4-氨基-N-(1-((3-氯-2-氟苯基)氨基)-6-甲基异喹啉-5-基)噻吩并[3,2-D]嘧啶-7-甲酰胺的双甲磺酸盐及其中间体的合成的制作方法

本文所述的技术整体涉及4-氨基-n-(1-((3-氯-2-氟苯基)氨基)-6-甲基异喹啉-5-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-甲酰胺的双甲磺酸盐的合成、结晶和纯化。该技术更具体地涉及商业规模的合成和制备，包括某些中间体。

背景技术：

1、4-氨基-n-(1-((3-氯-2-氟苯基)氨基)-6-甲基异喹啉-5-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-甲酰胺(1)是一种有效的促分裂原活化蛋白激酶(mapk)通路抑制剂，其已经显示出对具有各种ras和raf突变的晚期实体瘤的选择性活性(参见，例如，美国专利号9,156,852)，并且当前正以各种盐形式进行针对几种治疗适应症的临床研究。

2、

3、mapk通路在控制细胞生长和增殖方面发挥着至关重要的作用，并且这种信号级联的许多不同缺陷现在被认为是许多人类癌症的最重要起源。(参见，例如，solit,d.b.等人，braf mutation predicts sensitivity to mek inhibition,nature 439,358–362(2006))raf丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶家族是mapk通路的重要组成部分，并且其a-raf、b-raf或c-raf成员中的某些突变导致信号转导失调，这已经被确定为人类癌症的常见原因。(例如，yen,i.,shanahan、f.,lee,j.等人，nature，594,418–423(2021))近年来，在选择性抑制突变raf激酶方面取得了重大进展(例如,huestis,m.p.等人.,j.med.chem.2021,64,3940-3955；和huestis,m.p.等人,acs med.chem.lett.(2021),doi:10.1021/acsmedchemlett.1c00063)，尽管作为所有三个raf成员的抑制剂(所谓的“泛-raf”抑制剂)的分子(诸如1)也变得很重要。

4、迄今为止，1已经作为双-hcl(双盐酸盐)盐1a提供给临床试验中的患者，该盐已经根据图1中的方案大规模生产。然而，双-hcl盐及其先前制造方法两者均具有明显缺点。

5、图1所示的方法以下列两者之间的亲核芳族取代(snar)反应开始：1-氯-6-甲基-5-硝基异喹啉4和3-氯-2-氟苯胺5，以得到中间体hcl盐6a。然后将6a的有机部分的硝基还原以产生异喹啉中间体7(图1)。后者然后与噻吩并嘧啶酮3进行酰胺偶联以产生倒数第二个中间体8。在这个方法中，使用pocl3作为酸活化剂和氯化试剂两者，将3的嘧啶酮部分在一锅法中转化成8中的氯嘧啶部分。在最后步骤中，将8胺化以生成粗制双盐酸盐1a，这需要使用多步重调浆方案进行广泛纯化。

6、图1的方案有许多重大限制，包括：a)在方法的几个步骤中可能形成杂质，如果在医药最终产品中以痕量存在，任何杂质均会产生问题；b)使用超化学计量量的锌来还原6a的硝基，这既昂贵又需要额外纯化以去除过量金属；c)需要多次重调浆纯化以从产生中间体8的酰胺偶联的产物中去除杂质，其结果为浪费溶剂以及总体效率低下；d)氯嘧啶中间体8容易受在后续步骤中用羟基取代氯基的水解的影响；e)大量废物产生，诸如因6a的还原而产生的过量锌；以及f)缺乏提供对双盐酸盐1a的充分形式和杂质控制的可靠结晶方法，这意味着纯化非常耗时。

7、已经提出了与图1不同的方案(参见wo2013/100632)，该方案(其利用4-氨基噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-甲酸代替噻吩并嘧啶酮3)也具有与产生双-hcl盐相关的缺点。

8、具体地，双盐酸盐形式1a的使用和产生与几个实际困难相关。首先，由于蒸发，很难在升高的温度下控制盐酸的化学计量，这意味着最终产物经常含有水解杂质(由1的氨基水解产生)。由于水解以及产物1a本身在处理时仍然能够发生歧化(成游离碱1及其单-hcl盐和二-hcl盐的混合物)，这个问题不能通过使用过量的hcl来直接解决。其次，存在与大规模使用无机酸相关联的安全问题，因为过量的酸在反应中使用后需要适当淬灭，这本身可能会在后处理过程中进行不需要的放热中和步骤；这些问题在使用hcl时尤为严重。第三，双盐酸盐1a的吸湿性使产物中水含量的控制复杂化。第四，双-hcl盐的粒度分布(psd)既难以控制，又经常导致过滤器堵塞，从而导致纯化期间过滤时间过长。因此，需要研磨盐以产生大小均匀的颗粒。

9、因此，需要一种有效的多公斤规模产生方法来供应使用治疗剂1的持续临床研究，并提供适合供应商业产品的方法。

10、将对本文背景的讨论包括在内以说明该技术的背景。这不应被视为承认所提及的任何材料截至所附权利要求中任一项的优先权日已公开、已知或属于公知常识的一部分。

11、贯穿本技术的说明书和权利要求，词语“包含(comprise)”及其变体，诸如“包含(comprising)”和“包含(comprises)”，并不旨在排除其他添加剂、组分、整体或步骤。

技术实现思路

1、本公开涉及适用于在药物组合物中压片和递送的4-氨基-n-(1-((3-氯-2-氟苯基)氨基)-6-甲基异喹啉-5-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-甲酰胺(1)，特别是其双甲磺酸(不同地表示为“2msa”、“2msa”或“2msoh”)盐形式(1b)的合成，特别是以高纯度和以商业规模的合成。

2、一种合成式1b化合物的方法(在图2中概略地示出)，

3、

4、该方法包括：使化合物4与化合物5a在溶剂诸如甲基乙基酮(mek，2-丁酮)或甲基异丁基酮(mibk)与有机碱(诸如net3)的存在下反应，以产生化合物6a；

5、

6、在氨水的存在下并利用作为溶剂的2-甲基四氢呋喃，在铂-钒催化剂上用氢将化合物6a还原，以形成化合物7；

7、

8、利用n-甲基-吡咯啶中的n,n,n',n'-四甲基氯甲脒六氟磷酸盐(tcfh)、2,6-二甲基吡啶将化合物7与化合物2偶联，随后用甲磺酸(msoh)在n-甲基-吡咯啶中的水性混合物溶解，以获得粗制形式的1b；

9、

10、以及通过用dmso中的msoh和水进行的再结晶，纯化粗制形式的1b。

11、本文中制备1b的方法能够提供纯度>99a％hplc的产物。

12、制备1b的方法进一步包括如图3所示的方法，其中化合物2通过包括将22区域选择性溴化以产生23的方法来制备；

13、

14、将23氯化以形成24；

15、

16、将24转化成受保护的化合物25；

17、

18、羰基化25以形成26；

19、

20、以及将26用酸、然后用碱去保护，随后用乙酸等酸中和，以得到化合物2。

21、制备1b的方法进一步包括如图4所示的方法，其中化合物4通过包括将5-硝基异喹啉选择性甲基化以产生42的方法来制备；

22、

23、将42氧化以产生43；

24、

25、以及将43氯化以产生4。

26、制备1b的方法进一步包括如图5所示的方法，其中化合物5a通过包括将50区域选择性氟化以产生51的方法来制备；

27、

28、以及在雷尼镍上用h2将51催化还原以产生5a，其中氟化和还原发生在同一反应容器中，而无需在每个步骤之间分离化合物51。

29、本公开进一步包括一种制备如本文进一步描述的化合物2的方法。

30、本公开进一步包括一种产生式1b化合物的方法，其包括：将式7化合物与式2化合物偶联，

31、

32、利用n-甲基吡咯啶中的2,6-二甲基吡啶和tcfh，随后在n-甲基吡咯啶中用甲磺酸洗涤，以产生粗制物1b，其需要进一步纯化和再结晶。

33、本公开进一步包括一种产生式1b化合物的方法，其包括：利用氨水中的2,6-二甲基吡啶和tcfh将式7化合物与式2化合物偶联，随后在丙酮中洗涤以产生thf和1的1:1加成物。化合物1b可以通过用在异丙醇中的甲磺酸洗涤该加成物以纯形式产生。

34、本公开进一步包括式26化合物及其制备方法。

35、

36、本公开进一步包括thf和4-氨基-n-(1-((3-氯-2-氟苯基)氨基)-6-甲基异喹啉-5-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-甲酰胺、四氢呋喃的(1:1)加成物，及其结晶形式。