2所述的方法,所述磷酸酶为碱性磷酸酶,优选的,其氨基酸序列如caf2498152.1(ncbi登录号)所示。7.根据权利要求2或3所述的方法,尿苷一磷酸和糖苷水解酶反应温度为37℃,反应时间为2~10h,该反应中加入mgcl2。8.根据权利要求1-7中任一所述的方法,核糖-5
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磷酸、尿嘧啶和假尿苷-5
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磷酸糖苷酶反应的温度为37℃,反应时间为2~10h,该反应中加入cocl2。9.根据权利要求1-8中任一所述的方法,假尿苷-5
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磷酸和磷酸酶反应的温度为37℃,反应时间为2~10h。

技术总结
本发明提供一种酶法合成假尿苷的方法,首先采用ppnN水解起始底物尿苷一磷酸,获得核糖-5


技术研发人员:时鹏 冯速 韩艺文 唐伟 刘阳
受保护的技术使用者:南京诺唯赞生物科技股份有限公司
技术研发日:2022.10.10
技术公布日:2023/3/27
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