一种燕窝多肽及其制备方法与流程

本发明涉及燕窝深加工的，特别涉及一种燕窝多肽及其制备方法。

背景技术：

1、燕窝是金丝燕及同属燕类用唾液与绒羽混合凝结筑成的巢窝，其中燕窝中的蛋白主要为糖蛋白，其中粗蛋白含量在50％～60％，燕窝酸含量10％左右。采集的天然燕窝中含有很多羽毛，在加工燕窝食品的过程中，需要经过挑毛处理工序。燕窝挑毛后的下脚料中仍然含有一定数量的碎燕窝，用常规的工艺很难将其中的羽毛完全清除，所以含有很多燕羽的带有羽毛杂质的燕窝碎常常是作为废品倒掉,也有专利或文献报道用蛋白酶水解带有羽毛杂质的燕窝，例如申请号cn202010892221的专利文件所公开的一种燕窝肽的制备方法，采用胶原蛋白酶、胰蛋白酶和糜蛋白酶复合酶水解燕窝，但是没有记载用无燕羽的燕窝水解做对比试验。

2、目前报道用酶法水解燕窝多肽的蛋白酶有：胶原蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶、糜蛋白酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠萝酶、风味酶和无花果蛋白酶，但是没有见到用酸性蛋白酶水解燕窝多肽的报道，可能与酸性蛋白酶直接水解燕窝的多肽得率低有关。也有采用蛋白酶水解燕窝后再用酸水解，得到小分子燕窝肽的报道，例如申请号cn202010414309的专利文件所公开的一种从燕窝中同时提取燕窝多肽和燕窝多糖的方法，先用蛋白酶水解糖苷键，经盐析和离心得到上清液和沉淀，上清液经处理得到燕窝多糖；沉淀加水复溶后，常温二次酶解3h，然后柠檬酸调节溶液的ph至1～3，在80～110℃下酸水解3～10小时，水解液通过离心和膜过滤，得到低分子量的燕窝多肽。又如申请号cn201010571507的专利文件“燕窝寡肽组合物及其制备方法和使用”中，提出先用蛋白酶水解，然后用10％盐酸调节ph至1.5～2，80～90℃保温水解2～4小时，可以获得含有小分子的纳米寡肽组合物。

3、由于燕窝中的蛋白为糖蛋白，要想最大限度的获取多肽，以利于蛋白酶的水解，需要分解与蛋白结合的糖肽键以及多糖的糖苷键。现有关于水解燕窝糖苷酶的报道有申请号cn202010365628的专利文件所公开的一种燕窝肽制品的生产方法提到的用果胶酶或半乳糖苷酶辅助水解，以及申请号为cn2016107929662的专利文件所公开的一种燕窝多肽的制备方法中通过添加溶菌酶、纤维素酶、壳聚糖酶中的至少一种辅助水解。

技术实现思路

1、为了在含有羽毛杂质的情况下，制备较高多肽得率的燕窝多肽，本发明提供以下燕窝多肽的制备方法，包括如下制备步骤：

2、s100、带有羽毛杂质的燕窝预水解：将带有羽毛杂质的燕窝加水浸泡，然后用有机酸调节浸泡液ph至5.0～6.5加入脱氨酶进行酶处理，接着再用有机酸调节料液的ph至2.2～2.8后进行预水解，以使预水解液的粘度降低90％以上；

3、s200、第一次蛋白酶水解：在步骤s100得到的预水解液中加入地衣芽孢杆菌酸性蛋白酶进行第一次水解，得到第一蛋白酶水解液；

4、s300、第二次蛋白酶水解：在步骤s200得到的第一蛋白酶水解液中加入3.350或3.4310酸性蛋白酶进行第二次水解，得到第二蛋白酶水解液；

5、s400、多肽分级与干燥：将灭酶后的第二蛋白酶水解液在5000～8000rpm离心去渣，取上清液先用10000da的超滤膜超滤，得到的滤出液再用200da的纳滤膜纳滤并浓缩，然后喷雾干燥即得所述燕窝多肽。

6、在一实施例中，所述第一次水解的条件为在ph 2.2～3.5，35～45℃条件下水解90～150mi n，然后升温到55℃，保温4～7mi n后冷却得到第一蛋白酶水解液。此处水解结束后，仅升温到55℃，未进行彻底灭酶操作，目的是为了在后续的水解环节中保留少量地衣芽孢杆菌酸性蛋白酶的活性。

7、在一实施例中，所述第二次水解的条件为在ph2.5～3.5,45～55℃条件下水解60～120mi n得到第二蛋白酶水解液。

8、在一实施例中，所述第二蛋白酶水解液的灭酶条件为在80～90℃灭酶10～20min。

9、在一实施例中，所述脱氨酶的酶处理条件为在50～60℃保温酶处理2～4小时。

10、在一实施例中，按带有羽毛杂质的燕窝质量计，所述脱氨酶的添加量为300～600u/g；所述地衣芽孢杆菌酸性蛋白酶的添加量为2000～4000u/g；所述3.350酸性蛋白酶或3.4310酸性蛋白酶的添加量为2000～4000u/g。

11、在一实施例中，所述带有羽毛杂质的燕窝的浸泡条件为料液比1:20～40，常温浸泡8～12小时后加热至97～100℃，然后在70～100mi n内冷却至50～60℃。

12、在一实施例中，所述有机酸为醋酸或乳酸。

13、在一实施例中，所述预水解的条件为在85～95℃预水解2～4小时。

14、在一实施例中，所述燕窝多肽中的多肽含量为68％～72％，且其多肽与燕窝酸的含量比为6.0～6.4:1。

15、本发明还提供一种燕窝多肽，采用如上任意所述的燕窝多肽的制备方法制得。

16、基于上述，与现有技术相比，本发明提供的一种燕窝多肽的制备方法具备如下有益效果：

17、(1)常温浸泡的带有羽毛杂质的燕窝加热到97～100℃后，在70～100mi n内缓慢冷却至50～60℃,有利于燕窝的充分润涨和之后的多肽水解；同时又控制适宜的高温环境,避免长时间高温造成羽毛角蛋白过度软化，导致其在之后的酸与酶的作用中被水解。

18、(2)采用脱氨酶和ph2.2～2.8有机酸溶液来预降解燕窝中燕窝糖蛋白，既可以破坏聚糖蛋白中的糖肽键和糖苷键，又不会造成角蛋白的水解。在前期试验中偶然发现，在润胀的燕窝浆中加入少量脱氨酶进行酶处理，然后在热的有机酸水溶液中浸泡一定时间后，燕窝浆的黏度可降低90％以上；黏度下降率远高于没有用脱氨酶处理的燕窝浆，说明脱氨酶处理可能会使燕窝糖蛋白中的氨基糖或糖蛋白产生脱氨反应，从而破坏糖蛋白的结构稳定性，聚糖蛋白的糖肽键和糖苷键在之后的高温酸性水溶液中更容易被降解，使浆料黏度显著下降。

19、(3)据相关文献报道，角蛋白在一定条件下可以被胃蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、糜蛋白酶、米曲霉和枯草芽孢杆菌水解，也可以被1％～2％的盐酸溶液水解。如果不筛选择合适的酶、水解ph和温度条件，就有可能造成燕羽毛的水解，使酶解产物成为燕窝蛋白和羽毛角蛋白的水解混合物。本发明经过大量实验确定了先用脱氨酶酶处理燕窝，再用较温和的有机酸溶液在ph2.2～2.8和85～95℃条件下预水解(经检测未产生游离氨基酸)；然后用两种酸性蛋白酶依次酶解带有羽毛杂质的燕窝预水解液，所得的多肽含量/燕窝酸含量比与不含燕羽毛的二者含量比基本相同，且浆料中的羽毛保持完整，说明本方法不水解羽毛角蛋白。因此，采用本发明提供的方法可以简化挑毛工序，利用低价值的带有羽毛杂质的燕窝制作高价值的燕窝多肽，提升带有羽毛杂质的燕窝的经济价值。

20、(4)本发明采用先预水解带有羽毛杂质的燕窝，然后再用两种酸性蛋白酶依次水解的方式，使得其燕窝多肽得率可达到燕窝蛋白的90％～93％，为带有羽毛杂质的燕窝的深加工找到了新方法。

21、本发明的其它特征和有益效果将在随后的说明书中阐述，并且，部分地从说明书中变得显而易见，或者通过实施本发明而了解。本发明的目的和其他有益效果可通过在说明书、权利要求书中所指出的结构和/或组分来实现和获得。