环状脂质及其使用方法与流程

本公开涉及用于递送核酸序列、多肽或肽的优化系统和使用这些优化系统来治疗疾病、病症和/或疾患的方法。

背景技术：

0、发明背景

1、蛋白质一直是治疗学的标准，但在过去几年中，使用核酸作为针对多种疾病和治疗适应症的治疗模态已越来越突出。多个公司已表明，当相较于基于蛋白质的疗法时，核酸(例如sirna、mrna、环状rna、dna、aso等)可能更有效，但对于核酸和蛋白质治疗剂两者都需要靶向递送系统以确保所述治疗剂定位于所靶向的细胞、组织或器官。

2、目前递送系统，包括基于脂质的递送系统如脂质纳米粒子，聚焦于保护所递送的货物(cargo)，但未聚焦于递送系统正使用的脂质，并且通常未聚焦于货物或递送系统的定位递送。本领域中需要改进的基于脂质的递送系统。

技术实现思路

1、本公开提供了可用于递送系统的递送媒介物中的新型脂质以及用于筛选和开发靶向系统以用于将核酸和蛋白质治疗剂定位递送例如至免疫细胞的向性探索平台。

2、在本公开的一个方面，本文提供了一种具有式(cy)、(cy-i)至(cy-ix)中的任一者的脂质或其药学上可接受的盐或溶剂化物，或表(i)中的任何脂质或其盐或溶剂化物，参见下文，统称为“本公开的脂质”并且各自个别地称为“本公开的脂质”。

3、在本公开的一个方面，本文提供了一种药物组合物，其包含：

4、a)编码至少一种所关注蛋白质的多核苷酸，和

5、b)包含至少一种脂质的递送媒介物

6、其中所述组合物引发受试者的免疫反应。

7、在一个方面，所述多核苷酸为dna。

8、在一个方面，所述多核苷酸为rna。

9、在一个方面，所述rna为短干扰rna(sirna)。

10、在一个方面，所述sirna抑制或抑止细胞中所关注目标的表达。

11、在一个方面，所述抑制或抑止为约30％、40％、50％、60％、70％、80％、85％、90％、95％和100％，或至少20-30％、20-40％、20-50％、20-60％、20-70％、20-80％、20-90％、20-95％、20-100％、30-40％、30-50％、30-60％、30-70％、30-80％、30-90％、30-95％、30-100％、40-50％、40-60％、40-70％、40-80％、40-90％、40-95％、40-100％、50-60％、50-70％、50-80％、50-90％、50-95％、50-100％、60-70％、60-80％、60-90％、60-95％、60-100％、70-80％、70-90％、70-95％、70-100％、80-90％、80-95％、80-100％、90-95％、90-100％或95-100％。

12、在一个方面，所述多核苷酸为基本上环状的。

13、在一个方面，多核苷酸包含可操作地连接至有效负载序列区的内部核糖体进入位点(ires)序列。

14、在一个方面，所述ires序列包含源自微小核糖核酸病毒互补dna、脑心肌炎病毒(emcv)互补dna、脊髓灰质炎病毒互补dna或来自黑腹果蝇(drosophila melanogaster)的触角足基因的序列。

15、在一个方面，所述多核苷酸包含终止元件，其中所述终止元件包含至少一个终止密码子。

16、在一个方面，所述多核苷酸包含调节元件。

17、在一个方面，所述多核苷酸包含至少一个遮蔽剂。

18、在一个方面，使用体外转录产生基本上环状多核苷酸。

19、在一个方面，所述有效负载序列区包含非编码核酸序列。

20、在一个方面，所述有效负载序列区包含编码核酸序列。

21、在一个方面，所述编码核酸序列编码空肠弯曲菌(campylobacter jejuni)的所关注蛋白质。在一个方面，所述编码核酸序列编码艰难梭菌(clostridium difficile)的所关注蛋白质。在一个方面，所述编码核酸序列编码溶组织内阿米巴(entamoeba histolytica)的所关注蛋白质。在一个方面，所述编码核酸序列编码肠毒素b的所关注蛋白质。在一个方面，所述编码核酸序列编码诺沃克病毒(norwalk virus)或诺罗病毒(norovirus)的所关注蛋白质。在一个方面，所述编码核酸序列编码幽门螺旋杆菌(helicobacter pylori)的所关注蛋白质。在一个方面，所述编码核酸序列编码轮状病毒(rotavirus)的所关注蛋白质。在一个方面，所述编码核酸序列编码念珠菌属酵母(candida yeast)的所关注蛋白质。在一个方面，所述编码核酸序列编码冠状病毒(coronavirus)的所关注蛋白质。在一个方面，所述编码核酸序列编码sars-cov的所关注蛋白质。在一个方面，所述编码核酸序列编码sars-cov-2的所关注蛋白质。在一个方面，所述编码核酸序列编码mers-cov的所关注蛋白质。在一个方面，所述编码核酸序列编码肠病毒71的所关注蛋白质。在一个方面，所述编码核酸序列编码爱泼斯坦-巴尔病毒(epstein-barr virus)的所关注蛋白质。在一个方面，所述编码核酸序列编码革兰氏阴性细菌的所关注蛋白质。在一个方面，所述革兰氏阴性细菌为博德氏杆菌(bordetella)。在一个方面，所述编码核酸序列编码革兰氏阳性细菌的所关注蛋白质。在一个方面，所述革兰氏阳性细菌为破伤风梭菌(clostridium tetani)。在一个方面，所述革兰氏阳性细菌为土拉弗朗西斯菌(francisella tularensis)。在一个方面，所述革兰氏阳性细菌为链球菌属(streptococcus)细菌。在一个方面，所述革兰氏阳性细菌为葡萄球菌属(staphylococcus)细菌。在一个方面，所述编码核酸序列编码肝炎的所关注蛋白质。在一个方面，所述编码核酸序列编码人类巨细胞病毒(human cytomegalovirus)的所关注蛋白质。在一个方面，所述编码核酸序列编码人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiencyvirus)的所关注蛋白质。在一个方面，所述编码核酸序列编码人类乳头状瘤病毒(humanpapilloma virus)的所关注蛋白质。在一个方面，所述编码核酸序列编码流感病毒的所关注蛋白质。在一个方面，所述编码核酸序列编码jc病毒(john cunningham virus)的所关注蛋白质。在一个方面，所述编码核酸序列编码分支杆菌(mycobacterium)的所关注蛋白质。在一个方面，所述编码核酸序列编码痘病毒(poxviruses)的所关注蛋白质。在一个方面，所述编码核酸序列编码铜绿假单胞菌(pseudomonas aeruginosa)的所关注蛋白质。在一个方面，所述编码核酸序列编码呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus)的所关注蛋白质。在一个方面，所述编码核酸序列编码风疹病毒(rubella virus)的所关注蛋白质。在一个方面，所述编码核酸序列编码水痘带状疱疹病毒(varicella zoster virus)的所关注蛋白质。在一个方面，所述编码核酸序列编码基孔肯雅病毒(chikungunya virus)的所关注蛋白质。在一个方面，所述编码核酸序列编码登革热病毒(dengue virus)的所关注蛋白质。在一个方面，所述编码核酸序列编码狂犬病病毒(rabies virus)的所关注蛋白质。在一个方面，所述编码核酸序列编码克氏锥虫(trypanosoma cruzi)和/或恰加斯病(chagasdisease)的所关注蛋白质。在一个方面，所述编码核酸序列编码埃博拉病毒(ebola virus)的所关注蛋白质。在一个方面，所述编码核酸序列编码恶性疟原虫(plasmodiumfalciparum)的所关注蛋白质。在一个方面，所述编码核酸序列编码马尔堡病毒(marburgvirus)的所关注蛋白质。在一个方面，所述编码核酸序列编码日本脑炎病毒(japaneseencephalitis virus)的所关注蛋白质。在一个方面，所述编码核酸序列编码圣路易斯脑炎病毒(st.louis encephalitis virus)的所关注蛋白质。在一个方面，所述编码核酸序列编码西尼罗河病毒(west nile virus)的所关注蛋白质。在一个方面，所述编码核酸序列编码黄热病病毒(yellow fever virus)的所关注蛋白质。在一个方面，所述编码核酸序列编码炭疽芽孢杆菌(bacillus anthracis)的所关注蛋白质。在一个方面，所述编码核酸序列编码肉毒杆菌毒素(botulinum toxin)的所关注蛋白质。在一个方面，所述编码核酸序列编码蓖麻毒素(ricin)的所关注蛋白质。在一个方面，所述编码核酸序列编码志贺毒素(shigatoxin)和/或志贺样毒素的所关注蛋白质。

22、在一个方面，所述多核苷酸包含至少一个修饰。

23、在一个方面，至少20％的碱基经修饰。在一个方面，至少30％的碱基经修饰。在一个方面，至少40％的碱基经修饰。在一个方面，至少50％的碱基经修饰。在一个方面，至少60％的碱基经修饰。在一个方面，至少70％的碱基经修饰。在一个方面，至少80％的碱基经修饰。在一个方面，其中至少90％的碱基经修饰。在一个方面，至少100％的碱基经修饰。在一个方面，特定碱基包含至少一个修饰。

24、在一个方面，所述碱基为腺嘌呤。在一个方面，至少20％的腺嘌呤碱基经修饰。在一个方面，至少30％的腺嘌呤碱基经修饰。在一个方面，至少40％的腺嘌呤碱基经修饰。在一个方面，至少50％的腺嘌呤碱基经修饰。在一个方面，至少60％的腺嘌呤碱基经修饰。在一个方面，至少70％的腺嘌呤碱基经修饰。在一个方面，至少80％的腺嘌呤碱基经修饰。在一个方面，至少90％的腺嘌呤碱基经修饰。在一个方面，至少100％的腺嘌呤碱基经修饰。

25、在一个方面，所述碱基为鸟嘌呤。在一个方面，至少20％的鸟嘌呤碱基经修饰。在一个方面，至少30％的鸟嘌呤碱基经修饰。在一个方面，至少40％的鸟嘌呤碱基经修饰。在一个方面，至少50％的鸟嘌呤碱基经修饰。在一个方面，至少60％的鸟嘌呤碱基经修饰。在一个方面，至少70％的鸟嘌呤碱基经修饰。在一个方面，至少80％的鸟嘌呤碱基经修饰。在一个方面，至少90％的鸟嘌呤碱基经修饰。在一个方面，至少100％的鸟嘌呤碱基经修饰。

26、在一个方面，所述碱基为胞嘧啶。在一个方面，至少20％的胞嘧啶碱基经修饰。在一个方面，至少30％的胞嘧啶碱基经修饰。在一个方面，至少40％的胞嘧啶碱基经修饰。在一个方面，至少50％的胞嘧啶碱基经修饰。在一个方面，至少60％的胞嘧啶碱基经修饰。在一个方面，至少70％的胞嘧啶碱基经修饰。在一个方面，至少80％的胞嘧啶碱基经修饰。在一个方面，至少90％的胞嘧啶碱基经修饰。在一个方面，至少100％的胞嘧啶碱基经修饰。

27、在一个方面，所述碱基为尿嘧啶。在一个方面，至少20％的尿嘧啶碱基经修饰。在一个方面，至少30％的尿嘧啶碱基经修饰。在一个方面，至少40％的尿嘧啶碱基经修饰。在一个方面，至少50％的尿嘧啶碱基经修饰。在一个方面，至少60％的尿嘧啶碱基经修饰。在一个方面，至少70％的尿嘧啶碱基经修饰。在一个方面，至少80％的尿嘧啶碱基经修饰。在一个方面，至少90％的尿嘧啶碱基经修饰。在一个方面，至少100％的尿嘧啶碱基经修饰。

28、在一个方面，所述至少一个修饰为吡啶-4-酮核糖核苷、5-氮杂-尿苷、2-硫代-5-氮杂-尿苷、2-硫代尿苷、4-硫代-假尿苷、2-硫代-假尿苷、5-羟基尿苷、3-甲基尿苷、5-羧甲基-尿苷、1-羧甲基-假尿苷、5-丙炔基-尿苷、1-丙炔基-假尿苷、5-牛磺酸甲基尿苷、1-牛磺酸甲基-假尿苷、5-牛磺酸甲基-2-硫代-尿苷、1-牛磺酸甲基-4-硫代-尿苷、5-甲基-尿苷、1-甲基-假尿苷、4-硫代-1-甲基-假尿苷、2-硫代-1-甲基-假尿苷、1-甲基-1-脱氮-假尿苷、2-硫代-1-甲基-1-脱氮-假尿苷、二氢尿苷、二氢假尿苷、2-硫代-二氢尿苷、2-硫代-二氢假尿苷、2-甲氧基尿苷、2-甲氧基-4-硫代-尿苷、4-甲氧基-假尿苷、和4-甲氧基-2-硫代-假尿苷、5-氮杂-胞苷、假异胞苷、3-甲基-胞苷、n4-乙酰基胞苷、5-甲酰基胞苷、n4-甲基胞苷、5-羟甲基胞苷、1-甲基-假异胞苷、吡咯并-胞苷、吡咯并-假异胞苷、2-硫代-胞苷、2-硫代-5-甲基-胞苷、4-硫代-假异胞苷、4-硫代-1-甲基-假异胞苷、4-硫代-1-甲基-1-脱氮-假异胞苷、1-甲基-1-脱氮-假异胞苷、泽布拉林(zebularine)、5-氮杂-泽布拉林、5-甲基-泽布拉林、5-氮杂-2-硫代-泽布拉林、2-硫代-泽布拉林、2-甲氧基-胞苷、2-甲氧基-5-甲基-胞苷、4-甲氧基-假异胞苷、和4-甲氧基-1-甲基-假异胞苷、2-氨基嘌呤、2,6-二氨基嘌呤、7-脱氮-腺嘌呤、7-脱氮-8-氮杂-腺嘌呤、7-脱氮-2-氨基嘌呤、7-脱氮-8-氮杂-2-氨基嘌呤、7-脱氮-2,6-二氨基嘌呤、7-脱氮-8-氮杂-2,6-二氨基嘌呤、1-甲基腺苷、n6-甲基腺苷、n6-异戊烯基腺苷、n6-(顺式-羟基异戊烯基)腺苷、2-甲基硫代-n6-(顺式-羟基异戊烯基)腺苷、n6-甘氨酰基氨甲酰基腺苷、n6-苏氨酰基氨甲酰基腺苷、2-甲基硫代-n6-苏氨酰基氨甲酰基腺苷、n6,n6-二甲基腺苷、7-甲基腺嘌呤、2-甲基硫代-腺嘌呤、和2-甲氧基-腺嘌呤、肌苷、1-甲基-肌苷、怀俄苷(wyosine)、怀俄丁苷(wybutosine)、7-脱氮-鸟苷、7-脱氮-8-氮杂-鸟苷、6-硫代-鸟苷、6-硫代-7-脱氮-鸟苷、6-硫代-7-脱氮-8-氮杂-鸟苷、7-甲基-鸟苷、6-硫代-7-甲基-鸟苷、7-甲基肌苷、6-甲氧基-鸟苷、1-甲基鸟苷、n2-甲基鸟苷、n2,n2-二甲基鸟苷、8-氧代-鸟苷、7-甲基-8-氧代-鸟苷、1-甲基-6-硫代-鸟苷、n2-甲基-6-硫代-鸟苷或n2,n2-二甲基-6-硫代-鸟苷。

29、在一个方面，所述药物组合物包含至少一种选自由以下组成的组的阳离子脂质：表(i)中的任何脂质、具有式(cy-i)的结构的任何脂质、具有式(cy-ii)的结构的任何脂质、具有式(cy-iii)的结构的任何脂质、具有式(cy-iv)的结构的任何脂质、具有式(cy-v)的结构的任何脂质、具有式(cy-vi)的结构的任何脂质，和其组合。

30、在一个方面，所述阳离子脂质是具有式(cy-i)的结构的任何脂质。

31、在一个方面，所述阳离子脂质选自由化合物cy1、cy2、cy3、cy9、cy10、cy11、cy12、cy22、cy23、cy24、cy30、cy31、cy32、cy33、cy43、cy44、cy45、cy50、cy51、cy52和cy53组成的组。

32、在一个方面，所述阳离子脂质是具有式(cy-ii)的结构的任何脂质。

33、在一个方面，所述阳离子脂质选自由化合物cy4、cy5、cy16、cy17、cy18、cy25、cy26、cy37、cy38、cy39、cy46、cy56和cy57组成的组。

34、在一个方面，所述阳离子脂质是具有式(cy-iii)的结构的任何脂质。

35、在一个方面，所述阳离子脂质选自由化合物cy6、cy14、cy27、cy35、cy47和cy55组成的组。

36、在一个方面，所述阳离子脂质是具有式(cy-iv)的结构的任何脂质。

37、在一个方面，所述阳离子脂质选自由化合物cy7、cy8、cy19、cy20、cy21、cy28、cy29、cy40、cy41、cy42、cy48、cy49、cy58、cy59和cy60组成的组。

38、在一个方面，所述阳离子脂质是具有式(cy-v)的结构的任何脂质。

39、在一个方面，所述阳离子脂质是具有式(cy-vi)的结构的任何脂质。

40、在一个方面，所述药物组合物包含额外阳离子脂质。

41、在一个方面，所述药物组合物包含中性脂质。

42、在一个方面，所述药物组合物包含阴离子脂质。

43、在一个方面，所述药物组合物包含辅助脂质。

44、在一个方面，所述药物组合物包含隐形脂质。

45、在一个方面，所述脂质与所述多核苷酸的重量比为约100:1至约1:1。

46、在一个方面，所述药物组合物将货物或有效负载递送至有需要的受试者的免疫细胞中。所述免疫细胞可为t细胞，例如cd8+t细胞、cd4+t细胞或t调节细胞。所述免疫细胞也可为例如巨噬细胞或树突状细胞。

47、在一个方面，疫苗制剂包含药物组合物。

48、在一个方面，疫苗是用式(i)-(vi)中任一者制备。

49、在一个方面，本文提供了一种针对传染原对受试者进行疫苗接种的方法，所述方法包括使受试者与疫苗制剂或制剂接触以及引发免疫反应。

50、在一个方面，所述传染原为空肠弯曲菌、艰难梭菌、溶组织内阿米巴、肠毒素b、诺沃克病毒或诺罗病毒、幽门螺旋杆菌、轮状病毒、念珠菌属酵母、冠状病毒(包括sars-cov、sars-cov-2和mers-cov)、肠病毒71、爱泼斯坦-巴尔病毒、革兰氏阴性细菌(包括博德氏杆菌)、革兰氏阳性细菌(包括破伤风梭菌、土拉弗朗西斯菌、链球菌属细菌和葡萄球菌属细菌)、和肝炎、人类巨细胞病毒、人类免疫缺陷病毒、人类乳头状瘤病毒、流感病毒、jc病毒、分支杆菌、痘病毒、铜绿假单胞菌、呼吸道合胞病毒、风疹病毒、水痘带状疱疹病毒、基孔肯雅病毒、登革热病毒、狂犬病病毒、克氏锥虫和/或恰加斯病、埃博拉病毒、恶性疟原虫、马尔堡病毒、日本脑炎病毒、圣路易斯脑炎病毒、西尼罗河病毒、黄热病病毒、炭疽芽孢杆菌、肉毒杆菌毒素、蓖麻毒素或志贺毒素和/或志贺样毒素。

51、在一个方面，所述接触为经肠(至肠中)、胃肠道、硬膜外(至硬脑膜中)、口服(借助于口腔)、透皮、脑内(至脑中)、脑室内(至脑室中)、上表皮(涂覆至皮肤上)、皮内(至皮肤自身中)、皮下(在皮肤下)、经鼻施用(经由鼻)、静脉内(至静脉中)、静脉内推注、静脉内滴注、动脉内(至动脉中)、肌肉内(至肌肉中)、心内(至心脏中)、骨内输注(至骨髓中)、鞘内(至脊椎管中)、实质内(至脑组织中)、腹膜内(输注或注射至腹膜中)、膀胱内输注、玻璃体内(经由眼睛)、海绵窦内注射(至病理腔中)、腔内(至阴茎基底中)、阴道内施用、子宫内、羊膜外施用、透皮(经由完整皮肤扩散以全身性分散)、经粘膜(经由粘膜扩散)、经阴道、吹入(嗅吸)、舌下、唇下、灌肠剂、滴眼剂(至结膜上)、滴耳剂、经耳(于耳中或借助于耳)、经颊(导引朝向颊部)、经结膜、皮肤、牙齿(至一个或多个牙齿)、电渗透、宫颈内、窦道内、气管内、体外、血液透析、浸润、间质性、腹部内、羊膜内、关节内、胆管内、支气管内、囊内、软骨内(于软骨内)、尾部内(于马尾内)、脑池内(在小脑延髓大池内)、角膜内(在角膜内)、牙冠内、冠状动脉内(在冠状动脉内)、阴茎海绵体内(在阴茎海绵体的可膨胀空间内)、椎间盘内(在椎间盘内)、管内(在腺管内)、十二指肠内(在十二指肠内)、硬膜内(在硬脑膜内或其下方)、表皮内(至表皮)、食管内(至食道)、胃内(在胃内)、齿龈内(在齿龈内)、回肠内(在小肠的远端部分内)、病灶内(在定位病灶内或直接引入至定位病灶)、管腔内(在管腔内)、淋巴内(在淋巴内)、髓内(在骨骼的骨髓腔内)、脑脊膜内(在脑膜内)、心肌内(在心肌内)、眼内(在眼睛内)、卵巢内(在卵巢内)、心包内(在心包膜内)、胸膜内(在胸膜内)、前列腺内(在前列腺腺体内)、肺内(在肺或其支气管内)、窦内(在鼻窦或眶周窦内)、脊柱内(在脊柱内)、滑膜内(在关节的滑液腔内)、肌腱内(在肌腱内)、睾丸内(在睾丸内)、鞘内(在脑脊髓轴的任何层级处的脑脊髓液内)、胸内(在胸部内)、小管内(在器官的小管内)、瘤内(在肿瘤内)、鼓室内(在中耳(aurus media)内)、血管内(在一个或多个血管内)、室内(在室内)、离子电渗(借助于电流，其中可溶性盐的离子迁移至身体组织中)、灌洗(冲刷或冲洗开放的伤口或体腔)、经喉(直接至喉上)、鼻胃管(经由鼻和至胃中)、封闭敷裹技术(局部途径施用，接着其由封闭区域的敷料覆盖)、经眼(至眼睛外)、经口咽(直接至口腔和咽)、肠胃外、经皮、关节周、硬膜外、神经周、牙周、经直肠、呼吸道(通过经口或经鼻吸入至呼吸道内以用于局部或全身性作用)、眼球后(脑桥后或眼球后)、软组织、蛛膜下、结膜下、粘膜下层、局部、经胎盘(经由或跨过胎盘)、经气管(穿过气管壁)、经鼓膜(跨过或经过鼓腔)、输尿管(至输尿管)、尿道(至尿道)、经阴道、尾部阻滞(caudal block)、诊断、神经阻滞、胆道灌注、心脏灌注、光分离置换法或经脊椎。