技术特征：
1.一种利用磁性纳米固定化酶将s腺苷甲硫氨酸转化合成acc方法，其特征在于，包括：步骤一：将丝瓜、番茄、大豆、玉米种子中的至少任意一种在一定条件下培育，获得黄化苗；步骤二：从黄化苗中提取1-氨基环丙烷羧酸合成酶（acs）溶液；步骤三：利用步骤二中的提取液通过硫酸铵盐析法和超滤法获得高纯度1-氨基环丙烷羧酸合成酶（acs）；步骤四：将高纯度1-氨基环丙烷羧酸合成酶（acs）通过戊二醛交联法获得磁性纳米固定化1-氨基环丙烷羧酸合成酶；步骤五：利用磁性纳米固定化1-氨基环丙烷羧酸合成酶在辅酶溶液系统中将s-腺苷甲硫氨酸连续循环生物转化合成1-氨基环丙烷羧酸。2.根据权利要求1所述的利用磁性纳米固定化酶将s腺苷甲硫氨酸转化合成acc方法，其特征在于，所述步骤一具体为：取1kg丝瓜、番茄、大豆或玉米种子中的一种，用蒸馏水洗净后浸泡24h置于湿润的纱布上，于 25℃培养箱中萌发；每天用蒸馏水洗涤幼苗一次，萌发6d 后，选取生长状况较好的幼苗碾压使其下胚轴尾部稍微破损，冷藏15-26h，作为酶提取材料。3.根据权利要求1所述的利用磁性纳米固定化酶将s腺苷甲硫氨酸转化合成acc方法，其特征在于，所述步骤二具体为：以ph 8.0的磷酸缓冲液并添加质量分数为0.01-0.05%的二硫苏糖醇和质量分数为0.0001-0.0005%磷酸吡哆醛作为提取液，料液比1:5-15，用打浆机粉碎幼苗，粉碎时间1-3min，然后放入超声提取器中提取2-5min；将提取液用5-6层纱布过滤，即可得到提取液。4.根据权利要求1所述的利用磁性纳米固定化酶将s腺苷甲硫氨酸转化合成acc方法，其特征在于，所述步骤三具体为：向步骤二中的提取液中加入质量分数20%-30%的硫酸铵，充分溶解后放入4℃保藏50-90min，离心萃取器以5000-8000r/min离心15-20min，取上清液；上清液以截留分子量3-10kda的超滤膜超滤，取截留溶液再用10-20kda的超滤膜超滤，截留溶液即为1-氨基环丙烷羧酸合成酶酶液。5.根据权利要求1所述的利用磁性纳米固定化酶将s腺苷甲硫氨酸转化合成acc方法，其特征在于，所述步骤四具体为：取50-100g apts-fe4o3磁性纳米颗粒分散在1-5 l质量分数10-20%戊二醛（ga）水溶液中并搅拌 2-5h，加入磁铁吸取磁性纳米颗粒；将制备好的apts-fe4o
3-ga纳米粒子均匀分散在1-5 l上述酶液中，在20-30℃和100-200 rpm 下搅拌 3-6 h，得到固定化酶用磷酸缓冲液洗涤数次，其中，磷酸缓冲液ph=8.0，将其储存在上述缓冲液中，即可得到1-氨基环丙烷羧酸合成磁性纳米固定化酶。6.根据权利要求5所述的利用磁性纳米固定化酶将s腺苷甲硫氨酸转化合成acc方法，其特征在于，所述磷酸缓冲液为磷酸钠缓冲液或者磷酸钾缓冲液。7.根据权利要求1所述的利用磁性纳米固定化酶将s腺苷甲硫氨酸转化合成acc方法，其特征在于，所述步骤五具体为：用ph 8.0的磷酸缓冲液配置质量分数1%-10%的s-腺苷甲硫氨酸溶液100-500 l，并向其中添加20-60 g的二硫苏糖醇、1-5g的磷酸吡哆醛和10-50g的磁性纳米颗粒固定化酶，充分密封混合后，置于20-30 ℃恒温反应釜中搅拌反应3-6 h；然后，向反应釜底部加入磁铁吸附磁性纳米颗粒固定化酶，取出反应液，再加入新的反应液；连续循环反应5-20次，合并反应液即为1-氨基环丙烷羧酸粗品。
技术总结
本发明属于生物化工技术领域，具体涉及一种利用磁性纳米固定化酶将S腺苷甲硫氨酸转化合成ACC方法，包括：将种子在一定条件下培育，获得黄化苗；从黄化苗中提取1-氨基环丙烷羧酸合成酶（ACS）溶液；提取液通过硫酸铵盐析法和超滤法获得高纯度1-氨基环丙烷羧酸合成酶（ACS）；将高纯度1-氨基环丙烷羧酸合成酶（ACS）通过戊二醛交联法获得磁性纳米固定化1-氨基环丙烷羧酸合成酶；利用磁性纳米固定化1-氨基环丙烷羧酸合成酶在辅酶溶液系统中将S-腺苷甲硫氨酸连续循环生物转化合成1-氨基环丙烷羧酸。本发明通过从植物黄化苗中提取制备1-氨基环丙烷-1-羧酸合成酶，并通过交联法制备磁性纳米固定化酶可循环使用，节省成本。节省成本。节省成本。
技术研发人员：马科 吴桐 薛靖文 曾淼
受保护的技术使用者：郑州尼采生物科技有限公司
技术研发日：2022.11.30
技术公布日：2023/3/14