从雷公藤中提取雷公藤甲素的制作方法

本技术涉及天然药物化学，更具体地说，它涉及从雷公藤中提取雷公藤甲素。

背景技术：

1、雷公藤，卫茅科雷公藤属植物，本属植物在我国共有三种，产于浙江、湖南、安徽、福建、台湾等省，主要分布在长江中下游地区。雷公藤化学成分复杂，药理作用广泛，主要药用部分是根，具有活血化瘀、清热解毒、消肿散结、杀虫止血等功效，具有重要的临床应用价值，目前已广泛应用于治疗类风湿性关节炎、肾炎、红斑狼疮及各种皮肤病，均取得良好的疗效。其中，雷公藤甲素是雷公藤植物的主要有效成分之一，研究表明具有抗氧化，抗类风湿，抗老年性痴呆症、抗癌等功效。

2、目前，从雷公藤中提取雷公藤甲素的工艺操作较为复杂、工艺效率较低，导致雷公藤甲素的提取率和纯度低、雷公藤甲素品质差，无法达到理想的药用要求。因此，亟需提出一种从雷公藤中提取雷公藤甲素的提取工艺，以解决现有的提取工艺，所得雷公藤甲素的提取率和纯度低、品质差等问题，利于提高雷公藤甲素的临床应用价值。

技术实现思路

1、为了解决现有的从雷公藤中提取雷公藤甲素的提取工艺，所得雷公藤甲素的提取率和纯度低、品质差等问题，本技术提供了一种从雷公藤中提取雷公藤甲素的提取工艺。

2、从雷公藤中提取雷公藤甲素，采用如下的技术方案：

3、从雷公藤中提取雷公藤甲素，包括以下步骤：

4、s1、将雷公藤粉末、复合酶加入水中，并调节ph至5-6，进行酶解，得雷公藤浆液；

5、s2、向步骤s1所得的雷公藤浆液中加入离子液体微乳液，进行超声处理后，离心收集提取液；

6、s3、先将步骤s2所得的提取液用100-200nm纳米膜进行过滤，收集滤液，再将滤液进行均质，最后经1000-2000分子量的超滤膜过滤并截留，得透析液；

7、s4、将步骤s3所得的透析液加入溶剂进行萃取，收集有机相，进行减压浓缩至干，得雷公藤甲素粗品；

8、s5、将步骤s4所得的雷公藤甲素粗品加入乙酸乙酯中，随后用硅胶柱层析纯化，所得收集液减压浓缩，冷冻干燥，得雷公藤甲素精品。

9、通过采用上述技术方案，本技术从雷公藤中提取雷公藤甲素，先将雷公藤粉末进行酶解，利用复合酶破坏雷公藤的细胞壁，加入离子液体，并采用超声波协助处理，能够有效提高雷公藤甲素的提取率，减少有机溶剂的使用量，随后提取液经纳米膜过滤和经超滤膜截留，进一步除去大分子杂质，最后进行溶剂萃取获得雷公藤甲素粗品，雷公藤甲素粗品经硅胶柱层析纯化，得雷公藤甲素精品；本技术的提取工艺，大大改善了雷公藤甲素的提取效果，提高了提取效率，获得雷公藤甲素的纯度高，产品品质优异，使得雷公藤甲素具有广阔的市场前景。

10、优选的，所述步骤s1中，雷公藤粉末通过将雷公藤根依次经干燥、研磨及过150-250目筛网而得。

11、优选的，所述步骤s1中，雷公藤粉末、复合酶、水的质量比为1:0.02-0.05:3.5-4.5。

12、优选的，所述步骤s1中的酶解条件：温度为50-60℃，时间为1-2h。

13、通过采用上述技术方案，本技术在步骤s1中，采用的雷公藤粉末是选用雷公藤甲素含量较高的雷公藤根制得，且雷公藤根经过干燥、研磨、过筛制成粉末状，更加利于雷公藤甲素的提取；在步骤s1中控制了雷公藤粉末、复合酶、水的质量比，以及酶解条件，一方面使得雷公藤粉末充分酶解，另一方面能够节约原料，降低生产成本，适合工业化生产。

14、优选的，所述复合酶由质量比为3:2-5的纤维素酶与木聚糖酶复配而得。

15、通过采用上述技术方案，雷公藤甲素存在于雷公藤根的表皮之中，表皮是由致密的纤维构成，因此需要复合酶破坏雷公藤根的表皮细胞，使得雷公藤甲素能够充分释放出来；本技术的复合酶是由纤维素酶与木聚糖酶复配而得，且二者的质量比控制在一定的范围内，二者协同增效，能够有效提高雷公藤甲素的提取率，同时能够保持雷公藤甲素的生物活性。

16、优选的，所述步骤s2中的超声条件：功率为60-80w，时间为40-80min；离心条件：转速为9000-11000rpm，时间为5-10min。

17、优选的，所述步骤s2中，离子液体微乳液的质量为雷公藤粉末的2-3倍。

18、通过采用上述技术方案，本技术在步骤s1酶解后的雷公藤浆液中加入离子液体微乳液，雷公藤浆液中雷公藤甲素向离子液体微乳液中迁移，可以很好地萃取更多的雷公藤甲素成分；并利用超声波作用，协助离子液体微乳液，进一步提高雷公藤甲素的提取率。

19、优选的，所述离子液体微乳液，由以下方法制得：

20、按重量份，将40-60份离子液体、10-30份槐糖脂、4-6份正戊醇加入20-60份水中，进行均匀混合，得离子液体微乳液。

21、通过采用上述技术方案，本技术采用以离子液体作为主体，以蒸馏水作为核，同时用槐糖脂和正戊醇作为混合界面膜，构成离子液体/表面活性剂/水型离子液体微乳液，使得离子液体内部形成一个极性核，本技术采用离子液体微乳液，能够充分提取雷公藤的浆液中雷公藤甲素，而且有效减少有机溶剂的使用，降低有机溶剂带来的环境污染。

22、优选的，所述离子液体，包括以下重量份原料：26-30份1-甲基咪唑、35-40份环氧氯丙烷、40-50份甲苯、40-60份六氟磷酸钠、50-60份丙酮。

23、优选的，所述离子液体，由以下方法制得：

24、在氮气的保护下，先将1-甲基咪唑与甲苯混合均匀后，升温至60-80℃，加入环氧氯丙烷，反应5-7h后，用旋转蒸发仪去除去除甲苯，得中间体；再将中间体与六氟磷酸钠加入丙酮中，以转速1600-2000r/min搅拌反应1-2h，抽滤，将滤液真空浓缩，得离子液体。

25、通过采用上述技术方案，本技术以1-甲基咪唑、环氧氯丙烷、六氟磷酸钠为主要原料，并控制各工艺参数，制得离子液体，环氧氯丙烷的引入不仅能够提高离子液体的疏水性，使得离子液体与表面活性剂槐糖脂作用时，能够使得离子液体的内部形成较大的极性核，而且环氧氯丙烷中含有环氧结构，更加利于雷公藤甲素地迁移进入离子液体微乳液内部，使制得离子液体微乳液能够显著提高雷公藤甲素的提取率。

26、优选的，所述步骤s3中的均质条件：压强为60-80mpa，温度为50-60℃，时间为30-60min。

27、通过采用上述技术方案，本技术步骤s3中控制均质的条件，使提取液中残余的复合酶能够尽可能的完全除去，有效提高雷公藤甲素的纯度，使得雷公藤甲素的产品品质更佳。

28、优选的，所述步骤s4中溶剂的体积为透析液的0.2-1倍；所述溶剂由体积比为1-5:3的环己烷和石油醚混合而得。

29、通过采用上述技术方案，本技术以环己烷和石油醚为溶剂进行透析液中的雷公藤甲素的萃取，能够获得纯度较高的雷公藤甲素。

30、优选的，所述步骤s5中的雷公藤甲素粗品与乙酸乙酯的质量比为1:100-200。

31、优选的，所述步骤s5中的硅胶层析采用梯度洗脱，梯度洗脱规律为乙酸乙酯与二氯甲烷的体积比从1:6-10到1:1-5。

32、通过采用上述技术方案，本技术对所得雷公藤粗品进行进一步地纯化，并采用硅胶层析法，选用乙酸乙酯与二氯甲烷为洗脱剂进行梯度洗脱，有效将杂质分离，提高雷公藤甲素的纯度。

33、综上所述，本技术具有以下有益效果：

34、1.本技术的从雷公藤中提取雷公藤甲素，先采用复合酶进行酶解和离子液体微乳液从雷公藤中充分提取雷公藤甲素；再采用纳米膜和超滤膜进行除杂；最后采用溶剂萃取和硅胶层析进行纯化，获得雷公藤甲素；本技术的提取工艺操作简单安全，所得雷公藤甲素的纯度较高，且整个过程中雷公藤甲素的损失较小，雷公藤甲素的提取率也得到了相应地提高。

35、2.本技术的离子液体微乳液以离子液体、槐糖脂、正戊醇与水为原料，且离子液体由1-甲基咪唑、环氧氯丙烷、六氟磷酸钠为主要原料制得，所获得离子液体微乳液能够有效提高雷公藤甲素的提取率。