一种纳米复合催化剂及一步法测定糖化白蛋白的方法

文档序号:33098243发布日期:2023-02-01 00:16阅读:来源:国知局

技术特征:
1.一种纳米复合催化剂,其特征在于,所述纳米复合催化剂的制备过程为:先对过氧化物酶纳米模拟酶进行醛基化修饰得到cho-纳米酶,然后将cho-纳米酶与蛋白酶和酮胺氧化酶偶联得到纳米复合催化剂。2.根据权利要求1所述的纳米复合催化剂,其特征在于,所述过氧化物酶纳米模拟酶包括:纳米fe3o4、纳米cofe3o4、纳米co3o4、纳米ceo2、纳米mno、纳米mos2和纳米ws2中的一种或多种。3.根据权利要求1所述的纳米复合催化剂,其特征在于,所述过氧化物酶纳米模拟酶的粒径为1~1000nm。4.根据权利要求1所述的纳米复合催化剂,其特征在于,所述过氧化物酶纳米模拟酶醛基化修饰的过程如下:将过氧化物酶纳米模拟酶加入到壳聚糖溶液中,完全混匀后,加入多聚磷酸钠溶液,室温反应一段时间,分离收集壳聚糖修饰的过氧化物酶纳米模拟酶;经超纯水和冰醋酸溶液反复清洗干净后重新分散到pbs缓冲液中;然后加入高碘酸钠溶液进行反应;再次清洗后收集cho-纳米酶。5.根据权利要求1所述的纳米复合催化剂,其特征在于,所述壳聚糖溶液的质量百分比浓度为0.05~0.2%;多聚磷酸钠溶液的质量百分比浓度为0.5~5.0%;冰醋酸溶液的质量百分比浓度为0.5~1.5%;高碘酸钠溶液的质量百分比浓度大于等于1.0%;所述pbs缓冲液的ph值为1.5~6.5。6.根据权利要求1所述的纳米复合催化剂,其特征在于,将cho-纳米酶与蛋白酶和酮胺氧化酶偶联得到纳米复合催化剂的过程如下:将cho-纳米酶完全分散在水中,然后分别加入蛋白酶溶液和酮胺氧化酶溶液;混匀后进行偶联,偶联结束后进行分离、清洗,得到纳米复合催化剂。7.根据权利要求1所述的纳米复合催化剂,其特征在于,所述偶联反应的温度控制在0~8℃;所述偶联反应的时间为1~4小时;所述蛋白酶溶液的质量百分比浓度为0.1~1.00%;酮胺氧化酶溶液的质量百分比浓度为0.1~1.00%。8.一种一步法测定糖化白蛋白的方法,其特征在于,包括以下步骤:将权利要求1~7中任意一项中的纳米复合催化剂加入至糖化白蛋白待测溶液中,接着加入tmb溶液反应一段时间,观察结果,反应结束后的溶液颜色变蓝即存在糖化白蛋白,且随糖化白蛋白待测溶液中的糖化白蛋白浓度的增加而蓝色变深。9.根据权利要求8所述的一步法测定糖化白蛋白的方法,其特征在于,所述tmb溶液为1~500μmol/l的tmb溶液。10.根据权利要求9所述的一步法测定糖化白蛋白的方法,其特征在于,所述tmb溶液为50~300μmol/l的tmb溶液。

技术总结
本发明提供了一种纳米复合催化剂,所述纳米复合催化剂的制备过程为:先对过氧化物酶纳米模拟酶进行醛基化修饰得到CHO-纳米酶,然后将CHO-纳米酶与蛋白酶和酮胺氧化酶偶联得到纳米复合催化剂。本发明还提供了一种一步法测定糖化白蛋白的方法,包括以下步骤:将前述的纳米复合催化剂加入至糖化白蛋白待测溶液中,接着加入TMB溶液反应一段时间,观察结果,反应结束后的溶液颜色变蓝即存在糖化白蛋白,且随糖化白蛋白待测溶液中的糖化白蛋白浓度的增加而蓝色变深。本发明使用复合催化剂,融合了蛋白酶、酮胺氧化酶和过氧化物酶的三重功能,通过级联反应一步检测糖化白蛋白,能简化操作、提高检测效率和准确性。提高检测效率和准确性。提高检测效率和准确性。


技术研发人员:姜建芳
受保护的技术使用者:遵义医科大学
技术研发日:2022.10.24
技术公布日:2023/1/31
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