一种有益菌组合物、含其的微生物肥料及其制备方法与流程

本发明属于微生物领域，具体涉及一种有益菌组合物、含其的微生物肥料及其制备方法。

背景技术：

1、利用天然微生物制备微生物菌肥或微生物有机肥的技术，是上世纪60年代末在国际上迅速发展起来的一项绿色环保的生物处理技术。它通过多学科的综合运用，借助于混合的微生物群落在特定的环境中对多相的有机物进行分解，将有机固态废弃物发酵腐熟成为腐殖酸。该技术用于肥沃和改良土壤。具有经济、实用、不产生二次污染的特点，因此受到了广泛关注；同时，由于微生物菌肥或微生物有机肥制备看似简单，目前国内农户个体或者小微型企业纷纷量产，而且一般在生产过程中对微生物菌种菌株、原料都不进行筛选、调理，直接堆积发酵，其结果是发酵周期长、生产效率低下、杂菌数量多甚至包含大量的有害致病菌，目标有益菌不明确，并且目标有益菌相互间存在拮抗作用，使用或货架期存活率低，严重影响产品的质量及用户安全。

技术实现思路

1、为了解决现有技术中存在的发酵周期长、生产效率低下、杂菌数量多甚至包含大量的有害致病菌，目标有益菌不明确并且目标有益菌使用或货架期成活率低的问题，本发明提供了一种益菌组合物、含其的微生物肥料及其制备方法，包含以选择压力耐受筛选(以强化选择压力，三种共存菌的代谢物增加的压力、酸碱度增加的压力、温度增加的压力选育的方法)获取的三种有益菌，这三种有益菌均具有较好的耐自身代谢物拮抗及耐另外两种混合菌群代谢物拮抗的能力，同时具有较好的耐高温、耐酸、耐碱能力，活性和稳定性好，且更有利于保藏，延长了货架期。

2、为了解决上述技术问题，本发明第一方面提供了一种有益菌组合物，所述有益菌组合物包括淡紫拟青霉菌(paecilomyces lilacinus)pm0327-3、地衣芽孢杆菌(bacilluslicheniformis)bl-1106和枯草芽孢杆菌(bacillus subtilis)bs-56；其中，

3、所述淡紫拟青霉菌(paecilomyces lilacinus)pm0327-3的保藏编号为gdmcc no:62375；

4、所述地衣芽孢杆菌(bacillus licheniformis)bl-1106的保藏编号为gdmcc no:62323；

5、所述枯草芽孢杆菌(bacillus subtilis)bs-56的保藏编号为gdmcc no:62324。

6、可选地，所述淡紫拟青霉菌、地衣芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌的活菌数比例为(1-10):(1-10):(1-10)。

7、可选地，所述淡紫拟青霉菌、地衣芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌的每种活菌数均≥45亿cfu/g，且总活菌数≥150亿cfu/g。

8、为了解决上述技术问题，本发明第二方面提供了如本发明第一方面所述的有益菌组合物的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：

9、固态发酵获得淡紫拟青霉菌固态培养物；

10、深层发酵获得枯草芽孢杆菌发酵液，固液分离得到浆状渣泥i；

11、深层发酵获得地衣芽孢杆菌发酵液，固液分离得到浆状渣泥ii；

12、将浆状渣泥i、浆状渣泥ii、淡紫拟青霉菌固态培养物分别干燥后混合，得到所述有益菌组合物。

13、可选地，淡紫拟青霉菌的固态发酵采用的培养基包括：大米45-65wt％，麸皮3-8wt％，米糠5-9wt％，黄豆粉1-5wt％，余量为水。

14、可选地，枯草芽孢杆菌的深层发酵采用的培养基包括：葡萄糖1-4wt％，大豆蛋白胨1-5wt％，安琪酵母粉1-3wt％，豆粕1-6wt％，牛肉浸膏1-3wt％，玉米淀粉1-6wt％，氯化钠0.1-0.5wt％，磷酸二氢钾0.1-0.5wt％，硫酸镁0.01-0.1wt％，硫酸铵0.1-0.5wt％，硫酸锰0.01-0.1wt％，轻质碳酸钙0.1-0.5wt％，余量为水。

15、可选地，地衣芽孢杆菌的深层发酵采用的培养基包括：葡萄糖1-5wt％，玉米浆1-5wt％，酵母浸膏0.1-5wt％，豆粕1-5wt％，牛肉浸膏0.1-3wt％，玉米淀粉0.1-5wt％，氯化钠0.1-1.5wt％，磷酸二氢钾0.1-1.2wt％，磷酸氢二钾0.1-1.5wt％，硫酸镁0.01-0.1wt％，硫酸铵0.05-1wt％，硫酸锰0.01-0.5wt％，余量为水。

16、可选地，淡紫拟青霉菌的固态发酵过程包括：

17、第一阶段：在温度为25-32℃、相对湿度为80-95％条件下培养4-6天；

18、第二阶段：将温度调整为32-35℃，培养3-5天；

19、可选地，枯草芽孢杆菌的深层发酵的条件包括以下一种或多种：接种量5-10％；温度32-36℃；还原糖0.80-1.35％；溶解氧45-100％；ph6.3-8.9；发酵周期72-96h。

20、可选地，地衣芽孢杆菌的发酵培养的条件包括以下一种或多种：接种量5-10％；温度32-36℃；还原糖0.80-1.35％；溶解氧45-100％；ph6.3-8.9；发酵周期72-96h。

21、为了解决上述技术问题，本发明第三方面提供了一种微生物肥料，所述微生物肥料含有如本发明第一方面所述的有益菌组合物或根据本发明第二方面所述的制备方法得到的有益菌组合物。

22、为了解决上述技术问题，本发明第四方面提供了本发明第一方面所述的有益菌组合物、根据本发明第二方面所述的制备方法得到的有益菌组合或本发明第三方面所述的微生物肥料在制备促进植物生长的产品中的应用。

23、为了解决上述技术问题，本发明第五方面提供了本发明第一方面所述的有益菌组合物、根据本发明第二方面所述的制备方法得到的有益菌组合或本发明第三方面所述的微生物肥料在促进植物生长中的应用。

24、本发明的积极进步效果在于：

25、本技术所提供的有益菌组合物，包含以选择压力耐受筛选获取的三种有益菌淡紫拟青霉菌(paecilomyces lilacinus)pm0327-3、地衣芽孢杆菌(bacillus licheniformis)bl-1106和枯草芽孢杆菌(bacillus subtilis)bs-56，这三种有益菌均具有较好的耐自身代谢物拮抗及耐另外两种混合菌群代谢物拮抗的能力，同时具有较好的耐高温、耐酸、耐碱能力，活性和稳定性好，且更有利于保藏，延长了货架期。

26、生物材料保藏信息

27、淡紫拟青霉菌(paecilomyces lilacinus)pm0327-3，已于2022年4月12日保藏在广东省微生物菌种保藏中心(广东省科学院微生物研究所)(gdmcc)，保藏地址：广东省广州市先烈中路100号大院59号楼5楼，邮编：510070，保藏编号为：gdmcc no:62375，培养物名称是pm0327-3，分类命名是淡紫拟青霉菌(paecilomyces lilacinus)。

28、地衣芽孢杆菌(bacillus licheniformis)bl-1106，已于2022年3月25日保藏在广东省微生物菌种保藏中心(广东省科学院微生物研究所)(gdmcc)，保藏地址：广东省广州市先烈中路100号大院59号楼5楼，邮编：510070，保藏编号为：gdmcc no:62323，培养物名称是bl-1106，分类命名是地衣芽孢杆菌(bacillus licheniformis)。

29、枯草芽孢杆菌(bacillus subtilis)bs-56，已于2022年3月25日保藏在广东省微生物菌种保藏中心(广东省科学院微生物研究所)(gdmcc)，保藏地址：广东省广州市先烈中路100号大院59号楼5楼，邮编：510070，保藏编号为：gdmcc no:62324，培养物名称是bs-56，分类命名是枯草芽孢杆菌(bacillus subtilis)。