本公开文本总体上涉及肿瘤学和免疫疗法领域，并且特别涉及能够表达多肽例如嵌合抗原受体(car)的重组细胞的组合物，所述多肽可以用于逻辑门控(例如，非门(not-gate))以特异性靶向和消除某些类型的细胞(例如癌细胞)，同时减轻对其他非癌细胞的“非肿瘤靶向(on-target，off-tumor)”副作用。本公开文本还提供了可用于产生此类重组细胞或多肽的组合物和方法，以及用于检测和治疗病症如疾病(例如，癌症)的方法。
背景技术：
：：1、急性髓系白血病(aml)是美国最普遍的急性白血病，每年导致11,000多人死亡，其5年总生存率低于30％(siegel等人,ca cancer j clin.2020；70(1):7-30)。分子分析加速了对aml遗传多样性的理解，并导致多种分子靶向药物的批准，包括bcl-2抑制剂(维奈妥拉)、idh1/2的表观遗传修饰剂(依那德尼、伊沃德尼)、flt3抑制剂(米哚妥林、吉特替尼)和hedgehog抑制剂(格拉吉布)(lai等人,recent drug approvals for acute myeloidleukemia.j hematol oncol.2019；12(1):100)。吉妥珠单抗奥唑米星是一种cd33定向抗体药物缀合物，是目前唯一批准用于aml的免疫疗法药物(amadori等人,gemtuzumabozogamicin versus best supportive care in older patients with newl ydiagnosed acute myeloid leukemia unsuitable for intensive chemotherapy:results of the randomized phase iii eortc-gimema aml-19trial.j clinoncol.2016；34(9):972-979；castaigne等人,effect of gemtuzumab ozogamicin onsurvival of adult pati ents with de-novo acute myeloid leukaemia(alfa-0701):arandomised,open-label,ph ase 3study.lancet.2012；379(9825):1508-1516)。尽管有这些新兴疗法，但aml患者的复发率、发病率和总体死亡率仍然很高，需要新型疗法来提高存活率并降低毒性。2、cd19 car t细胞疗法极大地拓宽了化疗难治性b-all和dlbcl患者的治疗选择(gardner等人,intent-to-treat leukemia remission by cd19 car t cells ofdefined formulation and dose in children and young adults.blood.2017；129(25):3322-3331；lee等人,t cells expressing cd19 chimeric antigen receptors foracute lymphoblastic leukaemia in children and young adults:a phase 1dose-escalation trial.lancet.2015；385(9967):517-528；maude等人,chimeric antigenreceptor t cells for sustained remissions in leukemia.n engl jmed.2014；371(16):1507-1517；locke等人,long-term safety and activity of axicabtageneciloleucel in refractory large b-cell lymphoma(zuma-1):a single-arm,multicentre,phase 1-2trial.lancet oncol.2019；20(1):31-42；schuster等人tisagenlecleucel in adult relapsed or refractory diffuse large b-celllymphoma.n engl j med.2019；380(1):45-56；porter等人,chimeric antigen receptor-modified t cells in chronic lymphoid leukemia.n engl jmed.2011；365(8):725-733；brentjens等人,cd19-targeted t cells rapidly induce molecular remissionsin adults with chemotherapy-refractory acute lymphoblastic leukemia.scitransl med.2013；5(177):177ra138；turtle等人,cd19 car-t cells of defined cd4+:cd8+composition in adult b cell all patients.j clin invest.2016；126(6):2123-2138)。这些结果已经引发了人们对开发用于其他血液系统恶性肿瘤的car t细胞的浓厚兴趣。然而，car t细胞疗法的一个主要问题是当car t细胞攻击并消除表达为car t细胞设计的相同靶抗原的非癌细胞时的“非肿瘤靶向”副作用。已鉴定的仅在癌细胞上而不在非癌细胞上表达的细胞表面抗原并不多。3、因此，仍然需要更具特异性的car t疗法以克服这些障碍，从而将这些治疗剂的范围扩展到更多的疾病和治疗更多的患者。技术实现思路1、本公开文本总体上涉及免疫治疗剂的开发，所述免疫治疗剂包括能够表达多肽(如单独或组合作为布尔逻辑非门的抑制性嵌合抗原受体(icar))的重组细胞以及含有所述细胞或所述多肽的药物组合物，所述免疫治疗剂用于治疗各种病症，如疾病(例如，癌症)。如下文更详细所述，已发现具有或不具有多种修饰的icar(例如，对其细胞内信号传导结构域(也称为胞质信号传导区)的修饰)可识别由非癌细胞(例如，正常或健康细胞)表达的靶抗原并且抑制由重组细胞(例如，t细胞)表达的其他激活性car(acar)的激活，从而减少重组细胞对非癌细胞的激活。在一些实施方案中，这些icar分子的细胞内信号传导结构域具有免疫受体酪氨酸抑制基序(itim)，其使得所述icar分子能够抑制其他激活性car(acar)分子[例如，具有免疫受体酪氨酸激活基序(itam)的那些，如cd3zeta(cd3ζ)]的激活。此外，本文所述的实验结果已经证明类似于布尔逻辑门(例如非门)的这些icar和acar分子的组合基于不同细胞上多种抗原的存在来整合信号，这将大大增加它们对表达由icar和acar分子识别的两种抗原的非癌细胞的安全性。结构域替换和突变已经用于使icar分子工程化以测试特异性和/或效力。2、在一个方面，本公开文本提供了含有表达第一嵌合抗原受体(car)多肽和第二嵌合抗原受体(car)多肽的重组细胞的组合物。在一些实施方案中，由所述组合物的重组细胞表达的第一car多肽包含：3、1a)对第一配体具有结合亲和力的第一细胞外配体结合结构域；4、1b)第一跨膜结构域；以及5、1c)第一细胞内信号传导结构域。6、在一些实施方案中，由所述组合物的重组细胞表达的第二car多肽包含：7、2a)对第二配体具有结合亲和力的第二细胞外配体结合结构域；8、2b)第二跨膜结构域；以及9、2c)第二细胞内信号传导结构域。10、在一些实施方案中，所述第一配体与所述第一细胞外配体结合结构域的结合激活所述第一car多肽，并且导致所述重组细胞的激活以抑制表达足够量的所述第一配体而不是所述第二配体的第一细胞(例如，癌细胞)生长或杀伤所述第一细胞。在一些实施方案中，所述第二配体与所述第二细胞外配体结合结构域的结合激活所述第二car多肽，并且导致所述第一car多肽的激活减少，从而降低所述重组细胞抑制表达足够量的所述第二配体的第二细胞生长或杀伤所述第二细胞的能力。在一些实施方案中，所述第二细胞表达足够量的所述第一配体和所述第二配体两者。11、在一个方面，本公开文本提供了含有表达第一嵌合抗原受体(car)多肽和第二嵌合抗原受体(car)多肽的重组细胞的组合物，其中所述第一car多肽包含：12、1a)对第一配体具有结合亲和力的第一细胞外配体结合结构域；13、1b)第一跨膜结构域；以及14、1c)第一细胞内信号传导结构域，15、其中所述第二car多肽包含：16、2a)对第二配体具有结合亲和力的第二细胞外配体结合结构域；17、2b)第二跨膜结构域；以及18、2c)第二细胞内信号传导结构域，19、其中所述第一配体与所述第一细胞外配体结合结构域的结合激活所述第一car多肽，并且导致所述重组细胞的激活以抑制表达足够量的所述第一配体而不是所述第二配体的第一癌细胞生长或杀伤所述第一癌细胞，并且20、所述第二配体与所述第二细胞外配体结合结构域的结合激活所述第二car多肽，并且导致所述第一car多肽的激活减少，从而降低所述重组细胞抑制表达足够量的所述第二配体的第二细胞生长或杀伤所述第二细胞的能力。在一些实施方案中，所述第二细胞表达足够量的所述第一配体和所述第二配体两者。21、在一些实施方案中，所述第一配体在所述第一细胞(例如，癌细胞)的细胞膜上表达。在一些实施方案中，所述第二配体在所述第二细胞的细胞膜上表达。在一些实施方案中，所述第一配体在所述第一细胞(例如，癌细胞)的细胞膜上表达，并且所述第二配体在所述第二细胞的细胞膜上表达。在一些实施方案中，所述第二配体在所述第一细胞的细胞膜上不表达或仅以不足量表达。22、在一些实施方案中，所述第一配体包括cd93或her2。其他示例性第一配体可以包括本文所述的抗原，如在癌细胞或靶向杀伤/抑制生长的细胞上特异性表达的抗原。23、示例性第二配体可以包括由不同于第一细胞(例如，癌细胞)的第二细胞(例如，非癌细胞)表达的抗原。如在非限制性例子中，本文所述的非门car t系统(例如，表达激活性car(acar)和抑制性car(icar)构建体的细胞)可以区分表达第一抗原作为所述acar构建体的结合配体的第一细胞与表达第二抗原作为所述icar构建体的结合配体的第二细胞。因此，表达这种非门系统的t细胞可以被激活，并且杀伤所述第一细胞(例如，癌细胞)或抑制其生长，而不是第二细胞(例如，非癌细胞)，这是由于在与所述第二抗原/配体结合后icar对t细胞激活产生抑制。在一些实施方案中，所述第二抗原不由所述第一细胞(例如，癌细胞)表达，或仅以低水平表达(例如，不足以结合和激活所述抑制性car构建体以抑制激活性car构建体的激活以及从而t细胞的激活)。24、在一些实施方案中，所述第一细胞外配体结合结构域和所述第二细胞外配体结合结构域中的至少一个包含以下各项的配体结合结构域：抗体、抗原结合片段、抗体模拟物或受体。在一些实施方案中，所述抗体或所述抗原结合片段选自单克隆抗体、抗原结合片段(fab)、纳米抗体、双抗体、三抗体、微型抗体、f(ab')2片段、f(ab)v片段、单链可变片段(scfv)、单结构域抗体(sdab)、vh结构域、vl结构域、fv片段、vnar结构域和vhh结构域。25、在一些实施方案中，所述第一细胞外配体结合结构域包含能够结合cd93的抗体、抗原结合片段或抗体模拟物。在一些实施方案中，所述第一细胞外配体结合结构域包含在vh框架中含有cdr h1、cdr h2和cdr h3序列的可变重(vh)结构域。在一些实施方案中，所述cdr h1、cdr h2和cdr h3序列中的至少一个包含与seq id no:3、4或5具有至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述可变重(vh)结构域包含与seq id no:1或2具有至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述第一细胞外配体结合结构域还包含在vl框架中含有cdr l1、cdr l2和cdr l3序列的可变轻(vl)结构域。在一些实施方案中，所述cdrl1、cdr l2和cdr l3序列中的至少一个包含与seq id no:8、9或10具有至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述可变轻(vl)结构域包含与seq id no:6或7具有至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同一性的氨基酸序列。26、在一些实施方案中，所述vh和所述vl结构域通过接头(如肽接头)缀合。示例性接头可以在chen等人,fusion protein linkers:property,design and functionality.advdrug deliv rev.2013年10月；65(10):1357-69中找到，通过引用其整体明确地并入本文。在一些实施方案中，所述接头包括(g4s)n接头。可以优化这种gs接头的长度(“n”)以实现功能结构域的适当分离，或维持必要的结构域间相互作用。在一些实施方案中，所述接头含有(g4s)3接头。27、在一些实施方案中，所述第一细胞外配体结合结构域包含与seq id no:12-15中任一个具有至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同一性的氨基酸序列。28、在一些实施方案中，所述第一跨膜结构域和所述第二跨膜结构域中的至少一个包含cd8或cd28跨膜(tm)结构域或源自cd8或cd28 tm结构域的跨膜结构域。其他示例性tm结构域可以包括熟练技术人员已知的和/或本文所述的那些。29、在一些实施方案中，所述第一细胞内信号传导结构域包含cd3ζ的或源自cd3ζ的细胞内信号传导结构域。30、在一些实施方案中，所述第二细胞内信号传导结构域包含免疫受体酪氨酸抑制基序(itim)或itim样结构域。31、在一些实施方案中，所述第二细胞内信号传导结构域包含以下各项的或源自以下各项的细胞内信号传导结构域：pd-1、ctla-4、lair1(lir-1)、tigit、sig 2、sig5、sig 6、sig 10、btla、lag3、cd300a或sirpα。32、在一些实施方案中，所述第一car多肽和所述第二car多肽中的至少一种还包含铰链结构域和/或共刺激结构域。在一些实施方案中，所述铰链结构域是或源自igg4铰链结构域、cd28铰链结构域或cd8铰链结构域。其他示例性铰链结构域和/或共刺激结构域可以包括熟练技术人员已知的和/或本文所述的那些。33、在一些实施方案中，本文所述的第一癌细胞源自选自以下各项的癌症：急性髓系白血病(aml)、骨髓增生异常综合征、骨髓增殖性肿瘤和具有mll重排的急性髓系白血病。在一些实施方案中，所述癌症是急性髓系白血病(aml)。34、在一些实施方案中，本文所述的第二细胞是非癌细胞。在一些实施方案中，所述非癌细胞是内皮细胞。35、在一些实施方案中，本文所述的重组细胞是免疫细胞。在一些实施方案中，所述免疫细胞是t细胞、肿瘤浸润淋巴细胞(til)、自然杀伤(nk)细胞、巨噬细胞、单核细胞、γδt细胞、干细胞、自然杀伤t(nkt)细胞、诱导多能干细胞(ipsc)源性nk细胞或诱导多能干细胞(ipsc)源性t细胞。36、在一些实施方案中，响应于所述第一抗原的所述第一car多肽的激活增强所述重组细胞的细胞增殖、分化、细胞因子产生和/或细胞毒性。37、在一些实施方案中，响应于所述第二抗原的所述第二car多肽的激活减少所述重组细胞的细胞增殖、分化、细胞因子产生和/或细胞毒性。38、在一些实施方案中，本文所述的组合物能够：39、i)抑制所述第一癌细胞生长和/或杀伤所述第一癌细胞，而不是所述第二细胞；和/或40、ii)治疗有需要的受试者的癌症。41、在另一个方面，本说明书提供了组合物，其含有能够减少激活性嵌合抗原受体(acar)多肽的激活的抑制性嵌合抗原受体(icar)多肽。在一些实施方案中，所述acar多肽包含：42、1a)对第一配体具有结合亲和力的第一细胞外配体结合结构域；43、1b)第一跨膜结构域；以及44、1c)第一细胞内信号传导结构域。45、在一些实施方案中，所述icar多肽包含：46、2a)对第二配体具有结合亲和力的第二细胞外配体结合结构域；47、2b)第二跨膜结构域；以及48、2c)第二细胞内信号传导结构域。49、在另一个方面，本说明书提供了组合物，其含有能够减少激活性嵌合抗原受体(acar)多肽的激活的抑制性嵌合抗原受体(icar)多肽，50、其中所述acar多肽包含：51、1a)对第一配体具有结合亲和力的第一细胞外配体结合结构域；52、1b)第一跨膜结构域；以及53、1c)第一细胞内信号传导结构域，54、其中所述icar多肽包含：55、2a)对第二配体具有结合亲和力的第二细胞外配体结合结构域；56、2b)第二跨膜结构域；以及57、2c)第二细胞内信号传导结构域，58、其中所述第一配体与所述第一细胞外配体结合结构域的结合激活所述acar多肽，并且导致表达所述acar多肽和所述icar多肽两者的重组细胞的激活，以抑制表达足够量的所述第一配体而不是所述第二配体的第一癌细胞生长或杀伤所述第一癌细胞，并且其中所述第二配体与所述第二细胞外配体结合结构域的结合激活所述icar多肽，并且导致所述acar多肽的激活减少，从而降低所述重组细胞抑制表达足够量的所述第二配体的第二细胞生长或杀伤所述第二细胞的能力。在一些实施方案中，所述第二细胞表达足够量的所述第一和所述第二配体两者。59、在一些实施方案中，所述第一配体在所述第一细胞(例如，癌细胞)的细胞膜上表达。在一些实施方案中，所述第二配体在所述第二细胞的细胞膜上表达。在一些实施方案中，所述第一配体在所述第一细胞(例如，癌细胞)的细胞膜上表达，并且所述第二配体在所述第二细胞的细胞膜上表达。在一些实施方案中，所述第二配体在所述第一细胞的细胞膜上不表达或仅以不足量表达。60、在一些实施方案中，所述第一配体包括cd93或her2。其他示例性第一配体可以包括本文所述或熟练技术人员已知的抗原，如在癌细胞或靶向杀伤/抑制生长的细胞上特异性表达的抗原。61、示例性第二配体可以包括由不同于第一细胞(例如，癌细胞)的第二细胞(例如，非癌细胞)表达的抗原。如在非限制性例子中，本文所述的非门car t系统(例如，表达激活性car(acar)和抑制性car(icar)构建体的细胞)可以区分表达第一抗原作为所述acar构建体的结合配体的第一细胞与表达第二抗原作为所述icar构建体的结合配体的第二细胞。因此，表达这种非门系统的t细胞可以被激活，并且杀伤所述第一细胞(例如，癌细胞)或抑制其生长，而不是第二细胞(例如，非癌细胞)，这是由于在与所述第二抗原/配体结合后icar对t细胞激活产生抑制。在一些实施方案中，所述第二抗原不由所述第一细胞(例如，癌细胞)表达，或仅以低水平表达(例如，不足以结合和激活所述抑制性car构建体以抑制激活性car构建体的激活以及从而t细胞的激活)。62、在一些实施方案中，所述第一细胞外配体结合结构域和所述第二细胞外配体结合结构域中的至少一个包含以下各项的配体结合结构域：抗体、抗原结合片段、抗体模拟物或受体。63、在一些实施方案中，所述抗体或所述抗原结合片段选自单克隆抗体、抗原结合片段(fab)、纳米抗体、双抗体、三抗体、微型抗体、f(ab')2片段、f(ab)v片段、单链可变片段(scfv)、单结构域抗体(sdab)、vh结构域、vl结构域、fv片段、vnar结构域和vhh结构域。64、在一些实施方案中，所述第一细胞外配体结合结构域包含能够结合cd93的抗体、抗原结合片段或抗体模拟物。在一些实施方案中，所述第一细胞外配体结合结构域包含在vh框架中含有cdr h1、cdr h2和cdr h3序列的可变重(vh)结构域。65、在一些实施方案中，所述cdr h1、cdr h2和cdr h3序列中的至少一个包含与seqid no:3、4或5具有至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述可变重(vh)结构域包含与seq id no:1或2具有至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同一性的氨基酸序列。66、在一些实施方案中，所述第一细胞外配体结合结构域还包含在vl框架中含有cdrl1、cdr l2和cdr l3序列的可变轻(vl)结构域。在一些实施方案中，所述cdr l1、cdr l2和cdr l3序列中的至少一个包含与seq id no:8、9或10具有至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述可变轻(vl)结构域包含与seq id no:6或7具有至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同一性的氨基酸序列。67、在一些实施方案中，所述vh和所述vl结构域通过接头(如肽接头)缀合。示例性接头可以在chen等人,fusion protein linkers:property,design and functionality.advdrug deliv rev.2013年10月；65(10):1357-69中找到，通过引用其整体明确地并入本文。在一些实施方案中，所述接头包括(g4s)n接头。可以优化这种gs接头的长度(“n”)以实现功能结构域的适当分离，或维持必要的结构域间相互作用。在一些实施方案中，所述接头含有(g4s)3接头。68、在一些实施方案中，所述第一细胞外配体结合结构域包含与seq id no:12-15中任一个具有至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同一性的氨基酸序列。69、在一些实施方案中，所述第一跨膜结构域和所述第二跨膜结构域中的至少一个包含cd8或cd28跨膜(tm)结构域或源自cd8或cd28 tm结构域的tm结构域。其他示例性tm结构域可以包括熟练技术人员已知的和/或本文所述的那些。70、在一些实施方案中，所述第一细胞内信号传导结构域包含cd3ζ的或源自cd3ζ的细胞内信号传导结构域。71、在一些实施方案中，所述第二细胞内信号传导结构域包含免疫受体酪氨酸抑制基序(itim)或itim样结构域。72、在一些实施方案中，所述第二细胞内信号传导结构域包含以下各项的或源自以下各项的细胞内信号传导结构域：pd-1、ctla-4、lair1(lir-1)、tigit、sig 2、sig5、sig 6、sig 10、btla、lag3、cd300a或sirpα。73、在一些实施方案中，所述acar多肽和所述icar多肽中的至少一种还包含铰链结构域和/或共刺激结构域。在一些实施方案中，所述铰链结构域是或源自igg4铰链结构域、cd28铰链结构域或cd8铰链结构域。其他示例性铰链结构域和/或共刺激结构域可以包括熟练技术人员已知的和/或本文所述的那些。74、在一些实施方案中，所述第一癌细胞源自选自以下各项的癌症：急性髓系白血病(aml)、骨髓增生异常综合征、骨髓增殖性肿瘤或具有mll重排的急性髓系白血病。在一些实施方案中，所述癌症是急性髓系白血病(aml)。75、在一些实施方案中，所述第二细胞是非癌细胞。在一些实施方案中，所述非癌细胞是内皮细胞。76、在一些实施方案中，所述重组细胞是免疫细胞。在一些实施方案中，所述免疫细胞是t细胞、肿瘤浸润淋巴细胞(til)、自然杀伤(nk)细胞、巨噬细胞、单核细胞、γδt细胞、干细胞、自然杀伤t(nkt)细胞、诱导多能干细胞(ipsc)源性nk细胞或诱导多能干细胞(ipsc)源性t细胞。77、在一些实施方案中，响应于所述第一抗原的所述acar多肽的激活增强所述重组细胞的细胞增殖、分化、细胞因子产生和/或细胞毒性。78、在一些实施方案中，响应于所述第二抗原的所述icar多肽的激活减少所述重组细胞的细胞增殖、分化、细胞因子产生和/或细胞毒性。79、在一些实施方案中，本文所述的组合物能够：80、i)抑制所述第一癌细胞生长和/或杀伤所述第一癌细胞，而不是所述第二细胞；和/或81、ii)治疗有需要的受试者的癌症。82、在另一个方面，本公开文本提供了含有激活性嵌合抗原受体(acar)多肽和抑制性嵌合抗原受体(icar)多肽的系统。在一些实施方案中，所述系统中的acar多肽包含：83、1a)对第一配体具有结合亲和力的第一细胞外配体结合结构域；84、1b)第一跨膜结构域；以及85、1c)第一细胞内信号传导结构域。86、在一些实施方案中，所述系统中的icar多肽包含：87、2a)对第二配体具有结合亲和力的第二细胞外配体结合结构域；88、2b)第二跨膜结构域；以及89、2c)第二细胞内信号传导结构域。90、在一些实施方案中，所述第一配体与所述第一细胞外配体结合结构域的结合激活所述acar多肽，并且导致表达所述acar多肽和所述icar多肽两者的重组细胞的激活，以抑制表达足够量的所述第一配体而不是所述第二配体的第一癌细胞生长或杀伤所述第一癌细胞。在一些实施方案中，所述第二配体与所述第二细胞外配体结合结构域的结合激活所述icar多肽，并且导致所述acar多肽的激活减少，从而降低所述重组细胞抑制表达足够量的所述第二配体的第二细胞生长或杀伤所述第二细胞的能力。在一些实施方案中，所述第二细胞表达足够量的所述第一和所述第二配体两者。91、在另一个方面，本公开文本提供了含有激活性嵌合抗原受体(acar)多肽和抑制性嵌合抗原受体(icar)多肽的系统，其中所述acar多肽包含：92、1a)对第一配体具有结合亲和力的第一细胞外配体结合结构域；93、1b)第一跨膜结构域；以及94、1c)第一细胞内信号传导结构域，95、其中所述icar多肽包含：96、2a)对第二配体具有结合亲和力的第二细胞外配体结合结构域；97、2b)第二跨膜结构域；以及98、2c)第二细胞内信号传导结构域，99、其中所述第一配体与所述第一细胞外配体结合结构域的结合激活所述acar多肽，并且导致表达所述acar多肽和所述icar多肽两者的重组细胞的激活，以抑制表达足够量的所述第一配体而不是所述第二配体的第一癌细胞生长或杀伤所述第一癌细胞，并且其中所述第二配体与所述第二细胞外配体结合结构域的结合激活所述icar多肽，并且导致所述acar多肽的激活减少，从而降低所述重组细胞抑制表达足够量的所述第二配体的第二细胞生长或杀伤所述第二细胞的能力。在一些实施方案中，所述第二细胞表达足够量的所述第一和所述第二配体两者。100、在另一个方面，本公开文本提供了含有编码本文所述的icar多肽的多核苷酸的组合物。101、在另一个方面，本公开文本提供了含有编码如本文所述的acar多肽的第一多核苷酸和编码如本文所述的icar多肽的第二多核苷酸的组合物。102、在另一个方面，本公开文本提供了含有表达载体的组合物，所述表达载体含有编码本文所述的icar多肽的多核苷酸。103、在另一个方面，本公开文本提供了含有第一表达载体和第二表达载体的组合物，所述第一表达载体含有编码本文所述的acar多肽的第一多核苷酸，并且所述第二表达载体表达编码本文所述的icar多肽的第二多核苷酸。104、在另一个方面，本公开提供了含有表达载体的组合物，所述表达载体含有编码本文所述的acar多肽的第一多核苷酸和编码本文所述的icar多肽的第二多核苷酸。105、在另一个方面，本公开文本提供了用于在细胞中产生如本文所述的重组细胞或一种或多种car多肽的方法，所述方法包括将编码所述一种或多种car多肽的多核苷酸引入所述细胞中，以及在一定条件下诱导所述一种或多种car多肽的表达。106、在另一个方面，本公开文本提供了用于选择性激活本文所述的重组细胞的方法，所述方法包括使所述重组细胞与所述第一配体而不与所述第二配体接触。107、在另一个方面，本公开文本提供了用于选择性抑制癌细胞生长和/或杀伤癌细胞的方法，所述方法包括使本文所述的重组细胞与所述癌细胞接触，其中所述癌细胞表达足够量的所述第一配体而不是所述第二配体。108、在另一个方面，本公开文本提供了用于选择性抑制第一癌细胞生长和/或杀伤所述第一癌细胞而不是第二细胞的方法，所述方法包括包含使本文所述的重组细胞与所述第一癌细胞和所述第二细胞接触，其中所述第一癌细胞表达足够量的所述第一配体而不是所述第二配体，并且所述第二细胞表达足够量的所述第二配体。在一些实施方案中，所述第二细胞表达足够量的所述第一配体和所述第二配体两者。109、在另一个方面，本公开文本提供了治疗有需要的受试者的癌症的方法，所述方法包括向所述受试者施用药学有效量的本文所述的重组细胞，其中所述第一癌细胞来源于所述癌症。110、前述技术实现要素：仅是说明性的，并不旨在以任何方式进行限制。除了本文描述的说明性实施方案和特征之外，根据附图、具体实施方式和权利要求，本公开文本的其他方面、实施方案、目的和特征可以变得完全清楚。111、除非明确地或清楚地从实施方案或方面的上下文中排除，否则本文所述的方面和实施方案中的每一个能够一起使用。112、在整个本说明书中，引用了各种专利、专利申请和其他类型的出版物(例如，期刊文章、电子数据库条目等)。本文引用的所有专利、专利申请和其他出版物的披露内容出于所有目的特此通过引用以其整体并入。当前第1页12当前第1页12